IL-2-EASIA KAP1241. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

Μέγεθος: px
Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "IL-2-EASIA KAP1241. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium"

Transcript

1 IL2EASIA KAP1241 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium

2 : 11221/1

3 en Read entire protocol before use. IL2EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative measurement of human interleukin2 (IL2) in serum. II. GENERAL INFORMATION A. Proprietary name : DIAsource IL2EASIA Kit B. Catalogue number : KAP1241 : 96 tests C. Manufactured by : DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgium. For technical assistance or ordering information contact : Tel : +32 () Fax : +32 () III. CLINICAL BACKGROUND A. Biological activities IL2, formerly called TCell growth factor, is a 1416 kda glycosylated polypeptide produced by activated CD4+ THcells which acts within an autocrine way to promote Tcells and NKcells growth. Tcells respond to IL2 via binding to the high affinity IL2 receptor made up of three subunits (α, β, γ). IL2 can be found in culture supernatant after mitogen activation of mononuclear cells (PBMC) or Tclones. B. Clinical application Low IL2 concentration is detectable in serum/plasma of healthy donors, some data report elevated IL2 levels in sera of systemic vasculitis and scleroderma patients.

4 IV. PRINCIPLES OF THE METHOD VI. SUPPLIES NOT PROVIDED The DIAsource IL2EASIA is a solid phase Enzyme Amplified Sensitivity Immunoassay performed on microtiterplate. The assay uses monoclonal antibodies (Ms) directed against distinct epitopes of IL2. Calibrators and samples react with the capture monoclonal antibody (M 1) coated on microtiter well and with a monoclonal antibody (M 2) labelled with horseradish peroxidase (HRP). After an incubation period allowing the formation of a sandwich: coated M 1 human IL2 M 2 HRP, the microtiterplate is washed to remove unbound enzyme labelled antibody. Bound enzymelabelled antibody is measured through a chromogenic reaction. Chromogenic solution (TMB) is added and incubated. The reaction is stopped with the addition of Stop Solution and the microtiterplate is then read at the appropriate wavelength. The amount of substrate turnover is determined colourimetrically by measuring the absorbance, which is proportional to the IL2 concentration. A calibration curve is plotted and IL2 concentration in samples is determined by interpolation from the calibration curve. The use of the EASIA reader (linearity up to 3 OD units) and a sophisticated data reduction method (polychromatic data reduction) result in a high sensitivity in the low range and in an extended calibration range. V. REAGENTS PROVIDED Reagents Microtiterplate with 96 anti IL2 (monoclonal antibodies) coated wells Conjugate: HRP labelled antiil2 (monoclonal antibodies) in TRISMaleate buffer with bovine serum albumin and thymol CAL Calibrator N = to 5 (see exact values on vial labels) in human serum with bovine serum albumin and thymol DIL Specimen Diluent: human serum with bovine serum albumin, benzamidin and thymol INC Incubation Buffer: Phosphate buffer with bovine serum albumin and thymol WASH Wash Solution (TrisHCl) CONTROL Controls N = 1 or 2 in human serum with benzamidin and thymol CHROM Chromogenic TMB Solution STOP HRP N SPE BUF SOLN TMB Stop Solution: HCl 2N N SOLN CONC 96 tests Kit Color Code Reconstitution 96 wells blue Ready for use 1 vial 6 ml 6 vials lyophil. 1 vial lyophil. 1 vial 11 ml 1 vial 1 ml 2 vials lyophil. 1 vial 25 ml 1 vial 25 ml red yellow black black brown silver white white Ready for use Add 1 ml distilled water Add distilled water (see on the label for the exact volume) Ready for use Dilute 2 x with distilled water (use a magnetic stirrer). Add 1 ml distilled water Ready for use Ready for use Note: 1. Use Specimen Diluent for sample dilutions U of the calibrator preparation is equivalent to 1 U of the NIBSC 1 st IS 86/54. The following material is required but not provided in the kit: 1. High quality distilled water 2. Pipettes for delivery of: 5 μl, µl, 2 μl, 1 ml and 1 ml (the use of accurate pipettes with disposable plastic tips is recommended) 3. Vortex mixer 4. Magnetic stirrer 5. Horizontal microtiterplate shaker capable of 7 rpm ± rpm 6. Washer for Microtiterplates 7. Microtiterplate reader capable of reading at 45 nm, 49 nm and 65 nm (in case of polychromatic reading) or capable of reading at 45 nm and 65 nm (bichromatic reading) 8. Optional equipment: The ELISAAID necessary to read the plate according to polychromatic reading (see paragraph XI.A.) can be purchased from Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. REAGENT PREPARATION A. Calibrators: Reconstitute the calibrators with 1 ml distilled water. B. Controls: Reconstitute the controls with 1 ml distilled water. C. Specimen Diluent: Reconstitute Specimen Diluent to the volume specified on the vial label with distilled water D. Working Wash solution: Prepare an adequate volume of Working Wash solution by adding 199 volumes of distilled water to 1 volume of Wash Solution (2x). Use a magnetic stirrer to homogenize. Discard unused Working Wash solution at the end of the day. VIII. STORAGE AND EXPIRATION DATING OF REAGENTS Before opening or reconstitution, all kits components are stable until the expiry date, indicated on the vial label, if kept at 2 to 8 C. Unused strips must be stored, at 28 C, in a sealed bag containing a desiccant until expiration date. After reconstitution, calibrators, controls and Specimen Diluent are stable for 4 days at 2 to 8 C. For longer storage periods, aliquots should be made and kept at 2 C for maximum 2 months. Avoid successive freeze thaw cycles. The concentrated Wash Solution is stable at room temperature until expiration date. Freshly prepared Working Wash solution should be used on the same day. After its first use, the conjugate is stable until expiry date, if kept in the original wellclosed vial at 2 to 8 C. Alterations in physical appearance of kit reagents may indicate instability or deterioration. IX. SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Serum must be removed as soon as possible from the clot of red cells after clotting and centrifugation, and kept at 4 C. If the samples are not used immediately, they must be kept at 7 C for maximum 1year. Avoid subsequent freeze thaw cycles. Prior to use, all samples should be at room temperature. It is recommended to vortex the samples before use. Sampling conditions can affect values, therefore, strict precautions have to be taken during sampling to avoid impurities contained in sampling materials that would stimulate IL2 production by blood cells and thus falsely increase serum IL2 values. Collection tubes must be pyrogenfree. X. PROCEDURE A. Handling notes Do not use the kit or components beyond expiry date. Do not mix materials from different kit lots. Bring all the reagents to room temperature prior to use. Thoroughly mix all reagents and samples by gentle agitation or swirling. Perform calibrators, controls and samples in duplicate. Vertical alignment is recommended. Use a clean plastic container to prepare the Wash Solution. In order to avoid crosscontamination, use a clean disposable pipette tip for the addition of each reagent and sample. For the dispensing of the Chromogenic Solution and the Stop Solution avoid pipettes with metal parts. High precision pipettes or automated pipetting equipment will improve the precision. Respect the incubation times. To avoid drift, the time between pipetting of the first calibrator and the last sample must be limited to the time mentioned in section XIII paragraph E (Time delay).

5 Prepare a calibration curve for each run, do not use data from previous runs. Dispense the Chromogenic Solution within 15 minutes following the washing of the microtiterplate. During incubation with Chromogenic Solution, avoid direct sunlight on the microtiterplate. B. Procedure 1. Select the required number of strips for the run. The unused strips should be resealed in the bag with a desiccant and stored at 28 C. 2. Secure the strips into the holding frame. 3. Pipette µl of Incubation Buffer into all the wells 4. Pipette µl of each Calibrator, Control and Sample into the appropriate wells. 5. Pipette 5 µl of antiil2hrp conjugate into all the wells. 6. Incubate for 2 hours at room temperature on a horizontal shaker set at 7 rpm ± rpm. 7. Aspirate the liquid from each well. 8. Wash the plate 3 times by: Dispensing.4 ml of Wash Solution into each well Aspirating the content of each well 9. Pipette µl of the chromogenic solution into each well within 15 minutes following the washing step. 1. Incubate the microtiterplate for 15 minutes at room temperature on a horizontal shaker set at 7 rpm ± rpm, avoid direct sunlight. 11. Pipette 2 µl of Stop solution into each well. 12. Read the absorbencies at 45 nm and 49 nm (reference filter 63 nm or 65 nm) within 3 hours and calculate the results as described in section XI. XIII. PERFORMANCE AND LIMITATIONS A. Detection Limit Twenty zero calibrators were assayed along with a set of other calibrators. The detection limit, defined as the apparent concentration two standard deviations above the average OD at zero binding, was.5 U/ml. B. Specificity No significant crossreaction was observed in presence of 5 ng of IL1α, IL1β, IL3, IL4, IL6, IL7, IL8, IL1, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF and RANTES. This IL 2 assay is specific for human natural and recombinant IL2. Interference with the soluble IL2 receptor (scd25) To check the absence of any interference of the sril2 (scd25) on the assay, different scd25 concentrations were spiked in the calibrators. IL2 calibrators C. Precision ng/ml ng/ml ng/ml XI. CALCULATION OF RESULTS INTRA ASSAY INTER ASSAY A. Polychromatic Reading: 1. In this case, the ELISAAID software will do the data processing. 2. The plate is first read at 45 nm against a reference filter set at 65 nm (or 63 nm). 3. A second reading is performed at 49 nm against the same reference filter. 4. The ELISAAID Software will drive the reader automatically and will integrate both readings into a polychromatic model. This technique can generate OD s up to The principle of polychromatic data processing is as follows: Xi = OD at 45 nm Yi = OD at 49 nm Using a standard unweighted linear regression, the parameters A & B are calculated : Y = A*X + B If Xi < 3 OD units, then X calculated = Xi If Xi > 3 OD units, then X calculated = (YiB)/A A 4parameter logistic curve fitting is used to build up the calibration curve. The IL2 concentration in samples is determined by interpolation on the calibration curve. B. Bichromatic Reading 1. Read the plate at 45 nm against a reference filter set at 65 nm (or 63 nm). 2. Calculate the mean of duplicate determinations. 3. On semilogarithmic or linear graph paper plot the OD values (ordinate) for each calibrator against the corresponding concentration of IL2 (abscissa) and draw a calibration curve through the calibrator points by connecting the plotted points with straight lines. 4. Read the concentration for each control and sample by interpolation on the calibration curve. 5. Computer assisted data reduction will simplify these calculations. If automatic result processing is used, a 4parameter logistic function curve fitting is recommended. XII. TYPICAL DATA The following data are for illustration only and should never be used instead of the real time calibration curve. Calibrator IL2EASIA U/ml.78 U/ml 1.77 U/ml 5.7 U/ml 1.9 U/ml 23.8 U/ml OD units Polychromatic model Serum N <X> ± SD A B ± ±.2 CV Serum N <X> ± SD A B SD: Standard Deviation; CV: Coefficient of variation D. Accuracy Sample Serum 1 Serum 2 Added IL RECOVERY TEST DILUTION TEST Sample Dilution Theoretical Concent. Serum 1/1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/ Samples were diluted with Specimen Diluent Recovered IL ± ±.3 CV Recovery Measured Concent E. Time delay between last calibrator and sample dispensing As shown hereafter, assay results remain accurate even when a sample is dispensed 3 minutes after the calibrators have been added to the coated wells.

6 sample min 1 min 2 min 3 min 4 min F. Hook effect A sample spiked with IL2 up to 5 U/ml gives higher OD s than the last calibrator point. XIV. INTERNAL QUALITY CONTROL If the results obtained for Control 1 and/or Control 2 are not within the range specified on the vial label, the results cannot be used unless a satisfactory explanation for the discrepancy has been given. If desirable, each laboratory can make its own pools of control samples, which should be kept frozen in aliquots. Controls that contain azide will interfere with the enzymatic reaction and cannot be used. Acceptance criteria for the difference between the duplicate results of the samples should rely on Good Laboratory Practises It is recommended that controls be routinely assayed as unknown samples to measure assay variability. The performance of the assay should be monitored with quality control charts of the controls. It is good practise to check visually the curve fit selected by the computer. XV. REFERENCE INTERVALS These values are given only for guidance; each laboratory should establish its own normal range of values. For guidance, the results of 4 serum samples from apparently healthy persons with low CRP levels, ranged between and.1 U/ml. 38 samples obtained values below the detection limit of the test (<.5 U/ml). XVI. PRECAUTIONS AND WARNINGS Safety For in vitro diagnostic use only. The human blood components included in this kit have been tested by European approved and/or FDA approved methods and found negative for HBsAg, anti HCV, antihiv1 and 2. No known method can offer complete assurance that human blood derivatives will not transmit hepatitis, AIDS or other infections. Therefore, handling of reagents, serum or plasma specimens should be in accordance with local safety procedures. All animal products and derivatives have been collected from healthy animals. Bovine components originate from countries where BSE has not been reported. Nevertheless, components containing animal substances should be treated as potentially infectious. Avoid any skin contact with all reagents, Stop Solution contains HCl. In case of contact, wash thoroughly with water. Do not smoke, drink, eat or apply cosmetics in the working area. Do not pipette by mouth. Use protective clothing and disposable gloves. XVII. BIBLIOGRAPHY 1. ROBB R.J., (1984). Interleukin2 : The molecule and its function. Immunology. Today, 5: GRAU G. et al, (1989). Serum Cytokine changes in systemic vasculitis. Immumnology, 68: BASCHAR M. et al, (1989). Interleukin2 in Sclerodemia : Correlation of serum level with extent of skin involvement and disease duration. An. Internal Med., 11: XVIII. SUMMARY OF THE PROTOCOL Incubation buffer Calibrators (5) Samples, Controls AntiIL2 HRP conjugate CALIBRATORS (µl) 5 SAMPLE(S) CONTROLS (µl) 5 Incubate for 2 hours at room temperature with continuous shaking at 7 rpm. Aspirate the contents of each well. Wash 3 times with 4 µl of Wash Solution and aspirate. Chromogenic Solution Incubate for 15 min at room temperature with continuous shaking at 7 rpm. Stop Solution 2 2 Read on a microtiterplate reader and record the absorbance of each well at 45 nm (and 49 nm) versus 63 (or 65 nm) DIAsource Catalogue Nr : KAP1241 P.I. Number : 1759/en Revision nr : 11221/1 Revision date :

7 fr Lire entièrement le protocole avant utilisation. IL2EASIA I. BUT DU DOSAGE Trousse de dosage immunoenzymatique pour la mesure quantitative in vitro de l interleukine 2 humaine (IL2) dans le sérum. II. INFORMATIONS GENERALES A. Nom du produit : DIAsource IL2EASIA kit B. Numéro de catalogue : KAP1241 : 96 tests C. Fabriqué par : DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgium. Pour une assistance technique ou une information sur une commande : Tel : +32 () Fax : +32 () III. CONTEXTE CLINIQUE A. Activités biologiques L IL2, anciennement appelée facteur de croissance des cellules T, est un polypeptide glycosylé de 14 à 16 kda produit par les cellules TH activées CD4+. Elle favorise par voie autocrine la croissance des cellules T et des cellules NK. Les cellules T répondent à l IL2 par l intermédiaire de sa liaison au récepteur à haute affinité pour l IL2 composé de trois sousunités (α, β, γ). L IL 2 peut également être retrouvée dans le surnageant de culture après l activation mitogénique des cellules mononucléaires (PBMC) ou des clones T. B. Application clinique Une faible concentration d IL2 est détectable dans le sérum/plasma de donneurs sains. Certaines données signalent des niveaux d IL2 élevés dans le sérum de patients atteints de vasculite systémique ou de sclérodermie.

8 IV. PRINCIPES DU DOSAGE VI. MATERIELS NON FOURNIS La DIAsource IL2EASIA est une «Enzyme Amplified Sensitivity Immunoassay» en phase solide effectuée sur des microplaques. L analyse utilise des anticorps monoclonaux (AcM) dirigés contre des épitopes distincts de l IL2. Les calibrateurs et les échantillons réagissent avec l anticorps de capture monoclonal (AcM 1) recouvrant les puits et avec un anticorps monoclonal (AcM 2) marqué avec la peroxydase (HRP). Après une période d incubation permettant la formation d un sandwich: AcM 1 recouvert IL2 AcM 2 HRP, la microplaque est lavée afin d enlever l anticorps libre marqué enzymatiquement. L anticorps lié marqué enzymatiquement est mesuré avec une réaction chromogénique. Une solution chromogénique (TMB H 2O 2) est ajoutée et incubée. La réaction est arrêtée avec l addition de Solution d arrêt et la microplaque est alors lue à la longueur d onde appropriée. La quantité de remplacement de substrat est déterminée colorimétriquement par la mesure de l absorbance, qui est proportionnelle à la concentration en IL2. Une courbe de calibration est dessinée et la concentration en IL2 dans les échantillons est déterminée par interpolation de la courbe de calibration. L utilisation du lecteur EASIA (linéarité jusque 3 unités de DO) et une méthode de réduction de données sophistiquée (réduction de données polychromatique) résultent en une haute sensitivité dans la portée basse et en une portée de calibration étendue. V. REACTIFS FOURNIS Réactifs 96 tests Kit Code Couleur Reconstitution Le matériel mentionné cidessous est requis mais non fourni avec la trousse: 1. Eau distillée d une haute qualité 2. Pipettes pour distribuer: 5 μl, µl, 2 µl, 1 ml et 1 ml (l utilisation de pipettes précises et de pointes en plastique est recommandée) 3. Agitateur vortex 4. Agitateur magnétique 5. Agitateur de microplaques horizontal capable de 7 rpm ± rpm 6. Laveur de microplaques 7. Lecteur de microplaques capable de lire à 45 nm, 49 nm et 65 nm (en cas de lecture polychromatique) ou capable de lire à 45 nm et 65 nm (lecture monochromatique) 8. Equipement supplémentaire: le ELISAAID nécessaire pour lire la plaque selon la lecture polychromatique (voir paragraphe XI.A.) peut être acheté chez Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. PREPARATION DES REACTIFS A. Calibrateurs : Reconstituer les calibrateurs avec 1 ml d eau distillée. B. Contrôles : Reconstituer les contrôles avec 1 ml d eau distillée. C. Diluant du spécimen : Reconstituer le Diluant du spécimen avec le volume d eau distillée spécifié sur l étiquette du flacon. D. Solution de Lavage : Préparer un volume adéquat de Solution de Lavage en ajoutant 199 volumes d eau distillée à 1 volume de Solution de Lavage (2x). Utiliser un agitateur magnétique pour homogénéiser. Eliminer la Solution de Lavage non utilisée à la fin de la journée. Conjugué: antiil2 marqué avec de l HRP (anticorps monoclonal) dans un tampon TRISmaléate avec de l'albumine bovine et du thymol CAL Calibrateur N = à 5 (cfr. Valeurs exactes sur chaque flacon) dans du sérum humain avec de l'albumine bovine et du thymol DIL Microplaque de titration avec 96 puits recouvert d anti IL2 (anticorps monoclonal) HRP N SPE Diluant du spécimen dans du sérum humain avec de l'albumine bovine, de la benzamidine et du thymol 96 puits bleu Prêt à l emploi 1 flacon 6 ml 6 flacons lyophilisés 1 flacon lyophilisé Rouge Jaune Noir Prêt à l emploi Ajouter 1 ml d eau distillée Ajouter de l eau distillée (voir le volume exact sur l étiquette) VIII. STOCKAGE ET DATE D EXPIRATION DES REACTIFS Avant l ouverture ou la reconstitution, tous les composants de la trousse sont stables jusqu à la date d expiration, indiquée sur l étiquette, si la trousse est conservée entre 2 et 8 C. Des barrettes inutilisées doivent être gardées, à 28 C, dans un sachet cacheté contenant un dessiccatif jusqu à la date d expiration. Après reconstitution, les calibrateurs, le Diluant du spécimen et les contrôles sont stables pendant 4 jours entre 2 et 8 C. Pour de plus longues périodes de stockage, des aliquotes devront être réalisées et cellesci seront gardées à 2 C pendant 2 mois. Eviter des cycles de congélation et décongélation successifs. La Solution de Lavage concentrée est stable à température ambiante jusqu à la date d expiration. La Solution de Lavage préparée doit être utilisée le jour même. Après la première utilisation, le conjugué est stable jusqu à la date d expiration, si celuici est conservé entre 2 et 8 C dans le flacon d origine correctement fermé. Des altérations dans l apparence physique des réactifs de la trousse peuvent indiquer une instabilité ou une détérioration. IX. PREPARATION ET STABILITE DE L ECHANTILLON Tampon d incubation: Tampon phosphate avec de l'albumine bovine et du thymol WASH INC Solution de Lavage (TrisHCl) CONTROL SOLN BUF Contrôles N = 1 ou 2 dans du sérum humain avec de la benzamidine et du thymol N CONC 1 flacon 11 ml 1 flacon 1 ml 2 flacons lyophilisés Noir Brun Gris Prêt à l emploi Diluer 2 x avec de l eau distillée (utiliser un agitateur magnétique). Ajouter 1 ml d eau distillée Le sérum doit être débarrassé le plus rapidement possible du caillot de globules rouges après coagulation et centrifugation. Il doit être conservé à 4 C. Si les échantillons ne sont pas tout de suite utilisés, ils doivent être conservés à 7 C, au maximum pendant 1 an. Eviter des cycles de congélation et décongélation successifs. Avant l utilisation des échantillons, ceuxci doivent être à température ambiante. On recommande de vortexer les échantillons avant de les utiliser. Les conditions de la prise d échantillon pouvant affecter les résultats, il faut prendre de strictes précautions pendant la prise d échantillon afin d éviter que des impuretés contenues dans le matériel de prélèvement ne stimulent la production d IL2 par les cellules sanguines et ne fassent faussement augmenter les taux sériques d IL2. Les tubes de prélèvement doivent être pyrogenfree. Solution Chromogénique (Tétraméthylbenzydine) Solution d arrêt: HCl 2N Note: CHROM STOP TMB SOLN CONC 1 flacon 25 ml 1 flacon 25 ml Blanc Blanc Prêt à l emploi Prêt à l emploi 1. Utiliser le Diluant du spécimen pour la dilution des échantillons U de la préparation du calibrateur est équivalent à 1 U du NIBSC 1 st IS 86/54. X. MODE OPERATOIRE A. Notes de manipulation Ne pas utiliser la trousse ou ses composants après avoir dépassé la date d expiration. Ne pas mélanger du matériel provenant de trousses de lots différents. Mettre tous les réactifs à température ambiante avant utilisation. Mélangez tous les réactifs et les échantillons sous agitation douce. Réaliser les calibrateurs, les contrôles et les échantillons en double. Un alignement vertical est recommandé. Utiliser un récipient en plastic propre pour préparer la Solution de Lavage. Pour éviter toute contamination croisée, utiliser une nouvelle pointe de pipette pour l addition de chaque réactif et échantillon.

9 Pour la distribution de la Solution Chromogénique et de la Solution d arrêt, éviter des pipettes avec des parties en métal. Des pipettes de haute précision ou un équipement de pipetage automatique permettent d augmenter la précision. Respecter les temps d incubation. Afin d éviter des anomalies, le délai entre le pipetage du premier calibrateur et celui du dernier échantillon doit être limité au délai indiqué à la section XIII paragraphe E (Délai). Préparer une courbe d étalonnage pour chaque nouvelle série d expériences, ne pas utiliser les données d expériences précédentes. Distribuer la Solution Chromogénique dans les 15 minutes après le lavage de la microplaque de titration. Eviter exposition à la lumière du soleil lors de l incubation avec la Solution Chromogénique. B. Mode opératoire 1. Sélectionner le nombre de barrettes nécessaires pour le test. Les barrettes inutilisées doivent être cachetées de nouveau dans le sachet avec un dessiccatif et gardées à 28 C. 2. Placer les barrettes dans le support. 3. Pipeter µl du tampon d incubation dans tous les puits. 4. Pipeter µl de chaque Calibrateur, Contrôle et Echantillon dans les puits appropriés. 5. Pipeter 5 µl du conjugué antiil2hrp dans tous les puits. 6. Incuber pendant 2 heures à température ambiante dans un agitateur horizontal mis à 7 rpm ± rpm. 7. Aspirer le liquide de chaque puits. 8. Laver la plaque 3 fois en: distribuant.4 ml de la Solution de Lavage dans chaque puits aspirant le contenu de chaque puits 9. Pipeter µl de la Solution Chromogénique qui vient d être préparée dans chaque puits dans les 15 minutes après la phase de lavage. 1. Incuber la microplaque pendant 15 minutes à température ambiante dans un agitateur horizontal mis à 7 rpm ± rpm, éviter exposition à la lumière du soleil. 11. Pipeter 2 µl de la Solution d arrêt dans chaque puits. 12. Lire les absorbances à 45 nm et 49 nm (filtre de référence 63 nm ou 65 nm) dans 3 heures et calculer les résultats comme décrits dans la section XI. XI. CALCUL DES RESULTATS A. Lecture polychromatique: 1. En ce cas, le software ELISAAID fera le traitement des données. 2. La plaque est lue d abord à 45 nm contre un filtre de référence mis à 65 nm (ou 63 nm). 3. Une seconde lecture est effectuée à 49 nm contre le même filtre de référence. 4. Le software ELISAAID manœuvrera le lecteur automatiquement et intégrera les deux lectures dans un modèle polychromatique. Cette technique peut générer des DO jusqu à Le principe du traitement de données polychromatique est le suivant: Xi = DO à 45 nm Yi = DO à 49 nm Utilisant une régression linéaire non pondérée standard, les paramètres A & B sont calculés : Y = A*X + B Si Xi < 3 unités DO, X calculé = Xi Si Xi > 3 unités DO, X calculé = (YiB)/A Un lissage de courbes «4 paramètres» est utilisé pour la courbe de calibration. La concentration en IL2 des échantillons est déterminée par interpolation sur la courbe de calibration. XII. DONNEES TYPES Les données représentées cidessous sont fournies pour information et ne peuvent jamais être utilisées à la place d une courbe d étalonnage. Calibrateur IL2EASIA XIII. PERFORMANCE ET LIMITES U/ml,78 U/ml 1,77 U/ml 5,7 U/ml 1,9 U/ml 23,8 U/ml Unités DO modèle polychromatique,26,69,144,65 1,511 3,667 A. Sensibilité Vingt calibrateurs zéro ont été testés en parallèle avec un assortiment d autres calibrateurs. La limite de détection, définie comme la concentration apparente située 2 déviations standards audessus de la moyenne DO déterminée à la fixation zéro, était de,5 U/ml. B. Spécificité On n a pas constaté de réaction croisée significative en présence de 5 ng d IL1α, IL1β, IL3, IL4, IL6, IL7, IL8, IL1, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF et RANTES. Ce dosage de l IL2 est spécifique de l IL 2 humaine naturelle et recombinante. Interférence avec le récepteur de l IL2 soluble (scd25) Pour vérifier l absence de toute interférence du sril2 (scd25) avec l essai, on utilise des calibrateurs avec différentes concentrations en scd25. IL2 calibrateurs 1 2,5 7, C. Précision INTRAESSAI Sérum N <X> ± SD A B 2 2 3,2 ±,1 9,6 ±,2 CV 3,2 2,2,1 ng/ml ng/ml INTERESSAI Sérum N <X> ± SD A B SD : Déviation Standard; CV: Coefficient de variation D. Exactitude Echantillon TEST DE RECUPERATION IL2 ajoutée IL2 récupérée 3,9 ±,2 9,6 ±,3 1 ng/ml CV 5,1 3,1 Récupération B. Lecture bichromatique 1. Lire la plaque à 45 nm contre un filtre de référence mis à 65 nm (ou 63 nm). 2. Calculer la moyenne de chaque détermination réalisée en double. 3. Dessiner sur un graphique linéaire ou semilogarithmique les cpm (ordonnées) pour chaque calibrateur contre la concentration correspondante en IL2 (abscisses) et dessiner une courbe de calibration à l aide des points de calibration, en connectant les points avec des lignes droites. 4. Lire la concentration pour chaque contrôle et échantillon par interpolation sur la courbe de calibration. 5. L analyse informatique des données simplifiera les calculs. Si un système d analyse de traitement informatique des données est utilisé, il est recommandé d utiliser la fonction «4 paramètres» du lissage de courbes. Sérum 1 Sérum 2 1,9 2,8 9,7 18,4 1,9 2,8 9,7 18,4 1,8 2,9 9,1 17,8 1,9 2,8 9,3 17,

10 TEST DE DILUTION Echantillon Dilution Concent. théorique Sérum 1/1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1,8 4,9 2,6 1,5,7,3,2 Les échantillons ont été dilués avec le Diluant du spécimen. Concent. Mesurée 21,7 9,9 5,1 3, 1,4,6,3,2 E. Délai entre la distribution du dernier calibrateur et celle de l échantillon Comme montré cidessous, les résultats d un essai restent précis même quand un échantillon est distribué 3 minutes après que le calibrateur a été ajouté aux tubes avec l anticorps. D E L A I DELAI min 1 min 2 min 3 min 4 min Aucune méthode connue ne peut offrir l'assurance complète que des dérivés de sang humain ne transmettront pas d hépatite, le sida ou toute autre infection. Donc, le traitement des réactifs, du sérum ou des échantillons de plasma devra être conforme aux procédures locales de sécurité. Tous les produits animaux et leurs dérivés ont été collectés d'animaux sains. Les composants bovins proviennent de pays où l ESB n'a pas été détectée. Néanmoins, les composants contenant des substances animales devront être traités comme potentiellement infectieux. Eviter le contact de la peau avec tous les réactifs. La Solution d arrêt contient de l HCl. En cas de contact, laver avec beaucoup d eau. Ne pas fumer, ni boire, ni manger ni appliquer de produits cosmétiques dans les laboratoires. Ne pas pipeter avec la bouche. Utiliser des vêtements protecteurs et des gants à usage unique. XVII. BIBLIOGRAPHIE 1. ROBB R.J., (1984). Interleukin2 : The molecule and its function. Immunology. Today, 5: GRAU G. et al, (1989). Serum Cytokine changes in systemic vasculitis. Immumnology, 68: BASCHAR M. et al, (1989). Interleukin2 in Sclerodemia : Correlation of serum level with extent of skin involvement and disease duration. An. Internal Med., 11: ,6 3,9 7,6 16,8 1,4 3,6 7,3 15,9 1,5 3,7 7,1 16,2 1,4 3,7 7, 16,4 1,5 3,7 7,7 16,8 XVIII. RESUME DU PROTOCOLE F. Effet crochet Un échantillon dopé avec de l IL2 jusqu à 5 U/ml donne des DO supérieurs au dernier point de calibration. CALIBRATEURS (µl) ECHANTILLON(S) CONTROLES (µl) XIV. CONTROLE DE QUALITE INTERNE Si les résultats obtenus pour le(s) contrôle(s) 1 et/ou 2 ne sont pas dans l intervalle spécifié sur l étiquette du flacon, les résultats ne peuvent pas être utilisés à moins que l'on ait donné une explication satisfaisante de la nonconformité. Chaque laboratoire est libre de faire ses propres stocks d échantillons contrôles, lesquels doivent être congelés aliquotés. Des contrôles qui contiennent de l azoture influenceront la réaction enzymatique et ne peuvent pas être utilisés. Les critères d acceptation pour les écarts des valeurs en double des échantillons doivent être basés sur les pratiques de laboratoire courantes. On recommande que les contrôles soient testés de façon routinière comme des échantillons inconnus pour mesurer la variabilité du test. La réalisation du test doit être suivie avec des fichiers de contrôle de qualité des contrôles. On recommande de vérifier visuellement la courbe sélectionnée par l ordinateur. Tampon d incubation Calibrateurs (5) Echantillons, Contrôles Conjugué AntiIL2HRP 5 5 Incuber pendant 2 heures à température ambiante avec agitation continue à 7 rpm. Aspirer le contenu de chaque puits. Laver 3 fois avec 4 µl de la Solution de Lavage et aspirer. Solution Chromogénique Incuber pendant 15 min à température ambiante avec agitation continue à 7 rpm. Solution d arrêt 2 2 Lire sur un lecteur de microplaques et enregistrer l absorbance de chaque puits à 45 nm (contre 63 ou 65 nm) et 49 nm (contre 63 ou 65 nm) XV. VALEURS ATTENDUES Les valeurs sont données à titre d information; chaque laboratoire doit établir ses propres fourchettes de valeurs normales. A titre indicatif, les résultats de 4 échantillons de sérum de personnes apparemment saines avec de faibles niveaux de CRP se situaient entre et,1 U/ml. 38 échantillons ont montré des valeurs inférieures à la limité de détection (<,5 U/ml). XVI. PRECAUTIONS ET AVERTISSEMENTS DIAsource Catalogue Nr : KAP1241 P.I. Number : 1759/fr Revision nr : 11221/1 Sécurité Pour utilisation en diagnostic in vitro uniquement. Les composants de sang humain inclus dans ce kit ont été évalués par des méthodes approuvées par l Europe et/ou la FDA et trouvés négatifs pour HBsAg, l antihcv, l antihiv1 et 2. Date de révision :

11 de Vor Gebrauch des Kits lesen Sie bitte diese Packungsbeilage. IL2EASIA I. VERWENDUNGSZWECK Ein immunenzymetrisches Assay für die quantitative in vitro Bestimmung von humanem Interleukin 2 (IL2) in Serum. II. ALLGEMEINE INFORMATION A. Handelsbezeichnung : DIAsource IL2EASIA Kit B. Katalognummer : KAP1241 : 96 Tests C. Hergestellt von: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgien. Für technische Unterstützung oder Bestellungen wenden Sie sich bitte an: Tel : +32 () Fax : +32 () Für Deutschland : Kostenfreie Rufnummer : Kostenfreie Faxnummer : Ordering : III. KLINISCHER HINTERGRUND A. Biologische Aktivität IL2, zuvor TZellWachstumsfaktor genannt, ist ein 1416 kda glykosyliertes Polypeptid, das von aktivierten CD4+ THZellen produziert wird, welche innerhalb eines autokrinen Wirkmechanismus agieren, um das Wachstum von TZellen und NKZellen zu förden. TZellen antworten auf IL2 mittels der Bindung an einen IL2 Rezeptor hoher Affinität, der aus drei Unterklassen (α, β, γ) besteht. IL2 kann gefunden werden im Kulturüberstand nach der mitogenen Aktivierung mononuklearer Zellen (PBMC) oder TKlone. B. Klinische Anwendung Eine niedrige IL2 Konzentration ist nachweisbar im Serum/Plasma gesunder Spender, einige Versuchsergebnisse berichten von erhöhten IL2 Werten in Seren von Patienten mit systemischer Vaskulitis oder Sklerodermie.

12 IV. GRUNDSÄTZLICHES ZUR DURCHFÜHRUNG Der DIAsource IL2EASIA ist ein solid phaseenzyme Amplified Sensitive Immunoassay (EASIA) im Mikrotiterplattenformat. Derr Assay benutzt monoklonale Antikörper (Ms), die gegen verschiedene Epitope von IL2 gerichtet sind. Kalibratoren und Proben reagieren mit dem primären monoklonalen Antikörper (MAk 1), mit dem die Wells der Mikrotiterplatte beschichtet sind, und mit einem monoklonalen Antikörper (MAk 2), der mit MeerrettichPeroxidase (MRP) markiert ist. Nach einer Inkubationsphase bildet sich ein SandwichKomplex: MAk 1 IL2 MAk 2 MRP; nicht gebundene enzymbeschriftete Antikörper werden durch Waschen der Mikrotiterplatte entfernt. Gebundene enzymbeschriftete Antikörper werden durch eine Farbreaktion gemessen. Farblösung (TMB H 2O 2) wird hinzugefügt und inkubiert. Die Reaktion wird durch Hinzufügen einer Stopplösung beendet und die Mikrotiterplatte wird bei adäquater Wellenlänge ausgewertet. Die Menge an Substratumsatz wird kolorimetrisch durch Messung der sorption bestimmt, die proportional zur IL2Konzentration ist. Es wird eine Kalibrationskurve erstellt und die IL2Konzentration in den Proben wird durch Interpolation von der Kalibrationskurve bestimmt. Die Verwendung des EASIALesegeräts (Linearität bis zu 3 ODEinheiten) und eine komplexe Datenreduktionsmethode (polychromatische Datenreduktion) ergeben eine hohe Sensibilität im niedrigen Bereich und einen breiten Kalibrationsbereich. V. MITGELIEFERTE REAGENZIEN 2. Pipetten: 5 μl, µl, 2 µl, 1 ml und 1 ml (Verwendung von Präzisionspipetten mit Einwegplastikspitzen wird empfohlen) 3. Vortex Mixer 4. Magnetrührer 5. Horizontaler Schüttler für Mikrotiterplatte Kap. 7 rpm ± rpm 6. Waschgerät für Mikrotiterplatten 7. MikrotiterplattenLesegerät zur Auswertung bei 45 nm, 49 nm und 65 nm (bei polychromatischer Auswertung) oder zur Auswertung bei 45 nm und 65 nm (monochromatische Auswertung) 8. Optional: ELISAAID zur Auswertung der Platte nach polychromatischer Methode (siehe schnitt XI.A.), erhältlich bei Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. VORBEREITUNG DER REAGENZIEN A. Kalibratoren: Rekonstituieren Sie die Kalibratoren mit 1 ml dest. Wasser. B. Kontrollen: Rekonstituieren Sie die Kontrollen mit 1 ml dest. Wasser. C. Probenverdünner: Rekonstituieren Sie den Probenverdünner bis zu dem genau auf dem Ettikett des Fläschchens angegebenen Volumen mit dest. Wasser D. Waschlösung: Bereiten Sie ein angemessenes Volumen Waschlösung aus einem Anteil Waschlösung (2x) mit 199 Anteilen dest. Wasser zu. Verwenden Sie einen Magnetrührer zum gleichmäßigen Durchmischen. Werfen Sie die nicht benutzte Waschlösung am Ende des Tages weg. Reagenzien Konjugat: MRP beschriftete Anti IL2 (monoklonale Antikörper) in TRISMaleatpuffer mit Rinderserumalbumin und Thymol CAL Mikrotiterplatte mit 96 anti IL2 beschichtete Wells (monoklonale Antikörper) HRP N Kalibrator N = bis 5 (genaue Werte auf Gefäß Etiketten) in Humanserum mit Rinderserumalbumin und Thymol 96 Test Kit Farb Code Rekonstitution 96 Wells Blau gebrauchsfertig 1 Gefäß 6 ml 6 Gefäße lyophilisiert Rot Gelb gebrauchsfertig 1 ml dest. Wasser zugeben VIII. AUFBEWAHRUNG UND LAGERUNG DER REAGENZIEN Vor dem Öffnen oder der Rekonstitution sind die Reagenzien des Kits bis zum laufdatum (Angaben auf Etikett) bei Lagerung bei 2 C bis 8 C stabil. Nicht verwendete Mikrotiterstreifen sollten bis zum Verfallsdatum dicht in der Folie verschlossen mit Trockenmittel bei 2 bis 8 C gelagert werden. Nach der Rekonstitution sind die Kalibratoren, Probenverdünner und Kontrollen bei 2 C bis 8 C 4 Tage stabil. Aliquots müssen bei längerer Aufbewahrung bei 2 C eingefroren werden, dann sind Sie 2 Monate haltbar. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen. Die konzentrierte Waschlösung ist bei Raumtemperatur bis zum Verfallsdatum haltbar. Frisch zubereitete Waschlösung sollte am selben Tag benutzt werden. Nach der ersten Benutzung ist das Konjugat bei Aufbewahrung im Originalgefäß und bei 2 bis 8 C bis zum laufdatum stabil. Veränderungen im Aussehen der Kitkomponenten können ein Anzeichen für Instabilität oder Zerfall sein. Probenverdünner: Humanserum mit Rinderserumalbumin, Benzamidin und Thymol Inkubationspuffer: Phosphatpuffer mit Rinderserumalbumin und Thymol Waschlösung (TrisHCl) Kontrollen N = 1 oder 2 Humanserum mit Benzamidin und Thymol Farblösung TMB (Tetramethylbenzydin) Stopplösung: HCl 2N Gefäß lyophilisiert 1 Gefäß 11 ml 1 Gefäß 1 ml 2 Gefäße lyophilisiert 1 Gefäß 25 ml 1 Gefäß 25 ml Schwarz Schwarz Braun Silber Weiß Weiß Dest. Wasser zugeben( das exakte Volumen bitte dem Etikett entnehmen) gebrauchsfertig 2 x mit dest. Wasser verdünnen (Magnetrührer benutzen). 1 ml dest. Wasser zugeben gebrauchsfertig gebrauchsfertig Bemerkung: 1. Benutzen Sie den Probenverdünner zur Probenverdünnung U der Kalibratorzubereitung ist äquivalent zu 1 U des NIBSC 1 st IS 86/54. VI. WASH DIL INC CONTROL CHROM STOP SOLN TMB SOLN SPE BUF N CONC ZUSÄTZLICH BENÖTIGTES MATERIAL Folgendes Material wird benötigt, aber nicht mit dem Kit mitgeliefert: 1. Hochwertiges destilliertes Wasser IX. PROBENSAMMLUNG UND VORBEREITUNG Das Serum muss so schnell wie möglich vom Blutgerinnsell der roten Zellen nach Gerinnung und Zentifugation getrennt und bei 4 C aufbewahrt werden. Werden die Proben nicht direkt benutzt, müssen sie bei 7 C für maximal 1 Jahr gelagert werden. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen. Vor Gebrauch müssen alle Proben Raumtemperatur erreichen. Vortexmischen der Proben wird vor Gebrauch empfohlen. Die Bedingungen der Probennahme können Werte beeinflussen, weshalb strenge Vorsichtsmaßnahmen während des Sammelns ergriffen werden müssen, um Unreinheiten im gesammelten Material, die die IL2 Produktion durch Blutzellen stimulieren und somit Serum IL2 Werte fälschlich steigerrn könnten, zu vermeiden. Sammelröhrchen dürfen kein Pyrogen enthalten. X. DURCHFÜHRUNG A. Bemerkungen zur Durchführung Verwenden Sie den Kit oder dessen Komponenten nicht nach laufdatum. Vermischen Sie Materialien von unterschiedlichen KitChargen nicht. Bringen Sie alle Reagenzien vor der Verwendung auf Raumtemperatur. Mischen Sie alle Reagenzien und Proben gründlich durch sanftes Schütteln oder Rühren. Führen Sie Kalibratoren, Kontrollen und Proben doppelt aus. Vertikale Ausrichtung wird empfohlen. Verwenden Sie zur Zubereitung der Waschlösung reinen Kunststoffbehälter. Verwenden Sie saubere Einwegpipettenspitzen, um Kreuzkontamination zu vermeiden. Verwenden Sie zur Pipettierung der Farblösung (TMB) und der Stopplösung keine Pipetten mit Metallteilen. Präzisionspipetten oder ein automatisches Pipettiersystem erhöhen die Präzision.

13 Achten Sie auf die Einhaltung der Inkubationszeiten. Zur Vermeidung von Drift muss die Zeit zwischen dem Pipettieren des ersten Kalibrators und der letzten Probe auf die Zeit beschränkt werden, die in schnitt XIII satz E (Zeitverzögerung) erwähnt wird. Erstellen Sie für jeden Durchlauf eine Kalibrationskurve, verwenden Sie nicht die Daten von früheren Durchläufen. Pipettieren Sie die Farblösung (TMB) innerhalb von 15 Minuten nach dem Waschen der Mikrotiterplatte. Während der Inkubation mit der Farblösung (TMB) ist die Mikrotiterplatte vor direktem Sonnenlicht zu schützen. B. Durchführung 1. Wählen Sie die erforderliche Anzahl der Streifen für den Lauf aus. Nicht verwendete Mikrotiterstreifen sollten wieder dicht in der Folie verschlossen mit Trockenmittel bei 2 bis 8 C gelagert werden. 2. Befestigen Sie die Streifen im Halterahmen. 3. Pipettieren Sie µl Inkubationspuffer in alle Wells. 4. Pipettieren Sie jeweils µl Kalibrator, Kontrolle und Probe in die entsprechenden Wells. 5. Pipettieren Sie 5 µl AntiIL2MRPKonjugat in alle Wells. 6. Inkubieren Sie 2 Stunden bei Raumtemperatur auf horizontalem Schüttler bei 7 rpm ± rpm. 7. Saugen Sie die Flüssigkeit aus jedem Well ab. 8. Waschen Sie die Platte dreimal: pipettieren Sie,4 ml Waschlösung in jeden Well saugen Sie der Inhalt jedes Wells ab 9. Pipettieren Sie µl der Farblösung (TMB) innerhalb von 15 Minuten nach dem Waschvorgang in jeden Well. 1. Inkubieren Sie die Mikrotiterplatte 15 Minuten bei Raumtemperatur auf horizontalem Schüttler bei 7 rpm ± rpm; vermeiden Sie direktes Sonnenlicht. 11. Pipettieren Sie 2 µl der Stopplösung in jeden Well. 12. Werten Sie die sorptionen bei 45 nm und 49 nm (Referenzfilter 63 nm oder 65 nm) innerhalb 3 Stunden aus und berechnen Sie die Resultate wie in schnitt XI beschrieben. XII. TYPISCHE WERTE Die folgenden Daten dienen nur zu Demonstrationszwecken und können nicht als Ersatz für die Echtzeitstandardkurve verwendet werden. Kalibrator IL2EASIA U/ml,78 U/ml 1,77 U/ml 5,7 U/ml 1,9 U/ml 23,8 U/ml OD Einheiten Polychromatisches Modell,26,69,144,65 1,511 3,667 XIII. LEISTUNGSMERKMALE UND GRENZEN DER METHODIK A. Nachweisgrenze Zwanzig NullKalibratoren wurden zusammen mit einem Satz anderer Kalibratoren gemessen. Die Nachweisgrenze, definiert als die scheinbare Konzentration bei zwei Standardabweichungen über dem gemessenen Durchschnittswert bei Nullbindung, entsprach,5 U/ml. B. Spezifität Es wurde keine signifikante Kreuzreaktion beobachtet beim Vorhandensein von 5 ng von IL1α, IL1β, IL3, IL4, IL6, IL7, IL8, IL1, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF und RANTES. Dieses IL2 Assay ist spezifisch für humanes natürliches und rekombinantes IL2. Interferenzen mit dem löslichen IL2 Rezeptor (scd25) Um das Fehlen jeglicher Interferenzen des sril2 (scd25) im Assay zu eruieren, werden unterschiedliche Konzentrationen von scd25 in die Kalibratoren gespiked. XI. BERECHNUNG DER ERGEBNISSE A. Polychromatische Auswertung: 1. In diesem Fall werden die Daten durch die ELISAAID Software verarbeitet. 2. Die Platte wird zunächst bei 45 nm gegen einen Referenzfilter auf 65 nm (oder 63 nm) ausgewertet. 3. Eine zweite Auswertung erfolgt bei 49 nm gegen denselben Referenzfilter. 4. Die ELISAAID Software steuert das Lesegerät automatisch und integriert beide Auswertungen in ein polychromatisches Modell. Diese Technik kann ODs bis 1 erstellen. 5. Das Prinzip der polychromatischen Datenauswertung funktioniert wie folgt: Xi = OD bei 45 nm Yi = OD bei 49 nm Standard nicht gewichtet lineare Regression, Parameter A & B werden berechnet: Y = A*X + B Wenn Xi < 3 OD Einheiten, dann X berechnet = Xi Wenn Xi > 3 OD Einheiten, dann X berechnet = (YiB)/A Die Kalibrationskurve wird unter Verwendung einer 4 Parameter logistischen Kurve erstellt. Die IL2Konzentration in den Proben wird durch Interpolation auf der Kalibrationskurve bestimmt. B. Bichromatische Auswertung: 1. Werten Sie die Platte bei 45 nm gegen einen Referenzfilter auf 65 nm (oder 63 nm) aus. 2. Berechnen Sie den Durchschnitt aus den Doppelbestimmungen. 3. Tragen Sie auf semilogarithmischem oder linearem Millimeterpapier den c.p.m. (Ordinate) für jeden Standard gegen die entsprechende Konzentration IL2 (szisse) und zeichnen Sie eine Kalibrationskurve durch die Kalibrationspunkte, indem Sie die eingetragenen Punkte durch gerade Linien verbinden. 4. Berechnen Sie die Konzentration für jede Kontrolle und Probe durch Interpolation aus der Kalibrationskurve. 5. Computergestützte Methoden können ebenfalls zur Erstellung der Kalibrationskurve verwendet werden. Falls die Ergebnisberechnung mit dem Computer durchgeführt wird, empfehlen wir die Berechnung mit einer 4 Parameter Kurvenfunktion. IL2 Kalibratoren 1 2,5 7, C. Präzision INTRA ASSAY Serum N <X> ± SD A B 2 2 3,2 ±,1 9,6 ±,2 CV 3,2 2,2,1 ng/ml ng/ml INTER ASSAY Serum N <X> ± SD A B SD : Standardabweichung; CV: Variationskoeffizient D. Genauigkeit Probe Serum 1 Serum 2 WIEDERFINDUNGSTEST Zugeg. IL2 1,9 2,8 9,7 18,4 1,9 2,8 9,7 18,4 Wiedergef. IL2 1,8 2,9 9,1 17,8 1,9 2,8 9,3 17,2 3,9 ±,2 9,6 ±,3 1 ng/ml CV 5,1 3,1 Wiedergefunden

14 VERDÜNNUNGSTEST Probe Verdünn. Theoret. Konzent. Serum 1/1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1,8 4,9 2,6 1,5,7,3,2 Die Proben wurden mit Probenverdünner verdünnt. Gemess. Konzent. 21,7 9,9 5,1 3, 1,4,6,3,2 Keine bekannte Methode kann jedoch vollkommene Sicherheit darüber liefern, dass menschliche Blutbestandteile nicht Hepatitis, AIDS oder andere Infektionen übertragen. Deshalb sollte der Umgang mit Reagenzien, Serum oder Plasmaproben in Übereinstimmung mit den Sicherheitsbestimmungen erfolgen. Alle tierischen Produkte und deren Derivate wurden von gesunden Tieren gesammelt. Komponenten von Rindern stammen aus Ländern in denen BSE nicht nachgewiesen wurde. Trotzdem sollten Komponenten, die tierische Substanzen enthalten, als potenziell infektiös betrachtet werden. Vermeiden Sie Hautkontakt mit allen Reagenzien; Stopplösung enthält HCl. Bei Kontakt gründlich mit Wasser spülen. Bitte rauchen, trinken, essen Sie nicht in Ihrem Arbeitsbereich, und verwenden Sie keine Kosmetika. Pipettieren Sie nicht mit dem Mund. Verwenden Sie Schutzkleidung und Wegwerfhandschuhe. E. Zeitverzögerung zwischen letzter Kalibrator und Probenzugabe Es wird im Folgenden gezeigt, dass die Genauigkeit der Tests selbst dann gewährleistet ist, wenn die Probe 3 Minuten nach Zugabe des Kalibrators in die beschichteten Röhrchen zugegeben wird ZEITDIFFERENCE min 1 min 2 min 3 min 4 min 1,6 3,9 7,6 16,8 1,4 3,6 7,3 15,9 1,5 3,7 7,1 16,2 1,4 3,7 7, 16,4 1,5 3,7 7,7 16,8 F. HookEffekt Eine Probe mit IL2 bis zu 5 U/ml liefert höhere Messwerte als der letzte Kalibratormeßwert. XVII. LITERATUR 1. ROBB R.J., (1984). Interleukin2 : The molecule and its function. Immunology. Today, 5: GRAU G. et al, (1989). Serum Cytokine changes in systemic vasculitis. Immumnology, 68: BASCHAR M. et al, (1989). Interleukin2 in Sclerodemia : Correlation of serum level with extent of skin involvement and disease duration. An. Internal Med., 11: XVIII. ZUSAMMENFASSUNG DES PROTOKOLLS XIV INTERNE QUALITÄTSKONTROLLE Entsprechen die IstWerte nicht den auf den Fläschchen angegebenen Soll Werten, können die Werte, ohne treffende Erklärung der weichungen, nicht weiterverarbeitet werden. Falls zusätzliche Kontrollen erwünscht sind, kann jedes Labor seinen eigenen Pool herstellen, der in Aliquots eingefroren werden sollte. Kontrollen mit erhöhten Azidkonzentrationen stören die Enzymreaktion und können nicht verwendet werden. Akzeptanzkriterien für die Differenz zwischen den Resultaten der Wiederholungstests anhand der Proben müssen auf Guter Laborpraxis beruhen. Es wird empfohlen, Kontrollen im Assay routinemäßig wie unbekannte Proben zu behandeln, um die Assayvarianz zu messen. Die Leistung des Assay muss mit den Qualitätskontrollkarten der Kontrollen überprüft werden. Es hat sich bewährt, die durch den Computer ausgewählte Kurvenanpassung visuell zu überprüfen. XV. REFERENZ INTERVALLE Diese Werte sind nur Richtwerte; jedes Labor muss seinen eigenen Normalwertbereich ermitteln. Zur Orientierung: Die Ergebnisse von 4 Serumproben augenscheinlich gesunder Personen mit niedrigen CRP Werten, liegen innerhalb der Bandbreite von und,1 U/ml. 38 Proben enthielten Werte unterhalb der Nachweisgrenze des Tests (<,5 U/ml). Inkubationspuffer Kalibratoren (5) Proben, Kontrollen AntiIL2MRP Konjugat KALIBRATOREN (µl) 5 PROBE(N) KONTROLLEN (µl) 5 2 Stunden bei Raumtemperatur unter ständigem Schütteln bei 7 rpm inkubieren. Inhalt jedes Wells absaugen. Dreimal mit 4 µl Waschlösung waschen und absaugen. Farblösung (TMB) 15 min. bei Raumtemperatur unter ständigem Schütteln bei 7 rpm inkubieren. Stopplösung 2 2 Auf einem MikrotiterplattenLesegerät auswerten und sorption jedes Wells bei 45 nm (gg. 63 oder 65 nm) und 49 nm (gg. 63 oder 65 nm) vermerken. XIII. VORSICHTSMASSNAHMEN UND WARNUNGEN Sicherheit Nur für diagnostische Zwecke. Die menschlichen Blutkomponenten in diesem Kit wurden mit europäischen und in den USA erprobten FDAMethoden getestet, sie waren negativ für HBsAG, antihcv und antihiv 1 und 2. DIAsource Katalognummer : KAP1241 Beipackzettelnummer: 1759/de Nummer der Originalausgabe: 11221/1 Revisionsdatum :

15 it Prima di utilizzare il kit leggere attentamente le istruzioni per l uso IL2EASIA I. USO DEL KIT Kit immunoenzimetrico per la determinazione quantitativa in vitro dell interleuchina2 (IL2) umana in siero. II. INFORMAZIONI DI CARATTERE GENERALE A. Nome commerciale: DIAsource IL2EASIA Kit B. Numero di catalogo: KAP1241 : 96 tests C. Prodotto da: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgio. Per informazioni tecniche o su come ordinare il prodotto contattare: Tel: +32 () Fax: +32 () III. INFORMAZIONI CLINICHE A. Attività biologiche La IL2, inizialmente nota come fattore di crescita dei linfociti T, è un polipeptide glicosilato del peso di 1416 kda, prodotto dai linfociti CD4+ Th attivati, che agisce con meccanismo autocrino stimolando la crescita dei linfociti Te NK. I linfociti T rispondono all IL2 attraverso il legame con il recettore ad alta affinità per l IL2 costituito da tre subunità (α, β, γ). La IL2 può essere rilevata nel surnatante di colture, in seguito ad attivazione mitogena di cellule (PBMC) o clonit. B. Applicazione clinica In campioni di siero/plasma di donatori sani sono rilevabili livelli bassi di IL2. Alcuni dati evidenziano livelli elevati di IL2 nel siero di pazienti con vasculite sistemica o sclerodermia.

16 IV. PRINCIPIO DEL METODO VI. REATTIVI NON FORNITI DIAsource IL2EASIA è un immunosaggio a sensibilità amplificata a fase solida eseguito su piastre di microtitolazione. Il dosaggio utilizza anticorpi monoclonali (Mabs) diretti contro epitopi distinti dell IL2. I calibratori e i campioni reagiscono con la cattura dell anticorpo monoclonale (M 1) che riveste il pozzetto di microtitolazione e con un anticorpo monoclonale (M 2) marcato con horseradish perossidasi (HRP). Dopo un periodo di incubazione che consenta la formazione di un sandwich: M 1 di rivestimento IL2 umanam 2 HRP, la piastra di microtitolazione viene lavata per rimuovere l anticorpo marcato con enzima non legato. L anticorpo marcato con enzima non legato viene misurato attraverso una reazione cromogenica. Si procede quindi con l aggiunta della soluzione cromogena (TMB) e successiva incubazione. La reazione viene interrotta con l aggiunta di Soluzione di arresto; quindi la piastra di microtitolazione viene letta alla lunghezza d onda adeguata. La quantità di turnover del substrato viene determinata colorimetricamente misurando l assorbanza che è proporzionale alla concentrazione di IL2. Viene tracciata una curva di calibrazione e la concentrazione IL2 nei campioni viene determinata per interpolazione dalla curva di calibrazione. L utilizzo del lettore EASIA (linearità fino a 3 unità OD) associato all impiego di un sofisticato metodo di riduzione dati (riduzione dati policromatica) garantisce un elevata sensibilità nel range basso dei valori e un esteso range di calibrazione. V. REATTIVI FORNITI Reattivi Kit da 96 test Coniugato: antiil2 (anticorpi monoclonali) marcato con HRP in tampone TRISmaleato con albumina di siero bovino e timolo. Calibratore N= 5 (le concentrazioni esatte degli calibratore sono riportate sulle etichette dei flaconi), in siero umano con albumina di siero bovino e timolo. Diluente del Campione: siero umano con albumina di siero bovino, benzamidina e timolo. Tampone di Incubazione: Tampone fosfato con albumina di siero bovino e timolo. Tampone di lavaggio (TRIS HCl) Controlli: N = 1 o 2, in siero umano con benzamidina e timolo. Soluzione Cromogena TMB Soluzione di arresto: HCl 1N Note: CAL WASH DIL CONTROL CHROM STOP INC Piastra di microtitolazione con 96 pozzetti, rivestiti anti IL2 (anticorpi monoclonali) HRP N SOLN TMB SOLN SPE BUF N CONC Codice colore Volume di ricostituzione 96 pozzetti Blu Pronte per l uso 1 flacone 6 ml 6 flaconi liofiliz. 1 flacone liofiliz. 1 flacone 11 ml 1 flacone 1 ml 2 flaconi liofiliz. 1 flacone 25 ml 1 flacone 25 ml Rosso Giallo nero nero Bruno Argento Bianco bianco Pronte per l uso Aggiungere 1 ml di acqua distillata Aggiungere acqua distillata (vedi etichetta per volumi esatti) Pronte per l uso Diluire 2 x con acqua distillata usando un agitatore magnetico).. Aggiungere 1 ml di acqua distillata Pronto per l uso Pronto per l uso 1. Usare Diluente del Campione per diluire i campioni U della preparazione standard è equivalente a 1 U del NIBSC 1 st IS 86/54. Il seguente materiale è richiesto per il dosaggio ma non è fornito nel kit. 1. Acqua distillata di qualità elevata 2. Pipette per dispensare 5 µl, µl 2 µl, 1 ml e 1 ml (Si raccomanda di utilizzare pipette accurate con puntale in plastica monouso). 3. Agitatore tipo vortex. 4. Agitatore magnetico. 5. Agitatore orizzontale per micropiastre da 7 ± rpm. 6. Lavatrice per piastra di microtitolazione 7. Lettore di micropiastre per letture a 45, 49 e 65 nm (in caso di lettura policromatica) o per letture a 45 e 65 nm (in caso di lettura bicromatica). 8. Strumentazione aggiuntiva: l ELISAAID necessario per la lettura policromatica delle piastre (vedi paragrafo XI.A) è acquistabile presso Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. PREPARAZIONE DEI REATTIVI A. Calibratore: Ricostituire i calibratori con 1 ml di acqua distillata. B. Controlli: Ricostituire i controlli con 1 ml di acqua distillata. C. Diluente del Campione: Ricostituire il Diluente del Campione aggiungendo acqua distillata fino al volume riportato sull etichetta del flacone. D. Soluzione di lavoro del tampone di lavaggio: Preparare la quantità necessaria di soluzione di lavoro del tampone di lavaggio aggiungendo 199 parti di acqua distillata ad una parte di tampone di lavaggio concentrato (2x). Usare un agitatore magnetico per rendere la soluzione omogenea. La soluzione di lavoro va scartata al termine della giornata. VIII. CONSERVAZIONE E SCADENZA DEI REATTIVI I reattivi non utilizzati sono stabili a 28 C fino alla data riportata su ciascuna etichetta. Le strisce reattive inutilizzate devono essere conservate a 28 C, in un contenitore sigillato che contenga un essiccante fino alla data di scadenza. Dopo la ricostituzione, i calibratori, i controlli e il Diluente del Campione sono stabili 4 giorni a 28 C. Per periodi di conservazione molto lunghi, preparare e mantenere le aliquote a 2 C per un massimo di 2 mesi. Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento dei campioni. La soluzione di lavaggio concentrata è stabile a temperatura ambiente fino alla data di scadenza. La soluzione di lavoro del tampone di lavaggio deve essere preparata fresca ogni volta e usata nello stesso giorno della preparazione. Dopo apertura del flacone, il coniugato è stabile fino alla data di scadenza riportata sull etichetta, se conservato a 28 C nel flacone originale ben tappato. Alterazioni dell aspetto fisico dei reattivi possono indicare una loro instabilità o deterioramento. IX. RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI A coagulazione e centrifugazione avvenute, il siero dovrà assere rimosso al più presto dal coagulo di eritrociti e conservato a 4 C. In caso di utilizzo non immediato, i campioni dovranno essere conservati a 7 C per un anno al massimo. Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento dei campioni. Prima dell impiego, tutti i campioni devono essere a temperatura ambiente. Si raccomanda di vortexare i campioni prima di utilizzarli. Le condizioni di raccolta possono influenzare i valori. Adottare pertanto le massime precauzioni durante la raccolta per evitare che eventuali impurità contenute nei campioni possano stimolare la produzione di IL2 da parte delle cellule ematiche con conseguente aumento falsato dei livelli sierici di IL2. Le provette di raccolta devono essere apirogene. X. METODO DEL DOSAGGIO A. Avvertenze generali Non usare il kit o suoi componenti oltre la data di scadenza. Non mescolare reattivi di lotti diversi. Prima dell uso portare tutti i reattivi a temperatura ambiente. Mescolare delicatamente i campioni per inversione o rotazione. Eseguire calibratori, controlli e campioni in doppio. Si raccomanda l allineamento verticale. Utilizzare un contenitore di plastica pulito per preparare la soluzione di lavaggio. Per evitare crosscontaminazioni, cambiare il puntale della pipetta ogni volta che si usi un nuovo reattivo o campione. Per la distribuzione della soluzione cromogena e la Soluzione di arresto evitare pipette con parti metalliche. L uso di pipette ben tarate e ripetibili o di sistemi di pipettamento automatici migliora la precisione del dosaggio. Rispettare i tempi di incubazione. Per evitare derive, l intervallo tra il pipettaggio del primo calibratore e l ultimo campione deve essere limitato ai tempi riportati nella sezione XIII,

17 paagrafo E (Tempo Trascorso). Allestire una curva di calibrazione per ogni seduta analitica, in quanto non è possibile utilizzare per un dosaggio curve di calibrazione di sedute analitiche precedenti. Distribuzione della soluzione cromogena entro 15 minuti dopo il lavaggio della piastra di microtitolazione. Durante l incubazione con la soluzione cromogena evitare la luce diretta del sole sulla piastra di microtitolazione. B. Metodo del dosaggio 1. Selezionare il numero di strisce reagenti necessario per il test. Le strisce reagenti inutilizzate devono essere risigillate nel contenitore con un essiccante e conservate a 28 C. 2. Assicurare le strisce reagenti nel telaio di supporto. 3. Pipettare µl di Tampone di Incubazione in ogni pozzetto. 4. Pipettare µl di ogni calibratore, controllo e campione nei pozzetti adeguati. 5. Pipettare 5 µl di coniugato antiil2 HRP in tutti i pozzetti. 6. Incubare per 2 ore a temperatura ambiente su un agitatore orizzontale a 7 ± rpm. 7. Aspirare il liquido da ogni pozzetto. 8. Lavare la piastra 3 volte : versando,4 ml di soluzione di lavaggio in ogni pozzetto aspirando il contenuto di ogni pozzetto 9. Pipettare in ogni pozzetto µl di Soluzione Cromogena entro 15 minuti dal termine della fase di lavaggio. 1. Incubare la piastra di microtitolazione per 15 minuti a temperatura ambiente su un agitatore orizzontale a 7 ± rpm; evitare la luce diretta del sole. 11. Pipettare 2 µl di soluzione di arresto in ogni pozzetto. 12. Leggere le assorbanze a 45 nm a 49 nm (filtro di riferimento a 63 nm o 65 nm) entro 3 ore e calcolare i risultati come descritto nella sezione XI. XI. CALCOLO DEI RISULTATI A. Lettura policromatica: 1. In questo caso, l elaborazione dati verrà effettuata dal software ELISA AID. 2. La piastra viene letta a 45 nm rispetto a un filtro di riferimento regolato a 65 nm (o 63 nm). 3. Verrà quindi effettuata una seconda lettura a 49 nm rispetto allo stesso filtro di riferimento. 4. Il Software ELISAAID guiderà automaticamente il lettore e integrerà le due letture utilizzando un modello policromatico. Tale tecnica può generare valori fino a 1 OD. 5. Il principio dell elaborazione policromatica dei dati è la seguente: * Xi = OD a 45 nm * Yi = OD at 49 nm * Utilizzando una regressione lineare standard non pesata, i parametri A & B sono calcolati: Y = A*X + B * Se Xi <3 unità OD, X calcolato = Xi * Se Xi >3 unità OD, X calcolato = (YiB)/A * Per tracciare la curva di calibrazione viene utilizzato un modello di adattamento della curva logistica a 4 parametri. * La concentrazione di IL2 nel campione viene determinata per interpolazione sulla curva di calibrazione. B. Lettura bicromatica 1. Leggere la piastra a 45 nm rispetto a un filtro di riferimento regolato a 65 nm (o 63 nm). 2. Calcolare la media delle determinazioni in duplicato. 3. Costruire la curva di calibrazione su carta millimetrata semilogaritmica o lineare ponendo in ordinata le medie dei colpi per minuto (cpm) dei replicati degli standard e in ascissa le rispettive concentrazioni di IL2, collegando i punti tracciati con linee rette. 4. Determinare le concentrazioni e controlli per interpolazione sulla curva di taratura. 5. E possibile utilizzare un sistema di interpolazione dati automatizzato. Con un sistema automatico di interpolazione dati, utilizzare la curva a 4 parametri. XIII. CARATTERISTICHE E LIMITI DEL METODO A. Sensibilità Venti replicati dello standard zero sono stati dosati insieme agli altri standard. La sensibilità, calcolata come concentrazione apparente di un campione con OD pari alla media più 2 deviazioni standard di 2 replicati dello standard zero, è risultata essere,5 U/ml. B. Specificità Nessuna reazione crociata significativa è stata osservata in presenza di 5 ng di IL1α, IL1β, IL3, IL4, IL6, IL7, IL8, IL1, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF e RANTES. Tale test per il dosaggio dell IL2 è specifico per la IL2 naturale e ricombinante umana. Interferenza con il recettore solubile per l IL2 (scd25) Per controllare l assenza di un eventuale interferenza da parte dell sril2 (scd 25) nel dosaggio, sono state aggiunte differenti quantità di scd25 ai calibratori. Calibratori IL2 1 2,5 7, C. Precisione INTRA SAGGIO Siero N <X> ± SD A B 2 2 3,2 ±,1 9,6 ±,2 CV 3,2 2,2,1 ng/ml ng/ml INTER SAGGIO Siero N <X> ± SD A B SD : Deviazione Standard; CV: Coefficiente di Variazione D. Accuratezza Campione Siero 1 Siero 2 TEST DI RECUPERO IL2 aggiunta 1,9 2,8 9,7 18,4 1,9 2,8 9,7 18,4 IL2 recuperata TEST DI DILUIZIONE Campione Diluizione Concentrazione teorica 1,8 2, ,9 2, ,9 ±,2 9,6 ±,3 1 ng/ml Recupero Concentrazione misurata CV 5,1 3,1 XII. CARATTERISTICHE TIPICHE I dati qui di seguito riportati sono esclusivamente indicativi e non dovranno assolutamente essere utilizzati in sostituzione della curva di calibrazione tracciata in tempo reale. Calibratore IL2EASIA U/ml,78 U/ml 1,77 U/ml 5,7 U/ml 1,9 U/ml 23,8 U/ml Unità OD Modello policromatico Polychromatic model,26,69,144,65 1,511 3,667 Siero 1/1 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1,8 4,9 2,6 1,5,7,3,2 I campioni sono stati diluiti con Diluente del Campione 21,7 9,9 5,1 3, 1,4,6,3,2

18 E. Tempo trascorso tra l aggiunta dell ultimo calibratore e il campione Come mostrato nella seguente tabella, il dosaggio si mantiene accurato anche quando un campione viene aggiunto nelle provette sensibilizzate 3 minuti dopo l aggiunta del calibratore. campione min 1 min 2 min 3 min 4 min ,6 3,9 7,6 16,8 1,4 3,6 7,3 15,9 1,5 3,7 7,1 16,2 1,4 3,7 7, 16,4 1,5 3,7 7,7 16,8 XVII. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI 1. ROBB R.J., (1984). Interleukin2 : The molecule and its function. Immunology. Today, 5: GRAU G. et al, (1989). Serum Cytokine changes in systemic vasculitis. Immumnology, 68: BASCHAR M. et al, (1989). Interleukin2 in Sclerodemia : Correlation of serum level with extent of skin involvement and disease duration. An. Internal Med., 11: D. Effetto hook XVIII. SCHEMA DEL DOSAGGIO Un campione ha cui è stata aggiunta IL2 fino a 5 U/ml ha OD superiori a quello dello standard più concentrato. XIV. CONTROLLO DI QUALITA INTERNO CALIBRATORE (µl) CAMPIONI CONTROLLI (µl) Se i risultati ottenuti dosando il Controllo 1 e il Controllo 2 non sono all interno dei limiti riportati sull etichetta dei flaconi, non è opportuno utilizzare i risultati ottenuti per i campioni, a meno che non si trovi una giustificazione soddisfacente. Ogni laboratorio può preparare un proprio pool di sieri da utilizzare come controllo, da conservare congelato in aliquote. I controlli che contengono azide interferiscono con la reazione enzimatica e quindi non possono essere utilizzati. I criteri di accettazione delle differenze tra i risultati in duplicato dei campioni devono basarsi sulla buona prassi di laboratorio. Si raccomanda di saggiare i controlli con regolarità come campioni sconosciuti per misurare la variabilità del saggio. La resa del saggio deve essere monitorata con tabelle di controllo qualità dei controlli. È buona pratica verificare visivamente il modello di curva selezionato dal computer. XV. INTERVALLI DI RIFERIMENTO Questi valori vengono dati solo come guida; ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli normali di valori. Come riferimento, i risultati di 4 campioni di siero appartenenti a soggetti apparentemente sani con bassi livelli di PCR, hanno mostrato valori interni al range,1 U/ml. In 38 campioni, si sono ottenuti valori inferiori al limite di rilevazione del test (<,5 U/ml). XVI. PRECAUZIONI PER L USO Sicurezza Il kit è solo per uso diagnostico in vitro. I reattivi di origine umana presenti nel kit sono stati dosati con metodi approvati da organismi di controllo europei o da FDA e si sono rivelati negativi per HBs Ag, anti HCV, anti HIV1 e anti HIV2. Non sono disponibili metodi in grado di offrire la certezza assoluta che derivati da sangue umano non possano provocare epatiti, AIDS o trasmettere altre infezioni. Manipolare questi reattivi o i campioni di siero o plasma secondo le procedure di sicurezza vigenti. Tutti i prodotti di origine animale o loro derivati provengono da animali sani. I componenti di origine bovina provengono da paesi dove non sono stati segnalati casi di BSE. E comunque necessario considerare i prodotti di origine animale come potenziali fonti di infezioni. Evitare qualsiasi contatto della cute con tutti i reagenti, la soluzione di Arresto contiene HCl. In caso di contatto, lavare abbondamentemente con acqua. Non fumare, bere, mangiare o applicare cosmetici nell area di lavoro. Non pipettare i reattivi con pipette a bocca. Utilizzare indumenti protettivi e guanti monouso. Tampone di Incubazione Calibratore ( 5) Campioni, controlli Coniugato antiil2hrp 5 5 Incubare per 2 ore a temperatura ambiente in agitazione continua a 7 rpm. Aspirare il contenuto di ogni pozzetto. Lavare 3 volte con 4 µl di soluzione di lavaggio e aspirare. Soluzione chromogena Incubare per 15 minuti a temperatura ambiente in agitazione continua a 7 rpm. Soluzione di arresto 2 2 Leggere su un lettore per piastra da microtitolazione e registrare l assorbanza di ogni pozzetto a 45 nm (e 49 nm) rispetto a 63 (o 65 nm) Numero di catalogo di DIAsource: KAP1241 P.I. numero: 1759/it Revisione numero: 11221/1 Data di revisione :

19 el Διαβάστε ολόκληρο το πρωτόκολλο πριν από τη χρήση. IL2EASIA Ι. ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Ανοσοενζυμομετρικός προσδιορισμός για την in vitro ποσοτική μέτρηση της ανθρώπινης ιντερλευκίνης2 (IL2) σε ορό. II. ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ A. Εμπορική ονομασία: Κιτ IL2EASIA της DIAsource B. Αριθμός καταλόγου: KAP1241: 96 προσδιορισμοί Γ. Κατασκευάζεται από την: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgium. Για τεχνική βοήθεια ή πληροφορίες σχετικά με παραγγελίες επικοινωνήστε στα: Τηλ.: +32 () Φαξ: +32 () III. ΚΛΙΝΙΚΟ ΥΠΟΒΑΘΡΟ A. Βιολογική δράση Η IL2, παλαιότερα γνωστή ως αυξητικός παράγοντας των Tκυττάρων, είναι ένα γλυκοζυλιωμένο πολυπεπτίδιο μεγέθους 1416 kda, το οποίο παράγεται από ενεργοποιημένα CD4+ Τβοηθητικά κύτταρα και ενεργεί αυτοκρινώς για την προαγωγή της ανάπτυξης των T κυττάρων και των NKκυττάρων. Τα Tκύτταρα αντιδρούν στην IL2 μέσω δέσμευσης στον υψηλής συγγένειας υποδοχέα IL2, ο οποίος αποτελείται από τρεις υπομονάδες (α, β, γ). Η IL2 ανευρίσκεται στο υπερκείμενο καλλιεργειών μετά από ενεργοποίηση μιτογόνου μονοπύρηνων κυττάρων (PBMC) ή Τκλώνων. B. Κλινικές εφαρμογές Στον ορό/πλάσμα υγιών δοτών μπορούν να ανιχνευτούν χαμηλές συγκεντρώσεις IL2. Υπάρχουν αναφορές, σύμφωνα με τις οποίες παρατηρείται αύξηση των επιπέδων της IL2 σε ορό ασθενών με συστηματική αγγειίτιδα ή σκληρόδερμα.

20 IV. ΒΑΣΙΚΕΣ ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Ο προσδιορισμός IL2EASIA της DIAsource είναι ένας ενζυμικός ανοσοπροσδιορισμός ενισχυμένης ευαισθησίας, στερεής φάσης, ο οποίος εκτελείται σε πλάκες μικροτιτλοδότησης. Ο προσδιορισμός χρησιμοποιεί μονοκλωνικά αντισώματα (Ms) που κατευθύνονται εναντίον διακριτών επιτόπων της IL2. Οι βαθμονομητές και τα δείγματα αντιδρούν με το μονοκλωνικό αντίσωμα σύλληψης (M 1) που είναι επιστρωμένο στην υποδοχή της πλάκας μικροτιτλοδότησης και με ένα μονοκλωνικό αντίσωμα (M 2) σημασμένο με ραφανιδική υπεροξειδάση (HRP). Μετά από μια περίοδο επώασης που επιτρέπει το σχηματισμό ενός σάντουιτς: επιστρωμένο M 1 ανθρώπινη IL2 M 2 HRP, η πλάκα μικροτιτλοδότησης υποβάλλεται σε πλύση για να απομακρυνθεί το σημασμένο με ένζυμο αδέσμευτο αντίσωμα. Το σημασμένο με ένζυμο δεσμευμένο αντίσωμα μετράται μέσω μιας χρωμογόνου αντίδρασης. Προστίθεται και επωάζεται χρωμογόνο διάλυμα (ΤΜΒ έτοιμο για χρήση). Η αντίδραση σταματά με την προσθήκη ανασχετικού διαλύματος και στη συνέχεια γίνεται ανάγνωση της πλάκας μικροτιτλοδότησης στο κατάλληλο μήκος κύματος. Η ποσότητα μετατροπής του υποστρώματος καθορίζεται χρωματομετρικά μετρώντας την απορρόφηση, η οποία είναι ανάλογη προς τη συγκέντρωση της IL2. Παριστάνεται γραφικά μια καμπύλη βαθμονόμησης και προσδιορίζεται η συγκέντρωση της IL2 στα δείγματα με αναγωγή από την καμπύλη βαθμονόμησης. Η χρήση του συστήματος ανάγνωσης EASIA (γραμμικότητα έως 3 μονάδες OD) και μιας πολύπλοκης μεθόδου αναγωγής δεδομένων (αναγωγή πολυχρωματικών δεδομένων) έχουν ως αποτέλεσμα υψηλή ευαισθησία στο χαμηλό πεδίο τιμών και στο εκτεταμένο πεδίο τιμών βαθμονόμησης. 3. Αναμείκτης στροβιλισμού 4. Μαγνητικός αναδευτήρας 5. Οριζόντια συσκευή ανάδευσης πλακών μικροτιτλοδότησης με δυνατότητα 7 rpm ± rpm 6. Συσκευή πλύσης για πλάκες μικροτιτλοδότησης 7. Συσκευή ανάγνωσης πλακών μικροτιτλοδότησης με δυνατότητα ανάγνωσης στα 45 nm, 49 nm και 65 nm (σε περίπτωση πολυχρωματικής ανάγνωσης) ή με δυνατότητα ανάγνωσης στα 45 nm και 65 nm (διχρωματική ανάγνωση) 8. Προαιρετικός εξοπλισμός: Ο εξοπλισμός ELISAAID που είναι απαραίτητος για την πολυχρωματική ανάγνωση (δείτε την παράγραφο XI.A.) μπορεί να αγοραστεί από την Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. ΠΑΡΑΣΚΕΥΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΟΥ A. Βαθμονομητές: Ανασυστήστε τους βαθμονομητές με 1 ml απεσταγμένου νερού. B. Οροί ελέγχου: Ανασυστήστε τους ορούς ελέγχου με 1 ml απεσταγμένου νερού. Γ. Διάλυμα αραίωσης δειγμάτων: Ανασυστήστε το διάλυμα αραίωσης δειγμάτων στον όγκο που καθορίζεται στην ετικέτα του φιαλιδίου με απεσταγμένο νερό. Δ. Διάλυμα πλύσης εργασίας: Προετοιμάστε επαρκή όγκο διαλύματος πλύσης εργασίας με προσθήκη 199 όγκων απεσταγμένου νερού σε 1 όγκο διαλύματος πλύσης (2x). Χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα για την ομογενοποίηση. Απορρίψτε το μη χρησιμοποιημένο διάλυμα πλύσης εργασίας στο τέλος της ημέρας. V. ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ Πλάκα μικροτιτλοδότησης με 96 υποδοχές επιστρωμένες με αντι IL2 (μονοκλωνικά αντισώματα) Σύζευγμα: ΑντιIL2 (μονοκλωνικά αντισώματα) σημασμένα με HRP σε ρυθμιστικό διάλυμα TRIS Maleate με βόεια ορολευκωματίνη και θυμόλη CAL Βαθμονομητής N = 1 έως 5 (δείτε τις ακριβείς τιμές πάνω στις ετικέτες των φιαλιδίων) σε ανθρώπινο ορό με βόεια ορολευκωματίνη και θυμόλη DIL HRP Διάλυμα αραίωσης δειγμάτων: ανθρώπινος ορός με βόεια ορολευκωματίνη, βενζαμιδίνη και θυμόλη N SPE 96 υποδοχές 1 φιαλίδιο 6 ml 6 φιαλίδια λυοφιλοποιημένο 1 φιαλίδιο λυοφιλοποιημένο Αντιδραστήρια Κιτ 96 προσδιορισμών Χρωματικός κωδικός μπλε κόκκινο κίτρινο μαύρο Ανασύσταση Έτοιμο για χρήση Έτοιμο για χρήση Προσθέστε 1 ml απεσταγμένου νερού Προσθέστε απεσταγμένο νερό (βλ. ετικέτα στο φιαλίδιο για τον ακριβή όγκο) VIII. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΗΜΕΡΟΜΗΝΙΑ ΛΗΞΗΣ ΤΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Πριν από το άνοιγμα ή την ανασύσταση, όλα τα συστατικά του κιτ παραμένουν σταθερά έως την ημερομηνία λήξης, η οποία αναγράφεται στην ετικέτα του φιαλιδίου, εφόσον διατηρούνται σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Οι μη χρησιμοποιημένες ταινίες πρέπει να φυλάσσονται στους 28 C, σε σφραγισμένη σακούλα που περιέχει αποξηραντικό παράγοντα, μέχρι την ημερομηνία λήξης. Μετά την ανασύσταση, οι βαθμονομητές, οι οροί ελέγχου και το διάλυμα αραίωσης δειγμάτων παραμένουν σταθερά επί 4 ημέρες στους 28 C. Για μεγαλύτερες περιόδους φύλαξης, θα πρέπει να δημιουργηθούν κλάσματα/δόσεις μίας χρήσης και να διατηρηθούν σε θερμοκρασία 2 C επί 2 μήνες το μέγιστο. Αποφύγετε τους επανειλημμένους κύκλους απόψυξηςκατάψυξης. Το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης είναι σταθερό σε θερμοκρασία δωματίου μέχρι την ημερομηνία λήξης. Φρέσκο, παρασκευασμένο διάλυμα πλύσης εργασίας θα πρέπει να χρησιμοποιείται την ίδια ημέρα. Μετά την πρώτη χρήση του, το σύζευγμα παραμένει σταθερό έως την ημερομηνία λήξης, εφόσον διατηρείται στο αρχικό, ερμητικά κλειστό φιαλίδιο σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Τυχόν μεταβολές της φυσικής εμφάνισης των αντιδραστηρίων του κιτ ενδέχεται να υποδηλώνουν αστάθεια ή αλλοίωση. IX. ΣΥΛΛΟΓΗ ΚΑΙ ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ Ο ορός θα πρέπει να αφαιρεθεί όσο το δυνατόν νωρίτερα από το πήγμα των ερυθροκυττάρων μετά την πήξη και τη φυγοκέντριση και να διατηρηθεί στους 4 C. Αν τα δείγματα δεν χρησιμοποιηθούν αμέσως, θα πρέπει να διατηρηθούν στους 7 C επί 1 έτος το μέγιστο. Αποφεύγετε τους επακόλουθους κύκλους κατάψυξηςαπόψυξης. Φέρετε όλα τα δείγματα σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση. Συνιστάται η ανάμειξη των δειγμάτων σε συσκευή στροβιλισμού πριν από τη χρήση. Οι συνθήκες δειγματοληψίας μπορούν να επηρεάσουν τις τιμές. Για το λόγο αυτό θα πρέπει να λαμβάνονται αυστηρά μέτρα προφύλαξης κατά τη διάρκεια της δειγματοληψίας για την αποφυγή προσμίξεων στα δείγματα λήψης, τα οποία θα διέγειραν την παραγωγή IL2 από αιμοκύτταρα και θα αύξαναν εσφαλμένα τις τιμές της IL2 στον ορό. Τα σωληνάρια συλλογής θα πρέπει να είναι ελεύθερα πυρογενών. Ρυθμιστικό διάλυμα επώασης: Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών με βόεια ορολευκωματίνη και θυμόλη Διάλυμα πλύσης (TrisHCl) Οροί ελέγχου N = 1 ή 2 σε ανθρώπινο ορό με βενζαμιδίνη και θυμόλη Διάλυμα χρωμογόνου TMB Ανασχετικό διάλυμα: HCl 2N 1 φιαλίδιο 11 ml 1 φιαλίδιο 1 ml 2 φιαλίδια λυοφιλοποιημένο 1 φιαλίδιο 25 ml 1 φιαλίδιο 25 ml μαύρο καφέ ασημί πράσινο πράσινο Έτοιμο για χρήση Αραιώστε 2 x με απεσταγμένο νερό (χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα). Προσθέστε 1 ml απεσταγμένου νερού Έτοιμο για χρήση Έτοιμο για χρήση Σημείωση: 1. Χρησιμοποιήστε διάλυμα αραίωσης δειγμάτων για αραίωση των δειγμάτων. 2.1 U του παρασκευάσματος του βαθμονομητή είναι ισοδύναμο με 1 U του NIBSC 1 ο IS 86/54. VI. WASH SOLN CONTROL STOP INC CHROM TMB BUF CONC N SOLN ΑΝΑΛΩΣΙΜΑ ΠΟΥ ΔΕΝ ΠΑΡΕΧΟΝΤΑΙ Τα ακόλουθα υλικά απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται στο κιτ: 1. Απεσταγμένο νερό υψηλής ποιότητας 2. Πιπέτες για διανομή: 5 μl, μl, 1 ml και 1 ml (συνιστάται η χρήση πιπετών ακριβείας με αναλώσιμα πλαστικά ρύγχη) X. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ A. Σημειώσεις σχετικά με το χειρισμό Μη χρησιμοποιείτε το κιτ ή τα συστατικά μετά την ημερομηνία λήξης. Μην αναμειγνύετε υλικά από διαφορετικές παρτίδες κιτ. Φέρετε όλα τα αντιδραστήρια σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση. Αναμείξτε καλά όλα τα αντιδραστήρια και τα δείγματα με απαλή ανακίνηση ή ανάδευση. Εκτελέστε εις διπλούν ανάληψη των βαθμονομητών, των ορών ελέγχου και των δειγμάτων. Συνιστάται κάθετη ευθυγράμμιση. Χρησιμοποιήστε ένα καθαρό, πλαστικό δοχείο για να ετοιμάσετε το διάλυμα πλύσης. Χρησιμοποιείτε ένα καθαρό αναλώσιμο ρύγχος πιπέτας για την προσθήκη κάθε διαφορετικού αντιδραστηρίου και δείγματος προκειμένου να αποφύγετε την επιμόλυνση. Για τη διανομή του χρωμογόνου διαλύματος και του ανασχετικού διαλύματος αποφύγετε πιπέτες με μεταλλικά μέρη. Η ακρίβεια βελτιώνεται με χρήση πιπετών υψηλής ακρίβειας ή αυτοματοποιημένου εξοπλισμού διανομής με πιπέτες. Τηρείτε τους χρόνους επώασης. Για να αποφύγετε τη μετατόπιση, ο χρόνος μεταξύ της διανομής με πιπέτα του πρώτου βαθμονομητή και του τελευταίου δείγματος πρέπει να περιορίζεται στο χρονικό διάστημα που αναφέρεται στην ενότητα XIII, παράγραφος E (Μεσοδιάστημα). Προετοιμάστε μια καμπύλη βαθμονόμησης για κάθε ανάλυση και μη χρησιμοποιείτε δεδομένα από προηγούμενες αναλύσεις. Διανείμετε το χρωμογόνο διάλυμα εντός 15 λεπτών από την πλύση της πλάκας μικροτιτλοδότησης. Κατά τη διάρκεια της επώασης με το χρωμογόνο διάλυμα, αποφύγετε την άμεση έκθεση της πλάκας μικροτιτλοδότησης στο ηλιακό φως. B. Διαδικασία 1. Επιλέξτε τον απαιτούμενο αριθμό ταινιών για την ανάλυση. Οι μη χρησιμοποιημένες ταινίες πρέπει να ξανασφραγιστούν μέσα στη σακούλα με τον αποξηραντικό παράγοντα και να φυλαχτούν σε θερμοκρασία 28 C. 2. Ασφαλίστε τις ταινίες μέσα στο πλαίσιο στήριξης.

IL-4-EASIA KAP1281. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-4-EASIA KAP1281. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL4EASIA KAP1281 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B14 Nivelles Belgium : 955/1 en Read entire protocol before use. IL4EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative

Διαβάστε περισσότερα

IL-6-EASIA-CE KAP1261

IL-6-EASIA-CE KAP1261 IL6EASIACE KAP1261 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110221/4 en Read entire protocol before use. IL6EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

TNF-α- EASIA KAP1751

TNF-α- EASIA KAP1751 TFα EASIA KAP1751 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B134 Louvainlaeuve Belgium : 11221/3 en Read entire protocol before use. TFαEASIA I. ITEDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative

Διαβάστε περισσότερα

IL-2-EASIA KAP1241. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-2-EASIA KAP1241. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL2EASIA KAP1241 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B14 Nivelles Belgium : 955/1 en Read entire protocol before use. IL2EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative

Διαβάστε περισσότερα

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 090505/1 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

IL-1ß-EASIA KAP1211. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-1ß-EASIA KAP1211. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL1ßEASIA KAP1211 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B138 LouvainlaNeuve Belgium : 110221/1 en Read entire protocol before use. IL1βEASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110221/2 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme. (a) Note: Award A for vertical line to right of mean, A for shading to right of their vertical line. AA N (b) evidence of recognizing symmetry

Διαβάστε περισσότερα

25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971

25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971 25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 14512/2 en US: For in-vitro diagnostic use only. I. INTENDED USE Read entire protocol

Διαβάστε περισσότερα

English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based

English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based exclusively on safe, managed code. PDFsharp offers two powerful

Διαβάστε περισσότερα

English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based

English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based English PDFsharp is a.net library for creating and processing PDF documents 'on the fly'. The library is completely written in C# and based exclusively on safe, managed code. PDFsharp offers two powerful

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 110221/3 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay

Διαβάστε περισσότερα

CHORUS SYPHILIS SCREEN RECOMBINANT. REF 81100 (36 tests)

CHORUS SYPHILIS SCREEN RECOMBINANT. REF 81100 (36 tests) /GK/ 1/15 CHORUS SYPHILIS SCRE RECOMBINANT REF 81100 (36 tests) Fabriqué par/κατασκευάζεται από/manufactured by: DISE Diagnostica Senese Via delle Rose 10 53035 Monteriggioni (Siena) - Italy /GK/ 2/15

Διαβάστε περισσότερα

Tipologie installative - Installation types Type d installation - Installationstypen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης

Tipologie installative - Installation types Type d installation - Installationstypen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης AMPADE MOOCROMATICHE VIMAR DIMMERABII A 0 V~ - VIMAR 0 V~ DIMMABE MOOCHROME AMP AMPE MOOCHROME VIMAR VARIATEUR 0 V~ - DIMMERFÄHIGE MOOCHROMATICHE AMPE VO VIMAR MIT 0 V~ ÁMPARA MOOCROMÁTICA VIMAR REGUABE

Διαβάστε περισσότερα

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΛΕΝΑ ΦΛΟΚΑ Επίκουρος Καθηγήτρια Τµήµα Φυσικής, Τοµέας Φυσικής Περιβάλλοντος- Μετεωρολογίας ΓΕΝΙΚΟΙ ΟΡΙΣΜΟΙ Πληθυσµός Σύνολο ατόµων ή αντικειµένων στα οποία αναφέρονται

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 110221/1 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay

Διαβάστε περισσότερα

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS CHAPTER 5 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS EXERCISE 104 Page 8 1. Find the positive root of the equation x + 3x 5 = 0, correct to 3 significant figures, using the method of bisection. Let f(x) =

Διαβάστε περισσότερα

INS-EASIA KAP1251. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

INS-EASIA KAP1251. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium INS-EASIA KAP1251 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 120308/1 en Read entire protocol before use. INS-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for

Διαβάστε περισσότερα

Section 9.2 Polar Equations and Graphs

Section 9.2 Polar Equations and Graphs 180 Section 9. Polar Equations and Graphs In this section, we will be graphing polar equations on a polar grid. In the first few examples, we will write the polar equation in rectangular form to help identify

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ Πτυχιακή εργασία ΜΕΛΕΤΗ ΠΟΛΥΦΑΙΝΟΛΩΝ ΚΑΙ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΣΟΚΟΛΑΤΑΣ Αναστασία Σιάντωνα Λεμεσός

Διαβάστε περισσότερα

IL-6-EASIA-CE KAP1261

IL-6-EASIA-CE KAP1261 IL-6-EASIA-CE KAP1261 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium : 0905/1 en Read entire protocol before use. IL-6-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for

Διαβάστε περισσότερα

NSE-IRMA KIP2471. BioSource Europe S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

NSE-IRMA KIP2471. BioSource Europe S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium NSEIRMA KIP2471 BioSource Europe S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 051227/1 en Read entire protocol before use. NSEIRMA I. INTENDED USE Immunoradiometric assay kit for the in vitro quantitative

Διαβάστε περισσότερα

EE512: Error Control Coding

EE512: Error Control Coding EE512: Error Control Coding Solution for Assignment on Finite Fields February 16, 2007 1. (a) Addition and Multiplication tables for GF (5) and GF (7) are shown in Tables 1 and 2. + 0 1 2 3 4 0 0 1 2 3

Διαβάστε περισσότερα

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν Αριθμός έκθεζης δοκιμών / Test report number Σειριακός αριθμός οργάνοσ / Instrument serial No T Πελάηης / Customer TOTAL Q Επγαζηήπια Διακπιβώζεων A.E. Κοπγιαλενίος 20, Τ.Κ. 11526 Αθήνα 20 Korgialeniou

Διαβάστε περισσότερα

Potential Dividers. 46 minutes. 46 marks. Page 1 of 11

Potential Dividers. 46 minutes. 46 marks. Page 1 of 11 Potential Dividers 46 minutes 46 marks Page 1 of 11 Q1. In the circuit shown in the figure below, the battery, of negligible internal resistance, has an emf of 30 V. The pd across the lamp is 6.0 V and

Διαβάστε περισσότερα

Biodiesel quality and EN 14214:2012

Biodiesel quality and EN 14214:2012 3η Ενότητα: «Αγορά Βιοκαυσίμων στην Ελλάδα: Τάσεις και Προοπτικές» Biodiesel quality and EN 14214:2012 Dr. Hendrik Stein Pilot Plant Manager, ASG Analytik Content Introduction Development of the Biodiesel

Διαβάστε περισσότερα

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium ReninEASIA KAP1531 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 121009/1 en Read entire protocol before use. RENINEASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in

Διαβάστε περισσότερα

RENIN-IRMA KIP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

RENIN-IRMA KIP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium RENINIRMA KIP1531 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110218/1 en Read entire protocol before use. RENINIRMA I. INTENDED USE Immunoradiometric assay kit for the

Διαβάστε περισσότερα

Tipologie installative - Installation types Types d installation - Die einbauanweisungen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης

Tipologie installative - Installation types Types d installation - Die einbauanweisungen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης Types d installation Die einbauanweisungen Tipos de instalación Τυπολογίες εγκατάστασης AMPADE MOOCROMATICHE VIMAR DIMMERABII A 0 V~ MOOCHROME DIMMABE AMP VIMAR 0 V~ AMPE MOOCHROME VIMAR DIMMABE 0 V~ EUCHTE

Διαβάστε περισσότερα

ImmuLisa Enhanced B2GP1 ELISA Beta 2 Glycoprotein 1 Antibody ELISA

ImmuLisa Enhanced B2GP1 ELISA Beta 2 Glycoprotein 1 Antibody ELISA EN ImmuLisa Enhanced B2GP1 ELISA Beta 2 Glycoprotein 1 Antibody ELISA [IVD] For in vitro diagnostic use PRODUCT INSERT [REF] 5152A B2GP1 IgA Antibody ELISA 96 Determinations [REF] 5152G B2GP1 IgG Antibody

Διαβάστε περισσότερα

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007 Οδηγίες: Να απαντηθούν όλες οι ερωτήσεις. Αν κάπου κάνετε κάποιες υποθέσεις να αναφερθούν στη σχετική ερώτηση. Όλα τα αρχεία που αναφέρονται στα προβλήματα βρίσκονται στον ίδιο φάκελο με το εκτελέσιμο

Διαβάστε περισσότερα

6.3 Forecasting ARMA processes

6.3 Forecasting ARMA processes 122 CHAPTER 6. ARMA MODELS 6.3 Forecasting ARMA processes The purpose of forecasting is to predict future values of a TS based on the data collected to the present. In this section we will discuss a linear

Διαβάστε περισσότερα

hgh-easia KAP1081 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

hgh-easia KAP1081 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium hgheasia KAP1081 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 0904/1 en Read entire protocol before use. hgheasia I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative

Διαβάστε περισσότερα

Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1

Main source: Discrete-time systems and computer control by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 A Brief History of Sampling Research 1915 - Edmund Taylor Whittaker (1873-1956) devised a

Διαβάστε περισσότερα

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1)

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1) Name: Date: Nuclear Physics 5. A sample of radioactive carbon-4 decays into a stable isotope of nitrogen. As the carbon-4 decays, the rate at which the amount of nitrogen is produced A. decreases linearly

Διαβάστε περισσότερα

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 / KIP1974

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 / KIP1974 25OHVitamin D total RIACT KIP1971 / KIP1974 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 Louvainlaeuve Belgium : 141208/1 en Read entire protocol before use. 25OH Vitamin D total RIACT I. ITEDED

Διαβάστε περισσότερα

Session novembre 2009

Session novembre 2009 ΥΠΟΥΡΓΕΙΟ ΕΘΝΙΚΗΣ ΠΑΙΔΕΙΑΣ ΚΑΙ ΘΡΗΣΚΕΥΜΑΤΩΝ ΚΡΑΤΙΚΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΓΛΩΣΣΟΜΑΘΕΙΑΣ MINISTÈRE GREC DE L ÉDUCATION NATIONALE ET DES CULTES CERTIFICATION EN LANGUE FRANÇAISE NIVEAU ÉPREUVE B1 sur l échelle proposée

Διαβάστε περισσότερα

IGFBP-3-EASIA KAP1171

IGFBP-3-EASIA KAP1171 IGFBP3EASIA KAP1171 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B 1348 LouvainlaNeuve Belgium : 160308/2 en Read entire protocol before use. IGFBP3EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the

Διαβάστε περισσότερα

CHORUS. EPSTEIN-BARR EARLY ANTIGEN IgG REF 81058 REF 81058/12

CHORUS. EPSTEIN-BARR EARLY ANTIGEN IgG REF 81058 REF 81058/12 /GK/ 1/17 CHORUS EPSTEIN-BARR EARLY ANTIG IgG REF 81058 REF 81058/12 Fabriqué par/κατασκευάζεται από/manufactured by: DISE Diagnostica Senese Via delle Rose 10 53035 Monteriggioni (Siena) - Italy Modifications

Διαβάστε περισσότερα

Homework 3 Solutions

Homework 3 Solutions Homework 3 Solutions Igor Yanovsky (Math 151A TA) Problem 1: Compute the absolute error and relative error in approximations of p by p. (Use calculator!) a) p π, p 22/7; b) p π, p 3.141. Solution: For

Διαβάστε περισσότερα

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 25OHVitamin D total RIACT KIP1971 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 Louvainlaeuve Belgium : 1181/1 en Read entire protocol before use. 25OH Vitamin D total RIACT I. ITEDED USE Radioimmunoassay

Διαβάστε περισσότερα

NSE-IRMA KIP2471. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

NSE-IRMA KIP2471. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium SEIRMA KIP2471 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 Louvainlaeuve Belgium : 150414/1 en Read entire protocol before use. SEIRMA I. ITEDED USE Immunoradiometric assay kit for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

Code Breaker. TEACHER s NOTES

Code Breaker. TEACHER s NOTES TEACHER s NOTES Time: 50 minutes Learning Outcomes: To relate the genetic code to the assembly of proteins To summarize factors that lead to different types of mutations To distinguish among positive,

Διαβάστε περισσότερα

Areas and Lengths in Polar Coordinates

Areas and Lengths in Polar Coordinates Kiryl Tsishchanka Areas and Lengths in Polar Coordinates In this section we develop the formula for the area of a region whose boundary is given by a polar equation. We need to use the formula for the

Διαβάστε περισσότερα

MESACUP Desmoglein TEST Dsg1

MESACUP Desmoglein TEST Dsg1 MESACUP Desmoglein TEST Dsg1 Cat. No. 7680E: 48 wells Cat. No. 7680E: 48 puits Art.-Nr. 7680E: 48 Auftragsstellen Cat No 7680E: 48 wells Cat. No. 7680E: 48 pocillos Cat. n. 7680E: 48 pozzetti Cat. Nº 7680E:

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ Πτυχιακή εργασία ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΥΠΕΡΗΧΩΝ ΣΤΗΝ LISTERIA GRAYI ΣΤΟ ΓΑΛΑ: ΕΠΙΒΙΩΣΗ ΚΑΙ ΦΥΣΙΚΟΧΗΜΙΚΕΣ ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ. Άρτεμις

Διαβάστε περισσότερα

Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων

Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων ΕΛΛΗΝΙΚΗ ΔΗΜΟΚΡΑΤΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΡΗΤΗΣ Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων Φροντιστήριο 9: Transactions - part 1 Δημήτρης Πλεξουσάκης Τμήμα Επιστήμης Υπολογιστών Tutorial on Undo, Redo and Undo/Redo

Διαβάστε περισσότερα

2 Composition. Invertible Mappings

2 Composition. Invertible Mappings Arkansas Tech University MATH 4033: Elementary Modern Algebra Dr. Marcel B. Finan Composition. Invertible Mappings In this section we discuss two procedures for creating new mappings from old ones, namely,

Διαβάστε περισσότερα

Απόκριση σε Μοναδιαία Ωστική Δύναμη (Unit Impulse) Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο. Απόστολος Σ.

Απόκριση σε Μοναδιαία Ωστική Δύναμη (Unit Impulse) Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο. Απόστολος Σ. Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο The time integral of a force is referred to as impulse, is determined by and is obtained from: Newton s 2 nd Law of motion states that the action

Διαβάστε περισσότερα

ΕΦΑΡΜΟΓΗ APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Esencia 25 ml 100 ml. Damasco 2,5L (6-8m2/L)

ΕΦΑΡΜΟΓΗ APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Esencia 25 ml 100 ml. Damasco 2,5L (6-8m2/L) DAMASCO Διακριτική και κομψή διακόσμηση εμπνευσμένη από τα πολυτελή υφάσματα της αρχαιότητας, για όσους επιθυμούν οι τοίχοι να είναι επενδεδυμένοι με ένα προϊόν που παρέχει μεταξένια και βελούδινη αντανάκλαση.

Διαβάστε περισσότερα

10 MERCHIA. 10. Starting from standing position (where the SIGN START ) without marshal (self start) 5 minutes after TC4 KALO LIVADI OUT

10 MERCHIA. 10. Starting from standing position (where the SIGN START ) without marshal (self start) 5 minutes after TC4 KALO LIVADI OUT Date: 22 October 2016 Time: 09:00 hrs Subject: BULLETIN No 5 Document No: 1.6 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Διαβάστε περισσότερα

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΩΣ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΔΙΟΙΚΗΣΗ ΤΗΣ ΥΓΕΙΑΣ ΤΕΙ ΠΕΙΡΑΙΑ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ

Διαβάστε περισσότερα

FR/GK 1/13 ENZY-WELL. Epstein-Barr EBNA IgG. DIESSE Diagnostica Senese S.p.A. Via delle Rose, 10 53035 Monteriggioni (Siena) Italy REF 91057

FR/GK 1/13 ENZY-WELL. Epstein-Barr EBNA IgG. DIESSE Diagnostica Senese S.p.A. Via delle Rose, 10 53035 Monteriggioni (Siena) Italy REF 91057 /GK 1/13 ZYWELL EpsteinBarr EBNA IgG REF 91057 DISE Diagnostica Senese S.p.A. Via delle Rose, 10 53035 Monteriggioni (Siena) Italy IO09/022 IFU 91057 Ed. 10.07.2014 2/13 INSTRUCTIONS POUR L UTILISATION

Διαβάστε περισσότερα

Efecto Perlado. Colores. Efectos. by Osaka

Efecto Perlado. Colores. Efectos. by Osaka Efecto Perlado Colores & Efectos by Osaka 2 EFECTO PERLADO Τεχνοτροπία με βάση την άμμο με χρυσή και ασημή πέρλα. Πολύ γρήγορη εφαρμογή, με μια στρώση χρώματος. Έτοιμο να χρησιμοποιηθεί η χρωματίζεται

Διαβάστε περισσότερα

υγεία των νοσηλευτών που συστηματικά εμπλέκονται στην παρασκευή και χορήγηση τους.

υγεία των νοσηλευτών που συστηματικά εμπλέκονται στην παρασκευή και χορήγηση τους. ΠΕΡΙΛΗΨΗ Εισαγωγή: Τα χημειοθεραπευτικά φάρμακα έχουν αποδειχθεί οτι θέτουν σε κίνδυνο την υγεία των νοσηλευτών που συστηματικά εμπλέκονται στην παρασκευή και χορήγηση τους. Σκοπός: Σκοπός της παρούσας

Διαβάστε περισσότερα

Exercises to Statistics of Material Fatigue No. 5

Exercises to Statistics of Material Fatigue No. 5 Prof. Dr. Christine Müller Dipl.-Math. Christoph Kustosz Eercises to Statistics of Material Fatigue No. 5 E. 9 (5 a Show, that a Fisher information matri for a two dimensional parameter θ (θ,θ 2 R 2, can

Διαβάστε περισσότερα

Έλεγχος και Διασφάλιση Ποιότητας

Έλεγχος και Διασφάλιση Ποιότητας Έλεγχος και Διασφάλιση Ποιότητας Ενότητα 6: Κουππάρης Μιχαήλ Τμήμα Χημείας Εργαστήριο Αναλυτικής Χημείας General Successfully carry out the Preventive Maintenance Procedure and complete the Maintenance

Διαβάστε περισσότερα

hcg+ß-irma KIP0981 - KIP0984

hcg+ß-irma KIP0981 - KIP0984 hcg+ßirma KIP0981 KIP0984 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110218/1 en Read entire protocol before use. hcg+β IRMA I. INTENDED USE Immunoradiometric assay for

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ Πτυχιακή εργασία ΓΝΩΣΕΙΣ ΚΑΙ ΣΤΑΣΕΙΣ ΝΟΣΗΛΕΥΤΩΝ ΠΡΟΣ ΤΟΥΣ ΦΟΡΕΙΣ ΜΕ ΣΥΝΔΡΟΜΟ ΕΠΙΚΤΗΤΗΣ ΑΝΟΣΟΑΝΕΠΑΡΚΕΙΑΣ (AIDS) Αλέξης Δημήτρη Α.Φ.Τ: 20085675385 Λεμεσός

Διαβάστε περισσότερα

ΑΚΑ ΗΜΙΑ ΕΜΠΟΡΙΚΟΥ ΝΑΥΤΙΚΟΥ ΜΑΚΕ ΟΝΙΑΣ ΣΧΟΛΗ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ

ΑΚΑ ΗΜΙΑ ΕΜΠΟΡΙΚΟΥ ΝΑΥΤΙΚΟΥ ΜΑΚΕ ΟΝΙΑΣ ΣΧΟΛΗ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ ΑΚΑ ΗΜΙΑ ΕΜΠΟΡΙΚΟΥ ΝΑΥΤΙΚΟΥ ΜΑΚΕ ΟΝΙΑΣ ΣΧΟΛΗ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ ΘΕΜΑ :ΤΥΠΟΙ ΑΕΡΟΣΥΜΠΙΕΣΤΩΝ ΚΑΙ ΤΡΟΠΟΙ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΑΣ ΣΠΟΥ ΑΣΤΡΙΑ: ΕΥΘΥΜΙΑ ΟΥ ΣΩΣΑΝΝΑ ΕΠΙΒΛΕΠΩΝ ΚΑΘΗΓΗΤΗΣ : ΓΟΥΛΟΠΟΥΛΟΣ ΑΘΑΝΑΣΙΟΣ 1 ΑΚΑ

Διαβάστε περισσότερα

Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing

Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing ΕΛΛΗΝΙΚΗ ΔΗΜΟΚΡΑΤΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΡΗΤΗΣ Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing Γιώργος Μπορμπουδάκης Τμήμα Επιστήμης Υπολογιστών Procedure 1. Form the null (H 0 ) and alternative (H 1 ) hypothesis 2. Consider

Διαβάστε περισσότερα

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 11/3/2006

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 11/3/2006 ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 11/3/26 Οδηγίες: Να απαντηθούν όλες οι ερωτήσεις. Ολοι οι αριθμοί που αναφέρονται σε όλα τα ερωτήματα μικρότεροι το 1 εκτός αν ορίζεται διαφορετικά στη διατύπωση

Διαβάστε περισσότερα

1. Αφετηρία από στάση χωρίς κριτή (self start όπου πινακίδα εκκίνησης) 5 λεπτά µετά την αφετηρία σας από το TC1B KALO LIVADI OUT

1. Αφετηρία από στάση χωρίς κριτή (self start όπου πινακίδα εκκίνησης) 5 λεπτά µετά την αφετηρία σας από το TC1B KALO LIVADI OUT Date: 21 October 2016 Time: 14:00 hrs Subject: BULLETIN No 3 Document No: 1.3 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Διαβάστε περισσότερα

Correction Table for an Alcoholometer Calibrated at 20 o C

Correction Table for an Alcoholometer Calibrated at 20 o C An alcoholometer is a device that measures the concentration of ethanol in a water-ethanol mixture (often in units of %abv percent alcohol by volume). The depth to which an alcoholometer sinks in a water-ethanol

Διαβάστε περισσότερα

Το σύστημα των αξιών της ελληνικής κοινωνίας μέσα στα σχολικά εγχειρίδια της Λογοτεχνίας του Δημοτικού Σχολείου

Το σύστημα των αξιών της ελληνικής κοινωνίας μέσα στα σχολικά εγχειρίδια της Λογοτεχνίας του Δημοτικού Σχολείου ΔΗΜΟΚΡΙΤΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΡΑΚΗΣ ΠΑΙΔΑΓΩΓΙΚΟ ΤΜΗΜΑ ΔΗΜΟΤΙΚΗΣ ΕΚΠ/ΣΗΣ ΔΙΔΑΣΚΑΛΕΙΟ «ΘΕΟΔΩΡΟΣ ΚΑΣΤΑΝΟΣ» Το σύστημα των αξιών της ελληνικής κοινωνίας μέσα στα σχολικά εγχειρίδια της Λογοτεχνίας του Δημοτικού

Διαβάστε περισσότερα

2. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν.

2. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν. Experiental Copetition: 14 July 011 Proble Page 1 of. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν. Ένα μικρό σωματίδιο μάζας (μπάλα) βρίσκεται σε σταθερή απόσταση z από το πάνω μέρος ενός

Διαβάστε περισσότερα

MATERIALIEN ZUR VORBEREITUNG AUF DIE KLAUSUR INFORMATIK II FÜR VERKEHRSINGENIEURWESEN ANTEIL VON PROF. VOGLER IM WINTERSEMESTER 2011/12

MATERIALIEN ZUR VORBEREITUNG AUF DIE KLAUSUR INFORMATIK II FÜR VERKEHRSINGENIEURWESEN ANTEIL VON PROF. VOGLER IM WINTERSEMESTER 2011/12 Fakultät Informatik Institut für Angewandte Informatik, Professur Technische Informationssysteme MATERIALIEN ZUR VORBEREITUNG AUF DIE KLAUSUR INFORMATIK II FÜR VERKEHRSINGENIEURWESEN ANTEIL VON PROF. VOGLER

Διαβάστε περισσότερα

ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ

ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ ΣΥΓΚΡΙΤΙΚΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΣΥΓΚΡΑΤΗΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΟΡΙΣΜΕΝΩΝ ΠΡΟΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΜΕΝΩΝ ΣΥΝΔΕΣΜΩΝ ΑΚΡΙΒΕΙΑΣ

Διαβάστε περισσότερα

DETERMINATION OF THERMAL PERFORMANCE OF GLAZED LIQUID HEATING SOLAR COLLECTORS

DETERMINATION OF THERMAL PERFORMANCE OF GLAZED LIQUID HEATING SOLAR COLLECTORS ΕΘΝΙΚΟ ΚΕΝΤΡΟ ΕΡΕΥΝΑΣ ΦΥΣΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΗΜΟΚΡΙΤΟΣ / DEMOKRITOS NATIONAL CENTER FOR SCIENTIFIC RESEARCH ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΚΙΜΩΝ ΗΛΙΑΚΩΝ & ΑΛΛΩΝ ΕΝΕΡΓΕΙΑΚΩΝ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ LABORATORY OF TESTIN SOLAR & OTHER ENERY

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ

ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ 515 ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ~ " ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ ΠΡΟΣΤΑΤΕΥΤΙΚΟΥ ΙΜΑΤΙΣΜΟΥ ΑΡΓΥΡΟΠΟΥ ΛΟΣ ΘΕΜΙΣΤΟΚΛΗΣ

Διαβάστε περισσότερα

PLUGIN BASIC TS (en) indication, that electrical appliance is switched on

PLUGIN BASIC TS (en) indication, that electrical appliance is switched on PLUGIN BASIC TS (en) indication, that electrical appliance is switched on after pressing the ON button, will be the connected appliance permantely switched on. after pressing the button, will be the connected

Διαβάστε περισσότερα

ΘΕΩΡΗΤΙΚΗ ΚΑΙ ΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΗ ΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΙΕΡΓΑΣΙΑΣ ΣΚΛΗΡΥΝΣΗΣ ΙΑ ΛΕΙΑΝΣΕΩΣ

ΘΕΩΡΗΤΙΚΗ ΚΑΙ ΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΗ ΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΙΕΡΓΑΣΙΑΣ ΣΚΛΗΡΥΝΣΗΣ ΙΑ ΛΕΙΑΝΣΕΩΣ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΑΤΡΩΝ ΠΟΛΥΤΕΧΝΙΚΗ ΣΧΟΛΗ ΤΜΗΜΑ ΜΗΧΑΝΟΛΟΓΩΝ ΚΑΙ ΑΕΡΟΝΑΥΠΗΓΩΝ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ ΠΑΡΑΓΩΓΗΣ ΚΑΙ ΑΥΤΟΜΑΤΙΣΜΟΥ / ΥΝΑΜΙΚΗΣ & ΘΕΩΡΙΑΣ ΜΗΧΑΝΩΝ ΙΕΥΘΥΝΤΗΣ: Καθηγητής Γ. ΧΡΥΣΟΛΟΥΡΗΣ Ι ΑΚΤΟΡΙΚΗ

Διαβάστε περισσότερα

Surface Mount Aluminum Electrolytic Capacitors

Surface Mount Aluminum Electrolytic Capacitors FEATURES CYLINDRICAL V-CHIP CONSTRUCTION LOW COST, GENERAL PURPOSE, 2000 HOURS AT 85 O C NEW EXPANDED CV RANGE (up to 6800µF) ANTI-SOLVENT (2 MINUTES) DESIGNED FOR AUTOMATIC MOUNTING AND REFLOW SOLDERING

Διαβάστε περισσότερα

Second Order RLC Filters

Second Order RLC Filters ECEN 60 Circuits/Electronics Spring 007-0-07 P. Mathys Second Order RLC Filters RLC Lowpass Filter A passive RLC lowpass filter (LPF) circuit is shown in the following schematic. R L C v O (t) Using phasor

Διαβάστε περισσότερα

ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ. Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο. την απόκτηση του διπλώματος

ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ. Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο. την απόκτηση του διπλώματος ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο την απόκτηση του διπλώματος «Οργάνωση και Διοίκηση Βιομηχανικών Συστημάτων με εξειδίκευση στα Συστήματα Εφοδιασμού

Διαβάστε περισσότερα

ΙΕΥΘΥΝΤΗΣ: Καθηγητής Γ. ΧΡΥΣΟΛΟΥΡΗΣ Ι ΑΚΤΟΡΙΚΗ ΙΑΤΡΙΒΗ

ΙΕΥΘΥΝΤΗΣ: Καθηγητής Γ. ΧΡΥΣΟΛΟΥΡΗΣ Ι ΑΚΤΟΡΙΚΗ ΙΑΤΡΙΒΗ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΑΤΡΩΝ ΠΟΛΥΤΕΧΝΙΚΗ ΣΧΟΛΗ ΤΜΗΜΑ ΜΗΧΑΝΟΛΟΓΩΝ ΚΑΙ ΑΕΡΟΝΑΥΠΗΓΩΝ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ ΠΑΡΑΓΩΓΗΣ & ΑΥΤΟΜΑΤΙΣΜΟΥ / ΥΝΑΜΙΚΗΣ & ΘΕΩΡΙΑΣ ΜΗΧΑΝΩΝ ΙΕΥΘΥΝΤΗΣ: Καθηγητής Γ. ΧΡΥΣΟΛΟΥΡΗΣ Ι ΑΚΤΟΡΙΚΗ

Διαβάστε περισσότερα

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 6/5/2006

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 6/5/2006 Οδηγίες: Να απαντηθούν όλες οι ερωτήσεις. Ολοι οι αριθμοί που αναφέρονται σε όλα τα ερωτήματα είναι μικρότεροι το 1000 εκτός αν ορίζεται διαφορετικά στη διατύπωση του προβλήματος. Διάρκεια: 3,5 ώρες Καλή

Διαβάστε περισσότερα

Advanced Subsidiary Unit 1: Understanding and Written Response

Advanced Subsidiary Unit 1: Understanding and Written Response Write your name here Surname Other names Edexcel GE entre Number andidate Number Greek dvanced Subsidiary Unit 1: Understanding and Written Response Thursday 16 May 2013 Morning Time: 2 hours 45 minutes

Διαβάστε περισσότερα

ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ

ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ Γηπισκαηηθή Δξγαζία ηνπ Φνηηεηή ηνπ ηκήκαηνο Ζιεθηξνιόγσλ Μεραληθώλ θαη Σερλνινγίαο Ζιεθηξνληθώλ

Διαβάστε περισσότερα

HISTOGRAMS AND PERCENTILES What is the 25 th percentile of a histogram? What is the 50 th percentile for the cigarette histogram?

HISTOGRAMS AND PERCENTILES What is the 25 th percentile of a histogram? What is the 50 th percentile for the cigarette histogram? HISTOGRAMS AND PERCENTILES What is the 25 th percentile of a histogram? The point on the horizontal axis such that of the area under the histogram lies to the left of that point (and to the right) What

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium : 090505/1 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for

Διαβάστε περισσότερα

Supporting Information

Supporting Information Supporting Information Lewis acid catalyzed ring-opening reactions of methylenecyclopropanes with diphenylphosphine oxide in the presence of sulfur or selenium Min Shi,* Min Jiang and Le-Ping Liu State

Διαβάστε περισσότερα

ΠΣΤΥΙΑΚΗ ΔΡΓΑΙΑ. Μειέηε Υξόλνπ Απνζηείξσζεο Κνλζέξβαο κε Τπνινγηζηηθή Ρεπζηνδπλακηθή. Αζαλαζηάδνπ Βαξβάξα

ΠΣΤΥΙΑΚΗ ΔΡΓΑΙΑ. Μειέηε Υξόλνπ Απνζηείξσζεο Κνλζέξβαο κε Τπνινγηζηηθή Ρεπζηνδπλακηθή. Αζαλαζηάδνπ Βαξβάξα ΣΔΥΝΟΛΟΓΙΚΟ ΔΚΠΑΙΓΔΤΣΙΚΟ ΙΓΡΤΜΑ ΘΔΑΛΟΝΙΚΗ ΥΟΛΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΙΑ ΣΡΟΦΙΜΩΝ & ΓΙΑΣΡΟΦΗ ΣΜΗΜΑ ΣΔΥΝΟΛΟΓΙΑ ΣΡΟΦΙΜΩΝ ΠΣΤΥΙΑΚΗ ΔΡΓΑΙΑ Μειέηε Υξόλνπ Απνζηείξσζεο Κνλζέξβαο κε Τπνινγηζηηθή Ρεπζηνδπλακηθή Αζαλαζηάδνπ Βαξβάξα

Διαβάστε περισσότερα

department listing department name αχχουντσ ϕανε βαλικτ δδσϕηασδδη σδηφγ ασκϕηλκ τεχηνιχαλ αλαν ϕουν διξ τεχηνιχαλ ϕοην µαριανι

department listing department name αχχουντσ ϕανε βαλικτ δδσϕηασδδη σδηφγ ασκϕηλκ τεχηνιχαλ αλαν ϕουν διξ τεχηνιχαλ ϕοην µαριανι She selects the option. Jenny starts with the al listing. This has employees listed within She drills down through the employee. The inferred ER sttricture relates this to the redcords in the databasee

Διαβάστε περισσότερα

Technisches Handbuch. Pergola Top Star 120X70. metaform Bescha ungssysteme

Technisches Handbuch. Pergola Top Star 120X70. metaform Bescha ungssysteme 02 Technisches Handbuch Pergola Top Star 120X70 Exklusiv von Metaform ΑVΕΕ entworfen, ist es die Innova on bei der professionellen Bescha ung, denn das wegweisende Hebesystem erlaubt es Ihnen, sie an jeder

Διαβάστε περισσότερα

UDZ Swirl diffuser. Product facts. Quick-selection. Swirl diffuser UDZ. Product code example:

UDZ Swirl diffuser. Product facts. Quick-selection. Swirl diffuser UDZ. Product code example: UDZ Swirl diffuser Swirl diffuser UDZ, which is intended for installation in a ventilation duct, can be used in premises with a large volume, for example factory premises, storage areas, superstores, halls,

Διαβάστε περισσότερα

Η ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΑΙΘΑΝΟΛΗΣ,ΤΗΣ ΜΕΘΑΝΟΛΗΣ ΚΑΙ ΤΟΥ ΑΙΘΥΛΟΤΡΙΤΟΤΑΓΗ ΒΟΥΤΥΛΑΙΘΕΡΑ ΣΤΙΣ ΙΔΙΟΤΗΤΕΣ ΤΗΣ ΒΕΝΖΙΝΗΣ

Η ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΑΙΘΑΝΟΛΗΣ,ΤΗΣ ΜΕΘΑΝΟΛΗΣ ΚΑΙ ΤΟΥ ΑΙΘΥΛΟΤΡΙΤΟΤΑΓΗ ΒΟΥΤΥΛΑΙΘΕΡΑ ΣΤΙΣ ΙΔΙΟΤΗΤΕΣ ΤΗΣ ΒΕΝΖΙΝΗΣ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΕΚΠΑΙΔΕΥΤΙΚΟ ΙΔΡΥΜΑ ΚΑΒΑΛΑΣ ΣΧΟΛΗ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΩΝ ΕΦΑΡΜΟΓΩΝ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ Η ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΑΙΘΑΝΟΛΗΣ,ΤΗΣ ΜΕΘΑΝΟΛΗΣ ΚΑΙ ΤΟΥ ΑΙΘΥΛΟΤΡΙΤΟΤΑΓΗ ΒΟΥΤΥΛΑΙΘΕΡΑ ΣΤΙΣ ΙΔΙΟΤΗΤΕΣ ΤΗΣ ΒΕΝΖΙΝΗΣ ΟΝΟΜΑΤΕΠΩΝΥΜΟ

Διαβάστε περισσότερα

(1) Describe the process by which mercury atoms become excited in a fluorescent tube (3)

(1) Describe the process by which mercury atoms become excited in a fluorescent tube (3) Q1. (a) A fluorescent tube is filled with mercury vapour at low pressure. In order to emit electromagnetic radiation the mercury atoms must first be excited. (i) What is meant by an excited atom? (1) (ii)

Διαβάστε περισσότερα

Second Order Partial Differential Equations

Second Order Partial Differential Equations Chapter 7 Second Order Partial Differential Equations 7.1 Introduction A second order linear PDE in two independent variables (x, y Ω can be written as A(x, y u x + B(x, y u xy + C(x, y u u u + D(x, y

Διαβάστε περισσότερα

Capacitors - Capacitance, Charge and Potential Difference

Capacitors - Capacitance, Charge and Potential Difference Capacitors - Capacitance, Charge and Potential Difference Capacitors store electric charge. This ability to store electric charge is known as capacitance. A simple capacitor consists of 2 parallel metal

Διαβάστε περισσότερα

Precision Metal Film Fixed Resistor Axial Leaded

Precision Metal Film Fixed Resistor Axial Leaded Features EIA standard colour-coding Non-Flame type available Low noise and voltage coefficient Low temperature coefficient range Wide precision range in small package Too low or too high ohmic value can

Διαβάστε περισσότερα

ΚΡΑΤΙΚΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΓΛΩΣΣΟΜΑΘΕΙΑΣ HÖRVERSTEHEN. Mai 2012

ΚΡΑΤΙΚΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΓΛΩΣΣΟΜΑΘΕΙΑΣ HÖRVERSTEHEN. Mai 2012 ΥΠΟΥΡΓΕΙΟ ΠΑΙΔΕΙΑΣ ΔΙΑ ΒΙΟΥ ΜΑΘΗΣΗΣ ΚΑΙ ΘΡΗΣΚΕΥΜΑΤΩΝ ΚΡΑΤΙΚΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΤΙΚΟ ΓΛΩΣΣΟΜΑΘΕΙΑΣ Griechisches Ministerium für Bildung, Lebenslanges Lernen und Religionsangelegenheiten Griechisches Staatszertifikat

Διαβάστε περισσότερα

Αξιολόγηση των Φασματικού Διαχωρισμού στην Διάκριση Διαφορετικών Τύπων Εδάφους ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ. Σπίγγος Γεώργιος

Αξιολόγηση των Φασματικού Διαχωρισμού στην Διάκριση Διαφορετικών Τύπων Εδάφους ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ. Σπίγγος Γεώργιος ΕΘΝΙΚΟ ΜΕΤΣΟΒΙΟ ΠΟΛΥΤΕΧΝΕΙΟ ΤΜΗΜΑ ΑΓΡΟΝΟΜΩΝ ΤΟΠΟΓΡΑΦΩΝ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΤΟΜΕΑΣ ΤΟΠΟΓΡΑΦΙΑΣ-ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΤΗΛΕΠΙΣΚΟΠΗΣΗΣ Αξιολόγηση των Φασματικού Διαχωρισμού στην Διάκριση Διαφορετικών Τύπων Εδάφους ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ

Διαβάστε περισσότερα

CRASH COURSE IN PRECALCULUS

CRASH COURSE IN PRECALCULUS CRASH COURSE IN PRECALCULUS Shiah-Sen Wang The graphs are prepared by Chien-Lun Lai Based on : Precalculus: Mathematics for Calculus by J. Stuwart, L. Redin & S. Watson, 6th edition, 01, Brooks/Cole Chapter

Διαβάστε περισσότερα

( ) 2 and compare to M.

( ) 2 and compare to M. Problems and Solutions for Section 4.2 4.9 through 4.33) 4.9 Calculate the square root of the matrix 3!0 M!0 8 Hint: Let M / 2 a!b ; calculate M / 2!b c ) 2 and compare to M. Solution: Given: 3!0 M!0 8

Διαβάστε περισσότερα

Thin Film Chip Resistors

Thin Film Chip Resistors FEATURES PRECISE TOLERANCE AND TEMPERATURE COEFFICIENT EIA STANDARD CASE SIZES (0201 ~ 2512) LOW NOISE, THIN FILM (NiCr) CONSTRUCTION REFLOW SOLDERABLE (Pb FREE TERMINATION FINISH) Type Size EIA PowerRating

Διαβάστε περισσότερα

Section 1: Listening and responding. Presenter: Niki Farfara MGTAV VCE Seminar 7 August 2016

Section 1: Listening and responding. Presenter: Niki Farfara MGTAV VCE Seminar 7 August 2016 Section 1: Listening and responding Presenter: Niki Farfara MGTAV VCE Seminar 7 August 2016 Section 1: Listening and responding Section 1: Listening and Responding/ Aκουστική εξέταση Στο πρώτο μέρος της

Διαβάστε περισσότερα

Multilayer Ceramic Chip Capacitors

Multilayer Ceramic Chip Capacitors FEATURES X7R, X6S, X5R AND Y5V DIELECTRICS HIGH CAPACITANCE DENSITY ULTRA LOW ESR & ESL EXCELLENT MECHANICAL STRENGTH NICKEL BARRIER TERMINATIONS RoHS COMPLIANT SAC SOLDER COMPATIBLE* PART NUMBER SYSTEM

Διαβάστε περισσότερα

Εγκατάσταση λογισμικού και αναβάθμιση συσκευής Device software installation and software upgrade

Εγκατάσταση λογισμικού και αναβάθμιση συσκευής Device software installation and software upgrade Για να ελέγξετε το λογισμικό που έχει τώρα η συσκευή κάντε κλικ Menu > Options > Device > About Device Versions. Στο πιο κάτω παράδειγμα η συσκευή έχει έκδοση λογισμικού 6.0.0.546 με πλατφόρμα 6.6.0.207.

Διαβάστε περισσότερα

IGFBP-3-EASIA KAP1171

IGFBP-3-EASIA KAP1171 IGFBP3EASIA KAP1171 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 090505/2 en Read entire protocol before use. IGFBP3EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in

Διαβάστε περισσότερα