In Vitro жағдайындағы диагностикада қолдануға арналған BD MAX System жүйесімен бірге қолдануға арналған

Transcript

1 MAX CT/GC In Vitro жағдайындағы диагностикада қолдануға арналған P0212(02) BD MAX System жүйесімен бірге қолдануға арналған Қазақ I ҚОЛДАНУ МАҚСАТЫ BD MAX System жүйесінде орындалғандай BD MAX CT/GC талдауына Chlamydia trachomatis (CT) және Neisseria gonorrhoeae (GC) түрлерін дәрігермен жиналған әйел эндоцервикалды жағынды үлгілерінде, емделушімен жиналған вагиналды жағынды үлгілерінде (клиникалық орнатуда) және ер мен әйел зәрінің үлгілерінде ДНҚ сапалық, тікелей түрде анықтауға арналған автоматты ДНҚ шығару және нақты уақытты полимеразды тізбекті реакция (ПТР) кіреді. Талдау хламидиялық несеп жолы ауруын немесе гонококк несеп жолы ауруын тексеретін асимптоматикалық және симптоматикалық тұлғалармен пайдалануға арналған. ҚЫСҚА СИПАТТАМАСЫ МЕН ПРОЦЕДУРАНЫҢ ТҮСІНІКТЕМЕСІ Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы жыл сайын Chlamydia trachomatis түріне байланысты 105,7 миллион жаңа инфекция жағдайларын анықтайды. 1 Chlamydia trachomatis жыныстық инфекциясы жамбас органдарының қабынуы, жатыр сыртындағы жүктілік, бедеулік және салмағы төмен балалардың туылуы сияқты әйелдердегі ұзақ мерзімді асқынуға себеп болады. Хламидиялы асимптоматикалық инфекция ерлер және әйелдерде жалпы болып табылады және ауруды анықтау инфекция қаупінде қарастырылатын топтарды сканерлеуге негізделеді. Chlamydia trachomatis инфекциялы ерлердің елу пайызы асимптоматикалық болып табылады және емделу жоқ жағдайда инфекция ауыр уретритке немесе эпидидимитке және созылмалы проктитке әкелуі мүмкін. Chlamydia trachomatis тасымалдануы сексуалдық байланыс арқылы орын алады, бірақ конъюнктивитке немесе хламидиялық пневмонияға әкелетін туу арнасында орын алуы мүмкін. 2 Chlamydia trachomatis - антигенге тән бояу қолданылған кезде флюоресценция микроскобымен жасуша ортасында қаралатын сипаттық жасуша ішіндегі қоспаларды құратын грам бойынша теріс, ерекше жағдайды талап ететін жасуша ішіндегі бактерия. 3 Chlamydia trachomatis инфекциясы диагностикасының ағымдағы әдістері тікелей гибридтеу немесе күшейту арқылы нуклеин қышқылын анықтауға ұқсас орта мен иммунологиялық талдаулардан тұрады. Тарихи орта Chlamydia trachomatis анықтауға арналған алтын стандарт болғандықтан, күшейтілген әдістердің кеңейтілген сезгіштігі адоптация артуына әкеліп, инфекция жағдайлары санының артуына әкеледі. Дүниежүзілік денсаулық сақтау ұйымы жыл сайын Neisseria gonorrhoeae түріне байланысты 106,1 миллион жаңа инфекция жағдайларын анықтайды. 1 Әйелдер инфекциясы көбінесе асимптоматикалық болып табылады және емдеусіз күйде қалса, жамбас органдарының қабынуы, жатыр сыртындағы жүктілік, бедеулік әрі созылмалы жамбас қабынуына әкелуі мүмкін. Ерлерде ауыр уретрит немесе дизурия симптомдары елеулі асқыну орын алмай тұрып емдеуде тұлғалардың инфекциялануына әкелуі мүмкін. Neisseria gonorrhoeae тасымалдануы сексуалдық байланыс арқылы орын алады, бірақ конъюнктивитке әкелетін туу арнасында орын алуы мүмкін. Neisseria gonorrhoeae - Грам бойынша боялмайтын (теріс), оксидаза ферменттері бар диплококки бактериялары. Олар әдетте нейтрофилдердің ішінде болатын Грам бойынша боялған жағындылар мен уретралық іріңдер ішінде байқалады. Мекендейтін орнынан тыс ұзақ өмір сүрмейтіндіктен және құрғақ орта немесе жоғары температуралар сияқты жағымсыз қоршаған орта жағдайларына сезімтал болғандықтан, Neisseria gonorrhoeae ортасын анықтау қиын болуы мүмкін. 1

2 ПРОЦЕДУРАНЫҢ ПРИНЦИПТЕРІ BD MAX UVE Specimen Collection Kit (үлгілер топтамасының жинағы) арқылы емделушіге үлгі жиналып, мақсатты нуклеин қышқылдары нысанының тұтастығын қамтамасыз етуге анықталған уақыт пен температура жағдайларында зертханаға тасымалданады. Сынама қысқаша айналдырылып, шырышты еріту, үлгі матрицасын гомогендеу және мақсатты ағзаларды еріту мақсатында BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) құралында қыздырылады. Автоматты түрде суытудан кейін BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) бекіткіш қақпақпен қайта жабылады. Жұмыс тізімі құрылғаннан кейін, BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) түтіктері, құрамдас көрсеткіш сызықтары және BD MAX PCR Cartridge (ПТР картирджі) BD MAX System жүйесіне жүктеледі. BD MAX System жүйесі үлгі дайындауды, оған қоса мақсатты ағза лизисін, ДНҚ экстракциясын және концентрациясын, реагентті қайта гидрадтауды, нақты уақыттағы ПТР пайдаланып мақсатты нуклеин қышқылының реттілігін күшейту және анықтауды автоматтандырады. BD MAX System жүйесі нәтижелердің талдауын автоматты түрде орындайды. Талдауға экстракция түтігінде бар болатын ішкі үлгі өңделуін басқару кіреді. Үлгіні өңдеуді басқару құралы ДНҚ шығару қадамдарын, термиялық цикл қадамдарын, реагентті біріктіру және ингибиторлық заттардың бар болуын бақылайды. Келесі жасуша лизисінен кейін шығарылған нуклеин қышқылдары магниттік байланыс гранулаларына жинақталады. Гранулалар байланысқан нуклеин қышқылдарымен бірге жуу буферін пайдаланып жуылады және нуклеин қышқылдары элюциялау буферінің қызуымен элюцияланады. Элюцияланған ДНҚ залалсыздандыру буферімен залалсыздандырылады және ПТР реагенттерін қайта гидраттау үшін Мастер-микс түтігіне тасымалданады. Қалпына келтірілгеннен соң BD MAX System жүйесінде ПТР-ға дайын, құрамында бөлініп алынған нуклеин қышқылдары бар ерітіндінің бекітілген көлемі BD MAX PCR Cartridge (ПТР картриджі) құралына тамызылады. BD MAX PCR Cartridge (ПТР картриджі) картриджіндегі микроклапандар күшейту микстурасын қамту үшін ПТР басталғанға дейін жүйе тарапынан тығыздалып, булануға және ластануға мүмкіндік берілмейді. Күшейтілген ДНҚ нысаналары гидролиз (TaqMan) зондтарын пайдалану арқылы анықталады, олар бір жағы флуоресцентті репортер бояумен (флюорофор) әрі екінші жағы сөндіргіш фрагментімен белгіленген. Түрлі флюорофорлармен белгіленген зондтар BD MAX System жүйесінің үш түрлі оптикалық арналарында талданатын заттар мен Сынаманы өңдеу басқару құралын анықтау үшін пайдаланылады. Зондтар өздерінің түпкілікті күйлерінде болған кезде, флюорофор флюоресценциясы сөндіргішке жақын болғандықтан сөндіріледі. Дегенмен мақсатты ДНҚ бар болған кезде зондтар өздерінің комплементарлы бірізділіктеріне гибридтейді және ДНҚ үлгісі бойындағы тізбекті синтездегендей, ДНҚ полимеразасының 5 3 экзонуклеазалық әрекеті арқылы гидролизденеді. Нәтижесінде флюорофорлар сөндіргіш молекулаларынан бөлінеді және флюоресценсия таратылады. BD MAX System жүйесінде осы сигналдар әр циклде бақыланады және сапалы сынақ нәтижелерін (мысалы, оң немесе теріс) беру үшін реакцияның соңында деректерге түсініктеме беріледі. РЕАГЕНТТЕР ЖӘНЕ МАТЕРИАЛДАР Сілтеме: Жинақтың құрамы Саны BD MAX CT/GC Master Mix (Мастер-микс) (B1) Пеште құрғатылған ПТР Мастер-микс құрамында ДНҚ полимеразасы, нуклеотидтер және CT/GC тән молекулярлық праймерлері және үлгі өңделуін басқарудың арнайы молекулярлық зондымен бірге праймерлер бар. BD MAX CT/GC Құрамында барлық сұйық реагенттер бар құрамдас көрсеткіш сызықтары мен бір рет пайдаланатын тамшуыр ұштары үлгіні өңдеу және ДНҚ шығарып алу үшін қажет. BD MAX CT/GC Extraction Tubes (экстракция түтіктері) (B2) Құрамында ДНҚ магниттік тектестік гранулалары, протеаза реагенттері және үлгі өңделуін басқару элементі бар пешпен құрғатылған тұғыр 24 сынақ (2 x 12 түтік) 24 сынақ 24 сынақ (2 x 12 түтік) Диафрагмалы қақпақтар 25 ҚАЖЕТТІ, БІРАҚ ЖИНАҚҚА КІРМЕЙТІН ЖАБДЫҚТАР МЕН МАТЕРИАЛДАР BD MAX System жүйесі (BD, кат ) BD Pre-warm Heater Kit (алдын ала жылыту құралының жинағы) (BD Heater (жылыту құралы) және BD MAX Rack (сөре)) (BD, кат ) BD MAX PCR Cartridges (ПТР картридждері) (BD, санат ) BD MAX UVE Specimen Collection Kit (үлгілер топтамасының жинағы) (BD, кат ) BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) (BD, кат ) Vortex Genie 2 (VWR*, кат. : ) немесе баламасы Ұнтақсыз, бір реттік қолғаптар 2

3 ЕСКЕРТУЛЕР МЕН САҚТЫҚ ШАРАЛАРЫ BD MAX CT/GC талдауы in vitro жағдайында диагностикада қолдануға арналған. Егер емделушімен жиналған вагиналды жағындылар немесе эндоцервикалды жағындылар BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тасымалданса, оларды 2 30 C ауқымында сақтаған кезде 2 сағат ішінде тасымалдануы қажет. Алдымен, 2 30 C ауқымында сақталған зәр үлгілері топтама шынысынан BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне 4 сағат жинау ішінде тасымалдануы қажет немесе 24 сағат ішінде 2 8 C ауқымында сақталуы қажет. Жарамдылық мерзімі біткен реагенттерді және/немесе материалдарды пайдаланбаңыз. Егер әкелу кезінде белгіні герметизациялайтын шеткі қорап сынық болса, жинақты пайдаланбаңыз. Егер қорғаныш дорбалар ашық болса немесе жеткізу кезінде сынған болса, реагенттерді пайдаланбаңыз. Егер құрғатқыш жоқ болса немесе реагент дорбаларының ішінде сынған болса, реагенттерді пайдаланбаңыз. Құрғатқышты реагент дорбаларынан алып тастамаңыз. Қорғаныш дорбаларын әрбір қолданыстан кейін сыдырма ілгекпен жылдам жабыңыз. Герметизациялаудан бұрын дорбаларда қалған артық ауаны шығарыңыз. Реагенттерді қыздырудан және ылғалданудан қорғаңыз. Ылғалдық созылған ықпалы өнімділікке әсер етеді. Егер фольга сынған немесе зақымдалған болса, реагенттерді пайдаланбаңыз. Әртүрлі дорбалардағы және/немесе жинақтардағы және/немесе партиялардағы реагенттерді араластырмаңыз. Қақпақтарды ауыстырып алмаңыз немесе қайта пайдаланбаңыз, себебі кірлену орын алып және сынақ нәтижелерін жоққа шығаруы мүмкін. Сұйықтықтарды дұрыс толтыру үшін құрамдас көрсеткіш сызықтарын тексеріңіз (сұйықтықтар түтіктердің түбінде екеніне көз жеткізіңіз) (2-суретті қараңыз). Барлық тамшуыр ұштары бар екеніне көз жеткізу үшін құрамдас көрсеткіш сызықтарын тексеріңіз (2-суретті қараңыз). Мастер-микс секілді химиялық ерітінділерді пайдалану кезінде сақ болыңыз, себебі экстракция түтігі штрих-кодының оқылымы өзгеріп кетуі мүмкін. Осы талдауды дұрыс орындау үшін жақсы зертханалық техника қажет. Осы сынақтың жоғары аналитикалық сезгіштігінен барлық материалдар мен реагенттердің тазалығын сақтау үшін өте сақ болу керек. Басқа ПТР сынақтары зертхананың ұқсас жалпы аймағында жүргізілген жағдайларда, BD MAX CT/GC талдауы сынауы үшін қажетті басқа реагенттердің және BD MAX System жүйесінің ластанбағанын мұқият тексеру қажет. Реагенттердің микробтармен және дезоксирибонуклеазамен (DNase) ластануын ешқашан болдырмаңыз. Реагенттермен және картридждермен жұмыс істеуден бұрын қолғаптарды ауыстыру қажет. Ампликондар қоршаған ортаны ластамауы үшін, BD MAX PCR Cartridges (ПТР картриджері) картридждерін пайдаланғаннан кейін бөлшектерге бөлмеңіз. BD MAX PCR Cartridges (ПТР картридждері) картридждерінің тығыздағыштары ластануды болдырмауға арналған. Ластау қаупін төмендету үшін зертханада қоршаған ортаны бақылап тұру қажет. BD MAX CT/GC талдауының үлгіні тасымалдауға және сақтауға ұсынылған уақыт пен температура ауқымынан тыс орындалуы жарамсыз нәтижелер беруі мүмкін. Белгіленген тұрақтылық уақыты ауқымдарында орындалмаған талдауларды жаңа үлгімен қайталау керек. Қосымша басқару элементтерін жергілікті, мемлекеттік, аймақтық және/немесе федералдық ережелердің немесе аккредитациялық ұйымдардың нұсқауларына немесе талаптарына сәйкес сынауға болады. CLSI M29 4 құжаты мен микробиологиялық және биомедициналық зертханалардағы биологиялық қауіпсіздік құжаттарында көрсетілгендей, үлгілерді олар инфекциялық ретінде қарастырып, әрдайым қауіпсіз зертхана процедураларына сәйкес қолданыңыз. 5 Барлық реагенттермен жұмыс істеу кезінде қорғаныш киім мен бір рет пайдаланатын қолғаптарды киіңіз. Сынақты орындаған соң қолдарыңызды әбден жуыңыз. Ауызыңыздан тамызбаңыз. Үлгілер немесе жинақ реагенттері қолданылатын аумақтарда темекі шекпеңіз, ішпеңіз, шайнамаңыз немесе тамақтанбаңыз. Қолданылмайтын реагенттер мен қоқыстарды жергілікті, мемлекеттік, аймақтық және/немесе федералдық ережелерге сәйкес тастаңыз. Қосымша ескертулерді, сақтық шаралары мен процедураларды BD MAX System жүйесін пайдалану бойынша нұсқаулықтан 6 немесе BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) 7 пайдаланушы нұсқаулығынан қараңыз. 3

4 САҚТАУ ЖӘНЕ ТҰРАҚТЫЛЫҚ Үлгі тұрақтылығы Бастапқы зәр үлгілері жинау ыдысынан BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне 2 30 C ауқымында сақталған кезде 4 сағат жинау ішінде немесе 2 8 C ауқымында сақталған кезде 24 сағат жинау ішінде тасымалдануы қажет. Дәрігермен жиналған эндоцервикалды жағынды және емделушімен жиналған вагиналды жағынды үлгілері дереу немесе BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне жинағаннан кейін 2 30 C ауқымында сақталған жағдайда екі сағат ішінде тасымалдануы қажет. BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) жүйесіндегі зәр және жағынды үлгілері тасымалдау және сақтау барысында -20 C және 30 C ауқымында сақталуы керек. Қатты қыздырудан қорғаңыз. 1-кесте: BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тасымалдау алдындағы үлгі тұрақтылығы Үлгі тұрақтылығы Үлгі түрі Тасымалдау және сақтау температурасы 2 30 C 2 8 C BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тасымалдау алдында 4 сағат 24 сағат Вагиналды/эндоцервикалды жағынды 2 сағат 2 сағат BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) жүйесіндегі сынама 2 30 C ауқымында 5 күнге дейін сақтауға болады немесе 30 күнге дейін -20 C көрсеткішінде алдын ала жылыту алдында сақтауға болады. 2-кесте: Алдын ала жылыту алдындағы BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіндегі сынама тұрақтылығы Сынама тұрақтылығы BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесінде (алдын ала жылыту алдында) Үлгі түрі және вагиналды/ эндоцервикалды жағынды Тасымалдау және сақтау температурасы 2 30 C -20 C 5 күн 30 күн Алдын ала жылытылған кезде 2 30 C жағдайында сақталған сынамалар (2-кестені көріңіз) қосымша 5 күн 2 30 C ауқымында немесе BD MAX System жүйесінде сынау алдында -20 C көрсеткішінде (3-кестені көріңіз) қосымша 30 күн сақтауға болады. Алдын ала жылытылған кезде -20 C жағдайында (2-кестені көріңіз) сақталған сынамаларды BD MAX System жүйесінде сынау алдында -20 C -30 C көрсеткішінде (3-кестені көріңіз) қосымша 5 күн сақтауға болады.. ЕСКЕРТПЕ: Біріктірілген сынама тұрақтылығы [алдын ала жылыту алдында (2-кесте) және алдын ала жылытудан кейін (3-кесте)] жалпы 35 күннен аспайды. 3-кесте: Алдын ала жылытудан кейін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіндегі сынама тұрақтылығы Сынама тұрақтылығы Алдын ала жылытудан кейін (бастапқыда сақталған 2 30 C) Алдын ала жылытудан кейін (бастапқыда сақталған -20 C) Үлгі түрі және вагиналды/ эндоцервикалды жағынды және вагиналды/ эндоцервикалды жағынды Сақтау температурасы 2 30 C -20 C 5 күн 30 күн 5 күн 5 күн 4

5 Реагент тұрақтылығы BD MAX CT/GC құрамдас бөліктері берілген жарамдылық мерзімі аяқталғанға дейін 2 25 C аралығындағы температурада тұрақты болады. Жарамдылық мерзімі біткен құрамдас бөліктерді пайдаланбаңыз. BD MAX CT/GC Master Mix (Мастер-микс) және Extraction Tubes (экстракция түтіктері) тығыздап жабылған дорбаларда жеткізіледі. Өнімді ылғалдықтан сақтау үшін ашылғаннан кейін жедел түрде қайта жабыңыз. Реагент түтіктері алғаш ашылып, дорба қайта жабылғаннан кейін 7 күнге дейін 2 25 C аралығындағы температурада тұрақты болады. Мастер-микс 4-кесте: Реагент тұрақтылығы Жинақтың құрамдас бөліктері Температура Тұрақтылық Герметизацияланған дорба (ашылмаған) 2 25 C көрсетілген жарамдылық мерзіміне дейін Ашылған дорба (қайта герметизацияланған) 2 25 C 7 күн a Extraction түтігі Герметизацияланған дорба (ашылмаған) 2 25 C көрсетілген жарамдылық мерзіміне дейін Ашылған дорба (қайта герметизацияланған) 2 25 C 7 күн a Құрамдас көрсеткіш сызығы 2 25 C көрсетілген жарамдылық мерзіміне дейін a Дорбаның бастапқы герметизациясы бүлінгеннен кейін, ішінде құрғатқышы бар дорбаны әр қолданыстан кейін сыдырма ілгекпен жауып, тиісті температурада сақтаңыз. ҚОЛДАНУҒА АРНАЛҒАН НҰСҚАУЛАР Үлгіні тасымалдау/дайындау Үлгілер тек BD MAX UVE Specimen Collection Kit (үлгілер топтамасының жинағы) және келесі BD MAX UVE Specimen Collection Kit (үлгілер топтамасының жинағы) бумасының нұсқауларына сәйкес жиналуы керек. BD MAX UVE Specimen Collection Kit (үлгілер топтамасының жинағы) құрамдастарын және үлгілерді өңдеу кезінде таза қолғаптарды киіңіз. Қолғапқа үлгі тиіп кетсе, басқа үлгілерді ластамау үшін оны бірден ауыстырыңыз. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне әлі тасымалданбаған үлгілер үшін төмендегі нұсқаулар бойынша сынақ сынамаларын дайындаңыз. үлгісін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігіне тасымалдау: ЕСКЕРТПЕ: топтама шынысынан BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне 2 30 C ауқымында сақтаған кезде 4 сағат жинау ішінде тасымалдануы қажет немесе 2 8 C ауқымында сақтаған кезде 24 сағат сақталуы қажет. 1. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) қақпағын шешіңіз. Топтама шынысында зәр үлгісін мұқият араластыру үшін градусқа бөлінген тасымалдау тамшуырын пайдаланып, шамамен 1 мл мөлшерін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тасымалдаңыз. ЕСКЕРТПЕ: Тасымалдау тамшуырындағы градус бөліктерін нұсқаулық ретінде пайдаланыңыз. Түтікті артық толтырмаңыз немесе аз толтырмаңыз. 2. Тасымал тамшуырын биологиялық қоқыс контейнеріне лақтырыңыз. ЕСКЕРТПЕ: Тасымалдау тамшуыры тек бір үлгіге қолданылады. 3. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесінде қақпақты берік бекітіңіз. 4. Үлгі мен реагент жақсы араласу үшін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігін 3 4 шайқаңыз. 5. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігінде емделушінің идентификаторын және жиналған күнін/ уақытын көрсетіңіз. ЕСКЕРТПЕ: Түтіктегі штрих-кодтар алдын бөгемеңіз. 6. BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) операциясын жалғастырыңыз. Эндоцервикалды немесе вагиналды жағынды үлгілерін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігіне тасымалдау: ЕСКЕРТПЕ: Жағындылар жағынды қалқанынан BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне дереу (қалаулы) немесе 2 30 C ауқымында сақталған жағдайда 2 сағат жинау ішінде тасымалдануы қажет. ЕСКЕРТПЕ: Жағынды үлгісін тасымалдау жұмыс ағынының сын 1-суреттен қараңыз. 1. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) қақпағын шешіп, ұшы түбінде болуы үшін жағындыны түтікке толығымен салыңыз. 2. Жағындыны қақпағынан ұстап, жағынды білігін көрсеткіш белгісінен мұқият сындырыңыз. Түтік мазмұнының шашырауын немесе ластануына болдырмау үшін абай болыңыз. 3. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесінде қақпақты берік бекітіңіз. 4. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігінде емделушінің ақпаратын және жиналған күнін/уақытын көрсетіңіз. ЕСКЕРТПЕ: Түтіктегі штрих-кодтар алдын бөгемеңіз. 5. BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) операциясын жалғастырыңыз. 5

6 1-сурет: Жағынды үлгілерін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігіне тасымалдау 1. Ұшы түбінде болуы үшін жағындыны толығымен түтікке салыңыз. 2. Көрсеткіш белгісінде білікті абайлап тоқтатыңыз. 3. Түтіктің қақпағын мықтап қайта жабыңыз. 4. Түтікті емделуші ақпаратымен белгілеңіз. BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) операциясы (Пайдалану нұсқаулары үшін BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) нұсқаулығын 7 қараңыз) 1. Run (Іске қосу) жұмыс тізімі экранынан <BD MAX CTGC 59> опциясын таңдаңыз (Run > Worklist (Іске қосу > Жұмыс тізімі)). 2. Sample Tube (Сынама түтік) өрісіндегі әрбір BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) UVE штрих-кодын штрих-кодты немесе емделушінің деректер алу ұқсатқыш идентификаторын сканерлеу құралы арқылы енгізіңіз. 3. BD MAX CT/GC жинағы үшін Run > Kit Inventory (Іске қосу > Жинақ қоймасы) экранынан топтама нөмірін (топтаманы бақылау үшін) қолмен немесе штрих-кодты портативті сканермен сканерлеу арқылы енгізіңіз. ЕСКЕРТПЕ: Configuration > System (Конфигурация > Жүйе) ішінде топтама нөмірін бақылау қосылғанын тексеріңіз 4. Күтудегі жұмыстың тізімі енді жаңартылады және жоспарланған алдын ала жылыту қадамының құсбелгісі көрсетіледі. 5. Күтудегі жұмыс тізіміндегі құсбелгіні белгілеу арқылы сынаманы жобалаңыз. 6. BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) белгісіндегі көрсету терезесін зәр немесе жағынды үлгісі түтікке қосылғанын тексеру үшін пайдаланыңыз. 7. BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) жүйесіне жүктеу алдында сынаманы араластыру үшін қысқа уақыт шайқаңыз. 8. BD MAX Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) тақтасының UVE (үлгіден тұратын) BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) құралына салыңыз. Станция 24 үлгі буферінің түтігіне дейін сәйкестендіріңіз. 9. BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) құралындағы қақпақты жауып, Run > Worklist (Іске қосу > Жұмыс тізімі) тақтасында «Pre-warm» (Алдын ала жылыту) таңдаңыз. ЕСКЕРТПЕ: Түтіктердің BD Pre-warm rack (алдын ала жылыту сөресі) ішіне салынғанын және осы сөре Prewarm Heater (алдын ала жылыту құралы) ішіне жүктелгенін растап, алдын ала жылыту хабарын бастау үшін OK түймесін таңдаңыз. Белгілі бір BD MAX CT/GC жылыту және суыту профилі іске қосылады. 6

7 10. Алдын ала жылыту сеансының аяқталу уақыты күй экранында көрсетіледі. 11. Pending (Күтудегі) жұмыс тізімі экранындағы таңдалған сынама/сынақ «Pre-warm Complete» (Алдын ала жылыту аяқталды) ретінде көрсетілмейді.» 12. Алдын ала жылыту қадамын сәтті орындағаннан кейін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) құралын BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) ішінен алып, келесіні дайындаңыз: ЕСКЕРТПЕ: BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) өңдеу кезінде таза қолғаптарды киіңіз. Жағынды сынамалары: ЕСКЕРТПЕ: Егер жағынды қақпақпен жабылмаса, тесілетін көк диафрагмалы қақпақпен жабу алдында стерилді әдістермен жағындыны мұқият жойыңыз. a) BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) қақпағын ашып, артық сұйықтықты шығару үшін, жағындыны түтіктің жиегіне жайлап басыңыз. b) BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесінен жағындыны/қақпақ тіркесін шығарып тастаңыз. c) Түтікті тесуге болатын көк диафрагмалы қақпақпен жабыңыз. сынамалары: a) BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесінен қатты қақпақты шығарып тастаңыз. b) Түтікті тесуге болатын көк диафрагмалы қақпақпен жабыңыз. 13. BD MAX System Operation (жүйе операциясы) қадамына BD MAX System Rack (жүйе сөресі) орнату үшін өтіңіз. ЕСКЕРТПЕ: Сәтсіз алдын ала жылыту қадамы оқиғасында BD MAX System Timer Status (жүйе таймерінің күйі) құралы Failed / Cooling (сәтсіз/суыту) хабарын көрсетеді. BD MAX System жүйесінде сынау алдында алдын ала жылыту қадамын қайталау қажет. ЕСКЕРТПЕ: BD MAX CT/GC талдауы жоғарыдағы алдын ала жылыту қадамы сәтті аяқталғаннан кейін орындалады. Алдын ала жылыту циклі сәтті аяқталған үлгілер қайта сынау талап етілмейтін жағдайда қайта жылыту талап етілмейді. ЕСКЕРТПЕ: Бірнеше BD MAX System және BD Pre-warm Heater (алдын ала жылыту құралы) құралдарынан тұратын зертханалар үшін сынамалар алдын ала жылыту қадамы орындалған бірдей BD MAX System жүйесінде сыналуы немесе қайта сыналуы қажет. ЕСКЕРТПЕ: Алдын ала жылыту қадамын сәтті орындаудан кейін және BD MAX System жүйесін сынау алдында сынама тұрақтылығы үшін 3-кестені қараңыз. Сақталған сынамаларды орта температурасына теңестіріп, BD MAX System жүйесінде сынау алдында қысқа уақыт шайқау арқылы араластырыңыз. Егер сынамалар алдын ала жылыту қадамынан кейін дереу сыналса, BD MAX System жүйесін сынау алдында шайқау талап етілмейді. BD MAX System жүйесінің жұмысы ЕСКЕРТПЕ: Толық нұсқауларды BD MAX System жүйесінің пайдаланушы нұсқаулығынан 6 қараңыз (Жұмыс бөлімі). ЕСКЕРТПЕ: Бір (1) Мастер-микс (B1), бір (1) экстракция түтігі (B2) және бір (1) құрамдас көрсеткіш сызығы әрбір үлгіге талап етіледі. Егер сырттан басқару құралдары сыналса, бір (1) BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) және бір (1) диафрагмалы қақпақ әрбір басқару құралына талап етіледі (мысалы, сыртқы оң басқару құралы үшін біреу және теріс басқару құралы үшін біреу). BD MAX материалдардың қажетті санын қорғаныс қалталардан немесе қораптардан бір шетке алып қойыңыз. Ашық мастер-микс немесе экстракция түтігінің қалталарын сақтау үшін артық ауаны шығарыңыз және сыдырма ілгекті пайдаланып жабыңыз, құрғатушы буманың пакетте екендігін қамтамасыз етеді. 1. BD MAX System жүйесін қосыңыз (әлі қосылмаған болса) және <user name> (пайдаланушының аты) мен <password> (құпиясөз) енгізіп кіріңіз. 2. Реагенттермен және картридждермен жұмыс істеуден бұрын қолғаптарды ауыстыру қажет. 3. Құрамдас көрсеткіш сызықтарының қажет санын BD MAX CT/GC жинағынан шығарып алыңыз. Барлық сұйықтықтар түтіктердің түбінде болуын тексеру үшін әрбір құрамдас көрсеткіш сызығын жайлап қатты бетке басыңыз. 4. Экстракция түтігінің (түтіктерінің) және мастер-микс түтігінің (түтіктерінің) қажетті санын қорғаныс қалталардан жойыңыз. Артық ауаны шығарыңыз және қалталарды сыдырма ілгекпен жабыңыз. 5. Әр сынаманы сынау үшін А сөресінің 1 позициясынан басталатын BD MAX System Rack (жүйе сөресі) сөресіне бір (1) құрамдас көрсеткіш сызығын орналастырыңыз. 6. Бір (1) экстракция түтігін (ақ түсті фольга) 1 позициядағы әрбір құрамдас көрсеткіш сызығына 2-суретте көрсетілгендей сырт еткізіп бекітіңіз. 7. Бір (1) мастер-микс түтігін (жасыл түсті фольга) 2 позициядағы әрбір құрамдас көрсеткіш сызығына 2-суретте көрсетілгендей сырт еткізіп бекітіңіз. 7

8 2-сурет: BD MAX CT/GC Master Mix (Мастер-микс) және Extraction Tubes (экстракция түтіктері) құрамдас көрсеткіш сызықтарына бекіту қадамдарындағыдай құрамдас көрсеткіш сызықтарына сәйкес BD MAX System Rack (жүйе сөресі) сөрелеріне BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) салыңыз. 9. BD MAX PCR Cartridge (ПТР картриджі) картридждерінің қажетті санын BD MAX System жүйесіне орналастырыңыз (3-суретті қараңыз). Әрбір картридж 24 сынамадан тұрады. BD MAX System жүйесі әрбір сынақ топтамасы үшін BD MAX PCR Cartridge (ПТР картриджі) картриджінде позиция мен жолды автоматты түрде таңдайды. Барлық жолақтар зарарсыздандырылғанша BD MAX PCR Cartridges (ПТР картридждері) бірнеше рет пайдалануға болады. BD MAX PCR Cartridges (ПТР картридждері) қолданысын арттыру үшін 2000 сынама режимі арқылы жолақ тағайындаулары үшін Worklist (Жұмыс тізімі) қойындысы астынан Run Wizard (Шеберді қосу) опциясын таңдаңыз. Қосымша мәліметтер үшін BD MAX System пайдаланушы нұсқаулығын 6 көріңіз. 3-сурет: ПТР картридждерін салу 10. Сөрелерді BD MAX System жүйесіне салу (4-суретті қараңыз). 8

9 A жағы B жағы 4-сурет: Сөре(лер)ді BD MAX System жүйесіне жүктеу 11. BD MAX System жүйесінің есігін жабыңыз және өңдеуді бастау үшін <Start >(Іске қосу) түймесін басыңыз. 12. Сынақ топтамасының соңында дереу нәтижелерді тексеріңіз немесе BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) 3-кестеде көрсетілген температураға және уақытқа сәйкес нәтижелер тексерілгенге дейін сақтаңыз. ЕСКЕРТПЕ: Егер септа қақпағы сынақ топтама барысында зақымдалса, үлгіні сақтаудан бұрын оны жаңасымен ауыстырыңыз. ЕСКЕРТПЕ: Дайындалған BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) алдын ала жылытудан кейінгі сынама тұрақтылығы үшін 3-кестені қараңыз. Анықталмаған (IND), шешілмеген (UNR) немесе аяқталмаған (INC) нәтиже алған жағдайда немесе сыртқы басқару элементінде қате орын алса, BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) қайталау сынағын осы мерзімде орындау қажет (Қайталама сынақ процедурасы бөлімін қараңыз). САПА ТЕКСЕРУІ Сапа тексеру процедуралары талдаудың орындалуын бақылайды. Зертханалар толық және аналитикалық процес тиімділігін бақылау мақсатында жергілікті, провинциялық, мемлекеттік және федералдық немесе ел реттеулеріне немесе аккредитация ұйымдарына сәйкес басқару материалдарын сынау нөмірін, түрін және жиілігін анықтауы мүмкін. Жалпы сапаны басқару нұсқауын пайдаланушы CLSI MM3 8 және EP12 9 құжаттарынан қарай алады. 1. Сырттан басқару материалдарын BD қамтамасыз етпейді. Сырттан оң және теріс басқарулар BD MAX System жүйесінің бағдарламалық құралы арқылы үлгінің сынақ нәтижесін талқылау мақсатында пайдаланылмайды. Сырттан басқарулар емделуші нұсқалары ретінде қарастырылады. (Сырттан басқарудың талдау нәтижесін талқылау үшін Нәтижелер түсіндірмесі бөліміндегі кестені қараңыз.) 2. BD MAX System жүйесі бойынша әрбір зертхана параметрінде тиісті тексеру процесіне қол жеткізгенге дейін, күн сайын кем дегенде бір (1) сырттан оң басқару және бір (1) сырттан теріс басқару орындалуы керектігі ұсынылады. Бақылау сынақтың азайтылған жиілігі қолданылатын ережелерге сай болу керек. 3. Сырттан оң басқару элементі маңызды реагент сәтсіздігін бақылауға қолданылады. Сырттан теріс басқару элементі реагентті не қоршаған ортаның бүлінуін (немесе ауысатын қалдығын) мақсатты нуклеин қышқылы арқылы анықтау үшін пайдаланылады. 4. Пайдаланушыға зертхана үшін ең тиімді сапаны бақылау бағдарламасын таңдауға мүмкіндік беру үшін, сырттан басқару элементтерінің әртүрлі түрлері ұсынылады. a. Сырттан теріс басқару: BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) ұйым қоспасынсыз немесе теріс болатын бастапқыда сипатталған сынамасыз. BD компаниясы бақылау дайындығы нәтижесінде ықтимал бүлінуді азайту үшін Сыртқы оң бақылау құралынан бұрын Сыртқы теріс бақылау құралының дайын болғанын ұсынады. b. Сырттан оң басқару: Коммерциялық тұрғыдан қол жетімді материал [мысалы, Chlamydia trachomatis серовар H (ATCC VR-879), Neisseria gonorrhoeae (ATCC 19424)] немесе бастапқыда сипатталған белгілі сынама оң болуы керек. Сырттан басқару суспензияларын дайындау үшін ATCC жүйесінен алынған Chlamydia trachomatis серовар H және Neisseria gonorrhoeae қорлары соңғы бастапқы жасуша қорының 10-6 ерітіндісі үшін фосфатты буферлі тұз ерітіндісінде гидратталуы ұсынылады. Neisseria gonorrhoeae ATCC жасуша қорлары тез ериді және еріту алдында 1 мл фосфат буферлі тұзбен қайта гидратталуы қажет. Одан кейін ерітіндіні 150 мкл мөлшерін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) ішіне Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae 10-7 концентрациясын тасымалдау арқылы ерітіңіз. 5. Барлық сырттан басқару элементтері күтілген нәтижелер беруге тиіс (сырттан оң басқару үшін оң, сырттан теріс басқару үшін теріс және сәтсіз үлгіні өңдеуді басқару құралдары жоқ (шешілмеген немесе анықталмаған нәтижелер)). 6. Оң сынақ нәтижесін беретін сырттан теріс басқару үлгінің өңделуін және ластану мәселелерін көрсетеді. Теріс сынақ нәтижесін беретін сырттан оң басқару үлгінің өңделуін және/немесе ластану мәселелерін көрсетеді. Өңдеу/дайындау әдісінің үлгісін қарап шығыңыз. 9

10 7. Шешілмеген, анықталмаған немесе аяқталмаған сынақ нәтижелерін беретін сырттан басқару реагенттің немесе BD MAX System жүйесінің сәтсіздігін көрсетеді. Кез келген қате хабарламаларды BD MAX System жүйесінің мониторынан тексеріңіз Ескертулер мен қателік кодтарын талқылау үшін BD MAX System жүйесінің пайдаланушы нұсқаулығындағы 6 Жүйе қателігінің сы бөлімін қараңыз. Егер ақаулық шешілмесе, жабық дорбадағы реагенттерді немесе жаңа талдау жинағын пайдаланыңыз. 8. Әрбір экстракция түтігінде үлгі өңделуін басқару элементі бар, ол синтетикалық мақсатты ДНҚ реттілігі бар плазмида болып табылады. Сынаманы өңдеу құралы ДНҚ ұсталуының тиімділігін, жуылуын және үлгіні өңдеу қадамдарының барысында элюциялауын бақылайды, сондай ақ, ПТР талдаулар кезінде ДНҚ күшейту және анықтау тиімділігін бақылайды. Егер үлгіні өңдеуді басқару құралы нәтижесі қабылдау шарттарына сәйкес келмесе, үлгі нәтижесі Шешілмеген ретінде хабарланады; дегенмен, кез келген оң (ОҢ) талдау нәтижесі хабарланады және ешбір нысаны ТЕРІС ретінде аталмайды. Шешілмеген нәтиже үлгіге қатысты ингибиция немесе реагент ақаулығы анықтамасы болып табылады. Шешілмеген болып есептелетін кез келген үлгіні төмендегі Қайталама сынақ процедурасы бөліміне сәйкес қайталаңыз. НӘТИЖЕЛЕРДІ ТАЛДАУ Нәтижелерді BD MAX System жүйесінің мониторының Results (Нәтижелер) терезесінің Results (Нәтижелер) қойындысынан көруге болады. BD MAX System жүйесі сынақ нәтижелерін автоматты түрде талдайды. Нысанның және SPC күшейту күйіне негіздеп, сынақ нәтижесін NEG (теріс), POS (оң) немесе UNR (шешілмеген) ретінде атауға болады. IND (анықталмаған) немесе INC (аяқталмаған) нәтижелер BD MAX System жүйесінің сәтсіздігінен болады. Нәтижелер келесі шешім қабылдау алгоритмдеріне негізделеді. Берілген талдау нәтижесі CT POS CT NEG CT UNR GC POS GC NEG GC UNR IND INC 5-кесте: BD MAX CT/GC Result Interpretation (нәтиже талдауы) Нәтижені талдау Chlamydia trachomatis ДНҚ анықталған Жоқ Chlamydia trachomatis ДНҚ анықталған Шешілмеген ингибиторлық сынама немесе реагент сәтсіздігі; мақсатты немесе үлгіні өңдеуді басқару құралын күшейтусіз Neisseria gonorrhoeae ДНҚ анықталған Жоқ Neisseria gonorrhoeae ДНҚ анықталған Шешілмеген ингибиторлық сынама немесе реагент сәтсіздігі; мақсатты немесе үлгіні өңдеуді басқару құралын күшейтусіз BD MAX System жүйесінің сәтсіздігінен анықталмаған нәтиже (ескерту немесе қателік кодтары бар) a Аяқталмаған сынақ топтамасы (ескерту немесе қателік кодтары бар) a a Ескертулер мен қателік кодтарын талқылау үшін BD MAX System жүйесінің пайдаланушы нұсқаулығындағы 10 Ақаулықтарды жою бөлімін қараңыз. ҚАЙТАЛАМА СЫНАҚ ПРОЦЕДУРАСЫ ЕСКЕРТПЕ: Үлгі көлемі бір қайталама сынақ үшін BD MAX System жүйесіндегі BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтігінен қол жетімді. 3-кестеде көрсетілген уақыт шкалалары ішінде сынақты қайталау орындалуы қажет. Сақталған сынамаларды орта температурасына теңестіріп, BD MAX System жүйесінде сынау алдында қысқа уақыт шайқау арқылы араластырыңыз. BD MAX System жүйесінің жұмысы бөлімінен бастап сынамаларды қайта сынаңыз. ЕСКЕРТПЕ: Жаңа үлгілер ұқсас сынақ топтамасында қайталама үлгілермен сыналуы мүмкін. ШЕШІЛМЕГЕН НӘТИЖЕ Шешілмеген нәтижелер, үлгімен байланыстырылатын ингибицияны немесе реагент сәтсіздігін болдырмайтын тиісті нысан немесе сынаманы өңдеуді басқару құралы күшейту оқиғасында алынуы мүмкін. Егер сынаманы өңдеуді басқару құралы күшейтілмесе, сынама ШЕШІЛМЕГЕН ретінде хабарланады; дегенмен, кез келген оң (ОҢ) талдау нәтижелері хабарланады және ешбір нысана ТЕРІС ретінде аталмайды. BD MAX System жүйесі әрбір нысан нәтижелерін жекелей хабарлайды және ШЕШІЛМЕГЕН нәтиже бір немесе бірнеше BD MAX CT/GC нысандары үшін қамтылуы мүмкін. Толық ШЕШІЛМЕГЕН жағдайда барлық нысандарда ШЕШІЛМЕГЕН нәтиже болған орында сынақты қайталау қажет. Жартылай ШЕШІЛМЕГЕН жағдайда бір немесе бірнеше нысанда ОҢ нәтиже және басқа нысандарда ШЕШІЛМЕГЕН нәтиже болған кезде сынақтың төмендегідей қайталануы талап етіледі. Кейбір жағдайларда ерекше нәтижелер бастапқыда ОҢ ретінде хабарланған осы нысандарға сынақ қайталанған кезде қаралуы мүмкін. Ағымдағы зертханалық процедураларға сәйкес тиісті процедураларды орындаңыз. Үлгілер өздеріне қатысты BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтік(тер)інен жоғарыда анықталған мерзім ішінде қайталануы мүмкін. BD MAX System жүйесінің жұмысы бөлімін орындап қайта қосыңыз. 10

11 АНЫҚТАЛМАҒАН НӘТИЖЕ Анықталмаған нәтижелерді жүйе сәтсіздігі орын алған жағдайда алуға болады. Үлгілер өздеріне қатысты BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтік(тер)інен жоғарыда анықталған мерзім ішінде қайталануы мүмкін. BD MAX System жүйесінің жұмысы бөлімін орындап қайта қосыңыз. Ескерту мен қателік код хабарламаларын талқылау үшін BD MAX System жүйесінің пайдаланушы нұсқаулығын 6 қараңыз (Ақаулықтарды жою бөлімі). АЯҚТАЛМАҒАН НӘТИЖЕ Аяқталмаған нәтижелер үлгі дайындау не ПТР сәтсіз орындалған оқиғасында алынуы мүмкін. Үлгілер өздеріне қатысты BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) түтік(тер)інен жоғарыда анықталған мерзім ішінде қайталануы мүмкін. BD MAX System жүйесінің жұмысы бөлімін орындап қайта қосыңыз. Ескерту мен қателік код хабарламаларын талқылау үшін BD MAX System жүйесінің пайдаланушы нұсқаулығын 6 қараңыз (Ақаулықтарды жою бөлімі). СЫРТТАН БАСҚАРУ АҚАУЫ Сыналған кезде сырттан басқару элементтері күтілген нәтижелерді беру керек. Егер үлгілерді сырттан басқарудың қате нәтижесі себебінен қайталау қажет болса, олар жоғарыда анықталған рұқсат етілген мерзім ішінде жаңадан дайындалған сыртқы басқарулармен өздерінің BD MAX UVE Sample Buffer Tubes (үлгі буферінің түтіктері) түтіктерінен қайталау керек. BD MAX System жүйесінің жұмысы бөлімін орындап қайта қосыңыз. ПРОЦЕДУРА ШЕКТЕУЛЕРІ BD MAX CT/GC талдауы тек BD MAX System жүйесінде білікті қызметкерлермен қолданылады. BD MAX CT/GC талдауымен зәрді және емделушімен жиналған вагиналды жағынды үлгілерін жинау және сынау зәр жолының инфекциясының диагнозын белгілеу үшін жатыр мойыншығын бақылауды және эндоцервикалды сынама сынағы ауыстыруға арналмаған. Цервицит, уретрит, несеп жолының инфекциялары және жыныс мүшесінің инфекциялары басқа себептерден пайда болуы мүмкін немесе бір уақыттағы инфекциялар орын алуы мүмкін. Ер және әйел зәрін сынауға арналған BD MAX CT/GC талдауы бірінші кездейсоқ зәр үлгілерінде орындалуы керек. Клиникалық бағалау кезінде зәр көлемдерін 20 мл мөлшерден 60 мл мөлшерге дейін өнімділік талдауларына қосылды. Көбірек зәр көлемінің еру әсерлері талдау сезгіштігін азайтуы мүмкін. Ағынның ортаңғы бөлігі сияқты басқа айнымалылардың әсерлері анықталмады. BD MAX CT/GC талдауы үйде емделушілермен вагиналды жағынды үлгілері топтамасы үшін тексерілмеді. BD MAX CT/GC талдауының кедергісі VCF* контрацептив көбігі/концептрол* контрацептив гелі/ацикловир ( 25 мкл/мл), вагиналды анти қабыну кремі/метронидазол ( 2,5 мкл/мл) және қоспасыз қан ( 0,66 мкл/мл) бар орында вагиналды жағынды үшін қарастырылды. BD MAX CT/GC талдауы бар кедергі қоспасыз қан (>0,04% к/к) бар болғанда зәр матрицасында қарастырылды. Жыныс мүшесінің іріңі, жағындыларды пайдалану сияқты басқа ықтимал айнымалылардың және үлгіні жинау айнымалыларының әсерлері анықталмады. Көп диагностикалық сынақтарда секілді, BD MAX CT/GC талдауы нәтижелерін дәрігерге жеткілікті басқа зертханалық және клиникалық мәліметтерге байланысты түсіндіру керек. Қате нәтижелер үлгіні тиісті емес түрде жинау, өңдеу, сақтау, техникалық қате, үлгіні араластырып алу салдарынан не үлгідегі ағзалардың саны сынақтың аналитикалық сезгіштігінен төмен болу себебінен пайда болуы мүмкін. Егер BD MAX CT/GC талдауының нәтижесі АНЫҚ ЕМЕС, АЯҚТАЛМАҒАН немесе ШЕШІЛМЕГЕН (бір немесе бірнеше нысанға арналған) болса, сынақты қайталау керек. Оң BD MAX CT/GC талдауының нәтижесі өмірге қабілеттілігі бар ағзалардың бар болу мүмкіншілігін міндетті түрде білдірмейді. Оң нәтиже - Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae ДНҚ бар екендігінің көрсеткіші. BD MAX CT/GC талдауы терапияның сәттілігін немесе сәтсіздігін бағалау үшін пайдалануға болмайды, өйткені Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae нуклеин қышқылдары антимикробтық терапиядан кейін қалады. Жалған теріс нәтижелер нуклеин қышқылын дұрыс емес жинаудан, үлгілерді тасымалдау не сақтау себебінен жоғалту немесе дұрыс емес бактериялық жасушалар лизисі себебінен пайда болуы мүмкін. ПТР күшейтетін ингибиторлары бар сынамаларды анықтауға көмек көрсету үшін үлгі өңделуін басқару сынаққа қосылды. Егер нуклеин қышқылы үлгілерді дұрыс жинамау, тасымалдамау немесе сақтамау себебінен жоғалғанын не дұрыс бактериялық жасушалар лизисі дұрыс жасалғанын білдірмейді. BD MAX CT/GC талдауы күдікті жыныстық қатынасқа мәжбүрлеуді немесе басқа медициналық-заңдық көрсеткіштерді бағалау үшін пайдаланбау керек. Қате позитив немесе қате негатив нәтижелер қате медициналық, әлеуметтік немесе физиологиялық салдарларға әкелуі мүмкін кез келген жағдайда қосымша сынау ұсынылады. Барлық in vitrо диагностикалық сынақтар секілді, оң және теріс прогностикалық мағыналар таратылуына тығыз байланысты болады. BD MAX CT/GC орындалуы таралудың және толтырудың сыналғанына байланысты болуы мүмкін. BD MAX CT/GC талдауына BD MAX System жүйесінен үш (3) оптикалық арнаны пайдалану үшін қажет; FAM арнасы (475/520 нм), ROX арнасы (585/630 нм) және VIC арнасы (530/565 нм). Қалған оптикалық арнасының орындалуы осы талдаумен анықталмаған. ПТР-негізделген барлық in vitro диагностикалық сынақтар, талдаудың айқындау шегінен немесе АШ төмен мақсаттың өте төмен деңгейлері анықталуы мүмкін, бірақ нәтижелердің өрбу қабілеті жоғары болмауы мүмкін. Бұл сынақ сапалы әрі сандық мәндерді қамтамасыз етпейді және бар ағзалардың санын анықтамайды. 11

12 КҮТІЛГЕН МӘНДЕР Таралу Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae бойынша оң нәтиже көрсететін сынамалар таралуы емделуші популяциясына байланысты. Факторларға емхана түрі, емделуші жасы, қауіп факторлары, жынысы және сынақ әдісі кіреді. BD MAX CT/GC/TV клиникалық зерттеудегі (шілде 2013 сәуір 2014) жалпы Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae әйел нысаны пациенттің инфекция жұғу күйі (PIS) деңгейлерінде үйлесімді болды. Ер нысандары үшін жалпы 833 Chlamydia trachomatis және 835 Neisseria gonorrhoeae нысаны PIS деңгейлерінде үйлесімді болды. Бұл нысандар 8 географиялық орыннан алынды. Үш орын ғана әйел нысанына қосылды. 6-кесте: BD MAX CT/GC клиникалық зерттеу таралуы Жыныс күй Орын Chlamydia trachomatis Neisseria gonorrhoeae Әйел Еркек Жоқ Иә Жоқ Иә 1 16,0% (4/25) 8,0% (2/25) 2 8,5% (5/59) 0,0% (0/59) 3 5,3% (11/208) 1,0% (2/208) 4 2,3% (2/88) 2,3% (2/88) 5 1,4% (1/72) 0,0% (0/72) 6 3,6% (1/28) 0,0% (0/28) 7 6,2% (14/225) 3,6% (8/225) 8 4,7% (3/64) 4,7% (3/64) 5,3% (41/769) 2,2% (17/769) 1 14,3% (8/56) 3,6% (2/56) 2 9,4% (10/106) 2,8% (3/106) 3 7,0% (14/199) 1,0% (2/199) 4 5,6% (2/36) 0,0% (0/36) 5 5,4% (11/202) 1,0% (2/202) 6 2,9% (2/70) 1,4% (1/70) 7 12,1% (38/314) 5,1% (16/314) 8 10,5% (9/86) 0,0% (0/86) 8,8% (94/1 069) 2,4% (26/1 069) Жалпы 7,3% (135/1 838) 2,3% (43/1 838) 1 11,1% (2/18) 0,0% (0/18) 2 15,8% (19/120) 0,8% (1/121) 4 8,8% (3/34) 0,0% (0/34) 6 10,0% (6/60) 1,7% (1/60) 7 19,0% (40/210) 1,4% (3/210) 15,8% (70/442) 1,1% (5/443) 1 34,9% (30/86) 36,0% (31/86) 2 24,2% (37/153) 22,1% (34/154) 4 50,0% (4/8) 25,0% (2/8) 6 22,9% (8/35) 14,3% (5/35) 7 27,5% (30/109) 29,4% (32/109) 27,9% (109/391) 26,5% (104/392) Жалпы 21,5% (179/833) 13,1% (109/835) 12

13 Оң және теріс болжамдық мән Болжалды оң болжамдық мән (PPV) және теріс болжамдық мән (NPV) есептелді және 7 8 кестелерінде for Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae үшін көрсетіледі. Бұл есептеулер емделушінің инфекциялы күйімен салыстырғанда айрықшалыққа және жалпы сезгіштік пен болжамды таратылуына негізделеді. 7-кесте: Пациенттің инфекция жұғу күйімен салыстырылған Chlamydia trachomatis болжалды оң және теріс болжамдық мәндер Таралу Сезгіштік Ерекшелік PPV NPV 1% 54,3% 100,0% 2% 70,6% 99,9% 5% 86,1% 99,8% 10% 96,2% (535/556) 99,2% (5 446/5 491) 92,9% 99,6% 20% 96,7% 99,1% 30% 98,1% 98,4% 40% 98,7% 97,5% 50% 99,2% 96,3% 8-кесте: Пациенттің инфекция жұғу күйімен салыстырылған Neisseria gonorrhoeae болжалды оң және теріс болжамдық мәндер Таралу Сезгіштік Ерекшелік PPV NPV 1% 86,4% 100,0% 2% 92,8% 99,9% 5% 97,1% 99,8% 10% 96,9% (219/226) 99,8% (5 814/5 823) 98,6% 99,7% 20% 99,4% 99,2% 30% 99,6% 98,7% 40% 99,8% 98,0% 50% 99,8% 97,0% ӨНІМДІЛІК ЕРЕКШЕЛІКТЕРІ BD MAX CT/GC талдауын бағалау үшін клиникалық сынаққа қатысқан Солтүстік Америкадағы сегіз географиялық жағымсыз клиникалық орын. Зерттеу бөлігінде OB/GYN бір мың тоғыз жүз (1 900) әйел нысаны және 857 әйел нысаны, жыныстық түрде тасымалданған ауру (STD) және топты жоспарлау клиникасы есепке алынды. Егер дизурия, несеп шығысы, қабыну, иіс, коиталды ауру/ауырлық/қан кету, тестикулярлық немесе ума ауруы/үрлеу, қалыпсыз вагиналды шығыс немесе жамбас/ несеп/аднексалды аурур сияқты белгілер хабарланса, нысандар симптоматикалық ретінде жіктеледі. Егер нысандарда осы белгілер хабарланбаса, олар асимптоматикалық ретінде жіктелді. Соңғы деректер талдауына Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae талдаулары үшін бағаланатын әйел нысаны кіреді. Әйелдер үшін Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae талдаулары үшін 843 нысан бағаланды. Осы үйлесімді нысандардан Chlamydia trachomatis өнімділігі емделушімен жиналған вагиналды жағындыны, эндоцервикалды жағындыны, әйел зәрін және 803 ер зәрі үлгісін есептеді. Neisseria gonorrhoeae бағаланатын үлгілеріне емделушімен жиналған вагиналды жағынды, эндоцервикалды жағынды, әйел зәрі және 812 ер зәрі үлгісі кіреді. Ерекшеліктер қосылған бірақ келесілермен шектелмейді: есепке алу мәселелері, жоқ үлгілер, тасымалдау қателері, жинау қателері, жөнелту қателері, өңдеу қателері немесе BD MAX System пайдалану қателері. Бес үлгі әрбір әйел нысанынан жиналды. BD MAX CT/GC талдауында және екі анықтамалық зәр үлгісін жинау құрылғысында/сынағында BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне жиналды және тамызылды. Бір емделушімен жиналған вагиналды жағынды үлгісі BD MAX CT/GC талдауында сынау үшін BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тасымалданды. Үш кездейсоқ таңдалған эндоцервикалды жағынды үлгісі BD MAX CT/GC талдауында және екі анықтамалық зәр үлгісін жинау құрылғысында/сынағында BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне жиналды. Екі үлгі әрбір үйлесімді ер нысанынан жиналды. BD MAX CT/GC талдауында және екі анықтамалық зәр үлгісін жинау құрылғысында/сынағында BD MAX UVE Sample Buffer Tube (үлгі буферінің түтігі) жүйесіне тамызылды. Бір уретралды жағынды үлгісі жиналып, анықтамалық әдіспен сыналды. BD MAX CT/GC өнімділігі PIS жүйесімен салыстырылып есептелді (9-10 кестелерін қараңыз). PIS анықтаушы салыстырмалы анықтамалық әдістер әйелдер үшін екі түрлі коммерциялық түрде қолжетімді NAAT (Нуклеин қышқылдарын күшейту сынақтары) үш сынағынан және Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae кемінде 2 түрлі үлгі түрінен үш NAAT тұрады. Егер кемінде екі түрлі анықтамалық NAAT оң болса, анықталған нысан Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae түрлерімен инфекцияланған. Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae әйел орнына тән инфекциялар Chlamydia trachomatis немесе Neisseria gonorrhoeae PIS бойынша бер үлгі орны (зәр немесе жағынды) оң болған жағдайда, бірақ басқа орны болмаған жағдайда орын алды. Екі NAAT жағындысы нәтижесі теріс болған жағдайда және екі NAAT зәр нәтижесі оң болған жағдайда зәрге тән инфекция орын алады. Керісінше, эндоцервикалды орынға тән инфекция эндоцервикалды нәтижелер екі NAAT үшін оң болған жағдайда және зәр нәтижелері теріс болған жағдайда орын алды. Өнімділік деректері орынға тән инфекция талдауымен және талдауынсыз хабарланады. 13

14 Жалпы Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae бағаланатын сынақ нәтижесі BD MAX CT/GC талдауы арқылы PIS жүйесімен салыстырғанда BD MAX CT/GC талдауының өнімділігін есептеуге пайдаланылды. Үлгі түрі және симптоматикалық күй бойынша сезгіштік пен айрықшылық кестелерінде көрсетіледі. Пациенттің инфекция жұғу күйі Оң Теріс Белгісіз 9-кесте: Әйел нысандарына арналған Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae PIS анықтайтын анықтамалық нәтижелер a Эндоцервикалды жағынды NAAT 1 NAAT 2 Эндоцервикалды жағынды b - b + b - b c + c - c + c Белгісіз Белгісіз +/- +/- +/- +/- Белгісіз Белгісіз - Белгісіз Белгісіз Белгісіз Белгісіз - Белгісіз Белгісіз Белгісіз Белгісіз Белгісіз - a PIS кестесі барлық ықтимал тіркесімдерден тұрмайды. b Жағынды, тек инфекция: Жағынды үлгілері үшін инфекцияланған және зәр үлгілері үшін инфекцияланбаған. c, тек инфекция: үлгілері үшін инфекцияланған және жағынды үлгілері үшін инфекцияланбаған. Пациенттің инфекция жұғу күйі Оң Теріс Белгісіз 10-кесте: Ер нысандарына арналған Chlamydia trachomatis және Neisseria gonorrhoeae PIS анықтайтын анықтамалық нәтижелер a a PIS кестесі барлық ықтимал тіркесімдерден тұрмайды. NAAT 1 NAAT 2 NAAT 3 Уретралды жағынды Белгісіз Белгісіз +/- Белгісіз +/- +/- Белгісіз Белгісіз - Белгісіз Белгісіз + - Белгісіз + Белгісіз Белгісіз - Белгісіз + Белгісіз Белгісіз +/- +/- 14

15 11-кесте: Chlamydia trachomatis Емделушінің инфекцияланған күйімен салыстырғандағы жалпы өнімділік Жыныс Әйел Еркек Үлгі түрі Вагиналды жағынды Эндоцервикалды жағынды күй Сезгіштік 95% CA Ерекшелік 95% СА 100,0% (38/38) (90,8%, 100,0%) 98,6% (683/693) (97,4%, 99,2%) 98,9% (88/89) (93,9%, 99,8%) 98,7% (914/926) (97,7%, 99,3%) 99,2% (126/127) (95,7%, 99,9%) 98,6% (1 597/1 619) (98,0%, 99,1%) 97,4% (37/38) (86,5%, 99,5%) 99,1% (686/692) (98,1%, 99,6%) 96,5% (83/86) (90,2%, 98,8%) 99,4% (918/924) (98,6%, 99,7%) 96,8% (120/124) (92,0%, 98,7%) 99,3% (1 604/1 616) (98,7%, 99,6%) 94,9% (37/39) (83,1%, 98,6%) 99,7% (695/697) (99,0%, 99,9%) 91,0% (81/89) (83,3%, 95,4%) 99,4% (927/933) (98,6%, 99,7%) 92,2% (118/128) (86,2%, 95,7%) 99,5% (1 622/1 630) (99,0%, 99,8%) 98,6% (69/70) (92,3%, 99,7%) 99,7% (357/358) (98,4%, 100,0%) 95,3% (102/107) (89,5%, 98,0%) 99,3% (266/268) (97,3%, 99,8%) 96,6% (171/177) (92,8%, 98,4%) 99,5% (623/626) (98,6%, 99,8%) Жалпы 96,2% (535/556) (94,3%, 97,5%) 99,2% (5 446/5 491) (98,9%, 99,4%) Жыныс Әйел 12-кесте: Chlamydia trachomatis Ортаға тән емделушінің инфекцияланған күйімен салыстырғандағы жалпы өнімділік Үлгі түрі Вагиналды жағынды Эндоцервикалды жағынды күй Сезгіштік 95% СА Ерекшелік 95% СА 100,0% (38/38) (90,8%, 100,0%) 98,6% (683/693) (97,4%, 99,2%) 98,9% (86/87) (93,8%, 99,8%) 98,5% (914/928) (97,5%, 99,1%) 99,2% (124/125) (95,6%, 99,9%) 98,5% (1 597/1 621) (97,8%, 99,0%) 97,4% (37/38) (86,5%, 99,5%) 99,1% (686/692) (98,1%, 99,6%) 98,8% (83/84) (93,6%, 99,8%) 99,4% (920/926) (98,6%, 99,7%) 98,4% (120/122) (94,2%, 99,5%) 99,3% (1 606/1 618) (98,7%, 99,6%) 97,4% (37/38) (86,5%, 99,5%) 99,7% (696/698) (99,0%, 99,9%) 96,4% (80/83) (89,9%, 98,8%) 99,3% (932/939) (98,5%, 99,6%) 96,7% (117/121) (91,8%, 98,7%) 99,5% (1 628/1 637) (99,0%, 99,7%) Жалпы 98,1% (361/368) (96,1%, 99,1%) 99,1% (4 831/4 876) (98,8%, 99,3%) 15

16 13-кесте: Neisseria gonorrhoeae Емделушінің инфекцияланған күйімен салыстырғандағы жалпы өнімділік Жыныс Әйел Еркек Үлгі түрі Вагиналды Эндоцервикалды үлгі күй Сезгіштік 95% СА Ерекшелік 95% СА 92,9% (13/14) (68,5%, 98,7%) 99,9% (716/717) (99,2%, 100,0%) 96,0% (24/25) (80,5%, 99,3%) 99,8% (988/990) (99,3%, 99,9%) 94,9% (37/39) (83,1%, 98,6%) 99,8% (1 704/1 707) (99,5%, 99,9%) 92,9% (13/14) (68,5%, 98,7%) 100,0% (715/715) (99,5%, 100,0%) 96,0% (24/25) (80,5%, 99,3%) 99,9% (978/979) (99,4%, 100,0%) 94,9% (37/39) (83,1%, 98,6%) 99,9% (1 693/1 694) (99,7%, 100,0%) 86,7% (13/15) (62,1%, 96,3%) 99,4% (717/721) (98,6%, 99,8%) 100,0% (26/26) (87,1%, 100,0%) 99,9% (995/996) (99,4%, 100,0%) 95,1% (39/41) (83,9%, 98,7%) 99,7% (1 712/1 717) (99,3%, 99,9%) 80,0% (4/5) (37,6%, 96,4%) 100,0% (424/424) (99,1%, 100,0%) 100,0% (102/102) (96,4%, 100,0%) 100,0% (281/281) (98,7%, 100,0%) 99,1% (106/107) (94,9%, 99,8%) 100,0% (705/705) (99,5%, 100,0%) Жалпы 96,9% (219/226) (93,7%, 98,5%) 99,8% (5 814/5 823) (99,7%, 99,9%) Жыныс Әйел 14-кесте: Neisseria gonorrhoeae Орынға тән емделушінің инфекцияланған күйімен салыстырғандағы жалпы өнімділік Үлгі түрі Вагиналды жағынды Эндоцервикалды жағынды күй Сезгіштік 95% СА Ерекшелік 95% СА 92,3% (12/13) (66,7%, 98,6%) 99,7% (716/718) (99,0%, 99,9%) 96,0% (24/25) (80,5%, 99,3%) 99,8% (988/990) (99,3%, 99,9%) 94,7% (36/38) (82,7%, 98,5%) 99,8% (1 704/1 708) (99,4%, 99,9%) 100,0% (13/13) (77,2%, 100,0%) 100,0% (716/716) (99,5%, 100,0%) 96,0% (24/25) (80,5%, 99,3%) 99,9% (978/979) (99,4%, 100,0%) 97,4% (37/38) (86,5%, 99,5%) 99,9% (1 694/1 695) (99,7%, 100,0%) 92,9% (13/14) (68,5%, 98,7%) 99,4% (718/722) (98,6%, 99,8%) 100,0% (26/26) (87,1%, 100,0%) 99,9% (995/996) (99,4%, 100,0%) 97,5% (39/40) (87,1%, 99,6%) 99,7% (1 713/1 718) (99,3%, 99,9%) Жалпы 96,6% (112/116) (91,5%, 98,7%) 99,8% (5 111/5 121) (99,6%, 99,9%) 16