25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971

Μέγεθος: px
Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971"

Transcript

1 25OHVitamin D total RIACT KIP1971 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B14 ivelles Belgium

2 : 11324/2

3 en Read entire protocol before use. 25OH Vitamin D total RIACT I. ITEDED USE Radioimmunoassay for the in vitro quantitative measurement of 25hydroxyvitamin D2 and D3 (25 OHD2 and 25OHD3 ) in serum or heparin plasma. II. GEERAL IFORMATIO A. Proprietary name : DIAsource 25OH Vitamin D total RIACT Kit B. Catalog number : KIP 1971 : 96 tests C. Manufactured by : DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8, B14 ivelles, Belgium. III. CLIICAL BACKGROUD For technical assistance or ordering information contact : Tel : +32 () Fax : +32 () Vitamin D is the generic term used to designate Vitamin D2 or ergocalciferol and Vitamin D3 or cholecalciferol. Humans naturally produce Vitamin D3 when the skin is exposed to ultraviolet sun rays. In the liver mainly, Vitamin D3 is metabolised into 25Hydroxyvitamin D3 (25 OH D3) which is the main form of Vitamin D circulating in the body. 25 OH D3 is a precursor for other Vitamin D metabolites and has also a limited activity by itself. The most active derivative is 1,25Hydroxyvitamin D3, produced in the kidney (or placenta) by 1 α hydroxylation of 25OHD3. 25OHVitamin D stimulates the intestinal absorption of both calcium and phosphorus and also bone resorption and mineralisation. 25OH Vitamin D might also be active in other tissues responsible for calcium transport (placenta, kidney, mammary gland ) and endocrine gland (parathyroid glands, beta cells ). Vitamin D3 and Vitamin D2 are also available by ingestion through food or dietary supplementation. As Vitamin D2 is metabolised in a similar way to vitamin D3, both contribute to the overall Vitamin D status of an individual. It is the reason why it is very important to measure both forms of 25 OH Vitamin D equally for a correct diagnosis of Vitamin D deficiency, insufficiency or intoxication. Vitamin D deficiency is an important risk factor for rickets, osteomalacia, senile osteoporosis, cancer and abnormal pregnancy outcomes. The measurement of both 25 OH Vitamin D forms is also required to determine the cause of abnormal serum calcium concentrations in patients. Vitamin D intoxication has been shown to cause kidney and tissue damages..

4 IV. PRICIPLES OF THE METHOD At first calibrators, controls and samples (serum or heparin plasma) are pretreated to release 25OH Vitamin D 2 and 25OH Vitamin D 3 from Vitamin D Binding Protein (DBP). A fixed amount of 125 I labelled 25OH Vitamin D competes with the 25OH Vitamin D 2 and 25OH Vitamin D 3 from treated samples, controls or calibrators, for a fixed amount of a specific monoclonal antibody sites immobilized to the lower and inner surface of plastic tubes. After 2 hours incubation at room temperature on a tube shaker, an aspiration step terminates the competition reaction. The tubes are then washed twice and aspirated again. A calibration curve is plotted and the total 25 OH Vitamin D (D 2 and D 3) concentrations of the samples are determined by dose interpolation from the calibration curve. V. REAGETS PROVIDED Reagents 96 Test Kit Colour Code Tubes coated with Mab anti 25OH Vit D2 and 25OH Vit D3 Reconstitution 2 x 48 green Ready for use 3. Vortex mixer 4. Magnetic stirrer 5. Tube shaker (3 to 7 rpm) 6. Glass tubes (12x 75 mm) or polypropylene tubes (for example: Falcon 35263) for pretreatment step. 7. A water bath at 37 C 8. 5 ml automatic syringe (Cornwall type) for washing 9. Aspiration system 1. Any gamma counter capable of measuring 125 I may be used (minimal yield 7%). VII. REAGET PREPARATIO A. Calibrators : Reconstitute the calibrators with.5 ml distilled water B. Controls: Reconstitute the controls with.5 ml distilled water. C. Tracer: Reconstitute the lyophilized tracer with 6 ml of tracer buffer. D. Pretreatment Solution :Reconstitute extemporaneously the lyophilized pretreatment solution with 5 ml distilled water. E. Working Wash solution: Prepare an adequate volume of Working Wash solution by adding 69 volumes of distilled water to 1 volume of Wash solution (7x). Use a magnetic stirrer to homogenize. Discard unused Working Wash solution at the end of the day. VIII. STORAGE AD EXPIRATIO DATIG OF REAGETS Ag 125 Iodine labelled 25OH Vit D (HPLC grade). CAL Calibrator : horse serum and phosphate buffer with gentamycin. CAL 125 I Calibrators 15 in horse serum and phosphate buffer with gentamycin (see exact values on vial labels) 16 kbq lyophilised lyophilised 5 vials lyophilised red yellow yellow Add 6 ml of Tracer Buffer Add.5 ml distilled water Add.5 ml distilled water Before opening or reconstitution, all kits components are stable until the expiry date, indicated on the label, if kept at 2 to 8 C. After reconstitution, calibrators and controls are stable for one week at 2 to 8 C. For longer storage periods, aliquots should be made and kept at 2 C for maximum 3 months. Avoid subsequent freezethaw cycles. Freshly prepared Working Wash solution should be used on the same day. After its first use, tracer is stable until expiry date, if kept in the original wellclosed vial at 2 C (with one thawing). After its first use, pretreatment solution is stable 2 months at 2 C(with one thawing) Alterations in physical appearance of kit reagents may indicate instability or deterioration. IX. SPECIME COLLECTIO AD PREPARATIO WASH SOL COC Wash solution (TRISHCl) COTROL Controls = 2 in human serum with thymol 1 ml 2 vials lyophilised brown silver Dilute 7 x with distilled water (use a magnetic stirrer). Add.5 ml distilled water Don t use EDTA plasma. This kit is suitable for serum and heparin plasma samples. A correlation has been established between 23 serum and heparin plasma samples from same patients: Plasma =.997 Serum, R =.91. Serum and heparin samples must be kept at 28 C. If the test is not run within 24 hrs, samples storage at 2 C is recommended. Avoid subsequent freezethaw cycles. TRACER Tracer Buffer with casein and gentamycin PRE Pretreatment Solution with Proclin 3 (.1 %) PRE Pretreatment Buffer with sodium azide (<.1%) DIL SOL SOL Dilution Solution with sodium azide (<.1%) 7 ml lyophilised 2 ml ml red green blue black Ready for use Add 5 ml distilled distilled water Ready for use Ready for use ote : Use Calibrator for dilution of samples with values above the highest calibrator before pretreatment step. o international reference material is available. X. PROCEDURE A. Handling notes Do not use the kit or components beyond expiry date. Do not mix materials from different kit lots. Bring all the reagents to room temperature prior to use. Thoroughly mix all reagents and samples by gentle agitation or swirling. Use a clean disposable pipette tip for addition of each different reagent and sample in order to avoid crosscontamination. High precision pipettes or automated pipetting equipment will improve the precision. Prepare a calibration curve for each run, do not use data from previous runs. B. Procedure B1 Pretreatment : 1. Label one glass tube or one polypropylene tube for each calibrator, control and sample. 2. Briefly vortex calibrators, controls and samples and dispense µl of each into the respective tubes. 3. Dispense µl of pretreatment solution into each tube. 4. Dispense 2 µl of pretreatment buffer into each tube. 5. Briefly vortex tubes, cover them and incubate 3 minutes at 37 C in a water bath.! Be careful incubation volume must be completely immersed during this step.! Respect incubation time: 3 35 minutes is necessary.! Respect incubation temperature: 37 4 C is necessary. 6. Dispense 1 ml of Dilution Solution into each tube and vortex briefly. VI. SUPPLIES OT PROVIDED B2 Incubation : The following material is required but not provided in the kit: 1. Distilled water 2. Pipettes for delivery of: µl, μl, 2µl, μl and 1 ml (the use of accurate pipettes with disposable plastic tips is recommended) 1. Label coated tubes in duplicate for each calibrator, control and sample. For the determination of total counts, label 2 normal tubes. 2. Dispense µl of pretreated calibrator or control or sample

5 3. Dispense µl of 125 Iodine labelled 25OH Vitamin D into each tube, including the uncoated tubes for total counts. 4. Shake the tube rack gently by hand to liberate any trapped air bubbles. 5. Incubate for 2 hours at room temperature on a tube shaker (3 to 7 rpm) 6. Aspirate the content of each tube (except total counts). Be sure that the tip of the aspirator reaches the bottom of the coated tube in order to remove all the liquid. 7. Wash tubes with 2 ml Working Wash solution (except total counts) and aspirate. Avoid foaming during the addition of the Working Wash solution. 8. Wash tubes again with 2 ml Wash solution (except total counts) and aspirate. 9. Let the tubes stand upright for two minutes and aspirate the remaining drop of liquid. 1. Count tubes in a gamma counter for 6 seconds. C. Precision ITRAASSAY Sample <X> ± SD A B ± ± 2 C.V SD : Standard Deviation; CV: Coefficient of variation D. Accuracy ITERASSAY Sample <X> ± SD A B ± ± 3.5 C.V XI. CALCULATIO OF RESULTS 1. Calculate the mean of duplicate determinations. 2. Calculate the bound radioactivity as a percentage of the binding determined at the zero calibrator point () according to the following formula : Added 25OHVit.D 3 RECOVERY TEST Recovery Counts (Calibrator or sample) B/B = x Counts (Zero Calibrator ) 3. Using a 3 cycle semilogarithmic or logitlog graph paper, plot the (B/B) values for each calibrator point as a function of 25OH vitamin D concentration of each calibrator point. Reject obvious outliers. 4. Computer assisted methods can also be used to construct the calibration curve. If automatic result processing is used, a 4parameter logistic function curve fitting is recommended. 5. By interpolation of the sample (B/B ) values, determine the total 25OH vitamin D concentrations of the samples from the calibration curve. 6. For each assay, the percentage of total tracer bound in the absence of unlabelled 25 OH vitamin D (B/T) must be checked. 25 Added 25OHVit.D Recovery XII. TYPICAL DATA DILUTIO TEST The following data are for illustration only and should never be used instead of the real time calibration curve. Sample dilution Theoretical concent. Measured concent. Recovery 25OH Vitamin D total cpm B/Bo Total count /1 1/2 1/4 1/ Calibrator. ng/ml 2 ng/ml 6 ng/ml 15 ng/ml 55 ng/ml 12 ng/ml /1 1/2 1/4 1/ ote : 1 ng/ml = 2.5 pmol/ml XIII. PERFORMACE AD LIMITATIOS A. Detection Limit Twenty zero calibrators were assayed along with a set of other calibrators. The detection limit, defined as the apparent 25OHVitamin D total concentration two standard deviations below the average counts at zero binding, was.4ng/ml. B. Specificity The percentage of cross reaction estimated by comparison of the concentration yielding a % inhibition are respectively : E. Time delay between last calibrator and sample dispensing As shown hereafter, assay results remain accurate even when a sample is dispensed 1 and 2 minutes after the calibrator has been added to the coated tubes. Sample 1 Sample 2 TIME DELAY ' 1' 2' Compound CrossReactivity 25OHVitamin D 3 25OHVitamin D 2 1,25(OH) 2Vitamin.D 3 1,25(OH) 2Vitamin.D 2 Vitamin D3 Vitamin D2 24,25(OH) 2Vitamin.D <.3 <.3 The assay performance is not affected by hemolysis (5 g/l hemoglobin tested), bilirubinemia (.25 g/l bilirubin tested) or triglycerides (5 g/l tested).

6 XIV. EXPECTED VALUES Dietary intake, race, season and age are known to affect the normal levels of 25OH Vitamin D3. The expected values given hereafter should not be considered as absolute. DIAsource evaluated serum collected from 39 male and 4 female, healthy according to Ca, PTH and albumin values, from Western Europe. The age of the volunteers fell within the range of years. Samples were collected during the months of December 21 and January 211. The mean for the population (n = 79) was 12.9 ng/ml, ranging from 6.6 to 24.5 ng/ml (based on 2.5 % to 97.5 % percentiles). Each laboratory should establish its own range based on their local population. 7. HEAEY R.P. (21) Defining deficiency of vitamin D. Clinical Laboratory International, October 21, vol.34 : HOLICK M.F. (27) Vitamin D deficiency.. Engl. J. Med., 357: TAHA. M., VIETH R.(21) The problem of an optimal target level for 25Hydroxyvitamin D, the test for vitamin D nutritional status. Clinical Laboratory International, ovember 21, vol.34 : 283 Recent literature has suggested the following ranges for the classification of 25 OH Vitamin D status: Deficiency: 1 ng/ml; Insufficiency: 13 ng/ml; Sufficiency: 3 to 1 ng/ml; Toxicity: >1 ng/ml. XV. SUMMARY OF THE PROTOCOL XV. PRECAUTIOS AD WARIGS Safety For in vitro diagnostic use only. This kit contains 125 I (halflife: 6 days), emitting ionizing X (28 kev) and γ (35.5 kev) radiations. This radioactive product can be transferred to and used only by authorized persons; purchase, storage, use and exchange of radioactive products are subject to the legislation of the end user's country. In no case the product must be administered to humans or animals. All radioactive handling should be executed in a designated area. away from regular passage. A logbook for receipt and storage of radioactive materials must be kept in the lab. Laboratory equipment and glassware, which could be contaminated with radioactive substances, should be segregated to prevent cross contamination of different radioisotopes. Any radioactive spills must be cleaned immediately in accordance with the radiation safety procedures. The radioactive waste must be disposed of following the local regulations and guidelines of the authorities holding jurisdiction over the laboratory. Adherence to the basic rules of radiation safety provides adequate protection. The human blood components included in this kit have been tested by European approved and/or FDA approved methods and found negative for HbsAg, anti HCV, antihiv1 and 2. o known method can offer complete assurance that human blood derivatives will not transmit hepatitis, AIDS or other infections. Therefore, handling of reagents, serum or plasma specimens should be in accordance with local safety procedures. All animal products and derivatives have been collected from healthy animals. Bovine components originate from countries where BSE has not been reported. evertheless, components containing animal substances should be treated as potentially infectious. Avoid any skin contact with reagents (sodium azide as preservative). Azide in this kit may react with lead and copper in the plumbing and in this way form highly explosive metal azides. During the washing step, flush the drain with a large amount of water to prevent azide buildup. Do not smoke, drink, eat or apply cosmetics in the working area. Do not pipette by mouth. Use protective clothing and disposable gloves. XIV. PRECAUTIOS AD WARIGS PRETREATMET (in glass tubes or polypropylene tubes) Samples, controls, calibrators Pretreatment solution Pretreatment buffer Incubation: TOTAL COUTS μl CALIBRATORS μl 2 SAMPLE (S) COTROLS μl 2 Vortex 335 minutes at 374 C in a water bath (incubation volume must be immersed) Dilution Solution ICUBATIO (in coated tubes) Pretreated Calibrators, samples, controls Tracer Incubation Separation Working Wash solution Separation Working Wash solution Vortex 12 minutes at RT on a shaker (3 to 7 rpm) Aspirate 2. ml Aspirate 2. ml Aspirate 1. ZERWEKH J.E. (28) Blood biomarkers of Vitamin D status. Am. J. Clin. utr., 87(suppl):187S91S. Counting Count tubes for 6 seconds 2. HOLICK M.F. (26) Resurrection of Vitamin D deficiency and rickets. J. Clin. Invest., 116: DIAsource Catalogue r : KIP 1971 P.I. umber : 17528/en Revision nr : 11324/1 3. HEAEY R.P. (2) Vitamin D: how much do we need, and how much is too much. Osteoporos. Int., 11: Revision date : DAWSOHUGHES B., HEAEY R.P., HOLICK M.F., LIPS P., MEUIER P.J. (1997) Prevalence of Vitamin D insufficiency in an adult normal population. Osteoporos. Int., 7: BISCHOFFFERRARI H.A., GIOVAUCCI E., WILLETT W.C., DIETRICH T., DAWSOHUGHES B. (26) Estimation of optimal serum concentrations of 25hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am. J. Clin. utr., 84: HOLICK M.F(24) Sunlight and vitamin D for bone health and prevention of autoimmune diseases, cancers and cardiovascular disease. Am. J. Clin. utr., 8:16788S1688S.

7 fr Lire entièrement le protocole avant utilisation. 25OH Vitamin D total RIACT I. BUT DU DOSAGE Trousse de dosage radioimmunologique pour la mesure quantitative in vitro de la 25hydroxyvitamine D2 et D3 (25OHD2 et 25OHD3) dans le sérum ou le plasma hépariné. II. IFORMATIOS GÉÉRALES A. om du produit: DIAsource 25OH Vitamin D total RiaCT Kit B. uméro de catalogue: KIP1971 : 96 tests C. Fabriqué par: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8, B14 ivelles, Belgique. III. COTEXTE CLIIQUE Pour une assistance technique ou une information sur une commande: Tel : +32 () Fax : +32 () La vitamine D est le terme générique utilisé pour désigner la vitamine D2, ou ergocalciférol, et la vitamine D3, ou cholécalciférol. L'homme produit naturellement de la vitamine D lorsque sa peau est exposée aux ultraviolets des rayons solaires. La vitamine D3 est métabolisée, principalement dans le foie, en 25hydroxyvitamine D3 (25 OH D3) qui est la forme principale de la vitamine D circulante dans le corps. La 25 OH D3 est un précurseur d'autres métabolites de la vitamine D et possède en ellemême une activité limitée. Le dérivé le plus actif est la 1,25hydroxyvitamine D3 produite par le rein (ou le placenta) par 1αhydroxylation de la 25OHD3. La 25OHvitamine D3 stimule l'absorption intestinale à la fois du calcium et du phosphore ainsi que la résorption et la minéralisation de l'os. La 25OH vitamine D peut également être active sur d'autres tissus responsables du transport du calcium (placenta, rein, glande mammaire, ) et sur les glandes endocrines (glandes parathyroïdes, cellules bêta, ). Une autre source de vitamine D3 et de vitamine D2 est l'alimentation ou la prise de suppléments diététiques. La vitamine D2 étant métabolisée par une voie similaire à la vitamine D3, les deux formes de la vitamine contribuent au statut général en vitamine D d'un individu. C'est la raison pour laquelle il est très important de doser les deux formes de la 25OH vitamine D pour un faire diagnostic correct de carence, insuffisance ou intoxication en vitamine D. La carence en vitamine D est un facteur de risque important de rachitisme, ostéomalacie, ostéoporose sénile, cancer et mauvaise évolution de la grossesse. Le dosage des deux formes de la vitamine D est aussi requis pour déterminer la cause d'une concentration anormale de calcium dans le sérum. Il a été démontré qu'une intoxication en vitamine D provoque des dommages aux reins et à d'autres tissus.

8 IV. PRICIPE DU DOSAGE Les calibrateurs, contrôles et échantillons (sérum ou plasma hépariné) sont tout d'abord prétraités pour que la protéine de liaison de la vitamine D (DBP) relâche la 25OH vitamine D 2 et la 25OH vitamine D 3. Une quantité fixe de 25OH vitamine D marquée à l'i 125 entre en compétition avec la 25OH vitamine D 2 et la 25OH vitamine D 3 des échantillons, contrôles et calibrateurs traités pour une quantité fixe de sites d'anticorps monoclonaux spécifiques immobilisés sur la surface interne et le bas de tubes en plastique. Après une incubation de 2 heures à température ambiante sur un agitateur pour tubes, une étape d'aspiration termine la réaction de compétition. Les tubes sont ensuite lavés deux fois et à nouveau aspirés. Une courbe de calibration est tracée et les concentrations en 25OH vitamine D totale (D 2 et D 3) des échantillons sont déterminées par interpolation de la concentration sur la courbe de calibration. V. RÉACTIFS FOURIS Réactifs Quantité Code Couleur 25OH Vit D marquée à l'i 125 (de grade HPLC). Calibrateur : sérum de cheval et tampon phosphate avec de la gentamycine Calibrateurs 15 dans du sérum de cheval et tampon phosphate avec de la gentamycine (cf. valeurs exactes sur chaque flacon) WASH SOL COC Solution de Lavage (TrisHCl) Contrôles = 2 dans du sérum humain et thymol TRACER Tampon traceur avec de la caséine et de la gentamycine PRE SOL Solution de prétraitement avec du ProClin 3 (,1 %) PRE Tampon de prétraitement avec de l'azoture de sodium (<,1%) DIL SOL Solution de dilution avec de l'azoture de sodium (<,1%) Reconstitution 2 x 48 Vert Prêt à l emploi 1 flacon lyophil. 16 kbq 1 flacon lyophil. 5 flacons lyophil. 1 flacon 1 ml 2 flacons lyophil. 1 flacon 7 ml 1 flacon lyophil. 1 flacon 2 ml 1 flacon ml Rouge Jaune Jaune Brun Argent Rouge Vert Bleu oir Ajouter 6 ml de tampon traceur Ajouter,5 ml d eau distillée Ajouter,5 ml d eau distillée Diluer 7x avec de l eau distillée (utiliser un agitateur magnétique). Ajouter,5 ml d eau distillée Prêt à l emploi Ajouter 5 ml d eau distillée Prêt à l emploi Prêt à l emploi ote : Utiliser le calibrateur zéro pour la dilution des échantillons avec des valeurs audessus du calibrateur le plus haut avant l'étape de prétraitement. Des références internationales ne sont pas disponibles. VI. Tubes tapissés avec l anti 25OHVitamine D 2 et 25OHVitamine D 3 (anticorps monoclonaux) Ag CAL CAL COTROL 125 I MATÉRIEL O FOURI Le matériel mentionné cidessous est requis mais non fourni avec la trousse: 1. Eau distillée 2. Pipettes pour distribuer: μl, μl, 2 μl, µl et 1 ml (il est recommandé d'utiliser des pipettes de précision avec des pointes en plastique à usage unique) 3. Agitateur vortex 4. Agitateur magnétique 5. Agitateur pour tubes (3 à 7 tpm) 6. Tubes en verre (12 x 75 mm) ou en polypropylène (par exemple: Falcon 35263) pour l'étape de prétraitement. 7. Un bainmarie à 37 C 8. Seringue automatique de 5 ml (type Cornwall) pour les lavages 9. Systèmes d aspiration et de lavage. 1. Tout compteur gamma capable de mesurer l 125 I peut être utilisé (rendement minimum 7%). VII. PRÉPARATIO DES RÉACTIFS A. Calibrateurs : Reconstituer les calibrateurs avec,5 ml d eau distillée. B. Contrôles : Reconstituer les contrôles avec,5 ml d eau distillée. C. Traceur : Reconstituer le traceur lyophilisé avec 6 ml de tampon traceur. D. Solution de prétraitement: Reconstituter en extemporané la solution de prétraitement lyophilisée avec 5 ml d'eau distillée. E. Solution de lavage: Préparer un volume adéquat de Solution de Lavage en ajoutant 69 volumes d eau distillée à 1 volume de Solution de Lavage (7x). Utiliser un agitateur magnétique pour homogénéiser. Eliminer la Solution de Lavage non utilisée à la fin de la journée. VIII. STOCKAGE ET DATE D EXPIRATIO DES RÉACTIFS Avant l ouverture ou la reconstitution, tous les composants de la trousse sont stables jusqu à la date d expiration, indiquée sur l étiquette, si la trousse est conservée entre 2 et 8 C. Après reconstitution, les calibrateurs et les contrôles sont stables pendant une semaine entre 2 et 8 C. Pour de plus longues périodes de stockage, des aliquotes devront être réalisées et cellesci seront gardées à 2 C pendant 3 mois maximum. Eviter des cycles de congélation et décongélation successifs. La Solution de Lavage préparée doit être utilisée le jour même. Après sa première utilisation, le traceur est stable jusqu'à la date d'expiration s'il est conservé dans le flacon d'origine bien fermé à 2 C (avec une décongélation). Après sa première utilisation, la solution de prétraitement est stable pendant 2 mois à 2 C (avec une décongélation). Des altérations dans l apparence physique des réactifs de la trousse peuvent indiquer une instabilité ou une détérioration. IX. PRÉPARATIO ET STABILITÉ DE L ÉCHATILLO e pas utiliser de plasma sur EDTA. Cette trousse convient pour des échantillons de sérum et de plasma hépariné. Une corrélation a été établie entre 23 échantillons de sérum et de plasma hépariné de certains patients: plasma =,997 sérum, R =,91. Les échantillons de sérum et de plasma héparinés doivent être gardés entre 2 et 8 C. Si le test n est pas réalisé dans les 24 heures, un stockage à 2 C est recommandé Eviter des cycles de congélation et décongélation successifs. X. MODE OPÉRATOIRE A. otes de manipulation e pas utiliser la trousse ou ses composants après avoir dépassé la date d expiration. e pas mélanger du matériel provenant de trousses de lots différents. Mettre tous les réactifs à température ambiante avant utilisation. Mélanger tous les réactifs et les échantillons sous agitation douce. Pour éviter toute contamination croisée, utiliser une nouvelle pointe de pipette pour l addition de chaque réactif et échantillon. Des pipettes de haute précision ou un équipement de pipetage automatique permettent d augmenter la précision. Respecter les temps d incubation. Préparer une courbe de calibration pour chaque nouvelle série d expériences, ne pas utiliser les données d expériences précédentes. B. Mode opératoire B1 Prétraitement : 1. Étiqueter un tube en verre ou en polypropylène pour chacun des calibrateurs, contrôles et échantillons. 2. Agiter brièvement au vortex les calibrateurs, contrôles et échantillons et distribuer µl de chacun dans leur tube respectif. 3. Distribuer µl de solution de prétraitement dans chacun des tubes. 4. Distribuer 2 µl de tampon de prétraitement dans chacun des tubes. 5. Agiter brièvement au vortex les tubes, les couvrir et incuber 3 minutes à 37 C au bainmarie.! Attention, le volume à incuber doit être complètement immergé pendant cette étape.

9 ! Respecter le temps d'incubation: 3 à 35 minutes sont nécessaires.! Respecter la température d'incubation: 37 à 4 C sont nécessaires. 6. Distribuer 1 ml de solution de dilution dans chacun des tubes et agiter brièvement au vortex. B2 Incubation : 1. Identifier les tubes tapissés fournis dans la trousse, en double pour chaque calibrateur, échantillon, contrôle. Pour la détermination de l activité totale, identifier 2 tubes non tapissés. 2. Distribuer µl de calibrateur ou de contrôle ou d'échantillon prétraités. 3. Ajouter μl de 25OH vitamine D marquée à l'i 125 à chaque tube, ceux pour la détermination de l activité totale inclus. 4. Agiter manuellement et doucement le portetubes pour libérer toutes les bulles d'air emprisonnées. 5. Incuber pendant 2 heures à température ambiante sur un agitateur pour tubes (3 à 7 tpm). 6. Aspirer le contenu de chaque tube (sauf ceux pour la détermination de l activité totale). S'assurer que la pointe de la pipette atteint le fond du tube tapissé afin de retirer tout le liquide. 7. Laver les tubes avec 2 ml de Solution de lavage (sauf ceux pour la détermination de l activité totale) et aspirer. Eviter la formation de mousse pendant l addition de la Solution de Lavage. 8. Laver les tubes avec 2 ml de solution de lavage (sauf ceux pour la détermination de l activité totale) et aspirer. 9. Laisser les tubes droits pendant 2 minutes et aspirer le reste de liquide. 1. Placer les tubes dans un compteur gamma pendant 6 secondes pour quantifier la radioactivité. XI. CALCUL DES RÉSULTATS 1. Calculer la moyenne de chaque détermination réalisée en double. 2. Calculer la capacité de liaison de l essai comme un pourcentage de liaison déterminé au point de calibration () en suivant la formule cidessous : moyenne des cpm (CAL ou échantillon) B/B = x moyenne des cpm (CAL ) 3. Utiliser un 3 cycle semilogarithmic ou un papier graphique logitlog, porter en ordonnée les valeurs exprimées en pourcentage de liaison (B/B) de chaque point de calibration et en abscisse leur concentration respective en 25OH vitamine D, écarter les valeurs aberrantes. 4. Des méthodes informatiques peuvent aussi être utilisées pour construire la courbe de calibration. Si un système d analyse de traitement informatique des données est utilisé, il est recommandé d utiliser la fonction «4 paramètres» du lissage de courbes. 5. L interpolation des valeurs de chaque échantillon (B/B) détermine les concentrations en 25OH vitamine D totale à partir de la courbe d étalonnage. 6. Pour chaque essai, le pourcentage total de traceur lié en absence de 25OH vitamine D non marquée (B/T) doit être vérifié. XII. DOÉES TYPES Les données représentées cidessous sont fournies pour information et ne peuvent jamais être utilisées à la place d une courbe d étalonnage. 25OH Vitamin D total cpm B/Bo Calibrateur Activité totale 45756, ng/ml 2 ng/ml 6 ng/ml 15 ng/ml 55 ng/ml 12 ng/ml ote : 1 ng/ml = 2,5 pmol/ml XIII. PERFORMACE ET LIMITES DU DOSAGE, 81,6 64,5 48,8 22,5 14,4 25OHVitamin D 3 25OHVitamin D 2 1,25(OH) 2Vitamin.D 3 1,25(OH) 2Vitamin.D 2 Vitamin D3 Vitamin D2 24,25(OH) 2Vitamin.D 3 Elément Réactivité Croisée <,3 <,3 La performance de l'analyse n'est pas affectée par l'hémolyse (on a testé 5 g/l d'hémoglobine), la présence de bilirubine (on a testé,25 g/l de bilirubine) ou triglycérides (5 g/l testé). C. Précision A B ITRAESSAI <X> ± SD 14,7 ±,8 42,4 ± 2 C.V. 5,4 4,7 Echantillon Echantillon SD : Déviation Standard; CV: Coefficient de variation D. Exactitude 25OHVit.D 3 ajoutée 25 25OHVit.D 2 ajoutée Dilution 1/1 1/2 1/4 1/8 1/1 1/2 1/4 1/8 25 Concent. théorique 12,8 51,4 25,7 12,9 8,3 4,2 2,1 1, A B TEST DE RECUPÉRATIO TEST DE DILUTIO Concent. mesurée. 12,8 6,1 25,6 12,9 8,3 42, 24,7 1,9 ITERESSAI <X> ± SD 13,8 ± 1,3 38,5 ± 3,5 Récupération Récupération Récupération C.V. E. Délai entre la distribution du dernier calibrateur et celle de l échantillon Comme montré cidessous, les résultats d un essai restent précis même quand un échantillon est distribué 1 ou 2 minutes après que le calibrateur ait été ajouté aux tubes avec l anticorps. DELAI 9,4 9,1 A. Limite de détection Vingt calibrateurs zéro ont été testés en parallèle avec un assortiment d autres calibrateurs. La limite de détection, définie comme la concentration apparente de 25OHVitamine D totale située 2 déviations standards endessous de la moyenne déterminée à la fixation zéro, était de,4 ng/ml. échantillon 1 échantillon 2 ' 1' 2' 13,5 39,5 13,6 39,3 11,7 37,4 B. Spécificité Le pourcentage de réaction croisée estimé par la comparaison de la concentration (indiquant une inhibition de %) est respectivement : XV. VALEURS ATTEDUES

10 L alimentation, la race, la saison et l âge ont une influence sur les taux de 25OH.Vitamin D 3. normaux. Les valeurs attendues reprises cidessous ne doivent pas être considérées comme des valeurs absolues. DIAsource a évalué le sérum de 39 hommes et 4 femmes d'europe de l'ouest ayant des valeurs normales du Ca, de la PTH et de l'albumine. L'âge des volontaires se situait dans la fourchette de 17 à 58 ans. Les échantillons ont été prélevés pendant les mois de décembre 21 et janvier 211. La moyenne pour la population (n = 79) était de 12,9 ng/ml, la fourchette allant de 6,6 à 24,5 ng/ml (basé sur les percentiles 2,5 % à 97,5 %). Tous les laboratoires doivent établir leur fourchette à partir de leur population locale. Une bibliographie récente a suggéré les fourchettes suivantes pour la classification du statut en 25 OH Vitamine D: carence: à 1 ng/ml; insufficience: 1 à 3 ng/ml; normal: 3 à 1 ng/ml; toxicité: >1 ng/ml. Sunlight and vitamin D for bone health and prevention of autoimmune diseases, cancers and cardiovascular disease. Am. J. Clin. utr., 8:16788S1688S. 7. HEAEY R.P. (21) Defining deficiency of vitamin D. Clinical Laboratory International, October 21, vol.34 : HOLICK M.F. (27) Vitamin D deficiency.. Engl. J. Med., 357: TAHA. M., VIETH R.(21) The problem of an optimal target level for 25Hydroxyvitamin D, the test for vitamin D nutritional status. Clinical Laboratory International, ovember 21, vol.34 : 283 XVI. PRÉCAUTIOS ET AVERTISSEMETS XVIII. RÉSUMÉ DU PROTOCOLE Sécurité Pour utilisation en diagnostic in vitro uniquement. Cette trousse contient de l 125 I (demivie: 6 jours), une matière radioactive émettant des rayonnements ionisants X (28 kev) et γ (35,5 kev). Ce produit radioactif peut uniquement être reçu, acheté, possédé ou utilisé par des personnes autorisées; l achat, le stockage, l utilisation et l échange de produits radioactifs sont soumis à la législation du pays de l'utilisateur final. Ce produit ne peut en aucun cas être administré à l homme ou aux animaux. Toutes les manipulations radioactives doivent être exécutées dans un secteur désigné, éloigné de tout passage. Un journal de réception et de stockage des matières radioactives doit être tenu à jour dans le laboratoire. L'équipement de laboratoire et la verrerie, qui pourrait être contaminée avec des substances radioactives, doivent être isolés afin d éviter la contamination croisée de plusieurs isotopes. Toute contamination ou perte de substance radioactive doit être réglée conformément aux procédures de radio sécurité. Les déchets radioactifs doivent être placés de manière à respecter les réglementations en vigueur. L'adhésion aux règles de base de sécurité concernant les radiations procure une protection adéquate. Les composants de sang humain inclus dans ce kit ont été évalués par des méthodes approuvées par l Europe et/ou la FDA et trouvés négatifs pour HBsAg, l antihcv, l antihiv1 et 2. Aucune méthode connue ne peut offrir l'assurance complète que des dérivés de sang humain ne transmettront pas d hépatite, le sida ou toute autre infection. Donc, le traitement des réactifs, du sérum ou des échantillons de plasma devront être conformes aux procédures locales de sécurité. Tous les produits animaux et leurs dérivés ont été collectés d'animaux sains. Les composants bovins proviennent de pays où l ESB n'a pas été détectée. éanmoins, les composants contenant des substances animales devront être traités comme potentiellement infectieux. L azoture de sodium est nocif s il est inhalé, avalé ou en contact avec la peau (l azoture de sodium est utilisé comme agent conservateur). L azoture dans cette trousse pouvant réagir avec le plomb et le cuivre dans les canalisations et donner des composés explosifs, il est nécessaire de nettoyer abondamment à l eau le matériel utilisé. e pas fumer, ni boire, ni manger, ni appliquer de produits cosmétiques dans les laboratoires où des produits radioactifs sont utilisés. e pas pipeter avec la bouche. Utiliser des vêtements protecteurs et des gants à usage unique. PRÉTRAITEMET (dans des tubes en verre ou en polypropylène) Calibrateurs, Échantillons, Contrôles Solution de prétraitement Tampon de prétraitement Incubation ACTIVITÉ TOTALE µl CALIBRA TEURS µl 2 ÉCHATIL LO(S) COTROLE(S) µl 2 Vortex 3 à 35 minutes à 374 C au bainmarie (le volume à incuber doit être immergé) Solution de dilution ICUBATIO (dans les tubes tapissés) Calibrateurs, Échantillons, Contrôles prétraités Traceur Vortex Incubation 2 heures à température ambiante en agitant (3 à 7 TPM). XVII. BIBLIOGRAPHIE 1. ZERWEKH J.E. (28) Blood biomarkers of Vitamin D status. Am. J. Clin. utr., 87(suppl):187S91S. 2. HOLICK M.F. (26) Resurrection of Vitamin D deficiency and rickets. J. Clin. Invest., 116: HEAEY R.P. (2) Vitamin D: how much do we need, and how much is too much. Osteoporos. Int., 11: Séparation Solution de lavage de travail Séparation Solution de lavage de travail Séparation Comptage aspirer 2, aspirer 2, aspirer Temps de comptage des tubes: 6 secondes 4. DAWSOHUGHES B., HEAEY R.P., HOLICK M.F., LIPS P., MEUIER P.J. (1997) Prevalence of Vitamin D insufficiency in an adult normal population. Osteoporos. Int., 7: uméro de catalogue DIAsource : KIP1971 uméro de P.I.: 17528/fr uméro de révision : 11324/1 5. BISCHOFFFERRARI H.A., GIOVAUCCI E., WILLETT W.C., DIETRICH T., DAWSOHUGHES B. (26) Estimation of optimal serum concentrations of 25hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am. J. Clin. utr., 84:1828. Date de révision : HOLICK M.F(24)

11 it Prima di utilizzare il kit leggere attentamente le istruzioni per l uso. 25OH Vitamin D total RIACT I. USO DEL KIT Kit radioimmunologico per la determinazione quantitativa in vitro della 25idrossivitamina D2 e D3 (25OHD2 e 25OHD3) nel siero o nel plasma eparinizzato. II. IFORMAZIOI DI CARATTERE GEERALE A. ome commerciale: DIAsource 25OH Vitamin D total RiaCT Kit B. umero di catalogo: KIP1971 : 96 tests C. Prodotto da: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8, B14 ivelles, Belgio. III. IFORMAZIOI CLIICHE Per informazioni tecniche o su come ordinare il prodotto contattare: Tel : +32 () Fax : +32 () Con il termine Vitamina D si intendono genericamente la Vitamina D2, o ergocalciferolo, e la Vitamina D3, o colecalciferolo. L esposizione della cute ai raggi ultravioletti induce naturalmente la sintesi di Vitamina D3 da parte dell organismo umano. La Vitamina D3 viene metabolizzata, principalmente nel fegato, a 25idrossivitamina D3 (25OHD3), la principale forma di Vitamina D circolante nell organismo. La 25OHD3 è un precursore di altri metaboliti della Vitamina D, oltre ad avere essa stessa un attività limitata. Il suo derivato più attivo è la 1,25idrossivitamina D3, prodotta dal rene (o dalla placenta) in seguito a idrossilazione della 25OHD3 in posizione 1α. La 25OHVitamina D stimola l assorbimento intestinale sia del calcio che del fosforo, oltre al riassorbimento e alla mineralizzazione delle ossa. La 25OHVitamina D può anche essere attiva in altri tessuti responsabili del trasporto del calcio (placenta, rene, ghiandola mammaria, ecc.) e nelle ghiandole endocrine (paratiroidi, beta cellule, ecc.). Le Vitamine D3 e D2 sono assimilabili anche da fonti alimentari e dalla supplementazione con integratori alimentari. Poiché la Vitamina D2 è metabolizzata in modo simile alla Vitamina D3, entrambe queste vitamine contribuiscono allo stato complessivo di Vitamina D nell organismo umano. Questo è il motivo per cui è molto importante misurare ugualmente entrambe le forme di 25OHVitamina D per effettuare una corretta diagnosi di carenza, insufficienza o intossicazione da Vitamina D. La carenza di Vitamina D è un importante fattore di rischio per rachitismo, osteomalacia, osteoporosi senile, cancro ed esiti sfavorevoli di una gravidanza. La misurazione di entrambe le forme di 25OHVitamina D è indispensabile anche quando è necessario determinare la causa di un anomala concentrazione sierica di calcio in un paziente. È stato dimostrato che l intossicazione da Vitamina D causa danni renali e tissutali.

12 IV. PRICIPIO DEL METODO Inizialmente calibratori, controlli e campioni (siero o plasma eparinizzato) vengono pretrattati affinché la 25OHVitamina D 2 e la 25OHVitamina D 3 vengano rilasciate dalla proteina di legame della Vitamina D (DBP). Una quantità fissa di 25OHVitamina D marcata con 125 I compete con le 25OH Vitamine D 2 e D 3 presenti nei campioni, controlli e calibratori trattati, per il legame a un numero definito di siti rappresentati da anticorpi monoclonali specifici immobilizzati sulla superficie inferiore e interna delle provette di plastica. Dopo 2 ore di incubazione a temperature ambiente in un agitatore per provette, la reazione di competizione viene interrotta per aspirazione. Le provette vengono quindi lavate due volte e nuovamente sottoposte ad aspirazione. Si costruisce poi una curva di calibrazione e si calcolano le concentrazioni totali delle 25OH Vitamine D (D 2 e D 3) mediante interpolazione della dose sulla curva di calibrazione. V. REATTIVI FORITI Reattivi Quantità Codice colore 25OHVit D marcata con 125 Iodio (qualità per HPLC). Calibratore : siero di cavallo e tampone fosfato con gentamicina Calibratori 15 in siero di cavallo e tampone fosfato con gentamicina (le concentrazioni esatte dei calibratori sono riportate sulle etichette dei flaconi) WASH SOL COC Tampone di lavaggio (Tris HCl) Controlli. 1 e 2, in siero umano, contenente timolo TRACER Tampone per il marcato con caseina e gentamicina PRE SOL Soluzione di pretrattamento con Proclin 3 (,1%) PRE Tampone di pretrattamento con sodio azide (<,1%) DIL SOL Soluzione di diluizione con sodio azide (<,1%) Volume di ricostituzione 2 x 48 verde Pronte per l uso 1 flacone liofilizzati 16 kbq 1 flacone liofilizzati 5 flaconi liofilizzati 1 flacone 1 ml 2 flaconi liofilizzati 1 flacone 7 ml 1 flacone liofilizzati 1 flacone 2 ml 1 flacone ml rosso giallo giallo bruno argento rosso verde blu nero Aggiungere 6 ml di tampone per il marcato Aggiungere,5 ml di acqua distillata Aggiungere,5 ml di acqua distillata Diluire 7 x con acqua distillata usando un agitatore magnetico Aggiungere,5 ml di acqua distillata Pronto per l uso Aggiungere 5 ml di acqua distillata Pronto per l uso Pronto per l uso ota: Utilizzare il calibratore per diluire i campioni con valori superiori a quelli del calibratore maggiore prima della fase di pretrattamento. on è disponibile alcun materiale di riferimento internazionale. VI. Provette sensibilizzate con anticorpo monoclonale anti 25OHVitamina.D 2 e anti 25OHVitamina.D 3 Ag CAL CAL COTROL 125 I REATTIVI O FORITI Il seguente materiale è richiesto per il dosaggio ma non è fornito nel kit: 1. Acqua distillata 2. Pipette per dispensare μl, μl, 2 μl, µl e 1 ml (si raccomanda l uso di pipette accurate con puntali di plastica monouso). 3. Agitatore tipo vortex 4. Agitatore magnetico 5. Agitatore per provette (da 3 a 7 rpm) 6. Provette di vetro (12 x 75 mm) o di polipropilene (ad es.: Falcon 35263) per la fase di pretrattamento. 7. Un bagno termostatato a 37 C 8. Pipetta a ripetizione automatica 5 ml per i lavaggi 9. Dispositivo di aspirazione e lavaggio. 1. Contatore gamma con finestra per 125 I (efficienza minima 7%). VII. PREPARAZIOE DEI REATTIVI A. Calibratore: Ricostituire i calibratori con,5 ml di acqua distillata. B. Controlli: Ricostituire i controlli con,5 ml di acqua distillata. C. Marcato : Ricostituire il marcato liofilizzato con 6 ml di tampone per il marcato. D. Soluzione di pretrattamento: la soluzione di pretrattamento va ricostituita al momento con 5 ml di acqua distillata. E. Soluzione di lavoro del tampone di lavaggio: Preparare la quantità necessaria di soluzione di lavoro del tampone di lavaggio aggiungendo 69 parti di acqua distillata ad una parte di tampone di lavaggio concentrato (7 x). Usare un agitatore magnetico per rendere la soluzione omogenea. La soluzione di lavoro va scartata al termine della giornata. VIII. COSERVAZIOE E SCADEZA DEI REATTIVI I reattivi non utilizzati sono stabili a 28 C fino alla data riportata su ciascuna etichetta. Dopo ricostituzione, calibratore e controlli sono stabili 1 settimana a 28 C e, suddivisi in aliquote a 2 C, per periodi più lunghi, fino a un massimo di 3 mesi. Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento. La soluzione di lavoro del tampone di lavaggio deve essere preparata fresca ogni volta e usata nello stesso giorno della preparazione. Dopo il primo utilizzo, il marcato è stabile fino alla data di scadenza, se mantenuto a 2 C nel suo flacone originale ben chiuso (un solo scongelamento). Dopo il primo utilizzo, la soluzione di pretrattamento è stabile per 2 mesi a 2 C (un solo scongelamento). Alterazioni dell aspetto fisico dei reattivi possono indicare una loro instabilità o deterioramento. IX. RACCOLTA E PREPARAZIOE DEI CAMPIOI on usare plasma con EDTA. Questo kit è adatto per campioni di siero e di plasma eparinizzato. È stata stabilita una correlazione tra 23 campioni di siero e di plasma eparinizzato ottenuti dagli stessi pazienti: plasma =,997 siero, R =,91. Conservare i campioni di siero e di plasma eparinizzato a 28 C. Se non si desidera eseguire il dosaggio entro 24 ore dal prelievo, si raccomanda di conservare i campioni a 2 C. Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento X. METODO DEL DOSAGGIO A. Avvertenze generali on usare il kit o suoi componenti oltre la data di scadenza. on mescolare reattivi di lotti diversi. Prima dell uso portare tutti i reattivi a temperatura ambiente. Mescolare delicatamente i campioni per inversione o rotazione. Per evitare crosscontaminazioni, cambiare il puntale della pipetta ogni volta che si usi un nuovo reattivo o campione. L uso di pipette ben tarate e ripetibili o di sistemi di pipettamento automatici migliora la precisione del dosaggio. Rispettare i tempi di incubazione. Allestire una curva di taratura per ogni seduta analitica, in quanto non è possibile utilizzare per un dosaggio curve di taratura di sedute analitiche precedenti. B. Metodo del dosaggio B1 Pretrattamento : 1. Etichettare una provetta di vetro o di polipropilene per ciascun calibratore, controllo e campione. 2. Vortexare brevemente calibratori, controlli e campioni e distribuire µl di ognuno di essi nella rispettiva provetta. 3. Distribuire µl di soluzione di pretrattamento in ogni provetta. 4. Distribuire 2 µl di tampone di pretrattamento in ogni provetta. 5. Vortexare brevemente le provette, coprirle e incubare per 3 minuti a 37 C nel bagno termostatato.

13 ! Attenzione: durante questa fase il volume di incubazione deve risultare completamente immerso nel bagno.! Rispettare il tempo di incubazione: sono necessari 3 35 minuti.! Rispettare la temperatura di incubazione: sono necessari 37 4 C. 6. Distribuire 1 ml di Soluzione di diluizione in ogni provetta e vortexare brevemente. B2 Incubazione: 1. umerare le provette sensibilizzate necessarie per dosare in duplicato ogni calibratore, campione o controllo. umerare 2 provette non sensibilizzate per la determinazione dell attività totale. 2. Distribuire µl di calibratore o controllo o campione pretrattati. 3. Aggiungere μl di 25OHvitamina D marcata con 125 Iodio in ciascuna provetta, incluse quelle per l attività totale. 4. Agitare a mano delicatamente il portaprovette per far fuoriuscire tutte le bolle d aria intrappolate. 5. Incubare 2 ore a temperatura ambiente sotto agitazione (37 rpm). 6. Aspirare il liquido contenuto in tutte le provette, tranne in quelle per l attività totale. Assicurarsi che la punta dell aspiratore raggiunga il fondo della provetta sensibilizzata per rimuovere tutto il liquido. 7. Lavare le provette utilizzando 2 ml di tampone di lavaggio (tranne quelle per l attività totale) ed eseguire l aspirazione. Evitare che si formi schiuma durante l utilizzo del tampone di lavaggio. 8. Lavare ancora le provette con 2 ml di soluzione di lavaggio (eccetto quelle per le conte totali) e aspirare. 9. Lasciare decantare le provette in posizione verticale per due minuti circa e aspirare eventuali gocce di liquido residue. 1. Contare tutte le provette per 1 minuto con il contatore gamma. B. Specificità Le percentuali di crossreattività stimata rispetto alla concentrazione in grado di produrre un inibizione al % sono rispettivamente: 25OHVitamin D 3 25OHVitamin D 2 1,25(OH) 2Vitamin.D 3 1,25(OH) 2Vitamin.D 2 Vitamin D3 Vitamin D2 24,25(OH) 2Vitamin.D 3 Composto CrossReattività <,3 <,3 Le prestazioni del saggio non sono influenzate dall emolisi (analizzati 5 g/l di emoglobina), dalla bilirubinemia (analizzati,25 g/l di bilirubina) o dai trigliceridi (analizzati 5 g/l). C. Precisione Campio ne A B ITRA SAGGIO <X> ± SD 14,7 ±,8 42,4 ± 2 C.V. 5,4 4,7 Campio ne A B ITER SAGGIO SD : Deviazione Standard; CV: Coefficiente di Variazione <X> ± SD 13,8 ± 1,3 38,5 ± 3,5 C.V. 9,4 9,1 XI. CALCOLO DEI RISULTATI 1. Calcolare la media delle determinazioni in duplicato. 2. Calcolare il rapporto (rapporto di competizione) tra radioattività legata alle provette di calibratore 15, campioni e controlli (B) e la radioattività legata alle provette dello calibratore zero (B). 3. Usando carta semilogaritmica a 3 cicli o logitlog e ponendo in ordinata i rapporti di competizione. B/B per ogni calibratore e in ascissa le rispettive concentrazioni di 25OHVitamina D, tracciare la curva di taratura, scartare i valori palesemente discordanti. 4. È possibile utilizzare un sistema di interpolazione dati automatizzato. Con un sistema automatico di interpolazione dati utilizzare la curva a 4 parametri. 5. Per interpolazione sulla curva di taratura dei rapporti di competizione di campioni e controlli, determinare le rispettive concentrazioni di 25OH Vitamina D totale. 6. Per ogni dosaggio determinare la capacità legante B/T della 25OH Vitamina D. XII. cpm (Calibratore, campioni o controlli) B/B = cpm (Zero Calibratore ) CARATTERISTICHE TIPICHE x I dati sotto riportati sono forniti a titolo di esempio e non devono essere utilizzati al posto della curva calibratore eseguita contemporaneamente. D. Accuratezza 25OHVit.D 3 aggiunta 25 25OHVit.D 2 aggiunta 25 Diluizione 1/1 1/2 1/4 1/8 Concentrazione teorica 12,8 51,4 25,7 12,9 TEST DI RECUPERO TEST DI DILUZIOE Concentrazione misurata 12,8 6,1 25,6 12,9 Recupero Recupero Recupero OHVitamina D totale cpm B/Bo Calibratore Attività totale 45756, ng/ml 2 ng/ml 6 ng/ml 15 ng/ml 55 ng/ml 12 ng/ml ota: 1 ng/ml = 2,5 pmol/ml , 81,6 64,5 48,8 22,5 14,4 1/1 1/2 1/4 1/8 8,3 4,2 2,1 1, 8,3 42, 24,7 1, E. Tempo trascorso tra l aggiunta dell ultimo calibratore e il campione Come mostrato nella seguente tabella, il dosaggio si mantiene accurato anche quando un campione viene aggiunto nelle provette sensibilizzate 1 e 2 minuti dopo l aggiunta del calibratore. XIII. CARATTERISTICHE E LIMITI DEL METODO A. Sensibilità Venti replicati dello standard zero sono stati dosati insieme agli altri standard. La sensibilità, calcolata come concentrazione apparente di 25 OHVitamina D totale con cpm inferiori alla media più 2 deviazioni standard di 2 replicati dello standard zero, è risultata essere,4 ng/ml. campioni 1 campioni 2 TEMPO TRASCORSO ' 1' 2' 13,5 39,5 13,6 39,3 11,7 37,4

14 XV. VALORI ATTESI È noto che l apporto dietetico, la razza, la stagione e l età influiscono sui normali livelli di 25OH.Vitamin.D 3, I valori attesi forniti qui di seguito non devono essere considerati come assoluti. DIAsource ha analizzato il siero raccolto da 39 soggetti maschili e 4 soggetti femminili, giudicati sani in base ai valori di Ca, PTH e albumina, provenienti dall Europa occidentale. L intervallo di età dei volontari era anni. I campioni sono stati raccolti durante i mesi di dicembre 21 e gennaio 211. La media per la popolazione (n = 79) è risultata 12,9 ng/ml, varabile da 6,6 a 24,5 ng/ml (basati sui percentili dal 2,5% al 97,5%). Ogni laboratorio deve stabilire il proprio intervallo di riferimento in base alla propria popolazione locale. 7. HEAEY R.P. (21) Defining deficiency of vitamin D. Clinical Laboratory International, October 21, vol.34 : HOLICK M.F. (27) Vitamin D deficiency.. Engl. J. Med., 357: TAHA. M., VIETH R.(21) The problem of an optimal target level for 25Hydroxyvitamin D, the test for vitamin D nutritional status. Clinical Laboratory International, ovember 21, vol.34 : 283 La letteratura recente suggerisce i seguenti intervalli per la classificazione dello stato di 25OHVitamina D: carenza: 1 ng/ml; insufficienza: 13 ng/ml; sufficienza: da 3 a 1 ng/ml; tossicità: >1 ng/ml. XVIII. SCHEMA DEL DOSAGGIO XVI. PRECAUZIOI PER L USO Sicurezza Il kit è solo per uso diagnostico in vitro. Il kit contiene 125 I (emivita: 6 giorni) emettente raggi X (28 kev) e γ (35,5 kev) ionizzanti. L acquisto, la detenzione, l utilizzo e il trasporto di materiale radioattivo sono soggetti a regolamentazione locale. In nessun caso il prodotto può essere somministrato ad esseri umani o animali. Usare sempre guanti e camici da laboratorio quando si manipola materiale radioattivo. Le sostanze radioattive devono essere conservate in propri contenitori in appositi locali che devono essere interdetti alle persone non autorizzate. Deve essere tenuto un registro di carico e scarico del materiale radioattivo. Il materiale di laboratorio e la vetreria deve essere dedicato all uso di isotopi specifici per evitare crosscontaminazioni. In caso di contaminazione o dispersione di materiale radioattivo, fare riferimento alle norme locali di radioprotezione. I rifiuti radioattivi devono essere smaltiti secondo le norme locali di radioprotezione. Lo scrupoloso rispetto delle norme per l uso di sostanze radioattive fornisce una protezione adeguata agli utilizzatori. I reattivi di origine umana presenti nel kit sono stati dosati con metodi approvati da organismi di controllo europei o da FDA e si sono rivelati negativi per HBs Ag, anti HCV, anti HIV1 e anti HIV2. on sono disponibili metodi in grado di offrire la certezza assoluta che derivati da sangue umano non possano provocare epatiti, AIDS o trasmettere altre infezioni. Manipolare questi reattivi o i campioni di siero o plasma secondo le procedure di sicurezza vigenti. Tutti i prodotti di origine animale o loro derivati provengono da animali sani. I componenti di origine bovina provengono da paesi dove non sono stati segnalati casi di BSE. E comunque necessario considerare i prodotti di origine animale come potenziali fonti di infezioni. Evitare ogni contatto dell epidermide con i reattivi contenenti sodio azide come conservante. La sodio azide può reagire con piombo rame o ottone presenti nelle tubature di scarico per formare metalloazidi esplosive. Smaltire questi reattivi facendo scorrere abbondante acqua negli scarichi. ei luoghi dove si usano sostanze radioattive non è consentito consumare cibi o bevande, fumare o usare cosmetici. on pipettare i reattivi con pipette a bocca. XVII. RIFERIMETI BIBLIOGRAFICI 1. ZERWEKH J.E. (28) Blood biomarkers of Vitamin D status. Am. J. Clin. utr., 87(suppl):187S91S. 2. HOLICK M.F. (26) Resurrection of Vitamin D deficiency and rickets. J. Clin. Invest., 116: PRETRATTAMETO (in provette di vetro o di polipropilene) Calibratore, Campioni, Controlli Soluzione di pretrattamento Tampone di pretrattamento Incubazione ATTIVIT À TOTALE µl CALIBRATO RE µl 2 CAMPIOI COTROLLI µl 2 Agitare (Vortex) 335 minuti a 374 C in bagno termostatato (il volume di incubazione deve risultare immerso) Soluzione di diluizione ICUBAZIOE (in provette sensibilizzate) Calibratore, Campioni, Controlli pretrattati Marcato Incubazione Separazione Tampone di lavaggio Separazione Tampone di lavaggio Separazione Conteggio Agitare (Vortex) Incubare 2 ore a temperatura ambiente sotto agitazione (37 rpm). aspirare 2, aspirare 2, aspirare Contare le provette per 1 minuto 3. HEAEY R.P. (2) Vitamin D: how much do we need, and how much is too much. Osteoporos. Int., 11: DAWSOHUGHES B., HEAEY R.P., HOLICK M.F., LIPS P., MEUIER P.J. (1997) Prevalence of Vitamin D insufficiency in an adult normal population. Osteoporos. Int., 7: BISCHOFFFERRARI H.A., GIOVAUCCI E., WILLETT W.C., DIETRICH T., DAWSOHUGHES B. (26) Estimation of optimal serum concentrations of 25hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am. J. Clin. utr., 84: HOLICK M.F(24) Sunlight and vitamin D for bone health and prevention of autoimmune diseases, cancers and cardiovascular disease. Am. J. Clin. utr., 8:16788S1688S. umero di catalogo di DIAsource : KIP1971 P.I. numero: 17528/it Revisione numero: 11324/1 Data di revisione :

15 es Leer el protocolo completo antes de usar. 25OH Vitamin D total RIACT I. ISTRUCCIOES DE USO Radioinmunoensayo para la determinación cuantitativa in vitro de la 25hidroxivitamina D2 y D3 (25 OHD2 y 25OHD3) en suero o plasma heparinizado. II. IFORMACIÓ GEERAL A. ombre: DIAsource 25OH Vitamin D total RiaCT B. úmero de Catálogo: KIP1971 : 96 test C. Fabricado por: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8, B14 ivelles, Belgium. Para cuestiones técnicas e información sobre pedidos contactar: Tel : +32 () Fax : +32 () III. IFORMACIÓ CLÍICA Vitamina D es el término genérico usado para designar a la vitamina D2 o ergoclaciferol y la Vitamina D3 o colecalciferol. Los humanos producen vitamina D3 en forma natural cuando la piel está expuesta a los rayos ultravioleta del sol. La vitamina D3 es metabolizada principalmente en el hígado produciendo 25Hidroxivitamina D3 (25 OH D3) que es la forma principal de vitamina D circulando en el organismo. 25 OH D3 es la precursora para otros metabolitos de la vitamina D y tiene una actividad limitada por si sola. El derivado más activo es la 1,25Hidroxivitamina D3, producida en el riñón (o placenta) por la 1αhidroxilación de 25OHD3. La 25OHVitamina D estimula la absorción intestinal del calcio y el fósforo y también la reabsorción y mineralización ósea. La 25OH Vitamina D también puede estar activa en otros tejidos siendo responsable del transporte de calcio (placenta, riñón, glándula mamaria ) y glándula endocrina (glándula paratiroides, células beta ). La Vitamina D3 y Vitamina D2 también están disponibles por ingestión a través de los alimentos o suplementos dietéticos. Como la Vitamina D2 se metaboliza en forma similar a la vitamina D3, ambas contribuyen al estado general de la Vitamina D de un individuo. Por esta razón es muy importante medir ambos tipos de 25 OH Vitamina D de la misma forma para un diagnóstico correcto de deficiencia, insuficiencia o intoxicación. La deficiencia de vitamina D es un factor de riesgo importante en raquitismo, osteomalacia, osteoporosis senil, cáncer y el resultado del embarazo. La medición de ambos tipos de 25 OH Vitaminas D también es necesario para determinar la causa de concentraciones anormales de calcio en el suero de pacientes. Se ha demostrado que la intoxicación con Vitamina D puede causar daño en el riñón y tejidos.

16 IV. PRICIPIOS DEL MÉTODO Al comienzo los calibradores, controles y muestras (suero o plasma heparinizado) son pretratados para liberar 25OH Vitamina D 2 y 25OH Vitamina D 3 de la Proteína de Unión a Vitamina D (DBP). Una cantidad fija de 25OH Vitamin D marcado con 125 I compite con la 25OH Vitamina D 2 y la 25OH Vitamina D 3 de las muestras, controles o calibradores tratados, por una cantidad fija de sitios para un anticuerpo monoclonal específico, inmovilizados en la superficie interna e inferior de los tubos plásticos. Después de 2 horas de incubación a temperatura ambiente en un agitador de tubos, una etapa de aspiración termina la reacción de competencia. Luego los tubos se lavan dos veces y se aspiran nuevamente. Se dibuja una curva de calibración y el total de las concentraciones de las 25 OH Vitaminas D (D 2 y D 3) de las muestras se determinan por interpolación de dosis usando la curva de calibración. V. REACTIVOS SUMIISTRADOS Reactivos Cantidad Código de Color 25OH Vitamina D marcado con 125 Yodo (grado HPLC). Calibrador : suero de caballo y tampón fosfato con gentamicina Calibradores 15 en suero de caballo y tampón fosfato con gentamicina (mirar los valores exactos en las etiquetas) WASH SOL COC Solución de lavado (Tris HCl) Controles = 2 en suero humano y timol TRACER Tampón trazador con caseína y gentamicina PRE SOL Solución para pretramiento con Proclina 3 (.1 %) PRE Tampón para pretratamiento con azida de sodio (<.1%) DIL SOL Solución de Dilución con azida de sodio (<.1%) Reconstitución 2 x 48 verde Listo para uso liofilizado 16 kbq liofilizado 5 viales liofilizados 1 ml 2 viales liofilizados 7 ml liofilizado 2 ml ml rojo amarillo amarillo marrón plateado rojo verde azul negro Añadir 6 ml del tampón trazador Añadir,5 ml de agua destilada Añadir,5 ml de agua destilada Diluir 7 x con agua destilada (utilizar agitador magnético) Añadir,5 ml de agua destilada Listo para uso Añadir 5 ml de agua destilada Listo para uso Listo para uso ota : Para diluciones de muestras con valores superiores al calibrador más alto antes de la etapa de pretratamiento, utilizar el calibrador. o existe ninguna preparación de referencia internacional. VI. Tubos recubiertos con anti 25OHVitamin.D 2 y 25OH Vitamin.D 3 (anticuerpos monoclonales) Ag CAL CAL COTROL 125 I MATERIAL O SUMIISTRADO El material mencionado a continuación es necesario y no está incluido en el kit 1. Agua destilada 2. Pipetas de µl, µl, 2 µl, µl y 1 ml (se recomienda el uso de pipetas precisas con puntas plásticas) 3. Vortex 4. Agitador magnético 5. Agitador de tubos (3 a 7 rpm) 6. Tubos de vidrio (12 x 75 mm) o tubos de polipropileno (por ejemplo: Falcon 35263) para la etapa de pretratamiento. 7. Un baño maría a 37 C 8. Jeringa automática 5 ml (tipo Cornwall) para el lavado 9. Sistema de aspiración (opcional) 1. Contador de radiaciones gamma para medir I 125 (mínima eficiencia 7%) VII. PREPARACIÓ DE REACTIVOS A. Calibradores: reconstituir los calibradores con,5 ml de agua destilada. B. Controles: Reconstituir los controles con,5 ml de agua destilada. C. Trazador : reconstituir el trazador liofilizado con 6 ml de tampón trazador. D. Solución de pretratamiento: Reconstituir inmediatamente antes de usar la solución de pretratamiento liofilizada con 5 ml de agua destilada. E. Solución de lavado de trabajo: Preparar el volumen necesario de Solución de lavado de trabajo mezclando 69 partes de agua destilada por 1 parte de Solución de lavado (7x). Utilizar un agitador magnético para homogeneizar. Desechar la solución de lavado de trabajo no utilizada al final del día. VIII. ALMACEAJE Y CADUCIDADES DE LOS REACTIVOS Antes de abrir o reconstituir todos los componentes de los kits son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, si se guardan a 28ºC. Después de su reconstitución los calibradores y controles son estables durante una semana a 28ºC. Para periodos más largos, alicuotar y guardar a 2ºC por 3 meses máximo. Evitar congelar y descongelar sucesivamente. La solución de lavado de trabajo recién preparada solo debe utilizarse en el mismo día. Después del primer uso, el trazador es estable hasta la fecha de caducidad, si se mantiene en el vial original bien tapado a 2 C (descongelado una vez). Después del primer uso, la solución de pretratamiento es estable por 2 meses a 2 C (descongelado una vez) Las alteraciones de los reactivos en el aspecto físico pueden indicar inestabilidad o deterioro. IX. RECOGIDA Y PREPARACIÓ DE MUESTRAS o use plasma con EDTA. Este kit es adecuado para muestras de suero y plasma heparinizado. Se ha establecido una correlación entre 23 sueros y plasmas heparinizados de los mismos pacientes: Plasma =,997 Suero, R =,91. Las muestras de suero y de plasma heparinizado deben ser guardadas a 2 8ºC. Si el ensayo no se realiza en 24 horas, almacenar las muestras a 2º. Evitar congelar y descongelar sucesivamente. X. PROTOCOLO A. otas de manejo o utilizar el kit o componentes después de la fecha de caducidad. o mezclar reactivos de diferente número de lote. Llevar todos los reactivos a temperatura ambiente antes de su uso. Agitar minuciosamente todos los reactivos y muestras, agitándolos o girándolos suavemente. Con el fin de evitar contaminación cruzada utilizar puntas de pipetas desechables y limpias para la adición de cada reactivo y muestra. El uso de pipetas de precisión o equipamiento de dispensación automática mejorara la precisión. Respetar los tiempos de incubación. Preparar la curva de calibración en cada ensayo, no utilizar los datos de un ensayo previo. B. Protocolo B1 Pretratamiento : 1. Marque un tubo de vidrio o polipropileno para cada calibrador, control y muestra. 2. Brevemente agite en un vortex los calibradores, controles y muestras y dispense µl de cada uno en los tubos respectivos. 3. Dispense µl de solución de pretratamiento en cada tubo. 4. Dispense 2 µl de tampón de pretratamiento en cada tubo. 5. Brevemente agite en un vortex los tubos, cúbralos e incube 3 minutos a 37 C en baño maría.! Atención el volumen a incubar debe quedar completamente sumergido durante esta etapa.! Respete el tiempo de incubación: 3 35 minutos son necesarios.! Respete la temperatura de incubación: 37 4 C son necesarios.

17 6. Dispense 1 ml Solución de Dilución en cada tubo y agite brevemente en un vortex B2 Incubación : 1. Marcar los tubos recubiertos por duplicado para cada uno de los calibradores, muestras y controles. Para la determinación de las Cuentas Totales, marcar 2 tubos normales. 2. Dispensar µl de muestras o calibradores o controles pretratados. 3. Añadir μl de 25OH Vitamina D marcado con 125 Yodo a cada tubo, incluyendo las Cuentas Totales. 4. Agitar la gradilla con tubos suavemente con la mano para liberar las burbujas de aire atrapadas. 5. Incubar durante 2 horas a temperatura ambiente, en un agitador (37 RPM). 6. Aspirar el contenido de cada tubo (excepto los de Cuentas Totales). Asegurarse que la punta de la pipeta de aspiración toca el fondo del tubo con el fin de aspirar todo el líquido. 7. Lavar los tubos con 2 ml de Solución de lavado (excepto los de Cuentas Totales) y aspirar. Evitar la formación de espuma durante la adición de la Solución de lavado 8. Lavar los tubos nuevamente con 2 ml de Solución de lavado (excepto los de cuentas totales) y aspirar. 9. Dejar los tubos en posición vertical durante 2 minutos y aspirar el líquido restante. 1. Medir la actividad de cada tubo durante 6 segundos en un Contador Gamma. XI. CALCULO DE RESULTADOS 1. Calcular la media de los duplicados. 2. Calcular la radiactividad enlazada como un porcentaje de la unión determinada al punto cero () del calibrador de acuerdo con la siguiente formula: B. Especificidad El porcentaje de reacción cruzada estimada por la comparación de la concentración (indicando una inhibición de %) es respectivamente : 25OHVitamin D 3 25OHVitamin D 2 1,25(OH) 2Vitamin.D 3 1,25(OH) 2Vitamin.D 2 Vitamin D3 Vitamin D2 24,25(OH) 2Vitamin.D 3 Compuesto Reaccióncruzada <,3 <,3 El desempeño no se ve afectado por hemólisis (probado con 5 g/l de hemoglobina), bilirubinemia (probado con,25 g/l bilirubina) o triglicéridos (probado con 5 g/l). C. Precisión PRECISIO ITRAESAYO Muest ra A B <X> ± SD 14,7 ±,8 42,4 ± 2 CV 5,4 4,7 Muest ra A B PRECISIO ITERESAYO SD : Desviación Estándar; CV: Coeficiente de Variación D. Exactitud TEST DE RECUPERACIÓ <X> ± SD 13,8 ± 1,3 38,5 ± 3,5 CV 9,4 9,1 Cuentas (Calibrador o muestra) B/B = x Cuentas ( Calibrador Cero ) 3. Utilizando papel 3 ciclo semilogarítmico o logitlog, representar los valores de (B/B%) de cada punto del calibrador frente a las concentraciones de la 25OH vitamina D de cada calibrador, rechazando los puntos externos. 4. Métodos computarizados de resultados pueden ser utilizados para la construcción de la curva de calibración. Si se utiliza un sistema automático de cálculo de resultados, se recomienda usar la representación gráfica 4 parámetros. 5. Por interpolación de los valores (B/B%) de las muestras, se determinan los valores de las concentraciones totales de la 25OH vitamina D desde la curva de calibración. 6. El porcentaje total de enlace del trazador en ausencia de la 25OH vitamina D no marcado (B/T) debe ser calculado en cada ensayo. 25OHVit.D 3 añadido 25 25OHVit.D 2 añadido 25 Recuperado Recuperado XII. EJEMPLO DE RESULTADOS TEST DILUCIÓ Los datos mostrados a continuación sirven como ejemplo y nunca deberán ser usados como una calibración real. Dilución de la muestra Concent. Teórica Concent. Medida Recuperado 25OH Vitamin D total cpm B/Bo Cuentas Totales /1 1/2 1/4 1/8 12,8 51,4 25,7 12,9 12,8 6,1 25,6 12,9 117 Calibrador, ng/ml 2 ng/ml 6 ng/ml 15 ng/ml 55 ng/ml 12 ng/ml , 81,6 64,5 48,8 22,5 14,4 1/1 1/2 1/4 1/8 8,3 4,2 2,1 1, 8,3 42, 24,7 1, ota : 1 ng/ml = 2,5 pmol/ml XIII. REALIZACIÓ Y LIMITACIOES A. Límite de detección Veinte calibradores cero fueron medidos en una curva con otros calibradores. El límite de detección, definido como la concentración aparente total de 25OH Vitamina D, dos desviaciones estándares debajo de la media de cuentas cuando el enlace era cero, fue de,4 ng/ml. E. Tiempo de espera entre la dispensación del último calibrador y la de la muestra Como se muestra a continuación la precisión del ensayo se mantiene incluso en el caso de dispensar la muestra 1 y 2 minutos después de haberse adicionado el calibrador a los tubos recubiertos. Muestra 1 Muestra 2 TIEMPO DE ESPERA ' 1' 2' 13,5 39,5 13,6 39,3 11,7 37,4

18 XIV. VALORES ESPERADOS La alimentación, la raza, la estación y la edad pueden influenciar los niveles normales de 25OH.Vitamin.D 3. Los valores esperados presentados a continuación no deben considerarse como absolutos. DIAsource evaluó suero de 39 hombres y 4 mujeres, sanos de acuerdo a valores de Ca, PTH y albúmina., de Europa Occidental. La edad de los voluntarios fluctuó entre los 17 y los 58 años de edad. Las muestras fueron tomadas durante los meses de diciembre del 21 y enero del 211. El promedio para la población (n = 79) fue de 12.9 ng/ml, con un rango entre 6,6 al 24,5 ng/ml (basado en los percentiles 2,5% a 97,5%). Cada laboratorio debe establecer su propio rango basado en su población local. Literatura reciente ha sugerido los siguientes rangos para la clasificación del estado de la 25 OH Vitamina D: Deficiencia: 1 ng/ml; Insuficiencia: 13 ng/ml; Suficiencia: 3 a 1 ng/ml; Toxicidad: >1 ng/ml. XV. PRECAUCIOES Y ADVERTECIAS Seguridad Para uso solo en diagnóstico in vitro. Este kit contiene I 125 (vida media : 6 días) emisor de rayos X (28 kev) y de rayos γ (35,5 kev) ionizantes. Este producto radiactivo solo puede ser manejado y utilizado por personas autorizadas; la compra, almacenaje, uso y cambio de productos radiactivos están sujetos a la legislación del país del usuario. En ningún caso el producto deberá ser suministrado a humanos o animales. Todo el manejo de producto radiactivo se hará en un área señalizada, diferente de la de paso regular. Deberá de utilizarse un libro de registros para recepción y almacenaje de productos radiactivos utilizados. El material de laboratorio, vidrio que podría estar contaminado radiactivamente deberá separarse para evitar la contaminación cruzada con otros radioisótopos. Cualquier derramamiento radiactivo deberá ser limpiado de inmediato de acuerdo con los procedimientos de seguridad. Los desperdicios radiactivos deberán ser eliminados de acuerdo con las regulaciones y normativas vigentes de la legislación a la cual pertenezca el laboratorio. El ajustarse a las normas básicas de seguridad radiológica facilita una protección adecuada. Los componentes de sangre humana utilizados en este kit han sido testados por métodos aprobados por la CEE y/o la FDA dando negativo para HBsAg, anti HCV, antihiv1 y 2. o se conoce ningún método que asegure que los derivados de la sangre humana no transmitan hepatitis, SIDA u otras infecciones. Por lo tanto el manejo de los reactivos y muestras se hará de acuerdo con los procedimientos de seguridad locales. Todos los productos animales y derivados han sido obtenidos a partir de animales sanos. Componentes bovinos originales de países donde BSE no ha sido informado. Sin embargo, los componentes conteniendo substancias animales deberán ser considerados como potencialmente infecciosos. Evitar cualquier contacto de los reactivos con la piel (azida sódica como conservante). La azida en este kit puede reaccionar con el plomo y cobre de las cañerías y producir azidas metálicas altamente explosivas. Durante el proceso de lavado, hacer circular mucha cantidad de agua por el sumidero para evitar el almacenamiento de la azida. o fumar, beber, comer o utilizar cosméticos en el área de trabajo. o pipetear con la boca. Utilizar ropa de protección y guantes. XVI. BIBLIOGRAFIA 1. ZERWEKH J.E. (28) Blood biomarkers of Vitamin D status. Am. J. Clin. utr., 87(suppl):187S91S. 2. HOLICK M.F. (26) Resurrection of Vitamin D deficiency and rickets. J. Clin. Invest., 116: HOLICK M.F(24) Sunlight and vitamin D for bone health and prevention of autoimmune diseases, cancers and cardiovascular disease. Am. J. Clin. utr., 8:16788S1688S. 7. HEAEY R.P. (21) Defining deficiency of vitamin D. Clinical Laboratory International, October 21, vol.34 : HOLICK M.F. (27) Vitamin D deficiency.. Engl. J. Med., 357: TAHA. M., VIETH R.(21) The problem of an optimal target level for 25Hydroxyvitamin D, the test for vitamin D nutritional status. Clinical Laboratory International, ovember 21, vol.34 : 283 XVII. RESUME DEL PROTOCOLO PRETRATAMIETO (en tubos de vidrio o polipropileno) Calibradores, Muestras, controles Solución para pretratamiento Tampón para pretratamiento Incubación CUETAS TOTALES (µl) CALIBRADO RES (µl) 2 MUESTRA(S) COTROL(ES) (µl) 2 Vortex 335 minutos a 374 C en un baño maría (el volumen a incubar debe estar sumergido) Solución de Dilución ICUBACIÓ (en tubos recubiertos) Calibradores, Muestras, controles pretratados Trazador Vortex Incubación 2 horas a temperatura ambiente en un agitador (3 7 RPM). Separación Solución de Lavado de Trabajo Separación Solución de Lavado de Trabajo Separación aspirar 2, aspirar 2, aspirar 3. HEAEY R.P. (2) Vitamin D: how much do we need, and how much is too much. Osteoporos. Int., 11: Contaje Contar los tubos durante 6 segundos 4. DAWSOHUGHES B., HEAEY R.P., HOLICK M.F., LIPS P., MEUIER P.J. (1997) Prevalence of Vitamin D insufficiency in an adult normal population. Osteoporos. Int., 7: DIAsource Catalogo r : KIP1971 P.I. umero : 17528/es Revisión nr : 11324/1 5. BISCHOFFFERRARI H.A., GIOVAUCCI E., WILLETT W.C., DIETRICH T., DAWSOHUGHES B. (26) Estimation of optimal serum concentrations of 25hydroxyvitamin D for multiple health outcomes. Am. J. Clin. utr., 84:1828. Fecha de la revisión :

19 el Διαβάστε ολόκληρο το πρωτόκολλο πριν από τη χρήση. 25OH Vitamin D total RIACT Ι. ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Ραδιοανοσοπροσδιορισμός για την in vitro ποσοτική μέτρηση της 25υδροξυβιταμίνης D2 και D3 (25 OHD2 και 25OHD3 ) σε ορό ή ηπαρινισμένο πλάσμα. II. ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ A. Εμπορική ονομασία: Κιτ 25OHVitamin D total RiaCT της DIAsource B. Αριθμός καταλόγου: KIP1971 : 96 εξετάσεις Γ. Κατασκευάζεται από την: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8, B14 ivelles, Belgium. Για τεχνική βοήθεια ή πληροφορίες σχετικά με παραγγελίες επικοινωνήστε στα: Τηλ.: +32 () Fax: +32 () III. ΚΛΙΝΙΚΟ ΥΠΟΒΑΘΡΟ Βιταμίνη D είναι η κοινή ονομασία για την βιταμίνη D2 ή εργοκαλσιφερόλη και τη βιταμίνη D3 ή χοληκαλσιφερόλη. Ο ανθρώπινος οργανισμός παράγει φυσιολογικά βιταμίνη D3 όταν το δέρμα εκτίθεται σε υπεριώδη ηλιακή ακτινοβολία. Η βιταμίνη D3 μεταβολίζεται κυρίως στο ήπαρ σε 25υδροξυβιταμίνη D3 (25 OH D3), που αποτελεί την κύρια κυκλοφορούσα μορφή βιταμίνης D στο σώμα. Η 25 OH D3 αποτελεί πρόδρομη ουσία για άλλους μεταβολίτες βιταμίνης D και διαθέτει επίσης περιορισμένη ενεργότητα. Το πιο δραστικό παράγωγο είναι η 1,25υδροξυβιταμίνη D3, η οποία παράγεται στους νεφρούς (ή τον πλακούντα) μέσω 1 α υδροξυλίωσης της 25OHD3. Η 25OHβιταμίνη D διεγείρει την εντερική απορρόφηση τόσο του ασβεστίου όσο και του φωσφόρου αλλά και την οστική απορρόφηση και την εναπόθεση αλάτων σε αυτά. Η 25OH βιταμίνη D ενδεχομένως είναι επίσης ενεργή σε άλλους ιστούς που είναι επιφορτισμένοι με την μεταφορά του ασβεστίου (πλακούντας, νεφροί, μαζικοί αδένες ) και ενδοκρινείς αδένες (παραθυρεοειδείς αδένες, κύτταρα β ). Η βιταμίνη D3 και η βιταμίνη D2 είναι επίσης διαθέσιμες μέσω πρόσληψης με την τροφή ή διατροφικών συμπληρωμάτων. Η βιταμίνη D2 μεταβολίζεται με παρόμοιο τρόπο όπως η βιταμίνη D3 και επομένως και οι δύο συνεισφέρουν στα επίπεδα βιταμίνης D στον οργανισμό. Γι αυτόν ακριβώς το λόγο είναι ιδιαίτερα σημαντική η μέτρηση και των δύο μορφών της 25 OH βιταμίνης D για την ορθή διάγνωση της έλλειψης, ανεπάρκειας ή τοξίνωσης από βιταμίνη D. Η έλλειψη βιταμίνης D αποτελεί σημαντικό παράγοντα κινδύνου για τη ραχίτιδα, την οστεομαλακία, την οστεοπόρωση του γήρατος, τον καρκίνο και την έκβαση της κύησης. Η μέτρηση και των δύο μορφών της 25 OH βιταμίνης D απαιτείται επίσης για τον καθορισμό της αιτίας παθολογικών συγκεντρώσεων ασβεστίου στον ορό ασθενών. Έχει φανεί πως η τοξίνωση από βιταμίνη D οδηγεί σε νεφρικές και ιστικές βλάβες.

20 IV. ΒΑΣΙΚΕΣ ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Καταρχήν υποβάλλονται σε προκαταρκτική επεξεργασία οι βαθμονομητές, τα υλικά ελέγχου και τα δείγματα (ορός ή ηπαρινισμένο πλάσμα) για την απελευθέρωση 25OH βιταμίνης D 2 και 25OH βιταμίνης D 3 από την δεσμευτική πρωτεΐνη της βιταμίνης D (DBP). Μία συγκεκριμένη ποσότητα σημασμένης με 125 I, 25OH βιταμίνης D ανταγωνίζεται τη 25OH βιταμίνη D 2 και τη 25OH βιταμίνη D 3 από δείγματα, υλικά ελέγχου και βαθμονομητές που έχουν υποβληθεί σε επεξεργασία για συγκεκριμένη ποσότητα θέσεων ενός ειδικού μονοκλωνικού αντισώματος που έχουν καθηλωθεί στην κατώτερη και έσω επιφάνεια πλαστικών σωληναρίων. Έπειτα από επώαση 2 ωρών σε θερμοκρασία δωματίου σε αναδευτήρα σωληναρίων, ένα βήμα αναρρόφησης τερματίζει την αντίδραση ανταγωνισμού. Κατόπιν τα σωληνάρια υποβάλλονται δύο φορές σε πλύση και αναρροφώνται ξανά. Σχεδιάζεται μία καμπύλη βαθμονόμησης και οι συνολικές συγκεντρώσεις 25 OH βιταμίνης D (D 2 και D 3) των δειγμάτων προσδιορίζονται με αναγωγή συγκεντρώσεων από την καμπύλη βαθμονόμησης. V. ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ Αντιδραστήρια Ποσότητα Χρωματικ ός κωδικός Σημασμένη με 125 ιώδιο 25OH βιτ. D (βαθμού HPLC). Βαθμονομητής : ορός αλόγου/ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών με γενταμυκίνη ορός αλόγου/ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών με γενταμυκίνη (δείτε τις ακριβείς τιμές στις ετικέτες των φιαλιδίων) WASH SOL COC Διάλυμα πλύσης (Tris HCl) Υλικά ελέγχου 12 σε ανθρώπινο ορό με θυμόλη TRACER Ρυθμιστικό διάλυμα ιχνηθέτη με κασεΐνη και γενταμυκίνη PRE SOL Διάλυμα προκαταρκτικής επεξεργασίας με προκλίνη 3 (,1 %) PRE Ρυθμιστικό διάλυμα προκατ. επεξεργασίας με αζίδιο του νατρίου (<,1%) DIL SOL Διάλυμα αραίωσης με αζίδιο του νατρίου (<,1%) Ανασύσταση 2 x 48 πράσινο Έτοιμο για χρήση 1 φιαλίδιο λυοφιλ. 16 kbq 1 φιαλίδιο λυοφιλ. 5 φιαλίδια λυοφιλ. 1 φιαλίδιο 1 ml 2 φιαλίδια λυοφιλ. 1 φιαλίδιο 7 ml 1 φιαλίδιο λυοφιλ. 1 φιαλίδιο 2 ml 1 φιαλίδιο ml κόκκινο κίτρινο κίτρινο καφέ ασημί κόκκινο πράσινο μπλε μαύρο Προσθέστε 6 ml του ρυθμιστικού διαλύματος Προσθέστε,5 ml απεσταγμένου νερού Προσθέστε,5 ml απεσταγμένου νερού Αραιώστε 7 x με απεσταγμένο νερό (χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα). Προσθέστε,5 ml απεσταγμένου νερού Έτοιμο για χρήση Προσθέστε 5 ml απεσταγμένου νερού Έτοιμο για χρήση Έτοιμο για χρήση Σημείωση: Χρησιμοποιήστε τον Βαθμονομητή για την αραίωση δειγμάτων με τιμές άνω του υψηλότερου βαθμονομητή, πριν από το βήμα προκαταρκτικής επεξεργασίας. Δεν υπάρχει διαθέσιμο διεθνές υλικό αναφοράς. VI. Σωληνάρια επιστρωμένα με αντι 25OHβιταμίνη.D 2 and αντι25ohβιταμίνη.d 3 Ag CAL CAL COTROL 125 I ΑΝΑΛΩΣΙΜΑ ΠΟΥ ΔΕΝ ΠΑΡΕΧΟΝΤΑΙ Τα ακόλουθα υλικά απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται στο κιτ: 1. Απεσταγμένο νερό 2. Πιπέτες για διανομή: μl, μl, 2 μl, µl και 1ml (συνιστάται η χρήση πιπετών ακριβείας με αναλώσιμα πλαστικά ρύγχη) VIII. 3. Αναμείκτης στροβιλισμού 4. Μαγνητικός αναδευτήρας 5. Αναδευτήρας σωληναρίων (3 έως 7 σ.α.λ.) 6. Γυάλινα σωληνάρια (12 x 75 mm) ή σωληνάρια πολυπροπυλενίου (π.χ.: Falcon 35263) για το βήμα προκαταρκτικής επεξεργασίας. 7. Λουτρό νερού στους 37 C 8. Αυτόματη σύριγγα των 5 ml (τύπου Cornwall) για πλύση 9. Συσκευή αναρρόφησης και πλύσης. 1. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί οποιοσδήποτε απαριθμητής ακτίνων γ με δυνατότητα μέτρησης του 125 I (ελάχιστη απόδοση 7%). VII. ΠΑΡΑΣΚΕΥΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΟΥ A. Βαθμονομητές: Ανασυστήστε τους βαθμονομητές με,5 ml απεσταγμένου νερού. B. Υλικά ελέγχου: Ανασυστήστε τα υλικά ελέγχου με,5 ml απεσταγμένου νερού. C. Ιχνηθέτης: Ανασυστήστε τον λυοφιλοποιημένο ιχνηθέτη με 6 ml του ρυθμιστικού διαλύματος ιχνηθέτη. D. Διάλυμα προκαταρκτικής επεξεργασίας :Αμέσως πριν από τη χρήση, ανασυστήστε το λυφιλοποιημένο διάλυμα προκαταρκτικής επεξεργασίας με 5 ml απεσταγμένου νερού. E. Διάλυμα πλύσης εργασίας: Προετοιμάστε επαρκή όγκο διαλύματος πλύσης εργασίας με προσθήκη 69 όγκων απεσταγμένου νερού σε 1 όγκο διαλύματος πλύσης (7x). Χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα για την ομογενοποίηση. Απορρίψτε το μη χρησιμοποιημένο διάλυμα πλύσης εργασίας στο τέλος της ημέρας. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΗΜΕΡΟΜΗΝΙΑ ΛΗΞΗΣ ΤΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Πριν από το άνοιγμα ή την ανασύσταση, όλα τα συστατικά του κιτ παραμένουν σταθερά έως την ημερομηνία λήξης, η οποία αναγράφεται στην ετικέτα, εφόσον διατηρούνται σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Μετά την ανασύσταση, τα υλικά ελέγχου παραμένουν σταθερά για μία εβδομάδα σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Για μεγαλύτερες περιόδους φύλαξης, πρέπει να σχηματίζονται κλάσματα και να διατηρούνται στους 2 C για έως και 3 μήνες το ανώτερο. Αποφύγετε τους επανειλημμένους κύκλους απόψυξηςκατάψυξης. Φρέσκο, παρασκευασμένο διάλυμα πλύσης εργασίας θα πρέπει να χρησιμοποιείται την ίδια ημέρα. Μετά την πρώτη του χρήση, ο ιχνηθέτης είναι σταθερός έως την ημερομηνία λήξης, εάν διατηρείται στο αρχικό, καλά κλεισμένο φιαλίδιο στους 2 C (με μία απόψυξη). Μετά την πρώτη του χρήση, το διάλυμα προκαταρκτικής επεξεργασίας είναι σταθερό για 2 μήνες στους 2 C(με μία απόψυξη) Τυχόν μεταβολές της φυσικής εμφάνισης των αντιδραστηρίων του κιτ ενδέχεται να υποδηλώνουν αστάθεια ή αλλοίωση. IX. ΣΥΛΛΟΓΗ ΚΑΙ ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ Μην χρησιμοποιήσετε πλάσμα EDTA. Αυτό το κιτ ενδείκνυται για δείγματα ορού και ηπαρινισμένου πλάσματος. Έχει καθιερωθεί συσχέτιση μεταξύ 23 δειγμάτων ορού και ηπαρινισμένου πλάσματος από τους ίδιους ασθενείς: πλάσμα =,997 ορού, R =,91. Τα δείγματα ορού και ηπαρινισμένου πλάσματος πρέπει να φυλάσσονται στους 28 C. Εάν η εξέταση δεν πραγματοποιηθεί εντός 24 ωρών, συνιστάται η φύλαξη στους 2 C. Αποφύγετε τους επανειλημμένους κύκλους απόψυξηςκατάψυξης. X. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ A. Σημειώσεις σχετικά με το χειρισμό Μη χρησιμοποιείτε το κιτ ή τα συστατικά μετά την ημερομηνία λήξης. Μην αναμειγνύετε υλικά από διαφορετικές παρτίδες κιτ. Φέρετε όλα τα αντιδραστήρια σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση. Αναμείξτε καλά όλα τα αντιδραστήρια και τα δείγματα με απαλή ανακίνηση ή ανάδευση. Χρησιμοποιείτε ένα καθαρό αναλώσιμο ρύγχος πιπέτας για την προσθήκη κάθε διαφορετικού αντιδραστηρίου και δείγματος προκειμένου να αποφύγετε την επιμόλυνση. Η ακρίβεια βελτιώνεται με χρήση πιπετών υψηλής ακρίβειας ή αυτοματοποιημένου εξοπλισμού διανομής με πιπέτες. Τηρείτε τους χρόνους επώασης. Προετοιμάστε μια καμπύλη βαθμονόμησης για κάθε ανάλυση και μη χρησιμοποιείτε δεδομένα από προηγούμενες αναλύσεις. B. Διαδικασία B1 Προκαταρκτική επεξεργασία: 1. Επισημάνετε ένα γυάλινο σωληνάριο ή ένα σωληνάριο πολυπροπυλενίου για κάθε βαθμονομητή, υλικό ελέγχου και δείγμα. 2. Αναδεύστε σύντομα τους βαθμονομητές, τα υλικά ελέγχου και τα δείγματα σε αναδευτήρα vortex, και διανείμετε µl από το καθένα στα αντίστοιχα σωληνάρια.

HOMEWORK 4 = G. In order to plot the stress versus the stretch we define a normalized stretch:

HOMEWORK 4 = G. In order to plot the stress versus the stretch we define a normalized stretch: HOMEWORK 4 Problem a For the fast loading case, we want to derive the relationship between P zz and λ z. We know that the nominal stress is expressed as: P zz = ψ λ z where λ z = λ λ z. Therefore, applying

Διαβάστε περισσότερα

the total number of electrons passing through the lamp.

the total number of electrons passing through the lamp. 1. A 12 V 36 W lamp is lit to normal brightness using a 12 V car battery of negligible internal resistance. The lamp is switched on for one hour (3600 s). For the time of 1 hour, calculate (i) the energy

Διαβάστε περισσότερα

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 090505/1 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 25OHVitamin D total RIACT KIP1971 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 Louvainlaeuve Belgium : 1181/1 en Read entire protocol before use. 25OH Vitamin D total RIACT I. ITEDED USE Radioimmunoassay

Διαβάστε περισσότερα

La Déduction naturelle

La Déduction naturelle La Déduction naturelle Pierre Lescanne 14 février 2007 13 : 54 Qu est-ce que la déduction naturelle? En déduction naturelle, on raisonne avec des hypothèses. Qu est-ce que la déduction naturelle? En déduction

Διαβάστε περισσότερα

MSM Men who have Sex with Men HIV -

MSM Men who have Sex with Men HIV - ,**, The Japanese Society for AIDS Research The Journal of AIDS Research HIV,0 + + + + +,,, +, : HIV : +322,*** HIV,0,, :., n,0,,. + 2 2, CD. +3-ml n,, AIDS 3 ARC 3 +* 1. A, MSM Men who have Sex with Men

Διαβάστε περισσότερα

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS CHAPTER 5 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS EXERCISE 104 Page 8 1. Find the positive root of the equation x + 3x 5 = 0, correct to 3 significant figures, using the method of bisection. Let f(x) =

Διαβάστε περισσότερα

!Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr

!Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr !Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr Stato di tensione F A = F / A F Traione pura stato di tensione monoassiale F M A M Traione e torsione stato di tensione piano = F /

Διαβάστε περισσότερα

Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests

Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests Side-Note: So far we have seen a few approaches for creating tests such as Neyman-Pearson Lemma ( most powerful tests of H 0 : θ = θ 0 vs H 1 :

Διαβάστε περισσότερα

Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude

Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude Jan Behrens 2012-12-31 In this paper we shall provide a method to approximate distances between two points on earth

Διαβάστε περισσότερα

Mean bond enthalpy Standard enthalpy of formation Bond N H N N N N H O O O

Mean bond enthalpy Standard enthalpy of formation Bond N H N N N N H O O O Q1. (a) Explain the meaning of the terms mean bond enthalpy and standard enthalpy of formation. Mean bond enthalpy... Standard enthalpy of formation... (5) (b) Some mean bond enthalpies are given below.

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ Πτυχιακή εργασία ΜΕΛΕΤΗ ΠΟΛΥΦΑΙΝΟΛΩΝ ΚΑΙ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΣΟΚΟΛΑΤΑΣ Αναστασία Σιάντωνα Λεμεσός

Διαβάστε περισσότερα

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 / KIP1974

25OH-Vitamin D total- RIA-CT KIP1971 / KIP1974 25OHVitamin D total RIACT KIP1971 / KIP1974 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 Louvainlaeuve Belgium : 141208/1 en Read entire protocol before use. 25OH Vitamin D total RIACT I. ITEDED

Διαβάστε περισσότερα

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1)

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1) Name: Date: Nuclear Physics 5. A sample of radioactive carbon-4 decays into a stable isotope of nitrogen. As the carbon-4 decays, the rate at which the amount of nitrogen is produced A. decreases linearly

Διαβάστε περισσότερα

Jesse Maassen and Mark Lundstrom Purdue University November 25, 2013

Jesse Maassen and Mark Lundstrom Purdue University November 25, 2013 Notes on Average Scattering imes and Hall Factors Jesse Maassen and Mar Lundstrom Purdue University November 5, 13 I. Introduction 1 II. Solution of the BE 1 III. Exercises: Woring out average scattering

Διαβάστε περισσότερα

ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ

ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ ΤΜΗΜΑ ΙΑΤΡΟΦΗΣ ΚΑΙ ΙΑΙΤΟΛΟΓΙΑΣ, ΤΕΙ ΚΡΗΤΗΣ ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ ΕΠΙΜΕΛΕΙΑ: ΑΛΕΞΙΑ ΤΣΕΡΛΙΓΚΑ ΥΠΕΥΘΥΝΟΣ ΚΑΘΗΓΗΤΗΣ: Γ. Α. ΦΡΑΓΚΙΑ ΑΚΗΣ. 2012 σελ.

Διαβάστε περισσότερα

5.4 The Poisson Distribution.

5.4 The Poisson Distribution. The worst thing you can do about a situation is nothing. Sr. O Shea Jackson 5.4 The Poisson Distribution. Description of the Poisson Distribution Discrete probability distribution. The random variable

Διαβάστε περισσότερα

Efecto Perlado. Colores. Efectos. by Osaka

Efecto Perlado. Colores. Efectos. by Osaka Efecto Perlado Colores & Efectos by Osaka 2 EFECTO PERLADO Τεχνοτροπία με βάση την άμμο με χρυσή και ασημή πέρλα. Πολύ γρήγορη εφαρμογή, με μια στρώση χρώματος. Έτοιμο να χρησιμοποιηθεί η χρωματίζεται

Διαβάστε περισσότερα

derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates

derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates swapnizzle 03-03- :5:43 We begin by recognizing the familiar conversion from rectangular to spherical coordinates (note that φ is used

Διαβάστε περισσότερα

ΕΦΑΡΜΟΓΗ APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Esencia 25 ml 100 ml. Damasco 2,5L (6-8m2/L)

ΕΦΑΡΜΟΓΗ APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Esencia 25 ml 100 ml. Damasco 2,5L (6-8m2/L) DAMASCO Διακριτική και κομψή διακόσμηση εμπνευσμένη από τα πολυτελή υφάσματα της αρχαιότητας, για όσους επιθυμούν οι τοίχοι να είναι επενδεδυμένοι με ένα προϊόν που παρέχει μεταξένια και βελούδινη αντανάκλαση.

Διαβάστε περισσότερα

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν Αριθμός έκθεζης δοκιμών / Test report number Σειριακός αριθμός οργάνοσ / Instrument serial No T Πελάηης / Customer TOTAL Q Επγαζηήπια Διακπιβώζεων A.E. Κοπγιαλενίος 20, Τ.Κ. 11526 Αθήνα 20 Korgialeniou

Διαβάστε περισσότερα

Strain gauge and rosettes

Strain gauge and rosettes Strain gauge and rosettes Introduction A strain gauge is a device which is used to measure strain (deformation) on an object subjected to forces. Strain can be measured using various types of devices classified

Διαβάστε περισσότερα

1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model

1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model 1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model Let xi = the amount of money invested in each of the potential investments in, where (i=1,2, ) x1 = the amount of money invested in Savings Account

Διαβάστε περισσότερα

The challenges of non-stable predicates

The challenges of non-stable predicates The challenges of non-stable predicates Consider a non-stable predicate Φ encoding, say, a safety property. We want to determine whether Φ holds for our program. The challenges of non-stable predicates

Διαβάστε περισσότερα

Section 8.3 Trigonometric Equations

Section 8.3 Trigonometric Equations 99 Section 8. Trigonometric Equations Objective 1: Solve Equations Involving One Trigonometric Function. In this section and the next, we will exple how to solving equations involving trigonometric functions.

Διαβάστε περισσότερα

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme. (a) Note: Award A for vertical line to right of mean, A for shading to right of their vertical line. AA N (b) evidence of recognizing symmetry

Διαβάστε περισσότερα

Matrices and Determinants

Matrices and Determinants Matrices and Determinants SUBJECTIVE PROBLEMS: Q 1. For what value of k do the following system of equations possess a non-trivial (i.e., not all zero) solution over the set of rationals Q? x + ky + 3z

Διαβάστε περισσότερα

ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ

ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΠΑΣΡΩΝ ΣΜΖΜΑ ΖΛΔΚΣΡΟΛΟΓΩΝ ΜΖΥΑΝΗΚΩΝ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΤΠΟΛΟΓΗΣΩΝ ΣΟΜΔΑ ΤΣΖΜΑΣΩΝ ΖΛΔΚΣΡΗΚΖ ΔΝΔΡΓΔΗΑ Γηπισκαηηθή Δξγαζία ηνπ Φνηηεηή ηνπ ηκήκαηνο Ζιεθηξνιόγσλ Μεραληθώλ θαη Σερλνινγίαο Ζιεθηξνληθώλ

Διαβάστε περισσότερα

Daewoo Technopark A-403, Dodang-dong, Wonmi-gu, Bucheon-city, Gyeonggido, Korea LM-80 Test Report

Daewoo Technopark A-403, Dodang-dong, Wonmi-gu, Bucheon-city, Gyeonggido, Korea LM-80 Test Report LM-80 Test Report Approved Method: Measuring Lumen Maintenance of LED Light Sources Project Number: KILT1212-U00216 Date: September 17 th, 2013 Requested by: Dongbu LED Co., Ltd 90-1, Bongmyeong-Ri, Namsa-Myeon,

Διαβάστε περισσότερα

Stucco Natural / Stucco Mítiko. Στόκος με βάση τον ασβέστη.

Stucco Natural / Stucco Mítiko. Στόκος με βάση τον ασβέστη. Stucco Natural / Stucco Mítiko Στόκος με βάση τον ασβέστη. 5Kg Stucco Mítiko + 480ml Esencia 05 Stuco Natural / Stucco Mítiko Στόκος, για εσωτερική χρήση που χαρίζει ένα πολυτελές παλαιωμένο αποτέλεσμα,

Διαβάστε περισσότερα

RADIOIMMUNOASSAY FOR THE DIRECT DETERMINATION OF 17 BETA-ESTRADIOL IN HUMAN SERUM OR PLASMA

RADIOIMMUNOASSAY FOR THE DIRECT DETERMINATION OF 17 BETA-ESTRADIOL IN HUMAN SERUM OR PLASMA EstradCE.fm Page 1 Friday, September 19, 2003 2:49 PM RADIOIMMUNOASSAY FOR THE DIRECT DETERMINATION OF 17 BETA-ESTRADIOL IN HUMAN SERUM OR PLASMA 1. INTRODUCTION 17 beta-estradiol is a female steroid hormone

Διαβάστε περισσότερα

APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Madreperla 2,5L (27m2)

APPLICAZIONE APPLICATION APPLICATION. Sublime Colours 2,5L (10-12m2/L) Madreperla 2,5L (27m2) MADREPERLA 2,5L Μοντέρνα διακόσμηση με περλε αποχρώσεις, μπορεί να εφαρμοστεί με απλό ρολό, παλετινα και το φινίρισμα το δίνει η εύκαμπτη πλαστική σπάτουλα ή με ψεκασμό (με χρήση πιστολίου). Η τεχνοτροπία

Διαβάστε περισσότερα

Integrali doppi: esercizi svolti

Integrali doppi: esercizi svolti Integrali doppi: esercizi svolti Gli esercizi contrassegnati con il simbolo * presentano un grado di difficoltà maggiore. Esercizio. Calcolare i seguenti integrali doppi sugli insiemi specificati: a) +

Διαβάστε περισσότερα

Homework 3 Solutions

Homework 3 Solutions Homework 3 Solutions Igor Yanovsky (Math 151A TA) Problem 1: Compute the absolute error and relative error in approximations of p by p. (Use calculator!) a) p π, p 22/7; b) p π, p 3.141. Solution: For

Διαβάστε περισσότερα

Tipologie installative - Installation types Type d installation - Installationstypen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης

Tipologie installative - Installation types Type d installation - Installationstypen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης AMPADE MOOCROMATICHE VIMAR DIMMERABII A 0 V~ - VIMAR 0 V~ DIMMABE MOOCHROME AMP AMPE MOOCHROME VIMAR VARIATEUR 0 V~ - DIMMERFÄHIGE MOOCHROMATICHE AMPE VO VIMAR MIT 0 V~ ÁMPARA MOOCROMÁTICA VIMAR REGUABE

Διαβάστε περισσότερα

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΛΕΝΑ ΦΛΟΚΑ Επίκουρος Καθηγήτρια Τµήµα Φυσικής, Τοµέας Φυσικής Περιβάλλοντος- Μετεωρολογίας ΓΕΝΙΚΟΙ ΟΡΙΣΜΟΙ Πληθυσµός Σύνολο ατόµων ή αντικειµένων στα οποία αναφέρονται

Διαβάστε περισσότερα

TESTOSTERONE DIRECT RADIOIMMUNOASSAY KIT

TESTOSTERONE DIRECT RADIOIMMUNOASSAY KIT TestoCE.fm Page 1 Friday, November 7, 2003 3:02 PM TESTOSTERONE DIRECT RADIOIMMUNOASSAY KIT Procedure for quantitative determination of testosterone in human serum or plasma samples For in vitro use only

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΤΜΗΜΑ ΝΟΣΗΛΕΥΤΙΚΗΣ Πτυχιακή εργασία ΓΝΩΣΕΙΣ ΚΑΙ ΣΤΑΣΕΙΣ ΝΟΣΗΛΕΥΤΩΝ ΠΡΟΣ ΤΟΥΣ ΦΟΡΕΙΣ ΜΕ ΣΥΝΔΡΟΜΟ ΕΠΙΚΤΗΤΗΣ ΑΝΟΣΟΑΝΕΠΑΡΚΕΙΑΣ (AIDS) Αλέξης Δημήτρη Α.Φ.Τ: 20085675385 Λεμεσός

Διαβάστε περισσότερα

Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1

Main source: Discrete-time systems and computer control by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 A Brief History of Sampling Research 1915 - Edmund Taylor Whittaker (1873-1956) devised a

Διαβάστε περισσότερα

«Συμπεριφορά μαθητών δευτεροβάθμιας εκπαίδευσης ως προς την κατανάλωση τροφίμων στο σχολείο»

«Συμπεριφορά μαθητών δευτεροβάθμιας εκπαίδευσης ως προς την κατανάλωση τροφίμων στο σχολείο» ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΓΕΩΠΟΝΙΚΗ ΣΧΟΛΗ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΟ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΣΠΟΥΔΩΝ ΕΙΔΙΚΕΥΣΗ «ΑΓΡΟΤΙΚΗ ΟΙΚΟΝΟΜΙΑ» «Συμπεριφορά μαθητών δευτεροβάθμιας εκπαίδευσης ως προς την κατανάλωση τροφίμων στο

Διαβάστε περισσότερα

ANSWERSHEET (TOPIC = DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION #2. h 0 h h 0 h h 0 ( ) g k = g 0 + g 1 + g g 2009 =?

ANSWERSHEET (TOPIC = DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION #2. h 0 h h 0 h h 0 ( ) g k = g 0 + g 1 + g g 2009 =? Teko Classes IITJEE/AIEEE Maths by SUHAAG SIR, Bhopal, Ph (0755) 3 00 000 www.tekoclasses.com ANSWERSHEET (TOPIC DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION # Question Type A.Single Correct Type Q. (A) Sol least

Διαβάστε περισσότερα

ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΑ ΤΜΗΜΑ ΝΑΥΤΙΛΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΣΤΗΝ ΝΑΥΤΙΛΙΑ

ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΑ ΤΜΗΜΑ ΝΑΥΤΙΛΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΣΤΗΝ ΝΑΥΤΙΛΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΑ ΤΜΗΜΑ ΝΑΥΤΙΛΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΣΤΗΝ ΝΑΥΤΙΛΙΑ ΝΟΜΙΚΟ ΚΑΙ ΘΕΣΜΙΚΟ ΦΟΡΟΛΟΓΙΚΟ ΠΛΑΙΣΙΟ ΚΤΗΣΗΣ ΚΑΙ ΕΚΜΕΤΑΛΛΕΥΣΗΣ ΠΛΟΙΟΥ ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ που υποβλήθηκε στο

Διαβάστε περισσότερα

EE512: Error Control Coding

EE512: Error Control Coding EE512: Error Control Coding Solution for Assignment on Finite Fields February 16, 2007 1. (a) Addition and Multiplication tables for GF (5) and GF (7) are shown in Tables 1 and 2. + 0 1 2 3 4 0 0 1 2 3

Διαβάστε περισσότερα

Stato di tensione triassiale Stato di tensione piano Cerchio di Mohr

Stato di tensione triassiale Stato di tensione piano Cerchio di Mohr Stato di tensione triassiale Stato di tensione iano Cerchio di Mohr Stato di tensione F A = F / A F Traione ura stato di tensione monoassiale F M A M Traione e torsione stato di tensione iano = F / A =

Διαβάστε περισσότερα

COURBES EN POLAIRE. I - Définition

COURBES EN POLAIRE. I - Définition Y I - Définition COURBES EN POLAIRE On dit qu une courbe Γ admet l équation polaire ρ=f (θ), si et seulement si Γ est l ensemble des points M du plan tels que : OM= ρ u = f(θ) u(θ) Γ peut être considérée

Διαβάστε περισσότερα

English... p. 1 Italiano... p. 10 Français... p. 19 Deutsch... p. 28 Español... p. 37 Português... p. 47 Maygar...p. 56. Ελληνικά...p.

English... p. 1 Italiano... p. 10 Français... p. 19 Deutsch... p. 28 Español... p. 37 Português... p. 47 Maygar...p. 56. Ελληνικά...p. RENCTK (P2721) English... p. 1 Italiano... p. 10 Français... p. 19 Deutsch... p. 28 Español... p. 37 Português... p. 47 Maygar...p. 56 Ελληνικά...p. 65 ANGIOTENSlN I RADIOIMMUNOASSAY KlT Procedure for

Διαβάστε περισσότερα

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110221/2 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ

ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ 515 ΤΕΧΝΟΛΟ ΓΙ ΚΟ ΕΚΠΑ ΙΔ ΕΥ Τ ΙΚΟ Ι ΔΡΥ Μ Α 'ΠΕ Ι ΡΑ ΙΑ ~ " ΤΜΗΜΑ ΚΛΩΣΤΟΥΦΑΝΤΟΥΡΓΙΑΣ ΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΒΑΦΙΚΗΣ ΠΤΥΧΙΑΚΉ ΕΡΓ ΑΣΙΑ ΤΙΤΛΟΣ ΕΥΧΡΗΣΤΙΑ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΟΥ ΠΡΟΣΤΑΤΕΥΤΙΚΟΥ ΙΜΑΤΙΣΜΟΥ ΑΡΓΥΡΟΠΟΥ ΛΟΣ ΘΕΜΙΣΤΟΚΛΗΣ

Διαβάστε περισσότερα

Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων

Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων ΕΛΛΗΝΙΚΗ ΔΗΜΟΚΡΑΤΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΡΗΤΗΣ Συστήματα Διαχείρισης Βάσεων Δεδομένων Φροντιστήριο 9: Transactions - part 1 Δημήτρης Πλεξουσάκης Τμήμα Επιστήμης Υπολογιστών Tutorial on Undo, Redo and Undo/Redo

Διαβάστε περισσότερα

[1] P Q. Fig. 3.1

[1] P Q. Fig. 3.1 1 (a) Define resistance....... [1] (b) The smallest conductor within a computer processing chip can be represented as a rectangular block that is one atom high, four atoms wide and twenty atoms long. One

Διαβάστε περισσότερα

DESIGN OF MACHINERY SOLUTION MANUAL h in h 4 0.

DESIGN OF MACHINERY SOLUTION MANUAL h in h 4 0. DESIGN OF MACHINERY SOLUTION MANUAL -7-1! PROBLEM -7 Statement: Design a double-dwell cam to move a follower from to 25 6, dwell for 12, fall 25 and dwell for the remader The total cycle must take 4 sec

Διαβάστε περισσότερα

Precision Metal Film Fixed Resistor Axial Leaded

Precision Metal Film Fixed Resistor Axial Leaded Features EIA standard colour-coding Non-Flame type available Low noise and voltage coefficient Low temperature coefficient range Wide precision range in small package Too low or too high ohmic value can

Διαβάστε περισσότερα

ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ

ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΟΔΟΝΤΙΑΤΡΙΚΗΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΔΟΝΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΑΝΩΤΕΡΑΣ ΠΡΟΣΘΕΤΙΚΗΣ ΣΥΓΚΡΙΤΙΚΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΣΥΓΚΡΑΤΗΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΟΡΙΣΜΕΝΩΝ ΠΡΟΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΜΕΝΩΝ ΣΥΝΔΕΣΜΩΝ ΑΚΡΙΒΕΙΑΣ

Διαβάστε περισσότερα

Votre système de traite vous parle, écoutez-le!

Votre système de traite vous parle, écoutez-le! Le jeudi 28 octobre 2010 Best Western Hôtel Universel, Drummondville Votre système de traite vous parle, écoutez-le! Bruno GARON Conférence préparée avec la collaboration de : Martine LABONTÉ Note : Cette

Διαβάστε περισσότερα

ελτίο δεδοµένων ασφαλείας σύµφωνα µε το 1907/2006/EK, Άρθρο 31

ελτίο δεδοµένων ασφαλείας σύµφωνα µε το 1907/2006/EK, Άρθρο 31 Σελίδα: 1/6 ΤΜΗΜΑ 1: Στοιχεία ουσίας/παρασκευάσµατος και εταιρείας/επιχείρησης 1.1 Αναγνωριστικός κωδικός προϊόντος Αριθµός προϊόντος: A4569 Aριθµός CAS: 112926-00-8 Αριθµός ΕC: 231-545-4 1.2 Συναφείς

Διαβάστε περισσότερα

MACCHINE A FLUIDO 2 CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH

MACCHINE A FLUIDO 2 CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH MACCHINE A FLUIDO CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH MACCHINE A FLUIDO STADIO R.5 * 4 4 fs f 4 ( ) L MACCHINE A FLUIDO STADIO R.5 ϑ S ϑr a tan ( ) ξ.5 ( ϑ / 9) / 4 ( ) 3 MACCHINE A FLUIDO

Διαβάστε περισσότερα

Cellular Physiology and Biochemistry

Cellular Physiology and Biochemistry Original Paper 2016 The Author(s). 2016 Published The Author(s) by S. Karger AG, Basel Published online: November 25, 2016 www.karger.com/cpb Published by S. Karger AG, Basel 486 www.karger.com/cpb Accepted:

Διαβάστε περισσότερα

Clinical Assays TM ESTRADIOL-2

Clinical Assays TM ESTRADIOL-2 Clinical Assays TM ESTRADIOL-2 English... p. 1 Italiano... p. 14 Français... p. 28 Deutsch...p. 42 Español... p. 56 Svenska... p. 70 Ελληνικά...s. 83 RADIOIMMUNOASSAY FOR THE DIRECT DETERMINATION OF 17

Διαβάστε περισσότερα

Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit. MyBioSource.com

Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit. MyBioSource.com Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit Catalog Number. For the quantitative determination of mouse apolipoprotein A1 (Apo-A1) concentrations in serum, plasma, cell culture supernates, tissue homogenates,

Διαβάστε περισσότερα

ST5224: Advanced Statistical Theory II

ST5224: Advanced Statistical Theory II ST5224: Advanced Statistical Theory II 2014/2015: Semester II Tutorial 7 1. Let X be a sample from a population P and consider testing hypotheses H 0 : P = P 0 versus H 1 : P = P 1, where P j is a known

Διαβάστε περισσότερα

ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ. Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο. την απόκτηση του διπλώματος

ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ. Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο. την απόκτηση του διπλώματος ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΣ ΔΙΚΤΥΩΝ ΔΙΑΝΟΜΗΣ Η εργασία υποβάλλεται για τη μερική κάλυψη των απαιτήσεων με στόχο την απόκτηση του διπλώματος «Οργάνωση και Διοίκηση Βιομηχανικών Συστημάτων με εξειδίκευση στα Συστήματα Εφοδιασμού

Διαβάστε περισσότερα

UDZ Swirl diffuser. Product facts. Quick-selection. Swirl diffuser UDZ. Product code example:

UDZ Swirl diffuser. Product facts. Quick-selection. Swirl diffuser UDZ. Product code example: UDZ Swirl diffuser Swirl diffuser UDZ, which is intended for installation in a ventilation duct, can be used in premises with a large volume, for example factory premises, storage areas, superstores, halls,

Διαβάστε περισσότερα

(1) Describe the process by which mercury atoms become excited in a fluorescent tube (3)

(1) Describe the process by which mercury atoms become excited in a fluorescent tube (3) Q1. (a) A fluorescent tube is filled with mercury vapour at low pressure. In order to emit electromagnetic radiation the mercury atoms must first be excited. (i) What is meant by an excited atom? (1) (ii)

Διαβάστε περισσότερα

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007 Οδηγίες: Να απαντηθούν όλες οι ερωτήσεις. Αν κάπου κάνετε κάποιες υποθέσεις να αναφερθούν στη σχετική ερώτηση. Όλα τα αρχεία που αναφέρονται στα προβλήματα βρίσκονται στον ίδιο φάκελο με το εκτελέσιμο

Διαβάστε περισσότερα

Phys460.nb Solution for the t-dependent Schrodinger s equation How did we find the solution? (not required)

Phys460.nb Solution for the t-dependent Schrodinger s equation How did we find the solution? (not required) Phys460.nb 81 ψ n (t) is still the (same) eigenstate of H But for tdependent H. The answer is NO. 5.5.5. Solution for the tdependent Schrodinger s equation If we assume that at time t 0, the electron starts

Διαβάστε περισσότερα

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium ReninEASIA KAP1531 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 131029/3 en Read entire protocol before use. RENINEASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in

Διαβάστε περισσότερα

Instruction Execution Times

Instruction Execution Times 1 C Execution Times InThisAppendix... Introduction DL330 Execution Times DL330P Execution Times DL340 Execution Times C-2 Execution Times Introduction Data Registers This appendix contains several tables

Διαβάστε περισσότερα

Un calcolo deduttivo per la teoria ingenua degli insiemi. Giuseppe Rosolini da un università ligure

Un calcolo deduttivo per la teoria ingenua degli insiemi. Giuseppe Rosolini da un università ligure Un calcolo deduttivo per la teoria ingenua degli insiemi Giuseppe Rosolini da un università ligure Non è quella in La teoria ingenua degli insiemi Ma è questa: La teoria ingenua degli insiemi { < 3} è

Διαβάστε περισσότερα

Section 9.2 Polar Equations and Graphs

Section 9.2 Polar Equations and Graphs 180 Section 9. Polar Equations and Graphs In this section, we will be graphing polar equations on a polar grid. In the first few examples, we will write the polar equation in rectangular form to help identify

Διαβάστε περισσότερα

«ΑΓΡΟΤΟΥΡΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΤΟΠΙΚΗ ΑΝΑΠΤΥΞΗ: Ο ΡΟΛΟΣ ΤΩΝ ΝΕΩΝ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΩΝ ΣΤΗΝ ΠΡΟΩΘΗΣΗ ΤΩΝ ΓΥΝΑΙΚΕΙΩΝ ΣΥΝΕΤΑΙΡΙΣΜΩΝ»

«ΑΓΡΟΤΟΥΡΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΤΟΠΙΚΗ ΑΝΑΠΤΥΞΗ: Ο ΡΟΛΟΣ ΤΩΝ ΝΕΩΝ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΩΝ ΣΤΗΝ ΠΡΟΩΘΗΣΗ ΤΩΝ ΓΥΝΑΙΚΕΙΩΝ ΣΥΝΕΤΑΙΡΙΣΜΩΝ» I ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΣΧΟΛΗ ΝΟΜΙΚΩΝ ΟΙΚΟΝΟΜΙΚΩΝ ΚΑΙ ΠΟΛΙΤΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΤΜΗΜΑ ΟΙΚΟΝΟΜΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΣΤΗΝ «ΔΙΟΙΚΗΣΗ ΚΑΙ ΟΙΚΟΝΟΜΙΑ» ΚΑΤΕΥΘΥΝΣΗ: ΟΙΚΟΝΟΜΙΚΗ

Διαβάστε περισσότερα

ΓΕΩΠΟΝΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΤΜΗΜΑ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΤΡΟΦΗΣ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΟΥ

ΓΕΩΠΟΝΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΤΜΗΜΑ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΤΡΟΦΗΣ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΟΥ ΓΕΩΠΟΝΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΤΜΗΜΑ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΤΡΟΦΗΣ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΟΥ Πρόγραμμα Μεταπτυχιακών Σπουδών «Επιστήμη και Τεχνολογία Τροφίμων και Διατροφή του Ανθρώπου» Κατεύθυνση: «Διατροφή, Δημόσια

Διαβάστε περισσότερα

2 Composition. Invertible Mappings

2 Composition. Invertible Mappings Arkansas Tech University MATH 4033: Elementary Modern Algebra Dr. Marcel B. Finan Composition. Invertible Mappings In this section we discuss two procedures for creating new mappings from old ones, namely,

Διαβάστε περισσότερα

Inverse trigonometric functions & General Solution of Trigonometric Equations. ------------------ ----------------------------- -----------------

Inverse trigonometric functions & General Solution of Trigonometric Equations. ------------------ ----------------------------- ----------------- Inverse trigonometric functions & General Solution of Trigonometric Equations. 1. Sin ( ) = a) b) c) d) Ans b. Solution : Method 1. Ans a: 17 > 1 a) is rejected. w.k.t Sin ( sin ) = d is rejected. If sin

Διαβάστε περισσότερα

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΩΣ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΔΙΟΙΚΗΣΗ ΤΗΣ ΥΓΕΙΑΣ ΤΕΙ ΠΕΙΡΑΙΑ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ

Διαβάστε περισσότερα

PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities

PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities tanθ = sinθ cosθ cotθ = cosθ sinθ BASIC IDENTITIES cscθ = 1 sinθ secθ = 1 cosθ cotθ = 1 tanθ PYTHAGOREAN IDENTITIES sin θ + cos θ =1 tan θ +1= sec θ 1 + cot

Διαβάστε περισσότερα

Math221: HW# 1 solutions

Math221: HW# 1 solutions Math: HW# solutions Andy Royston October, 5 7.5.7, 3 rd Ed. We have a n = b n = a = fxdx = xdx =, x cos nxdx = x sin nx n sin nxdx n = cos nx n = n n, x sin nxdx = x cos nx n + cos nxdx n cos n = + sin

Διαβάστε περισσότερα

25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971

25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971 25OH Vitamin D Total ELISA KAP1971 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 14512/2 en US: For in-vitro diagnostic use only. I. INTENDED USE Read entire protocol

Διαβάστε περισσότερα

Areas and Lengths in Polar Coordinates

Areas and Lengths in Polar Coordinates Kiryl Tsishchanka Areas and Lengths in Polar Coordinates In this section we develop the formula for the area of a region whose boundary is given by a polar equation. We need to use the formula for the

Διαβάστε περισσότερα

In vitro και in vivo φαρμακοκινητική ανάλυση των παραγώγων ανθρακινόνης σε φυτικά σκευάσματα

In vitro και in vivo φαρμακοκινητική ανάλυση των παραγώγων ανθρακινόνης σε φυτικά σκευάσματα ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΤΜΗΜΑ ΦΑΡΜΑΚΕΥΤΙΚΗΣ ΤΟΜΕΑΣ ΦΑΡΜΑΚΟΓΝΩΣΙΑΣ ΦΑΡΜΑΚΟΛΟΓΙΑΣ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΚΑΤΕΥΘΥΝΣΗ ΦΑΡΜΑΚΟΛΟΓΙΑ ΚΑΙ ΘΕΡΑΠΕΥΤΙΚΗ In vitro και in vivo φαρμακοκινητική

Διαβάστε περισσότερα

Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές

Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές From law to practice-praxis Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές Το πρόγραμμα συγχρηματοδοτείται από την ΕΕ Συγχρηματοδοτείται από την Ευρωπαϊκή Ένωση Γνωρίζετε τι προβλέπει η Οδηγία 2002/14; Sa che cosa

Διαβάστε περισσότερα

Ειδικό πρόγραμμα ελέγχου για τον ιό του Δυτικού Νείλου και την ελονοσία, ενίσχυση της επιτήρησης στην ελληνική επικράτεια (MIS 365280)

Ειδικό πρόγραμμα ελέγχου για τον ιό του Δυτικού Νείλου και την ελονοσία, ενίσχυση της επιτήρησης στην ελληνική επικράτεια (MIS 365280) «Ειδικό πρόγραμμα ελέγχου για τον ιό του Δυτικού Νείλου και την ελονοσία, ενίσχυση της επιτήρησης στην ελληνική επικράτεια» Παραδοτέο Π1.36 Έκδοση ενημερωτικών φυλλαδίων Υπεύθυνος φορέας: Κέντρο Ελέγχου

Διαβάστε περισσότερα

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

Renin-EASIA KAP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium ReninEASIA KAP1531 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 121009/1 en Read entire protocol before use. RENINEASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in

Διαβάστε περισσότερα

1) Abstract (To be organized as: background, aim, workpackages, expected results) (300 words max) Το όριο λέξεων θα είναι ελαστικό.

1) Abstract (To be organized as: background, aim, workpackages, expected results) (300 words max) Το όριο λέξεων θα είναι ελαστικό. UΓενικές Επισημάνσεις 1. Παρακάτω θα βρείτε απαντήσεις του Υπουργείου, σχετικά με τη συμπλήρωση της ηλεκτρονικής φόρμας. Διευκρινίζεται ότι στα περισσότερα θέματα οι απαντήσεις ήταν προφορικές (τηλεφωνικά),

Διαβάστε περισσότερα

Statistical Inference I Locally most powerful tests

Statistical Inference I Locally most powerful tests Statistical Inference I Locally most powerful tests Shirsendu Mukherjee Department of Statistics, Asutosh College, Kolkata, India. shirsendu st@yahoo.co.in So far we have treated the testing of one-sided

Διαβάστε περισσότερα

Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing

Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing ΕΛΛΗΝΙΚΗ ΔΗΜΟΚΡΑΤΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΡΗΤΗΣ Μηχανική Μάθηση Hypothesis Testing Γιώργος Μπορμπουδάκης Τμήμα Επιστήμης Υπολογιστών Procedure 1. Form the null (H 0 ) and alternative (H 1 ) hypothesis 2. Consider

Διαβάστε περισσότερα

Example Sheet 3 Solutions

Example Sheet 3 Solutions Example Sheet 3 Solutions. i Regular Sturm-Liouville. ii Singular Sturm-Liouville mixed boundary conditions. iii Not Sturm-Liouville ODE is not in Sturm-Liouville form. iv Regular Sturm-Liouville note

Διαβάστε περισσότερα

Statistics 104: Quantitative Methods for Economics Formula and Theorem Review

Statistics 104: Quantitative Methods for Economics Formula and Theorem Review Harvard College Statistics 104: Quantitative Methods for Economics Formula and Theorem Review Tommy MacWilliam, 13 tmacwilliam@college.harvard.edu March 10, 2011 Contents 1 Introduction to Data 5 1.1 Sample

Διαβάστε περισσότερα

The Simply Typed Lambda Calculus

The Simply Typed Lambda Calculus Type Inference Instead of writing type annotations, can we use an algorithm to infer what the type annotations should be? That depends on the type system. For simple type systems the answer is yes, and

Διαβάστε περισσότερα

Esercizi sui circoli di Mohr

Esercizi sui circoli di Mohr Esercizi sui circoli di Mohr ESERCIZIO A Sia assegnato lo stato tensionale piano nel punto : = -30 N/mm² = 30 N/mm² x = - N/mm² 1. Determinare le tensioni principali attraverso il metodo analitico e mediante

Διαβάστε περισσότερα

RENIN-IRMA KIP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

RENIN-IRMA KIP1531. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium RENINIRMA KIP1531 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 100712/1 en Read entire protocol before use. RENINIRMA I. INTENDED USE Immunoradiometric assay kit for the in

Διαβάστε περισσότερα

ελτίο δεδοµένων ασφαλείας σύµφωνα µε το 1907/2006/EK, Άρθρο 31

ελτίο δεδοµένων ασφαλείας σύµφωνα µε το 1907/2006/EK, Άρθρο 31 Σελίδα: 1/6 ΤΜΗΜΑ 1: Στοιχεία ουσίας/παρασκευάσµατος και εταιρείας/επιχείρησης 1.1 Αναγνωριστικός κωδικός προϊόντος Αριθµός προϊόντος: 135571 Aριθµός CAS: 112926-00-8 Αριθµός ΕC: 231-545-4 Αριθµούς καταχώρισης

Διαβάστε περισσότερα

Right Rear Door. Let's now finish the door hinge saga with the right rear door

Right Rear Door. Let's now finish the door hinge saga with the right rear door Right Rear Door Let's now finish the door hinge saga with the right rear door You may have been already guessed my steps, so there is not much to describe in detail. Old upper one file:///c /Documents

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ Πτυχιακή εργασία ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΥΠΕΡΗΧΩΝ ΣΤΗΝ LISTERIA GRAYI ΣΤΟ ΓΑΛΑ: ΕΠΙΒΙΩΣΗ ΚΑΙ ΦΥΣΙΚΟΧΗΜΙΚΕΣ ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ. Άρτεμις

Διαβάστε περισσότερα

Areas and Lengths in Polar Coordinates

Areas and Lengths in Polar Coordinates Kiryl Tsishchanka Areas and Lengths in Polar Coordinates In this section we develop the formula for the area of a region whose boundary is given by a polar equation. We need to use the formula for the

Διαβάστε περισσότερα

DiaSorin Inc. 1951 Northwestern Avenue, P.O. Box 285, Stillwater, MN 55082-0285 U.S.A. Phone: 651-439-9710 - Fax: 651-351-5669

DiaSorin Inc. 1951 Northwestern Avenue, P.O. Box 285, Stillwater, MN 55082-0285 U.S.A. Phone: 651-439-9710 - Fax: 651-351-5669 DiaSorin Inc. 1951 Northwestern Avenue, P.O. Box 285, Stillwater, MN 55082-0285 U.S.A. Phone: 651-439-9710 - Fax: 651-351-5669 IRMA-mat Ferritin Instructions for Use REF 324.511 100 tests English IVD For

Διαβάστε περισσότερα

Tipologie installative - Installation types Types d installation - Die einbauanweisungen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης

Tipologie installative - Installation types Types d installation - Die einbauanweisungen Tipos de instalación - Τυπολογίες εγκατάστασης Types d installation Die einbauanweisungen Tipos de instalación Τυπολογίες εγκατάστασης AMPADE MOOCROMATICHE VIMAR DIMMERABII A 0 V~ MOOCHROME DIMMABE AMP VIMAR 0 V~ AMPE MOOCHROME VIMAR DIMMABE 0 V~ EUCHTE

Διαβάστε περισσότερα

Biodiesel quality and EN 14214:2012

Biodiesel quality and EN 14214:2012 3η Ενότητα: «Αγορά Βιοκαυσίμων στην Ελλάδα: Τάσεις και Προοπτικές» Biodiesel quality and EN 14214:2012 Dr. Hendrik Stein Pilot Plant Manager, ASG Analytik Content Introduction Development of the Biodiesel

Διαβάστε περισσότερα

Πτυχιακή Εργασία Η ΠΟΙΟΤΗΤΑ ΖΩΗΣ ΤΩΝ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΣΤΗΘΑΓΧΗ

Πτυχιακή Εργασία Η ΠΟΙΟΤΗΤΑ ΖΩΗΣ ΤΩΝ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΣΤΗΘΑΓΧΗ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΥΓΕΙΑΣ Πτυχιακή Εργασία Η ΠΟΙΟΤΗΤΑ ΖΩΗΣ ΤΩΝ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΣΤΗΘΑΓΧΗ Νικόλας Χριστοδούλου Λευκωσία, 2012 ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΥΓΕΙΑΣ

Διαβάστε περισσότερα

Second Order RLC Filters

Second Order RLC Filters ECEN 60 Circuits/Electronics Spring 007-0-07 P. Mathys Second Order RLC Filters RLC Lowpass Filter A passive RLC lowpass filter (LPF) circuit is shown in the following schematic. R L C v O (t) Using phasor

Διαβάστε περισσότερα

ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ. «Προστασία ηλεκτροδίων γείωσης από τη διάβρωση»

ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ. «Προστασία ηλεκτροδίων γείωσης από τη διάβρωση» ΑΡΙΣΤΟΤΕΛΕΙΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΘΕΣΣΑΛΟΝΙΚΗΣ ΠΟΛΥΤΕΧΝΙΚΗ ΣΧΟΛΗ ΤΜΗΜΑ ΗΛΕΚΤΡΟΛΟΓΩΝ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΚΑΙ ΜΗΧΑΝΙΚΩΝ ΥΠΟΛΟΓΙΣΤΩΝ ΤΟΜΕΑΣ ΗΛΕΚΤΡΙΚΗΣ ΕΝΕΡΓΕΙΑΣ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΥΨΗΛΩΝ ΤΑΣΕΩΝ ΔΙΠΛΩΜΑΤΙΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ «Προστασία ηλεκτροδίων

Διαβάστε περισσότερα