Ανοςοΐςτοχημική μελζτη τησ ζκφραςησ των υποδοχζων ςωματοςτατίνησ 1 (SSTR1) και 2Α (SSTR2Α) ςτον οδοντικό πολφό

Transcript

1 ΑΡΛΣΟΣΖΛΕΛΟ ΠΑΝΕΠΛΣΙΜΛΟ ΚΕΑΛΟΝΜΚΘ ΧΟΛΘ ΕΠΛΣΘΜΩΝ ΤΓΕΛΑ ΣΜΘΜΑ ΟΔΟΝΣΛΑΣΡΛΚΘ ΣΟΜΕΑ ΠΑΚΟΛΟΓΛΑ ΚΑΛ ΚΕΡΑΠΕΤΣΛΚΘ ΟΔΟΝΣΛΚΩΝ ΛΣΩΝ ΕΡΓΑΣΘΡΛΟ ΕΝΔΟΔΟΝΣΟΛΟΓΛΑ Ανοςοΐςτοχημική μελζτη τησ ζκφραςησ των υποδοχζων ςωματοςτατίνησ 1 (SSTR1) και 2Α (SSTR2Α) ςτον οδοντικό πολφό Διπλωματικι Διατριβι Χριςτακοφδθ Διμθτρασ Οδοντιάτρου ΚΕΑΛΟΝΛΚΘ 2010

2 ΑΡΛΣΟΣΖΛΕΛΟ ΠΑΝΕΠΛΣΙΜΛΟ ΚΕΑΛΟΝΜΚΘ ΧΟΛΘ ΕΠΛΣΘΜΩΝ ΤΓΕΛΑ ΣΜΘΜΑ ΟΔΟΝΣΛΑΣΡΛΚΘ ΣΟΜΕΑ ΠΑΚΟΛΟΓΛΑ ΚΑΛ ΚΕΡΑΠΕΤΣΛΚΘ ΟΔΟΝΣΛΚΩΝ ΛΣΩΝ ΕΡΓΑΣΘΡΛΟ ΕΝΔΟΔΟΝΣΟΛΟΓΛΑ Ανοςοΐςτοχημική μελζτη τησ ζκφραςησ των υποδοχζων ςωματοςτατίνησ 1 (SSTR1) και 2Α (SSTR2Α) ςτον οδοντικό πολφό Διπλωματικι Διατριβι Χριςτακοφδθ Διμθτρασ Οδοντιάτρου ΚΕΑΛΟΝΛΚΘ 2010

3 ΣΡΙΜΕΛΗ ΕΠΙΣΡΟΠΗ ΕΠΛΒΛΕΠΟΤΑ ΚΑΚΘΓΘΣΡΛΑ ΛΤΡΟΤΔΛΑ ΚΛΕΟΝΛΚΘ-ΚΑΚΘΓΘΣΡΛΑ ΣΗΛΑΦΑ ΔΘΜΘΣΡΛΟ-ΚΑΚΘΓΘΣΘ ΚΟΛΟΚΟΤΡΘ ΛΩΑΝΝΘ-ΑΝΑΠΛΘΡΩΣΘ ΚΑΚΘΓΘΣΘ

4 ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ Περίλθψθ 1. Γενικό μζροσ 1.1 Ειςαγωγι 1.2 Περί ςωματοςτατίνθσ 1.3 Παραγωγι ςωματοςτατίνθσ 1.4 Ρφκμιςθ ζκκριςθσ τθσ ςωματοςτατίνθσ 1.5 Μθχανιςμόσ δράςθσ τθσ ςωματοςτατίνθσ Αντικαρκινικι δράςθ Φυςιολογικζσ δράςεισ τθσ SRIF Παρεκκλίςεισ ςτθν εξειδίκευςθ τθσ δράςθσ SRIF 1.6 Φαρμακοδυναμικι τθσ SRIF και των αναλόγων τθσ 1.7 ωματοςτατίνθ ςτον οδοντικό πολφό 1.8 Τποδοχείσ ςωματοςτατίνθσ 1.9 Μεταγωγι ςιματοσ διαμζςου sstr 1.10 Ανατομικι κατανομι υποδοχζων 1.11 Ζκφραςθ των sstr ςε ανκρϊπινουσ όγκουσ 1.12 Εςωτερίκευςθ, απευαιςκθτοποίθςθ και ολιγομεριςμόσ των sstr 1.13 Αλλθλεπιδράςεισ του προςδζτθ με τον υποδοχζα. Κρίςιμεσ κζςεισ περιοχισ δζςμευςθσ 2. Ειδικό μζροσ 2.1 κοπόσ 2.2 Τλικά και μζκοδοσ 2.3 Ανοςοΐςτοχθμικι τεχνικι 2.4 Αποτελζςματα 2.5 υηιτθςθ 2.6 υμπεράςματα 2.7 Σμιματα διατριβισ που ανακοινϊκθκαν Βιβλιογραφία Eπίλογοσ

5 ΠΕΡΙΛΗΨΗ Η ζςιαημζηαηίκδ, έκα κεονμπεπηίδίμ ιε ααζζηυ νυθμ ηδκ ηαηαζημθή ηδξ έηθναζδξ ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ ζηδκ οπυθοζδ, αθθά ηαζ δνάζδ ζε πενζθενζημφξ ζζημφξ υπςξ ζηζξ κεονζηέξ ίκεξ ημο ακενχπζκμο μδμκηζημφ πμθθμφ, έπεζ πνμηαθέζεζ ημ εκδζαθένμκ πμθθχκ ενεοκδηχκ ηδξ ζαηνζηήξ επζζηήιδξ, ηδξ θανιαημθμβίαξ ηαζ υπζ ιυκμ. Παθαζυηενεξ ενβαζίεξ οπμζηδνίγμοκ πςξ δ ζςιαημζηαηίκδ πανμοζζάγεζ ακαθβδηζηέξ ηαζ ακηζθθεβιμκχδεζξ ζδζυηδηεξ, μζ μπμίεξ ιπμνμφκ κα έπμοκ ηθζκζηή εθανιμβή ζηδ εεναπεία θθεβιμκςδχκ κμζδιάηςκ(farooqui et al 1999). Με αάζδ ηα παναπάκς δ ζςιαημζηαηίκδ ηαζ δ ακάπηολδ ζοκεεηζηχκ παναβχβςκ ηδξ ιε εκδεπυιεκδ ηθζκζηή εθανιμβή, ιπμνμφκ πζεακυκ κα ιεηααάθθμοκ ημοξ νοειζζηζημφξ ιδπακζζιμφξ ηδξ κεονμβεκμφξ θθεβιμκήξ ημο μδμκηζημφ πμθθμφ. Eπζδζςηυιεκμξ ζηυπμξ ηδξ παναπάκς ένεοκαξ απμηεθεί δ ιεθέηδ ηδξ έηθναζδξ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ 1 ηαζ 2Α (SSTR1-SSTR2Α) ζε θθεβιμκχδδ ηαζ θοζζμθμβζηυ ακενχπζκμ πμθθζηυ ζζηυ ιε ηδ πνήζδ ακμζμΐζημπδιζηχκ ιεευδςκ. Σα απμηεθέζιαηα ηδξ ιεθέηδξ έδεζλακ υηζ μζ οπμδμπείξ SSTR1 ηαζ SSTR2A δεκ εηθνάγμκηαζ ζε θοζζμθμβζηυ πμθθζηυ ζζηυ. Ακηίεεηα, ζε θθεβιμκχδδ μδμκηζηυ πμθθυ ηαηαβνάθδηε SSTR1 ήπζα εεηζηυηδηα ηαζ απμοζία έηθναζδξ ημο SSTR2A. Δπμιέκςξ, ηα παναπάκς εονήιαηα οπμδεζηκφμοκ υηζ μ SSTR1 ιπμνεί κα έπεζ ζδιακηζηυ νυθμ ζηδ νφειζζδ ηδξ πμθθζηήξ θθεβιμκήξ ηαζ δ δέζιεοζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημοξ εζδζημφξ ηδξ οπμδμπείξ ιπμνεί κα ζοιιεηέπεζ ζημκ έθεβπμ ηαζ πζεακυκ ζηδκ απμηνμπή ηδξ ελέθζλδξ ηδξ θθεβιμκήξ.

6 1. ΓΕΝΙΚΟ ΜΕΡΟ 1.1 EIΑΓΩΓΗ Ο μδμκηζηυξ πμθθυξ εκυξ πθήνμοξ δζαπθαζιέκμο δμκηζμφ είκαζ μ αββεζμανζεήξ παθανυξ ζοκδεηζηυξ ζζηυξ πμο ανίζηεηαζ ζημ εζςηενζηυ ημο πμθθζημφ εαθάιμο. Πνυηεζηαζ βζα έκα ελαζνεηζηά ελεζδζηεοιέκμ υνβακμ πμο παναηηδνίγεηαζ απυ ζδζαίηενδ δοκαιζηή ηαζ πθαζηζηυηδηα. Συζμ δ ανπζηεηημκζηή ημο κεονζημφ πθέβιαημξ υζμ ηαζ δ αζιμδοκαιζηή ημο μδμκηζημφ πμθθμφ απμηεθμφκ ακηζηείιεκμ έκημκδξ ενεοκδηζηήξ ιεθέηδξ εδχ ηαζ πμθθά πνυκζα. Οζ πενζζζυηενεξ ένεοκεξ εζηζάζηδηακ ζηα κεονμπεπηίδζα ηαζ ζημ νυθμ ημοξ ζηδ νφειζζδ ηδξ πμθθζηήξ αζιαηζηήξ νμήξ ηαζ ηδκ ελέθζλδ ηδξ κεονμβεκμφξ θθεβιμκήξ. Ιδζαίηενμ εκδζαθένμκ πνμηάθεζακ μζ αθθδθεπζδνάζεζξ ηςκ κεονμπεπηζδίςκ ιε πμθθζηά ηφηηανα ηαεχξ ηαζ ηφηηανα ημο ακμζμπμζδηζημφ ζοζηήιαημξ ιέζς οπμδμπέςκ, δ ηαοημπμίδζδ ηςκ οπμδμπέςκ αοηχκ, μ παναηηδνζζιυξ ημοξ ηαεχξ ηαζ δ επίδναζή ημοξ ζηδκ ελέθζλδ ηδξ θθεβιμκήξ ημο πμθθμφ πμο μδδβεί ηεθζηά ζηδκ κέηνςζή ημο. Η μοζία P ήηακ ημ πνχημ κεονμπεπηίδζμ πμο ηαοημπμζήεδηε ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ ιε ηδκ εθανιμβή ιεευδςκ ακμζμΐζημπδιείαξ (Olgart et al 1977). ηδ ζοκέπεζα ηαζ άθθα κεονμπεπηίδζα ιε πνμέθεοζδ ημ βάββθζμ ημο ηνζδφιμο ακζπκεφηδηακ ζηζξ κεονζηέξ απμθήλεζξ ημο πμθθζημφ ζζημφ υπςξ ημ κεονμπεπηίδζμ Κ (ΝΡΚ), ημ κεονμπεπηίδζμ Τ (ΝΡΤ), δ πμθεηοζημηζκίκδ, δ κεονμηζκίκδ Α (ΝΚΑ), εκηεθαθίκδ (ΔΝΚ), ημ πεπηίδζμ ζπεηζγυιεκμ ιε ημ βμκίδζμ ηδξ ηαθζζημκίκδξ (CGRP), δ ζεηνεημκεονίκδ, δ βαθακίκδ (GAL), ημ αββεζμεκενβυ πμθοπεπηίδζμ (VIP) ηαζ δ ζςιαημζηαηίκδ (SST), (Olgart et al 1977, Wakisaka et al 1988, 1987a, 1996a, Casasco 1990a,b, Uddman et al 1980,1984,1986, Heyeraas et al 1993, Pert et al 1998). Σα κεονμπεπηίδζα ιε ηδκ ζδζυηδηα ημο κεονμδζααζααζηή ζοιιεηέπμοκ ζηδκ νφειζζδ πμθθχκ θεζημονβζχκ ημο ακενχπζκμο μνβακζζιμφ ( Olgart et al 1989), υπςξ: ζοιιεημπή ζημ ιδπακζζιυ επμφθςζδξ, δζέβενζδ ηαζ ακαζημθή ηδξ δνάζδξ ηςκ θειθμηοηηάνςκ, ζοιιεημπή ζε ημπζηέξ αιοκηζηέξ ακηζδνάζεζξ, ζοιιεημπή ζημ ιδπακζζιυ ακάπηολδξ ημο ζοκδεηζημφ ζζημφ.

7 πεηζηά ιε ηδκ δνάζδ ηςκ κεονμπεπηζδίςκ πμο ακζπκεφμκηαζ ζημκ πμθθυ, έπεζ απμδεζπεεί υηζ εηηυξ απυ ηδ ζοιιεημπή ημοξ ζηδκ νφειζζδ ηδξ αζιαηζηήξ νμήξ παίγμοκ ζδιακηζηυ νυθμ ηαζ ζημ ιδπακζζιυ ιεηαθμνάξ πυκμο ( Wakisaka 1990, Casasco et al 1990b, Rodd and Boissonade 2000, Awadeh et al 2002). Πνυζθαηα ανέεδηε υηζ δ απεθεοεένςζδ ηςκ κεονμπεπηζδίςκ sub P ηαζ CGRP απυ ημκ πμθθζηυ ζζηυ εηηυξ απυ ηδκ ζοιαμθή ημοξ ζηδκ αφλδζδ ηδξ αζιαηζηήξ νμήξ ζοιαάθθμοκ επίζδξ ηαζ ζηδ ζοζζχνεοζδ πθάζιαημξ ηαζ θεοηχκ αζιμζθαζνίςκ, βεβμκυξ πμφ μδδβεί ζε ημπζηή θθεβιμκή (Park et al 2004). Οζ αηνζαείξ δνάζεζξ άθθςκ κεονμπεπηζδίςκ δεκ έπμοκ αηυιδ επζαεααζςεεί, ηαζ βζ αοηυ εεςνμφκηαζ ακαβηαίεξ πεναζηένς ιεθέηεξ πνμηεζιέκμο κα ηαεμνζζηεί επαηνζαχξ μ νυθμξ ημοξ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ, πμφ πζεακυκ κα μδδβήζμοκ ζε πμθφ εκδζαθένμοζεξ θανιαημθμβζηέξ εθανιμβέξ ζπεηζηά ιε ημκ μδμκηζηυ πυκμ ηαζ ηδκ πμθθζηή θθεβιμκή. Η ζςιαημζηαηίκδ απμιμκχεδηε απυ ημκ ακενχπζκμ πμθθζηυ ζζηυ ζηζξ ανπέξ ηδξ πνμδβμφιεκδξ δεηαεηίαξ (Casasco et al. 1990,1991). Μέπνζ ζήιενα έπμοκ ακζπκεοεεί 2 ιμνθέξ ημο κεονμπεπηζδίμο ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ, έκα δεηαηεηνα-αιζκμ-μλζηυ ηοηθζηυ πμθοπεπηίδζμ ιε ιζα εκδζάιεζδ δζζμοθθζηή βέθονα, ημ μπμίμ μκμιάζηδηε ζςιαημζηαζηαηίκδ-14, ιζα είημζζ-μπηχ πεπηζδζηή ιμνθή ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ-14 πμο πενζέπεζ ιζα αγςημφπα απυθδλδ, δ μπμία μκμιάζηδηε ζςιαημζηαηίκδ-28 ή πνυζςιαημζηαηίκδ. Ακαθένεηαζ ηαζ ιζα ηνίηδ ιμνθή ζςιαημζηαηίκδξ, δ ζςιαημζηαηίκδ- 25, δ μπμία υιςξ εεςνείηαζ πνυδνμιδ ιμνθή ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ-14 ηαζ ιεηααμθζηυ πνμσυκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ-28. Καζ μζ δφμ ιμνθέξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ πανμοζζάγμοκ πανυιμζμ θάζια δνάζδξ, πμο είκαζ δ ακαζημθή ηδξ έηηνζζδξ δζαθυνςκ πεπηζδζηχκ μνιμκχκ ηαζ ηοηηανζηχκ θεζημονβζχκ ζε δζάθμνμοξ ζζημφξ (Effendic et al 1978, Murray 2004, Paran et al 2001). ήιενα έπεζ απμδεζπεεί υηζ δ αζμθμβζηή δνάζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημκ ακενχπζκμ μνβακζζιυ νοειίγεηαζ απυ πέκηε εζδζημφξ οπμδμπείξ ηδξ ηοηηανζηήξ ιειανάκδξ: SST1,SST2,SST3,SST4,SST5. Η ζςιαημζηαηίκδ (SST),έκα πεπηίδζμ ιε νοειζζηζηυ ηονίςξ νυθμ, πανάβεηαζ απυ κεονμεκδμηνζκζηά, θθεβιμκχδδ ηαζ ακμζμπμζδηζηά ηφηηανα ςξ απάκηδζδ ζε ζυκηα, άθθα κεονμπεπηίδζα, κεονμδζααζααζηέξ, εονεμεζδείξ ηαζ ζηενμεζδζηέξ μνιυκεξ, αολδηζημφξ πανάβμκηεξ ηαζ ηοημηίκεξ (Aguila et al 1991, Elliot et al 1998, Patel 1992). Σμ κεονμπεπηίδζμ αοηυ απεθεοεενχκεηαζ ζε ιεβάθα πμζά απυ ηα απμεδηεοηζηά ηοζηίδζα ηςκ εηηνζηζηχκ ηοηηάνςκ, ή ζε ιζηνά πμζά απυ εκενβμπμζδιέκα ακμζμπμζδηζηά ηφηηανα ηαεχξ ηαζ ηφηηανα πμο ζοιιεηέπμοκ ζημ ιδπακζζιυ ηδξ θθεβιμκήξ. Γεκζηυηενα, δ ζςιαημζηαηίκδ ειθακίγεζ πμζηίθεξ αζμθμβζηέξ δνάζεζξ ζημκ ακενχπζκμ μνβακζζιυ, δ ζδιακηζηυηενδ απυ ηζξ μπμίεξ

8 εεςνείηαζ δ ακαζημθή ηδξ έηηνζζδξ ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ. Δπζπθέμκ ζημ ακμζμπμζδηζηυ ζφζηδια, ακαπαζηίγεζ ημκ πμθθαπθαζζαζιυ ηςκ θειθμηοηηάνςκ, ηδκ παναβςβή ακμζμζθαζνζκχκ απυ ηα Β θειθμηφηηανα ηαεχξ ηαζ ηδκ πδιεζμηαλία ηςκ μοδεηενυθζθςκ (Kolasinski et al 1992, Fais et al 1991). Οζ οπμδμπείξ ζςιαημζηαηίκδξ εηθνάγμκηαζ εονέςξ ζε πμθθμφξ ζζημφξ. οπκά ειθακίγμκηαζ πμθθέξ οπμηαηδβμνίεξ πμο ζοκοπάνπμοκ ζημ ίδζμ ηφηηανμ. Μέπνζ ζήιενα οπάνπμοκ ανηεηέξ ενβαζίεξ πμο ιεθεημφκ ηδκ έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηίκδξ ζε δζαθυνμοξ ζζημφξ εκχ ακηίεεηα δ ένεοκα ηςκ παναπάκς οπμδμπέςκ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ ημο ακενχπμο είκαζ πενζμνζζιέκδ. Με αάζδ ηα παναπάκς δ πανμφζα ενεοκδηζηή πνμζπάεεζα εζηζάζηδηε ηονίςξ: ηδκ έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ 1 ηαζ 2Α (SSTR1-SSTR2Α) ηυζμ ζε θοζζμθμβζηυ υζμ ηαζ ζε θθεβιμκχδδ ακενχπζκμ πμθθζηυ ζζηυ ηαεχξ ηαζ ημ νυθμ πμο δζαδναιαηίγμοκ ζηδκ ελέθζλδ ηδξ θθεβιμκήξ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ ηαζ εζδζηά ζηδ νφειζζδ ηδξ κεονμβεκμφξ θθεβιμκήξ. 1.2 ΠΕΡΙ ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ Σμ 1968 πεζναιαηζηά ηαζ ηθζκζηά δεδμιέκα (Pecile & Muller 1968) μδήβδζακ ζημ ζοιπέναζια υηζ μ οπμεάθαιμξ εθέβπεζ ηαζ νοειίγεζ ηδκ έηηνζζδ ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ (Growth Hormone- GH, Somatotrophin). Έβζκε ηυηε δ οπυεεζδ υηζ αοηυξ μ έθεβπμξ αζηείηαζ απυ ηάπμζμκ πανάβμκηα μ μπμίμξ πνμένπεηαζ απυ ημκ άλμκα οπμεαθάιμο-οπυθοζδξ. Γζα ηδκ απυδεζλδ ηδξ οπυεεζδξ αοηήξ έβζκακ ιεθέηεξ ζε αηαηένβαζηα (crude) εηποθίζιαηα εβηεθάθςκ αμμεζδχκ απυ ημκ Brazeau ηαζ ημοξ ζοκενβάηεξ ημο (Brazeau et al 1973) μζ μπμίμζ ηαηάθενακ ηεθζηά κα πνμζδζμνίζμοκ έκακ πανάβμκηα πμο μκυιαζακ <<Παπάγονηα παπεμπόδιζηρ ηηρ έκκπιζηρ ηηρ ζωμαηοηποπίνηρ ή ωμαηοζηαηίνη>> (Somatotropin Release Inhibiting Factor- SRIF ή Somatostatin-SST). Μεηά ηδκ απμιυκςζδ αοημφ ημο πανάβμκηα πνμζδζμνίζηδηε δ πνςημηαβήξ ημο δμιή ιε απμζημδυιδζδ Edmann ηαεχξ ηαζ αιζκμλζηή ημο ζφζηαζδ ιε ακάθοζδ αιζκμλέςκ. Η απμιυκςζδ ηαζ δ ηαοημπμίδζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ 14 (SRIF 14) ήηακ βεβμκυξ. Πένα απυ ηδκ απμιμκςεείζα ηαζ ηαοημπμζδεήζα ιμνθή ηδξ SRIF 14 ανβυηενα απμδείπεδηε ηαζ δ φπανλδ ιζαξ ζζυιμνθδξ, ηδξ SRIF 28 (Predayrol et al 1980), δ μπμία είκαζ έκα εζημζζμηηαπεπηίδζμ εηηεηαιέκμ πνμξ ημ αιζκμηεθζηυ άηνμ ηδξ SRIF14 ιε άθθα δεηαηέζζενα αιζκμλέα. Αιθυηενεξ μζ ζζμιμνθέξ ανέεδηε κα πνμένπμκηαζ

9 απυ ημ πμθοπεπηίδζμ πνμ-πνμζςιαημζηαηίκδ, δ δνάζδ πμθοπεπηζδαζχκ ζημ ηαναμλοηεθζηυ άηνμ ημο μπμίμο μδδβεί ιεηά απυ απμημπέξ ζηζξ δομ ζζμιμνθέξ. Πανυθμ πμο δ αζμθμβζηή ακαβηαζυηδηα βζα ηδκ φπανλδ δφμ ζζμιμνθχκ δεκ έπεζ αηυια δζαζαθδκζζηεί, πζζηεφεηαζ υηζ δ SRIF14 θεζημονβεί ηονίςξ ςξ κεονμπεπηίδζμ εκχ δ SRIF28 ςξ μνιυκδ ζηδκ ηοηθμθμνία (D Alessio et al 1989, Reichlin 1987). Kαιία απυ ηζξ πνυδνμιεξ ιμνθέξ SRIF είηε δ πνμ-πνμζςιαημζηαηίκδ είηε δ πνμζςιαημζηαηίκδ δεκ ειθακίγεζ αζμθμβζηή δναζηζηυηδηα. Οζ δομ πνυδνμιεξ ιμνθέξ εκημπίγμκηαζ ηυζμ ζημ Κ.Ν.. υζμ ηαζ ζε πθήεμξ ζζηχκ ζηδκ πενζθένεζα. Ραδζμακμζμθμβζηέξ ιεθέηεξ έδεζλακ ηδκ φπανλδ ορδθμφ πμζμζημφ ηδξ μνιυκδξ ζημκ οπμεάθαιμ ηαζ ζηα πενζζζυηενα ιένδ ημο ιεηπαζιζαημφ ζοζηήιαημξ, υπςξ είκαζ δ αιοβδαθή αθθά ηαζ ζε ιζηνυηενεξ ζοβηεκηνχζεζξ ζηδκ πενζμπή ημο ιεζεβηεθάθμο. ημ Κ.Ν.. δεζπυγεζ δ SRIF14 υπςξ επίζδξ ηαζ ζημ ακχηενμ βαζηνεκηενζηυ ζφζηδια, εκχ δ SRIF28 ζημ ηαηχηενμ βαζηνεκηενζηυ. Η ζςιαημζηαηίκδ, πένακ ηδξ απμιυκςζήξ ηδξ απυ ηα ακχηενα εδθαζηζηά, ανέεδηε ηαζ ηαοημπμζήεδηε ζε πμθθά ζπμκδοθςηά αθθά ηαζ αζπυκδοθα αθθά ηαζ ζε πνςηυγςα. Η παναβςβή ηδξ δεκ θαίκεηαζ κα είκαζ ηάπμζμ πνυζθαημ βεβμκυξ ζηδκ ελέθζλδ αθθά έηδ ελέθζλδξ θαίκεηαζ κα άθδζακ ηδκ παναβςβή ηαζ ηδκ δνάζδ ηδξ μνιυκδξ ακέπαθεξ. Σμ βμκίδζμ πμο είκαζ οπεφεοκμ βζα ηδκ έηθναζδ ηδξ πνμ-πνμζςιαημζηαηίκδξ είκαζ έκα ελ αοηχκ πμο δεκ έηοπακ ιεηαθθάλεςκ ζηδκ πμνεία ηδξ ελέθζλδξ (Conlon et al 1997). 1.3 ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΣΗ ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ Όπςξ ακαθένεδηε πζμ πάκς, μζ δφμ ζζμιμνθέξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ πνμένπμκηαζ απυ ηδ θφζδ εκυξ πνυδνμιμο ιμνίμο, ιίαξ πνμμνιυκδξ ηδξ PreproS, ημ mrna ημοξ δδθαδή ιεηαβνάθεηαζ ςξ ιένμξ αοημφ ημο πνυδνμιμο ιμνίμο (Goodman et al 1983). Η PreproS απμηεθείηαζ απυ 116 αιζκμλέα ηαζ δ ζφκεεζδ ηδξ (ιεηάθναζδ απυ ημ ακηίζημζπμ mrna) βίκεηαζ ζημ ημηηζχδεξ εκδμπθαζιαηζηυ δίηηομ. Αημθμφεςξ απεθεοεενχκεηαζ ζημοξ αοθμφξ ημο εκδμπθαζιαηζημφ δζηηφμο υπμο βίκεηαζ δ απμημπή εκυξ είημζζηεηναπεπηζδίμο ημο MLSSCRLQRALAALCIVLALGGVT απυ ημ αιζκμηεθζηυ άηνμ ηδξ. Η απμημπή βίκεηαζ ιε ηδ ιεζμθάαδζδ ηδξ δνάζδξ ιζαξ εζδζηήξ πνςηεάζδξ( Walter et al 1984). Η οπυθμζπδ μνιυκδ πνμζςιαημζηαηίκδ (ProS), δ μπμία απμηεθείηαζ πθέμκ απυ 92 αιζκμλέα ηαζ δζαεέηεζ ζημ C-ηεθζηυ ηδξ άηνμ ηζξ δφμ ζζμιμνθέξ SRIF14 ηαζ

10 SRIF28,ιεηαθένεηαζ ζηδ ζοζηεοή Golgi, υπμο ηαζ απμεδηεφεηαζ ζε εηηνζηζηά ηοζηίδζα. Δηεί θαιαάκμοκ πχνα ιεηα-ιεηαθναζηζηέξ ηνμπμπμζήζεζξ. Η ηαηάηιδζδ ηδξ ProS πνμξ ζηζξ δομ ζζμιμνθέξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ελανηάηαζ απυ ηδ δνάζδ εζδζηχκ εκδμπνςηεμθοηζηχκ πνμπεπηζδζηχκ ιεηαηνεπηζηχκ εκγφιςκ-pc s ηςκ μπμίςκ δ θεζημονβία νοειίγεηαζ δζαθμνεηζηά ζηα δζάθμνα είδδ ηοηηάνςκ πμο πανάβμοκ ζςιαημζηαηίκδ. οκμθζηά απμιμκχεδηακ ηαζ ηαοημπμζήεδηακ έλζ ηέημζα ιεηαηνεπηζηά έκγοια ηαζ είκαζ ηα ελήξ: Furin, PC1/PC3, PC2, PACE-4, PC4 ηαζ PC5/PC6 (Seidah et al 1990). Η απμημπή βίκεηαζ πάκηα ζηα ιμκμααζζηά ή δζααζζηά αιζκμλέα θοζίκδ ή ανβζκίκδ ακηίζημζπα. Γεκζηά θαίκεηαζ υηζ δ ProS ηαηενβάγεηαζ ακάθμβα ιε ημκ ηφπμ ηοηηάνμο ζημ μπμίμ εηθνάγεηαζ. ε εκδμηνζκζηά εκηενζηά ηφηηανα ημο αθεκκμβυκμο ιε ηδ δνάζδ ηδξ PACE-4 απμηυπηεηαζ δ SRIF28 απυ ημ ηαναμλοηεθζηυ ηιήια ηδξ ProS δίκμκηαξ ζζμιμνζαηή πμζυηδηα ProS1-64 (Beinfeld et al 1989). ημ εκ θυβς είδμξ ηοηηάνςκ δ SRIF28 είκαζ δ δεζπυγμοζα ζζμιμνθή. ε κεονζηά ηαζ παβηνεαηζηά ηφηηανα πμο ηονζανπεί δ SRIF14, αοηή πανάβεηαζ ηονίςξ ιε ηδ δνάζδ ηδξ εκδμπεπηζδάζδξ PC2 ηαζ ζε ιζηνυηενμ ααειυ ιε ηδ δνάζδ ηδξ PC1 (Brackh et al 1995). Δπίζδξ δ SRIF14 ιπμνεί κα πνμηφρεζ ηαζ απυ ηαηεοεείακ πνςηευθοζδ ηδξ SRIF28 απυ ηδκ PACE4 δνχκηαξ ζημ δζπεπηίδζμ Arg-Lys ζηζξ εέζεζξ ηδξ SRIF28. Η SRIF14 ηέθμξ, απμζημδμιείηαζ ζημ πθάζια ιε ηδ δνάζδ ηςκ εκδμπνςηεαζχκ ηαζ πνμξ ιζηνυηενα αδνακή πεπηίδζα (Dahms et al 1992). ε ηάεε πενίπηςζδ δ SRIF28 δεκ είκαζ απθά έκαξ πνυδνμιμξ ηδξ SRIF14 αθθά δζαηδνεί ηδ θεζημονβζηή ηδξ αοημκμιία. Πνέπεζ κα ζδιεζςεεί επίζδξ υηζ δ ιεηαβναθή ημο βμκζδίμο πμο ηςδζημπμζεί ηδ ζςιαημζηαηίκδ θαίκεηαζ κα νοειίγεηαζ ηαηά ηφνζμ θυβμ απυ ηδκ πμζυηδηα ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ πμο οπάνπεζ ζηδκ ηοηθμθμνία (Hurley et al 1992). 1.4 ΡΤΘΜΙΗ ΕΚΚΡΙΗ ΣΗ ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ Η έηηνζζδ ηδξ SRIF ιπμνεί κα επδνεαζηεί απυ έκα εονφ θάζια παναβυκηςκ μζ μπμίμζ ιπμνεί κα είκαζ ζυκηα, ηνμθέξ ζημκ βαζηνεκηενζηυ ζςθήκα, κεονμπεπηίδζα, κεονμδζααζααζηέξ, μνιυκεξ, ακαπηολζαημί πανάβμκηεξ ηαζ ηοημηίκεξ. Μενζημί απυ αοημφξ ημοξ πανάβμκηεξ αζημφκ ηδκ δνάζδ ημοξ άιεζα ηαζ ηαοηυπνμκα ζε δζαθμνεηζημφξ ζζημφξ, εκχ άθθμζ είκαζ απμθφηςξ ζζημεηθεηηζημί, βεβμκυξ ημ μπμίμ ελδβείηαζ απυ ηδκ ζζημεζδζηή έηθναζδ ηέημζςκ παναβυκηςκ ζε ηφηηανα πμο πανάβμοκ ζςιαημζηαηίκδ. Έιιεζα δε μζ πζμ πάκς πανάβμκηεξ ιπμνμφκ κα δνάζμοκ ιέζς ηδξ νφειζζδξ έηηνζζδξ άθθςκ πεπηζδίςκ πμο δνμοκ επδνεάγμκηαξ ηδκ έηηνζζδ ηδξ SRIF.

11 Η ιειανακζηή απμπυθςζδ εκενβμπμζεί ηδκ απεθεοεένςζδ ηδξ SRIF ηυζμ απυ ηα κεονζηά ηφηηανα υζμ ηαζ απυ πενζθενζηά SRIF εεηζηά ηφηηανα υπςξ είκαζ ηα D- ηφηηανα ημο παβηνέαημξ. Ο ζοβηεηνζιέκμξ ηνυπμξ έηηνζζδξ οζμεεηείηαζ ςξ εειεθζχδδξ ζδζυηδηα ηςκ ηοηηάνςκ ηα μπμία εηηνίκμοκ SRIF. Οζ δζαηνμθζημί πανάβμκηεξ επδνεάγμοκ ηδκ ζζημεζδζηή απεθεοεένςζδ ιέζς ηονίςξ ηςκ D- ηοηηάνςκ ημο παβηνέαημξ δζεβείνμκηαξ ηδκ ιέζς βθοηυγδξ, αιζκμλέςκ ηαζ θζπζδίςκ. Η οπμεαθαιζηή έηηνζζδ ηδξ SRIF ακαζηέθθεηαζ απυ ηδ βθοηυγδ ηαζ δεκ είκαζ εοαίζεδηδ ζε αιζκμβεκζηή δζέβενζδ, εκχ ζημ έκηενμ πονμδμηείηαζ ηονίςξ απυ άθθεξ μνιυκεξ ηαζ πεπηίδζα ηαζ υπζ απυ δζαηνμθζημφξ πανάβμκηεξ ηδξ ηοηθμθμνίαξ (Patel 1992). Κάεε κεονμδζααζααζηήξ, μ μπμίμξ δμηζιάζηδηε, ανέεδηε κα έπεζ δνάζδ είηε επαβςβζηή είηε ακαζηαθηζηή-ζε δζαθμνεηζηυ ααειυ- ζηδκ έηηνζζδ ηδξ SRIF ζημοξ δζάθμνμοξ ζζημφξ. Έηζζ δ βθοηαβυκδ, δ GHRH, δ κεονμηεκζίκδ, δ CRH, ημ ζπεηζηυ ιε ημ βμκίδζμ ηδξ ηαθζζημκίκδξ πεπηίδζμ ηαζ δ αμιαεζίκδ είκαζ ζζπονμί επαβςβείξ ηδξ έηηνζζδξ ηδξ SRIF, εκχ ηα μπζμεζδή πεπηίδζα ηαζ ημ GABA βεκζηχξ ακαζηέθθμοκ ηδκ έηηνζζή ηδξ (Epelbaum 1994). Σα βθοημημνηζημεζδή πανμοζζάγμοκ δμζμελανηχιεκδ δζθαζζηή δνάζδ ζηδκ έηηνζζδ ηδξ SRIF αθμφ ζε παιδθέξ δυζεζξ δνμοκ δζεβενηζηά εκχ ζε ορδθέξ δνμοκ ακαζηαθηζηά. Η ζκζμοθίκδ δνα δζεβενηζηά ζημκ οπμεάθαιμ, εκχ δνα ακαζηαθηζηά ζηα κδζίδζα ημο παβηνέαημξ ηαζ ζημ έκηενμ. Ακαπηολζαημί πανάβμκηεξ υπςξ είκαζ μζ ηοημηίκεξ, επδνεάγμοκ ηδκ έηηνζζδ ηυζμ ζημ ακμζμπμζδηζηυ υζμ ηαζ ζημ Κ.Ν.. Ο IGF επάβεζ ηδκ έηηνζζδ υπςξ ηαζ δ IL-1, TNF-a, IL-6 εκχ ιεηαλφ ημοξ θαίκεηαζ κα δνμοκ ηαζ ζοκενβζζηζηά. Οζ εκ θυβς πανάβμκηεξ έπμοκ αηυιδ ηδ δοκαηυηδηα κα επδνεάζμοκ ηδκ ζφκεεζδ ηδξ SRIF αθμφ ιπμνμφκ κα επζθένμοκ αθθαβέξ ζηδκ έηθναζδ ημο βμκζδίμο ηδξ PreProS (Patel 1999b). 1.5 MΗΧΑΝΙΜΟ ΔΡΑΗ ΣΗ ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ H αζμθμβζηή δνάζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημκ ακενχπζκμ μνβακζζιυ έπεζ απμδεζπεεί υηζ νοειίγεηαζ απυ πέκηε εζδζημφξ οπμδμπείξ ηδξ ηοηηανζηήξ ιειανάκδξ: sstr1, sstr2, sstr3, sstr4 ηαζ sstr5. Η εονεία ακαημιζηή ηαηακμιή ηςκ οπμδμπέςκ αοηχκ οπμδεζηκφεζ δνάζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζε πμθθαπθά επίπεδα υπςξ ζημ έκηενμ, ζημκ εβηέθαθμ ηαζ ζηδκ οπυθοζδ. Η δνάζδ ηδξ πενζθαιαάκεζ ακαζημθή έηηνζζδξ ελςηνζκχκ ή εκδμηνζκχκ παναβυκηςκ, νφειζζδ έηηνζζδξ ή θεζημονβίαξ άθθςκ κεονμπεπηζδίςκ ή κεονμδζααζααζηχκ ηαζ έθεβπμ πνμηφπςκ ζοιπενζθμνάξ.

12 Δπζπθέμκ, δ ζςιαημζηαηίκδ επδνεάγεζ ηδ βαζηνεκηενζηή ηαζ ηδ πμθζηή ηίκδζδ, ημκ ηυκμ ηςκ θείςκ ιοχκ ηςκ ημζπςιάηςκ ηςκ αββείςκ, ηδκ εκηενζηή απμννυθδζδ ηνμθχκ ηαζ ζυκηςκ. Δηηυξ ημο νυθμο ηδξ ζηδκ ακαζημθή ηδξ έηηνζζδξ ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ ηαζ ηδξ ακάπηολδξ υβηςκ κεονμεκδμηνζκζηήξ θφζεςξ, ανέεδηε υηζ δζαδναιαηίγεζ νοειζζηζηυ νυθμ ζημ ζαηπανχδδ δζααήηδ, ζηδκ επζθδρία, ζηδ κυζμ ημο Alzheimer, ζηδ κυζμ ημο Hundigton ηαζ ζημ AIDS. ΑΝΑΣΟΛΗ ΕΚΚΡΙΗ ΠΕΠΣΙΔΙΩΝ Η ΟΡΜΟΝΩΝ Η ακαζημθή εηηνζηζηχκ δζαδζηαζζχκ απυ ηδ ζςιαημζηαηίκδ δζελάβεηαζ ιε ηδκ ιεζμθάαδζδ δζαθμνεηζηχκ οπυηοπςκ ημο οπμδμπέα ηδξ. Με ηδ πνήζδ εηθεηηζηχκ ςξ πνμξ ηάπμζμκ οπμδμπέα ακαθυβςκ, αθθά ηαζ ιε ηδ πνήζδ πμκηζηχκ ζηα μπμία είπε απμηθεζζηεί δ έηθναζδ ηάπμζμο οπμδμπέα (Knockout mice), δείπεδηε υηζ δ ακαζημθή έηηνζζδξ GH πνμηαθείηαζ απυ ηδ ιεζμθάαδζδ ηςκ sstr2, sstr5 ηαζ sstr1, ηδξ πνμθαηηίκδξ απυ ημοξ sstr1 ηαζ sstr5, ηαζ ηδξ ηαθζζημκίκδξ απυ ημκ sstr1. Όζμκ αθμνά ηδκ ζκζμοθίκδ, δ ακαζημθή έηηνζζήξ ηδξ εθέβπεηαζ απυ ημοξ sstr1 ηαζ sstr5. Ο οπυηοπμξ sstr2 είκαζ επίζδξ μ οπεφεοκμξ βζα ηδκ ακαζημθή έηηνζζδξ ηδξ βθοηαβυκδξ, ηδξ ζκηενθενυκδξ ηαζ ημο βαζηνζημφ μλέμξ (Olias et al 2004, Weckbecker et al 2003, Strowski et al 2000). Η ακαζημθή έηηνζζδξ μνιμκχκ ελανηάηαζ απυ ηδκ ακαζημθή θεζημονβίαξ ηδξ αδεκοθζηήξ ηοηθάζδξ ή/ηαζ απυ ηδ νφειζζδ θεζημονβίαξ ηακαθζχκ ζυκηςκ. Δκχ υθμζ μζ οπμδμπείξ είκαζ ζοκδεδειέκμζ ιε G πνςηεΐκεξ ηαζ δ ακαζημθή ηδξ αδεκοθζηήξ ηοηθάζδξ αημθμοεεί αοηυ ημ ιμκμπάηζ, εκημφημζξ δ ακαζημθή έηηνζζδξ πμο πνμηαθεί δ SRIF ηαζ ηα ακάθμβά ηδξ είκαζ απμηέθεζια ηονίςξ ηδξ ιείςζδξ ηςκ εκδμηοηηάνζςκ επζπέδςκ ζυκηςκ αζαεζηίμο. Αοηυ επζηοβπάκεηαζ είηε ιέζς ακμίβιαημξ ηςκ ηακαθζχκ Κ+ ιε δεοηενμβεκή ακαζημθή ηςκ ελανηχιεκςκ απυ δζαθμνά δοκαιζημφ δζαφθςκ Ca++ είηε ιε ημκ πνςημβεκή απμηθεζζιυ δζαφθςκ Ca++. H SRIF είκαζ βκςζηυ υηζ νοειίγεζ ηδ θεζημονβία ηςκ ηακαθζχκ Κ+. Οζ οπμδμπείξ sstr2, sstr3, sstr4 ηαζ sstr5 εκενβμπμζμφκ ιέζς ηςκ Gia2 ηαζ Gia3 πνςηεσκχκ ηα εκ θυβς ηακάθζα έηζζ χζηε κα αολάκεηαζ δ νμή ηςκ ζυκηςκ Κ+ πνμξ ηα ιέζα. Πζμ δναζηήνζμξ ζε αοηή ηδ θεζημονβία είκαζ μ sstr2 (Kreienkamp et al 1997). Ο απεοεείαξ απμηθεζζιυξ δζαφθςκ Ca++ πνμηαθείηαζ απυ ημοξ οπυηοπμοξ sstr1, sstr2,sstr5. Η επαβςβή απυ ηδ SRIF ηδξ Caεξανηχιεκδξ θςζθαηάζδξ ηαθζζκεονίκδξ είκαζ έκαξ ιδπακζζιυξ μ μπμίμξ ιεηέπεζ ιαγί ιε ημοξ πνμδβμφιεκμοξ ζηδκ ακαζημθή ελςηφηηςζδξ μνιμκχκ (Renstrolm et al 1996). Έκαξ άθθμξ πζεακυξ ιδπακζζιυξ ακαζημθήξ έηηνζζδξ είκαζ αοηυξ πμο παναηδνήεδηε ζε ηανηζκζηά ηφηηανα οπυθοζδξ

13 ζηα μπμία δ ακαζημθή έηηνζζδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ επάβεηαζ ιε ηδ ιεζμθάαδζδ ηςκ οπμηφπςκ sstr1 ηαζ sstr2 ακαζηέθθμκηαξ ηδ θςζθμθζπάζδ Α2, μδδβχκηαξ έηζζ ζηδ ιείςζδ ηςκ επζπέδςκ αναπζδμκζημφ μλέμξ (Cervia et al 2002) ΑΝΣΙΚΑΡΚΙΝΙΚΗ ΔΡΑΗ Πανάθθδθα ιε ηδκ ακηζεηηνζηζηή ηδξ δνάζδ δ ζςιαημζηαηίκδ ιπμνεί κα αζηήζεζ ανκδηζηυ έθεβπμ ζηδκ ακάπηολδ δζαθυνςκ θοζζμθμβζηχκ ηαζ ηανηζκζηχκ ηοηηάνςκ. Συζμ δ SRIF, υζμ ηαζ ηα ακάθμβά ηδξ πανμοζζάγμοκ ακηζκεμπθαζιαηζηή δνάζδ ζε πμζηζθία πεζναιαηζηχκ υβηςκ ηυζμ in vitro υζμ ηαζ in vivo ιε άιεζμοξ ή έιιεζμοξ ιδπακζζιμφξ (Schally et al 2001, 2004, Weckbecker et al 1993). ημοξ έιιεζμοξ ιδπακζζιμφξ πενζθαιαάκμκηαζ: δ ακαζημθή έηηνζζδξ ή ζφκεεζδξ παναβυκηςκ πμο εοκμμφκ ηδκ ηοηηανζηή ακάπηολδ, δ ακαζημθή ηδξ αββεζμβέκεζδξ, ηαζ νφειζζδ ηδξ θεζημονβίαξ ημο ακμζμπμζδηζημφ ζοζηήιαημξ. Η άιεζδ ακαζημθή ημο ηοηηανζημφ πμθθαπθαζζαζιμφ ιπμνεί κα αζηδεεί ιέζς ιδπακζζιχκ παφζδξ ηδξ ηοηηανζηήξ ακάπηολδξ ή/ηαζ ιέζς απμπηςηζηχκ ιδπακζζιχκ ΦΤΙΟΛΟΓΙΚΕ ΔΡΑΕΙ ΣΗ SRIF KΕΝΣΡΙΚΕ ΔΡΑΕΙ Η SRIF δζαδναιαηίγεζ νυθμ ηθεζδί ζηδ θοζζμθμβία. Η δνάζδ ηδξ είκαζ ηονίςξ ακαζηαθηζηή ιε ηφνζμ νυθμ ηδκ ακαζημθή έηηνζζδξ ηδξ αολδηζηήξ μνιυκδξ. Αοηυ είκαζ δοκαηυ ιέζς άιεζδξ ακαζημθήξ ηδξ έηηνζζήξ ηδξ, υζμ ηαζ έιιεζδξ ιέζς ακαζημθήξ θεζημονβίαξ ηδξ GHRH (Zheng et al 1997). Οζ οπμδμπείξ πμο ιεζμθααμφκ βζα ηδκ εηδήθςζδ ηδξ ζοβηεηνζιέκδξ δνάζδξ είκαζ ηονίςξ μ sstr1 ηαζ μ sstr2. Mέζς ημο sstr2 ηαζ ημο sstr5 ακαζηέθθεηαζ δ έηηνζζδ άθθςκ μνιμκχκ ηδξ οπυθοζδξ υπςξ δ TSH ηαζ δ πνμθαηηίκδ. Οζ οπμδμπείξ ηδξ SRIF ηαηακέιμκηαζ πένακ ηςκ ζςιαημζηαηζκενβζηχκ κεονχκςκ ηαζ ζε άθθεξ πενζμπέξ ημο εβηεθάθμο ιε δζάθμνεξ ηεκηνζηέξ δνάζεζξ (Selmer et al 2000). Η SRIF εεςνείηαζ ζδιακηζηυξ νοειζζηήξ ηδξ κεονζηήξ δζεβενζζιυηδηαξ ηαζ ανέεδηε κα εηηνίκεηαζ ιαγί ιε ημ GABA απυ κεονχκεξ ημο ζππυηαιπμο ηαζ ηδξ αιοβδαθήξ (Vezzani et al 1999). Ακαζηέθθεζ ηδκ πνμηαθμφιεκδ απυ ημ GABA κεονμιεηααίααζδ ιέζς πνμζοκαπηζημφ ιδπακζζιμφ ακαζημθήξ ηδξ έηηνζζήξ ημο. Μπμνεί κα αθθδθεπζδνάζεζ θεζημονβζηά ιε ηδκ αηεηοθμπμθίκδ ή ημ βθμοηαιζκζηυ μλφ ηαζ κα αολήζεζ ηδκ απυηνζζδ ημο ζππυηαιπμο ή

14 ηςκ θθμζΐηχκ κεφνςκ ζε αοηά, εκχ νοειίγεζ ηδκ έηηνζζδ αηεηοθμπμθίκδξ απυ ημ νααδςηυ ζχια (Leresche et al 2000). Ο Tallent ηαζ ζοκενβάηεξ (1999) ακαθένμοκ υηζ δ ζςιαημζηαηίκδ ιέζς πνμζοκαπηζηήξ ακαζημθήξ απεθεοεένςζδξ βθμοηαιζκζημφ μλέμξ ηαζ ιεηαζοκαπηζηήξ εκενβμπμίδζδξ ηακαθζχκ Κ+ιεζχκεζ ηδ ιεηαζοκαπηζηή δζεβενζζιυηδηα. Ακαθένεηαζ επίζδξ υηζ δ ζςιαημζηαηίκδ νοειίγεζ ηδ ζοιπενζθμνά, ηζξ ζοκαζζεδιαηζηέξ ακηζδνάζεζξ ηαζ ηδκ ηζκδηζηή θεζημονβία( Olias et al 2004). Έκαξ άθθμξ ζδιακηζηυξ νυθμξ ηδξ SRIF ζηδ θοζζμθμβία ημο Κ.Ν.. είκαζ δ νφειζζδ ημο πυκμο αθμφ μζ οπμδμπείξ ηδξ πανμοζζάγμοκ ορδθυ πμζμζηυ μιμθμβίαξ (~35) ιε ημοξ ακηίζημζπμοξ μπζμεζδείξ (Allen et al 2000), βεβμκυξ, ημ μπμίμ ηαεζζηά ηζξ δφμ μζημβέκεζεξ ςξ ηζξ πζμ ζοββεκείξ ζηδκ μζημβέκεζα ηςκ GPCR. Ανηεηά ακάθμβα ηδξ SRIF πανμοζζάγμοκ ζοββέκεζα ιε μπζμεζδείξ οπμδμπείξ ιε ημ Ocreotide κα δνα ακηαβςκζζηζηά ζημκ MOR1. Η ακαθβδηζηή δνάζδ ηδξ SRIF ηαζ ηςκ ακαθυβςκ ηδξ θαίκεηαζ κα εηδδθχκεηαζ ιέζς ιδπακζζιχκ πμο πανειπμδίγμοκ ηδ ιεηαθμνά ζήιαημξ ημο πυκμο απυ ημ κςηζαίμ ιοεθυ, ηονίςξ ιέζς αζζεδηζηχκ βαββθίςκ, ζημκ εβηέθαθμ (Schindler et al 1999). Ο οπμδμπέαξ πμο θαίκεηαζ κα είκαζ οπεφεοκμξ βζα ηδκ ακαθβδηζηή δνάζδ ηδξ SRIF είκαζ μ sstr2. H πζεακή πνήζδ <<ζςιαημζηαηζκχκ>> ςξ ζζπονχκ ακαθβδηζηχκ εα ιπμνμφζε κα άκμζβε ιζα ηαζκμφνζα μδυ ζηδκ ηεκηνζηή ακαθβδηζηή εεναπεία αθμφ ηα εκ θυβς ιυνζα πζεακυκ κα απμηνέπμοκ ηζξ βκςζηέξ πανεκένβεζεξ ηςκ μπμζμεζδχκ ( Schindler et al 1999). διεζχκεηαζ υιςξ δ αδοκαιία ηδξ θοζζηήξ μνιυκδξ ηαζ ηςκ ακαθυβςκ ηδξ κα δζαπενάζμοκ ημκ αζιαημεβηεθαθζηυ θναβιυ ηαζ κα θηάζμοκ ζημκ εβηέθαθμ. ΠΕΡΙΦΕΡΙΚΕ ΔΡΑΕΙ Η SRIF δζαεέηεζ πμζηζθία δνάζεςκ ζημ βαζηνεκηενζηυ ζφζηδια, ζημ εκδμηνζκζηυ αθθά ηαζ ζημ ακμζμπμζδηζηυ. Η δνάζδ ηδξ ζηδ ζφζπαζδ θείςκ ιοχκ ηςκ αββείςκ δζεηπεναζχκεηαζ ιε ηδ ιεζμθάαδζδ ηδξ αηεηοθμπμθίκδξ. Πανάβεηαζ απυ D ηφηηανα ηδξ ελςηνζκμφξ ιμίναξ ημο παβηνέαημξ ηαζ νοειίγεζ ηδκ εκηενζηή απμννυθδζδ ηςκ ηνμθχκ. Δζδζηυηενα, πανάβεηαζ υηακ αολάκμκηαζ ηα επίπεδα βθοηυγδξ ηαζ αιζκμλέςκ ζημ αίια ιεηά απυ θήρδ ηνμθήξ. οιπενζθένεηαζ ςξ παναηνζκήξ νοειζζηζηυξ πανάβμκηαξ, δδθαδή ζακ πδιζηυ ζήια πμο ιεηαδίδεηαζ ζηα βεζημκζηά ηφηηανα ηαζ νοειίγεζ ηδκ έηηνζζδ άθθςκ παναβυκηςκ, νοειίγμκηαξ ιε αοηυ ημκ ηνυπμ ηδ δνάζδ ημοξ. Ακαζηέθθεζ ηδκ έηηνζζδ βθοηαβυκδξ απυ ηα α ηφηηανα ημο παβηνέαημξ ηαζ ηδξ ζκζμοθίκδξ απυ ηα α ηφηηανα ιέζς ημο sstr2 (Low 2004, Olias et al 2004). Δίκαζ

15 ακαζηαθηζηυξ πανάβμκηαξ βζα ηδκ έηηνζζδ βαζηνζημφ μλέμξ απυ ημ ζημιάπζ ηαζ βαζηνίκδξ. ε ηαηαζηάζεζξ θθεβιμκήξ ηαζ αθθενβζηχκ ακηζδνάζεςκ επάβεηαζ δ έηηνζζδ ηυζμ ηδξ SRIF υζμ ηαζ δ έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ ζε ιαηνμθάβα, ζπθδκμηφηηανα, Σ- θειθμηφηηανα, ηαζ παναηδνείηαζ παναηνζκήξ δνάζδ ζηα ζοβηεηνζιέκα ηφηηανα. Αζηεί νοειζζηζηή δνάζδ ζηδκ έηηνζζδ ηδξ IL-2 απυ ηα Σ-θειθμηφηηανα, ηαζ εκχπνμηαθεί ηδκ αφλδζδ ηδξ έηηνζζήξ ηδξ απυ ηα Σ-θειθμηφηηανα ημο εκηενζημφ αθεκκμβυκμο, ηδ ιεζχκεζ απυ ηα ακηίζημζπα ημο πενζθενζημφ αίιαημξ (Krantic et al 2004). Γζεβείνεζ ηδκ έηηνζζδ IL-4 ηαζ IL-10 εκχ ιεζχκεζ ηδκ έηηνζζδ ηδξ INF-β. επζπνυζεεηα πνμηαθεί ακαζημθή έηηνζζδξ ηοημηζκχκ ηαζ άθθςκ παναβυκηςκ πμο ειπθέημκηαζ ζηδκ θθεβιμκή υπςξ επίζδξ ηαζ δζαθυνςκ ακμζμζθαζνζκχκ IgA, IgE, IgG, IgM (Krantic et al 2004). Όπςξ πνμακαθένεδηε αζηεί ακηζκεμπθαζιαηζηή δνάζδ ιέζς δζαθυνςκ ιδπακζζιχκ ζε πμθθά είδδ υβηςκ εκχ πανάθθδθα είκαζ οπυ δζενεφκδζδ μ νυθμξ ηδξ ζηδ θοζζμθμβία ημο ηανδζαββεζαημφ (Weckbecker et al 2003, Curtis et al 2000, Badway et al 2004) ΠΑΡΕΚΚΛΙΕΙ ΣΗΝ ΕΞΕΙΔΙΚΕΤΗ ΣΗ ΔΡΑΗ ΣΗ SRIF Η ελεζδίηεοζδ ηδξ δνάζδξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ, ζε έκα ζοβηεηνζιέκμ είδμξ ηοηηάνμο, επζηοβπάκεηαζ ιέζς ηδξ έηθναζδξ ζοβηεηνζιέκμο οπυηοπμο ημο οπμδμπέα ηδξ ή ιέζς ηδξ ζοκδοαζιέκδξ έηθναζδξ πενζζζμηένςκ ημο εκυξ. Έκαξ ιεβάθμξ υβημξ δεδμιέκςκ ηα ηεθεοηαία πνυκζα ηείκεζ κα δείλεζ υηζ δ ελεζδίηεοζδ ιπμνεί κα ιεηααθδεεί απυ δζάθμνμοξ πανάβμκηεξ αθμφ δ έηθναζδ ηςκ οπμηφπςκ ημο οπμδμπέα πανμοζζάγεζ ηάπμζμο ααειμφ πθαζηζηυηδηα (Krantic et al 2004). Οζ πανάβμκηεξ μζ μπμίμζ ιπμνμφκ κα ιεηααάθθμοκ ηδκ ελεζδζηεοιέκδ δνάζδ ηδξ SRIF ιπμνμφκ κα πςνζζημφκ ζε ηνείξ ηαηδβμνίεξ (Krantic et al 2004): 1. ηοςρ πεπιζηαζιακούρ (temporal) 2. ηοςρ πεπιβαλλονηικούρ (environmental) 3. ηοςρ λειηοςπγικούρ (functional) H πνμζθάηςξ ακαθενεείζα ιεηαηυπζζδ έηθναζδξ απυ ημκ sstr2α πνμξ ημκ sstr3 ζε ςνζιάγμκηα εοιμηφηηανα, ακηζπνμζςπεφεζ έκα πανάδεζβια πενζζηαζζαημφ πμο εοεφκεηαζ βζα ηδκ ιεηααμθή ηδξ δνάζδξ. Δκχ ηα ακχνζια CD2+ ηαζ CD3 εοιμηφηηανα πμο είκαζ οπυ πμθθαπθαζζαζιυ ηαζ εζδζηά ζηδ θάζδ ηδξ

16 δζαθμνμπμίδζδξ ιέζς TCR ακαδζάηαλδξ εηθνάγμοκ ημκ sstr2, ηεθζηά δζαθμνμπμζμφκηαζ ζε CD3+ ηα μπμία εηθνάγμοκ ημκ sstr3 ηαζ οθίζηακηαζ απυπηςζδ (Ferone et al 2002). Η δεφηενδ ηάλδ παναβυκηςκ μζ μπμίμζ εοεφκμκηαζ βζα ηδ ιεηααμθή ηδξ δνάζδξ είκαζ μζ πενζααθθμκηζημί ηαζ δ επίδναζή ημοξ απμδεζηκφεηαζ απυ ζημζπεία ηα μπμία πνμηφπημοκ απυ ιεθέηεξ ζε ιεηαζπδιαηζζιέκα ηφηηανα. Η ηαοηυπνμκδ φπανλδ άθθςκ πνμζδεηχκ ( π.π. μπζμεζδή ή κημπαιίκδ) ηαζ εκενβμπμίδζδ ηςκ ζπεηζηχκ οπμδμπέςκ απυ αοημφξ μδδβεί ζε μθζβμιενζζιυ ηαηά ζοκέπεζα ζηδκ ηνμπμπμίδζδ ηδξ ιεηαβςβήξ ζήιαημξ ηαζ ζηδκ ηεθζηή ηνμπμπμίδζδ ηδξ δνάζδξ (Krantic et al 2004). Σέθμξ, ημ θεζημονβζηυ ηαεεζηχξ ημο ηοηηάνμο είκαζ οπεφεοκμ βζα ηδκ ηνμπμπμίδζδ ηδξ ελεζδίηεοζδξ ηδξ δνάζδξ. Γζα πανάδεζβια, ηυζμ θοζζμθμβζηά, υζμ ηαζ ηανηζκζηά θαηημθυνα ηφηηανα ηδξ οπυθοζδξ, εηθνάγμοκ ημοξ sstr2 ηαζ sstr5 ηαζ ιέζς αοηχκ ακαζηέθθεηαζ δ έηηνζζδ ηδξ πνμθαηηίκδξ. Ο οπυηοπμξ sstr2 είκαζ μ ηφνζμξ οπεφεοκμξ βζα ηδκ άζηδζδ αοηήξ ηδξ δνάζδξ. ε ιενζηέξ υιςξ πενζπηχζεζξ, υπμο ημ ηφηηανμ ιεηαπίπηεζ ιέζς εκυξ παεμβεκεηζημφ ιδπακζζιμφ ζε παεμθμβζηή ηαηάζηαζδ, παναηδνείηαζ ιεηαηυπζζδ ζημκ οπυηοπμ ημο οπμδμπέα μ μπμίμξ αζηεί ηδ δνάζδ, ηαζ αοηή αζηείηαζ ηαηά ηφνζμ θυβμ απυ ημκ sstr5 ηαζ υπζ απυ ημκ sstr2. Σμ εκηοπςζζαηυ υιςξ είκαζ υηζ δεκ παναηδνείηαζ αθθαβή ζηδκ έηθναζδ ηςκ δομ οπμδμπέςκ αθθά ιυκμ ςξ πνμξ ημ πμζμξ ιεζμθααεί βζα ηδ δνάζδ (Shimon et al 1997, Jaquet et al 1999). 1.6 ΦΑΡΜΑΚΟΔΤΝΑΜΙΚΗ ΣΗ SRIF ΚΑΙ ΣΩΝ ΑΝΑΛΟΓΩΝ ΣΗ Η απυδεζλδ ηδξ πακ-ακηζεηηνζηζηήξ δνάζδξ ηδξ SRIF μδήβδζε ζηδκ ηθζκζηή ένεοκα βζα ημ εεναπεοηζηυ ηδξ δοκαιζηυ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ ηδξ ιεβαθαηνίαξ, ημο δζααήηδ ηαζ βαζηνεκηενζηχκ δζαηαναπχκ. Υνδζζιμπμζείηαζ βζα ηδκ ακηζιεηχπζζδ ηδξ ιεβαθαηνίαξ πμο πνμηαθείηαζ απυ ηδκ οπενέηηνζζδ ηδξ GH εκχ ζοκεπείξ έηποζδ SRIF μδδβεί ζε ιείςζδ ηςκ επζπέδςκ βθοηυγδξ ζημ αίια ακ ηαζ ηακέκα ακάθμβμ ζςιαημζηαηίκδξ δεκ απμδείπεδηε πνήζζιμξ ακηζδζααδηζηυξ πανάβμκηαξ (Gerich et al 1974, 1979). ημ βαζηνεκηενζηυ ζφζηδια, πανυθμ πμο έπεζ πθδεχνα δνάζεςκ, πνδζζιμπμζείηαζ ιυκμ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ ημο βαζηνζημφ έθημοξ, ζηδ βαζηνίηζδα, ζηδκ αζιμνναβζηή παβηνεαηίηζδα ηαζ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ αθααχκ ζε ζζημφξ πνμηαθμφιεκεξ απυ ημλζημφξ πανάβμκηεξ. Πμθφ πνήζζιδ απμδεζηκφεηαζ δ πνήζδ ηδξ θοζζηήξ μνιυκδξ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ μλέμξ μζζμθαβζημφ έθημοξ, εκχ ηα ακάθμβά ηδξ είκαζ πνήζζια βζα

17 πνυκζα πνήζδ. Σα ακάθμβα ηδξ SRIF επίζδξ πνδζζιμπμζμφκηαζ ζηδ εεναπεία δζάννμζαξ πμο πνμηαθείηαζ απυ οπενέηηνζζδ VIP ή 5-HT ζε αζεεκείξ ιε βαζηνμεκηενμπαβηνεαηζημφξ (GEP) υβημοξ ζε θάζδ πδιεζμεεναπείαξ. ηδκ μβημθμβία μζ <<ζςιαημζηαηίκεξ>> πνδζζιμπμζμφκηαζ βζα ηδκ ακηζιεηχπζζδ αδεκςιάηςκ ηαζ ζοκμδχκ ζοιπηςιάηςκ GEP υβηςκ. ςιαημηνυθα αδεκχιαηα ηδξ οπυθοζδξ, ζκζμοθζκχιαηα, βαζηνζκχιαηα ηαζ βεκζηά υβημζ πμο οπενεηηνίκμοκ μνιυκεξ ή πανάβμκηεξ υπςξ ηδκ GH, ηδ βαζηνίκδ, ηδ ζεηνεηίκδ, ηδ βθοηαβυκδ, ακηζιεηςπίγμκηαζ ιε ηζξ ζςιαημζηαηίκεξ, αθμφ ιπμνμφκ κα νοειζζημφκ αοηέξ μζ οπενεηηνίζεζξ ηαζ κα εθεβπεεί ηαοηυπνμκα ημ ιέβεεμξ ημο υβημο (Weckbecker et al 2003). Όζμκ αθμνά ζηδκ άιεζδ ακηζιεηχπζζδ ζηενεχκ υβηςκ, δ ηθζκζηή πνήζδ είκαζ πενζμνζζιέκδ. Δλαζνεηζηά πνήζζιεξ απμδείπεδηακ μζ ζςιαημζηαηίκεξ ζηδ ιδ πανειααηζηή ζημπεοιέκδ δζάβκςζδ, εεναπεία ή νάδζμεκδμεεναπεία υβηςκ, πμο οπενεηθνάγμοκ οπμδμπείξ ηδξ θοζζηήξ μνιυκδξ. Όζμκ αθμνά ζηζξ δνάζεζξ ζε άθθα ζοζηήιαηα, δ ηθζκζηή πνήζδ δεκ απμδείπεδηε αηυια, αθθά ανηεηά ηθζκζηά δεδμιέκα πανμοζζάγμοκ ζδζαίηενα ζηακμπμζδηζηά απμηεθέζιαηα βζα ηδκ ακηζιεηχπζζδ ημο πυκμο ηαζ ημο ζοκδνυιμο Cushing, ημ μπμίμ είκαζ απμηέθεζια ηδξ οπενέηηνζζδξ ACTH απυ ηδκ οπυθοζδ. Η ακαζημθή έηηνζζδξ ηδξ ηεθεοηαίαξ αεθηζχκεζ ηδκ ηθζκζηή παεμθμβζηή εζηυκα (Hofland et al 2003). Τπάνπμοκ αηυια εκδείλεζξ βζα ηδ πνήζδ ηςκ ζςιαημζηαηζκχκ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ ηδξ κυζμο ημο Graves ηαζ ζηδκ ακηζιεηχπζζδ ηαηαζηάζεςκ πνμηαθμοιέκςκ απυ δζααήηδ υπςξ δζααδηζηή κεθνμπάεεζα ηαζ νεηζκμπάεεζα,κυζςκ πνμηαθμφιεκςκ απυ θθεβιμκχδδξ ηαηαζηάζεζξ (απυ ακςιαθίεξ ημο ακμζμπμζδηζημφ) υπςξ νεοιαημεζδή ανενίηζδα, πμθθαπθή ζηθήνςζδ, κυζμ ημο Hundigton αθθά ηαζ ημο AIDS (Weckbecker et al 2003). 1.7 ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ ΣΟΝ ΟΔΟΝΣΙΚΟ ΠΟΛΦΟ Η ακίπκεοζδ ημο κεονμπεπηζδίμο ζςιαημζηαηίκδ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ, ακαθένεηαζ βζα πνχηδ θμνά ζε πεζναιαηζηά απμηεθέζιαηα ημκ Gazelius et al (1981), μ μπμίμξ πνδζζιμπμίδζε ναδζμ-ακμζμθμβζηέξ ιεευδμοξ ηαζ παναηήνδζε ακμζμθμβζηή εοαζζεδζία ζημ κεονμπεπηίδζμ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ βάηαξ. Ο πνχημξ πμο εκηυπζζε ηδκ πανμοζία ηαζ ηδκ ηαηακμιή ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ ημο ακενχπμο ήηακ μζ Casasco et al (1990b, 1991). Μέπνζ ζήιενα μζ δομ παναπάκς ενβαζίεξ είκαζ μζ ιυκεξ πμο ακαθένμκηαζ ζηδκ αζαθζμβναθία ζπεηζηά ιε ηδκ πανμοζία ηαζ ηδκ ηαηακμιή αοημφ ημο κεονμπεπηζδίμο ζημκ μδμκηζηυ

18 πμθθυ ημο ακενχπμο. Ο Casasco ηαζ μζ ζοκενβάηεξ ημο (1991) ακαθένμοκ υηζ SSTκεονζηέξ ίκεξ εζζένπμκηαζ ζημκ πμθθυ, ιέζς κεονζηχκ δεζιχκ, υπμο ηαζ δζαηθαδχκμκηαζ αηνμννζγζηά ηαζ ιοθζηά ζημ πμθθζηυ ζηνχια, ιέπνζ ημ κεονζηυ πθέβια ημο Rashkow. Οζ ίκεξ αοηέξ είηε πενζαάθθμοκ δζάθμνα αββεία, είηε πανμοζζάγμκηαζ ιυκεξ πςνίξ ηαιία επαθή ιε αββεζαηά ημζπχιαηα. Η ηαηακμιή αοηή ηςκ SST-ακμζμθμβζηά εοαίζεδηςκ κεονζηχκ ζκχκ αημθμοεεί ηδκ ηαηακμιή ακμζμθμβζηά εοαίζεδηςκ κεονζηχκ ζκχκ ηαζ άθθςκ κεονμπεπηζδίςκ ημο μδμκηζημφ πμθθμφ ηαζ ηονίςξ ηδξ μοζίαξ Ρ (Wakisaka 1985). Η πανυιμζα ηαηακμιή ηςκ SOTζκχκ βφνς απυ ηα πμθθζηά αββεία, μδδβεί ζηδκ δζαπίζηςζδ υηζ ηαζ δ ζςιαημζηαηίκδ παίγεζ νυθμ ζηδκ νφειζζδ ηδξ πμθθζηήξ αζιαηζηήξ ηοηθμθμνίαξ, αθθά ζφιθςκα ιε ημκ Gazelius et al (1981) μζ SST-εεηζηέξ κεονζηέξ ίκεξ δεκ πανμοζζάγμοκ άιεζδ αββεζεκενβυ δνάζδ. Όπςξ ακαθένεδηε, μ Olgart et al (1977) παναηήνδζε υηζ δ δθεηηνζηή δζέβενζδ ημο ηάης θαηκζαημφ κεφνμο μδδβεί ζηδκ έηηνζζδ ηδξ μοζίαξ P ηαζ επαηυθμοεδ αββεζμδζαζημθή ηαζ αφλδζδ ηδξ αζιαηζηήξ νμήξ. Η δθεηηνζηή υιςξ δζέβενζδ ημο ηάης θαηκζαημφ κεφνμο ηαζ δ ηαοηυπνμκδ πμνήβδζδ ζςιαημζηαηίκδξ επέθενε ακαζημθή έηηνζζδξ ηδξ μοζίαξ Ρ πμο είπε ςξ απμηέθεζια ηδκ ακαζημθή ηδξ αββεζμδζαζημθήξ ηςκ πμθθζηχκ αββείςκ (Gazelius et al 1981). Σα εονήιαηα αοηά μδήβδζακ ζηδκ οπυεεζδ υηζ μζ SST- ίκεξ έπμοκ έκα έιιεζμ αββεζμνοειζζηζηυ νυθμ ιέζς ηδξ ακαζημθήξ ηδξ έηηνζζδξ μοζίαξ Ρ, πνυηαζδ πμο εκζζπφεηαζ ηαζ απυ ηδκ πανάθθδθδ ηαηακμιή μοζίαξ Ρ ηαζ ζςιαημζηαηίκδξ ηαηά ιήημξ ηςκ ζκχκ πμφ πενζαάθμοκ ηα πμθθζηά αββεία (Wakisaka 1985, Casasco et al 1991). Σμ βεβμκυξ υηζ δ ζςιαημζηαηiκδ απμηεθεί ακαζημθέα ηδξ μοζίαξ Ρ, δ μπμία είκαζ οπεφεοκδ βζα ηδκ νφειζζδ ηδξ αζιαηζηήξ νμήξ ηαζ πανάθθδθα δ ακηζθθεβιμκχδδξ δνάζδ πμο πανμοζζάγεζ δ ζςιαημζηαηίκδ ζημοξ πενζθενζημφξ ζζημφξ (Paran et al 2001), δεκ απμηθείεζ ηδκ πζεακυηδηα πανυιμζαξ δνάζδξ ηδξ ζημκ πμθθυ. Δπίζδξ, οπμδμπείξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ έπμοκ ανεεεί κα ζπεηίγμκηαζ ιε αζζεδηζημφξ ηεκηνμιυθμοξ κεονχκεξ μζ μπμίμζ ζοκδέμκηαζ άιεζα ιε ημ ιδπακζζιυ ιεηαθμνάξ πυκμο ηαζ ακαθβδζίαξ. Η δνάζδ αοηή ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημοξ πενζθενζημφξ ζζημφξ, ίζςξ κα εηδδθχκεηαζ ηαζ ζηζξ SST- κεονζηέξ ίκεξ πμο ανίζημκηαζ εθεφεενεξ ζημκ πμθθζηυ ζζηυ, πςνίξ κα πενζαάθθμοκ πμθθζηά αββεία (Casasco et al 1991).

19 1.8 ΤΠΟΔΟΧΕΙ ΩΜΑΣΟΣΑΣΙΝΗ Οζ αζμθμβζηέξ δνάζεζξ ηδξ SRIF εηδδθχκμκηαζ ιέζς ηδξ πνυζδεζδξ ηδξ ίδζαξ ή ακαθυβςκ ηδξ ζε οπμδμπείξ ορδθήξ πνυζδεζδξ. Οζ οπμδμπείξ αοημί ακήημοκ ζηδκ οπενμζημβέκεζα ηςκ ζογεοβιέκςκ ιε G πνςηεΐκεξ οπμδμπέςκ, μζ μπμίμζ δζαεέημοκ επηά δζαιειανακζηέξ έθζηεξ. Οζ οπμδμπείξ ηδξ SRIF πανμοζζάγμοκ εονεία ακαημιζηή ηαηακμιή, αθμφ εκημπίγμκηαζ ζε πμθθά ζοζηήιαηα ηαζ υνβακα υπςξ ζημ Κ.Ν.., ζημ έκηενμ, ζημ πάβηνεαξ, ζηδκ οπυθοζδ, ζημ ακμζμπμζδηζηυ, ζημ εονεμεζδή, ζημοξ πκεφιμκεξ, ζημοξ κεθνμφξ ηαζ αθθμφ (Patel Y 1999, Olias et al 2004). Έςξ ζήιενα έπμοκ ηθςκμπμζδεεί ηαζ παναηηδνζζηεί πέκηε δζαθμνεηζημί οπυηοπμζ ημο οπμδμπέα ζςιαημζηαηίκδξ, μζ sstr 1-5 (Hoyer et al 1995). O Τamada ηαζ μζ ζοκενβάηεξ ημο (Yamada et al 1993) ηθςκμπμίδζακ ημοξ πνχημοξ δφμ οπμδμπείξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ημ 1993, ημοξ sstr1 & 2, μζ μπμίμζ πνμένπμκηακ απυ ημκ άκενςπμ (h) ηαζ απυ ημκ ιο (m). Η ηεπκζηή ημοξ ζηδνίπεδηε ζηδ ζφκεεζή ημοξ ιέζς PCR εκυξ sstr cdna ηθάζιαημξ απυ RNA ηοηηάνςκ ηςκ κδζζδίςκ ημο παβηνέαημξ. Μεηά ηδκ επζηοπία ηδξ ηθςκμπμίδζδξ ηςκ sstr1 & 2 αημθμφεδζε δ ηθςκμπμίδζδ ηςκ rsstr1 (Li et al1992) ηαζ m,r,h,sstr3 (Yasuda et al 1992, Yamada et al 1992, Corness et al 1993), r,h,sstr4 (Bruno et al 1992), hsstr5 (O Caroll et al 1992). Σμ ιέβεεμξ ημοξ ηοιαίκεηαζ απυ 369 εχξ 418 αιζκμλέα. Οζ sstr s ηςδζημπμζμφκηαζ απυ πέκηε ιδ αθθδθζηά βμκίδζα ηα μπμία ανίζημκηαζ ζε πέκηε δζαθμνεηζηά πνςιμζχιαηα (Patel 1999). Όθα ηα βμκίδζα εηηυξ αοημφ ημ μπμίμ είκαζ οπεφεοκμ βζα ηδκ έηθναζδ ημο sstr2 δεκ δζαεέημοκ ζκηνυκζα. Ο sstr2 ανέεδηε κα οπάνπεζ ζε δφμ ζζμιμνθέξ (Patel Y 1993), ηδκ ιαηνά sstr2a ιε 369 αιζκμλέα ηαζ ηδκ ημκηή sstr2b ιε 13 αιζκμλέα θζβυηενα. Καζ μζ δφμ ζζμιμνθέξ πνμηφπημοκ απυ δζαθμνεηζηυ ιάηζζια ημο mrna ζημ 3 άηνμ ηδξ ηςδζηήξ αθθδθμοπίαξ. Σμ ηιήια ημο οπμδμπέα ημ μπμίμ δζαθένεζ ακάιεζα ζηζξ δφμ ζζμιμνθέξ sstr2a ηαζ sstr2b είκαζ ημ ιήημξ ημο εκδμηοηηάνζμο C- ηεθζημφ άηνμο. Μέπνζ ζήιενα, μ sstr2b έπεζ πενζβναθεί ιυκμ ζε ζζημφξ πμκηζηζχκ ηαζ παναιέκεζ αζαθέξ ακ μζ δφμ αοηέξ ιμνθέξ ημο οπμδμπέα sstr2 εηθνάγμκηαζ ηαζ ζε άθθα είδδ (Reisine & Bell 1995, Vanetti et a l1992). Η μιμζυηδηα ακάιεζα ζηζξ αθθδθμοπίεξ ηςκ πέκηε οπυηοπςκ sstr1-5 ηοιαίκεηαζ απυ 39-57%, εκχ δ μιμζυηδηα ακάιεζα ζημοξ ίδζμοξ οπμδμπείξ δζαθμνεηζηχκ εζδχκ είκαζ ηαηά πμθφ ορδθυηενδ (Patel et al 1995). Όζμκ αθμνά ζηζξ επηά δζαιειανακζηέξ έθζηεξ, αοηέξ δζαεέημοκ αοζηδνά ζοκηδνδιέκα 100 αιζκμλέα ηαζ δ% μιμζυηδηα ζηδκ αθθδθμοπία ημοξ είκαζ ιεηαλφ 56 ηαζ 70%. Η έαδμιδ έθζηα είκαζ δ πενζμπή δ μπμία δζαεέηεζ ηδ ιεβαθφηενδ μιμθμβία ιε ημκ επίημπμ YANSCANPIXLYΦFLS κα έπεζ ηαοημπμζδεεί ζε υθμοξ ημοξ οπυηοπμοξ.

20 Οζ ιυκεξ δζαθμνμπμζήζεζξ πμο παναηδνμφκηαζ είκαζ ζηα αιζκμλέα Υ ηαζ Φ. Όπμο Υ είκαζ έκα αθεζθαηζηυ άπμθμ αιζκμλφ, ζζμθεοηίκδ ή ααθίκδ. ηδκ ηνίηδ δζαιειανακζηή έθζηα παναηδνείηαζ δ αθθδθμοπία DRY (αζπανηζηυ μλφ-ανβζκίκδ-ηονμζίκδ), επίζδξ παναηηδνζζηζηή βζα υθμοξ ημοξ οπμδμπείξ ζςιαημζηαηίκδξ. Αλζμζδιείςημ είκαζ αηυιδ, υηζ ακάιεζα ζηδκ ηοζηεΐκδ115 ηδξ ηνίηδξ δζαιειανακζηήξ έθζηαξ ηαζ ηδξ ηοζηεΐκδξ193 ηδξ ηέηανηδξ έθζηαξ ζπδιαηίγεηαζ έκαξ δζζμοθθζδζηυξ δεζιυξ (Dohlman et al 1990). Ο επίημπμξ αοηυξ εεςνείηαζ δ οπμβναθή ηςκ sstr οπμδμπέςκ. Δπζπνυζεεηα, υθμζ μζ οπμδμπείξ ηδξ SRIF ζηα εδθαζηζηά δζαεέημοκ ιία ζοκεκαζηζηή αθθδθμοπία ημο ηφπμο (S/T)-ΥΦ-Stop ζημ ηαναμλοηεθζηυ ημοξ άηνμ. Όπμο Υ ιπμνεί κα είκαζ μπμζμδήπμηε αιζκμλφ, εκχ Φ έκα μβηχδεξ ηαζ οδνυθμαμ αιζκμλφ (Kreienkamp et al 2002). Οζ πενζμπέξ δε ιε ηζξ ιεβαθφηενεξ απμηθίζεζξ ηυζμ ζημ ιήημξ ηαζ ζηδκ αθθδθμοπία είκαζ ηα δφμ άηνα: ημ ελςηοηηάνζμ αιζκμηεθζηυ ηαζ ημ εκδμηοηηάνζμ ηαναμλοηεθζηυ. Όθμζ μζ οπμδμπείξ πανμοζζάγμοκ ορδθή ζοββέκεζα ηυζμ βζα ηδκ SRIF14, υζμ ηαζ βζα ηδκ SRIF28. Η ζοββέκεζα είκαζ ηδξ ηάλδξ ηςκ nm, ηαζ βζα ηζξ δφμ ζζμιμνθέξ, εκχ ιυκδ ελαίνεζδ απμηεθεί μ sstr5 o μπμίμξ πανμοζζάγεζ 10 θμνέξ ορδθυηενδ ζοββέκεζα βζα ηδκ ζζμιμνθή ηδξ SRIF28 ζε ζπέζδ ιε ημοξ άθθμοξ οπμδμπείξ ηαζ ηδκ SRIF14. Βάζδ ηονίςξ ηδξ δμιζηήξ ημοξ μιμθμβίαξ μζ οπυηοπμζ sstr1-5 ιπμνμφκ κα ηαλζκμιδεμφκ ζε δομ μιάδεξ ςξ ελήξ: ηδκ sstr μιάδα 1 πμο πενζθαιαάκεζ ημοξ οπυηοπμοξ sstr2,3,5 ηαζ ηδκ sstr μιάδα 2 πμο πενζθαιαάκεζ ημοξ οπυηοπμοξ sstr1,4 (Patel 1999). Η μιαδμπμίδζδ δεκ ζηδνίγεηαζ ιυκμ ζε δμιζηά παναηηδνζζηζηά αθθά ηαζ ζηζξ θανιαημθμβζηέξ ζδζυηδηεξ ημο ηάεε οπμδμπέα πμο απμννέμοκ απυ ηδ δζαθμνεηζηή ζδιαημδυηδζδ ηδκ μπμία πνμηαθμφκ (Patel 1999). ημ ενχηδια πυζμζ ηεθζηά είκαζ μζ οπμδμπείξ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ, δ ζογήηδζδ παναιέκεζ ακμζηηή. Με αάζδ παναηδνήζεζξ ηςκ Tallent (Tallent et al 1996), Cervia (Cervia et al 2003) ηαζ ηςκ ζοκενβαηχκ ημοξ βζα αζοκήεζζηεξ θανιαημθμβζηέξ απμηνίζεζξ ζηδκ θοζζμθμβζηή ηοηηανζηή ζεζνά At20, αθθά ηαζ ζε κεμπθαζιαηζημφξ ζζημφξ απυ ημκ Reubi ηαζ ημοξ ζοκενβάηεξ ημο (Reubi et al 2001), ίζςξ οπάνπμοκ ηαζ άθθμζ οπμδμπείξ μζ μπμίμζ <<απέδναζακ>> απυ ηδκ ηθςκμπμίδζδ ηαζ ημ παναηηδνζζιυ. Δίκαζ υιςξ πζεακυκ δ αζοκήεζζηδ ζοιπενζθμνά κα μθείθεηαζ ζε μιμή εηενμδζιενζζιμφξ ακάιεζα ζημοξ sstr ή ηαζ ζε άθθμοξ GPCR. 1.9 METAΓΩΓΗ ΗΜΑΣΟ ΔΙΑΜΕΟΤ ΣΩΝ SSTR H ιεηαβςβή ζήιαημξ δζαιέζμο ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ είκαζ ιζα πμθφπθμηδ δζαδζηαζία, δ δζεηπεναίςζδ ηδξ μπμίαξ ανπίγεζ ιε ηδ δέζιεοζδ ηδξ SRIF

21 ή ηςκ ακαθυβςκ ηδξ ζε ηάπμζμκ απυ ημοξ πέκηε οπυηοπμοξ ημο οπμδμπέα, ζοκεπίγεηαζ ιε ηδκ εκενβμπμίδζδ ηδξ ζοκδεδειέκδξ G πνςηεΐκδξ ηαζ αημθμοεεί ιεηάδμζδ ημο ζήιαημξ ιέζς δζαθυνςκ ιμκμπαηζχκ. Χξ βκςζηυ, μζ G πνςηεΐκεξ είκαζ δμιζηά ακελάνηδηα ζημζπεία ιεηαβςβήξ, ηα μπμία ζοκδέμκηαζ άιεζα ιε ιία ζοβηεηνζιέκδ οπεν-μζημβέκεζα οπμδμπέςκ, ζοβηνμηχκηαξ έηζζ έκα εκζαίμ θεζημονβζηυ ζφκμθμ. Ακαθοηζηά, μζ G πνςηεΐκεξ απμηεθμφκηαζ απυ ηνείξ οπμιμκάδεξ (α, α ηαζ β) ηαζ θεζημονβμφκ ςξ δζαηυπηεξ πανμπήξ-δζαημπήξ ζδιάηςκ πνμξ ημ ηφηηανμ. Πζμ ζοβηεηνζιέκα, δ α οπμιμκάδα ηδξ G πνςηεΐκδξ είκαζ εηείκδ πμο αθθδθεπζδνά ιε έκα ηιήια ημο οπμδμπέα (πενζμπή ζφγεολδξ), δζεοημθφκμκηαξ έηζζ ηδ ιεηαβςβή πμο ένπεηαζ απυ ηδ δέζιεοζδ εκυξ ιμνίμοαβςκζζηή ζηδκ πενζμπή ζφγεολδξ. Οζ άθθεξ δφμ α ηαζ β οπμιμκάδεξ ελοπδνεημφκ ηδκ αβηονμαυθδζδ ηδξ G πνςηεΐκδξ ζηδκ ηοηηανζηή ιειανάκδ (Page et al 2000, Lefkowitz 1995). Όηακ ημ ιυνζμ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ δεζιεοηεί ζημοξ παναπάκς οπμδμπείξ παναηδνείηαζ ιεηααμθή ηδξ δζαιυνθςζήξ ημοξ, πμο έπεζ ςξ απμηέθεζια ηδκ εκενβμπμίδζδ εκυξ εηενμηνζιενμφξ G-πνςηεΐκζημφ ζοιπθέβιαημξ (απμηεθμφιεκμ απυ α-, α- ηαζ β- οπμιμκάδεξ). Η ιεηααμθή αοηή πναβιαημπμζείηαζ ζε εηείκδ ηδ πενζμπή ημο οπμδμπέα, πμο είκαζ οπεφεοκδ βζα ηδ ζφγεολδ ημο ιε ηδκ α- οπμιμκάδα ηδξ G-πνςηεΐκδξ, δ μπμία ιε ηδ ζεζνά ηδξ ακηαθθάζεζ ημ δεζιεοιέκμ GDP ιε εκδμηοηηάνζμ GTP (Robertson et al1994, Reisine et al 1993, Krantic et al 2004). H GTP-ζοκδεδειέκδ ιμνθή ηδξ α-οπμιμκάδαξ απμπςνίγεηαζ απυ ημκ οπμδμπέα ηαζ ημ α-β-ζφιπθεβια ηαζ έηζζ μζ εθεφεενεξ α-οπμιμκάδεξ αθθδθεπζδνμφκ ιε ιζα πνςηεΐκδ ζηυπμ (π.π. έκα έκγοιμ υπςξ αδεκοθζηή ηοηθάζδ ή έκα δίαοθμ ζυκηςκ). Καηά ηδ ζφκδεζδ, αοηή αολάκεηαζ δ δναζηζηυηδηα ηδξ GTP-άζδξ πμο ειθακίγεζ δ α-οπμιμκάδα ιε ζοκέπεζα ηδκ οδνυθοζδ ημο ζοκδεδειέκμο GTP πνμξ GDP πμο επζηνέπεζ ηεθζηά ηδκ επακαζφκδεζή ηδξ α-οπμιμκάδαξ ιε ημ ζφιπθεβια α- β ημο οπμδμπέα. Χξ ζοκέπεζα δζαιμνθχκεηαζ δ δναζηδνζυηδηα δζαθυνςκ εκγφιςκ ηθεζδζχκ, υπςξ είκαζ δ αδεκοθζηή ηοηθάζδ, μζ θςζθμηονμζζκμθςζθαηάζεξ (PTPαζεξ) ηαζ μζ MAP ηζκάζεξ εκχ πανάθθδθα παναηδνμφκηαζ αθθαβέξ ζηα εκδμηοηηάνζα επίπεδα αζαεζηίμο ηαζ ηαθίμο αθμφ ακαθυβςξ νοειίγεηαζ δ θεζημονβία ηςκ ηακαθζχκ αοηχκ ηςκ ζυκηςκ (Patel 1999, Hannon et al 2002). Σμ είδμξ ζδιαημδυηδζδξ πμο επζηναηεί είκαζ έκα εέια πμο ελανηάηαζ απυ ηδκ ζζημεζδζηή ηαηακμιή ηςκ οπμδμπέςκ, ημκ πνμζδέηδ, ημκ οπυηοπμ ημο οπμδμπέα ή ηδκ εζςηενίηεοζή ημο (Hannon et al 2002). Γζέβενζδ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ SRIF ζοκδέηαζ ιε ημ ακηίζημζπμ εκδμηοηηάνζμ ιμκμπάηζ ιεηάδμζδξ ζήιαημξ ιέζς εκενβμπμίδζδξ G πνςηεΐκχκ ζοιπενζθαιαακμιέκςκηςκ Gai, Gao, Gaq, Ga14, Ga16 ( Patel 1999, Hanon et al 2002, Rosskopf 2003). Η αθθδθεπίδναζδ ηςκ G πνςηεΐκχκ ιε ημοξ sstr s ελανηάηαζ απυ πανάβμκηεξ υπςξ

22 είκαζ δ ζζημεζδζηή έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ. Γζα πανάδεζβια δ Gao ανίζηεηαζ ζε κεονζηά ηφηηανα, αθθά απμοζζάγεζ απυ Β θειθμηφηηανα ηδ ζηζβιή πμο ηαζ ηα δφμ είδδ ηοηηάνςκ εηθνάγμοκ ημκ sstr2. Όθμζ μζ βκςζημί ακενχπζκμζ οπμδμπείξ ηδξ SRIF ιπμνμφκ κα ακαζηείθμοκ ηδκ αδεκοθζηή ηοηθάζδ ηαζ ζοκεπχξ κα παναηδνδεεί ιείςζδ ηςκ επζπέδςκ camp. Αοηυ ημ βεβμκυξ εκενβμπμζεί ιία ζεζνά απυ ζημζπεία ζημκ ηαηαννάηηδ ηδξ ιεηαβςβήξ ζήιαημξ ιε πνχηδ ηδκ πνςηεΐκζηή ηζκάζδ Α ( Hoyer 2000, Florio et al 1996). ηα πενζζζυηενα ηφηηανα δ ιεηαβςβή ζήιαημξ πμο νοειίγεηαζ απυ ημ αζαέζηζμ αημθμοεεί ηαεμδζηή νφειζζδ θυβς εκενβμπμίδζδξ ημο οπμδμπέα ελαζηίαξ απμηθεζζιμφ θεζημονβίαξ ηακακαθίςκ Ca++. Χξ απμηέθεζια ιείςζδξ ηδξ εκδμηοηηάνζαξ ζοβηέκηνςζδξ [Ca++] παναηδνείηαζ ιειανακζηή οπενπυθςζδ (Florio et al 1996). πήια 1. Η δμιή ηδξ G πνςηεΐκδξ, πμο απμηεθείηαζ απυ ηζξ ηνείξ οπμιμκάδεξ α, α ηαζ β NH + 4 COO H - χιμα 2. χθματικι αναπαράςταςθ τθσ G πρωτεΐνθσ. Διακρίνονται οι χαρακτθριςτικζσ 7 διαμεμβρανικζσ ζλικεσ

23 1.10 ANATOMIKH KATAΝΟΜΗ ΤΠΟΔΟΧΕΩΝ Η έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ SRIF ζε επίπεδμ mrna ηυζμ ζε ηνςηηζηά υζμ ηαζ ζημκ ακενχπζκμ μνβακζζιυ, ελεηάζηδηε ιε RT-PCR ηαζ in situ οανζδμπμίδζδ, εκχ δ φπανλδ οπμδμπέςκ ζε επίπεδμ πνςηεΐκδξ ακζπκεφηδηε ιε ακμζμΐζημπδιζηέξ ιεευδμοξ, αθθά ηαζ ιε πεζνάιαηα ακηαβςκζζηζηήξ δέζιεοζδξ ακαθυβςκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ζημοξ δζάθμνμοξ οπυηοπμοξ ημο οπμδμπέα. Όθμζ μζ οπμδμπείξ ακζπκεφηδηακ ζημ ΚΝ ηαζ ζηδκ πενζθένεζα: ηυζμ ζημ βαζηνεκηενζηυ ζφζηδια, υζμ ηαζ ζημ βεκκδηζηυ ζφζηδια, αθθά ηαζ ζημ εκδμηνζκζηυ. Βνέεδηε κα πανμοζζάγμοκ ζζημεηθεηηζηυηδηα ηαζ ηοηηανζηή ελεζδίηεοζδ. Ακαθοηζηά, ζημ ηεκηνζηυ κεονζηυ ζφζηδια ηνςηηζηχκ ακζπκεφηδηε ημ mrna ηαζ ηςκ πέκηε οπυηοπςκ ημο οπμδμπέα ζημ νααδςηυ ζχια, ζημκ ζππυηαιπμ, ζηδκ αιοβδαθή, ζημκ μζθνδηζηυ αμθαυ ηαζ ζηδκ πνμμπηζηή πενζμπή (Breder et al 1992, Bruno et al 1993, Schindler et al 1996). Ακάιεζα ζημοξ πέκηε οπυηοπμοξ μ sstr1 ηαζ μ sstr2 είκαζ μζ πζμ ζοπκά απακηχιεκμζ. Μεηάβναθα υθςκ ηςκ οπμδμπέςκ ακζπκεφηδηακ ζηδκ οπυθοζδ επίιο αθθά υπζ ζηδκ ακενχπζκδ οπυθοζδ απυ ηδκ μπμία απμοζζάγεζ ημ mrna ημο sstr4. mrna ηαζ ηςκ πέκηε οπμδμπέςκ ακζπκεφηδηε ηυζμ ζημ ακενχπζκμ πάβηνεαξ, ζημιάπζ, δςδεηαδάηηοθμ ηαζ εζθευ, υζμ ηαζ ζε αοηά ημο επίιο. ηδκ πθεζμρδθία ηςκ πενζπηχζεςκ υπμο ακζπκεφεηαζ ηάπμζμξ οπμδμπέαξ ζε ιεηάβναθδ ιμνθή, ακζπκεφεηαζ ηαζ δ ακηίζημζπδ πνςηεΐκδ (Selmer et all 2000). Άθθεξ πενζμπέξ ή ζζημί ζηδκ πενζθένζα ζηζξ μπμίεξ ανέεδηε κα εηθνάγεηαζ ημ mrna ηςκ οπμδμπέςκ είκαζ ηα επζκεθνίδζα, μ εφιμξ αδέκαξ ηαζ ηα ηφηηανα ημο Sertolli ηςκ υνπεςκ, υπμο ακζπκεφηδηακ ηονίςξ ιεηάβναθα ηςκ sstr1-3. ημ ζημιάπζ ανέεδηακ ηαζ μζ πέκηε οπυηοπμζ εκχ ζημ ακενχπζκμ πάβηνεαξ ηονζανπεί μ sstr2 ιε ηαοηυπνμκδ φπανλδ ηαζ ηςκ sstr1, sstr3, sstr5 ζε δζαθμνεηζηέξ ποηκυηδηεξ ζηα δάθμνα είδδ ηοηηάνςκ ημο (Patel 1999, Selmer et al 2000). Ο sstr2 ακαθένεηαζ επζπνυζεεηα ζε ορδθή ποηκυηδηα ζε εκενβμπμζδιέκα ιαηνμθάβα, Σ ηαζ Β θειθμηφηηανα (Krantic 2000, Dalm et al 2003) ΕΚΦΡΑΗ ΣΩΝ SSTR Ε ΑΝΘΡΩΠΙΝΟΤ ΟΓΚΟΤ Η έηθναζδ οπμδμπέςκ ζε παεμθμβζηέξ ηαηαζηάζεζξ έπεζ ιεθεηδεεί εηηεηαιέκα ζε ηανηζκζηά ηφηηανα αθθά ηαζ ζε παναζηεοάζιαηα απυ υβημοξ ηυζμ ζε επίπεδμ mrna, υζμ ηαζ ζε πνςηεΐκδξ. Οζ ιεθέηεξ έβζκακ ιε ηεπκζηέξ αοημναδζμβναθίαξ, ακηαβςκζζηζηήξ δέζιεοζδξ, ακμζμΐζημπδιείαξ, Northern Blotting RPA ηαζ RT-PCR. Τπενέηθναζδ ηςκ ζπεηζηχκ οπμδμπέςκ παναηδνείηαζ ζε ηφηηανα ηονίςξ

24 βαζηνεκηενμπαβηνεαηζηήξ πνμέθεοζδξ, υβημοξ οπυθοζδξ, ηανηζκμεζδείξ υβημοξ, ιζηνμηοηηανζηυ ηανηίκμ ημο πκεφιμκα, ηανηίκμ ημο πνμζηάηδ, ηανηίκμ ημο ιαζημφ ηαζ ημο εονεμεζδμφξ. Η πθεζμκυηδηα αοηχκ ηςκ υβηςκ οπενεηθνάγεζ ζε ιεβάθμ πμζμζηυ ημκ sstr2 ηαζ αημθμοεμφκ ζε ιζηνυηενα πμζμζηά ηαηά ζεζνά sstr1>sstr3>sstr4>sstr5. O Kulaksiz ηαζ ζοκενβάηεξ (Kulaksiz et al 2002) ιεθέηδζακ ιε ακμζμΐζημπδιζηέξ ιεευδμοξ ηαζ ιε ακηζζχιαηα, εζδζηά έκακηζ ημο ηάεε οπυηοπμο, 100 ακενχπζκμοξ GEP/ηανηζκμεζδείξ υβημοξ. Δπζαεααίςζακ ημ ορδθυ πμζμζηυ ειθάκζζδξ οπμδμπέςκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ιε δζαθμνμπμίδζδ ζηδκ έηθναζδ ημο ηάεε οπυηοπμο ηυζμ ζημκ ηφπμ ηάεε υβημο, υζμ ηαζ ζοπκά απυ αζεεκή ζε αζεεκή απυ ημκ μπμίμ πνμένπμκηακ ημ δείβια. Δπζπνυζεεηα, ζοκέηθναζδ πμθθαπθχκ ηφπςκ sstr παναηδνείηαζ ηυζμ ζε θοζζμθμβζηά υζμ ηαζ ζε ηανηζκζηά ηφηηανα, υπςξ ακαθένμοκ μζ Reubi ηαζ ζοκενβάηεξ (Reubi et al 2001). Σα εονφιαηά ημοξ πνμένπμκηαζ απυ ηδ ιεθέηδ πενζζζυηενςκ ηςκ 200 υβηςκ βζα ηδκ έηθναζδ sstr οπμδμπέςκ ζε επίπεδμ πνςηεΐκδξ ιε ηδ πνήζδ εηθεηηζηχκ βζα ηάεε οπυηοπμ αβςκζζηχκ, υπμο ιε πεζνάιαηα ακηαβςκζζηζηήξ δέζιεοζδξ εηημπζγυηακ μ ναδζμπνμζδέηδξ. Η πθεζμρδθία ηςκ ελαηαζεέκηςκ κεονμαθαζηςιάηςκ, ηανηζκςιάηςκ ημο ιαζημφ, θειθςιάηςκ παναβαββθζςιάηςκ ηαζ αδεκςιάηςκ ηδξ οπυθοζδξ ελέθναγακ ζε ζδζαίηενα ορδθυ πμζμζηυ ημκ sstr2, εκχ ζε πμζμζηυ θζβυηενμ ημο 15% μζ υβημζ ελέθναγακ πενζζζυηενμοξ ημο εκυξ οπυηοπμοξ. ε ιζα άθθδ ιεθέηδ μ Reubi ηαζ μζ ζοκενβάηεξ ημο ελεηάγμκηαξ ηδκ ζοκέηθναζδ οπμδμπέςκ ηυζμ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ υζμ ηαζ άθθςκ πεπηζδίςκ ζε υβημοξ κεονμεκδμηνζκζηήξ πνμέθεοζδξ, ανήηακ υηζ μ οπυηοπμξ 2 είκαζ αοηυξ πμο δεζπυγεζ αθμφ πανμοζζάγεζ πμθφ ορδθή ποηκυηδηα ζε ζπέζδ ιε ημοξ άθθμοξ οπυηοπμοξ (Reubi 2003). Δπμιέκςξ μ sstr2 οπενέπεζ ζοκηνζπηζηά ηυζμ ζε ειθάκζζδ, υζμ ηαζ ζε ποηκυηδηα, είηε είκαζ ζε ιεηάβναθδ ιμνθή (mrna), είηε είκαζ πνςηεΐκδ. Σμ βεβμκυξ αοηυ δζηαζμθμβεί ηδκ εηηεηαιέκδ ένεοκα βζα ηδκ ακάπηολδ ακαθυβςκ εηθεηηζηχκ ςξ πνμξ ημκ sstr ΕΩΣΕΡΙΚΕΤΗ, ΑΠΕΤΑΙΘΗΣΟΠΟΙΗΗ ΚΑΙ ΟΛΙΓΟΜΕΡΙΜΟ ΣΩΝ SSTR H εζςηενίηεοζδ είκαζ έκα θαζκυιεκμ ημ μπμίμ παναηηδνίγεζ ημοξ GPCR ηαζ επάβεηαζ απυ ηα ιυνζα πμο δεζιεφμκηαζ ζε αοημφξ (πνμζδέηεξ-ligands). Δλανηάηαζ απυ ημ πνυκμ έηεεζδξ ημο οπμδμπέα ζημκ πνμζδέηδ, ηδ ζοβηέκηνςζδ ημο πνμζδέηδ ηαεχξ

25 ηαζ ζε εηενυθμβδ νφειζζδ ιέζς άθθςκ ζοζηδιάηςκ ζδιαημδυηδζδξ (Froidevaux et al 2002, Hofland et al 2003). ηδκ πενίπηςζδ ηςκ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηίκδξ μζ οπυηοπμζ sstr2 ηαζ sstr5 θαίκεηαζ κα εζςηενζηεφμκηαζ πμθφ πζμ απμηεθεζιαηζηά ζε ζπέζδ ιε ημοξ οπυθμζπμοξ (Hofland et al 2003, Csaba et al 2001). Η εζςηενίηεοζδ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ SRIF ηαζ εζδζηά ημο sstr2 είκαζ έκα βεβμκυξ ημ μπμίμ ανίζηεζ εθανιμβή ζηδκ θανιαημθμβία ηαζ ηδ εεναπεοηζηή, έηζζ υπςξ πνδζζιμπμζείηαζ ζηδ ζημπεοιέκδ δζάβκςζδ, εεναπεία ή ναδζμεκδμεεναπεία βζα κα ιεηαθένεζ εκδμηοηηάνζα ηάπμζμ δζαβκςζηζηυ ή εεναπεοηζηυ πανάβμκηα πμο είκαζ ζογεοβιέκμξ ζημκ πνμζδέηδ. Υνδζζιμπμζμφκηαζ δδθαδή ηα ζοζηήιαηα ηςκ οπμδμπέςκ ςξ αζμθμβζημί <<δμφνεζμζ ίππμζ>>. ε ηαιία υιςξ πενίπηςζδ δ εζςηενίηεοζδ δεκ ιπμνεί κα ζοζπεηζζεεί ιε ηδκ απεοαζζεδημπμίδζδ πμο παναηδνείηαζ ζε πενζπηχζεζξ sstr2 εεηζηχκ υβηςκ, πμο πνςηφηενα ακηαπμηνίκμκηακ ζε εεναπεία ιε ακάθμβα ηδξ SRIF (Arnold et al 2000). Δίκαζ υιςξ ζαθέξ υηζ δ πνυκζα πμνήβδζδ ηάπμζμο ακαθυβμο μδδβεί ζε απεοαζζεδημπμίδζδ ηςκ οπμδμπέςκ (Lambert et al 1996). Η ηαοηυπνμκδ ζοκφπανλδ sstr οπμδμπέςκ, δ μπμία είκαζ απμηέθεζια πμθθαπθήξ έηθναζδξ απυ έκα ηφηηανμ, έπεζ απμδεζπεεί ζε ανηεηά είδδ ηοηηάνςκ υπςξ ζηδκ οπυθοζδ (Kumar et al 1997) ηαζ ζημ πάβηνεαξ (Kumar et al 1999). Ακαθμβζηά ιε άθθμοξ ηφπμοξ GPCR μ ζδιακηζηυξ ααειυξ ζοκέηθναζδξ δζαθμνεηζηχκ οπμηφπςκ sstr s αολάκεζ ηαηαηυνοθα ηδκ πζεακυηδηα μθζβμιενζζιμφ, δδθαδή υιμ ή εηενμδζιενζζιμφ ημοξ. Ο μθζβμιενζζιυξ είκαζ έκα θαζκυιεκμ πμο μδδβεί ζε ζπδιαηζζιυ πμθφ-οπμδμπέςκ ιε κέα πμζμηζηά παναηηδνζζηζηά πμο αθμνμφκ ηυζμ ζηδ ιεηααμθή ηδξ ζηακυηδηαξ δέζιεοζδξ ιμνίςκ ζε αοημφξ, υζμ ηαζ ζηδ ιεηαβςβή ζήιαημξ. Οιμδζιενζζιυξ οπμηφπςκ ημο οπμδμπέα ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ακαθένεηαζ βζα ημοξ sstr2, sstr3 ηαζ sstr5 (Rocheville et al 2000, Pfeiffer et al 2001) ζε ακηίεεζδ ιε ημκ sstr1 μ μπμίμξ δε ζπδιαηίγεζ μιμδζιενή. Οζ sstr s ζπδιαηίγμοκ επίζδξ εηενμδζιενή ιεηαλφ ημοξ ή αημια ηαζ ιε άθθμοξ GPCR. O sstr2 εηενμδζιενίγεηαζ ιε ημκ sstr3 ηαζ αοηυ μδδβεί ζε απεκενβμπμίδζδ θεζημονβίαξ ημο ηεθεοηαίμο ιε πανάθθδθδ αφλδζδ ηδξ ακηίζηαζδξ ζηδκ πνμηαθμφιεκδ απυ ηδκ SRIF εζςηενίηεοζδ. Μζα ηέημζα θεζημονβζηή απεκενβμπμίδζδ ημο sstr3 ίζςξ είκαζ δ ελήβδζδ βζα ηδκ απμοζία ημο sstr3 απυ ημοξ ζζημφξ πμο θοζζμθμβζηά παναηδνείηαζ έηθναζή ημο. Ο sstr2 ζπδιαηίγεζ εηενμθζβμιενή ιε ημ μ μπζμεζδή οπμδμπέα (MOR1) υηακ ζοκεηθνάγμκηαζ. Αοηυξ μ δζιενζζιυξ δεκ επδνεάγεζ ηδ δέζιεοζδ ηςκ πνμζδεηχκ ή ηζξ ζδζυηδηεξ δέζιεοζήξ ημοξ, αθθά δδιζμονβεί δζαζηαονμφιεκδ νφειζζδ ηδξ θςζθμνοθίςζδξ, ηδξ εζςηενίηεοζδξ ηαζ απεοαζζεδημπμίδζδξ ή επακεοαζζεδημπμίδζδξ ηαζ ηςκ δφμ οπμδμπέςκ (Pfeiffer et al 2002).

26 Ο νυθμξ ημο μιμ ή εηενμδζιενζζιμφ είκαζ έκα βεβμκυξ πμο ιπμνεί κα έπεζ αανφκμοζα ζδιαζία βζα ημ ιεθθμκηζηυ ζπεδζαζιυ θανιάηςκ ηαζ αλίγεζ ζδζαίηενδξ πνμζμπήξ (George et al 2002). Πνέπεζ υιςξ κα ζδιεζςεεί υηζ δζιενζζιμί παναηδνήεδηακ ιυκμ ζε επζιμθοζιέκεξ ηοηηανζηέξ ζεζνέξ εκχ δεκ ηαηάθενακ αηυια κα ηαοημπμζδεμφκ ζε θοζζμθμβζηά ιδ επζιμθοζιέκα ηφηηανα. Η ιυκδ παναηήνδζδ ζε θοζζμθμβζηά ηφηηανα έβζκε απυ ημκ Baragli ηαζ ημοξ ζοκενβάηεξ ημο, μζ μπμίμζ εκηυπζζακ εηενμδζιενή ηςκ sstr2 ηαζ D2 οπμδμπέςκ ηδξ κημπαιίκδξ (Baragli et al 2003) ΑΛΛΗΛΕΠΙΔΡΑΕΙ ΣΟΤ ΠΡΟΔΕΣΗ ΜΕ ΣΟΝ ΤΠΟΔΟΧΕΑ. ΚΡΙΙΜΕ ΘΕΕΙ ΠΕΡΙΟΧΗ ΔΕΜΕΤΗ. Λυβς ηδξ αδφκαηδξ ιέπνζ ζήιενα ηνοζηάθθςζδξ μπμζμοδήπμηε GPCR, πένακ αοημφ ηδξ νμδμρίκδξ, δ πνμζπάεεζα βζα ηδκ απμζαθήκζζδ ηδξ ηνίζζιδξ πενζμπήξ δέζιεοζδξ ηςκ πνμζδεηχκ ζε αοημφξ πενζμνίγεηαζ ιυκμ ζε ιδ εοεείεξ ή έιιεζεξ ιεευδμοξ, υπςξ είκαζ μζ ηαηεοεοκυιεκεξ ιεηαθθάλεζξ ζηδκ έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ ή μζ πζιαζνζημί οπμδμπείξ. Οζ οπυηοπμζ ημο οπμδμπέα ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ δεκ λέθοβακ αεααίςξ απυ αοηά ηα ζηεκά πθαίζζα ηδξ ένεοκαξ. Οζ ιεθέηεξ βζα ημοξ ζοβηεηνζιέκμοξ οπυηοπμοξ έδεζλακ υηζ δ πενζμπή δέζιεοζδξ ζοβηνμηείηαζ απυ ιδ ζοκεπυιεκα αιζκμλέα ζηδκ αθθδθμοπία ηαζ αοηά ηα αιζκμλέα ζοβηνμημφκ ιία ημζθυηδηα δέζιεοζδξ (Baldwin 1994, Strader et al 1995). Μζα εκαθθαηηζηή άπμρδ εζζδβείηαζ υηζ καζ ιεκ οπάνπεζ ημζθυηδηα δέζιεοζδξ, αθθά μζ πνμζδέηεξ επζπνυζεεηα αθθδθεπζδνμφκ ιε άθθα ηνίζζια αιζκμλέα ζηδκ ελςηοηηάνζα (ECL) ή ζηδ δζαιειανακζηή (TM) πενζμπή βζα κα ζηαεενμπμζήζμοκ αοεμνιήηςξ ηδ δζαιυνθςζδ ημο οπμδμπέα (Schwartz et al 1996). Η πενζμπή δέζιεοζδξ βζα ημοξ πνμζδέηεξ πμο θένμοκ ηδ θανιαημθυνμ δμιή ημο Ocreotide (ακάθμβμ ζςιαημζηαηίκδξ) ειπθέηεζ αιζκμλέα ηυζμ ζηζξ ECL S υζμ ζηζξ ECL S ηαζ TM S (Schwartz et al 1996, Gether et 1993). Με ζηναηδβζηυ πθεμκέηηδια ηδκ εηθεηηζηή ζοββέκεζα ημο Ocreotide ιε ημκ hsstr2 ηαζ υπζ ιε ημκ hsstr1, μ Kaupman ηαζ μζ ζοκενβάηεξ ημο επζπείνδζακ ζοζηδιαηζηέξ ιεηαθθάλεζξ επί ημο hsstr1 ιε ζημπυ κα μιμζάζεζ δμιζηά ιε ημκ hsstr2 (Kaupmann et al 1995). Καηάθενακ κα ηαοημπμζήζμοκ δφμ ηνίζζια αιζκμλέα ηα Gln291 ηαζ Ser305 ζηδκ αθθδθμοπία ημο hsstr1 ηαζ ηα μπμία ανίζημκηαζ ζηζξ ΣΜ-VI ηαζ ΣΜ-VII ακηίζημζπα. Σα αιζκμλέα αοηά ακηζζημζπμφκ ζηα Asn276 ηαζ Phe294 ζηδκ αθθδθμοπία ημο hsstr2. Όηακ θμζπυκ ακηζηαηέζηδζακ ηα Gln291 ηαζ Ser305 ζημκ hsstr1 ιε Asn ηαζ Phe ακηίζημζπα παναηήνδζακ αφλδζδ ηδξ ζηακυηδηαξ δέζιεοζδξ ημο Ocreotide

27 πνμξ ημκ hsstr1 ηαηά 1000 θμνέξ. Αημθμοεχκηαξ ηεπκζηέξ ιμνζαηήξ πνμζμιμίςζδξ ηαζ πνδζζιμπμζχκηαξ ηα ηνίζζια αιζκμλέα ημο οπμδμπέα αθθά ηαζ ηδ βκςζηή δμιή ημο Οcreotide, πνυηεζκακ υηζ οπάνπεζ ιία πενζμπή δέζιεοζδξ δ μπμία ειπθέηεζ οδνυθμαα αθθά ηαζ θμνηζζιέκα αιζκμλέα ημπμεεηδιέκα ζηζξ ΣΜ-ΙΙΙ ηαζ ΣΜ-VII. Tμ ιμκηέθμ πμο πνυηεζκακ πνμαθέπεζ υηζ ηα ηέζζενα αιζκμλέα Phe7, Trp8, Lys9 ηαζ Thr10 πμο πνμένπμκηαζ απυ ηδ β-ζηνμθή ημο Ocreotide ηαζ απμηεθμφκ ηδ θανιαημθυνμ δμιή ημο, πνμζακαημθίγμκηαζ βζα κα αθθδθεπζδνάζμοκ ιε ηα Asn276 ηαζ Phe294 ηςκ ΣΜ-VI ηαζ TM-VII ακηίζημζπα (Kaupmann et al 1995). Η πενζμπή Asn276 ηαζ Phe294 δδιζμονβεί έκα οδνυθμαμ πενζαάθθμκ ζδακζηυ βζα αθθδθεπίδναζδ ηςκ Phe7, Trp8 ηαζ Thr10, εκχ υπςξ απμδείπεδηε ηαζ απυ ηδκ ενβαζία ηςκ Strnad ηαζ Hadcock (1995), ζηδκ μπμία ιεθέηδζακ ηδκ αθθδθεπίδναζδ ηδξ θοζζηήξ μνιυκδξ ιε ημκ sstr2, ημ Asp122 ζηδκ ΣΜ-ΙΙΙ αθθδθεπζδνά ιε ηδκ Lys9 ηδξ SRIF. ημκ sstr1 ημ Ocreotide δεζιεφεηαζ αζεεκχξ, αθμφ ημ πμθζηυ πενζαάθθμκ πμο ζπδιαηίγμοκ ηα Gln291 ηαζ Ser305 δεκ ημ αθήκεζ κα θηάζεζ ααεζά ζηδκ πηοπή πμο ζπδιαηίγμοκ, πνάβια ημ μπμίμ ελαζθαθίγμοκ ηα Asn276 ηαζ Phe294. Σα ηεθεοηαία ελαζθαθίγμοκ επζπνυζεεηα ηαζ ηδ ζηαεενή αθθδθεπίδναζδ ιε ηδ δζζμοθθζδζηή βέθονα. Λυβς ημο ιεβάθμο ιεβέεμοξ ηαζ ηδξ εηηαηαιέκδξ δζαιμνθςηζηήξ ημοξ εοεθζλίαξ μζ δομ ζζμιμνθέξ ηςκ θοζζηχκ πνμζδεηχκ (SRIF14 ηαζ SRIF28) οζμεεημφκ δζαιμνθχζεζξ πμο ημοξ επζηνέπμοκ κα δεζιεφμκηαζ ηαζ ιε ημοξ πέκηε οπυηοπμοξ ημο οπμδμπέα, πνάβια ημ μπμίμ είκαζ αδφκαημ βζα ακάθμβα ιζηνυηενμο ιεβέεμοξ (ελαπεπηίδζα ή μηηαπεπηίδζα). Δλαίνεζδ απμηεθμφκ ηα ιυνζα ΚΔ108 ηαζ SOM230 ηα μπμία δεζιεφμκηαζ ιε ιεβάθδ ζοββέκεζα ηαζ ιε ημοξ πέκηε οπυηοπμοξ ημο οπμδμπέα. Δπζπνυζεεηα, μζ Greenwood ηαζ ζοκενβάηεξ (Greenwood et al 1997) ελέηαζακ ηδκ πζεακή ακάιεζλδ ηςκ ECL s ηαζ ανήηακ υηζ οπάνπεζ ιία δοκαιζηή ζοκεζζθμνά ηςκ ECL2, αθθά υπζ ηςκ ECL1 ηαζ ECL3 ζηδκ αθθδθεπίδναζδ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ηαζ ηςκ ακαθυβςκ ηδξ ιε ημκ οπμδμπέα. Σμ ιμκηέθμ πμο πνμηείκεηαζ, ηαζ είκαζ ζε απυθοηδ ζοιπθδνςιαηζηυηδηα ιε ηα πνμδβμφιεκα, οζμεεηεί ηδκ άπμρδ υηζ δ πενζμπή δέζιεοζδξ απμηεθείηαζ απυ αιζκμλέα ηα μπμία οπάνπμοκ ζε έηηαζδ απυ ηδκ ΣΜ-ΙΙΙ έςξ ηδκ ΣΜ-VI ιε δοκαιζηή ζοκεζζθμνά ηςκ ECL2. πδιαηίγεηαζ δδθαδή ιία πενζμπδ απμηεθμφιεκδ απυ ηνίζζια αιζκμλέα ζηζξ ΣΜ-ΙΙ ηαζ ECL2, δ μπμία ηαηαθήβεζ ζε ιία ημζθυηδηα ζπδιαηζγυιεκδ ζηδκ πενζμπή ηςκ ΣΜ-VI ηαζ ΣΜ-VII. Ο Tran ηαζ ζοκενβάηεξ (1985) ακαθένμοκ επίζδξ ηδκ φπανλδ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηίκδξ ιε δζαθμνεηζηή ζοββέκεζα ζφκδεζδξ πνμξ δζάθμνα πνμζδέιαηα. φιθςκα ιε ηζξ ένεοκεξ ηςκ Baldwin (1994) ηαζ Strader (1995) δ ηνίζζιδ εέζδ ακαβκχνζζδξ πνμζδέιαημξ (ligand binding domain) εκημπίγεηαζ ιέζα ζηζξ α-έθζηεξ

28 ηςκ οπμδμπέςκ ηαζ πζεακμθμβείηαζ επίζδξ υηζ πνυηεζηαζ βζα ιδ βεζημκζηά αιζκμλέα πμο ζπδιαηίγμοκ ιία εζμπή ζακ ηθεζδανζά ιέζα ζηδκ ακαδζπθςιέκδ ηνζζδζάζηαηδ δμιή ημο οπμδμπέα. Πανά ηζξ πνμζπάεεζεξ πμο έπμοκ βίκεζ ιέπνζ ζήιενα μζ επζζηήιμκεξ δεκ ηαηάθενακ κα εκημπίζμοκ αηνζαχξ ηδκ δζαιειανακζηή πενζμπή ζφκδεζδξ ημο οπμδμπέα ιε ημ πνυζδεια. Απυ ηζξ ενβαζίεξ ηςκ Greenwood (1997) ηαζ Schwartz (1996) πνμηφπηεζ υηζ δ παναπάκς πενζμπή πζεακυκ κα ανίζηεηαζ ιεηαλφ ηνίηδξ ηαζ έαδμιδξ δζαιειανακζηήξ έθζηαξ (ΣΜ). ε ηάεε πενίπηςζδ πάκηςξ ημ ιμκηέθμ πμο πνμηείκεηαζ βζα ημκ sstr2 δεκ εθανιυγεηαζ βζα ημοξ οπυθμζπμοξ ηέζζενζξ οπυηοπμοξ ημο οπμδμπέα. Σα απμηεθέζιαηα ηςκ ιεθεηχκ βζα ηζξ αθθδθεπζδνάζεζξ ηςκ πνμζδεηχκ ιε ημκ οπμδμπέα ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ ηαζ ημκ ηαεμνζζιυ ηςκ ηνίζζιςκ εέζεςκ δέζιεοζδξ ειπθέημοκ ηυζμ ECL s υζμ ηαζ ΣΜ s ηαζ είκαζ ζε απυθοηδ ζοιθςκία ιε ιεθέηεξ αθθδθεπίδναζδξ άθθςκ GPCR (αββεζμηεκζίκδξ κεονμηζκίκδξ η.α) ιε ημοξ πνμζδέηεξ ημοξ (Olias et al 2004). Πίνακασ 1 Τποδοχείσ ςωματοςτατίνησ ςτον άνθρωπο SSTR1 SSTR2A SSTR2B SSTR3 SSTR4 SSTR5 Χρωμοςωμική Θζςη 14q13 17q24-22q p p13.3 Μοριακό Μζγεθοσ (kda) Αμινοξζα φνδεςη με G πρωτεΐνεσ

29 2. ΕΙΔΙΚΟ ΜΕΡΟ 2.1 ΚΟΠΟ ημπυξ ηδξ ζοβηεηνζιέκδξ ενεοκδηζηήξ ενβαζίαξ ήηακ δ ακμζμΐζημπδιζηή ιεθέηδ ηδξ έηθναζδξ ηςκ οπμδμπέςκ ηδξ ζςιαημζηαηίκδξ 1 (SSTR1) ηαζ 2Α (SSTR2Α) ζε πθήνςξ δζαπθαζιέκμ ακενχπζκμ μδμκηζηυ πμθθυ, θοζζμθμβζηυ ηαζ θθεβιμκχδδ. Γζα ημ θυβμ αοηυ πνδζζιμπμζήεδηακ ακηζζχιαηα έκακηζ ζοβηεηνζιέκςκ πνςηεΐκχκ (ακηζβυκςκ) ιε ζηυπμ: ηδκ ηαηαβναθή ηδξ πανμοζίαξ εεηζηυηδηαξ (πνςζηζηή ακηίδναζδ) ηυζμ ζε θοζζμθμβζηυ υζμ ηαζ ζε θθεβιμκχδδ μδμκηζηυ πμθθυ ηδκ αλζμθυβδζδ ημο ααειμφ πνςζηζηήξ έκηαζδξ (ααειμφ ακμζμεοαζζεδζίαξ) ημο μδμκηζημφ πμθθμφ ζηζξ ζοβηεηνζιέκεξ πνςηεΐκεξ 2.2 ΤΛΙΚΟ ΚΑΙ ΜΕΘΟΔΟ Σμ πνςηυημθθμ πμο πνδζζιμπμζήεδηε ζηδκ πανμφζα ιεθέηδ εβηνίεδηε απυ ηδκ επζηνμπή Ηεζηήξ ηαζ Γεμκημθμβίαξ ημο Ανζζημηεθείμο Πακεπζζηδιίμο Θεζζαθμκίηδξ. Γζα ηδκ πναβιαημπμίδζδ ημο πεζναιαηζημφ ιένμοξ πνδζζιμπμζήεδηακ δέηα δυκηζα, ηα μπμία αθαζνέεδηακ απυ κεανμφξ αζεεκείξ (δθζηίαξ εηχκ) ζηδκ ηθζκζηή ημο Δνβαζηδνίμο ηδξ Οδμκημθαηκζαηήξ Υεζνμονβζηήξ, Διθοηεοιαημθμβίαξ ηαζ Αηηζκμθμβίαξ ηδξ Οδμκηζαηνζηήξ πμθή ημο Α.Π.Θ. Σα παναπάκς δυκηζα δζαηνίεδηακ ζε δφμ μιάδεξ : 1η ομάδα : πέκηε ελ αοηχκ είκαζ οβζή δυκηζα 2η ομάδα: πέκηε πανμοζζάγμοκ ηθζκζηά ζοιπηχιαηα μλείαξ πμθθίηζδαξ (ιδ ακηζζηνεπηήξ) ηα δυκηζα έβζκακ ελαβςβέξ είηε βζα μνεμδμκηζημφξ θυβμοξ (ζηζξ πενζπηχζεζξ θοζζμθμβζημφ μδμκηζημφ πμθθμφ) είηε βζα θυβμοξ ιδ δοκαηυηδηαξ πναβιαημπμίδζδξ ηδξ εκδμδμκηζηήξ εεναπείαξ (ζηζξ πενζπηχζεζξ παεμθμβζημφ μδμκηζημφ πμθθμφ). Κάεε μδμκηζηυξ πμθθυξ βζα κα ζοιπενζθδθεεί ηαζ κα πνδζζιμπμζδεεί ζηδκ

30 ενεοκδηζηή ενβαζία, εεςνήεδηε απαναίηδημ κα πθδνεί, έπεζηα απυ πθήνδ ηθζκζηυ ηαζ αηηζκμβναθζηυ έθεβπμ, ηζξ αηυθμοεεξ πνμτπμεέζεζξ: 1. Να παναηδνείηαζ πθήνδξ ακαημθή ημο δμκηζμφ ζημκ μδμκηζηυ θναβιυ ιε πθήνδ δζάπθαζδ ηδξ νίγαξ, ηαζ πανάθθδθα κα έπεζ δζαβκςζεεί απμοζία πνυκζαξ πενζαηνμννζγζηήξ πάεδζδξ, πενζμδμκηζηήξ πάεδζδξ υπςξ επίζδξ ηαζ απμοζία εκαζαεζηίςζδξ, απμννυθδζδξ ή ηαηάβιαημξ. 2. Να οπάνπεζ ηενδδμκζηή πνμζαμθή ζηα δυκηζα πμο ειθακίγμοκ θθεβιμκή πμθθμφ πςνίξ πμθθζηή απμηάθορδ. 3.Η ηαηάζηαζδ ηδξ βεκζηήξ οβείαξ ημο αζεεκμφξ ηαζ μζ ημπζηέξ ακαημιζηέξ ζοκεήηεξ κα επζηνέπμοκ ηδκ εοπενή αθαίνεζδ ηςκ δμκηζχκ. 4. Σμ ζαηνζηυ ζζημνζηυ ηςκ αζεεκχκ κα είκαζ εθεφεενμ απυ κυζμοξ ημο ακμζμθμβζημφ ζοζηήιαημξ. 5. Η δθζηία ηςκ αζεεκχκ εα πνέπεζ κα ηοιαίκεηαζ απυ 20 έςξ 35 εηχκ..αιέζςξ ιεηά ηδκ ελαβςβή, ηάεε δυκηζ απυ ηάεε μιάδα ιμκζιμπμζήεδηε ζε θμνιυθδ 10% ημοθάπζζημκ δομ εζημζζηεηνάςνα. Η δζαδζηαζία ηδξ απαζαεζηίςζδξ ηςκ δμκηζχκ, έηζζ χζηε κα είιαζηε ζε εέζδ κα ζοζπεηίζμοιε ημ αάεμξ ηδξ ηενδδυκαξ ζηδκ μδμκηίκδ ιε ηδκ ακηίδναζδ ηδξ ζηζαάδαξ ηςκ μδμκηζκμαθαζηχκ ζηδκ ακηίζημζπδ πενζμπή, δεκ αημθμοεήεδηε ελαζηίαξ ηδξ πζεακυηδηαξ κα πνμηφρεζ απεκενβμπμίδζδ ηςκ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηίκδξ ιε απμηέθεζια ηδκ έθθεζρδ ηαηαβναθχκ. Λήψη υλικοφ Σμ θφθμ ηαζ δ δθζηία ημο αζεεκμφξ ηαηαβνάθηδηακ ζημ ζζημνζηυ. Σα ηθζκζηά εονήιαηα, υπςξ δ φπανλδ ή ιδ αοηυιαημο πυκμο, παναηεηαιέκμο πυκμο, πυκμο ζηδκ ρδθάθδζδ ή ηαζ ζηδκ επίηνμοζδ, ηα παναηηδνζζηζηά ημο πυκμο ιεηά ηδκ εθανιμβή ελςηενζημφ ενεείζιαημξ, δ πανμοζία ηαζ δ έηηαζδ ηενδδυκαξ, ηαεχξ ηαζ ηα οπάνπμκηα αηηζκμβναθζηά εονήιαηα, ηαηαβνάθηδηακ επίζδξ ζημ ζζημνζηυ ημο αζεεκμφξ.

31 ε υηζ αθμνά ηδ δζαδζηαζία θήρδξ ημο οθζημφ αημθμοεήεδηε ημ παναηάης πνςηυημθθμ: επίηεολδ πθήνμοξ ακαζζεδζίαξ ηδξ πενζμπήξ. ηαηά ημ δοκαηυ αηναοιαηζηή, πςνίξ επζπθμηέξ, αθαίνεζδ ημο δμκηζμφ ηαζ δ άιεζδ ημπμεέηδζή ημο ζε δζάθοια μοδέηενδξ θμνιυθδξ 10% βζα ιμκζιμπμίδζδ. ιεηά ηδκ πάνμδμ 48 ςνχκ, ζπδιαηίζηδηε επζιήηδξ αφθαηα ζηδ ιφθδ ηαζ νίγα ημο δμκηζμφ ιε ηοθζκδνζηή εββθοθίδα ορδθχκ ηαποηήηςκ ηαζ ηαηαζμκζζιυ κενμφ. Σα δυκηζα δζαπςνίζηδηακ ζηδ ζοκέπεζα ζε δφμ ηιήιαηα ηαζ ιε ήπζεξ ηζκήζεζξ αθαζνέεδηε μ πμθθζηυξ ζζηυξ πνμζέπμκηαξ ηδ δζαηήνδζδ ηδξ ιμνθμθμβζηήξ αηεναζυηδηάξ ημο. ηα πμθθζηά δείβιαηα ημπμεεηήεδηακ εη κέμο ζε δζάθοια μοδέηενδξ θμνιυθδξ 10%. Πίκαηαξ 2. Πανμοζίαζδ ηςκ εονδιάηςκ ιεηά απυ ηθζκζηή ελέηαζδ ηςκ αζεεκχκ Α/Α Αςηόμαηο οξύ Ένηονο άλγορ μεηά Παποςζία ηεπηδόναρ άλγορ ηην εθαπμογή μεγάληρ έκηαζηρ επεθίζμαηορ 1. _ 2. _ 3. _ 4. _ 5. _

32 ηδ ζοκέπεζα πναβιαημπμζήεδηε ζηήκςζδ ημο ζζημφ ζε ηφαμοξ παναθίκδξ ηαζ αημθμφεδζε θήρδ ημιχκ ζε ιζηνμηυιμ. Απυ ημ ηάεε πμθθζηυ παναζηεφαζια πάνεδηακ δζαδμπζηέξ ημιέξ πάπμοξ 4ι ζε εζδζηυ ιζηνμηυιμ (R.Junk, Heidelberg). ε ηάεε ακηζηεζιεκμθυνμ πθάηα ημπμεεηήεδηακ απυ ιία έςξ ηαζ ηνείξ ημιέξ ακάθμβα ιε ημ ιέβεεμξ ημο πμθθζημφ ζζημφ. οκμθζηά απυ ηάεε πμθθζηυ ζζημηειάπζμ, πνδζζιμπμζήεδηακ βζα ηδκ ζζημθμβζηή ηαζ ακμζμσζημπδιζηή ιεθέηδ, ημιέξ απυ ηζξ πενζμπέξ ιοθζημφ, ιέζμο ηαζ αηνμννζγζημφ μδμκηζημφ πμθθμφ. Η ζζημθμβζηή ιεθέηδ πναβιαημπμζήεδηε ανπζηά ζε μπηζηυ ιζηνμζηυπζμ απυ εζδζηυ παεμθμβμακαηυιμ. Γζα ηδκ πνμζεηηζηή εηηίιδζδ ηςκ ακμζμσζημπδιζηχκ πνχζεςκ εθανιυζηδηε ιέεμδμξ ακάθοζδξ εζηυκαξ ιέζς δθεηηνμκζημφ οπμθμβζζηή ηαζ μζ ζζημθμβζηέξ ημιέξ ιε ζδζαίηενμ εκδζαθένμκ θςημβναθήεδηακ ηαζ ανπεζμεεηήεδηακ ζε δθεηηνμκζηή ιμνθή. 2.3 ΑΝΟΟΪΣΟΧΗΜΙΚΗ ΣΕΧΝΙΚΗ Η ακμζμσζημπδιζηή ηεπκζηή πμο πνδζζιμπμζήεδηε βζα ηδκ δζενεφκδζδ ηςκ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηζκδξ SSTR1 ηαζ SSTR2A πναβιαημπμζήεδηε ζφιθςκα ιε ημ πνςηυημθθμ ηδξ ηαηαζηεοάζηνζαξ εηαζνίαξ βζα ηάεε ηφπμ οπμδμπέα. Η εθανιμβή ακμζμσζημπδιζηήξ πνχζδξ έβζκε (ιε ηδ ιέεμδμ ζηνεπηααζδίκδξ-αζμηίκδξ) ζε δζαθμνεηζηέξ ζοβηεκηνχζεζξ ηςκ ακηζζςιάηςκ (SSTR1 ηαζ SSTR2A) βζα ημκ ηαεμνζζιυ ηδξ ηαθφηενδξ αναίςζδξ ηαζ εκ ζοκεπεία αημθμφεδζε ακμζμσζημπδιζηή πνχζδ ηςκ ημιχκ ημο πμθθζημφ ζζημφ ηςκ δεζβιάηςκ. Η ακμζμΐζημπδιζηή πνχζδ βζα ημκ οπμδμπέα SSTR1 έβζκε ιε αναίςζδ 1/30 ηαζ 1/50 ηαζ εθανιυζηδηε δ ιέεμδμξ ζηνεπηααζδίκδξ-αζμηίκδξ. Η ακμζμΐζημπδιζηή πνχζδ βζα ημκ οπμδμπέα SSTR2A έβζκε ιε αναίςζδ 1/150 ηαζ 1/250 ηαζ εθανιυζηδηε επίζδξ δ ιέεμδμξ ζηνεπηααζδίκδξαζμηίκδξ. οκμθζηά 6 πθαηίδζα απυ ηάεε πμθθζηυ δείβια (2 πθαηίδζα απυ ηάεε πενζμπή) πνςιαηίζηδηακ ιε ηζξ ακμζμΐζημπδιζηέξ ιεευδμοξ ζηνεπηααζδίκδξ-αζμηίκδξ (Dako, StreptComplex) πνμηεζιέκμο κα ακζπκεοημφκ μζ οπμδμπείξ ζςιαημζηαηίκδξ SSTR1 ηαζ SSTR2A. Οζ ζζημθμβζηέξ ημιέξ ημπμεεηήεδηακ ανπζηά ζε ηθίαακμ ζε εενιμηναζία 60 C βζα 18 χνεξ ημοθάπζζημκ. Μεηά ηδκ δζαδζηαζία ηδξ απμπαναθίκςζδξ, αημθμφεδζε δ επακοδάηςζδ ηςκ ημιχκ ιε άιεζδ ειαάπηζζή ημοξ ζε δζάθοια λοθυθδξ βζα 10 min, ηαζ δζαδμπζηά ζε δζαθφιαηα αθημυθδξ 100%, 96% ηαζ 70% βζα ημκ ίδζμ πνυκμ. ηδκ

33 ζοκέπεζα ηα πθαηίδζα ειααπηίζηδηακ ζε δζάθοια ιεεακυθδξ ηαζ οπενμλεζδίμο ημο οδνμβυκμο, βζα κα βίκεζ δ δέζιεοζδ ηδξ εκδμβεκμφξ οπενμλεζδάζδξ ιε ζημπυ κα ιδκ ηαηαζηαθμφκ μζ πνχζεζξ. Καηυπζκ, μζ ημιέξ λεπθφεδηακ ιε κενυ ανφζδξ. Αιέζςξ ιεηά έβζκε δ ημπμεέηδζδ ηςκ ακηζηεζιεκμθυνςκ πθαηχκ ζε ηζηνζηυ δζάθοια ph 6.0 βζα ακηζβμκζηή ακάνηδζδ ηαζ έβζκε λέπθοια ιε κενυ ανφζδξ. Αημθμφεδζε εένιακζή ημοξ ζημκ θμφνκμ ιζηνμηοιάηςκ βζα ημκ SSTR1 βζα 7min ηαζ φζηενα βζα 5 min ζηα 650W ηαζ βζα ημκ SSTR2A βζα 5 min ηαζ ιεηά βζα 5min ζηα 300W ακηίζημζπα. Έβζκε λέπθοια ηςκ ημιχκ ιε δζάθοια TBS, ηνείξ θμνέξ απυ 10 min, ζηέβκςια ηαζ ιανηάνζζια ιε fat pencil. Αημθμφεδζε επχαζδ ηςκ ημιχκ ιε πμθοηθςκζηυ ακηίζςια ημοκεθζμφ βζα ημκ οπμδμπέα SSTR1 (somatostatin receptor 1epitope specific polyclonal rabbit antibody, Cat#e4094) ζε αναίςζδ 1/50 ηαζ 1/30 βζα 30 min βζα ηζξ ιζζέξ ημιέξ ηαζ επχαζδ ιε πμθοηθςκζηυ ακηζμνυ ημοκεθζμφ έκακηζ ημο ακενχπζκμο οπμδμπέα ζςιαημζηαηίκδξ SSTR2 ( polyclonal rabbit antibody to somatostatin receptor, IMG-80418) ζε αναίςζδ 1/250 ηαζ 1/150 βζα 30 min βζα ηα οπυθμζπα δείβιαηα. ηδ ζοκέπεζα έβζκε έηπθοζδ ιε δζάθοια ΣBS ηαζ επχαζδ ιε Δnvision βζα 30 min [Dako REAL EnVision HRP RABBIT/MOUSE (ENV) K5007DAKO]. Αημθμφεδζε επχαζδ ηςκ ημιχκ ζε δζάθοια Γζαιζκμαεκγζδίκδξ (DAB) βζα 3-10 min ζε εενιμηναζία δςιαηίμο ηαζ ηαθυ λεπθοια ιε κενυ ανφζδξ. Η ακηίπνςζδ ηςκ ημιχκ έβζκε ιε αζιαημλοθίκδ Mayer s βζα 1 min. ηδ ζοκέπεζα μζ ημιέξ λεπθφεδηακ ηαθά ιε κενυ ανφζδξ ηαζ αοείζηδηακ δζαδμπζηά ζε δζαθφιαηα αζεακυθδξ 70%, 96% ηαζ 100% βζα 10 min ηαζ δζάθοια λοθυθδξ βζα 10 min. ημ ηεθεοηαίμ ζηάδζμ έβζκε δ επζηάθορδ ηςκ ημιχκ ιε αάθζαιμ ημο Κακαδά ηαζ ηαθοπηνίδεξ. Χξ εεηζημί ιάνηονεξ πνδζζιμπμζήεδηακ μζ ηαηάθθδθμζ ζζημί ζφιθςκα ιε ηδκ ηαηαζηεοάζηνζα εηαζνεία ηςκ εηάζημηε ακηζζςιάηςκ. Καζ βζα ηα δφμ ακηζζχιαηα ςξ εεηζημί ιάνηονεξ πνδζζιμπμζήεδηακ ημιέξ απυ ζζηυ παβηνέαημξ ακενχπμο πμο οπενεηθνάγμοκ ημκ SSTR1 ηαζ SSTR2A. ηζξ παναπάκς ημιέξ αημθμοεήεδηε δ ίδζα ακμζμΐζημπδιζηή δζαδζηαζία ιε ηα πμθθζηά ζζημηειάπζα ιεθέηδξ. Χξ ανκδηζημί ιάνηονεξ πνδζζιμπμζήεδηακ ζζημηειάπζα ηςκ πμθθζηχκ δεζβιάηςκ ημο οθζημφ ιεθέηδξ πμο ακηί βζα πνςημβεκέξ ακηίζςια πνδζζιμπμζήεδηε ΣΒS (Tris Buffer Saline).

34 Εξζταςη ςε οπτικό μικροςκόπιο Η ακμζμΐζημπδιζηή ελέηαζδ ζημ μπηζηυ ιζηνμζηυπζμ ηςκ ζζημθμβζηχκ ημιχκ πενζθάιαακε: ηδκ ακαγήηδζδζδ ηςκ οπμδμπέςκ SSTR1 ηαζ SSTR2A ζημκ πμθθζηυ ζζηυ ημκ ηαεμνζζιυ ηδξ έκηαζδξ ηδξ ακμζμΐζημπδιζηήξ πνχζδξ Η παναπάκς ιεθέηδ έβζκε ανπζηά ζε μπηζηυ ιζηνμζηυπζμ πμθθαπθήξ παναηήνδζδξ πανμοζία παεμθμβμακαηυιμο ζημ ηιήια ηδξ Παεμθμβζηήξ Ακαημιζηήξ ηδξ Ιαηνζηήξ ζπμθήξ ημο Α.Π.Θ ηαζ ζηδ ζοκέπεζα ζε μπηζηυ ιζηνμζηυπζμ ηφπμο Axiostar, Zeiss (Wetzlar, Germany) ημο ηιήιαημξ Δκδμδμκημθμβίαξ ηδξ Οδμκηζαηνζηήξ πμθήξ Α.Π.Θ. Ο πνμζδζμνζζιυξ ηδξ έηθναζδξ ηςκ παναπάκς οπμδμπέςκ (ακηζβυκςκ) έβζκε ιε αάζδ ηδκ αηυθμοεδ ηθίιαηα: απουςία χρϊςησ αντιγόνων ήπια χρϊςη-παρουςία μικροφ βαθμοφ αντιγόνων μζτρια χρϊςη-παρουςία μζτριου αριθμοφ αντιγόνων ζντονη χρϊςη -παρουςία μεγάλου αριθμοφ αντιγόνων Μεηά ηδκ ιεθέηδ ηςκ ζζημθμβζηχκ ηαζ ακμζμσζημπδιζηχκ εονδιάηςκ ηδξ ηάεε πενίπηςζδξ αημθμφεδζε δ άιεζδ ρδθζμπμίδζδ ηςκ πενζμπχκ εκδζαθένμκημξ ζε Η\Τ. Η ρδθζμπμίδζδ πναβιαημπμζήεδηε ιέζς ηάιεναξ ζοκδεδειέκδξ ζε μπηζηυ ιζηνμζηυπζμ ηφπμο Axiostar, Zeiss (Wetzlar, Germany), ημ μπμίμ ιε ηδ ζεζνά ημο είκαζ ζοκδεδειέκμ ιε Η\Τ. Η άιεζδ ρδθζμπμίδζδ πανέπεζ ημ πθεμκέηηδια ηδξ δζαηήνδζδξ-απμεήηεοζδξ ημο ααειμφ έκηαζδξ ηδξ πνχζεςξ ημο ζζημηειαπίμο επεζδή μζ ακμζμσζημπδιζηέξ πνχζεζξ παναηηδνίγμκηαζ απυ εοαζζεδζία ηαζ ζηαδζαηή ελαζεέκδζδ ηδξ έκηαζδξ ημο απμηεθέζιαημξ ιε ηδκ πάνμδμ ημο πνυκμο. ημ ηεθζηυ ζηάδζμ ηδξ ενεοκδηζηήξ ενβαζίαξ ηα εονήιαηα απυ ηάεε πενίπηςζδ αλζμθμβήεδηακ λεπςνζζηά, ζηδ ζοκέπεζα έβζκε ζοβηνζηζηή αλζμθυβδζδ ηςκ ακμζμσζημπδιζηχκ εονδιάηςκ υθςκ ηςκ πενζπηχζεςκ εκχ ζημ ηέθμξ εηηζιήεδηακ ζοκμθζηά ηα εονήιαηα ιε ζηυπμ ηδκ ελαβςβή ζοιπεναζιάηςκ ζπεηζηά ιε ηδκ έηθναζδ ηςκ οπμδμπέςκ πμο πνμακαθένεδηακ ζημκ ακενχπζκμ μδμκηζηυ πμθθυ ηαζ ηδκ ζοζπέηζζή ημοξ ιε ηδκ πμθθζηή θθεβιμκή.

35 2.4 AΠΟΣΕΛΕΜΑΣΑ ΙΣΟΛΟΓΙΚΑ ΕΤΡΤΜΑΣΑ Απυ ηδκ ζζημθμβζηή ελέηαζδ ηςκ πμθθζηχκ ζζημηειαπίςκ, 5 δείβιαηα παναηηδνίζηδηακ ςξ θοζζμθμβζημί μδμκηζημί πμθθμί, 3 δείβιαηα παναηηδνίζηδηακ ςξ θθεβιμκχδδ πμθθζημί ζζημί ιε ιζηνμφ ααειμφ θθεβιμκχδδ δζήεδζδ (θθεβιμκή ιζηνμφ ααειμφ ελέθζλδξ) ηαζ 2 δείβιαηα παναηηδνίζηδηακ ςξ θθεβιμκχδδ πμθθζημί ζζημί ιε ιεβάθμο ααειμφ θθεβιμκχδδ δζήεδζδ (θθεβιμκή ζε πθήνδ ελέθζλδ) ΘΕΣΙΚΟ ΜΑΡΣΤΡΑ Η εθανιμβή ηδξ ακμζμσζημπδιείαξ ζημκ ζζηυ παβηνέαημξ (εεηζηυξ ιάνηοναξ) έδεζλε ηδκ έκημκδ έηθναζδ (+++) ηςκ ελεηαγoιέκςκ ακηζζςιάηςκ (SSTR1 ηαζ SSTR2A) ζε υθα ηα ηφηηανα ημο (Δζη 1 ιεβέεοκζδ x10 ηαζ Δζη 2 ιεβέεοκζδ x40).). ΦΤΙΟΛΟΓΙΚΟ ΟΔΟΝΣΙΚΟ ΠΟΛΦΟ ε υθεξ ηζξ πενζπηχζεζξ θοζζμθμβζημφ πμθθζημφ ζζημφ, δ εθανιμβή ακμζμσζημπδιζηήξ πνχζδξ (ιε ηδ ιέεμδμ ζηνεπηααζδίκδξ-αζμηίκδξ) ζε δζαθμνεηζηέξ ζοβηεκηνχζεζξ ημο ακηζζχιαημξ SSTR1 ηαζ SSTR2A δεκ ειθάκζζε ηαιία έηθναζδ (-) ημο οπμδμπέα ζςιαημζηαηίκδξ 1 (SSTR1) ηαζ 2A (SSTR2A). (Δζη 3, 8, ιεβέεοκζδ x 10 ) ΦΛΕΓΜΟΝΩΔΗ ΟΔΟΝΣΙΚΟ ΠΟΛΦΟ (ήπιου βαθμοφ φλεγμονϊδησ διήθηςη) ε υθεξ ηζξ πενζπηχζεζξ θθεβιμκχδμοξ μδμκηζημφ πμθθμφ ιε ήπζμ ααειυ θθεβιμκχδμοξ δζήεδζδξ ηαηαβνάθδηε SSTR1 ήπζα εεηζηυηδηα (+) εκχ ακηίεεηα μζ ακμζμπνχζεζξ βζα ημκ SSTR2A ήηακ ανκδηζηέξ (-). οβηνζηζηά ιε ηζξ πενζπηχζεζξ ημο εεηζημφ ιάνηονα δ έκηαζδ ηδξ πνςζηζηήξ ακηίδναζδξ βζα ημκ οπμδμπέα SSTR1 ήηακ

36 παιδθμφ ααειμφ (+). Η ακμζμπνχζδ εηθνάζηδηε ιε ηδ ιμνθή πνχιαημξ ακμζπημφ ηαθέ ζημοξ μδμκηζκμαθάζηεξ ηαεχξ ηαζ ζηα έιιμνθα ζημζπεία εκηυξ ηςκ αββείςκ ημο μδμκηζημφ πμθθμφ. Δπίζδξ, ζε μνζζιέκεξ εέζεζξ εκημπίζηδηε ηαζ ζηζξ κεονζηέξ δεζιίδεξ ημο μδμκηζημφ πμθθμφ. (Δζη 4, 6 α, 6 α, 7) ΦΛΕΓΜΟΝΩΔΗ ΟΔΟΝΣΙΚΟ ΠΟΛΦΟ (μεγάλου βαθμοφ φλεγμονϊδησ διήθηςη) ε υθεξ ηζξ πενζπηχζεζξ θθεβιμκχδμοξ μδμκηζημφ πμθθμφ ιε ιεβάθμ ααειυ θθεβιμκχδμοξ δζήεδζδξ ηαηαβνάθδηε SSTR1 ήπζα εεηζηυηδηα (+) εκχ ακηίεεηα μζ ακμζμπνχζεζξ βζα ημκ SSTR2A ήηακ ανκδηζηέξ (-). οβηνζηζηά ιε ηζξ πενζπηχζεζξ ημο εεηζημφ ιάνηονα δ έκηαζδ ηδξ πνςζηζηήξ ακηίδναζδξ βζα ημκ οπμδμπέα SSTR1 ήηακ παιδθμφ ααειμφ(-). Η ακμζμπνχζδ εηθνάζηδηε ιε ηδ ιμνθή πνχιαημξ ακμζπημφ ηαθέ ζημοξ μδμκηζκμαθάζηεξ ηαεχξ ηαζ ζηα έιιμνθα ζημζπεία εκηυξ ηςκ αββείςκ ημο μδμκηζημφ πμθθμφ. (Δζη 5, 9, 10) Πίκαηαξ 3. Ακμζμζμΐζημπδιζηά εονήιαηα μδμκηζημφ πμθθμφ ΦΤΙΟΛΟΓΙΚΟ ΠΟΛΦΟ ΦΛΕΓΜΟΝΩΔΗ ΠΟΛΦΟ ΗΠΙΟΤ ΒΑΘΜΟΤ ΦΛ. ΔΙΗΘΗΗ ΦΛΕΓΜΟΝΩΔΗ ΠΟΛΦΟ ΜΕΓΑΛΟΤ ΒΑΘΜΟΤ ΦΛ. ΔΙΗΘΗΗ SSTR1 ΑΠΟΥΙΑ (-) ΠΑΡΟΥΙΑ ΗΠΙΑ(+) ΠΑΡΟΥΙΑ ΗΠΙΑ(+) SSTR2A ΑΠΟΥΙΑ (-) ΑΠΟΥΙΑ (-) ΑΠΟΥΙΑ (-)

37 Εικόνα 1. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε ιςτό παγκρζατοσ (κετικόσ μάρτυρασ). Παρατθρείται θ ζντονθ χρϊςθ (ςκουρο καφζ χρϊμα) ςτο ιςτολογικό παραςκεφαςμα από ιςτό παγκρζατοσ που υπερεκφράηει τον SSTR1. (μεγζκυνςθ x 10) Εικόνα 2. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR2A ςε ιςτό παγκρζατοσ (κετικόσ μάρτυρασ). Παρατθρείται θ ζντονθ χρϊςθ ( καφζ χρϊμα) ςτο ιςτολογικό παραςκεφαςμα από ιςτό παγκρζατοσ που υπερεκφράηει τον SSTR2A ςε όλα του τα κφτταρα. (μεγζκυνςθ x 40)

38 Εικόνα 4. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (ιπιοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται θ ιπια χρϊςθ (ανοιχτό καφζ χρϊμα) ςτα ζμμορφα ςτοιχεία των αγγείων του πολφικοφ ιςτοφ και ςτθν παρακείμενθ νευρικι δεςμίδα που εκφράηουν τον SSTR1 (μεγζκυνςθ x 20) Εικόνα 5. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (μεγάλοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται θ ιπια χρϊςθ (ανοιχτό καφζ χρϊμα) ςτα ζμμορφα ςτοιχεία των αγγείων του πολφικοφ ιςτοφ που εκφράηουν τον SSTR1 (μεγζκυνςθ x 20)

39 Εικόνα 6α. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (ιπιοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται θ ιπια χρϊςθ (ανοιχτό καφζ χρϊμα) ςτουσ οδοντινοβλάςτεσ του πολφικοφ ιςτοφ που εκφράηουν τον SSTR1 (μεγζκυνςθ x 20) Εικόνα 6β. Μεγζκυνςθ τθσ εικόνασ 6α (μεγζκυνςθ x 40)

40 Εικόνα 7. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (ιπιοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται απουςία ζκφραςθσ SSTR1 ςτθν νευρικι δεςμίδα του πολφικοφ ιςτοφ (μεγζκυνςθ x 20) Εικόνα 3. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR1 ςε φυςιολογικό πολφικό ιςτό. Παρατθρείται απουςία χρϊςθσ ςτο ιςτολογικό παραςκεφαςμα και απουςία ζκφραςθσ του παραπάνω υποδοχζα. (μεγζκυνςθ x 10)

41 Εικόνα 8. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR2Α ςε φυςιολογικό πολφικό ιςτό. Παρατθρείται απουςία χρϊςθσ ςτο ιςτολογικό παραςκεφαςμα και απουςία ζκφραςθσ του παραπάνω υποδοχζα. (μεγζκυνςθ x 10) Εικόνα 9. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR2Α ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (μεγάλοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται απουςία ζκφραςθσ SSTR2Α ςτον πολφικό ιςτό (μεγζκυνςθ x 10)

42 Εικόνα 10. Ανοςοΐςτοχθμικι χρϊςθ για SSTR2Α ςε φλεγμονϊδθ οδοντικό πολφό (μεγάλοσ βακμόσ διικθςθσ). Παρατθρείται απουςία ζκφραςθσ SSTR2Α ςτον πολφικό ιςτό (μεγζκυνςθ x 20) 2.5 ΤΖΗΣΗΗ Μέζς ηδξ οζμεέηδζδξ ηαζ εθανιμβήξ πμζηίθςκ ιέζςκ ηαζ ηεπκζηχκ επζπεζνήεδηε ηαηά ηαζνμφξ δ ιεθέηδ ηδξ έηθναζδξ, ηαηακμιήξ, ηςκ ηφπςκ, ηδξ θοζζμθμβίαξ, ηδξ ζζημθμβίαξ ηαζ ηδξ αζμπδιζηήξ ζφζηαζδξ ηςκ κεονμπεπηζδίςκ αθθά ηαζ ηςκ οπμδμπέςκ ημοξ ζημκ μδμκηζηυ πμθθυ (Casasco et al 1991, Rodd & Boissonade 2002). Οζ ιέεμδμζ πμο εθανιυζηδηακ βζα ηδ ιεθέηδ ηςκ οπμδμπέςκ ζςιαημζηαηίκδξ είηε ζε επίπεδμ mrna είηε ζε επίπεδμ πνςηεΐκδξ είκαζ δ αοημναδζμβναθία, ακμζμΐζημπδιεία, ακμζμθεμνζζιυξ, RT-PCR, Northern Blot ηαζ in situ οανζδμπμίδζδ (Schindler et al 1996, Patel 1999, Volante et al 2004, Paakkμnen et al 2009). Οζ ακμζμΐζημπδιζηέξ ηεπκζηέξ παναηηδνίγμκηαζ απυ ιεβάθμο ααειμφ αηνίαεζα ηαζ εζδζηυηδηα (specifity) ζηδκ ακίπκεοζδ δζαθυνςκ πνςηεΐκςκ (ακηζβυκςκ) ζηδκ ηοηηανζηή ή ζζηζηή ημοξ εέζδ. Πθεμκεηημφκ έκακηζ άθθςκ ηεπκζηχκ ηαζ ζδζαίηενα ημο