IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

Μέγεθος: px
Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium"

Transcript

1 IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium

2 : /2

3 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro quantitative measurement of human interleukin8 (IL8) in plasma. II. GENERAL INFORMATION A. Proprietary name : DIAsource IL8EASIA Kit B. Catalogue number : KAP1301 : 96 tests C. Manufactured by : DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgium. For technical assistance or ordering information contact : Tel : +32 (0) Fax : +32 (0) III. CLINICAL BACKGROUND A. Biological activities IL8 (also known as NAP1 for Neutrophilactivating peptide) is a chemoattractant protein for neutrophils. This cytokine belongs to a new family of chemotactic peptides called "chemokines". This proinflammatory mediator is secreted by different cells such as monocytes, neutrophils, endothelial cells, fibroblast after activation, and by mitogenstimulated T lymphocytes. IL8 is a key cytokine that has been found in scales of psoriasis patients, in synovial fluid of patients suffering from rheumatoid arthritis and gout. The role of IL8 in the recruitment of neutrophils in the lung during ARDS has also been suggested. B. Clinical application The IL8 level in the septic shock patients was found to correlate with mortality and in acute graft liver rejection the IL8 serum levels were reported to have markedly increased. The level of IL8 in these or other conditions may prove to be important in characterizing the progress of these disease conditions.

4 IV. PRINCIPLES OF THE METHOD VI. SUPPLIES NOT PROVIDED The DIAsource IL8EASIA is a solid phase Enzyme Amplified Sensitivity Immunoassay performed on microtiterplate. The assay uses monoclonal antibodies (Ms) directed against distinct epitopes of IL8. Calibrators and samples react with the capture monoclonal antibody (M 1) coated on microtiter well and with a monoclonal antibody (M 2) labelled with horseradish peroxidase (HRP). After an incubation period allowing the formation of a sandwich: coated M 1 human IL8 M 2 HRP, the microtiterplate is washed to remove unbound enzyme labelled antibody. Bound enzymelabelled antibody is measured through a chromogenic reaction. Chromogenic solution (TMB) is added and incubated. The reaction is stopped with the addition of Stop Solution and the microtiterplate is then read at the appropriate wavelength. The amount of substrate turnover is determined colourimetrically by measuring the absorbance, which is proportional to the IL8 concentration. A calibration curve is plotted and IL8 concentration in samples is determined by interpolation from the calibration curve. The use of the EASIA reader (linearity up to 3 OD units) and a sophisticated data reduction method (polychromatic data reduction) result in a high sensitivity in the low range and in an extended calibration range. V. REAGENTS PROVIDED Reagents Microtiterplate with 96 anti IL8 (monoclonal antibodies) coated wells 96 tests Kit Color Code Reconstitution 96 wells blue Ready for use The following material is required but not provided in the kit: 1. High quality distilled water 2. Pipettes for delivery of: 50 μl, µl, 200 μl, 1 ml and 10 ml (the use of accurate pipettes with disposable plastic tips is recommended) 3. Vortex mixer 4. Magnetic stirrer 5. Horizontal microtiterplate shaker capable of 700 rpm ± rpm 6. Washer for Microtiterplates 7. Microtiterplate reader capable of reading at 450 nm, 490 nm and 650 nm (in case of polychromatic reading) or capable of reading at 450 nm and 650 nm (bichromatic reading) 8. Optional equipment: The ELISAAID necessary to read the plate according to polychromatic reading (see paragraph XI.A.) can be purchased from Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. REAGENT PREPARATION A. Calibrators: Reconstitute calibrators with 1 ml distilled water. B. Controls: Reconstitute the controls with 1 ml distilled water. C. Specimen Diluent: Reconstitute specimen diluent to the volume specified on the vial label with distilled water D. Working Wash solution: Prepare an adequate volume of Working Wash solution by adding 199 volumes of distilled water to 1 volume of Wash Solution (200x). Use a magnetic stirrer to homogenize. Discard unused Working Wash solution at the end of the day. E. Revelation Solution: pipette 0.2 ml of the chromogen TMB into one of the vials of substrate buffer (H 2O 2 in acetate/citrate buffer). Extemporaneous preparation is recommended. HRP 1 vial 6 ml red Ready for use VIII. STORAGE AND EXPIRATION DATING OF REAGENTS Conjugate: HRP labelled antiil8 (monoclonal antibodies) in TRISMaleate buffer with bovine serum albumin and thymol CAL Calibrator N = 0 to 5 (see exact values on vial labels) in human serum with benzamidin and thymol DIL Specimen Diluent: human serum with benzamidin and thymol INC Incubation Buffer: Phosphate buffer with bovine serum albumin and thymol WASH Wash Solution (TrisHCl) CONTROL Controls N = 1 or 2 in human serum with thymol CHROM N TMB SPE N Chromogen TMB (Tetramethylbenzydine) in Dimethylformamide 6 vials lyophil. 2 vials lyophil. 1 vial 11 ml 1 vial 10 ml 2 vials lyophil. 1 vial 1 ml yellow black black brown silver Add 1 ml distilled water Add distilled water (see on the label for the exact volume) Ready for use Dilute 200 x with distilled water (use a magnetic stirrer). Add 1 ml distilled water green Dilute 0.2 ml into 1 vial of substrate buffer Before opening or reconstitution, all kits components are stable until the expiry date, indicated on the vial label, if kept at 2 to 8 C. Unused strips must be stored, at 28 C, in a sealed bag containing a desiccant until expiration date. After reconstitution, calibrators, controls and Specimen Diluent are stable for 4 days at 2 to 8 C. For longer storage periods, aliquots should be made and kept at 20 C for maximum 2 months. Avoid successive freeze thaw cycles. The concentrated Wash Solution is stable at room temperature until expiration date. Freshly prepared Working Wash solution should be used on the same day. After its first use, the conjugate is stable until expiry date, if kept in the original wellclosed vial at 2 to 8 C. The freshly prepared revelation solution is stable, before use, for maximum 15 minutes at room temperature and must be discarded afterwards. Alterations in physical appearance of kit reagents may indicate instability or deterioration. IX. SPECIMEN COLLECTION AND PREPARATION Avoid subsequent freeze thaw cycles. Prior to use, all samples should be at room temperature. It is recommended to vortex the samples before use. Sampling conditions can affect values, therefore, strict precautions have to be taken during sampling to avoid impurities contained in sampling materials that would stimulate IL8 production by blood cells and thus falsely increase plasma IL8 values. Collection tubes must be pyrogenfree. Plasma can be collected on sterile EDTA and rapidly separated after centrifugation. The use of heparin tubes is discouraged as batches of heparin are often contaminated with pyrogen. X. PROCEDURE SUB Substrate buffer: H 2O 2 in acetate / citrate buffer STOP Stop Solution: H 2SO 4 1.8N 3 vials 21 ml 1 vial 6 ml white black Ready for use Ready for use Note: 1. Use Specimen Diluent for sample dilutions pg of the calibrator preparation is equivalent to 1 mu of the NIBSC 1 st IS 89/520. A. Handling notes Do not use the kit or components beyond expiry date. Do not mix materials from different kit lots. Bring all the reagents to room temperature prior to use. Thoroughly mix all reagents and samples by gentle agitation or swirling. Perform calibrators, controls and samples in duplicate. Vertical alignment is recommended. Use a clean plastic container to prepare the Wash Solution. In order to avoid crosscontamination, use a clean disposable pipette tip for the addition of each reagent and sample. For the dispensing of the Revelation Solution and the Stop Solution avoid pipettes with metal parts. High precision pipettes or automated pipetting equipment will improve the precision.

5 Respect the incubation times. To avoid drift, the time between pipetting of the first calibrator and the last sample must be limited to the time mentioned in section XIII paragraph E (Time delay). Prepare a calibration curve for each run, do not use data from previous runs. The Revelation Solution should be colourless. If a blue colour develops within a few minutes after preparation, this indicates that the reagent is unusable, and must be discarded. Dispense the Revelation Solution within 15 minutes following the washing of the microtiterplate. During incubation with Revelation Solution, avoid direct sunlight on the microtiterplate. B. Procedure 1. Select the required number of strips for the run. The unused strips should be resealed in the bag with a desiccant and stored at 28 C. 2. Secure the strips into the holding frame. 3. Pipette µl of Incubation Buffer into all the wells 4. Pipette µl of each Calibrator, Control and Sample into the appropriate wells. 5. Pipette 50 µl of antiil8hrp conjugate into all the wells. 6. Incubate for 2 hours at room temperature on a horizontal shaker set at 700 rpm ± rpm. 7. Aspirate the liquid from each well. 8. Wash the plate 3 times by: Dispensing 0.4 ml of Wash Solution into each well Aspirating the content of each well 9. Pipette 200 µl of the freshly prepared revelation solution into each well within 15 minutes following the washing step. 10. Incubate the microtiterplate for 30 minutes at room temperature on a horizontal shaker set at 700 rpm ± rpm, avoid direct sunlight. 11. Pipette 50 µl of Stop solution into each well. 12. Read the absorbencies at 450 nm and 490 nm (reference filter 630 nm or 650 nm) within 3 hours and calculate the results as described in section XI. XII. TYPICAL DATA The following data are for illustration only and should never be used instead of the real time calibration curve. IL8EASIA Calibrator 0 pg/ml 40.4 pg/ml 58 pg/ml 156 pg/ml 551 pg/ml 1845 pg/ml XIII. PERFORMANCE AND LIMITATIONS OD units Polychromatic model A. Detection Limit Twenty zero calibrators were assayed along with a set of other calibrators. The detection limit, defined as the apparent concentration two standard deviations above the average OD at zero binding, was 1,1 pg/ml. B. Specificity No significant crossreaction was observed in presence of 50 ng of IL1α, IL1β, IL1ra, IL2, IL3, IL4, IL6, IL7, IL10, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF, RANTES, PF4, βtg, GRO, IP10 and SCF. This IL8 assay is specific for human natural and recombinant IL8 and is able to recognize the 72 a.a. form of IL8. C. Precision INTRA ASSAY Serum N <X> ± SD CV (%) INTER ASSAY Serum N <X> ± SD CV (%) XI. CALCULATION OF RESULTS A. Polychromatic Reading: 1. In this case, the ELISAAID software will do the data processing. 2. The plate is first read at 450 nm against a reference filter set at 650 nm (or 630 nm). 3. A second reading is performed at 490 nm against the same reference filter. 4. The ELISAAID Software will drive the reader automatically and will integrate both readings into a polychromatic model. This technique can generate OD s up to The principle of polychromatic data processing is as follows: Xi = OD at 450 nm Yi = OD at 490 nm Using a standard unweighted linear regression, the parameters A & B are calculated : Y = A*X + B If Xi < 3 OD units, then X calculated = Xi If Xi > 3 OD units, then X calculated = (YiB)/A A 4parameter logistic curve fitting is used to build up the calibration curve. The IL8 concentration in samples is determined by interpolation on the calibration curve. B. Bichromatic Reading 1. Read the plate at 450 nm against a reference filter set at 650 nm (or 630 nm). 2. Calculate the mean of duplicate determinations. 3. On semilogarithmic or linear graph paper plot the OD values (ordinate) for each calibrator against the corresponding concentration of IL8 (abscissa) and draw a calibration curve through the calibrator points by connecting the plotted points with straight lines. 4. Read the concentration for each control and sample by interpolation on the calibration curve. 5. Computer assisted data reduction will simplify these calculations. If automatic result processing is used, a 4parameter logistic function curve fitting is recommended. A B ± ± A B SD: Standard Deviation; CV: Coefficient of variation D. Accuracy Sample Added IL8 Plasma RECOVERY TEST DILUTION TEST Recovered IL Sample Dilution Theoretical Concent. Plasma 1/1 1/2 1/4 1/8 1/ Samples were diluted with Specimen Diluent. 150 ± ± 58 Recovery (%) Measured Concent

6 E. Time delay between last calibrator and sample dispensing As shown hereafter, assay results remain accurate even when a sample is dispensed 30 minutes after the calibrators have been added to the coated wells. TIME DELAY sample 0 min 10 min 20 min 30 min 40 min F. Hook effect A sample spiked with IL8 up to 0.5 µg/ml gives higher OD s than the last calibrator point. XIV. INTERNAL QUALITY CONTROL XVII. BIBLIOGRAPHY 1. MATSUHUMA K., et al. (1989). Purification and characterization of a novel monocyte chemotactic and activating factor produced by a human myelomonocitic cell line. J. Exp. Med., 169 : BAGGIOLINI M., et al. (1989). Neutrophilactivating peptide1/interleukin8, a novel cytokine that activates neutrophils. J. Clin. Invest., 84 : HACK C., et al. (1992). Interleukin8 in sepsis : relation to shock and inflammatory mediators. Infect. Immun., 60 : TILG H., et al. (1992). Interleukin8 serum concentrations after liver transplantation. Transplant, 53 : If the results obtained for Control 1 and/or Control 2 are not within the range specified on the vial label, the results cannot be used unless a satisfactory explanation for the discrepancy has been given. If desirable, each laboratory can make its own pools of control samples, which should be kept frozen in aliquots. Controls that contain azide will interfere with the enzymatic reaction and cannot be used. Acceptance criteria for the difference between the duplicate results of the samples should rely on Good Laboratory Practises It is recommended that controls be routinely assayed as unknown samples to measure assay variability. The performance of the assay should be monitored with quality control charts of the controls. It is good practise to check visually the curve fit selected by the computer. XVIII. SUMMARY OF THE PROTOCOL Incubation Buffer Calibrators (05) Samples, Controls AntiIL8 HRP conjugate CALIBRATORS (µl) 50 SAMPLE(S) CONTROLS (µl) 50 XV. REFERENCE INTERVALS These values are given only for guidance; each laboratory should establish its own normal range of values. For guidance, the results of 36 EDTA plasma samples from apparently healthy persons with low CRP levels, ranged between 0 and 132 pg/ml. Among them, 34 samples obtained values below 50 pg/ml. XVI. PRECAUTIONS AND WARNINGS Incubate for 2 hours at room temperature with continuous shaking at 700 rpm. Aspirate the contents of each well. Wash 3 times with 400 µl of Wash Solution and aspirate. Revelation Solution Incubate for 30 min at room temperature with continuous shaking at 700 rpm. Stop Solution Read on a microtiterplate reader and record the absorbance of each well at 450 nm (and 490 nm) versus 630 (or 650 nm) Safety For in vitro diagnostic use only. The human blood components included in this kit have been tested by European approved and/or FDA approved methods and found negative for HBsAg, anti HCV, antihiv1 and 2. No known method can offer complete assurance that human blood derivatives will not transmit hepatitis, AIDS or other infections. Therefore, handling of reagents, serum or plasma specimens should be in accordance with local safety procedures. All animal products and derivatives have been collected from healthy animals. Bovine components originate from countries where BSE has not been reported. Nevertheless, components containing animal substances should be treated as potentially infectious. Avoid any skin contact with all reagents, Stop Solution contains H 2SO 4, the chromogen contains TMB in Dimethylformamide, Substrate buffer contains H 2O 2. In case of contact, wash thoroughly with water. Do not smoke, drink, eat or apply cosmetics in the working area. Do not pipette by mouth. Use protective clothing and disposable gloves. DIAsource Catalogue Nr : KAP1301 P.I. Number : /en Revision nr : /1 Revision date :

7 it Prima di utilizzare il kit leggere attentamente le istruzioni per l uso IL8EASIA I. USO DEL KIT Kit immunoenzimetrico per la determinazione quantitativa in vitro dell interleuchina8 umana (IL8) in plasma. II. INFORMAZIONI DI CARATTERE GENERALE A. Nome commerciale: DIAsource IL8EASIA Kit B. Numero di catalogo: KAP1301 : 96 tests C. Prodotto da: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgio. Per informazioni tecniche o su come ordinare il prodotto contattare: Tel: +32 (0) Fax: +32 (0) III. INFORMAZIONI CLINICHE A. Attività biologiche La IL8, nota anche come NAP1 (Peptide Attivante i Neutrofili), è una proteina chemioattraente per i neutrofili. Tale citochina appartiene ad una nuova famiglia di peptidi chemiotattici chiamati chemochine. È un mediatore proinfiammatorio che viene secreto da differenti tipi di cellule quali monociti, neutrofili, cellule endoteliali, fibroblasti attivati e linfociti T fitogenostimolati. La IL8 è una citochina chiave la cui presenza è stata rilevata nelle scaglie di pazienti affetti da psoriasi e nel fluido sinoviale di soggetti affetti da artrite reumatoide e gotta. È stato altresì suggerito un ruolo attivo della IL8 nel reclutamento di neutrofili nel polmone di soggetti con ARDS. B. Applicazione clinica In pazienti con shock settico, i livelli di IL8 sono risultati correlati alla mortalità, e in caso di rigetto acuto dopo trapianto di fegato sono stati evidenziati livelli di IL8 marcatamente aumentati. La misurazione dei livelli di IL8 nei casi succitati e in altre condizioni potrebbe dimostrare una sua validità nella valutazione della progressione della malattia.

8 IV. PRINCIPIO DEL METODO DIAsource IL8EASIA è un immunosaggio a sensibilità amplificata a fase solida eseguito su piastre di microtitolazione. Il dosaggio utilizza anticorpi monoclonali (Mabs) diretti contro epitopi distinti dell IL8. I calibratori e i campioni reagiscono con la cattura dell anticorpo monoclonale (M 1) che riveste il pozzetto di microtitolazione e con un anticorpo monoclonale (M 2) marcato con horseradish perossidasi (HRP). Dopo un periodo di incubazione che consenta la formazione di un sandwich: M 1 di rivestimento IL8 umana M 2 HRP, la piastra di microtitolazione viene lavata per rimuovere l anticorpo marcato con enzima non legato. L anticorpo marcato con enzima non legato viene misurato attraverso una reazione cromogenica. Si procede quindi con l aggiunta della soluzione cromogena (TMB) e successiva incubazione. La reazione viene interrotta con l aggiunta di Soluzione di arresto; quindi la piastra di microtitolazione viene letta alla lunghezza d onda adeguata. La quantità di turnover del substrato viene determinata colorimetricamente misurando l assorbanza che è proporzionale alla concentrazione di IL8. Viene tracciata una curva di calibrazione e la concentrazione IL8 nei campioni viene determinata per interpolazione dalla curva di calibrazione. L utilizzo del lettore EASIA (linearità fino a 3 unità OD) associato all impiego di un sofisticato metodo di riduzione dati (riduzione dati policromatica) garantisce un elevata sensibilità nel range basso dei valori e un esteso range di calibrazione. V. REATTIVI FORNITI Reattivi Coniugato: antiil8 (anticorpi monoclonali) marcato con HRP in tampone TRISmaleato con albumina di siero bovino e timolo. Calibratore N= 0 5 (le concentrazioni esatte degli calibratore sono riportate sulle etichette dei flaconi), in siero umano con benzamidina e timolo. Diluente del Campione: siero umano con benzamidina e timolo. Tampone di Incubazione: Tampone fosfato con albumina di siero bovino e timolo. Tampone di lavaggio (TRIS HCl) Controlli: N = 1 o 2, in siero umano con timolo Soluzione Cromogena TMB (tetrametilbenzidina) in Dimetilformammide Tampone del Substrato: H 2O 2 in tampone acetato / citrato Soluzione di arresto: H 2SO 4 1.8N Note: CAL WASH DIL INC CONTROL CHROM SUB STOP Piastra di microtitolazione con 96 pozzetti, rivestiti anti IL8 (anticorpi monoclonali) N HRP SPE N TMB Kit da 96 test 96 pozzetti 1 flacone 6 ml 6 flaconi liofiliz. 2 flacone liofiliz. 1 flacone 11 ml 1 flacone 10 ml 2 flaconi liofiliz. 1 flacone 1 ml 3 flaconi 21 ml 1 flacone 6 ml Codice colore Blu Rosso Volume di ricostituzione Pronte per l uso Pronte per l uso Giallo Aggiungere 1 ml di nero nero Bruno Argento acqua distillata Aggiungere acqua distillata (vedi etichetta per volumi esatti) Pronte per l uso Diluire 200 x con acqua distillata usando un agitatore magnetico). Aggiungere 1 ml di acqua distillata Verde Diluire 0,2 ml in 1 flacone di tampone del substrato Bianco nero Pronte per l uso Pronto per l uso 1. Usare Diluente del Campione per diluire i campioni pg della preparazione standard è equivalente a 1 mu dell NIBSC 1 st IS 89/520. VI. REATTIVI NON FORNITI Il seguente materiale è richiesto per il dosaggio ma non è fornito nel kit. 1. Acqua distillata di qualità elevata 2. Pipette per dispensare 50 l, µl 200 µl, 1 ml e 10 ml (Si raccomanda di utilizzare pipette accurate con puntale in plastica monouso). 3. Agitatore tipo vortex. 4. Agitatore magnetico. 5. Agitatore orizzontale per micropiastre da 700 ± rpm. 6. Lavatrice per piastra di microtitolazione 7. Lettore di micropiastre per letture a 450, 490 e 650 nm (in caso di lettura policromatica) o per letture a 450 e 650 nm (in caso di lettura bicromatica). 8. Strumentazione aggiuntiva: l ELISAAID necessario per la lettura policromatica delle piastre (vedi paragrafo XI.A) è acquistabile presso Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. VII. PREPARAZIONE DEI REATTIVI A. Calibratore: Ricostituire i calibratori con 1 ml di acqua distillata. B. Controlli: Ricostituire i controlli con 1 ml di acqua distillata. C. Diluente del Campione: Ricostituire il Diluente del Campione aggiungendo acqua distillata fino al volume riportato sull etichetta del flacone. D. Soluzione di lavoro del tampone di lavaggio: Preparare la quantità necessaria di soluzione di lavoro del tampone di lavaggio aggiungendo 199 parti di acqua distillata ad una parte di tampone di lavaggio concentrato (200x). Usare un agitatore magnetico per rendere la soluzione omogenea. La soluzione di lavoro va scartata al termine della giornata. E. Soluzione di Rivelazione: pipettare 0,2 ml di soluzione cromogena TMB in uno dei flaconi del tampone del substrato (H 2O 2 in tampone acetato/citrato). Si raccomanda la preparazione estemporanea. VIII. CONSERVAZIONE E SCADENZA DEI REATTIVI I reattivi non utilizzati sono stabili a 28 C fino alla data riportata su ciascuna etichetta. Le strisce reattive inutilizzate devono essere conservate a 28 C, in un contenitore sigillato che contenga un essiccante fino alla data di scadenza. Dopo la ricostituzione, i calibratori, i controlli e il Diluente del Campione sono stabili 4 giorni a 28 C. Per periodi di conservazione molto lunghi, preparare e mantenere le aliquote a 20 C per un massimo di 2 mesi. Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento dei campioni. La soluzione di lavaggio concentrata è stabile a temperatura ambiente fino alla data di scadenza. La soluzione di lavoro del tampone di lavaggio deve essere preparata fresca ogni volta e usata nello stesso giorno della preparazione. Dopo apertura del flacone, il coniugato è stabile fino alla data di scadenza riportata sull etichetta, se conservato a 28 C nel flacone originale ben tappato. La soluzione di rivelazione preparata di fresco rimane stabile prima dell uso per un massimo di 15 minuti a temperatura ambiente. Superato tale limite dovrà essere eliminata. Alterazioni dell aspetto fisico dei reattivi possono indicare una loro instabilità o deterioramento. IX. RACCOLTA E PREPARAZIONE DEI CAMPIONI Evitare ripetuti cicli di congelamentoscongelamento dei campioni. Prima dell impiego, tutti i campioni devono essere a temperatura ambiente. Si raccomanda di vortexare i campioni prima di utilizzarli. Le condizioni di raccolta possono influenzare i valori. Adottare pertanto le massime precauzioni durante la raccolta per evitare che eventuali impurità contenute nei campioni possano stimolare la produzione di IL8 da parte delle cellule ematiche con conseguente aumento falsato dei livelli sierici di IL8. Le provette di raccolta devono essere apirogene. Il plasma può essere raccolto in provette sterili con EDTA e rapidamente separato dopo centrifugazione. L utilizzo di provette contenenti eparina è sconsigliabile in considerazione della frequente contaminazione pirogenica dei lotti di eparina. X. METODO DEL DOSAGGIO A. Avvertenze generali Non usare il kit o suoi componenti oltre la data di scadenza. Non mescolare reattivi di lotti diversi. Prima dell uso portare tutti i reattivi a temperatura ambiente. Mescolare delicatamente i campioni per inversione o rotazione. Eseguire calibratori, controlli e campioni in doppio. Si raccomanda l allineamento verticale. Utilizzare un contenitore di plastica pulito per preparare la soluzione di lavaggio.

9 Per evitare crosscontaminazioni, cambiare il puntale della pipetta ogni volta che si usi un nuovo reattivo o campione. Per la distribuzione della Soluzione di Rivelazione e la Soluzione di arresto evitare pipette con parti metalliche. L uso di pipette ben tarate e ripetibili o di sistemi di pipettamento automatici migliora la precisione del dosaggio. Rispettare i tempi di incubazione. Per evitare derive, l intervallo tra il pipettaggio del primo calibratore e l ultimo campione deve essere limitato ai tempi riportati nella sezione XIII, paagrafo E (Tempo Trascorso). Allestire una curva di calibrazione per ogni seduta analitica, in quanto non è possibile utilizzare per un dosaggio curve di calibrazione di sedute analitiche precedenti. La Soluzione di Rivelazione deve essere incolore. L eventuale sviluppo di un colore blu entro pochi minuti dalla preparazione indica che il reagente è inutilizzabile e deve essere eliminato. Distribuzione della Soluzione di Rivelazione entro 15 minuti dopo il lavaggio della piastra di microtitolazione. Durante l incubazione con la Soluzione di Rivelazione evitare la luce diretta del sole sulla piastra di microtitolazione. B. Metodo del dosaggio 1. Selezionare il numero di strisce reagenti necessario per il test. Le strisce reagenti inutilizzate devono essere risigillate nel contenitore con un essiccante e conservate a 28 C. 2. Assicurare le strisce reagenti nel telaio di supporto. 3. Pipettare µl di Tampone di Incubazione in ogni pozzetto 4. Pipettare µl di ogni calibratore, controllo e campione nei pozzetti adeguati. 5. Pipettare 50 µl di coniugato antiil8 HRP in tutti i pozzetti. 6. Incubare per 2 ore a temperatura ambiente su agitatore orizzontale regolato a 700 ± rpm. 7. Aspirare il liquido da ogni pozzetto. 8. Lavare la piastra 3 volte : versando 0,4 ml di soluzione di lavaggio in ogni pozzetto aspirando il contenuto di ogni pozzetto 9. Pipettare 200 µl della soluzione di rivelazione preparata di fresco in ogni pozzetto entro 15 minuti dal termine della fase di lavaggio. 10. Incubare la piastra di microtitolazione per 30 minuti a temperatura ambiente su un agitatore orizzontale a 700 ± rpm; evitare la luce diretta del sole. 11. Pipettare 50 µl di soluzione di arresto in ogni pozzetto. 12. Leggere le assorbanze a 450 nm a 490 nm (filtro di riferimento a 630 nm o 650 nm) entro 3 ore e calcolare i risultati come descritto nella sezione XI. XII. CARATTERISTICHE TIPICHE I dati qui di seguito riportati sono esclusivamente indicativi e non dovranno assolutamente essere utilizzati in sostituzione della curva di calibrazione tracciata in tempo reale. IL8EASIA Calibratore 0 pg/ml 40,4 pg/ml 58 pg/ml 156 pg/ml 551 pg/ml 1845 pg/ml XIII. CARATTERISTICHE E LIMITI DEL METODO Unità OD Modello policromatico 0,029 0,120 0,164 0,423 1,350 2,973 A. Sensibilità Venti replicati dello standard zero sono stati dosati insieme agli altri standard. La sensibilità, calcolata come concentrazione apparente di un campione con OD pari alla media più 2 deviazioni standard di 20 replicati dello standard zero, è risultata essere1 1,1 pg/ml. B. Specificità Nessuna reazione crociata significativa è stata osservata in presenza di 50 ng di IL1α, IL1β, IL1ra, IL2, IL3, IL4, IL6, IL7, IL10, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF, RANTES, PF4, βtg, GRO, IP10 e SCF. Tale test per il dosaggio della IL8 è specifico per la IL8 naturale e ricombinante umana ed è in grado di riconoscere la IL8 di 72 aa. C. Precisione INTRA SAGGIO Siero N <X> ± SD A B ± ± 8 CV (%) 3,2 3,6 INTER SAGGIO Siero N <X> ± SD A B ± ± 58 CV (%) 8,6 13,1 XI. CALCOLO DEI RISULTATI SD : Deviazione Standard; CV: Coefficiente di Variazione A. Lettura policromatica: 1. In questo caso, l elaborazione dati verrà effettuata dal software ELISA AID. 2. La piastra viene letta a 450 nm rispetto a un filtro di riferimento regolato a 650 nm (o 630 nm). 3. Verrà quindi effettuata una seconda lettura a 490 nm rispetto allo stesso filtro di riferimento. 4. Il Software ELISAAID guiderà automaticamente il lettore e integrerà le due letture utilizzando un modello policromatico. Tale tecnica può generare valori fino a 10 OD. 5. Il principio dell elaborazione policromatica dei dati è la seguente: * Xi = OD a 450 nm * Yi = OD at 490 nm * Utilizzando una regressione lineare standard non pesata, i parametri A & B sono calcolati: Y = A*X + B * Se Xi <3 unità OD, X calcolato = Xi * Se Xi >3 unità OD, X calcolato = (YiB)/A * Per tracciare la curva di calibrazione viene utilizzato un modello di adattamento della curva logistica a 4 parametri. * La concentrazione di IL8 nel campione viene determinata per interpolazione sulla curva di calibrazione. B. Lettura bicromatica 1. Leggere la piastra a 450 nm rispetto a un filtro di riferimento regolato a 650 nm (o 630 nm). 2. Calcolare la media delle determinazioni in duplicato. 3. Costruire la curva di calibrazione su carta millimetrata semilogaritmica o lineare ponendo in ordinata le medie dei OD dei replicati degli standard e in ascissa le rispettive concentrazioni di IL8, collegando i punti tracciati con linee rette. 4. Determinare le concentrazioni e controlli per interpolazione sulla curva di taratura. 5. E possibile utilizzare un sistema di interpolazione dati automatizzato. Con un sistema automatico di interpolazione dati, utilizzare la curva a 4 parametri. D. Accuratezza Campione TEST DI RECUPERO IL8 aggiunta Plasma IL8 recuperata TEST DI DILUIZIONE Campione Diluizione Concentrazione teorica Plasma 1/1 1/2 1/4 1/8 1/ I campioni sono stati diluiti con Diluente del Campione. Recupero (%) Concentrazione misurata

10 E. Tempo trascorso tra l aggiunta dell ultimo calibratore e il campione Come mostrato nella seguente tabella, il dosaggio si mantiene accurato anche quando un campione viene aggiunto nelle provette sensibilizzate 30 minuti dopo l aggiunta del calibratore. campione 0 min 10 min 20 min 30 min 40 min D. Effetto hook Un campione ha cui è stata aggiunta IL8 fino a 0,5 μg/ml ha OD superiori a quello dello standard più concentrato. XIV. CONTROLLO DI QUALITA INTERNO Se i risultati ottenuti dosando il Controllo 1 e il Controllo 2 non sono all interno dei limiti riportati sull etichetta dei flaconi, non è opportuno utilizzare i risultati ottenuti per i campioni, a meno che non si trovi una giustificazione soddisfacente. Ogni laboratorio può preparare un proprio pool di sieri da utilizzare come controllo, da conservare congelato in aliquote. I controlli che contengono azide interferiscono con la reazione enzimatica e quindi non possono essere utilizzati. I criteri di accettazione delle differenze tra i risultati in duplicato dei campioni devono basarsi sulla buona prassi di laboratorio. Si raccomanda di saggiare i controlli con regolarità come campioni sconosciuti per misurare la variabilità del saggio. La resa del saggio deve essere monitorata con tabelle di controllo qualità dei controlli. È buona pratica verificare visivamente il modello di curva selezionato dal computer. XV. INTERVALLI DI RIFERIMENTO Questi valori vengono dati solo come guida; ogni laboratorio deve stabilire i propri intervalli normali di valori. Come riferimento, i valori di 36 campioni di plasma EDTA appartenenti a soggetti apparentemente sani con bassi livelli di PCR sono risultati compresi nel range pg/ml. Di questi, 34 hanno prodotto valori inferiori a 50 pg/ml. XVI. PRECAUZIONI PER L USO XVII. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI 1. MATSUHUMA K., et al. (1989). Purification and characterization of a novel monocyte chemotactic and activating factor produced by a human myelomonocitic cell line. J. Exp. Med., 169 : BAGGIOLINI M., et al. (1989). Neutrophilactivating peptide1/interleukin8, a novel cytokine that activates neutrophils. J. Clin. Invest., 84 : HACK C., et al. (1992). Interleukin8 in sepsis : relation to shock and inflammatory mediators. Infect. Immun., 60 : TILG H., et al. (1992). Interleukin8 serum concentrations after liver transplantation. Transplant, 53 : XVIII. SCHEMA DEL DOSAGGIO Tampone di Incubazione Calibratore (0 5) Campioni, controlli Coniugato antiil8hrp CALIBRATORE (µl) 50 CAMPIONI CONTROLLI (µl) 50 Incubare per 2 ore a temperatura ambiente in agitazione continua a 700 rpm. Aspirare il contenuto di ogni pozzetto. Lavare 3 volte con 400 µl di soluzione di lavaggio e aspirare. Soluzione di Rivelazione Incubare per 30 minuti a temperatura ambiente in agitazione continua a 700 rpm. Soluzione di arresto Leggere su un lettore per piastra da microtitolazione e registrare l assorbanza di ogni pozzetto a 450 nm (e 490 nm) rispetto a 630 (o 650 nm) Sicurezza Il kit è solo per uso diagnostico in vitro. I reattivi di origine umana presenti nel kit sono stati dosati con metodi approvati da organismi di controllo europei o da FDA e si sono rivelati negativi per HBs Ag, anti HCV, anti HIV1 e anti HIV2. Non sono disponibili metodi in grado di offrire la certezza assoluta che derivati da sangue umano non possano provocare epatiti, AIDS o trasmettere altre infezioni. Manipolare questi reattivi o i campioni di siero o plasma secondo le procedure di sicurezza vigenti. Tutti i prodotti di origine animale o loro derivati provengono da animali sani. I componenti di origine bovina provengono da paesi dove non sono stati segnalati casi di BSE. E comunque necessario considerare i prodotti di origine animale come potenziali fonti di infezioni. Evitare qualsiasi contatto della cute con tutti i reagenti, la Soluzione di Arresto contiene H 2SO 4, la soluzione cromogena contiene TMB in Dimetilformammide, il tampone del substrato contiene H 2O 2. In caso di contatto, lavare abbondamentemente con acqua. Non fumare, bere, mangiare o applicare cosmetici nell area di lavoro. Non pipettare i reattivi con pipette a bocca. Utilizzare indumenti protettivi e guanti monouso. Numero di catalogo di DIAsource: KAP1301 P.I. numero: /it Revisione numero: /2 Data di revisione :

11 el Διαβάστε ολόκληρο το πρωτόκολλο πριν από τη χρήση. IL8EASIA I. ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ Ανοσοενζυμομετρικός προσδιορισμός για την in vitro ποσοτική μέτρηση της ανθρώπινης ιντερλευκίνης8 (IL8) στο πλάσμα. II. ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ A. Εμπορική ονομασία: Κιτ IL8EASIA της DIAsource B. Αριθμός καταλόγου: KAP1301: 96 προσδιορισμοί Γ. Κατασκευάζεται από την: DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2, B1348 LouvainlaNeuve, Belgium. Για τεχνική βοήθεια ή πληροφορίες σχετικά με παραγγελίες επικοινωνήστε στα: Τηλ.: +32 (0) Φαξ: +32 (0) III. ΚΛΙΝΙΚΟ ΥΠΟΒΑΘΡΟ A. Βιολογική δράση H IL8 (γνωστή επίσης ως NAP1 πεπτίδιο ενεργοποίησης των ουδετερόφιλων) είναι μία χημειοτακτική πρωτεΐνη για τα ουδετερόφιλα. Η συγκεκριμένη κυτταροκίνη αποτελεί μέλος μίας νέας οικογένειας χημειοτακτικών πεπτιδίων με την ονομασία «χημειοκίνες». Αυτός ο προφλεγμονώδης μεσολαβητής εκκρίνεται από διάφορα κύτταρα, π.χ. μονοκύτταρα, ουδετερόφιλα, ενδοθηλιακά κύτταρα, ινοβλάστες μετά από ενεργοποίηση και από ενεργοποιημένα από μιτογόνο Τλεμφοκύτταρα. Η IL8 είναι μία κυτταροκίνηκλειδί που έχει βρεθεί σε μεγάλες συγκεντρώσεις στα λέπια ψωριασικών ασθενών, σε αρθρικό υγρό πασχόντων από ρευματοειδή αρθρίτιδα και ουρική αρθρίτιδα. Έχει αναφερθεί πως η IL8 ενδεχομένως διαδραματίζει ρόλο στη στρατολόγηση ουδετερόφιλων στον πνεύμονα κατά τη διάρκεια ARDS. B. Κλινικές εφαρμογές Έχει φανεί πως τα επίπεδα της IL8 σχετίζονται με τη θνησιμότητα των ασθενών σε σηπτικό σοκ, ενώ έχει αναφερθεί εκσεσημασμένη αύξηση των επιπέδων της στον ορό, σε περιπτώσεις οξείας απόρριψης ηπατικού μοσχεύματος. Τα επίπεδα της IL8 σε αυτές και άλλες καταστάσεις ενδέχεται να αποδειχθούν σημαντικός παράγοντας στον προσδιορισμό της πορείας αυτών των κλινικών οντοτήτων.

12 IV. ΒΑΣΙΚΕΣ ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Ο προσδιορισμός IL8EASIA της DIAsource είναι ένας ενζυμικός ανοσοπροσδιορισμός ενισχυμένης ευαισθησίας, στερεής φάσης, ο οποίος εκτελείται σε πλάκες μικροτιτλοδότησης. Ο προσδιορισμός χρησιμοποιεί μονοκλωνικά αντισώματα (Ms) που κατευθύνονται εναντίον διακριτών επιτόπων της IL8. Οι βαθμονομητές και τα δείγματα αντιδρούν με το μονοκλωνικό αντίσωμα σύλληψης (M 1) που είναι επιστρωμένο στην υποδοχή της πλάκας μικροτιτλοδότησης και με ένα μονοκλωνικό αντίσωμα (M 2) σημασμένο με ραφανιδική υπεροξειδάση (HRP). Μετά από μια περίοδο επώασης που επιτρέπει το σχηματισμό ενός σάντουιτς: επιστρωμένο M 1 ανθρώπινη IL8 M 2 HRP, η πλάκα μικροτιτλοδότησης υποβάλλεται σε πλύση για να απομακρυνθεί το σημασμένο με ένζυμο αδέσμευτο αντίσωμα. Το σημασμένο με ένζυμο δεσμευμένο αντίσωμα μετράται μέσω μιας χρωμογόνου αντίδρασης. Προστίθεται και επωάζεται χρωμογόνο διάλυμα (ΤΜΒ έτοιμο για χρήση). Η αντίδραση σταματά με την προσθήκη ανασχετικού διαλύματος και στη συνέχεια γίνεται ανάγνωση της πλάκας μικροτιτλοδότησης στο κατάλληλο μήκος κύματος. Η ποσότητα μετατροπής του υποστρώματος καθορίζεται χρωματομετρικά μετρώντας την απορρόφηση, η οποία είναι ανάλογη προς τη συγκέντρωση της IL8. Παριστάνεται γραφικά μια καμπύλη βαθμονόμησης και προσδιορίζεται η συγκέντρωση της IL8 στα δείγματα με αναγωγή από την καμπύλη βαθμονόμησης. Η χρήση του συστήματος ανάγνωσης EASIA (γραμμικότητα έως 3 μονάδες OD) και μιας πολύπλοκης μεθόδου αναγωγής δεδομένων (αναγωγή πολυχρωματικών δεδομένων) έχουν ως αποτέλεσμα υψηλή ευαισθησία στο χαμηλό πεδίο τιμών και στο εκτεταμένο πεδίο τιμών βαθμονόμησης. V. ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ Αντιδραστήρια Κιτ 96 προσδιο ρισμών Πλάκα μικροτιτλοδότησης με 96 υποδοχές επιστρωμένες με αντι IL 8 (μονοκλωνικά αντισώματα) HRP Σύζευγμα: ΑντιIL8 (μονοκλωνικά αντισώματα) σημασμένα με HRP σε ρυθμιστικό διάλυμα Trisμηλικών με βόεια ορολευκωματίνη και θυμόλη 96 υποδοχές 1 φιαλίδιο 6 ml Χρωματικός κωδικός μπλε κόκκινο Ανασύσταση Έτοιμο για χρήση Έτοιμο για χρήση Χρωμογόνο TMB (Τετραμεθυλβενζυδίνη) σε διμεθυλφορμαμίδη Ρυθμιστικό διάλυμα υποστρώματος: H 2O 2 σε ρυθμιστικό διάλυμα οξικού/κιτρικού οξέος Ανασχετικό διάλυμα: H 2SO 4 1,8N 1 φιαλίδιο 1 ml 3 φιαλίδια 21 ml 1 φιαλίδιο 6 ml πράσινο πράσινο μαύρο Αραιώστε 0,2 ml iε 1 φιαλίδιο ρυθμιστικού διαλύματος υποστρώματος Έτοιμο για χρήση Έτοιμο για χρήση Σημείωση:1.Χρησιμοποιήστε διάλυμα αραίωσης δειγμάτων για αραίωση των δειγμάτων pg του παρασκευάσματος του βαθμονομητή είναι ισοδύναμο με 1 mu του NIBSC 1 ο IS 89/520 VI. CHROM TMB SUB STOP ΑΝΑΛΩΣΙΜΑ ΠΟΥ ΔΕΝ ΠΑΡΕΧΟΝΤΑΙ Τα ακόλουθα υλικά απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται στο κιτ: 1. Απεσταγμένο νερό υψηλής ποιότητας 2. Πιπέτες για διανομή: 50 μl, μl, 200 μl, 1 ml και 10 ml (συνιστάται η χρήση πιπετών ακριβείας με αναλώσιμα πλαστικά ρύγχη) 3. Αναμείκτης στροβιλισμού 4. Μαγνητικός αναδευτήρας 5. Οριζόντια συσκευή ανάδευσης πλακών μικροτιτλοδότησης με δυνατότητα 700 rpm ± rpm 6. Συσκευή πλύσης για πλάκες μικροτιτλοδότησης 7. Συσκευή ανάγνωσης πλακών μικροτιτλοδότησης με δυνατότητα ανάγνωσης στα 450 nm, 490 nm και 650 nm (σε περίπτωση πολυχρωματικής ανάγνωσης) ή με δυνατότητα ανάγνωσης στα 450 nm και 650 nm (διχρωματική ανάγνωση) 8. Προαιρετικός εξοπλισμός: Ο εξοπλισμός ELISAAID που είναι απαραίτητος για την πολυχρωματική ανάγνωση (δείτε την παράγραφο XI.A.) μπορεί να αγοραστεί από την Robert Maciels Associates, Inc. Mass USA. CAL Βαθμονομητής N = 0 έως 5 (δείτε τις ακριβείς τιμές πάνω στις ετικέτες των φιαλιδίων) σε ανθρώπινο ορό με βενζαμιδίνη και θυμόλη DIL Διάλυμα αραίωσης δειγμάτων: σε ανθρώπινο ορό με βενζαμιδίνη και θυμόλη INC Ρυθμιστικό διάλυμα επώασης: Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών με βόεια ορολευκωματίνη και θυμόλη WASH Διάλυμα πλύσης (TrisHCl) CONTROL Οροί ελέγχου N = 1 ή 2 σε ανθρώπινο ορό με θυμόλη N SPE N 6 φιαλίδια λυοφιλοποιημένο 2 φιαλίδια λυοφιλοποιημένο 1 φιαλίδιο 11 ml 1 φιαλίδιο 10 ml 2 φιαλίδια λυοφιλοποιημένο. κίτρινο μαύρο μαύρο καφέ ασημί Προσθέστε 1 ml απεσταγμένου νερού Προσθέστε απεσταγμένο νερό (βλ. ετικέτα στο φιαλίδιο για τον ακριβή όγκο) Έτοιμο για χρήση Αραιώστε 200 x με απεσταγμένο νερό (χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα). Προσθέστε 1 ml απεσταγμένου νερού VII. ΠΑΡΑΣΚΕΥΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΟΥ A. Βαθμονομητές: Ανασυστήστε τους βαθμονομητές με 1 ml απεσταγμένου νερού. B. Οροί ελέγχου: Ανασυστήστε τους ορούς ελέγχου με 1 ml απεσταγμένου νερού. C. Διάλυμα αραίωσης δειγμάτων: Ανασυστήστε το διάλυμα αραίωσης δειγμάτων στον όγκο που καθορίζεται στην ετικέτα του φιαλιδίου με απεσταγμένο νερό. D. Διάλυμα πλύσης εργασίας: Προετοιμάστε επαρκή όγκο διαλύματος πλύσης εργασίας με προσθήκη 199 όγκων απεσταγμένου νερού σε 1 όγκο διαλύματος πλύσης (200x). Χρησιμοποιήστε μαγνητικό αναδευτήρα για την ομογενοποίηση. Απορρίψτε το μη χρησιμοποιημένο διάλυμα πλύσης εργασίας στο τέλος της ημέρας. E. Αποκαλυπτικό Διάλυμα: Διανείμετε με πιπέτα 0,2 ml του χρωμογόνου TMB σε ένα από τα φιαλίδια ρυθμιστικού διαλύματος υποστρώματος (H 2O 2 σε ρυθμιστικό διάλυμα οξικού/κιτρικού οξέος). Συνιστάται αυτοσχέδια προετοιμασία. VIII. ΦΥΛΑΞΗ ΚΑΙ ΗΜΕΡΟΜΗΝΙΑ ΛΗΞΗΣ ΤΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Πριν από το άνοιγμα ή την ανασύσταση, όλα τα συστατικά του κιτ παραμένουν σταθερά έως την ημερομηνία λήξης, η οποία αναγράφεται στην ετικέτα του φιαλιδίου, εφόσον διατηρούνται σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Οι μη χρησιμοποιημένες ταινίες πρέπει να φυλάσσονται στους 28 C, σε σφραγισμένη σακούλα που περιέχει αποξηραντικό παράγοντα, μέχρι την ημερομηνία λήξης. Μετά την ανασύσταση, οι βαθμονομητές, οι οροί ελέγχου και το διάλυμα αραίωσης δειγμάτων παραμένουν σταθερά επί 4 ημέρες στους 28 C. Για μεγαλύτερες περιόδους φύλαξης, θα πρέπει να δημιουργηθούν κλάσματα/δόσεις μίας χρήσης και να διατηρηθούν σε θερμοκρασία 20 C επί 2 μήνες το μέγιστο. Αποφύγετε τους επανειλημμένους κύκλους απόψυξηςκατάψυξης.

13 Το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης είναι σταθερό σε θερμοκρασία δωματίου μέχρι την ημερομηνία λήξης. Φρέσκο, παρασκευασμένο διάλυμα πλύσης εργασίας θα πρέπει να χρησιμοποιείται την ίδια ημέρα. Μετά την πρώτη χρήση του, το σύζευγμα παραμένει σταθερό έως την ημερομηνία λήξης, εφόσον διατηρείται στο αρχικό, ερμητικά κλειστό φιαλίδιο σε θερμοκρασία 2 έως 8 C. Το μόλις προετοιμασμένο αποκαλυπτικό διάλυμα είναι σταθερό ριν από τη χρήση του, για έως και 15 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Κατόπιν θα πρέπει να απορρίπτεται. Τυχόν μεταβολές της φυσικής εμφάνισης των αντιδραστηρίων του κιτ ενδέχεται να υποδηλώνουν αστάθεια ή αλλοίωση 9. Διανείμετε με πιπέτα 200 μl του μόλις προετοιμασμένου αποκαλυπτικού διαλύματος σε κάθε υποδοχή, εντός 15 λεπτών από το βήμα πλύσης. 10. Επωάστε την πλάκα μικροτιτλοδότησης επί 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου σε οριζόντιο αναδευτήρα στις 700 rpm ± rpm, αποφύγετε την άμεση έκθεση στην ηλιακή ακτινοβολία. 11. Διανείμετε με πιπέτα 50 µl ανασχετικού διαλύματος σε κάθε υποδοχή. 12. Κάντε ανάγνωση των απορροφήσεων στα 450 nm και 490 nm (φίλτρο αναφοράς 630 nm ή 650 nm) εντός 3 ωρών και υπολογίστε τα αποτελέσματα όπως περιγράφεται στην ενότητα XI. IX. ΣΥΛΛΟΓΗ ΚΑΙ ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ Αποφεύγετε τους επακόλουθους κύκλους κατάψυξηςαπόψυξης. Φέρετε όλα τα δείγματα σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση. Συνιστάται η ανάμειξη των δειγμάτων σε συσκευή στροβιλισμού πριν από τη χρήση. Οι συνθήκες δειγματοληψίας μπορούν να επηρεάσουν τις τιμές. Για το λόγο αυτό θα πρέπει να λαμβάνονται αυστηρά μέτρα προφύλαξης κατά τη διάρκεια της δειγματοληψίας για την αποφυγή προσμίξεων στα δείγματα λήψης, τα οποία θα διέγειραν την παραγωγή IL8 από αιμοκύτταρα και θα αύξαναν εσφαλμένα τις τιμές της IL8 στον ορό. Τα σωληνάρια συλλογής θα πρέπει να είναι ελεύθερα πυρογενών. Το πλάσμα μπορεί να συλλέγεται σε αποστειρωμένα φιαλίδια με EDTA και να διαχωρίζεται ταχέως μετά τη φυγοκέντρηση. Δεν συνιστάται η χρήση σωληναρίων ηπαρίνης, διότι συχνά οι παρτίδες ηπαρίνης είναι επιμολυσμένες με πυρετογόνα. X. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ A. Σημειώσεις σχετικά με το χειρισμό Μη χρησιμοποιείτε το κιτ ή τα συστατικά μετά την ημερομηνία λήξης. Μην αναμειγνύετε υλικά από διαφορετικές παρτίδες κιτ. Φέρετε όλα τα αντιδραστήρια σε θερμοκρασία δωματίου πριν από τη χρήση. Αναμείξτε καλά όλα τα αντιδραστήρια και τα δείγματα με απαλή ανακίνηση ή ανάδευση. Εκτελέστε εις διπλούν ανάληψη των βαθμονομητών, των ορών ελέγχου και των δειγμάτων. Συνιστάται κάθετη ευθυγράμμιση. Χρησιμοποιήστε ένα καθαρό, πλαστικό δοχείο για να ετοιμάσετε το διάλυμα πλύσης. Χρησιμοποιείτε ένα καθαρό αναλώσιμο ρύγχος πιπέτας για την προσθήκη κάθε διαφορετικού αντιδραστηρίου και δείγματος προκειμένου να αποφύγετε την επιμόλυνση. Αποφύγετε πιπέτες με μεταλλικά μέρη για τη διανομή του Αποκαλυπτικού Διαλύματος και του Ανασχετικού Διαλύματος. Η ακρίβεια βελτιώνεται με χρήση πιπετών υψηλής ακρίβειας ή αυτοματοποιημένου εξοπλισμού διανομής με πιπέτες. Τηρείτε τους χρόνους επώασης. Για να αποφύγετε τη μετατόπιση, ο χρόνος μεταξύ της διανομής με πιπέτα του πρώτου βαθμονομητή και του τελευταίου δείγματος πρέπει να περιορίζεται στο χρονικό διάστημα που αναφέρεται στην ενότητα XIII, παράγραφος E (Μεσοδιάστημα). Προετοιμάστε μια καμπύλη βαθμονόμησης για κάθε ανάλυση και μη χρησιμοποιείτε δεδομένα από προηγούμενες αναλύσεις. Το Αποκαλυπτικό Διάλυμα θα πρέπει να είναι άχρωμο. Η δημιουργία μπλε χρώματος σε διάστημα λίγων λεπτών από την προετοιμασία υποδεικνύει πως το αντιδραστήριο δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί και θα πρέπει να απορριφθεί. Διανείμετε το Αποκαλυπτικό Διάλυμα εντός 15 λεπτών από την πλύση της πλάκας μικροτιτλοδότησης. Κατά τη διάρκεια επώασης με το Αποκαλυπτικό Διάλυμα, αποφύγετε την έκθεση της πλάκας μικροτιτλοδότησης στο άμεσο ηλιακό φως. B. Διαδικασία 1. Επιλέξτε τον απαιτούμενο αριθμό ταινιών για την ανάλυση. Οι μη χρησιμοποιημένες ταινίες πρέπει να ξανασφραγιστούν μέσα στη σακούλα με τον αποξηραντικό παράγοντα και να φυλαχτούν σε θερμοκρασία 2 8 C. 2. Ασφαλίστε τις ταινίες μέσα στο πλαίσιο στήριξης 3. Διανείμετε με πιπέτα µl ρυθμιστικού διαλύματος επώασης σε όλες τις υποδοχές. 4. Διανείμετε με πιπέτα µl από κάθε βαθμονομητή, ορό ελέγχου και δείγμα στις κατάλληλες υποδοχές. 5. Διανείμετε με πιπέτα 50 µl συζεύγματος αντιil8 μέσα σε όλες τις υποδοχές. 6. Επωάστε επί 2 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου επάνω σε οριζόντιο αναδευτήρα, ρυθμισμένο στις 700 rpm ± rpm. 7. Αναρροφήστε το υγρό από κάθε υποδοχή. 8. Πλύνετε την πλάκα 3 φορές: διανέμοντας 0,4 ml διαλύματος πλύσης σε κάθε υποδοχή. αναρροφώντας το περιεχόμενο κάθε υποδοχής XI. ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ A. Πολυχρωματική ανάγνωση: 1. Στην περίπτωση αυτή, την επεξεργασία των δεδομένων θα κάνει το λογισμικό του ELISAAID. 2. Η ανάγνωση της πλάκας γίνεται πρώτα στα 450 nm έναντι ενός φίλτρου αναφοράς που ρυθμίζεται στα 650 nm (ή τα 630 nm). 3. Εκτελείται δεύτερη ανάγνωση στα 490 nm έναντι του ίδιου φίλτρου αναφοράς. 4. Το λογισμικό του ELISAAID θα ενεργοποιήσει αυτόματα τη συσκευή ανάγνωσης και θα ενσωματώσει και τις δύο μετρήσεις σε ένα πολυχρωματικό μοντέλο. Αυτή η τεχνική μπορεί να δημιουργήσει οπτικές πυκνότητες (OD) έως και βασική αρχή της επεξεργασίας των πολυχρωματικών δεδομένων έχει ωεξής: Xi = OD στα 450 nm Yi = OD στα 490 nm Χρησιμοποιώντας τυπική μη σταθμισμένη γραμμική παλινδρόμηση, υπολογίζονται οι παράμετροι A & B: Y = A*X + B Αν Xi < 3 μονάδες OD, τότε υπολογισθέν X = Xi Αν Xi > 3 μονάδες OD, τότε υπολογισθέν X = (YiB)/A Χρησιμοποιείται προσαρμογή λογιστικής καμπύλης 4 παραμέτρων για τη δημιουργία της καμπύλης βαθμονόμησης. Η συγκέντρωση IL8 στα δείγματα καθορίζεται μέσω αναγωγής στην καμπύλη βαθμονόμησης. B. Διχρωματική ανάγνωση 1. Κάντε ανάγνωση της πλάκας στα 450 nm έναντι ενός φίλτρου αναφοράς που ρυθμίζεται στα 650 nm (ή τα 630 nm). 2. Υπολογίστε τη μέση τιμή των διπλών προσδιορισμών. 3. Σε ημιλογαριθμικό ή γραμμικό χαρτί γραφημάτων, παραστήστε γραφικά τις τιμές OD (τεταγμένη) για κάθε βαθμονομητή έναντι της αντίστοιχης συγκέντρωσης της IL8 (τετμημένη) και σχεδιάστε μια καμπύλη βαθμονόμησης μέσω των σημείων του βαθμονομητή, συνδέοντας με ευθείες γραμμές τα αποτυπωμένα σημεία. 4. Διαβάστε τη συγκέντρωση για κάθε ορό ελέγχου και δείγμα με αναγωγή στην καμπύλη βαθμονόμησης. 5. Αναγωγή δεδομένων με τη βοήθεια ηλεκτρονικού υπολογιστή θα απλοποιήσει αυτούς τους υπολογισμούς. Εάν χρησιμοποιείται αυτόματη επεξεργασία αποτελεσμάτων, συνιστάται προσαρμογή καμπύλης λογιστικής συνάρτησης 4 παραμέτρων. XII. ΤΥΠΙΚΑ ΔΕΔΟΜΕΝΑ Τα ακόλουθα δεδομένα προορίζονται μόνο ως παράδειγμα και δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται ποτέ αντί της καμπύλης βαθμονόμησης πραγματικού χρόνου. Βαθμονομητής IL8EASIA 0 pg/ml 40,4 pg/ml 58 pg/ml 156 pg/ml 551 pg/ml 1845 pg/ml Μονάδες OD Πολυχρωματικό μοντέλο 0,029 0,120 0,164 0,423 1,350 2,973 XIII. ΑΠΟΔΟΣΗ ΚΑΙ ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ A. Όριο ανίχνευσης Μετρήθηκαν είκοσι μηδενικοί βαθμονομητές μαζί με ένα σύνολο άλλων βαθμονομητών. Το όριο ανίχνευσης, οριζόμενο ως η φαινομενική συγκέντρωση δύο τυπικών αποκλίσεων πάνω από τις μέσες μετρήσεις OD σε μηδενική δέσμευση, ήταν 1,1 pg/ml.

14 B. Ειδικότητα Δεν παρατηρήθηκε σημαντική διασταυρούμενη αντίδραση παρουσία 50 ng IL 1α, IL1β, IL1ra, IL2, IL3, IL4, IL6, IL7, IL10, TNFα, TNFβ, IFNα, IFNβ, IFNγ, TGFβ, GMCSF, OSM, MIP1α, MIP1β, LIF, MCP1, GCSF, RANTES, PF4, βtg, GRO, IP10 and SCF. Ο παρών προσδιορισμός IL8 είναι ειδικός για την ανθρώπινη, φυσική και ανασυνδυασμένη IL8 και μπορεί να αναγνωρίσει τη μορφή 72 a.a. της IL8. C. Ακρίβεια ΓΙΑ ΤΟΝ ΙΔΙΟ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟ Ορός N <X> ± T.A. A B ± ± 8 Σ.Δ. (%) 3,2 3,6 ΜΕΤΑΞΥ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΩΝ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΩΝ Ορός N <X> ± T.A. A B Τ.Α.: Τυπική απόκλιση, Σ.Δ.: Συντελεστής διακύμανσης D. Ορθότητα Δείγμα ΔΟΚΙΜΑΣΙΑ ΑΝΑΚΤΗΣΗΣ Προστεθείσα IL8 Πλάσμα Ανακτηθείσα IL ΔΟΚΙΜΑΣΙΑ ΑΡΑΙΩΣΗΣ Δείγμα Αραίωση Θεωρητική συγκέντρωση Πλάσμα 1/1 1/2 1/4 1/8 1/ Τα δείγματα αραιώθηκαν με διάλυμα αραίωσης δειγμάτων. 150 ± ± 58 Ανάκτηση (%) Μετρηθείσα συγκέντρωση Σ.Δ. (%) 8,6 13,1 E. Μεσοδιάστημα μεταξύ της διανομής τελευταίου βαθμονομητή και δείγματος Όπως φαίνεται στη συνέχεια, τα αποτελέσματα του προσδιορισμού παραμένουν αξιόπιστα ακόμα και όταν διανέμεται ένα δείγμα 30 λεπτά μετά την προσθήκη των βαθμονομητών στα επιστρωμένα σωληνάρια. Δείγμα 0 λεπτά 10 λεπτά ΧΡΟΝΙΚΗ ΚΑΘΥΣΤΕΡΗΣΗ λεπτά λεπτά λεπτά κατεψυγμένα σε κλάσματα/δόσεις μιας χρήσης. Οροί ελέγχου που περιέχουν αζίδιο θα επιδράσουν στην ενζυμική αντίδραση και δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν. Τα κριτήρια αποδοχής για τη διαφορά μεταξύ των διπλών αποτελεσμάτων των δειγμάτων θα πρέπει να βασίζονται σε ορθές εργαστηριακές πρακτικές. Συνιστάται οι οροί ελέγχου να υποβάλλονται σε προσδιορισμό τακτικά ως άγνωστα δείγματα για να μετράται η μεταβλητότητα του προσδιορισμού. Η απόδοση του προσδιορισμού πρέπει να παρακολουθείται με διαγράμματα ποιοτικού ελέγχου των ορών ελέγχου. Είναι καλό το να ελέγχετε οπτικά την προσαρμογή της καμπύλης που επιλέχθηκε από τον υπολογιστή. XV. ΤΙΜΕΣ ΑΝΑΦΟΡΑΣ Οι τιμές αυτές παρέχονται μόνον ως οδηγός. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθιερώσει το δικό του πεδίο φυσιολογικών τιμών. Ως καθοδήγηση, τα αποτελέσματα 36 δειγμάτων πλάσματος EDTA από εμφανώς υγιή άτομα με χαμηλά επίπεδα CRP, κυμάνθηκαν μεταξύ 0 και 132 pg/ml. Οι τιμές 34 από αυτά τα δείγματα ήταν κάτω από 50 pg/ml. XVI. ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ ΚΑΙ ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ Ασφαλείας Μόνο για διαγνωστική χρήση in vitro. Τα συστατικά ανθρώπινου αίματος που περιλαμβάνονται στο κιτ αυτό έχουν ελεγχθεί με μεθόδους εγκεκριμένες στην Ευρώπη ή/και από τον FDA και έχει διαπιστωθεί ότι είναι αρνητικά ως προς την παρουσία HBsAg, αντιhcv, αντι HIV1 και 2. Καμία γνωστή μέθοδος δεν είναι δυνατό να παρέχει πλήρη διασφάλιση ότι παράγωγα του ανθρώπινου αίματος δε θα μεταδώσουν ηπατίτιδα, AIDS ή άλλες λοιμώξεις. Επομένως, ο χειρισμός αντιδραστηρίων, δειγμάτων ορού ή πλάσματος θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις τοπικές διαδικασίες περί ασφάλειας. Όλα τα ζωικά προϊόντα και παράγωγα έχουν συλλεχθεί από υγιή ζώα. Τα βόεια συστατικά προέρχονται από χώρες όπου δεν έχει αναφερθεί BSE. Παρ' όλ' αυτά, συστατικά που περιέχουν ζωικές ουσίες θα πρέπει να αντιμετωπίζονται ως δυνητικώς μολυσματικά. Αποφύγετε κάθε επαφή με το δέρμα με όλα τα αντιδραστήρια, Το Ανασχετικό Διάλυμα περιέχει H 2SO 4, το χρωμογόνο περιέχει TMB σε Διμεθυλφορμαμίδη, το ρυθμιστικό διάλυμα υποστρώματος περιέχει H 2O 2. Σε περίπτωση επαφής, πλύνετε σχολαστικά με νερό. Μην καπνίζετε, μην πίνετε, μην τρώτε και μη χρησιμοποιείτε καλλυντικά στο χώρο εργασίας. Μην διανέμετε με πιπέτα χρησιμοποιώντας το στόμα σας. Χρησιμοποιείτε προστατευτικό ρουχισμό και γάντια μιας χρήσης. XVII. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. MATSUHUMA K., et al. (1989). Purification and characterization of a novel monocyte chemotactic and activating factor produced by a human myelomonocitic cell line. J. Exp. Med., 169 : BAGGIOLINI M., et al. (1989). Neutrophilactivating peptide1/interleukin8, a novel cytokine that activates neutrophils. J. Clin. Invest., 84 : HACK C., et al. (1992). Interleukin8 in sepsis : relation to shock and inflammatory mediators. Infect. Immun., 60 : TILG H., et al. (1992). Interleukin8 serum concentrations after liver transplantation. Transplant, 53 : F. Φαινόμενο αγκίστρου (hook) Δείγμα που εμβολιάστηκε με IL8 έως 0,5 µg/ml δίνει υψηλότερες μετρήσεις οπτικής πυκνότητας (OD) από το σημείο του τελευταίου βαθμονομητή XIV. ΕΣΩΤΕΡΙΚΟΣ ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ Εάν τα αποτελέσματα που λαμβάνονται για τον ορό ελέγχου 1 ή/και τον ορό ελέγχου 2 δε βρίσκονται εντός του πεδίου τιμών που καθορίζεται στην ετικέτα του φιαλιδίου, τα αποτελέσματα δεν είναι δυνατό να χρησιμοποιηθούν, εκτός εάν έχει δοθεί ικανοποιητική εξήγηση για την ασυμφωνία. Εάν είναι επιθυμητό, κάθε εργαστήριο μπορεί να δημιουργήσει τα δικά του μείγματα δειγμάτων ελέγχου (pools), τα οποία πρέπει να διατηρούνται

15 XVIII. ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΤΟΥ ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΟΥ ΒΑΘΜΟΝΟΜΗ ΤΕΣ (µl) ΔΕΙΓΜΑ(ΤΑ) ΟΡΟΙ ΕΛΕΓΧΟΥ (µl) Ρυθμιστικό διάλυμα επώασης Βαθμονομητές (05) Δείγματα, οροί ελέγχου Σύζευγμα αντιil8hrp Επωάστε επί 2 ώρες σε θερμοκρασία δωματίου με συνεχή ανάδευση στις 700 rpm). Αναρροφήστε το περιεχόμενο κάθε υποδοχής. Πλύνετε 3 φορές με 400 µl διαλύματος πλύσης και αναρροφήστε. Αποκαλυπτικό Διάλυμα Επωάστε επί 30 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου με συνεχή ανάδευση στις 700 rpm. Ανασχετικό διάλυμα Διαβάστε σε συσκευή ανάγνωσης πλακών μικροτιτλοδότησης και καταγράψτε την απορρόφηση κάθε υποδοχής στα 450 nm (και 490 nm) έναντι 630 (ή 650 nm) Αρ. καταλόγου DIAsource: KAP1301 Αριθμός P.I.: /el Αρ. αναθεώρησης: /1 Ημερομηνία αναθεώρησης:

16 P.I. Number : 1700 Revision nr Used symbols Consult instructions for use Storage temperature Use by Batch code Catalogue number Control In vitro diagnostic medical device Manufacturer Contains sufficient for <n> tests WASH CAL 0 CAL N CONTROL N Ag 125I 125I Ag 125I 125I INC ACETONITRILE SERUM DIL SPE DIL ANTISERUM IMMUNOADSORBENT DIL CAL REC PEG EXTR ELU GEL PRE NEUTR TRACEUR HRP Ag HRP HRP Ag HRP CONJ CHROM TMB CHROM TMB SUB STOP INC SER AP SUB PNPP BIOT CONJ PREC AGENT AVID HRP ASS BIOT SAV HRP NSB 2nd ACID DIST TRAY PMSF STRIP SUB EXTR CART SAV HRP PIPETTE WASH Wash solution concentrated Zero calibrator Calibrator # Control # Tracer Tracer Tracer concentrated Tracer concentrated Tubes Incubation buffer Acetonitrile Serum Specimen diluent Dilution buffer Antiserum Immunoadsorbent Calibrator diluent Reconstitution solution Polyethylene glycol Extraction solution Elution solution Bond Elut Silica cartridges Pretreatment solution Neutralization solution Tracer buffer Microtiterplate HRP Conjugate HRP Conjugate HRP Conjugate concentrate HRP Conjugate concentrate Conjugate buffer Chromogenic TMB concentrate Chromogenic TMB solution Substrate buffer Stop solution Incubation serum Buffer AP Conjugate Substrate PNPP Biotin conjugate concentrate Precipitating Agent Avidine HRP concentrate Assay buffer Biotin conjugate Specific Antibody Streptavidin HRP concentrate Nonspecific binding 2nd Antibody Acidification Buffer Distributor Incubation trays PMSF solution Protect from light Dot Strip Substrate Extraction Buffer Concentrate Cartridge Streptavidin HRP Pipette Wash buffer

17 P.I. Number : 1700 Revision nr Simboli utilizzati Consultare le istruzioni per l uso Limitazioni di temperatura Utilizzare entro Numero di lotto Numero di catalogo Controllo Dispositivo medicodiagnostico in vitro Fabbricante Contenuto sufficiente per <n> saggi WASH CAL 0 0 CAL N CONTROL N Ag 125I 125I Ag 125I 125I INC ACETONITRILE SERUM DIL SPE DIL ANTISERUM IMMUNOADSORBENT DIL CAL REC PEG EXTR ELU GEL PRE NEUTR TRACEUR HRP Ag HRP HRP Ag HRP CONJ CHROM TMB CHROM TMB SUB STOP INC SER AP SUB PNPP BIOT CONJ PREC AGENT AVID HRP ASS BIOT SAV HRP NSB 2nd ACID DIST TRAY PMSF STRIP SUB EXTR CART SAV HRP PIPETTE WASH Tampone di lavaggio concentrato Calibratore zero Standard # Controllo # Marcato Marcato Marcato concentrato Marcato concentrato Provette Tampone incubazione Acetonitrile Siero Diluente campione Tampone diluizione Antisiero Immunoassorbente Diluente calibratore Soluzione di ricostituzione Polietilenglicole Soluzione di estrazione Soluzione di eluizione Cartucce di silice bond elut Soluzione di pretrattamento Soluzione di neutralizzazione Tracer Buffer Piastra di microtitolazione HRP Coniugato HRP Coniugato HRP Coniugato concentrato HRP Coniugato concentrato Buffer coniugato Cromogena TMB concentrato Soluzione cromogena TMB Tampone substrato Soluzione di arresto Incubazione con siero Buffer AP Coniugato Substrato PNPP Concentrato coniugato con biotina Agente precipitante Concentrato avidina HRP Soluzione tampone per test Coniugato con biotina Anticorpo Specifico StreptavidinaHRP concentrata Legame nonspecifico 2 Anticorpo Tampone Acidificante Ditributore Vassoi di incubazione Soluzione di PMSF Proteggere dalla luce Dot strip Substrato Concentrato del tampone di estrazione Cartuccia HRP coniugata a streptavidina Pipetta Tampone di lavaggio

18 P.I. Number : 1700 Revision nr Χρησιμοποιούμενα σύμβολα Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης Θερμοκρασία αποθήκευσης Ημερομηνία λήξης Αριθμός παρτίδας Αριθμός καταλόγου Πρότυπο ελέγχου In Vitro Διαγνωστικό Ιατροτεχνολιγικό προιόν Κατασκευαστής Περιεχόμενο επαρκές για «ν» εξετάσεις WASH CAL 0 CAL N CONTROL N Ag 125I 125I Ag 125I 125I INC ACETONITRILE SERUM DIL SPE DIL ANTISERUM IMMUNOADSORBENT DIL CAL REC PEG EXTR ELU GEL PRE NEUTR TRACEUR HRP Ag HRP HRP Ag HRP CONJ CHROM TMB CHROM TMB SUB STOP INC SER AP SUB PNPP BIOT CONJ PREC AGENT AVID HRP ASS BIOT SAV HRP NSB 2nd ACID DIST TRAY PMSF STRIP SUB EXTR CART SAV HRP PIPETTE WASH Συμπυκνωμένο διάλυμα έκπλυσης Μηδενικός βαθμονομητής Βαθμονομητής # Ορός ελέγχου # Ιχνηθέτης Ιχνηθέτης Χρωμογόνος Ιχνηθέτης Χρωμογόνος Ιχνηθέτης Σωληνάρια Ρυθμιστικό διάλυμα επώασης Ακετονιτρίλιο Ορός Διάλυμα αραίωσης δειγμάτων Ρυθμιστικό διάλυμα αραίωσης Αντιορός Ανοσοπροσροφητικό Αραιωτικό βαθμονομητών Διάλυμα ανασύστασης Πολυαιθυλενογλυκόλη Διάλυμα εκχύλισης Διάλυμα έκλουσης Φύσιγγες πυριτίου Bond Elut Διάλυμα προεπεξεργασίας Διάλυμα εξουδετέρωσης Ρυθμιστικό διάλυμα Πλάκα μικροτιτλοδότησης HRP Σύζευγμα HRP Σύζευγμα Χρωμογόνος HRP Σύζευγμα Χρωμογόνος HRP Σύζευγμα Ρυθμιστικό διάλυμα συζεύγματος Χρωμογόνος TMB Διάλυμα χρωμογόνου ΤΜΒ Ρυθμιστικό διάλυμα υποστρώματος Ανασχετικό αντιδραστήριο Ορός επώασης Ρυθμιστικό διάλυμα AP Σύζευγμα PNPP υποστρώματος Συμπυκνωμένο αντιδραστήριο συζευγμένο με βιοτίνη Παράγοντας καθίζησης Συμπυκνωμένο διάλυμα αβιδίνηςhrp Ρυθμιστικό διάλυμα προσδιορισμού αντιδραστήριο συζευγμένο με βιοτίνη Ειδικό Αντίσωμα Συμπυκνωμένη στρεπταβιδίνη συνεξευγμένη με HRP μηειδική δέσμευση 2ο Αντίσωμα Ρυθμιστικό Διάλυμα όξινο Διανομέας Δίσκοι επώασης Διάλυμα PMSF Προστατεύετε από το φως Ταινία κουκκίδων Υπόστρωμα Συμπύκνωμα ρυθμ. διαλύματος εκχύλισης Φύσιγγα Στρεπταβιδίνη HRP πιπέτα Ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-8-EASIA KAP1301. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL8EASIA KAP1301 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue de l'industrie, 8 B1400 Nivelles Belgium : 090505/1 en Read entire protocol before use. IL8EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 110221/3 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue du Bosquet, 2 - B-1348 Louvain-la-Neuve - Belgium : 110221/1 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay

Διαβάστε περισσότερα

IL-6-EASIA-CE KAP1261

IL-6-EASIA-CE KAP1261 IL-6-EASIA-CE KAP1261 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium : 0905/1 en Read entire protocol before use. IL-6-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for

Διαβάστε περισσότερα

Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit. MyBioSource.com

Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit. MyBioSource.com Mouse Apolipoprotein A1 (Apo-A1) ELISA Kit Catalog Number. For the quantitative determination of mouse apolipoprotein A1 (Apo-A1) concentrations in serum, plasma, cell culture supernates, tissue homogenates,

Διαβάστε περισσότερα

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium

IL-10-EASIA KAP1321. DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium IL-10-EASIA KAP1321 DIAsource ImmunoAssays S.A. - Rue de l'industrie, 8 - B-1400 Nivelles - Belgium : 090505/1 en Read entire protocol before use. IL-10-EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for

Διαβάστε περισσότερα

the total number of electrons passing through the lamp.

the total number of electrons passing through the lamp. 1. A 12 V 36 W lamp is lit to normal brightness using a 12 V car battery of negligible internal resistance. The lamp is switched on for one hour (3600 s). For the time of 1 hour, calculate (i) the energy

Διαβάστε περισσότερα

Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude

Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude Approximation of distance between locations on earth given by latitude and longitude Jan Behrens 2012-12-31 In this paper we shall provide a method to approximate distances between two points on earth

Διαβάστε περισσότερα

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme

Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme Math 6 SL Probability Distributions Practice Test Mark Scheme. (a) Note: Award A for vertical line to right of mean, A for shading to right of their vertical line. AA N (b) evidence of recognizing symmetry

Διαβάστε περισσότερα

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ

ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΙΣΑΓΩΓΗ ΣΤΗ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΛΕΝΑ ΦΛΟΚΑ Επίκουρος Καθηγήτρια Τµήµα Φυσικής, Τοµέας Φυσικής Περιβάλλοντος- Μετεωρολογίας ΓΕΝΙΚΟΙ ΟΡΙΣΜΟΙ Πληθυσµός Σύνολο ατόµων ή αντικειµένων στα οποία αναφέρονται

Διαβάστε περισσότερα

BD OptEIA ELISA Sets ELISA

BD OptEIA ELISA Sets ELISA BD OptEIA ELISA Sets ELISA BD OptEIA ELISA Sets ELISA CaptureDetection Detection 9620 170,000 ELISAEnzymed-Linked ImmunoSorbent Assay CaptureDetection BD OptEIA ELISA Set 2 BD OptEIA ELISA Set BD OptEIA

Διαβάστε περισσότερα

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007

ΚΥΠΡΙΑΚΗ ΕΤΑΙΡΕΙΑ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ CYPRUS COMPUTER SOCIETY ΠΑΓΚΥΠΡΙΟΣ ΜΑΘΗΤΙΚΟΣ ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΟΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΚΗΣ 19/5/2007 Οδηγίες: Να απαντηθούν όλες οι ερωτήσεις. Αν κάπου κάνετε κάποιες υποθέσεις να αναφερθούν στη σχετική ερώτηση. Όλα τα αρχεία που αναφέρονται στα προβλήματα βρίσκονται στον ίδιο φάκελο με το εκτελέσιμο

Διαβάστε περισσότερα

Section 8.3 Trigonometric Equations

Section 8.3 Trigonometric Equations 99 Section 8. Trigonometric Equations Objective 1: Solve Equations Involving One Trigonometric Function. In this section and the next, we will exple how to solving equations involving trigonometric functions.

Διαβάστε περισσότερα

ΛΟΗ Β. PDF created with pdffactory trial version

ΛΟΗ Β. PDF created with pdffactory trial version Αξιολόγηση προσδιορισμών Αναλυτική επίδοση προσδιορισμού Επιλογή μεθόδου προσδιορισμού βάσει αναλυτικών χαρακτηριστικών και ελέγχου ποιότητας των μετρήσεων Διαγνωστική αξία ανάλυσης Επιλογή δοκιμασίας

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΤΕΧΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΚΑΙ ΔΙΑΧΕΙΡΙΣΗΣ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΟΣ Πτυχιακή εργασία ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΥΠΕΡΗΧΩΝ ΣΤΗΝ LISTERIA GRAYI ΣΤΟ ΓΑΛΑ: ΕΠΙΒΙΩΣΗ ΚΑΙ ΦΥΣΙΚΟΧΗΜΙΚΕΣ ΕΠΙΔΡΑΣΕΙΣ. Άρτεμις

Διαβάστε περισσότερα

HOMEWORK 4 = G. In order to plot the stress versus the stretch we define a normalized stretch:

HOMEWORK 4 = G. In order to plot the stress versus the stretch we define a normalized stretch: HOMEWORK 4 Problem a For the fast loading case, we want to derive the relationship between P zz and λ z. We know that the nominal stress is expressed as: P zz = ψ λ z where λ z = λ λ z. Therefore, applying

Διαβάστε περισσότερα

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS

CHAPTER 25 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS CHAPTER 5 SOLVING EQUATIONS BY ITERATIVE METHODS EXERCISE 104 Page 8 1. Find the positive root of the equation x + 3x 5 = 0, correct to 3 significant figures, using the method of bisection. Let f(x) =

Διαβάστε περισσότερα

Daewoo Technopark A-403, Dodang-dong, Wonmi-gu, Bucheon-city, Gyeonggido, Korea LM-80 Test Report

Daewoo Technopark A-403, Dodang-dong, Wonmi-gu, Bucheon-city, Gyeonggido, Korea LM-80 Test Report LM-80 Test Report Approved Method: Measuring Lumen Maintenance of LED Light Sources Project Number: KILT1212-U00216 Date: September 17 th, 2013 Requested by: Dongbu LED Co., Ltd 90-1, Bongmyeong-Ri, Namsa-Myeon,

Διαβάστε περισσότερα

Τοξικολογία Τροφίμων. Έλεγχος υπολειμμάτων με τη μέθοδο ELISA

Τοξικολογία Τροφίμων. Έλεγχος υπολειμμάτων με τη μέθοδο ELISA Τοξικολογία Τροφίμων Έλεγχος υπολειμμάτων με τη μέθοδο ELISA Στόχοι ενότητας Εξοικείωση με το kit προσδιορισμού αφλατοξίνης Μ1 σε δείγμα γάλακτος Κατανόηση των κρίσιμων σημείων εφαρμογής της συγκεκριμένης

Διαβάστε περισσότερα

Solution Series 9. i=1 x i and i=1 x i.

Solution Series 9. i=1 x i and i=1 x i. Lecturer: Prof. Dr. Mete SONER Coordinator: Yilin WANG Solution Series 9 Q1. Let α, β >, the p.d.f. of a beta distribution with parameters α and β is { Γ(α+β) Γ(α)Γ(β) f(x α, β) xα 1 (1 x) β 1 for < x

Διαβάστε περισσότερα

- Ανοσονεφελομετρική μέθοδος

- Ανοσονεφελομετρική μέθοδος - Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποιοτικό προσδιορισμό της α-1 Αντιθρυψίνης ( ΑΑΤ ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον υπερευαίσθητο ποσοτικό προσδιορισμό της C Αντιδρώσας Πρωτεΐνης (

Διαβάστε περισσότερα

5.4 The Poisson Distribution.

5.4 The Poisson Distribution. The worst thing you can do about a situation is nothing. Sr. O Shea Jackson 5.4 The Poisson Distribution. Description of the Poisson Distribution Discrete probability distribution. The random variable

Διαβάστε περισσότερα

Mean bond enthalpy Standard enthalpy of formation Bond N H N N N N H O O O

Mean bond enthalpy Standard enthalpy of formation Bond N H N N N N H O O O Q1. (a) Explain the meaning of the terms mean bond enthalpy and standard enthalpy of formation. Mean bond enthalpy... Standard enthalpy of formation... (5) (b) Some mean bond enthalpies are given below.

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της Αντιστρεπτολυσίνης Ο ( ASO ) σε ανθρώπινο

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό των Ρευματοειδών Παραγόντων ( RF ) σε ανθρώπινο

Διαβάστε περισσότερα

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 4 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση.

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 4 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση. -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της Αλβουμίνης(ALB) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα EasyNeph.

Διαβάστε περισσότερα

Section 9.2 Polar Equations and Graphs

Section 9.2 Polar Equations and Graphs 180 Section 9. Polar Equations and Graphs In this section, we will be graphing polar equations on a polar grid. In the first few examples, we will write the polar equation in rectangular form to help identify

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της α-1 Όξινης Γλυκοπρωτεΐνης ( AGP ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με

Διαβάστε περισσότερα

MSM Men who have Sex with Men HIV -

MSM Men who have Sex with Men HIV - ,**, The Japanese Society for AIDS Research The Journal of AIDS Research HIV,0 + + + + +,,, +, : HIV : +322,*** HIV,0,, :., n,0,,. + 2 2, CD. +3-ml n,, AIDS 3 ARC 3 +* 1. A, MSM Men who have Sex with Men

Διαβάστε περισσότερα

ΜΕΘΟΔΟΣ Ανοσονεφελομετρική υπερευαίσθητη μέθοδος ενισχυμένη με latex.

ΜΕΘΟΔΟΣ Ανοσονεφελομετρική υπερευαίσθητη μέθοδος ενισχυμένη με latex. - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της C Αντιδρώσας Πρωτεΐνης ( ΗS CRP ) σε ανθρώπινο

Διαβάστε περισσότερα

!Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr

!Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr !Stato di tensione triassiale!stato di tensione piano!cerchio di Mohr Stato di tensione F A = F / A F Traione pura stato di tensione monoassiale F M A M Traione e torsione stato di tensione piano = F /

Διαβάστε περισσότερα

Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1

Main source: Discrete-time systems and computer control by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 Main source: "Discrete-time systems and computer control" by Α. ΣΚΟΔΡΑΣ ΨΗΦΙΑΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ ΔΙΑΛΕΞΗ 4 ΔΙΑΦΑΝΕΙΑ 1 A Brief History of Sampling Research 1915 - Edmund Taylor Whittaker (1873-1956) devised a

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της β-2 Μικροσφαιρίνης (Uβ2M) σε ανθρώπινα

Διαβάστε περισσότερα

The challenges of non-stable predicates

The challenges of non-stable predicates The challenges of non-stable predicates Consider a non-stable predicate Φ encoding, say, a safety property. We want to determine whether Φ holds for our program. The challenges of non-stable predicates

Διαβάστε περισσότερα

IL-6-EASIA-CE KAP1261

IL-6-EASIA-CE KAP1261 IL6EASIACE KAP1261 DIAsource ImmunoAssays S.A. Rue du Bosquet, 2 B1348 LouvainlaNeuve Belgium : 110221/4 en Read entire protocol before use. IL6EASIA I. INTENDED USE Immunoenzymetric assay for the in vitro

Διαβάστε περισσότερα

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση.

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση. -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό Συμπληρώματος ( C3 ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα EasyNeph.

Διαβάστε περισσότερα

EE512: Error Control Coding

EE512: Error Control Coding EE512: Error Control Coding Solution for Assignment on Finite Fields February 16, 2007 1. (a) Addition and Multiplication tables for GF (5) and GF (7) are shown in Tables 1 and 2. + 0 1 2 3 4 0 0 1 2 3

Διαβάστε περισσότερα

1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model

1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model 1) Formulation of the Problem as a Linear Programming Model Let xi = the amount of money invested in each of the potential investments in, where (i=1,2, ) x1 = the amount of money invested in Savings Account

Διαβάστε περισσότερα

DETERMINATION OF THERMAL PERFORMANCE OF GLAZED LIQUID HEATING SOLAR COLLECTORS

DETERMINATION OF THERMAL PERFORMANCE OF GLAZED LIQUID HEATING SOLAR COLLECTORS ΕΘΝΙΚΟ ΚΕΝΤΡΟ ΕΡΕΥΝΑΣ ΦΥΣΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΗΜΟΚΡΙΤΟΣ / DEMOKRITOS NATIONAL CENTER FOR SCIENTIFIC RESEARCH ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΟΚΙΜΩΝ ΗΛΙΑΚΩΝ & ΑΛΛΩΝ ΕΝΕΡΓΕΙΑΚΩΝ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ LABORATORY OF TESTIN SOLAR & OTHER ENERY

Διαβάστε περισσότερα

Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές

Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές From law to practice-praxis Αποτελέσματα έρευνας σε συνδικαλιστές Το πρόγραμμα συγχρηματοδοτείται από την ΕΕ Συγχρηματοδοτείται από την Ευρωπαϊκή Ένωση Γνωρίζετε τι προβλέπει η Οδηγία 2002/14; Sa che cosa

Διαβάστε περισσότερα

Strain gauge and rosettes

Strain gauge and rosettes Strain gauge and rosettes Introduction A strain gauge is a device which is used to measure strain (deformation) on an object subjected to forces. Strain can be measured using various types of devices classified

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό απτοσφαιρίνης ( HPT ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα EasyNeph.

Διαβάστε περισσότερα

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση.

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση. -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της Ανοσοσφαιρίνης M (IGM) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία

ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ. Πτυχιακή εργασία ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΚΥΠΡΟΥ ΣΧΟΛΗ ΓΕΩΠΟΝΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΕΠΙΣΤΗΜΗΣ ΤΡΟΦΙΜΩΝ Πτυχιακή εργασία ΜΕΛΕΤΗ ΠΟΛΥΦΑΙΝΟΛΩΝ ΚΑΙ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΗΣ ΙΚΑΝΟΤΗΤΑΣ ΣΟΚΟΛΑΤΑΣ Αναστασία Σιάντωνα Λεμεσός

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της σερουλοπλασμίνης ( CER ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

Jesse Maassen and Mark Lundstrom Purdue University November 25, 2013

Jesse Maassen and Mark Lundstrom Purdue University November 25, 2013 Notes on Average Scattering imes and Hall Factors Jesse Maassen and Mar Lundstrom Purdue University November 5, 13 I. Introduction 1 II. Solution of the BE 1 III. Exercises: Woring out average scattering

Διαβάστε περισσότερα

Copper-catalyzed formal O-H insertion reaction of α-diazo-1,3-dicarb- onyl compounds to carboxylic acids with the assistance of isocyanide

Copper-catalyzed formal O-H insertion reaction of α-diazo-1,3-dicarb- onyl compounds to carboxylic acids with the assistance of isocyanide Electronic Supplementary Material (ESI) for ChemComm. This journal is The Royal Society of Chemistry 2014 Copper-catalyzed formal O-H insertion reaction of α-diazo-1,3-dicarb- onyl compounds to carboxylic

Διαβάστε περισσότερα

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν

Ε Κ Θ Ε Σ Η Δ Ο Κ Ι Μ Ω Ν Αριθμός έκθεζης δοκιμών / Test report number Σειριακός αριθμός οργάνοσ / Instrument serial No T Πελάηης / Customer TOTAL Q Επγαζηήπια Διακπιβώζεων A.E. Κοπγιαλενίος 20, Τ.Κ. 11526 Αθήνα 20 Korgialeniou

Διαβάστε περισσότερα

Instruction Execution Times

Instruction Execution Times 1 C Execution Times InThisAppendix... Introduction DL330 Execution Times DL330P Execution Times DL340 Execution Times C-2 Execution Times Introduction Data Registers This appendix contains several tables

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό Ανοσοσφαιρίνης (IGG) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα EasyNeph.

Διαβάστε περισσότερα

Homework 3 Solutions

Homework 3 Solutions Homework 3 Solutions Igor Yanovsky (Math 151A TA) Problem 1: Compute the absolute error and relative error in approximations of p by p. (Use calculator!) a) p π, p 22/7; b) p π, p 3.141. Solution: For

Διαβάστε περισσότερα

C.S. 430 Assignment 6, Sample Solutions

C.S. 430 Assignment 6, Sample Solutions C.S. 430 Assignment 6, Sample Solutions Paul Liu November 15, 2007 Note that these are sample solutions only; in many cases there were many acceptable answers. 1 Reynolds Problem 10.1 1.1 Normal-order

Διαβάστε περισσότερα

Code Breaker. TEACHER s NOTES

Code Breaker. TEACHER s NOTES TEACHER s NOTES Time: 50 minutes Learning Outcomes: To relate the genetic code to the assembly of proteins To summarize factors that lead to different types of mutations To distinguish among positive,

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της Λιποπρωτεΐνης α ( LPA ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα

Διαβάστε περισσότερα

Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests

Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests Other Test Constructions: Likelihood Ratio & Bayes Tests Side-Note: So far we have seen a few approaches for creating tests such as Neyman-Pearson Lemma ( most powerful tests of H 0 : θ = θ 0 vs H 1 :

Διαβάστε περισσότερα

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1)

Nuclear Physics 5. Name: Date: 8 (1) Name: Date: Nuclear Physics 5. A sample of radioactive carbon-4 decays into a stable isotope of nitrogen. As the carbon-4 decays, the rate at which the amount of nitrogen is produced A. decreases linearly

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της β-2 μικροσφαιρίνης ( B2M ) σε ανθρώπινο

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της α1 απολιποπρωτεΐνης ( APA ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση.

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση. -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό των αντισωμάτων της Ανοσοσφαιρίνης G ( IGG ) σε ανθρώπινο ΕΝΥ με

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό του Συμπληρώματος C4 ( C4 ) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

2. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν.

2. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν. Experiental Copetition: 14 July 011 Proble Page 1 of. Μηχανικό Μαύρο Κουτί: κύλινδρος με μια μπάλα μέσα σε αυτόν. Ένα μικρό σωματίδιο μάζας (μπάλα) βρίσκεται σε σταθερή απόσταση z από το πάνω μέρος ενός

Διαβάστε περισσότερα

Potential Dividers. 46 minutes. 46 marks. Page 1 of 11

Potential Dividers. 46 minutes. 46 marks. Page 1 of 11 Potential Dividers 46 minutes 46 marks Page 1 of 11 Q1. In the circuit shown in the figure below, the battery, of negligible internal resistance, has an emf of 30 V. The pd across the lamp is 6.0 V and

Διαβάστε περισσότερα

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

- Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ - Ενισχυμένη με latex νεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική latex εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της α-1 Μικροσφαιρίνης ( ua1m) σε ανθρώπινα

Διαβάστε περισσότερα

[1] P Q. Fig. 3.1

[1] P Q. Fig. 3.1 1 (a) Define resistance....... [1] (b) The smallest conductor within a computer processing chip can be represented as a rectangular block that is one atom high, four atoms wide and twenty atoms long. One

Διαβάστε περισσότερα

Απόκριση σε Μοναδιαία Ωστική Δύναμη (Unit Impulse) Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο. Απόστολος Σ.

Απόκριση σε Μοναδιαία Ωστική Δύναμη (Unit Impulse) Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο. Απόστολος Σ. Απόκριση σε Δυνάμεις Αυθαίρετα Μεταβαλλόμενες με το Χρόνο The time integral of a force is referred to as impulse, is determined by and is obtained from: Newton s 2 nd Law of motion states that the action

Διαβάστε περισσότερα

Assalamu `alaikum wr. wb.

Assalamu `alaikum wr. wb. LUMP SUM Assalamu `alaikum wr. wb. LUMP SUM Wassalamu alaikum wr. wb. Assalamu `alaikum wr. wb. LUMP SUM Wassalamu alaikum wr. wb. LUMP SUM Lump sum lump sum lump sum. lump sum fixed price lump sum lump

Διαβάστε περισσότερα

k A = [k, k]( )[a 1, a 2 ] = [ka 1,ka 2 ] 4For the division of two intervals of confidence in R +

k A = [k, k]( )[a 1, a 2 ] = [ka 1,ka 2 ] 4For the division of two intervals of confidence in R + Chapter 3. Fuzzy Arithmetic 3- Fuzzy arithmetic: ~Addition(+) and subtraction (-): Let A = [a and B = [b, b in R If x [a and y [b, b than x+y [a +b +b Symbolically,we write A(+)B = [a (+)[b, b = [a +b

Διαβάστε περισσότερα

Biodiesel quality and EN 14214:2012

Biodiesel quality and EN 14214:2012 3η Ενότητα: «Αγορά Βιοκαυσίμων στην Ελλάδα: Τάσεις και Προοπτικές» Biodiesel quality and EN 14214:2012 Dr. Hendrik Stein Pilot Plant Manager, ASG Analytik Content Introduction Development of the Biodiesel

Διαβάστε περισσότερα

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση.

Reagent Β: n º 1 φιαλίδιο x 5 ml.υγρό αντιδραστήριο, έτοιμο προς χρήση. -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό των αντισωμάτων έναντι της Τρανσφερίνης ( TRF ) σε ανθρώπινο ορό

Διαβάστε περισσότερα

PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities

PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities PARTIAL NOTES for 6.1 Trigonometric Identities tanθ = sinθ cosθ cotθ = cosθ sinθ BASIC IDENTITIES cscθ = 1 sinθ secθ = 1 cosθ cotθ = 1 tanθ PYTHAGOREAN IDENTITIES sin θ + cos θ =1 tan θ +1= sec θ 1 + cot

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της Ανοσοσφαιρίνης A (IGA) σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα με το σύστημα

Διαβάστε περισσότερα

Areas and Lengths in Polar Coordinates

Areas and Lengths in Polar Coordinates Kiryl Tsishchanka Areas and Lengths in Polar Coordinates In this section we develop the formula for the area of a region whose boundary is given by a polar equation. We need to use the formula for the

Διαβάστε περισσότερα

Εγκατάσταση λογισμικού και αναβάθμιση συσκευής Device software installation and software upgrade

Εγκατάσταση λογισμικού και αναβάθμιση συσκευής Device software installation and software upgrade Για να ελέγξετε το λογισμικό που έχει τώρα η συσκευή κάντε κλικ Menu > Options > Device > About Device Versions. Στο πιο κάτω παράδειγμα η συσκευή έχει έκδοση λογισμικού 6.0.0.546 με πλατφόρμα 6.6.0.207.

Διαβάστε περισσότερα

Example Sheet 3 Solutions

Example Sheet 3 Solutions Example Sheet 3 Solutions. i Regular Sturm-Liouville. ii Singular Sturm-Liouville mixed boundary conditions. iii Not Sturm-Liouville ODE is not in Sturm-Liouville form. iv Regular Sturm-Liouville note

Διαβάστε περισσότερα

10 MERCHIA. 10. Starting from standing position (where the SIGN START ) without marshal (self start) 5 minutes after TC4 KALO LIVADI OUT

10 MERCHIA. 10. Starting from standing position (where the SIGN START ) without marshal (self start) 5 minutes after TC4 KALO LIVADI OUT Date: 22 October 2016 Time: 09:00 hrs Subject: BULLETIN No 5 Document No: 1.6 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Διαβάστε περισσότερα

ΒΑΣΙΚΕΣ ΕΝΝΟΙΕΣ ΣΤΗΝ ΕΝΟΡΓΑΝΗ ΑΝΑΛΥΣΗ

ΒΑΣΙΚΕΣ ΕΝΝΟΙΕΣ ΣΤΗΝ ΕΝΟΡΓΑΝΗ ΑΝΑΛΥΣΗ ΒΑΣΙΚΕΣ ΕΝΝΟΙΕΣ ΣΤΗΝ ΕΝΟΡΓΑΝΗ ΑΝΑΛΥΣΗ Αναλυτική Μέθοδος- Αναλυτικό Πρόβλημα. Ανάλυση, Προσδιορισμός και Μέτρηση. Πρωτόκολλο. Ευαισθησία Μεθόδου. Εκλεκτικότητα. Όριο ανίχνευσης (limit of detection, LOD).

Διαβάστε περισσότερα

Modbus basic setup notes for IO-Link AL1xxx Master Block

Modbus basic setup notes for IO-Link AL1xxx Master Block n Modbus has four tables/registers where data is stored along with their associated addresses. We will be using the holding registers from address 40001 to 49999 that are R/W 16 bit/word. Two tables that

Διαβάστε περισσότερα

6.1. Dirac Equation. Hamiltonian. Dirac Eq.

6.1. Dirac Equation. Hamiltonian. Dirac Eq. 6.1. Dirac Equation Ref: M.Kaku, Quantum Field Theory, Oxford Univ Press (1993) η μν = η μν = diag(1, -1, -1, -1) p 0 = p 0 p = p i = -p i p μ p μ = p 0 p 0 + p i p i = E c 2 - p 2 = (m c) 2 H = c p 2

Διαβάστε περισσότερα

A facile and general route to 3-((trifluoromethyl)thio)benzofurans and 3-((trifluoromethyl)thio)benzothiophenes

A facile and general route to 3-((trifluoromethyl)thio)benzofurans and 3-((trifluoromethyl)thio)benzothiophenes Electronic Supplementary Material (ESI) for ChemComm. This journal is The Royal Society of Chemistry 2014 A facile and general route to 3-((trifluoromethyl)thio)benzofurans and 3-((trifluoromethyl)thio)benzothiophenes

Διαβάστε περισσότερα

ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ

ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ ΠΤΥΧΙΑΚΗ ΕΡΓΑΣΙΑ ΤΜΗΜΑ ΙΑΤΡΟΦΗΣ ΚΑΙ ΙΑΙΤΟΛΟΓΙΑΣ, ΤΕΙ ΚΡΗΤΗΣ ΙΑΤΡΟΦΙΚΗ ΦΡΟΝΤΙ Α ΓΙΑ ΤΑΞΙ ΙΩΤΕΣ ΣΥΝΤΟΜΗΣ ΚΑΙ ΜΑΚΡΑΣ ΙΑΡΚΕΙΑΣ ΕΠΙΜΕΛΕΙΑ: ΑΛΕΞΙΑ ΤΣΕΡΛΙΓΚΑ ΥΠΕΥΘΥΝΟΣ ΚΑΘΗΓΗΤΗΣ: Γ. Α. ΦΡΑΓΚΙΑ ΑΚΗΣ. 2012 σελ.

Διαβάστε περισσότερα

MACCHINE A FLUIDO 2 CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH

MACCHINE A FLUIDO 2 CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH MACCHINE A FLUIDO CORRELAZIONE RENDIMENTO TURBINA A GAS S.F. SMITH MACCHINE A FLUIDO STADIO R.5 * 4 4 fs f 4 ( ) L MACCHINE A FLUIDO STADIO R.5 ϑ S ϑr a tan ( ) ξ.5 ( ϑ / 9) / 4 ( ) 3 MACCHINE A FLUIDO

Διαβάστε περισσότερα

Areas and Lengths in Polar Coordinates

Areas and Lengths in Polar Coordinates Kiryl Tsishchanka Areas and Lengths in Polar Coordinates In this section we develop the formula for the area of a region whose boundary is given by a polar equation. We need to use the formula for the

Διαβάστε περισσότερα

Srednicki Chapter 55

Srednicki Chapter 55 Srednicki Chapter 55 QFT Problems & Solutions A. George August 3, 03 Srednicki 55.. Use equations 55.3-55.0 and A i, A j ] = Π i, Π j ] = 0 (at equal times) to verify equations 55.-55.3. This is our third

Διαβάστε περισσότερα

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ

-Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ -Ανοσονεφελομετρική μέθοδος ΓΕΝΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Διαγνωστική ανοσονεφελομετρική εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό των λ-ελαφρών Αλυσίδων της Ανοσοσφαιρίνης ( Ελεύθερες και Δεσμευμένες)

Διαβάστε περισσότερα

ST5224: Advanced Statistical Theory II

ST5224: Advanced Statistical Theory II ST5224: Advanced Statistical Theory II 2014/2015: Semester II Tutorial 7 1. Let X be a sample from a population P and consider testing hypotheses H 0 : P = P 0 versus H 1 : P = P 1, where P j is a known

Διαβάστε περισσότερα

Stato di tensione triassiale Stato di tensione piano Cerchio di Mohr

Stato di tensione triassiale Stato di tensione piano Cerchio di Mohr Stato di tensione triassiale Stato di tensione iano Cerchio di Mohr Stato di tensione F A = F / A F Traione ura stato di tensione monoassiale F M A M Traione e torsione stato di tensione iano = F / A =

Διαβάστε περισσότερα

Numerical Analysis FMN011

Numerical Analysis FMN011 Numerical Analysis FMN011 Carmen Arévalo Lund University carmen@maths.lth.se Lecture 12 Periodic data A function g has period P if g(x + P ) = g(x) Model: Trigonometric polynomial of order M T M (x) =

Διαβάστε περισσότερα

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ

ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ ΚΑΣΚΑΦΕΤΟΥ ΣΩΤΗΡΙΑ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΠΕΙΡΑΙΩΣ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΜΕΤΑΠΤΥΧΙΑΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ ΔΙΟΙΚΗΣΗ ΤΗΣ ΥΓΕΙΑΣ ΤΕΙ ΠΕΙΡΑΙΑ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗΣ ΣΥΝΤΑΓΟΓΡΑΦΗΣΗΣ ΚΑΙ Η ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΗΣ ΕΦΑΡΜΟΓΗΣ ΤΗΣ ΣΤΗΝ ΕΛΛΑΔΑ: Ο.Α.Ε.Ε. ΠΕΡΙΦΕΡΕΙΑ ΠΕΛΟΠΟΝΝΗΣΟΥ

Διαβάστε περισσότερα

Dr. D. Dinev, Department of Structural Mechanics, UACEG

Dr. D. Dinev, Department of Structural Mechanics, UACEG Lecture 4 Material behavior: Constitutive equations Field of the game Print version Lecture on Theory of lasticity and Plasticity of Dr. D. Dinev, Department of Structural Mechanics, UACG 4.1 Contents

Διαβάστε περισσότερα

derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates

derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates derivation of the Laplacian from rectangular to spherical coordinates swapnizzle 03-03- :5:43 We begin by recognizing the familiar conversion from rectangular to spherical coordinates (note that φ is used

Διαβάστε περισσότερα

Surface Mount Multilayer Chip Capacitors for Commodity Solutions

Surface Mount Multilayer Chip Capacitors for Commodity Solutions Surface Mount Multilayer Chip Capacitors for Commodity Solutions Below tables are test procedures and requirements unless specified in detail datasheet. 1) Visual and mechanical 2) Capacitance 3) Q/DF

Διαβάστε περισσότερα

Second Order RLC Filters

Second Order RLC Filters ECEN 60 Circuits/Electronics Spring 007-0-07 P. Mathys Second Order RLC Filters RLC Lowpass Filter A passive RLC lowpass filter (LPF) circuit is shown in the following schematic. R L C v O (t) Using phasor

Διαβάστε περισσότερα

Microscopi a penna PEAK. Sommario

Microscopi a penna PEAK. Sommario Microscopi a penna PEAK Sommario Microscopi a penna PEAK 2001-15 2 Microscopio a penna PEAK 2001-15, versione lunga 3 Microscopio a penna PEAK 2001-25 3 Microscopio a penna PEAK 2001-50 4 Microscopio a

Διαβάστε περισσότερα

«ΕΠΙΔΙΩΚΟΝΤΑΣ ΤΗΝ ΑΡΙΣΤΕΙΑ ΣΤΗΝ ΚΙΝΗΤΙΚΟΤΗΤΑ ERASMUS» 29 ΝΟΕΜΒΡΙΟΥ 2013

«ΕΠΙΔΙΩΚΟΝΤΑΣ ΤΗΝ ΑΡΙΣΤΕΙΑ ΣΤΗΝ ΚΙΝΗΤΙΚΟΤΗΤΑ ERASMUS» 29 ΝΟΕΜΒΡΙΟΥ 2013 ΗΜΕΡΙΔΑ ΤΗΣ ΕΘΝΙΚΗΣ ΜΟΝΑΔΑΣ / ΙΚΥ ΕΥΡΩΠΑΪΚΟ ΕΚΠΑΙΔΕΥΤΙΚΟ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΔΙΑ ΒΙΟΥ ΜΑΘΗΣΗ LLP ERASMUS «ΕΠΙΔΙΩΚΟΝΤΑΣ ΤΗΝ ΑΡΙΣΤΕΙΑ ΣΤΗΝ ΚΙΝΗΤΙΚΟΤΗΤΑ ERASMUS» 29 ΝΟΕΜΒΡΙΟΥ 2013 Erasmus + Θέματα ακαδημαϊκής αναγνώρισης

Διαβάστε περισσότερα

ANSWERSHEET (TOPIC = DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION #2. h 0 h h 0 h h 0 ( ) g k = g 0 + g 1 + g g 2009 =?

ANSWERSHEET (TOPIC = DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION #2. h 0 h h 0 h h 0 ( ) g k = g 0 + g 1 + g g 2009 =? Teko Classes IITJEE/AIEEE Maths by SUHAAG SIR, Bhopal, Ph (0755) 3 00 000 www.tekoclasses.com ANSWERSHEET (TOPIC DIFFERENTIAL CALCULUS) COLLECTION # Question Type A.Single Correct Type Q. (A) Sol least

Διαβάστε περισσότερα

1. Ηλεκτρικό μαύρο κουτί: Αισθητήρας μετατόπισης με βάση τη χωρητικότητα

1. Ηλεκτρικό μαύρο κουτί: Αισθητήρας μετατόπισης με βάση τη χωρητικότητα IPHO_42_2011_EXP1.DO Experimental ompetition: 14 July 2011 Problem 1 Page 1 of 5 1. Ηλεκτρικό μαύρο κουτί: Αισθητήρας μετατόπισης με βάση τη χωρητικότητα Για ένα πυκνωτή χωρητικότητας ο οποίος είναι μέρος

Διαβάστε περισσότερα

2 Composition. Invertible Mappings

2 Composition. Invertible Mappings Arkansas Tech University MATH 4033: Elementary Modern Algebra Dr. Marcel B. Finan Composition. Invertible Mappings In this section we discuss two procedures for creating new mappings from old ones, namely,

Διαβάστε περισσότερα

1. Αφετηρία από στάση χωρίς κριτή (self start όπου πινακίδα εκκίνησης) 5 λεπτά µετά την αφετηρία σας από το TC1B KALO LIVADI OUT

1. Αφετηρία από στάση χωρίς κριτή (self start όπου πινακίδα εκκίνησης) 5 λεπτά µετά την αφετηρία σας από το TC1B KALO LIVADI OUT Date: 21 October 2016 Time: 14:00 hrs Subject: BULLETIN No 3 Document No: 1.3 --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Διαβάστε περισσότερα

H&R Legionella One Step Legionella pneumophila Antigen Test Device

H&R Legionella One Step Legionella pneumophila Antigen Test Device H&R Legionella One Step Legionella pneumophila Antigen Test Device Ανδριάνα Μοννά ΑΜ: 10031 Πρακτική Άσκηση : Υγείας Μέλαθρον Προβλεπόμενη χρήση To Η&R Legionella One Step Legionella pneumophila Antigen

Διαβάστε περισσότερα