ZENIT RA dsdna IgG REF 41413

Transcript

1 REF ZENIT RA dsdna IgG Διανέµεται από την: ΟΔΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ 100 ΧΡΗΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΟΠΟΙΑ ΠΡΟΟΡΙΖΕΤΑΙ H δοκιµασία ZENIT RA dsdna IgG είναι µια δοκιµασία ανοσολογικής χηµειοφωταύγειας (CLIA) για τον ποσοτικό προσδιορισµό, µε τον αποκλειστικό αναλυτή ZENIT RA Analyzer, των ειδικών αντισωµάτων τάξης IgG που κατευθύνονται έναντι του αντιγόνου dsdna σε δείγµατα ορού ή ανθρώπινου πλάσµατος (EDTA). Αυτός ο προσδιορισµός χρησιµοποιείται ως διαγνωστικό βοήθηµα στην αξιολόγηση αυτοάνοσων συστηµατικών νόσων. ΠΡΟΣΟΧΗ: Οποιαδήποτε ιατρική απόφαση δεν µπορεί να βασίζεται στο αποτέλεσµα αυτής της δοκιµασίας µόνο, αλλά πρέπει να βασίζεται στην αξιολόγηση του συνόλου όλων των διαθέσιµων κλινικών και εργαστηριακών δεδοµένων. ΚΛΙΝΙΚΗ ΣΗΜΑΣΙΑ Tα αυτοαντισώµατα εναντίον εκχυλιζόµενων πυρηνικών αντιγόνων (ENA) αντιπροσωπεύουν µια πολυάριθµη οικογένεια αυτοαντισωµάτων που δεν είναι ειδικά για όργανο και είδος, των οποίων η ανίχνευση είναι µεγάλης σηµασίας για την εργαστηριακή διάγνωση αυτοάνοσων συστηµατικών ρευµατικών νόσων (1,2,3,4). Οι αυτοάνοσες συστηµατικές νόσοι χαρακτηρίζονται, από εργαστηριακής πλευράς, από την παρουσία αντιπυρηνικών αυτοαντισωµάτων (ANA). Τα ANA είναι η πρώτη εξέταση αυτοαντισωµάτων που πρέπει να ζητείται σε ασθενή µε πιθανολογούµενη αυτοάνοση συστηµατική νόσο. Η αναζήτηση των ANA εκτελείται γενικά µε τη µέθοδο του έµµεσου ανοσοφθορισµού (IFI) σε µονό στρώµα κυττάρων HEp-2. Η θετικότητα για ANA σε IFI υποδεικνύει την παρουσία άµεσων αυτοαντισωµάτων έναντι διαφόρων αντιγόνων, πυρηνικών (DNA, ιστόνες, µη ιστονικές πρωτεΐνες, πυρηνιακά αντιγόνα κ.λπ.) ή κυτταροπλασµατικών (5,6). Η θετικότητα των ANA σε σηµαντικό τίτλο πρέπει να εµβαθυνθεί µε την αναζήτηση των αυτοαντισωµάτων αντι-ena και αντι-dsdna. Η εύρεση θετικότητας των ANA και µιας ή περισσότερων ειδικοτήτων για αντι-ena ή και αντιdsdna είναι ιδιαιτέρως δηλωτική αυτοάνοσων συστηµατικών νόσων: Συστηµατικός ερυθηµατώδης λύκος (LES), σύνδροµο του Sjogren (SS), συστηµατική προοδευτική σκλήρυνση (SSp), δερµατοµυοσίτιδαπολυοµυοσίτιδα (DM/PM) και µικτή νόσος του συνδετικού ιστού (MCTD). Τα αντισώµατα αντι-dna περιλαµβάνουν ένα ανοµοιογενές σύνολο ανοσοσφαιρινών µε διαφορετική ειδικότητα και απληστία. Αυτές µπορεί να κατευθύνονται έναντι του DNA διπλής έλικας, (dsdna), καθώς και έναντι του DNA µονής έλικας (ssdna). Τα αντισώµατα αντι-dsdna αναγνωρίζουν επίτοπα που εντοπίζονται κατά µήκος του σκελετού δεοξυριβόζης-φωσφορικού (7) και ο τόπος δεσµού περιλαµβάνει περίπου 6 IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 1 από 16

2 νουκλεοτίδια (8). Τα αντισώµατα αντι-ssdna αναγνωρίζουν αντίθετα µεµονωµένες νουκλεοτιδικές περιοχές και αυτό συµβαίνει όταν το µόριο αποδιαταχτεί ή πάντως ανοίξει µερικώς 9). Τα αντι-ssdna είναι αντισώµατα χαµηλής απληστίας και έχουν χαµηλή διαγνωστική αξία λόγω της χαµηλής ειδικότητας. Τα αντισώµατα αντιdsdna έχουν υψηλή διαγνωστική αξία ως δείκτες αυτοαντισωµάτων σε ασθενείς µε LES και για το λόγο αυτό αποτελούν µέρος των κριτηρίων κατάταξης για τον LES σύµφωνα µε το American College of Rheumathology (10). Η επίπτωσή τους στον LES ποικίλλει από 40 έως 80% ανάλογα µε την στατιστική που επιλέγεται και τη µέθοδο ποσοτικού προσδιορισµού. Εκτός από τον διαγνωστικό ρόλο, ο ποσοτικός προσδιορισµός του αντι-dsdna µπορεί να διαδραµατίσει σηµαντικό ρόλο στην παρακολούθηση του LES και ιδίως σε ασθενείς µε νεφρίτιδα του λύκου. Αυτό συνδέεται στενά µε τον παθογενετικό ρόλο τους: Οι εξάρσεις του LES έπονται µιας σταθερής και προοδευτικής αύξησης των αντι-dsdna, που ακολουθείται από µια αιφνίδια πτώση τη στιγµή στην οποία εκδηλώνεται κλινικά η νέα όξυνση, που δικαιολογείται από την εναπόθεση ανοσοσυµπλεγµάτων DNA/αντι-dsDNA υψηλής απληστίας σε επίπεδο σπειραµάτων (11). Ο ποσοτικός προσδιορισµός τους βρίσκει για τους λόγους αυτούς ευρεία χρήση στη διαγνωστική φάση και την παρακολούθηση του LES. ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Το κιτ ZENIT RA dsdna για τον ποσοτικό προσδιορισµό των ειδικών IgG αντι-dsdna χρησιµοποιεί µια έµµεση ανοσολογική µέθοδο δύο βηµάτων µε βάση την αρχή της χηµειοφωταύγειας. Το ειδικό αντιγόνο χρησιµοποιείται για την επένδυση των µαγνητικών σωµατιδίων (στερεά φάση) και ένα αντίσωµα κατά των ανθρώπινων IgG επισηµαίνεται µε ένα παράγωγο του εστέρα ακριδίνης (συζυγές). Κατά την πρώτη επώαση τα ειδικά αντισώµατα που είναι παρόντα στο δείγµα, στους βαθµονοµητές ή στους µάρτυρες δεσµεύονται στη στερεά φάση. Κατά τη δεύτερη επώαση το συζυγές αντιδρά µε τα αντισώµατα αντι-dsdna IgG που δεσµεύονται από τη στερεά φάση. Μετά από κάθε επώαση, το υλικό που δεν δεσµεύεται στη στερεά φάση αποµακρύνεται µέσω αναρρόφησης και ακόλουθης πλύσης. Η ποσότητα του σηµασµένου συζυγούς που παραµένει δεσµευµένο στη στερεά φάση αξιολογείται µέσω ενεργοποίησης της αντίδρασης χηµειοφωταύγειας και της µέτρησης του φωτεινού σήµατος. Το παραγόµενο σήµα, εκφραζόµενο σε σχετικές µονάδες φωτός (RLU, Relative Light Unit), είναι ενδεικτικό της συγκέντρωσης των ειδικών αντισωµάτων που υπάρχουν στο δείγµα, στους βαθµονοµητές και στους µάρτυρες. ΑΥΤΟΜΑΤΟΠΟΙΗΣΗ Ο αναλυτής ZENIT RA Analyzer εκτελεί µε αυτόµατο τρόπο όλες τις λειτουργίες που προβλέπονται από το πρωτόκολλο του προσδιορισµού: Προσθήκη στον περιέκτη αντίδρασης των δειγµάτων, βαθµονοµητών, µαρτύρων, µαγνητικών σωµατιδίων, συζυγούς και διαλυµάτων ενεργοποίησης χηµειοφωταύγειας, µαγνητικός διαχωρισµός και πλύση των σωµατιδίων, µέτρηση εκπεµπόµενου φωτός. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 2 από 16

3 Το σύστηµα υπολογίζει τα αποτελέσµατα του προσδιορισµού για τα δείγµατα και τους µάρτυρες µέσω καµπύλης βαθµονόµησης που είναι αποθηκευµένη στη µνήµη και εκτυπώνει µια αναφορά που περιλαµβάνει όλες τις πληροφορίες που είναι σχετικές µε τον ποσοτικό προσδιορισµό και τον ασθενή. ΥΛΙΚΑ ΚΑΙ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ Υλικά και αντιδραστήρια που παρέχονται ΑΝΤΙΔ 1 MP 2,5 ml Μαγνητικά σωµατίδια επενδυµένα µε το αντιγόνο dsdna σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών που περιέχει πρωτεΐνες σταθεροποίησης, Pro-Clin 300 και αζίδιο του νατρίου (< 0,1 %) ως συντηρητικά. ΑΝΤΙΔ 2 CONJ 25 ml Μονοκλωνικό αντίσωµα ποντικού κατά ανθρώπινων IgG σηµασµένο µε ένα παράγωγο εστέρα της ακριδίνης (συζυγές), σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών που περιέχει πρωτεΐνες σταθεροποίησης και αζίδιο του νατρίου (< 0,1 %) ως συντηρητικά. ΑΝΤΙΔ 3 DIL 25 ml Διάλυµα αραίωσης δειγµάτων: Ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών που περιέχει αλβουµίνη ορού βοός, επιφανειοδραστική ουσία, αδρανή κυανή χρωστική, Pro-Clin 300 και Γενταµυκίνη SO 4 ως συντηρητικά. ΑΝΤΙΔ 4 CAL A 1,6 ml Ορός ανθρώπου µε χαµηλή συγκέντρωση αντισωµάτων αντι-dsdna IgG σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών που περιέχει αλβουµίνη ορού βοός, επιφανειοδραστική ουσία, αδρανή κυανή χρωστική, Pro- Clin 300 και Γενταµυκίνη SO 4 ως συντηρητικά. ΑΝΤΙΔ 5 CAL B 1,6 ml Ορός ανθρώπου µε υψηλή συγκέντρωση αντισωµάτων αντι-dsdna IgG σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών που περιέχει αλβουµίνη ορού βοός, επιφανειοδραστική ουσία, αδρανή κυανή χρωστική, Pro-Clin 300 και Γενταµυκίνη SO 4 ως συντηρητικά. Όλα τα αντιδραστήρια είναι έτοιµα για χρήση. Τα αντιδραστήρια 1, 2 και 3 είναι τοποθετηµένα µαζί σε µια ενιαία διάταξη που αποτελεί τη φύσιγγα αντιδραστηρίων. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 3 από 16

4 Οι συγκεντρώσεις των βαθµονοµητών εκφράζονται σε UI/mL (διεθνείς µονάδες) και είναι βαθµονοµηµένες έναντι ενός διεθνούς προτύπου αναφοράς Wo/80 (WHO). Οι τιµές των συγκεντρώσεων που είναι ειδικές για την παρτίδα του προϊόντος είναι καταχωρηµένες στο DATA DISK που βρίσκεται εντός του κιτ. DATA DISK Μίνι-DVD που περιέχει όλες τις πληροφορίες σχετικά µε τα προϊόντα της σειράς ZENIT RA (Αντιδραστήρια, Βαθµονοµητές, Οροί ελέγχου) ενηµερωµένες έως την τελευταία παρτίδα παραγωγής µε την εξαίρεση των προϊόντων που έχουν λήξει στην ηµεροµηνία συµπλήρωσης του νέου DATA DISK. Αρκεί να φυλάξετε το DATA DISK µε τον µεγαλύτερο αριθµό παρτίδας για να διατηρείτε πάντα ενηµερωµένες τις απαραίτητες πληροφορίες για τη σωστή λειτουργία του συστήµατος. Απαραίτητα υλικά και αντιδραστήρια που δεν παρέχονται στο κιτ - Αναλυτής ZENIT RA (ZENIT RA Analyzer) Κωδ. Αρ Κύβος υποδοχών ZENIT RA (ZENIT RA Cuvette Cube) * Κωδ. Αρ Συσκευασία 960 υποδοχών. - Υγρό συστήµατος ZENIT RA (ZENIT RA System Liquid) * Κωδ. Αρ φιάλη 0,5 λίτρου διαλύµατος 10x. - Διάλυµα πλύσης ZENIT RA (ZENIT RA Wash Solution) * Κωδ. Αρ φιάλη 0,5 λίτρου διαλύµατος 20x. - Σετ εκκινητών ZENIT RA (ZENIT RA Trigger Set) * Κωδ. Αρ φιάλη των 250 ml Trigger A (διάλυµα προενεργοποίησης) 1 φιάλη των 250 ml Trigger Β (διάλυµα ενεργοποίησης) - Διάλυµα ZENIT RA D-SORB (ZENIT RA D-SORB Solution) Κωδ. Αρ Συσκευασία 2 φιαλών 1 λίτρου διαλύµατος έτοιµου προς χρήση. - Φύσιγγα συστήµατος ελέγχου ZENIT RA Κωδ. Αρ (ZENIT RA Cartridge Checking System) * - Σετ άνω πωµάτων ZENIT RA (ZENIT RA Top Cap Set) Κωδ. Αρ άνω πώµατα για το κλείσιµο των περιεκτών των βαθµονοµητών µετά την πρώτη χρήση. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 4 από 16

5 (*) Ο αναλυτής ZENIT RA Analyzer και τα εξαρτήµατα που προσδιορίζονται από έναν αστερίσκο κατασκευάζονται από την Immunodiagnostic Systems S.A., Rue E. Solvay, 101, B-4000 Liège, Βέλγιο και διανέµονται από την A. Menarini Diagnostics Srl. Άλλα συνιστώµενα αντιδραστήρια ΣΕΤ ΟΡΩΝ ΕΛΕΓΧΟΥ ZENIT RA ANA (ZENIT RA ANA CONTROL SET) Κωδ. Αρ φιαλίδια του 1,5 ml αρνητικού ανθρώπινου ορού και 3 φιαλίδια του 1,5 ml θετικού ανθρώπινου ορού για αντισώµατα αντι-dsdna. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ Τα αντιδραστήρια που παρέχονται στο κιτ ZENIT RA dsdna IgG προορίζονται αποκλειστικά για διαγνωστική χρήση in vitro και όχι για χρήση in vivo σε ανθρώπους ή ζώα. Αυτό το προϊόν πρέπει να χρησιµοποιείται από επαγγελµατίες χρήστες µε αυστηρή τήρηση των οδηγιών που αναγράφονται στο παρόν έγγραφο. Η Menarini δεν µπορεί να θεωρηθεί υπεύθυνη για απώλειες ή ζηµίες που απορρέουν από µια χρήση που δεν συµµορφώνεται µε τις παρεχόµενες οδηγίες. Προφυλάξεις ασφαλείας Αυτό το προϊόν περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και εποµένως ο χειρισµός του πρέπει να γίνεται σαν να περιέχει µολυσµατικούς παράγοντες. Αυτό το προϊόν περιέχει µέρη µε υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Όλες οι µονάδες ορού ή πλάσµατος που χρησιµοποιούνται για την κατασκευή των αντιδραστηρίων αυτού του κιτ αναλύθηκαν µε µεθόδους εγκεκριµένες από τον Οργανισµό Τροφίµων και Φαρµάκων των Η.Π.Α. (FDA) και βρέθηκαν αρνητικές για HBsAg, αντι-hcv, αντι-hiv1 και αντι-hiv2. Ωστόσο, επειδή καµία µέθοδος εξέτασης δεν είναι δυνατό να προσφέρει πλήρη διασφάλιση για την απουσία παθογόνων παραγόντων, όλο το υλικό ανθρώπινης προέλευσης θα πρέπει να αντιµετωπίζεται ως δυνητικά µολυσµατικό και ο χειρισµός του θα πρέπει να γίνεται ανάλογα. Σε περίπτωση συσκευασίας που έχει υποστεί βλάβη µε έκλυση των αντιδραστηρίων, προβείτε στην απολύµανση της εν λόγω περιοχής µε ένα αραιωµένο διάλυµα υποχλωριώδους νατρίου, αφού λάβετε τα κατάλληλα προσωπικά µέτρα προστασίας (ποδιά, γάντια, γυαλιά). Προβείτε στην απόρριψη του χρησιµοποιούµενου για τον καθαρισµό υλικού και των αποβλήτων της συσκευασίας που αφορούσε η έκλυση, µε βάση τους εθνικούς κανονισµούς για την απόρριψη των δυνητικών µολυσµατικών αποβλήτων. Ορισµένα αντιδραστήρια περιέχουν αζίδιο του νατρίου ως συντηρητικό. Επειδή το αζίδιο του νατρίου µπορεί να αντιδράσει µε µόλυβδο, χαλκό και µολυβδικό ορείχαλκο σχηµατίζοντας εκρηκτικά αζίδια στις σωληνώσεις, IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 5 από 16

6 συνιστάται να µην απορρίπτετε αντιδραστήρια ή απόβλητα στις αποχετεύσεις αλλά να ακολουθείτε τους εθνικούς κανονισµούς σχετικά µε την απόρριψη δυνητικά επικίνδυνων αποβλήτων. Προφυλάξεις λειτουργίας Για να λάβετε αξιόπιστα αποτελέσµατα είναι απαραίτητο να ακολουθήσετε αυστηρά τις παρούσες οδηγίες χρήσης και να ακολουθήσετε επιµελώς όλα όσα υποδεικνύονται στο εγχειρίδιο λειτουργίας του οργάνου. Τα αντιδραστήρια που παρέχονται στο κιτ πρέπει να χρησιµοποιούνται αποκλειστικά µε το σύστηµα ZENIT RA Analyzer. Τα µέρη της φύσιγγας αντιδραστηρίων δεν µπορούν να αφαιρεθούν από τη φύσιγγα και να επανασυναρµοστούν. Μην χρησιµοποιείτε το κιτ µετά την πάροδο της ηµεροµηνίας λήξης. ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΤΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Τα αντιδραστήρια που παρέχονται µε το κιτ είναι όλα έτοιµα για χρήση. ΣΥΝΤΗΡΗΣΗ ΚΑΙ ΣΤΑΘΕΡΟΤΗΤΑ ΤΩΝ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Φυλάσσετε τα αντιδραστήρια που παρέχονται µε το κιτ σε 2-8 C στο σκοτάδι σε κατακόρυφη θέση. Υπό αυτές τις συνθήκες η φύσιγγα αντιδραστηρίων και οι βαθµονοµητές που δεν έχουν ανοιχτεί είναι σταθεροί έως την ηµεροµηνία λήξης. Η φύσιγγα αντιδραστηρίων µετά το άνοιγµα µπορεί να χρησιµοποιηθεί για 60 ηµέρες αν φυλαχθεί στο ψυγείο σε 2-8 C ή επί του οργάνου. Οι βαθµονοµητές µετά το άνοιγµα µπορούν να χρησιµοποιηθούν για 60 ηµέρες αν έχουν φυλαχθεί στο ψυγείο σε 2-8 C και αν η παραµονή επί του οργάνου δεν υπερβαίνει τις 6 ώρες ανά συνεδρία. Μην καταψύχετε τα αντιδραστήρια και τους βαθµονοµητές. ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΚΑΙ ΣΥΝΤΗΡΗΣΗ ΤΩΝ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ Ο προσδιορισµός πρέπει να γίνεται σε ανθρώπινα δείγµατα ορού και πλάσµατος (EDTA). Αντενδείκνυται η χρήση λιπαιµικών δειγµάτων ή δειγµάτων µε αιµόλυση ή θολών δειγµάτων. Αν ο προσδιορισµός εκτελεστεί µετά από πάνω από 8 ώρες από τη λήψη, διαχωρίστε τον ορό από το πήγµα ή το πλάσµα από τα ερυθρά αιµοσφαίρια, µεταφέροντάς τα από τους πρωτεύοντες σωλήνες διαχωρισµού µε γέλη στους δευτερεύοντες σωλήνες χωρίς πρόσθετα. Πριν αναλυθούν τα δείγµατα µπορούν να φυλαχθούν στο ψυγείο σε 2-8 C για 7 ηµέρες το πολύ. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 6 από 16

7 Αν ο προσδιορισµός εκτελεστεί µετά από πάνω από 7 ηµέρες, φυλάξτε τα δείγµατα στην κατάψυξη (< - 20 C). Αποφύγετε την επανειληµµένη κατάψυξη και απόψυξη. ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΚΗ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ Για να λάβετε αξιόπιστα αποτελέσµατα ανάλυσης, ακολουθήστε αυστηρά τις οδηγίες που αναγράφονται στο εγχειρίδιο λειτουργίας του οργάνου. Τοποθέτηση των αντιδραστηρίων Όλα τα αντιδραστήρια που παρέχονται µε το κιτ είναι έτοιµα για χρήση. Πριν την εισαγωγή της φύσιγγας αντιδραστηρίων στο σύστηµα, ο περιέκτης των µαγνητικών σωµατιδίων πρέπει να ανακινηθεί µε οριζόντια περιστροφή έτσι ώστε να ευνοηθεί η επαναιώρηση των σωµατιδίων. Αυτό πρέπει να εκτελεστεί αποφεύγοντας το σχηµατισµό αφρού. Τοποθετήστε τη φύσιγγα αντιδραστηρίων στην περιοχή αντιδραστηρίων του οργάνου χρησιµοποιώντας τον ειδικό οδηγό και αφήστε σε ανακίνηση για τουλάχιστον 30 λεπτά πριν τη χρήση. Η τοποθέτηση της φύσιγγας αντιδραστηρίων καθορίζει προσωρινά την ανάγνωση του αναγνωριστικού γραµµωτού κωδικού. Στην περίπτωση βλάβης της ετικέτας της φύσιγγας ή στην περίπτωση απουσίας ανάγνωσης, τα αναγνωριστικά στοιχεία της φύσιγγας αντιδραστηρίων µπορούν να εισαχθούν µε το χέρι. Το όργανο διατηρεί αυτόµατα σε συνεχή ανακίνηση τα µαγνητικά σωµατίδια. Αν η φύσιγγα αντιδραστηρίων αφαιρεθεί από το όργανο, φυλάξτε την στο σκοτάδι σε 2-8 C σε κατακόρυφη θέση. Τοποθέτηση βαθµονοµητών και µαρτύρων Οι βαθµονοµητές και οι µάρτυρες ZENIT RA είναι έτοιµοι για χρήση. Αφήστε τους βαθµονοµητές και τους µάρτυρες σε θερµοκρασία δωµατίου για 10 λεπτά και ανακινήστε ήπια το περιεχόµενο, µε το χέρι ή µέσω περιδίνησης, αποφεύγοντας το σχηµατισµό αφρού. Μην αναποδογυρίζετε τον περιέκτη και µη βγάλετε το διατρητικό πώµα κλεισίµατος (κίτρινο πώµα για τους βαθµονοµητές και πράσινα ή µπλε πώµατα για τους µάρτυρες). Αν οι βαθµονοµητές ή οι µάρτυρες χρησιµοποιούνται για πρώτη φορά, πιέστε το διατρητικό πώµα εντελώς προς τα κάτω. Με αυτόν τον τρόπο θα διατρηθεί η µεµβράνη που σφραγίζει τον περιέκτη επιτρέποντας τη λήψη του υγρού που περιέχεται σε αυτόν. Η επίτευξη της κατάβασης του διατρητικού πώµατος επισηµαίνεται από την ταυτόχρονη κάλυψη της ερυθρόχρωµης ταινίας που υπάρχει στην άνω πλευρά της ετικέτας (Εικ. 1 Σφραγισµένος περιέκτης και Διατρηµένος περιέκτης). Στην περίπτωση που οι βαθµονοµητές ή οι µάρτυρες είχαν χρησιµοποιηθεί προηγουµένως, ο περιέκτης θα διαθέτει άνω πώµα κλεισίµατος (λευκό πώµα) και η ερυθρόχρωµη ταινία της ετικέτας θα είναι καλυµµένη. Επί του οργάνου πρέπει να τοποθετούνται αποκλειστικά οι περιέκτες χωρίς άνω πώµα (λευκό πώµα) και µε την ερυθρόχρωµη ταινία καλυµµένη (Εικ. 1 Διατρηµένος περιέκτης). IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 7 από 16

8 Εισάγετε στο όργανο τους βαθµονοµητές ή τους µάρτυρες στην περιοχή δειγµάτων µετά την ανάγνωση του γραµµωτού κωδικού. Τα δεδοµένα του γραµµωτού κωδικού µπορούν να εισαχθούν και µε το χέρι σε περίπτωση βλάβης της ετικέτας ή σε περίπτωση απουσίας ανάγνωσης. Οι τιµές των συγκεντρώσεων των αντισωµάτων IgG αντι-dsdna που υπάρχουν στους βαθµονοµητές ή στους ορούς ελέγχου είναι καταχωρηµένες στο DATA DISK και µεταφέρονται αυτόµατα στον αναλυτή. Στην περίπτωση µη µεταφοράς των στοιχείων είναι δυνατή η εισαγωγή τους µε το χέρι. Στο τέλος της συνεδρίας οι περιέκτες των βαθµονοµητών και των µαρτύρων πρέπει να κλείνονται µε τα ειδικά άνω πώµατα (λευκά πώµατα) και να µεταφέρονται σε 2-8 C έως την επόµενη φορά που θα χρησιµοποιηθούν (Εικ. 1 Κλειστός περιέκτης). Οι βαθµονοµητές µπορούν να χρησιµοποιηθούν έως τέσσερις φορές το πολύ. Εικόνα 1: Μορφή περιέκτη Σφραγισµένος περιέκτης Διατρηµένος περιέκτης Κλειστός περιέκτης Τοποθέτηση των δειγµάτων Προσδιορίστε τα δείγµατα χρησιµοποιώντας τη συσκευή ανάγνωσης γραµµωτών κωδικών και εισάγετέ τα στο όργανο, στον ειδικό περιέκτη. Στην περίπτωση απουσίας του γραµµωτού κωδικού στο δείγµα ή στην περίπτωση απουσίας ανάγνωσης, τα αναγνωριστικά στοιχεία του δείγµατος µπορούν να εισαχθούν µε το χέρι. Επιλέξτε τις απαιτούµενες παραµέτρους για κάθε δείγµα. Βαθµονόµηση Το όργανο ZENIT RA Analyzer χρησιµοποιεί µια καµπύλη βαθµονόµησης αποθηκευµένη στη µνήµη (master curve), που παράγεται από τον κατασκευαστή για κάθε παρτίδα φύσιγγας αντιδραστηρίων. Οι παράµετροι των master curve, µαζί µε τις τιµές των συγκεντρώσεων των βαθµονοµητών, είναι αποθηκευµένες στη µνήµη του DATA DISK και µεταφέρονται στη βάση δεδοµένων του οργάνου. Οι βαθµονοµητές A και B χρησιµοποιούνται για την επαναβαθµονόµηση της master curve ανάλογα µε το όργανο που χρησιµοποιείται και µε τα αντιδραστήρια επί του οργάνου. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 8 από 16

9 Για να εκτελέσετε την επαναβαθµονόµηση αναλύστε εις τριπλούν τους δύο βαθµονοµητές A και B και εις απλούν τους µάρτυρες. Οι τιµές της συγκέντρωσης που λαµβάνονται µε τους µάρτυρες επιτρέπουν την επικύρωση της νέας βαθµονόµησης. Αφού γίνει αποδεκτή και αποθηκευτεί στη µνήµη η επαναβαθµονόµηση της master curve, όλα τα επόµενα δείγµατα µπορούν να αναλυθούν χωρίς περαιτέρω βαθµονόµηση, εκτός από τις ακόλουθες περιπτώσεις: - όταν έχει τοποθετηθεί επί του οργάνου µια φύσιγγα αντιδραστηρίων µε µια καινούρια παρτίδα - όταν οι τιµές των µαρτύρων δεν συµπεριλαµβάνονται στο εύρος αποδοχής - όταν εκτελείται η διαδικασία συντήρησης του οργάνου - όταν έχει παρέλθει η ηµεροµηνία λήξης της εγκυρότητας της επαναβαθµονοµηµένης master curve. Η εγκυρότητα της επαναβαθµονοµηµένης master curve για το κιτ ZENIT RA -dsdna IgG διαρκεί 15 ηµέρες. Ο χειρισµός της επαναβαθµονόµησης γίνεται µε αυτόµατο τρόπο από το όργανο. Προσδιορισµός Πιέστε το πλήκτρο εκκίνησης. 1. Το σύστηµα αναρροφά 100 µl Διαλύτη δειγµάτων, 20 µl Μαγνητικών σωµατιδίων, 100 µl Διαλύτη δειγµάτων και 4 µl δείγµατος ή µάρτυρα (για τους βαθµονοµητές ο θετικός ορός παρέχεται προαραιωµένος µε το Διαλύτη δειγµάτων και ο όγκος που λαµβάνεται είναι 104 µl). Τα διαλύµατα και το εναιώρηµα που αναρροφώνται διανέµονται στην υποδοχή αντίδρασης. 2. Η υποδοχή αντίδρασης επωάζεται στο ρότορα σε 37 C για 10 λεπτά. 3. Μετά από αυτήν τη φάση επώασης, τα µαγνητικά σωµατίδια διαχωρίζονται και πλένονται. 4. Στην υποδοχή διανέµονται 200 µl συζυγούς. 5. Η υποδοχή αντίδρασης επωάζεται στο ρότορα σε 37 C για 10 λεπτά. 6. Μετά από αυτήν την τελευταία φάση επώασης, τα µαγνητικά σωµατίδια διαχωρίζονται και πλένονται και η υποδοχή µεταφέρεται στο θάλαµο ανάγνωσης. 7. Η ποσότητα δεσµευµένου συζυγούς στη στερεά φάση, που εκφράζεται σε RLU, είναι απευθείας ανάλογη µε τη συγκέντρωση IgG αντι-dsdna που υπάρχει στο δείγµα. 8. Οι απαντήσεις που λαµβάνονται παρεµβάλλονται στην καµπύλη βαθµονόµησης και µετατρέπονται σε συγκεντρώσεις. Δείγµατα µε τιµές συγκέντρωσης υψηλότερες από το άνω όριο του εύρους δυνατότητας µέτρησης µπορούν να αραιωθούν και να υποβληθούν εκ νέου σε δοκιµασία. Η νέα τιµή που λαµβάνεται πολλαπλασιάζεται, για τη λήψη του τελικού αποτελέσµατος, µε τον συντελεστή αραίωσης που χρησιµοποιήθηκε. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 9 από 16

10 ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Για τη διασφάλιση της εγκυρότητας του προσδιορισµού, οροί ελέγχου µε διαφορετικά επίπεδα συγκέντρωσης (τουλάχιστον ένας αρνητικός ορός και ένας θετικός ορός) πρέπει να µετρώνται κάθε ηµέρα κατά την οποία εκτελείται ο προσδιορισµός. Αν το εργαστήριό σας απαιτεί, για την επαλήθευση των αποτελεσµάτων του προσδιορισµού, µια συχνότερη χρήση ή έναν πιο αυξηµένο αριθµό µαρτύρων, ακολουθήστε τις διαδικασίας του ελέγχου ποιότητας που είναι καθιερωµένες εκεί. Αν χρησιµοποιούνται οι οροί ελέγχου ZENIT RA, οι µέσες αναµενόµενες τιµές και τα όρια του εύρους αποδοχής είναι εκείνα που αναφέρονται στο DATA DISK που υπάρχει και στη συσκευασία των µαρτύρων. Αν χρησιµοποιούνται διαφορετικοί οροί ελέγχου, είναι απαραίτητο, πριν από την πρώτη τους χρήση, να προσδιορίσετε τις αναµενόµενες τιµές µε αντιδραστήρια και το σύστηµα ZENIT RA. Αν η τιµή των µαρτύρων δεν εµπίπτει στο εύρος αποδοχής που προσδιορίζεται, τα σχετικά αποτελέσµατα του προσδιορισµού δεν είναι έγκυρα και τα αντίστοιχα δείγµατα πρέπει να αναλυθούν εκ νέου. Σε αυτήν την περίπτωση είναι αναγκαίο να εκτελέσετε πριν την επανάληψη του προσδιορισµού µια διαδικασία επαναβαθµονόµησης. ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΚΑΙ ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Υπολογισµός των αποτελεσµάτων Η συγκέντρωση των αντισωµάτων IgG αντι-dsdna που υπάρχει στο εξεταζόµενο δείγµα υπολογίζεται αυτόµατα από το σύστηµα. Οι τιµές µπορούν να απεικονιστούν µέσω ανάγνωσης στο βίντεο ή µέσω εκτύπωσης. Οι συγκεντρώσεις εκφράζονται σε UI/mL. Ο υπολογισµός της συγκέντρωσης της προσδιοριζόµενης ουσίας στο δείγµα γίνεται µέσω ανάγνωσης της απάντησης που λαµβάνεται για κάθε δείγµα σε µια καµπύλη βαθµονόµησης που υποβάλλεται σε επεξεργασία µέσω ενός συστήµατος λογιστικού fitting µε τέσσερις παραµέτρους (4PL, σταθµισµένο Y), που διορθώνεται περιοδικά ανάλογα µε τις απαντήσεις που λαµβάνονται στον προσδιορισµό των βαθµονοµητών. Για λεπτοµερείς πληροφορίες σχετικά µε τον τρόπο µε τον οποίο το σύστηµα υπολογίζει τα αποτελέσµατα, συµβουλευτείτε το εγχειρίδιο λειτουργίας του συστήµατος. Ερµηνεία των αποτελεσµάτων Το εύρος της δυνατότητας µέτρησης του προσδιορισµού ZENIT RA dsdna IgG είναι: 0,0 600 UI/mL. Οι κατώτερες από 0,0 UA/mL τιµές είναι συναγόµενες τιµές και µπορούν να αναφερθούν ως ίσες µε 0,0 UI/mL. Οι τιµές πάνω από 600 UI/mL µπορούν να αναφερθούν ως άνω των 600 UI/mL, ή να υποβληθούν σε εκ νέου δοκιµασία µετά από κατάλληλη αραίωση. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 10 από 16

11 Τα αποτελέσµατα των δειγµάτων µπορούν να ερµηνευτούν µε τον ακόλουθο τρόπο: (UI/mL) Ερµηνεία < 30 Το δείγµα πρέπει να θεωρηθεί ως αρνητικό για την παρουσία IgG αντι-dsdna Το δείγµα πρέπει να θεωρηθεί ως αµφίβολο για την παρουσία IgG αντι-dsdna. > 50 Το δείγµα πρέπει να θεωρηθεί ως θετικό για την παρουσία IgG αντι-dsdna Οι παραπάνω αναφερόµενες τιµές πρέπει να θεωρούνται µόνο προτεινόµενες τιµές. Το κάθε εργαστήριο πρέπει να προσδιορίζει τα δικά του διαστήµατα αναφοράς. ΟΡΙΑ ΤΟΥ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΥ Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσµατα που λαµβάνονται µε το κιτ ZENIT RA -dsdna IgG και το σύστηµα ZENIT RA Analyzer πρέπει να χρησιµοποιούνται από κοινού µε τα άλλα κλινικά και εργαστηριακά στοιχεία που είναι στη διάθεση του ιατρού. Η βακτηριακή µόλυνση των δειγµάτων και η απενεργοποίηση στη θερµότητα µπορούν να επηρεάσουν το αποτέλεσµα του προσδιορισµού. Τα ετερόφιλα αντισώµατα που υπάρχουν στα δείγµατα ανθρώπινου ορού µπορούν να αντιδράσουν µε τα αντιδραστήρια µε βάση ανοσοσφαιρίνες, προκαλώντας παρεµβολές στους ανοσολογικούς προσδιορισµούς in vitro. Αυτά τα δείγµατα µπορούν να δώσουν µη φυσιολογικές τιµές αν αναλυθούν µε το κιτ ZENIT RA dsdna IgG. ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΕΣ ΤΙΜΕΣ Αναλύθηκαν τα δείγµατα 100 δοτών που επιλέχτηκαν τυχαία για την επαλήθευση της παρουσίας των αντισωµάτων IgG αντι-dsdna. 99 δείγµατα προέκυψαν αρνητικά, µε µια µέση τιµή 11,2 UA/mL και µια τυπική απόκλιση 3,78 UA/mL. Με τα αποτελέσµατα που ελήφθησαν υπολογίστηκε το Limit of Blank (LoB = η υψηλότερη τιµή που µπορούµε να αναµένουµε σε µια σειρά δειγµάτων που δεν περιέχουν την προσδιοριζόµενη ουσία). Το Limit of Blank, που προσδιορίστηκε ως το 95 εκατοστηµόριο του αρνητικού πληθυσµού, προέκυψε ίσο µε 16,9 UA/mL µε την Παρτίδα αντιδραστηρίων αρ. 1. ΑΠΟΔΟΣΕΙΣ Προειδοποίηση: Τα παρουσιαζόµενα στοιχεία δεν αποτελούν τις προδιαγραφές της λειτουργίας του κιτ, αλλά αποτελούν πειραµατική ένδειξη του πώς λειτουργεί το κιτ εντός τέτοιων προδιαγραφών µε τον προβλεπόµενο από τον κατασκευαστή τρόπο. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 11 από 16

12 Ακρίβεια και Επαναληψιµότητα Η ακρίβεια και η επαναληψιµότητα του κιτ ZENIT RA dsdna IgG αξιολογήθηκαν µε χρήση ενός πρωτοκόλλου µε βάση τις κατευθυντήριες γραµµές του εγγράφου EP5-A2 των Clinical and Laboratory Standards (CLSI). Η ακρίβεια υπολογίστηκε αναλύοντας τα αποτελέσµατα 20 επαναλήψεων τεσσάρων ορών (έναν αρνητικό και τρεις θετικούς µε διαφορετικές συγκεντρώσεις IgG αντι-dsdna) που εκτελέστηκαν µε δύο διαφορετικές παρτίδες αντιδραστηρίων στην ίδια πειραµατική συνεδρία. Η συγκέντρωση του ορού που ήταν αρνητικός για IgG αντι-dsdna (NC) προέκυψε στο εύρος από 7,8 έως 13,5 UA/mL και από 3,6 έως 8,2 UA/mL αντίστοιχα µε την παρτίδα αντιδραστηρίων αρ. 1 και αρ. 2. Στον Πίνακα αναγράφονται τα αποτελέσµατα που λαµβάνονται µε τους 3 θετικούς ορούς. Δείγµα LP MP HP Αντιδραστήρια Αρ. παρτίδας Μέση συγκέντρωση (UI/mL) SD CV % 1 70,6 2,32 3,3 2 73,4 1,18 1,6 1 93,6 3,82 4,1 2 98,8 3,76 3, ,7 2,30 1, ,2 3,32 2,1 Η επαναληψιµότητα υπολογίστηκε αναλύοντας τα αποτελέσµατα του προσδιορισµού πέντε ορών (ενός αρνητικού και τεσσάρων θετικών µε διαφορετικές συγκεντρώσεις αντι-dsdna IgG) που εκτελέστηκε εις απλούν µε δύο διαφορετικές παρτίδες αντιδραστηρίων σε 30 διαφορετικές συνεδρίες. Η συγκέντρωση του ορού αντι-dsdna IgG αρνητικού (N1) προέκυψε ότι συµπεριλαµβάνεται στο εύρος από 0,2 έως 7,4 UA/mL. Στον Πίνακα αναγράφονται τα αποτελέσµατα που λαµβάνονται µε τους 4 θετικούς ορούς. Δείγµα Μέση συγκέντρωση (UI/mL) SD CV % P1 63,9 2,81 4,4 P2 88,0 5,05 5,7 P3 111,0 5,26 4,7 P4 193,4 81,7 4,2 IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 12 από 16

13 Γραµµικότητα των αραιώσεων Η γραµµικότητα των αραιώσεων του κιτ ZENIT RA dsdna IgG αξιολογήθηκε µε χρήση ενός πρωτοκόλλου µε βάση τις κατευθυντήριες γραµµές του εγγράφου EP6-A των Clinical and Laboratory Standards (CLSI). Προσδιορίστηκαν κλιµακούµενες αραιώσεις 2 ορών υψηλής συγκέντρωσης IgG αντι-dsdna, που εκτελέστηκαν µε το Διαλύτη δειγµάτων. Τα αποτελέσµατα αυτής της µελέτης ανακεφαλαιώνονται στον ακόλουθο πίνακα. Δείγµα Συντελεστής αραίωσης Μετρηθείσα συγκέντρωση (UI/mL) Αναµενόµενη συγκέντρωση (UI/mL) Ανάκτηση % % ,1 - (100) 2 157,6 160,6 98,1 4 82,2 80,3 102,4 8 44,8 40,1 111, ,6 20,1 112, ,3 - (100) 2 199,0 173,2 114,9 4 96,3 86,6 110,9 8 48,5 43,3 112, ,1 21,6 111,6 Σε κάθε περίπτωση καθίσταται απαραίτητο να υπογραµµιστεί ότι δεν µπορούν όλοι οι οροί, όταν µετρώνται σε διαφορετικές αραιώσεις, να παρέχουν γραµµικά αποτελέσµατα στο εσωτερικό του εύρους της δυνατότητας µέτρησης, καθώς το αποτέλεσµα εξαρτάται όχι µόνο από τη συγκέντρωση αλλά και από τη συγγένεια των αντισωµάτων, καθώς και τη συγγένεια των αντισωµάτων που υπάρχουν στο δείγµα. Ευαισθησία της ανάλυσης H ευαισθησία της ανάλυσης του κιτ ZENIT RA dsdna IgG, εκφρασµένη ως όριο ανίχνευσης (Limit of Detection LoD: δηλ. η µικρότερη ποσότητα προσδιοριζόµενης ουσίας που η µέθοδος είναι σε θέση να µετρήσει) αξιολογήθηκε χρησιµοποιώντας ένα πρωτόκολλο µε βάση τις κατευθυντήριες γραµµές του εγγράφου EP17-A των Clinical and Laboratory Standards (CLSI) και τον τύπο υπολογισµού LoD = LoB + C β SD s (όπου LoB παριστά την τιµή του Limit of Blank, SD s την εκτιµώµενη τυπική απόκλιση της κατανοµής του δείγµατος χαµηλής συγκέντρωσης και C β απορρέει από το 95 εκατοστηµόριο της τυπικής καµπύλης του Gauss). Χρησιµοποιήθηκαν 4 δείγµατα χαµηλής συγκέντρωσης προσδιοριζόµενης ουσίας, προσδιορισµένα εις απλούν µε δύο διαφορετικές παρτίδες αντιδραστηρίων σε 30 διαφορετικά πειράµατα. Το όριο ανίχνευσης του κιτ ZENIT RA dsdna IgG προέκυψε ίσο µε 24,2 UA/mL. Oι τιµές του ορίου ανίχνευσης, µαζί µε ζητήµατα κλινικού χαρακτήρα και αποτελέσµατα σύγκρισης µε µεθόδους αναφοράς συνέβαλλαν στον προσδιορισµό της τιµής αποκοπής (cut-off). IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 13 από 16

14 Ειδικότητα της ανάλυσης: Παρεµβολές Μία µελέτη που βασίστηκε στις κατευθυντήριες γραµµές του εγγράφου EP7-A2 των CLSI κατέδειξε ότι οι αποδόσεις του προσδιορισµού δεν επηρεάζονται από την παρουσία των δυνητικών ουσιών παρεµβολής που αναγράφονται στον ακόλουθο πίνακα, έως τη συγκέντρωση του πειράµατος. Δυνητικές ουσίες παρεµβολής Ελεύθερη χολερυθρίνη Συζευγµένη χολερυθρίνη Αιµοσφαιρίνη Λιπαρά οξέα Μέγιστη συγκέντρωση του πειράµατος 20 mg/dl 28 mg/dl 500 mg/dl 3000 mg/dl Αντενδείκνυται ωστόσο η χρήση λιπαιµικών δειγµάτων, δειγµάτων µε αιµόλυση ή θολών δειγµάτων. Ειδικότητα της ανάλυσης: Διασταυρούµενες αντιδράσεις Για την αξιολόγηση των δυνητικών διασταυρούµενων αντιδράσεων του αντιγόνου, που χρησιµοποιείται για την ευαισθητοποίηση των µικροσωµατιδίων, διεξήχθη µια µελέτη µε 18 δείγµατα, όλα µε υψηλά επίπεδα άλλων αυτοαντισωµάτων και αρνητικά για IgG αντι-dsdna IgG. Τα χρησιµοποιούµενα δείγµατα υποδιαιρέθηκαν ως εξής: SS-A (2), SS-B (2), Jo-1 (1), Scl 70 (2), Cenp B (2), πυρηνιακά (1), β 2 -GPI/CL IgG (1), γλιαδίνη/t-tg (2), RF (2), MPO (1), PR3 (1) και CCP (1). Η µελέτη δεν έδειξε καµία σηµαντική διασταυρούµενη αντίδραση του αντιγόνου σε στερεά φάση µε τα άλλα αυτοαντισώµατα. Επίδραση κορεσµού σε υψηλές δόσεις Μερικές ανοσολογικές µέθοδοι που χρησιµοποιήθηκαν για τον προσδιορισµό των δειγµάτων που περιέχουν την προσδιοριζόµενη ουσία σε εξαιρετικά υψηλές συγκεντρώσεις µπορεί να δώσουν φαινοµενικά επίπεδα προσδιοριζόµενης ουσίας χαµηλότερης τιµής (φαινόµενο hook). Η µέθοδος που χρησιµοποιείται στο κιτ ZENIT RA dsdnα IgG, όντας µια µέθοδος µε δύο επωάσεις, δεν εµφανίζει αυτό το φαινόµενο. Ένα δείγµα µε εξαιρετικά υψηλή συγκέντρωση (άνωθεν του εύρους µέτρησης) IgG αντι-dsdna επιβεβαίωσε την απουσία επιπέδου hook έως τη συγκέντρωση των 1984 UA/mL. Σχετική Ευαισθησία και Ειδικότητα Η παρουσία αντισωµάτων IgG αντι-dsdna προσδιορίστηκε χρησιµοποιώντας το κιτ ZENIT RA dsdna IgG και µια µέθοδο προσδιορισµού ELISA του εµπορίου σε 447 δείγµατα. 13 δείγµατα έδωσαν αντικρουόµενα αποτελέσµατα µεταξύ του προσδιορισµού ZENIT RA και του προσδιορισµού ELISA του εµπορίου. IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 14 από 16

15 Η σχετική συµφωνία προέκυψε εποµένως ότι είναι ίση µε 97,1 % (434/447). Η σχετική ευαισθησία προέκυψε ότι είναι ίση µε 89,3 % (50/56). Η σχετική ειδικότητα προέκυψε ότι είναι ίση µε 98,2 % (384/391). Πρότυπο και ορός αναφοράς Το σύστηµα είναι βαθµονοµηµένο έναντι του πρώτου διεθνούς προτύπου Wo/80 (WHO). Η ποσότητα των αντισωµάτων αντι-dsdnα IgG που υπάρχουν στο δείγµα ANA HUMAN REFERENCE SERUM # 1 (CDC, Αρ. καταλ. IS2072, Αρ. παρτίδας ) που µετρήθηκε µε το κιτ ZENIT RA dsdna IgG, βρέθηκε ότι είναι 226 UA/mL. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. CA von Mühlen, EM Tan. Autoantibodies in the diagnosis of systemic rheumatic diseases. Sem Arthr Rheum 1995; 24: RL Humbel. Auto-immunité, auto-anticorps et maladie. In : Humbel RL, ed. Autoanticorps et maladies autoimmunes, Paris,France : Edition Scientifiques Elsevier; 1997: PN Hollingsworth, SC Pummer, RL Dawkins. Antinuclear antibodies. In : Peter JB, Shoenfeld Y, eds. Autoantibodies. Amsterdam, The Netherlands : Elsevier Science BV; 1996: CA Slater, RB Davis, RH Shmerling. Antinuclear antibodies testing. A study of clinical utility. Arch Int Med 1996; 156: RL Humbel. Detection of antinuclear antibodies by immunofluorescence. In : van Venrooij, Maini RN eds. Manual of biological markers of disease. Dordrecht, the Netherlands : Kluwer; 1993: A2: National Committee for clinical Laboratory Standarditation. Quality assurance for the indirect immunofluorescence test for autoantibodies to nuclear antigen ( IF-ANA ). Approved guideline. Wayne, PA: NCCLS I/LA2-A, vol 16( 11 ); RJT Smeenk. Detection of antibodies to dsdna : current insights into its relevance. Clin Exp Rheumatol 2002; 20: DB Stollar, G Zon, RW Pastor. A recognitation site on synthetic helical oligonucleotides for monoclonal anti-native DNA autoantibodies. Proc Natl Acad Sci USA 1986; 83: DS Pisetsky, CF Reich. The influence of DNA size on the binding of anti-dna antibodies in the solid and fluid phase. Clin Immunol Immunopathol 1994; 72; M Hochberg. Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus. Arthritis Rheum 1997; 40: IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 15 από 16

16 11. AJG Swaak, R Smeenk. Detection of anti-dsdna as a diagnostic tool: a prospective study in 441 non systemic lupus erythematosus ( SLE ) patients with anti-dsdna antibody ( anti-dsdna ). Am Rheum Dis 1985; 44: TECHNOGENETICS S.r.l. Viale Casiraghi Sesto San Giovanni (MI) - Italia GREECE Διανέµεται στην ΕΛΛΑΔΑ από την MENARINI ΔΙΑΓΝΩΣΤΙΚΑ ΙΑΤΡΙΚΑ ΟΡΓΑΝΑ ΑΕΒΕ Λ. Βουλιαγµένης Αργυρούπολη Αθήνα Τηλ.: Φαξ: Γραµµή Εξυπηρέτησης Διαβήτη: mendiagr@otenet.gr IFU003ZENIT RA-Έκδοση: Ιουνίου 2010 Σελ. 16 από 16