المكافحة االحيائية لمرض موت باد ارت الطماطة المتسبب عن الفطر Pythium aphanidermatum

Transcript

1 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 المكافحة االحيائية لمرض موت باد ارت الطماطة المتسبب عن الفطر Pythium aphanidermatum ناهدة مهدي صالح عدنان عبدهللا عيسى قسم وقاية النبات / كلية الزراعة / جامعة بغداد المستخلص اجريت هذه الد ارسة لتقويم كفاءة الخميرتين Saccharomyces cerevisiae و Kluyveromyces ضد الفطر Pythium aphanidermatum المسبب لمرض سقوط الباد ارت في الطماطة. عزل الفطر من باد ارت طماطة مصابة وشخص واختبرت مقدرة عزالته االمراضية على باد ارت طماطة واختيرت العزلة االكثر امراضية في هذه الدراسة. اختبرت فعالية الخميرتين.S cerevisiae و.K ضد الفطر الممرض على الوسط الزرعي مستخلص البطاطا والدكتروز واالكر )PDA( في اطباق بتري. عمل خط من مزرعة للخميرة على الوسط الزرعي بمسافة 5 سم من حافة الطبق ووضع في الجانب المقابل قرص قطر 1.5 سم من مزرعة حديثة للفطر على بعد 4.5 سم من حافة الطبق. حضنت االطباق بدرجة 55 م + 5 وحسبت نسبة التثبيط. اختبر تأثير راشح الخميرتين في وزن الكتلة الحيوية للفطر في الوسط الزرع السائل. جرى تقييم لكفاءة الخميرتين في مقاومة مرض موت الباد ارت تحت ظروف البيت الزجاجي باضافة 51 مل / كغم تربة في اصص بالستيكية بحجم لقاح وحدة تكوين مستعمرة / مل للخميرة.S cerevisiae و وحدة تكوين مستعمرة / مل للخميرة.K قبل ستة ايام من الز ارعة وعند الز ارعة بالحجم نفسه. غمرت البذور بعالق الخميرة.S cerevisiae بحجم لقاح وحدة تكوين مستعمرة / بذرة وبعالق الخميرة.K بحجم لقاح وحدة ملوثة بالفطر الممرض بمعدل 1 بذور / اصيص. بلغت فعالية الخميرتين.S cerevisiae و.K ضد الفطر.P aphanidermatum على الوسط الزرعي و % 45.3 على الترتيب بعد ثالثة ايام من التحضين في. ادت الخميرة.S cerevisiae بالت اركيز 1. و 1.5 و 1.4 و 1.3 و 1.5 غم / لتر والخميرة.K بحجم لقاح خلية/مل الى تثبيط كامل لنمو الفطر الممرض. اظهر راشح الخميرتين تأثي ار في خفض وزن الكتلة الحيوية للفطر الممرض اذ بلغ 41.3 و 21. ملغم للخميرتين.S cerevisiae و.K على الترتيب قياسا ب 32.4 ملغم في المقارنة. تفوقت معاملة التربة والبذور بعالق الخميرة.K بالتركيز خلية / مل و خلية / بذرة على الترتيب على بقية المعامالت في خفض نسبة موت باد ارت الطماطة قبل البزوغ وبعده, اذ بلغت صف ار قياسا مع % 51 و % 2.23 في معاملة المقارنة على الترتيب تحت ظروف البيت الزجاجي, ارفقتها زيادة في فعالية انزيم البيروكسيديز. مستل من رسالة ماجستير للباحث االول The Iraqi Journal of Agricultural Sciences 43(5): 52-62, 212 Issa & Saleh BIOLOGICAL CONTROL OF TOMATO SEEDLINGS DAMPING OFF CAUSED BY PYTHIUM APHANIDERMATUM Adnan A. Issa Nahida M. Saleh Dept. of Plant Protection / College of Agriculture / University of Baghadad ABSTRACT This study was conducted to evaluate the activity of Saccharomyces cerevesiae and Kluyveromyces against Pythium aphanidermatum, causative agents of tomato seedling damping off. P. aphanidermatum was isolated from infected seedling. The activity of S. cerevesiae and against P. aphanidermatum was tested on potato dextrose agar (PDA) in petridishes. A line of yeast growth on one side and a disk of.5cm from new growth of fungal culture was placed on the other side. The effect of the yeast in controlling seedling damping off disease in pots under greenhouse condition was carried out by adding 5 ml of yeast suspention at 21 x 8 cfu / ml of S. cerevesiae and 3 x 1 6 cfu / ml of befor 6 days of cultivation and the same volum during cultivation, Tomato seeds were soaked in yeast suspention and sowing in soil contaminted with P. aphanidermatum. The activity of S. cerevesiae and against P. aphanidermatum attained to % and 32.8 % on PDA after 3 days of incubation respectively. S. cerevesiae at.1 ;.2 ;.3 ;.4 and.5 g / L. and at 9 x 1 5 cfu / ml inhibited totaly fungal growth. The yeast filtrate induced a reduction in fungal biomass weight, 41.3 and 6,1 mg for S. cerevesiae and respectively compared with 76.3 mg for control. It was found that soil and seed treatments with suspention at 31 x 6 cfu / ml and 2 x 1 4 cfu /seed were more effective than other treatment in reduction of pre and post emergence tomato seedling damping off, that were.,. compared with 5 and % in control treatment respectively unde greenhouse condition assouated with increasing of peroxidase activity. Part of M.Sc Thesis of first author

2 aphanidermatum الطماطة. مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 المقدمة يعد مرض موت البادرات من االمراض المهمة على محاصيل الخضر في المشتل والحقل )1(. يتسبب المرض عن العديد من الفطريات ويعد الفطر Pythium aphanidermatum من بين اكثرها اهمية وخطورة ويسبب خسائر كبيرة في المراحل المبكرة من نقل الشتالت )32( وبالنظر لالستعمال المتكرر للمبيدات الكيميائية الذي ادى الى تلوث التربة واالض ارر بالبيئة فضال عن صحة االنسان وظهور صفة المقاومة في الكائنات الممرضة )13(. اتجهت جهود الباحثين في العقود االخيرة اليجاد وسائل بديلة الدارة المسببات الممرضة وتم التوجه الى اسلوب المكافحة االحيائية باستعمال احياء مجهرية مضادة للفطريات ومن بين هذه االحياء الخمائر )11 32(. ادى استعمال الخميرة Saccharomyces cerevesiae الى تثبيط الفطرين Fusarium و Macrophomina phaseolina oxysporum المسببين لمرض موت البادرات في العديد من محاصيل الخضر في الوسط الزرعي وخفض نسبة موت البادرات تحت ظروف البيت الزجاجي 1( )21 2. اظهرت الخميرة.S cerevisiae فعالية كبيرة في تثبيط نمو الفطر Sclerotinia sclerotiorum وتكوين االجسام الحجرية تثبيطا كامال )11( وادى استعمال هذه الخميرة الى تثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum والسيطرة على مرض موت البادرات الذي يسببه تحت ظروف البيت الزجاجي )26(. وجد ان للخميرة Kluyveromyces Penicillium فعالية ضد ساللتين من الفطر lactis )21( expansum. اشارت نتائج العديد من الدراسات الى ان فعالية الخمائر في تثبيط نمو الفطريات ناتجا عن المنافسة مع الفطر الممرض على الغذاء والمكان )31( او التطفل على الفطر 5( )13 واستحثاث مقاومة جهازية في النبات )9 11( ومن خالل تحفيزها مواد مثبطة للفطر من بينها انزيمات محللة لجدران خاليا الفطر مثل β-1,3-glucanase و 7( Chitinase 32 المواد والط ارئق عزل وتشخيص الفطر المسبب لمرض موت الباد ارت في P. aphanidermatum جمعت باد ارت طماطة تظهر عليها اع ارض موت الباد ارت من البيوت البالستيكية في ابي غريب. عزل وشخص الفطر المسبب للمرض على انه.P aphanidermatum وفقا للصفات التي ذكرها االم ارضية على باد ارت الطماطة. )22( Waterhouse و اختبرت مقدرته اختبار الفعالية التضادية للخميرتين.S cerevisiae و P. aphanidermatum ضد الفطر الوسط الزرعي في حضررر الوسررط الزرعرري البطاطررا والدكسررتروز واالكررر )PDA( وعقم في المؤصدة في درجة ح اررة 131 م وضطط 1.5 كطم / 3 سم مدة 31 دقيقة. صب الوسط في اطباق بتري قطر 9 سم بدرجرة حر اررة 51 م. عمرل خرط مرن نمرو الخميررة علرى الوسرط الزرعررري علرررى بعرررد 3 سرررم مرررن حافرررة الطبرررق ( اخرررذ النمرررو مرررن مزرعة للخميرة على الوسط PDA عمر 12 سراعة ) ووضر علرررى الطرررررن االخررررر مرررن الطبررررق قرررررص قطرررر 1.5 سررررم مررررن مسررتعمرة للفطررر.P aphanidermatum بعمررر ثالثررة ايررام على الوسط الزرعي PDA على بعد 2.5 سم مرن حافرة الطبرق )39(. كرررررر االختبررررار اربررر مرررر ارت. حضرررنت االطبررراق فرررري درجة ح اررة م وجرت متابعة للنمرو الفطرري كرل 13 سررررراعة. قررررردرت فعاليرررررة عررررراملي المكافحرررررة االحيائيرررررة بحسرررررب المعادلة -: ( أ / أ + ب ) أ- منطقرررة التثبررريط : وهررري المسرررافة برررين خرررط الخميررررة ونهايرررة النمو الفطري. ب- التوس الفطري باتجاه خط الخميرة. تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة نمو الفطر الزرعية S. cerevisiae في تثبيط.P aphanidermatum على االوساط ( ونظرا الهمية مرض موت البادرات في الطماطة والمشاكل الكثيرة الناتجة عن استعمال المبيدات الكيميائية في مقاومته فقد اجريت هذه الدراسة لتقييم كفاءة الخميرتين.S P. ضد الفطر و cerevisiae

3 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 اضيفت الخميرة الى الوسط الزرعري PDA قبرل تصرلبه ( 11- رشرحت مزرعررة للخميررة.S cerevisiae واخرررى للخميررة منمراة فري الوسرط الزرعري NYDB خرالل مرشرف بكتيري.45 مايكرون وجم ال ارشف في قنراني زجاجيرة معقمرة بمعررردل 11 مرررل / قنينرررة وللمقارنرررة اسرررتعمل الوسرررط الزرعررري NYDB فقررط. لقحررت القنرراني برراق ارص قطررر 1 سررم مررن حافررة مسرررررتعمرة للفطرررررر.P aphanidermatum علرررررى الوسرررررط 15 م ) برررررالت اركيز 1.1 و 1.3 و 1.2 و 1.1 و 1.5 غرررررم / لترررر فررري دوارق زجاجيرررة سرررعة 511 مرررل. رل الوسرررط الزرعررري جيررردا وصرررب فررري اطبررراق بترررري قطرررر 9 سرررم. اسرررتعمل وسرررط PDA بردون خميرررة للمقارنرة. لقررف الوسرط فري االطبرراق بقرررص قطررر 1.5 سررم مررن مزرعررة للفطررر.P aphanidermatum علرى الوسرط PDA عمرر ثالثررة ايرام وضرر فري مركررز الطبررق الزرعررررري PDA عمرررررر ثالثرررررة ايرررررام وكرررررررت ثرررررالث مررررر ارت. استعملت اربعة اطباق لكل تركيز. حضرنت االطبراق فري درجرة حضنت القناني فري درجرة حر اررة م مردة خمسرة ايرام. حررررر اررة م وجررررررى قيرررررام لقطرررررر المسرررررتعم ارت عنرررررد رشحت الم ازرع على او ارق ترشيف معلومة الوزن وجففت بدرجرة وصول النمو القطرري فري المقارنرة الرى حافرة الطبرق وحسربت ح اررة 15 م وحسب الوزن الجان للكتلة الحيوية للفطر. النسررربة المئويرررة للتثبررريط بحسرررب المعادلرررة :- ( أ ب ) / أ أ- متوسط قطر النمو في المقارنة. ب- متوسط قطر النمو في المعاملة. تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة في تثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum على االوساط الزرعية عملت التخافين من مزرعرة للخميررة فري الوسرط تقويم كفاءة كل من الخميرتين.S cerevisiae و في مكافحة مرض موت باد ارت الطماطة المتسبب عن الفطر.P aphanidermatum تحت ظروف البيت الزجاجي. تحضير لقاح الخميرتين.S cerevisiae و اسرتخدم الوسرط الزرعري NYDB لتحضرير لقراح الخميررتين S. cerevisiae و.K اذ حضرررت اربعررة دوارق الزرعرري السررائل Nutrient Yeast Dextrose Broth سرررعة 3 لترررر يحتررروي كرررل منهرررا لترررر واحرررد مرررن الوسرررط الزرعررري. NYDB عقمت بالمؤصدة تحت درجرة حر اررة 131 م وضرطط كطم / سم لمدة 31 دقيقة. برد الوسط الزرعي الرى 11- Yeast غررررم 2 Nutrient Broth غررررم 2( (NYDB) Extract 11 غررررم Dextrose 1 مررررل مرررراء مقطررررر( المعقررم. وضرر 1 مررل مررن كررل تخفيررن فرري طبررق بتررري معقررم 15 م ولقف دورقين بالخميرة.S cerevisiae ولقف الدورقين وصررررب فوقررررره 31 مرررررل مررررن الوسررررط الزرعررررري. PDA حركررررت االخررررين باضرررافة مرررل مرررن مزرعرررة سرررائلة للخميررررة االطباق حركة دائرية لضمان توزي اللقاح في الوسرط وبواقر اربعة اطبراق لكرل تركيرز وللمقارنرة اضرين 1 مرل مراء مقطرر معقرررررم. لقحرررررت االطبررررراق بقررررررص مرررررن مزرعرررررة للفطرررررر.P aphanidermatum على الوسط الزرعي PDA عمرر ثالثرة ايام. قيست اقطار المستعم ارت عند وصول النمو القطرري فري المقارنررة الررى حافررة الطبررق وحسرربت النسرربة المئويررة للتثبرريط كمررا ذكر سابقا. تأثير ارشح الخميرتين.S cerevisiae و.K منمرررراة فرررري الوسررررط الزرعرررري NYDB بعمررررر 12 سراعة الرى كرل دورق. حضررنت الردوارق تحرت درجرة حرر اررة م لمررررررررررررررردة 12 سررررررررررررررراعة. اسرررررررررررررررتعملت شرررررررررررررررريحة العرررررررررررررررد Haemocytometer لحساب تركيز اللقاح قبل االستعمال. تحضير لقاح الفطر الممرض.P aphanidermatum اسرتعمل الوسرط الزرعري )PDA( Potato Dextrose Agar الكثررررار الفطررررر..P aphanidermatum صررررب الوسررررط الزرعي المعقم في اطباق بتري قطرهرا 9 سرم. لقحرت االطبراق في تثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum في م اركزها بعد تصلب الوسط الزرعي باق ارص قطرها 1.5 سم اخررذت مررن مسررتعمرة للفطررر.P aphanidermatum منمرراة

4 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, تربرررة ملقحرررة بررررالخميرة +.K بررررذور غيررررر معاملة. على الوسط الزرعي PDA بعمر ثالثة ايام. حضنت االطبراق فرري درجررة حرر اررة م لمرردة خمسررة ايررام. اضررين اللقرراح بمعررردل ربررر طبرررق لكرررل اصررريص الرررى جميررر المعرررامالت التررري 5- تربرررررة ملقحرررررة برررررالخميرتين.S cerevisiae و.K تتطلب اضافة لقاح الفطرر..P aphanidermatum غلفرت + بذور غير معاملة. االصص بأكيام البولي اثيلين المثقبة بعد ترطيبها بماء مقطرر 2- تربررة ملوثرررة بررالفطر.P aphanidermatum ومعاملرررة معقم وتركت لمدة ثالثة ايام قبل الز ارعة. بمبيد بريفيكيرور ن )انترال شرركة براير االلمانيرة( بتركيرز 2.5 مل / لتر وبمعدل مل / اصيص + بذور غير معاملة. 7- تربررة ملوثرررة بررالفطر.P aphanidermatum ومعاملرررة بالخميرة +.S cerevisiae بذور غير معاملة. 2- تربررة ملوثرررة بررالفطر.P aphanidermatum ومعاملرررة بالخميرة +.K بذور غير معاملة. 9- تربررة ملوثرررة بررالفطر.P aphanidermatum ومعاملرررة برالخميرتين.S cerevisiae و +.K برذور غيرر معاملة. 11- تربررة ملوثررة بررالفطر +.P aphanidermatum بررذور معاملة بالخميرة.S cerevisiae 11- تربررة ملوثررة بررالفطر +.P aphanidermatum بررذور معاملة بالخميرة. 13- تربررة ملوثررة بررالفطر +.P aphanidermatum بررذور معاملة بالخميرتين.S cerevisiae و.K معا. 12- تربررة ملوثررة بررالفطر.P aphanidermatum وملقحررة.S +.S بررررذور معاملررررة بررررالخميرة بررررالخميرة cerevisiae. cerevisiae 11- تربررة ملوثررة بررالفطر.P aphanidermatum وملقحررة.K +.K برررذور معاملرررة برررالخميرة برررالخميرة. 15- تربررة ملوثررة بررالفطر.P aphanidermatum وملقحررة + بررررذور S. و بررررالخميرتين cerevisiae معاملة بالخميرتين S. cerevisiae و. 12- تربة معقمة + بذور معاملة بالخميرة.S. cerevisiae 17- تربة معقمة + بذور معاملة بالخميرة. 12- تربة معقمة + بذور معاملرة برالخميرتين.S cerevisiae و. 22 معاملة التربة بكل من الخميرتين و S. cerevisiae اضين 51 مل / كطم تربة مزيجية في اصص بالستيكية قطر 15 سررم مررن كررل مررن مزرعررة للخميرررة.S cerevisiae بحجررم لقررراح وحررردة تكررروين مسرررتعمرة / مرررل والخميررررة بحجررم لقرراح وحرردة تكرروين مسررتعمرة / مرررل فررري الوسرررط الزرعررري السرررائل NYDB قبرررل سرررتة ايرررام مرررن الز ارعرة واعيرردت االضررافة عنررد الز ارعرة بررالحجم نفسرره. غلفررت االصص باكيام بولي اثيلين مثقبة في البيت الزجاجي. معاملة البذور بكل من الخميرتين.S cerevisiae و.K غمرت بذور طماطرة معقمرة سرطحيا فري كرل مرن مزرعرة سرائلة للخميرررة S. cerevisiae بحجررم لقرراح وحرردة تكرروين مسررررتعمرة / بررررذرة وثانيررررة فرررري مزرعررررة سررررائلة للخميرررررة بحجررم لقرراح وحرردة تكرروين مسررتعمرة / بررذرة وثالثرررة فررري خلرريط مرررن المرررزرعتين بحجررم لقررراح 2 1 وحررردة 4 تكررروين مسرررتعمرة / برررذرة فررري الوسرررط NYDB حاويرررة علررى الصررمع العربرري بمعرردل 5 غررم / لتررر مرردة 13 سرراعة. زرعرررررت البرررررذور فررررري االصرررررص بمعررررردل 11 برررررذور / اصررررريص واجريت المعامالت االتية وبثالثة مكر ارت. 1- تربرررة معقمرررة فقرررط )مقارنرررة( اضرررين لهرررا الوسرررط الزرعررري PDA الخالي من الفطر الممرض + بذور غير معاملة. 3- تربرررة ملوثرررة برررالفطر +.P aphanidermatum برررذور غير معاملة. 2- تربررررة ملقحررررة بررررالخميرة +.S cerevisiae بررررذور غيررررر معاملة.

5 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 حسبت النسبة المئويرة لمروت البراد ارت قبرل البرزو بعرد 11 ايرام مرررن الز ارعرررة وحسرررربت النسررربة المئويرررة لمرررروت البرررراد ارت بعررررد البرررررزو بعرررررد 31 يومرررررا مرررررن الز ارعرررررة وقررررردرت فعاليرررررة انرررررزيم البيروكسيديز بعد 21 يوما من الز ارعة باستعمال الطريقرة التري اتبعهرا )2(. حللررت نتررائي جميرر التجررارب المختبريررة باسررتعمال التصرميم العشروائي الكامرل بينمرا حللرت جمير تجرارب البيرت الزجاجي باستعمال تصميم القطاعات الكاملة المعشاة وقورنت المتوسطات باختبار اقل فرق معنرروي )3(. النتائج والمناقشة اختبار الفعالية التضادية للخميرتين.S cerevisiae و.K ضد الفطرaphanidermatum.P في الوسط الزرعي اظهرررررت نتررررائي هررررذا االختبررررار )شرررركل 1 ( ان الخميررررريتين S. و cerevisiae فعالرة فري تثبريط الفطرر P. aphanidermatum علرررى الوسررررط الزرعررري PDA اذ بلطرررت فعاليررررررة المكافحررررررة االحيائيررررررة لهمررررررا و %23.2 علررررررى الترتيب بعد ثالثة ايرام مرن التحضرين فري درجرة حر اررة 35 م +. 3 اشرررارت نترررائي سرررابقة الرررى ان فعاليرررة المكافحرررة االحيائيرررة للخميرررة Botrytis ضررد الفطررر لcinerea.S cerevisiae المسرربب لمرررض العفررن الرمررادي فرري العنررب بلطررت % شكل 1. تأثير الخميرتين S. cerevisiae.k و.P في نمو الفطرaphanidermatum الوسط الزرعي أ- الخميرة.S cerevisiae ضد الفطر aphanidermatum ب- الخميرة.K ضد الفطر aphanidermatum تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة تثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum الزرعية في P. P. S. cerevisiae في على االوساط احدثت الت اركيرز 1.1 و 1.3 و 1.2 و 1.1 و 1.5 غرم / لترر مرررن الخميررررة.S cerevisiae تثبيطرررا تامرررا )%( لنمررررو الفطرر.P aphanidermatum علرى الوسرط الزرعري PDA بعررد يررومين مررن التحضررين فرري درجررة حرر اررة 35 م + 3 قياسررا بمعاملرررررة المقارنرررررة التررررري كانررررت فيهرررررا نسررررربة التثبررررريط %1.1. )جدول 1(. اشارت العديد من الد ارسات الى كفاءة الخميرة.S.P aphanidermatum في تثبيط نمو الفطر cerevisiae بنسرربة %52.22 )26(. وتثبررريط عرردد مرررن الفطريررات االخررررى مثرررررررررل M. phaseolina و F. oxysporum و Sclerotinia sclerotiorum و Rhizoctonia solani )11 2 1( جدول 1. تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة في تثبيط نمو الفطر االوساط الزرعية S. cerevisiae P. aphanidermatum على 7.9 بعررررد سرررربعة ايررررام مررررن التحضررررين فرررري درجررررة حرررر اررة 35 م.)39( % التركيز معدل قطر المستعمرة ( غم / لتر( ( سم ) للتثبيط المقارنة LSD أ ب

6 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة تثبيط نمو الفطر الزرعية في.P aphanidermatum على االوساط اظهررت النترائي ان اضرافة لقراح الخميررة.K الرى الوسط الزرعي بحجم لقاح خليرة / مرل اعطرى اعلرى نسبة مئوية لتثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum بلطت % قياسررررا بررررر %1.1 فرررري معاملررررة المقارنررررة )جرررردول 3(. لرروحظ انررره كلمرررا ازد حجرررم اللقررراح ازدت نسررربة التثبررريط معنويرررا. تتفرررق هرررذه النترررائي مررر نترررائي د ارسرررة اخررررى اشرررارت الرررى كفررراءة الخميرررررة spp. Kluyveromyces فرررري تثبرررريط نمررررو الفطررررر Aspergillus section flavi وت اروحررت نسرربة التثبرريط بررين. )31( %-75 جدول. تأثير ت اركيز مختلفة من الخميرة.K في تثبيط نمو الفطر.P aphanidermatum التركيز ( خلية / مل ) االوساط الزرعية معدل قطر المستعمرة % ( سم ) المقارنة للتثبيط LSD على تأثير ارشح الخميرتين.S cerevisiae و.K P. في تثبيط نمو الفطر aphanidermatum بينرت نتررائي هررذا االختبررار انخفرراض وزن الكتلررة الحيويررة الجافررة للفطرررر P. aphanidermatum معنويرررا عنرررد ز ارعتررره فررري ارشرف كرل مرن الخميررتين.S cerevisiae و.K اذ بلع معدل الوزن الجان 11.2 و 21.1 ملطم قياسا بر 72.2 ملطررم فرري معاملررة المقارنررة الترري اسررتعمل فيهررا الوسررط الزرعرري ارشرررف الخميررررة.S cerevisiae كررران اكثرررر ترررأثي ار مرررن ارشرررف الخميرررررة.K فررررري تثبررررريط نمرررررو الفطرررررر P.. aphanidermatum جدول. تأثير ارشح الخميرتي ن و S. cerevisiae.p في تثبيط نمو الفطر Aphanidermatum المعامالت ارشح الخميرة cerevisiae ارشح الخميرة المقارنة P=.5 S. وزن الكتلة الحيوية الجافة للفطر P. aphanidermatum )ملغم( LSD تقويم كفاءة كل من الخميرتين.S cerevisiae.k و المتسبب عن الفطر ظروف البيت الزجاجي في مكافحة مرض موت باد ارت الطماطة P. aphanidermatum تحت اظهررررت جميررر المعرررامالت كفررراءة فررري خفرررض النسررربة المئويرررة لموت باد ارت الطماطرة قبرل البرزو وبعرده النراجم عرن االصرابة برررالفطر P. aphanidermatum ارفقتهرررا زيرررادة فررري فعاليرررة انزيم البيروكسيديز قياسا بمعاملة المقارنة )فطرر ممررض فقرط( )جرررردول 1(. تفوقررررت معاملررررة التربررررة والبررررذور بررررالخميرة فرري خفررض النسرربة المئويررة لمرروت البرراد ارت قبررل البررزو وبعررده اذ بلطررت 1.1 و %1.1 قياسررا بمعاملررة المقارنررة 51 و %12.27 علرررى الترتيرررب وكانرررت فعاليرررة االنرررزيم فيهرررا 2392 وحررردة / مرررل قياسرررا برررر 2127 وحررردة / مرررل فررري معاملرررة المقارنرة تلتهرا معاملرة التربرة برالخميرة.K التري بلطرررت فيهرررا نسررربة مررروت البررراد ارت قبرررل البرررزو وبعرررده 2.22 و %1.1 على الترتيب في حين كانت فعالية االنزيم فيها 2151 وحررررردة / مرررررل. امرررررا معاملرررررة التربرررررة والبرررررذور برررررالخميرة S. NYDB برردال مررن ال ارشررف علررى الترتيررب )جرردول 2(. لرروحظ ان cerevisiae )المعاملررررررررررررة 12( ومعاملررررررررررررة التربررررررررررررة والبررررررررررررذور

7 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 بررالخميرتين S. cerevisiae و )المعاملررة 15( فقرررد بلطرررت فيهرررا نسررربة مررروت البررراد ارت قبرررل البرررزو وبعرررده 2.27 و 1.1 و 2.27 و %2.22 فيمرررا كانرررت فعاليرررة االنرررزيم فيهما 2122 و 2112 وحردة / مرل علرى الترتيرب. لرم يالحرظ وجرررود فرررروق معنويرررة برررين المعرررامالت التررري تضرررمنت معاملرررة التربررررررة والبررررررذور بررررررالخميرتين.S cerevisiae و سررررررواء كانررررررت علررررررى انفرررررر ارد او مجتمعررررررة اال ان جميعهررررا كانررررت متفوقررررة معنويررررا علررررى معاملررررة المقارنررررة )فطررررر ممرض فقط(. بلطت نسبة موت الباد ارت قبل البزو وبعده فري التربررررررة المعاملررررررة بررررررالخميرتين.S cerevisiae و.S 9(. وفي التربة المعاملرة برالخميرة )المعاملة cerevisiae )المعاملرررررررررة )7 11 و 2.22 و 2.27 و %1.1 وكانت فعالية االنزيم فيهما 5211 و 2311 وحردة / مرل علرى الترتيررررررب. لرررررروحظ فرررررري المعررررررامالت المتضررررررمنة اضررررررافة لقرررررراح الخميرررتين.S cerevisiae و.K الررى التربررة على انف ارد او مجتمعة عدم وجود فروق معنويرة فيمرا بينهرا فري نسبة موت الباد ارت اال انهرا كانرت متفوقرة معنويرا علرى معاملرة المقارنررة. امررا فرري معاملررة البررذور بررالخميرة.K )المعاملررررة 11( ومعاملررررة البررررذور بررررالخميرة.S cerevisiae )المعاملرة 11( ومعاملرة البرذور برالخميرتين.S cerevisiae و.K )المعاملرررررة 13( فقررررد كانررررت نسرررربة مرررروت البررراد ارت قبرررل البرررزو وبعرررده 31 و 2.27 و 31 و و و %2.27 وكانرررررررت فعاليرررررررة االنرررررررزيم فيهرررررررا 5227 و 5212 و 57 وحرررردة / مررررل علررررى الترتيررررب. ان معررررامالت البرذور برالخميرتين.S cerevisiae و.K علرى انف ارد او معا لم يحصرل بينهمرا فرروق معنويرة فري خفرض نسربة مرروت البرراد ارت قبررل البررزو وبعررده ولكررن حصررلت بينهررا فررروق معنويرررررة مرررررن ناحيرررررة فعاليرررررة انرررررزيم البيروكسررررريديز اذ تفوقرررررت معاملة البرذور برالخميرة.K )المعاملرة 11( تلتهرا معاملررة البررذور بررالخميرة.S cerevisiae )المعاملررة 11( ثررم معاملررررررة البررررررذور بررررررالخميرتين.S cerevisiae و البررررذور بررررالخميرتين S. cerevisiae و منفررررردة او مجتمعررررة احرررردثت زيررررادة معنويررررة فرررري فعاليررررة انررررزيم البيروكسيديز قياسا بمعاملة المقارنرة )تربرة معقمرة فقرط(. اشرار )32( الى نتائي مماثلة من ان الخميررة.S cerevisiae كانرت كفوءة جدا في خفض شدة االصابة بمرض مروت براد ارت التبرع المتسبب عن االصابة برالفطر.P aphanidermatum عنرد اضررافتها الررى التربررة اذ بلطررت نسرربة االصررابة %11.2 قياسررا بر %52 فري معاملرة المقارنرة )فطرر ممررض فقرط(. تتفرق هرذه النتائي م نتائي العديد مرن الد ارسرات التري اشرارت الرى فاعليرة الخميرررررة.S cerevisiae فرررري السرررريطرة علرررى مرررررض مرررروت الباد ارت في عدد من المحاصيل )الطماطة والباذنجان والبنجرر السرررررركري والفاصرررررروليا والبطرررررريي( المتسرررررربب عررررررن العديررررررد مررررررن الفطريررات phaseolina( M. و F. oxysporum و F. solani و F. verticilloids و R. solani و 4( )Verticillium dahliae و Cephalosporium sp..) وكرررررذلم مررررر مرررررا وجررررده )12( مرررررن ان الخميررة spp. Kluyveromyces كانرت كفروءة فري الحرد مرن االصررررابات المتسررررببة عررررن الفطررررر.F verticilloids علررررى محصرررررررول الرررررررذرة الصرررررررف ارء. ان المقررررررردرة التضرررررررادية العاليرررررررة للخميررتين.S cerevisiae و.K ضرد الفطررين.P aphanidermatum و.R solani ربمرررا تعرررود الرررى تنررررافم هررررذه الخمررررائر مرررر المسررررببات الممرضررررة علررررى المررررواد الطذائيررة والمكرران نتيجررة لقرردرتها العاليررة علررى التكرراثر السررري فقد اشارت د ارسات سابقة الرى القردرة التنافسرية العاليرة للخمرائر )23( وربمرا يعرود تأثيرهرا الرى انتاجهرا مرواد قاتلرة للفطريرات Fungicidal او مضررادة لهررا Antifungal اذ تشررير بعررض المصررادر الررى قرردرة بعررض سررالالت الخميرررة.S cerevisiae على انتال سموم قاتلة للفطريات )31 39(. اوضرحت نترائي د ارسرررة اخرررررى ان الخميرررررة.S cerevisiae تختررررزل الخيرررروط الفطريررة وتحللهررا )6(. ذ كررر ان هرراتين الخميرررتين ذات مقرردرة علررى انتررال مررواد مضررادة للفطريررات فضررال عررن مقرردرتها علررى انتال مرواد عضروية متطرايرة تثربط نمرو الفطريرات )17 31 )المعاملررررررررة 13 (.ان معاملررررررررة التربررررررررة ومعاملررررررررة

8 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, ( وان الخميرررة.K تنررتي انزيمررات وكحررول اثيلرري تعمررل علررى القترررل المباشررر للفطررر وتحليلررره )22 21( وبعضررررها لرررره المقرررردرة علررررى تحفيررررز دفاعررررات بايوكيمائيررررة مثررررل Phenylalanine و Ethylene و Phytoalexins )9( ammonia وال يسررررررتبعد ان تكررررررون احرررررردى lyase ميكانيكيررات التررأثير المثرربط للمسررببات الممرضررة لهررذه الخمررائر هي من خالل تحفيزهرا مقاومرة جهازيرة فري النبرات العائرل ضرد المسررببات الممرضررة مررن خررالل تحفيزهررا تصررني بروتينررات فرري االنسررررررررررجة النباتيررررررررررة مررررررررررن ضرررررررررررمنها انزيمررررررررررات مررررررررررن بينهررررررررررا Peroxidase و Chitinase وبروتينررررات اخرررررى ذات عالقررررة باالم ارضية )2 12(. ومما يدعم حصول استحثاث للمقاومرة الجهازيررررررررة فرررررررري هررررررررذه الد ارسررررررررات هررررررررو زيررررررررادة فعاليررررررررة انررررررررزيم Peroxidase عنرررد المعاملرررة برررالخميرتين وقرررد اسرررتعمل هرررذا االنررررزيم مؤشرررر ار علررررى حرررردوث اصررررابة باالحيرررراء المجهريررررة وان زيادتررره تررردل علرررى حصرررول مقاومرررة جهازيرررة فررري النبرررات ضرررد مهاجمرة المسررببات الممرضرة )19 37(. ويسررهم هرذا االنررزيم فرررري تخليررررق االثيلررررين ويشررررترم فرررري الم ارحررررل النهائيررررة لتكرررروين اللكنرررين والترررآم الجرررروح ويسرررهم فررري تكررروين الحرررواجز الدفاعيرررة وتقويرة جرد ارن الخاليرا عنرد تعرضرها للمسرببات الممرضرة )8.)22 12 على الرغم من كفاءة عوامل المكافحة االحيائية ومنها الخمائر فرري الحررد مررن نمررو الفطريررات الممرضررة والخسررائر الترري تسررببها اال ان اسرررتعمالها مرررا ازل محررردودا مقارنرررة بالمبيررردات الكيميائيرررة لكررررون المبيرررردات الكيميائيررررة اكثررررر تررررأثي ار واسرررررع نتيجررررة اال ان المخرررراطر الناجمررررة عررررن اسررررتعمال المبيرررردات الكيميائيررررة علررررى النظررررام البيئرررري والصررررحة العامررررة فضررررال عررررن ظهررررور سررررالالت مقاومة من المسببات الممرضة فإن اسرتعمال عوامرل المكافحرة االحيائيررة ربمررا يمثررل هرردفا مسررتقبليا كأحررد عوامررل ادارة امرر ارض النبات. جدول 5. تقويم كفاءة كل من الخميرتين.S cerevisiae و.K في مكافحة مرض موت باد ارت الطماطة المتسبب عن الفطر.P aphanidermatum % % المعامالت فعالية انزيم للموت قبل للموت بعد البيروكسيديز البزوغ البزوغ )وحدة / مل( تربة معقمة فقط )مقارنة( + بذور غير معاملة 5- تربة ملوثة بالفطر +.P aphanidermatum بذور غير معاملة 5- تربة ملقحة بالخميرة +.S cerevisiae بذور غير معاملة 5- تربة ملقحة بالخميرة +.K بذور غير معاملة -2 تربة ملقحة بالخميرتين S. cerevisiae و + بذور 5555 غير معاملة 5- تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum ومعاملة بالمبيد بريفيكيور 5 S. ن + بذور غير معاملة 5- تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرة + cerevisiae بذور غير معاملة

9 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرة.K + بذور غير معاملة تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرتين.S cerevisiae و +.K بذور غير معاملة تربة ملوثة بالفطر +.P aphanidermatum بذور معاملة بالخميرة 5 S. cerevisiae تربة ملوثة بالفطر +.P aphanidermatum بذور معاملة بالخميرة تربة ملوثة بالفطر +.P aphanidermatum بذور معاملة 5 بالخميرتين S. cerevisiae و تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرة.S S. cerevisiae بذور معاملة بالخميرة + cerevisiae تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرة.K بذور معاملة بالخميرة تربة ملوثة بالفطر.P aphanidermatum وملقحة بالخميرتين.S.S بذور معاملة بالخميرتين +.K و cerevisiae وMarxianus cerevisiae تربة معقمة + بذور معاملة بالخميرة.S cerevisiae تربة معقمة + بذور معاملة بالخميرة.K تربة معقمة + بذور معاملة بالخميرتين.S cerevisiae و.K Marxianus LSD P=.5 التطبيقيررة. رسررالة ماجسررتير. قسررم الصررناعات الطذائيررة. كليررة الز ارعة. جامعة بطداد. 92 صفحة. صالف ناهدة مهردي وآالء خضرير حسران وليلرى جبرار صررربر وعمررررار امجرررد عرررراي تقررررويم فاعليرررة خميرررررة الخبررررز وبعررررض العناصررررر وحرررامض السالسررررلم فرررري مكافحررررة الماكروفومينرررا. مجلرررة العلررروم الز ارعيرررة الع ارقيرررة. )2( 11 : Arras, G. ; V. Decicco ; S. Arru and G. Lima Biocontrol by yeasts of blue mold of citrus fruits and the mode of action of an isolate of Pichia guilliermondii. J. Hortic. Sci. Biotechnol. 73 : Attyia, S.H. and A.A. Youssry. 21. Application of Saccharomyces cerevisiae as a biocontrol agent against some diseases of.1 المصادر 1. اسرررررطيفان زهيرررررر عزيرررررز وحرررررازم عبررررردالعزيز محمرررررود آفررررات الطماطررررة. الطبعررررة االولررررى. مطبعررررة ادور للطباعة الفنية الحديثة. 113 صفحة. 3. الررر اروي خاشررر محمرررود وعبررردالعزيز محمرررد خلرررن ا تصرررررميم وتحليرررررل التجرررررارب الز ارعيرررررة. و ازرة التعلررررريم العالي والبحث العلمي. جامعة الموصل. مؤسسة دار الكترب للطباعة والنشر. 122 صفحة. 2. الصررررروفي محمرررررد عبرررررردالر ازق. 3. فصرررررل انرررررزيم البيروكسررريديز وتنقيتررره وتوصررريفه مرررن الحليرررب النبررراتي لنبرررات الرررررديبال Calotorpis procera وامكانيرررررة اسرررررتخداماته 5

10 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, Elwakil, M.A. ; O.A. Awadallah ; I.M. El-Refai ; M.A. El-Metwally and M.S. Mohammed. 29. The use of bread yeasts as a biocontrol agent for controlling seed borne fungi of faba bean. Plant Pathology Journal. 8 (4) : Etcheverry, M.G. ; A. Scandolara ; A. Nesci ; M.S.V.B. Ribieiro ; P. Pereira and P. Battilani. 29. Bilogical interactions to select biocontrol agents against toxigenic strains of Aspergillus flavus and Fusarium verticilloides from maize. Biomedical and Life Sciences. Mycopathologia. 167 (5) : Fialho, M.B. ; L. Toffano ; M.P. Pedroso ; F. Augusto and S.F. Pascholati. 21. Volatile organic compounds produced by Saccharomyces cerevisiae inhibit the in vitro development of Guignardia citricarpa the causal agent of citrus black spot. World J. Microbiol. Biotechnol. 26 : Gaspar, T.H. ; C. Penel ; D. Hagege and H. Greeppin Peroxidase in plant growth differentiation and molecular and physiological aspects of plant peroxidase (eds Lobarzewki, H. ; C. Greppin, and T.H. Penel). Univ. Geneva Switazerland Howell, C.R. ; L.E. Hanson ; R.D. Stipanovie and L.S. Puckhaber Induction of terpenoid synthesis in cotton roots and control of (Rhizoctonia solani) by seed treatment with (Trichoderma virens). Phytopathology Izgu, F. and D. Altinbay Killer toxins of certain yeast strains have potential growth inhibitory activity on Gram Positive Pathogenic bacteria. Microbios, 89 : Janisiewicz, W.J. ; T.J. Tworkoski and C. Sharer. 2. Characterizing the mechanism of biological control of postharvest diseases on fruit with a simple method to study competition for nutrients. Phytopathology. 9 : Kabli, S.A. 27. Purification and characterization of protopectinase produced 51 Solanaceae caused by Macrophomina phaseolina and Fusarium solani. Egyptian Journal of Biology. 3 : Castoria, R. ; F. Decurtis ; G. Lima ; L. Caputo ; S. Pacifico and V. De Cicco. 21. Aureobasidium pullulans (Ls-3) an antagonist of postharvest pathogens of fruits : Study on its mode of action. Postharvest Biol. Technol. 22 : Chen, f. ; M. Wang ; Y. Zheng ; J. Luo ; X. Yang and X. Wang. 29. Quantitative changes of plant defense enzymes and phytohormone in biocontrol of cucumber fusarium wilt by Bacillus subtilis B 579. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 26 (4) : Droby, S. ; V. Vinokur ; B. Weiss ; L. Cohen ; A. Daus ; E.E. Goldschmidt and R. Porat. 22. Induction of resistance to Penicillium digitatum in grapefruit by the yeast biocontrol agent Candida oleophila. Phytopathology. 92 : El-Gamal, N.G.S. and M.A. Abd Alla. 22. Biological control of white rot disease on green bean pods during transportation and storage. Egypt. J. Phytopathol. 3 (2) : El Ghaouth, A. ; C.L. Wilson and M. Wisniewski. 23. Control of postharvest decay of apple fruit with Candida saitoana and induction of defense responses. Phytopathology. 93 : El-Ghaouth, A. ; C.L. Wilson and M. Wisniewski Ultrastructural and cytochemical aspects of the biological control of Botrytis cinerea by Candida saitoana in apple fruit. Phytopathology. 88 : El-Sayed, S. 2. Microbial agents as a plant growth promoting and roots protector. 1 th. Microbiology Conference Nov. Cairo. Egypt. p El-Tarabily, A. 24. Suppression of Rhizoctonia solani disease of sugar beet by antagonistic and plant growth promoting yeasts. Journal of Applied Microbiology. 96 :

11 مجلة العلوم الز ارعية الع ارقية 34)5(: -55, 515 with Autochthonous wine yeasts. Food Technol. Biotechnol.. 48 (3) : Serrat, M. ; R.C. Bermudez and T.G. Villa. 24. Polygalacturonase and ethanol production in Kluyveromyces. Applied Biochemistry and Biotechnology. 117 (1) : Shalaby, M.E., and M.F. El-Nady. 28. Application of Saccharomyces cerevisiae as a biocontrol agent against Fusarium infection of sugar beet plants. Acta. Biologica Szegediensis. 52 (2) : Spadaro, D. ; R. Vola ; S. Piano and M.L. Gullino. 22. Mechanisms of action and efficiency of four isolates of the yeast Metschnikowia pulcherrima active against postharvest pathogens on apples. Postharvest Biol. Technol. 24 : Strobel, N.E. ; C. Ji ; S. Gopalan ; J.A. Kuc and S.X. He Induction of systemic acqupred resistance in cucumber by Pseudomonas syrinage pv. Syringae 61 Hrpzpss protein. The Plant Journal. 9 (4) : Taczman Bruckner, A. ; C.S. Mohacsi Farkas ; C.S. Balla and G. Kisko.. Comparison of biocontrol activity of Kluveromyces lactis with other yeasts strains against Penicillium expansum. Acta. Alimentaria. 34 (1) : Urquhart, E.J. and Z. Punja. 22. Hydrolytic enzymes and antifungal compounds produced by Tilletiopsis species, phyllosphere yeasts that are antagonists of powdery mildew fungi. Can. J. Micribiol. 48 : Waterhouse, G.M Key to Pythium pringsheim. Commonwealth Mycological Institute. England. 19 pp. by Kluyveromyces. J. Kau. Sci. 19 : Kavita, ; S. Meenakumari and P. Sivaprasad. 23. Effect of dual inoculation of native arbuscular mycorrhizal fungi and Azosprillium on suppression of damping off in chilli. Indian Pytopathology. 56 : La Penna, M. ; A. Nesci and M. Etcheverry. 24. In vitro studies on the potential for biological control on Aspergillus section flavi by Kluyveromyces spp. Letters in Applied Microbiology. 38 : La Penna, M. and M. Etchererry. 26. Impact on growth and aflatoxins B1 accumulation by Kluyveromyces isolates at different water activity conditions. Mycopathologia. 162 : Loganathan, M. ; G.V. Sible ; Prabaker and R. Samiyappan. 24. Antagonism of yeast Saccharomyces cerevisiae against Pythium aphanidermatum (Edson) Fitz. in Tobacco. Madras Agric. J. 91 (7-12) : Lojkowska, E. and M. Holubowska The role of polyphenol oxidase and peroxidase in potato tuber resistance to soft rot caused by (Erwinia carotovora). J. Phytopathology. 136 : Masih, E.I. and B. Paul. 22. Secretion of beta -1,3-glucanase by the yeasts Pichia membranifaciens and its possible role in the biocontrol of Botrytis cinerea causing mold disease of the grapevine. Curr microbial. 44 : Raspor, P. ; D.M. Miklic ; M. Avbelj and N. Cadez. 21. Biocontrol of grey mold disease on grape caused by Botrytis cinerea 55