2014/10/13 A93A01358BEL A11A01980 30 ml 9 ml Pentra C200 Διαγνωστικό αντιδραστήριο για τον in-vitro ποσοτικό προσδιορισμό της αντι-στρεπτολυσίνης O (ASO) σε ορό ή πλάσμα με τη μέθοδο της ενισχυμένης με σωματίδια λάτεξ θολοσιμετρικής ανοσοδοκιμασίας. Έκδοση εφαρμογής Ορός, πλάσμα: ASLO a (δεν χρησιμοποιείται στις ΗΠΑ) 02.xx στρεπτόκοκκο όπως ο ρευματοειδής πυρετός, η οξεία σπειραματονεφρίτιδα, η οστρακιά και η αμυγδαλίτιδα. Το είναι μια λάτεξ ανοσοθολωσιμετρική μέθοδος, σχεδιασμένη για την ακριβή μέτρηση των επιπέδων της ASO σε δείγματα ορού και πλάσματος. QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.9 Προοριζόμενη χρήση Το αντιδραστήριο προορίζεται για τον διαγνωστικό in vitro ποσοτικό προσδιορισμό της αντιστρεπτολυσίνης O (ASO) σε ορό και πλάσμα με τη μέθοδο της ενισχυμένης με σωματίδια λάτεξ θολοσιμετρικής ανοσοδοκιμασίας. Ο προσδιορισμός βοηθά στη διάγνωση νόσων που προκαλούνται από βακτήρια τα οποία ανήκουν στο γένος στρεπτόκοκκος και παρέχει επιδημιολογικές πληροφορίες για τις νόσους αυτές. Οι παθογόνοι στρεπτόκοκκοι συνδέονται με λοιμώξεις όπως η κυνάγχη, το μολυσματικό κηρίο (μία λοίμωξη που χαρακτηρίζεται από μικρές φλύκταινες στο δέρμα), οι λοιμώξεις της ουροφόρου οδού, ο ρευματικός πυρετός και οι νεφρικές παθήσεις. Κλινικό ενδιαφέρον (1) Η πλειοψηφία των ατόμων με λοιμώξεις από αιμολυτικό στρεπτόκοκκο παράγουν αντιστρεπτολυσίνη O (ASO), αντισώματα ενάντια στη στρεπτολυσίνη O (SLO), μία εξωτοξίνη του στρεπτόκοκκου. Η μέτρηση του επιπέδου της ASO γίνεται για διαγνωστικούς σκοπούς, για την εκτίμηση της πορείας της θεραπευτικής αγωγής καθώς και για την αξιολόγηση της αποκατάστασης από ασθένειες οφειλόμενες σε αιμολυτικό a Τροποποίηση: τροποποίηση πρωτοκόλλου εφαρμογής. b Τροποποίηση: "Αντιδραστήρια": τροποποίηση. Μέθοδος (2, 3, 4) Όταν σημειωθεί αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος μεταξύ αντιστρεπτολυσίνης Ο (ASO) σε ένα δείγμα και στρεπτολυσίνης Ο (SLO) που έχει ευαισθητοποιηθεί σε σωματίδια λάτεξ, προκαλείται συμπλοκοποίηση. Η συμπλοκοποίηση αυτή εντοπίζεται ως αλλαγή στην απορρόφηση, όπου το μέγεθος της αλλαγής είναι ανάλογο με την ποσότητα ASO στο δείγμα. Στη συνέχεια, η πραγματική συγκέντρωση προσδιορίζεται με παρεμβολή από την καμπύλη βαθμονόμησης διαμορφωμένη από βαθμονομητές γνωστής συγκέντρωσης. Αντιδραστήρια b To είναι έτοιμο για χρήση. Αντιδραστήριο 1: Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών, ph 7,0 50 mmol/l Αζίδιο του νατρίου < 0,1% Σταθεροποιητές πρωτεϊνών 1 / 5
Αντιδραστήριο 2: Ρυθμιστικό διάλυμα γλυκίνης (ph 8,2) με NaCl Λευκωματίνη βόειου ορού 0,5% Σωματίδιο προσδεδεμένο στη στρεπτολυσίνη 100 mmol/l < 1% στερεά Αζίδιο του νατρίου < 0,1% To πρέπει να χρησιμοποιείται σύμφωνα με το παρόν φυλλάδιο αντιδραστηρίου. Εάν χρησιμοποιηθεί διαφορετικά, ο κατασκευαστής δεν μπορεί να εγγυηθεί την απόδοσή του. Χειρισμός 1. Αφαιρέστε και τα δύο καπάκια της κασέτας. 2. Εάν έχει σχηματιστεί αφρός, αφαιρέστε τον με μία πλαστική πιπέτα. 3. Τοποθετήστε την κασέτα στο ψυγείο αντιδραστηρίων του Pentra C200. Μετά τη λήψη των μετρήσεων, οι κασέτες των αντιδραστηρίων πρέπει να παραμένουν στο ψυγείο του Pentra C200. Πρέπει να δίνεται ιδιαίτερη προσοχή ώστε να μην μπερδεύονται τα καπάκια των κασετών αντιδραστηρίων με αυτά άλλων κασετών. Δεν πρέπει να γίνεται εναλλαγή ή ανάμιξη των αντιδραστηρίων με διαφορετικούς αριθμούς παρτίδας. Βαθμονομητής Για τη βαθμονόμηση χρησιμοποιήστε: ASO Cal, Κωδ. A11A01979 (δεν περιλαμβάνεται) 4 x 1 ml Ορός ελέγχου Για τον εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο, χρησιμοποιήστε: Immuno I Control L/H, κωδ. A11A01621 (δεν περιλαμβάνεται) 1 x 3 ml (λυοφιλιωμένο) + 1 x 3 ml (λυοφιλιωμένο) Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να υποβάλλεται σε δοκιμασία καθημερινά και/ή μετά από βαθμονόμηση. Η συχνότητα ανάλυσης ορών ελέγχου και τα διαστήματα εμπιστοσύνης πρέπει να ανταποκρίνονται στους κανονισμούς του εκάστοτε εργαστηρίου και στις οδηγίες που ισχύουν στη συγκεκριμένη χώρα. Για την εξέταση υλικών ποιοτικού ελέγχου πρέπει να ακολουθείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς και τοπικούς κανονισμούς. Τα αποτελέσματα πρέπει να βρίσκονται εντός των καθορισμένων ορίων εμπιστοσύνης. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει τη διαδικασία που θα ακολουθείται όταν τα αποτελέσματα υπερβαίνουν τα καθορισμένα όρια εμπιστοσύνης. Απαιτούμενα αλλά μη παρεχόμενα υλικά Αυτόματος βιοχημικός αναλυτής: Pentra C200 Βαθμονομητής: ASO Cal, κωδ.a11a01979 Ορός ελέγχου: Immuno I Control L/H, κωδ. A11A01621 Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός. Δείγμα Ορός. Πλάσμα σε EDTA ή ηπαρίνη λιθίου. Άλλα αντιπηκτικά εκτός από τα αναγραφόμενα δεν έχουν αξιολογηθεί από την HORIBA Medical και συνεπώς δεν συνιστάται η χρήση τους στην ανάλυση αυτή. Σταθερότητα (5): Στους 20-25 C: 2 ημέρες Στους 4-8 C: 8 ημέρες Στους -20 C: 6 μήνες Εύρος τιμών αναφοράς (1) Κάθε εργαστήριο πρέπει να καθιερώνει το δικό του εύρος φυσιολογικών τιμών. Οι τιμές που αναφέρονται εδώ χρησιμοποιούνται ως ενδεικτικές μόνο. Ενήλικες: < 200 IU/mL Παιδιά: < 150 IU/mL Φύλαξη και σταθερότητα Τα αντιδραστήρια, σε κασέτες που δεν έχουν ανοιχτεί, παραμένουν σταθερά μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα στους 2-8 C. Σταθερότητα μετά το άνοιγμα: ανατρέξτε στην παράγραφο "Απόδοση στον Pentra C200". Μην καταψύχετε τα αντιδραστήρια. 2 / 5
Διαχείριση Αποβλήτων Ανατρέξτε στις κατά τόπους νομικές απαιτήσεις. Το αντιδραστήριο αυτό περιέχει λιγότερο από 0,1% αζίδιο του νατρίου ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου ενδέχεται να αντιδράσει με μόλυβδο και χαλκό σχηματίζοντας εκρηκτικά αζίδια μετάλλων. Γενικές προφυλάξεις c Το αντιδραστήριο αυτό προορίζεται μόνο για επαγγελματική διαγνωστική χρήση in vitro. Για προδιαγραφές χρήσης μόνο. Προειδοποίηση: Το παρόν αντιδραστήριο λαμβάνεται από ουσίες ζωικής προέλευσης. Συνεπώς, πρέπει να αντιμετωπίζεται ως δυνητικά μολυσματικό και να χρησιμοποιείται με την ανάλογη προσοχή σύμφωνα με την ορθή εργαστηριακή πρακτική (6). Η διάγνωση πρέπει να γίνεται μόνο αφού ληφθούν υπόψη τα κλινικά συμπτώματα και τα αποτελέσματα άλλων εξετάσεων. Λαμβάνετε τις τυπικές εργαστηριακές προφυλάξεις ασφαλούς χρήσης. Οι κασέτες των αντιδραστηρίων είναι μίας μόνο χρήσης και πρέπει να απορρίπτονται σύμφωνα με τις κατά τόπους νομικές απαιτήσεις. Παρακαλούμε να ανατρέξετε στο Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Προϊόντος που αφορά το αντιδραστήριο. Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν εάν υπάρχει εμφανής ένδειξη βιολογικής, χημικής ή φυσικής φθοράς. Είναι ευθύνη των χρηστών να ελέγξουν εάν το έγγραφο αυτό αφορά το αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται. Απόδοση στον Pentra C200 d Τα χαρακτηριστικά απόδοσης που αναγράφονται παρακάτω ελήφθησαν από τον αναλυτή Pentra C200. Αριθμός αναλύσεων: περίπου 100 αναλύσεις Σταθερότητα αντιδραστηρίου μετά την τοποθέτηση στον αναλυτή: Αφού ανοιχθεί, η κασέτα αντιδραστηρίου που έχει τοποθετηθεί στο θάλαμο ψύξης του Pentra C200 παραμένει σταθερή για 60 ημέρες. Όγκος δείγματος: 3 µl/ανάλυση Όριο ποσοτικοποίησης: Το όριο ποσοτικοποίησης καθορίζεται σύμφωνα με το πρωτόκολλο EP17-A του CLSI (NCCLS) (7) και ισούται με 81 IU/mL. Ελάχιστο όριο ερμηνείας: Το ελάχιστο όριο ερμηνείας (MIL) εκτιμάται βάσει πολλαπλού προσδιορισμού δείγματος χαμηλής συγκέντρωσης και ισούται με 6,8 IU/mL. Ακρίβεια και ορθότητα: Επαναληψιμότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγματα χαμηλής, μέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 υλικά ελέγχου αναλύθηκαν 20 φορές, σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου Valtec (8). ελέγχου 1 ελέγχου 2 Μέση τιμή IU/mL CV % 163,23 1,70 313,85 1,11 Δείγμα 1 147,46 2,43 Δείγμα 2 410,30 1,03 Δείγμα 3 818,44 1,29 Αναπαραγωγιμότητα (συνολική ακρίβεια) 3 δείγματα χαμηλής, μέτριας και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου (μάρτυρες) αναλύονταν εις διπλούν επί 20 ημέρες (2 σειρές ημερησίως) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP5-A2 του CLSI (NCCLS) (9). ελέγχου 1 ελέγχου 2 Μέση τιμή IU/mL CV % 179,23 4,34 356,54 3,46 Δείγμα 1 180,26 4,29 Δείγμα 2 461,70 2,87 Δείγμα 3 793,55 1,66 Εύρος μέτρησης: Η δοκιμασία επιβεβαίωσε εύρος μέτρησης από 81 έως 950 IU/mL, με αυτόματη μεταγενέστερη αραίωση έως και 3800 IU/mL. Η γραμμικότητα του αντιδραστηρίου αξιολογήθηκε έως τα 950 IU/mL, σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP6-A του CLSI (NCCLS) (10). c Τροποποίηση: τροποποίηση γενικών προφυλάξεων. d Τροποποίηση: τροποποίηση αποδόσεων. 3 / 5
Συσχέτιση: 147 δείγματα ασθενών (ορός) συσχετίστηκαν με αντιδραστήριο του εμπορίου που χρησιμοποιήθηκε ως υλικό αναφοράς, σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP9-A2 του CLSI (NCCLS) (11). Οι τιμές κυμάνθηκαν από 81,20 έως 851,00 IU/mL. Η εξίσωση της αλλομετρικής γραμμής που προέκυψε με τη διαδικασία παλινδρόμησης Passing-Bablock (12) είναι: Y = 0,96 X - 16,61 (IU/mL) με συντελεστή συσχέτισης r 2 = 0,9531. Αλληλεπιδράσεις: Αιμοσφαιρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 290 µmol/l (500 mg/dl). Τριγλυκερίδια: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση για επίπεδα τριγλυκεριδίων έως και 6,15 mmol/l (538 mg/dl). Ολική χολερυθρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 500 µmol/l (29,25 mg/dl). Άμεση χολερυθρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 469 µmol/l (27,44 mg/dl). Ασκορβικό οξύ: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 340 µmol/l (5,98 mg/dl). Ιβουπροφαίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 2,43 mmol/l (50 mg/dl). Ακεταμινοφαίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 1324 µmol/l (20 mg/dl). Ακετυλοσαλικυλικό οξύ: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση έως τα 3,62 mmol/l (65 mg/dl). Ο Young έχει δημοσιεύσει έναν κατάλογο με φάρμακα και προαναλυτικές μεταβλητές που είναι γνωστό ότι επηρεάζουν τη μεθοδολογία αυτή (13, 14). Φαινόμενο προζώνης: Δεν ανιχνεύθηκε περίσσεια αντιγόνου σε συγκέντρωση 1900 IU/mL. Σταθερότητα βαθμονόμησης: Το αντιδραστήριο βαθμονομείται την Ημέρα 0. Η βαθμονόμηση ελέγχεται με ανάλυση 2 δειγμάτων ορού ελέγχου. Η σταθερότητα βαθμονόμησης είναι 13 ημέρες. Σημείωση: Συνιστάται αναβαθμονόμηση όταν αλλάζουν οι αριθμοί παρτίδας των αντιδραστηρίων καθώς και όταν τα αποτελέσματα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισμένου εύρους τιμών. Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής a : 02.xx Βιβλιογραφία 1. Thomas L. Streptococcus pyogenes infection, In: Thomas L, editor, Clinical Laboratory Diagnostics. 1 st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft. (1998): 80-86. 2. Otsuji S, Kamada T, Matsuura T, Seki M, Tanaka K, Shibata H, Honda T. A rapid turbidimetric immunoassay for serum antistreptolysin-o. J. Clin. Lab. Anal. (1990) 4: 241-245. 3. Singer JM et al. The latex fixation test. I. Application to the serologic diagnosis of rheumatoid arthritis, Amer. J. Med. (1956) 21: 888-892. 4. Curtis GDW, Kraak WAG, Mitchell RG. Comparison of latex and haemolysin tests for determination of antistreptolysin O (ASO) antibodies. J. Clin. Immunol. (1988) 41: 1331-1333. 5. Ehret W, Heil W, Schmitt Y, Töpfer G, Wisser H, Zawta B et al. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigations and stability of blood, plasma and serum samples. WHO publication WHO/DIL/LAB/ 99.1 Rev.2: 22 (2002). 6. Council Directive (2000/54/EC). Official Journal of the European Communities. No. L262 from October 17, 2000: 21-45. 7. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34). 8. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 9. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 10. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 11. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 12. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. a Τροποποίηση: τροποποίηση πρωτοκόλλου εφαρμογής. 4 / 5
13. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 14. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. 5 / 5