ABX Pentra CK-MB RTU. Προοριζόμενη χρήση: Διαγνωστικό αντιδραστήριο για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό CK-MB σε ορό με χρωματομετρία.

Transcript

1 2011/03/29 A93A00062MEL A11A x 20 ml 1 x 5 ml 400 Προοριζόμενη χρήση: Διαγνωστικό αντιδραστήριο για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό CK-MB σε ορό με χρωματομετρία. Κλινικό ενδιαφέρον (1, 2) Η κινάση της κρεατίνης (CK) είναι ένα ένζυμο το οποίο αποτελείται από ισοένζυμα με επικρατέστερα αυτά του μυός (CK-M) και του εγκεφάλου (CK-B). Η κινάση της κρεατίνης (CK) συναντάται στον ορό σε διμερική μορφή ως CK-MM, CK-MB, CK-BB και ως μακροένζυμο. Αυξημένες τιμές CK παρατηρούνται σε βλάβες του μυοκαρδίου και παθήσεις των σκελετικών μυών. Η μέτρηση της CK χρησιμοποιείται κυρίως σε συνδυασμό με την CK-MB για τη διάγνωση και την παρακολούθηση του εμφράγματος του μυοκαρδίου. Μέθοδος a Ιστορικό: τη μέθοδο για τον προσδιορισμό της κινάσης της κρεατινίνης (CK) με συζευγμένες ενζυματικές αντιδράσεις περιέγραψε αρχικά ο Oliver (3) και στη συνέχεια την τροποποίησε ο Rosalky (4). Η Γερμανική Εταιρεία Κλινικής Χημείας (DGKC) (5) και η Διεθνής Ομοσπονδία Κλινικής Χημείας (IFCC) (6) τυποποίησαν στη συνέχεια τη μέθοδο συνιστώντας την αντιστρεψιμότητα της οξείδωσης της CK και την ενεργοποίησή της με N-ακετυλοκυστεΐνη (NAC). Η IFCC την επιβεβαίωσε και επέκτεινε τη μέθοδο στους 37 C το 2002 (7). Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται εδώ. Βελτιστοποιημένη εξέταση UV σύμφωνα με τη Γερμανική Εταιρεία Κλινικής Χημείας (DGKC) και τη Διεθνή Ομοσπονδία Κλινικής Χημείας (IFCC) για CK με αναστολή των ισοενζύμων CK-M από μονοκλωνικά αντισώματα (5, 8). Η CK-MB αποτελείται από τις υπομονάδες CK-MB. Αντισώματα εξειδικευμένα έναντι της CK-M, αναστέλλουν πλήρως την CK-MM (στην οποία οφείλεται το μεγαλύτερο μέρος της ενεργότητας της CK), καθώς και την υπομονάδα CK-M της CK-MB. Μετράται μόνο η ενεργότητα της CK-B η οποία είναι το ήμισυ της ενεργότητας της CK-MB. Αντιδραστήρια b Ο είναι έτοιμος για χρήση. Αντιδραστήριο 1: Ιμιδαζόλη Γλυκόζη N-ακετυλοκυστεΐνη (NAC) Οξικό μαγνήσιο EDTA-Na 2 NADP Εξοκινάση (HK) Μονοκλωνικά αντισώματα έναντι ανθρώπινης CK-M, ικανότητα αναστολής Αντιδραστήριο 2: Ιμιδαζόλη Φωσφορική κρεατίνη ADP AMP Διαδενοσικό πενταφωσφορικό Γλυκοζο-6-φωσφορική αφυδρογονάση (G6P-DH) Σταθεροποιητές 120 mmol/l 25 mmol/l 25 mmol/l 12,5 mmol/l 2 mmol/l 2,5 mmol/l 5 ku/l 2500 U/L 90 mmol/l 150 mmol/l 10 mmol/l 28 mmol/l 50 µmol/l 15 ku/l Το πρέπει να χρησιμοποιείται σύμφωνα με τις οδηγίες του παρόντος αντιδραστηρίου. Εάν χρησιμοποιηθεί με διαφορετικό τρόπο, ο κατασκευαστής δεν μπορεί να εγγυηθεί την απόδοσή του. Form-0846 Rev.4 a Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: τροποποίηση αντισώματος. b Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: "Αντιδραστήρια": τροποποίηση.

2 Χειρισμός c 1. Μεταφέρετε τον απαραίτητο όγκο του αντιδραστηρίου R1 για τις αναλύσεις μιας ημέρας σε φιαλίδιο αντιδραστηρίου 15, 10 ή 4 ml. 2. Μεταφέρετε τον απαραίτητο όγκο του αντιδραστηρίου R2 για τις αναλύσεις μιας ημέρας σε φιαλίδιο αντιδραστηρίου 10 ή 4 ml. Το αντιδραστήριο 1 και το αντιδραστήριο 2 πρέπει να τοποθετηθούν στον ίδιο φορέα αντιδραστηρίου στο τμήμα A, B ή C (βλέπε διάγραμμα παρακάτω, το τμήμα Α λειτουργεί ως παράδειγμα). CK Control, Κωδ. A11A01786 (δεν περιλαμβάνεται) 4 x 3 ml (λυοφιλιωμένο) Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να αναλύεται καθημερινά και/ή μετά από βαθμονόμηση. Η συχνότητα των ορών ελέγχου και τα διαστήματα εμπιστοσύνης πρέπει να ανταποκρίνονται στις οδηγίες του εργαστηρίου και τις οδηγίες της συγκεκριμένης χώρας. Τα αποτελέσματα πρέπει να βρίσκονται εντός των καθορισμένων ορίων εμπιστοσύνης. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει μία διαδικασία η οποία πρέπει να ακολουθείται σε περίπτωση που τα αποτελέσματα υπερβαίνουν τα καθορισμένα όρια εμπιστοσύνης. R 2 Απαιτούνται υλικά αλλά δεν παρέχονται R 1 Αυτόματος βιοχημικός αναλυτής: 400 Υλικό ελέγχου: CK Control, Κωδ. A11A01786 Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός. 3. Τοποθετήστε το αντιδραστήριο R1 στη θέση 1 ενός διαθέσιμου τμήματος. Χρησιμοποιήστε ένα από τα ακόλουθα: φιαλίδιο αντιδραστηρίου των 15 ml φιαλίδιο αντιδραστηρίου των 10 ml + ειδικό φιαλίδιο αντιδραστηρίου των 4 ml + ειδικό 4. Τοποθετήστε το αντιδραστήριο R2 στη θέση 2 του ίδιου τμήματος που επιλέξατε. Χρησιμοποιήστε ένα από τα ακόλουθα: φιαλίδιο αντιδραστηρίου των 10 ml + ειδικό φιαλίδιο αντιδραστηρίου των 4 ml + ειδικό 5. Εάν έχει σχηματιστεί αφρός, αφαιρέστε τον με μία πλαστική πιπέτα. 6. Τοποθετήστε το φορέα αντιδραστηρίων στο ψυγείο αντιδραστηρίων του 400. Βαθμονομητής Μη εφαρμόσιμο: βαθμονόμηση βάσει συντελεστή. Ορός ελέγχου Για τον εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο, χρησιμοποιήστε: Δείγμα Μη αιμολυμένος ορός. Σταθερότητα (9): Στους C: 1 ημέρα Στους 2-8 C: 1 εβδομάδα Στους - 20 C: 4 εβδομάδες Εύρος τιμών αναφοράς (1) Κάθε εργαστήριο πρέπει να καθιερώνει το δικό του εύρος φυσιολογικών τιμών. Οι τιμές που αναφέρονται εδώ χρησιμοποιούνται ως ενδεικτικές μόνο. < 24 U/L (στους 37 C). Φύλαξη και Σταθερότητα d Τα αντιδραστήρια, σε φιαλίδια που δεν έχουν ανοιχτεί, παραμένουν σταθερά μέχρι την ημερομηνία λήξης της ετικέτας, εφόσον αποθηκεύονται σε θερμοκρασία 2-8 C, προστατεύονται από το φως και κάθε μορφή μόλυνσης. Σταθερότητα μετά το άνοιγμα: ανατρέξτε στην παράγραφο «Απόδοση στον 400». Μην καταψύχετε τα αντιδραστήρια. c Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: αλλαγή χειρισμού. d Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: τροποποίηση φύλαξης και σταθερότητας.

3 Αλλοίωση συσκευασίας Σε περίπτωση αλλοίωσης της προστατευτικής συσκευασίας, μη χρησιμοποιείτε το αντιδραστήριο εάν η αλλοίωση ενδέχεται να έχει επίπτωση στην απόδοση του προϊόντος. Διαχείριση Αποβλήτων e Ανατρέξτε τις κατά τόπους νομικές απαιτήσεις. Το αντιδραστήριο αυτό περιέχει λιγότερο από 0,1% αζίδιο του νατρίου ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου ενδέχεται να αντιδράσει με μόλυβδο και χαλκό σχηματίζοντας εκρηκτικά αζίδια μετάλλων. Γενικές Προφυλάξεις Το αντιδραστήριο αυτό προορίζεται μόνο για επαγγελματική διαγνωστική χρήση in vitro. Αποφύγετε την κατάποση. Αποφύγετε την επαφή με το δέρμα και τις βλεννογόνους. Λαμβάνετε τις τυπικές εργαστηριακές προφυλάξεις ασφαλούς χρήσης. Τα φιαλίδια αντιδραστηρίων είναι μίας χρήσης και πρέπει να απορρίπτονται σύμφωνα με τις κατά τόπους νομικές διατάξεις. Παρακαλούμε να ανατρέξετε στο Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Προϊόντος που αφορά το αντιδραστήριο. Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν εάν υπάρχει εμφανής ένδειξη βιολογικής, χημικής ή φυσικής φθοράς. Απόδοση στον 400 f Τα χαρακτηριστικά απόδοσης που αναγράφονται παρακάτω προέκυψαν από τον αναλυτή 400. Αριθμός αναλύσεων: 125 αναλύσεις Σταθερότητα μετά την τοποθέτηση: Μετά από το άνοιγμα, η κασέτα αντιδραστηρίου που έχει τοποθετηθεί στο ψυγείο του 400 είναι σταθερή για 14 ημέρες. Όγκος δείγματος: 8,0 µl/ανάλυση Όριο ποσοτικοποίησης: Το όριο ποσοτικοποίησης καθορίζεται σύμφωνα με το πρωτόκολλο EP17-A του CLSI (NCCLS) (10) και ισούται με 8,10 U/L. Ακρίβεια και Επαναληψιμότητα: Επαναληψιμότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγματα χαμηλής, μέτριας και υψηλής συγκέντρωσης και 1 υλικό ελέγχου υποβλήθηκαν σε ανάλυση 20 φορές σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου Valtec (11). Δείγμα υλικού ελέγχου Μέση τιμή U/L CV % 35,43 1,35 Δείγμα 1 53,89 1,02 Δείγμα 2 135,81 0,69 Δείγμα 3 234,42 0,39 Αναπαραγωγιμότητα (συνολική ακρίβεια) 3 δείγματα χαμηλής, μέτριας και υψηλής συγκέντρωσης και 1 υλικό ελέγχου αναλύονταν εις διπλούν επί 20 ημέρες (δύο φορές ημερησίως) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP5-A2 του CLSI (NCCLS) (12). Δείγμα υλικού ελέγχου Μέση τιμή U/L CV % 34,85 2,77 Δείγμα 1 54,05 1,90 Δείγμα 2 138,30 1,94 Δείγμα 3 236,61 1,42 Εύρος μετρήσεων: Η ανάλυση επιβεβαίωσε εύρος μέτρησης από 5,24 έως 300 U/L. Η γραμμικότητα του αντιδραστηρίου εκτιμήθηκε έως 300 U/L σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP6- A του CLSI (NCCLS) (13). Συσχετισμός: 40 δείγματα ασθενών (ορός) συσχετίστηκαν με αντιδραστήριο του εμπορίου που ελήφθη ως σημείο αναφοράς σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP9-A2 του CLSI (NCCLS) (14). Οι τιμές κυμαίνονται από 13,82 έως 245,95 U/L. Η εξίσωση της αλλομετρικής γραμμής που προέκυψε με τη διαδικασία παλινδρόμησης Passing-Bablock (15) είναι: Y = 0,94 X + 2,41 (U/L) με συντελεστή συσχετισμού r 2 = 0,9980. e Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: τροποποίηση διαχείρισης αποβλήτων. f Τροποποίηση από την έκδοση με δείκτη L στην έκδοση Μ: τροποποίηση αποδόσεων

4 Αλληλεπιδράσεις: Αιμοσφαιρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 56 µmol/l (97 mg/dl). Τριγλυκερίδια: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 7 mmol/l (612,5 mg/dl) (με χρήση Intralipid, για προσομοίωση λιπαιμίας). Ολική χολερυθρίνη: Άμεση χολερυθρίνη: Άλλες αλληλεπιδράσεις: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 500 µmol/l (29,3 mg/dl). Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 500 µmol/l (29,3 mg/dl). Το ισοένζυμο CK-MM αναστέλλεται στο 99% (εσωτερική μελέτη). Επειδή η μεθοδολογία που χρησιμοποιήθηκε μετρά τη δραστηριότητα του μονομερούς CKB, μπορεί να προκύψει υπερεκτίμηση της δραστηριότητας της CK- MB σε περίπτωση (16, 17, 18, 19): - αυξημένης δραστηριότητας του CK-BB - μακρομορφής του CK-BB (CK-BB συνδεδεμένη στη σφαιρίνη IgG και σε πολυμερικό σύμπλοκο της μιτοχονδριακής CK) Ο Young έχει δημοσιεύσει έναν κατάλογο με φάρμακα και προαναλυτικές μεταβλητές που είναι γνωστό ότι επηρεάζουν τη μεθοδολογία αυτή (20, 21). Σταθερότητα Βαθμονόμησης: Το αντιδραστήριο βαθμονομείται την Ημέρα 0. Η βαθμονόμηση ελέγχεται με ανάλυση 1 δείγματος ορού ελέγχου. Η σταθερότητα βαθμονόμησης είναι 10 ημέρες. Σημείωση: Συνιστάται αναβαθμονόμηση όταν αλλάζουν οι αριθμοί παρτίδας των αντιδραστηρίων καθώς και όταν τα αποτελέσματα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισμένου εύρους τιμών. Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής: Έκδοση λογισμικού 4.xx: 7.xx Έκδοση λογισμικού 5.xx: 8.xx Προειδοποίηση Είναι ευθύνη των χρηστών να ελέγξουν εάν το έγγραφο αυτό αφορά το αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται. Βιβλιογραφία 1. Stein W. Creatine kinase (total activity), creatine kinase isoenzymes and variants. In: Thomas L, ed. Clinical laboratory diagnostics. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft (1998): Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3 rd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company (1999): Oliver JT. A spectrophotometric method for the determination of creatine phosphokinase and myokinase. Biochem. J. (1955) 61: Rosalky SB, J. Lab. Clin. Med. (1967) 69: Recommendations of the German Society for Clinical Chemistry. Standardization of methods for the estimation of enzyme activities in biological fluids: Standard method for the determination of creatine kinase activity. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1977) 15: Horder M, Elser RC, Gerhardt M and al. Approved Recommendation on IFCC Methods for the Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes. Part 7. IFCC Method for Creatine Kinase. Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1991) 29: Schumann G and al., IFCC Primary Reference procedures for the Measurement of Catalytic Activity Concentration of Enzymes at 37 C. Part 2. Reference Procedures for the Measurement of Catalytic Concentration of Creatine Kinase, Clin Chem Lab Med. (2002) 40 (6): Würzburg U, Hennrich N, Orth HD, Lang H. Quantitative determination of creatine kinase isoenzyme catalytic concentrations in serum using immunological methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1977) 15: Guder WG, Zawta B. The Quality of Diagnostics Samples. Samples: From the Patient to the Laboratory. 1 st ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B. (WHILEY-VCH, Darmstadt, Germany) (2001): Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34). 11. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 13. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 14. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19).

5 15. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: Neumeier D, Prellwitz W, Determination of creatine kinase isoenzyme MB activity in serum using immunological inhibition of creatine kinase M subunit activity. Activity kinetics and diagnostic significance in myocardial infarction, Clin Chim Acta. (1976) 73 (3): Ljungdahl L, Gerhardt W. Creatine kinase isoenzyme variants in human serum, Clin. Chem. (1978) 24 (5): Urdal P, Landaas S, Macro Creatine kinase BB in serum, and some data on its prevalence, Clin. Chem. (1979) 25 (3): Wu AHB, Bowers GNJr. Evaluation and comparison of immunoinhibition and immunoprecipitation methods for differentiating MB from BB and macro forms of creatine kinase isoenzymes in patients and healthy individuals, Clin. Chem. (1982) 28 (10): Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3:

6