ÁíôéäñáóôÞñéï ãéá in-vitro ðïóïôéêü ðñïóäéïñéóìü ôçò Áéìïóöáéñßíçò A1c (HbA1c).

ÁíôéäñáóôÞñéï ãéá in-vitro ðïóïôéêü ðñïóäéïñéóìü ôçò Áéìïóöáéñßíçò A1c (HbA1c). 2004/07/07 A93A01029 D A11A01702 1 x 23 ml Κλινικό ενδιαφέρον (1,7): H HbA1c προκύπτει από τη µη ενζυµατική σταθεροποίηση του Ν- τελικού τµήµατος της β αλυσίδας της αιµοσφαιρίνης A0. Τα επίπεδα HbA1c που είναι ανάλογα προς τα επίπεδα γλυκόζης του αίµατος, αντιστοιχούν στη µέση ηµερήσια συγκέντρωση γλυκόζης κατά τους δύο µήνες πριν από τη λήψη του δείγµατος. Πρόσφατες µελέτες έδειξαν ότι τακτικές µετρήσεις της HbA1c µπορούν να οδηγήσουν σε αλλαγές στη θεραπεία του διαβήτη και σε καλύτερο µεταβολικό έλεγχο όπως υποδεικνύει η µείωση των τιµών της HbA1c. Η παρούσα διαγνωστική µέθοδος in vitro χρησιµοποιείται για τον ποσοτικό προσδιορισµό της αιµοσφαιρίνης A1c (HbA1c), που αποτελεί ένδειξη διαβήτη, στο ανθρώπινο αίµα. Οι µετρήσεις που λαµβάνονται µε αυτή τη διαδικασία µπορούν να χρησιµοποιηθούν για µακροχρόνιο έλεγχο των διαβητικών. Μέθοδος Η HbA1c εκφράζεται ως ποσοστό της περιεκτικότητας ολικής αιµοσφαιρίνης. Για τον προσδιορισµό των συγκεντρώσεων THb µε τη µέθοδο της φασµατοφωτοµετρίας, οι διαφορετικές µορφές αιµοσφαιρίνης πρέπει να µετατραπούν σε µία ενιαία µορφή µε οµοιόµορφο φάσµα απορρόφησης. Οι τιµές της HbA1c και της ολικής αιµοσφαιρίνης (THb) σε mol που λαµβάνονται από την ανάλυση χρησιµοποιούνται για τον υπολογισµό του λόγου HbA1c/THb και δεν πρέπει να χρησιµοποιούνται µεµονωµένα για διαγνωστικούς σκοπούς. Αρχή (8): Οι συγκεντρώσεις της HbA1c και της ολικής αιµοσφαιρίνης µετρώνται και ο λόγος εκφράζεται ως ποσοστό της HbA1c. Για τον προσδιορισµό του ποσοστού της HbA1c, απαιτείται η χρήση πέντε αντιδραστηρίων: του Antibody Reagent (R1) αραιωµένου µε Diluent I (R5), του Agglutinator Reagent (R2), του Hemolysis Reagent (R3) και του Total Hemoglobin Reagent (R4). Το δείγµα ολικού αίµατος αναµιγνύεται µε το Hemolysis Reagent (R3) από τον αναλυτή: Πραγµατοποιείται λύση των ερυθρών αιµοσφαιρίων και υδρόλυση της αιµοσφαιρινικής αλυσίδας µε τη δράση µιας πρωτεάσης που υπάρχει στο αντιδραστήριο. Το Total Hemoglobin Reagent (R4) χρησιµοποιείται για τον προσδιορισµό της ολικής αιµοσφαιρίνης. Η µέθοδος βασίζεται στη µετατροπή κάθε µορφής αιµοσφαιρίνης σε αλκαλική αιµατίνη σε ένα αλκαλικό διάλυµα µη ιοντικού καθαριστικού όπως περιγράφεται στην αρχική διαδικασία από τους Wolf et al. Η αντίδραση προκαλείται από την προσθήκη δείγµατος αίµατος που έχει υποβληθεί σε προεπεξεργασία µε το Total Hemoglobin Reagent (R4), µε αποτέλεσµα τη λήψη διαλύµατος πράσινου χρώµατος. Η µετατροπή των διαφορετικών τύπων αιµοσφαιρίνης σε αλκαλική αιµατίνη µε καθορισµένο φάσµα απορρόφησης επιτρέπει τον υπολογισµό της συγκέντρωσης της ολικής αιµοσφαιρίνης. Η αιµοσφαιρίνη µετράται µε τη µέθοδο τελικού σηµείου στα 600nm. 1 x 23 ml 1 x 110 ml 1 x 38 ml 1 x 25 ml ABX Diagnostics BP 7290-34184 Montpellier cedex 4 - France Τα επίπεδα αιµοσφαιρίνης είναι ευθέως ανάλογα προς την οπτική πυκνότητα (OD) που παρατηρείται. Για τη µέτρηση της ειδικής HbA1c χρησιµοποιείται µέθοδος συµπλοκοποίησης latex µε αναστολή. Μια συγκολλητίνη (συνθετικό πολυµερές που περιέχει πολλαπλά αντίγραφα του ανοσοαντιδρώντος τµήµατος της HbA1c) προκαλεί τη συµπλοκοποίηση των σωµατιδίων latex που καλύπτονται µε ειδικά µονοκλωνικά αντισώµατα ποντικιού της HbA1c. Απουσία της HbA1c στο δείγµα, πραγµατοποιείται συµπλοκοποίηση της συγκολλητίνης στο Agglutinator Reagent (R2) και των µικροσωµατιδίων που καλύπτονται µε το Antibody Reagent (R1). Η συµπλοκοποίηση οδηγεί σε αύξηση της απορρόφησης του αιωρήµατος. Η παρουσία της HbA1c στο δείγµα µειώνει το ρυθµό συµπλοκοποίησης, καθώς η HbA1c ανταγωνίζεται µε το Agglutinator Reagent (R2) για τα σηµεία πρόσδεσης του αντισώµατος των µικροσωµατιδίων. Όσο µεγαλύτερη είναι η ποσότητα HbA1c στο δείγµα, τόσο χαµηλότερος είναι ο ρυθµός συµπλοκοποίησης. Η αντίδραση µετράται µε την απορρόφηση στα 600 nm και ο ρυθµός συµπλοκοποίησης χρησιµοποιείται για τον υπολογισµό της συγκέντρωσης από µια καµπύλη βαθµονόµησης. Το ποσοστό της HbA1c υπολογίζεται στη συνέχεια χρησιµοποιώντας τις τιµές της HbA1c και της ολικής αιµοσφαιρίνης σε µmol. S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B

Αντιδραστήρια Το ABX Pentra HbA1c WB είναι κιτ πολλαπλού αντιδραστηρίου. Το κιτ περιλαµβάνει: Αντιδραστήριο 1: Antibody Reagent 1 x 23 ml Αντιδραστήριο 2: Agglutinator Reagent 1 x 23 ml Αντιδραστήριο 3: Hemolysis Reagent 1 x 110 ml Αντιδραστήριο 4: Total Hemoglobin Reagent 1 x 38 ml Αντιδραστήριο 5: Diluent I 1 x 25 ml Το Antibody Reagent (R1) περιέχει: σωµατίδια συζευγµένα µε αντισώµατα HbA1c (ποντικιού), βόεια λευκωµατίνη ορού, ρυθµιστικό διάλυµα, επιφανειοδραστικά, συντηρητικά. Το Agglutinator Reagent (R2) περιέχει: πολυµερές απτίνης οµοιοπολικά συζευγµένο, βόεια λευκωµατίνη ορού, ρυθµιστικό διάλυµα, συντηρητικό, επιφανειοδραστικό. Το Hemolysis Reagent (R3) περιέχει: χοίρεια πεψίνη, ρυθµιστικό διάλυµα, συντηρητικό. Το παρόν αντιδραστήριο διατίθεται και ξεχωριστά, ο κωδικός του είναι ο A11A01730. Το Total Hemoglobin Reagent (R4) περιέχει: υδροξείδιο του νατρίου, επιφανειοδραστικό. Το Diluent I (R5) Περιέχει: συντηρητικό, NaCl. Τα δείγµατα ολικού αίµατος, ο βαθµονοµητής και ο ορός ελέγχου δεν απαιτούν προ-επεξεργασία. Για το πιπετάρισµα ολικού αίµατος συνιστάται η χρήση πιπέτας θετικής εκτόπισης. Σηµείωση: είναι δυνατή η ταυτόχρονη ανάλυση 5 δειγµάων. Aν πρέπει να αναλυθούν περισσότερα από 5 δείγµατα, περιµένετε µέχρι το όργανο να τεθεί σε κατάσταση Analysing πριν τοποθετήσετε τα επόµενα δείγµατα µετά την οµογενοποίηση. Βαθµονοµητής Για τη βαθµονόµηση, χρησιµοποιήστε: Το ABX Pentra HbA1c WB Cal, Κωδ. A11A01703 (δεν περιλαµβάνεται) 1 x 8 ml + 5 x 2 ml Η ολική αιµοσφαιρίνη βαθµονοµείται µε το ABX Pentra HbA1c WB Cal (CAL 1) χρησιµοποιώντας µια τιµή στόχο ολικής αιµοσφαιρίνης. Οι βαθµονοµητές και τα αντιδραστήρια δεν εξαρτώνται από την παρτίδα και υποβάλλονται σε εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο στην ΑΒΧ. Η βαθµονόµηση της µεθόδου HbA1c πραγµατοποιείται µε τη χρήση του ABX Pentra HbA1c WB Cal, το οποίο περιέχει έξι επίπεδα βαθµονοµητών HbA1c. Αυτές οι διαδικασίες βαθµονόµησης είναι συµβατές µε την πιστοποίηση NGSP/DCCT. Tοποθετήστε τους βαθµονοµητές στο calibrator sample rack : Το ABX Pentra HbA1c WB πρέπει να χρησιµοποιείται σύµφωνα µε τις παρούσες οδηγίες. Η ΑBX Diagnostics δεν µπορεί να παρέχει καµία εγγύηση ως προς την απόδοσή του σε περίπτωση διαφορετικής χρήσης. Χειρισµός Antibody Reagent (R1): 1. Αναµίξτε 3 όγκους Antibody Reagent (R1) µε 2 όγκους Diluent I (R5) 2. Αφήστε το µίγµα να σταθεροποιηθεί για περίπου µία ώρα στο ψυγείο του ABX Pentra 400 πριν από την πρώτη χρήση. Όλα τα υπόλοιπα αντιδραστήρια, το Agglutinator Reagent (R2), το Hemolysis Reagent (R3), και το Total Hemoglobin Reagent (R4), είναι έτοιµα προς χρήση. 1. Αναµίξτε το περιεχόµενο των αντιδραστηρίων προσεκτικά µε αναστροφή και µεταγγίστε τα σε κατάλληλα δοχεία αντιδραστηρίου. 2. Αφήστε τα αντιδραστήρια να σταθεροποιηθούν στο ψυγείο του ABX Pentra 400 πριν από τη χρήση. βλέπε διάγραµµα παρακάτω (το τµήµα Α, B και C λειτουργεί ως παράδειγµα) Hemolysis Reagent Αντιδραστήριο 3 Total Hemoglobin Reagent Αντιδραστήριο 4 Agglutinator Reagent Αντιδραστήριο 2 Antibody Reagent Αντιδραστήριο 1 (αραίωσα) 1. CAL 1 (200 µl) 2. νερό 3. CAL 2 (150 µl) 4. CAL 3 (150 µl) 5. CAL 4 (150 µl) 6. CAL 5 (150 µl) 7. CAL 6 (150 µl) Σηµείωση: η θέση CAL 1 λαµβάνεται ως παράδειγµα. Tο CAL 1 µπορεί επίσης να τοποθετηθεί στη θέση 8, 9 ή 10. Ορός ελέγχου Για τον εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο της εξέτασης, χρησιµοποιήστε: Το ABX Pentra HbA1C WB Control, Κωδ. A11A01704 (δεν περιλαµβάνεται) Φυσιολογικός ορός ελέγχου: 2 x 0.25 ml (λυοφιλίωµα) Παθολογικός ορός ελέγχου: 2 x 0.25 ml (λυοφιλίωµα) Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να αναλύεται καθηµερινά και/ ή µετά από κάθε βαθµονόµηση. Η συχνότητα των ορών ελέγχου και τα µεσοδιαστήµατα διασποράς θα πρέπει να ακολουθούν τις οδηγίες του εργαστηρίου και τις κατά τόπους οδηγίες. Τα αποτελέσµατα πρέπει να βρίσκονται εντός του εύρους τιµών των προκαθορισµένων ορίων εµπιστοσύνης. Κάθε εργαστήριο πρέπει να καθιερώσει µια διαδικασία την οποία θα ακολουθεί, σε περίπτωση που τα αποτελέσµατα υπερβαίνουν τα προκαθορισµένα όρια. S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 000 42 - APE 332 B

Απαιτούµενα µη παρεχόµενα υλικά Αυτόµατος βιοχηµικός αναλυτής Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισµός νερό είγµα (9) Τα δείγµατα τριχοειδικού ή φλεβικού αίµατος µπορούν να χρησιµοποιηθούν µε αυτή τη µέθοδο. Τα αποδεκτά αντιπηκτικά είναι το καλιούχο αιθυλενοδιαµινοτετραοξικό οξύ (K2-EDTA) και η εναµµώνια ηπαρίνη (NH 4 -ηπαρίνη). είγµατα ολικού αίµατος που συλλέγονται σε K 2 -EDTA ή NH 4 -ηπαρίνη µπορούν να αποθηκευτούν στους -70 C για µέχρι και έξι µήνες, στους 5 C για µέχρι και δύο εβδοµάδες, ή στους 25 C και άνω για µέχρι και µια εβδοµάδα. Τα κατεψυγµένα δείγµατα πρέπει να αποψύχονται σε θερµοκρασία δωµατίου και στη συνέχεια να αναµειγνύονται προσεκτικά πριν από τη χρήση. Αναµίξτε προσεκτικά τα δείγµατα αίµατος αµέσως πριν τη διεξαγωγή της ανάλυσης προκειµένου να εξασφαλίσετε ακριβή αποτελέσµατα THb. Εύρος φυσιολογικών τιµών (4,11,13,14) Κάθε εργαστήριο οφείλει να φροντίζει ώστε οι συνήθεις τιµές του να είναι συµβατές µε τις τιµές αναφοράς του NGSP. Η τεχνική αυτή έχει πιστοποιηθεί από το NGSP µε 4-6% HbA1c ως φυσιολογική τιµή σε µη διαβητικούς, µε θεραπευτικό στόχο τη λήψη τιµής 7%, όπως συνιστά η ADA (Αµερικανική ιαβητολογική Εταιρία). Όλα τα αποτελέσµατα ασθενών πρέπει να ερµηνεύονται υπό το φως των συνολικών κλινικών εξετάσεων του ασθενή. Όρια της µεθόδου (10): Οι περισσότεροι ασθενείς παρουσιάζουν επίπεδα αιµοσφαιρίνης µεταξύ 4.4 mmol/l και 14.4 mml/l. Ωστόσο, σύµφωνα µε δηµοσιεύσεις ειδικών, τα επίπεδα αιµοσφαιρίνης ασθενών µε οξεία αναιµία ενδέχεται να είναι χαµηλότερα από 4.4 mmol/l ενώ τα επίπεδα αιµοσφαιρίνης ασθενών µε πολυκυτταραιµία ενδέχεται να υπερβαίνουν τα 14.4 mmol/l. Οι ασθενείς µε αυτά τα συµπτώµατα θα πρέπει να υποβάλλονται σε ανάλυση µε άλλη µέθοδο αν οι τιµές αιµοσφαιρίνης τους βρίσκονται εκτός του εύρους µέτρησης. Κάθε συνθήκη που επηρεάζει το χρόνο ζωής των ερυθρών αιµοσφαιρίων (όπως η αιµολυτική αναιµία ή άλλες αιµολυτικές παθήσεις, εγκυµοσύνη ή σηµαντική απώλεια αίµατος ) οδηγεί σε µείωση της έκθεσης αυτών των κυττάρων στη γλυκόζη και κατά συνέπεια σε χαµηλότερο ποσοστό των επιπέδων γλυκοζυλιωµένης αιµοσφαιρίνης (Ghb). Τα αποτελέσµατα των ποσοστών της Ghb δεν είναι αξιόπιστα σε ασθενείς που πάσχουν από χρόνια απώλεια αίµατος και ως εκ τούτου έχουν µεταβλητούς χρόνους ζωής των ερυθροκυττάρων. είγµατα που περιέχουν αιµοσφαιρίνη S και C, όταν αναλύονται µε αυτή τη µέθοδο, ενδέχεται να οδηγήσουν σε αύξηση έως και 40% της αναµενόµενης τιµής της HbA1c. Από δείγµατα που περιέχουν υψηλά επίπεδα αιµοσφαιρίνης F (περισσότερο από 10%) ενδέχεται να προκύψουν αποτελέσµατα της HbA1c χαµηλότερα από τα αναµενόµενα µε αυτή τη µέθοδο. Εποµένως, τα αποτελέσµατα της αιµοσφαιρίνης Alc που λαµβάνονται µε αυτή την ανάλυση για δείγµατα αίµατος που περιέχουν τις µορφές S, C και F (περισσότερο από 10%) δεν πρέπει να συγκρίνονται µε τις φυσιολογικές ή µη φυσιολογικές δηµοσιευµένες τιµές. Έχει διαπιστωθεί ότι ένα δείγµα που περιέχει αιµοσφαιρίνη Ε δεν προκαλεί παρεµβολή στη µέτρηση της HbA1c κατά τη χρήση αυτής της µεθόδου. Παρεµβολές από καρβαµυλιωµένες ή ακετυλιωµένες αιµοσφαιρίνες δεν έχουν αξιολογηθεί για το παρόν αντιδραστήριο. Το ασταθές κλάσµα γλυκοζυλιωµένης αιµοσφαιρίνης (σηµείο πρόσδεσης γλυκόζης του Schiff στην αιµοσφαιρίνη Α ή Alc) δεν επηρεάζει τα αποτελέσµατα, καθώς το αντίσωµα είναι ειδικό για σταθερή κετοαµίνη. Αποθήκευση και Σταθερότητα Προστατέψτε από υψηλή θερµοκρασία, ηλιακή ακτινοβολία και ψύξη. ιάρκεια ζωής αντιδραστηρίου (σφραγισµένο και µετά το άνοιγµα): Τα αντιδραστήρια παραµένουν σταθερά µέχρι την ηµεροµηνία λήξης που υποδεικνύεται στην ετικέτα εφόσον αποθηκεύονται σε θερµοκρασία µεταξύ 2-8 C στην αρχική τους συσκευασία και προστατεύονται από µολύνσεις. ιαδικασία Ανάλυσης Το πρωτόκολλο εφαρµογής της εξέτασης σε αναλυτές πλην του ΑBX Pentra 400 διατίθεται κατόπιν παραγγελίας. ιαχείριση Αποβλήτων Παρακαλούµε ανατρέχετε στις κατά τόπους νοµικές διατάξεις. Γενικές Προφυλάξεις 1. Αντιδραστήριο, µόνο για επαγγελµατική in-vitroδιαγνωστική χρήση. 2. Antibody Reagent (R1) : Για την παρασκευή αυτού του προϊόντος χρησιµοποιήθηκαν συστατικά ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε µονάδα δότη έχει αναλυθεί για το επιφανειακό αντιγόνο της Ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για τα αντισώµατα της Ηπατίτιδας C (HCV) και του Ιού Ανθρώπινης Ανοσοανεπάρκειας (HIV-1 και HIV-2). Από την ανάλυση προέκυψαν αρνητικά αποτελέσµατα (απουσία υποτροπιάζουσας δραστικότητας). Προσοχή. Εφόσον καµία ανάλυση δεν εγγυάται πλήρως την απουσία των ιών HIV, ηπατίτιδας Β ή C ή άλλων µολυσµατικών παραγόντων, τα προϊόντα αυτά πρέπει να αντιµετωπίζονται ως εν δυνάµει µολυσµατικά δείγµατα ανθρώπινου αίµατος. Σε περίπτωση έκθεσης, ακολουθήστε τους κατά τόπους κανονισµούς των υγειονοµικών αρχών. 3. Agglutinator Reagent (R2) : Προκαλεί ερεθισµό. 4. Antibody Reagent (R1), Agglutinator Reagent (R2), Hemolysis Reagent (R3) και Total Hemoglobin Reagent (R4): Αποφύγετε την επαφή µε τα µάτια, το δέρµα και τα ρούχα. Ξεπλύνετε τα χέρια σας προσεκτικά µε νερό µετά τη χρήση του προϊόντος. Απαγορεύεται η κατάποση. 5. Diluent I (R5): Προκαλεί ερεθισµό. R36/38: Μπορεί να προκαλέσει ερεθισµούς στα µάτια και το δέρµα. R43: Η επαφή µε το δέρµα µπορεί να προκαλέσει ευαισθητοποίηση. 6. Τα φιαλίδια αντιδραστηρίων πρέπει να απορρίπτονται µετά από κάθε χρήση. 7. Παρακαλούµε να ανατρέξετε στο ελτίο εδοµένων Ασφαλείας Προϊόντος που αφορά στο αντιδραστήριο. S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B

Απόδοση στο ABX Pentra 400 Τα χαρακτηριστικά απόδοσης που αναγράφονται παρακάτω προσδιορίστηκαν στον αναλυτή ABX Pentra 400. Αριθµός εξετάσεων: 345 εξετάσεις ιάρκεια ζωής του ανασυσταθέντος διαλύµατος latex: Η διάρκεια ζωής του ανασυσταθέντος διαλύµατος latex είναι 2 µήνες εφόσον αποθηκευτεί σε θερµοκρασία 2-8 C µετά την ανασύσταση. Χρησιµοποιήστε µόνο την απαιτούµενη ποσότητα και τοποθετήστε αµέσως τα αντιδραστήρια σε ψυχρό περιβάλλον µετά τη χρήση. παίρνω Όγκος δείγµατος: 7.3 µl/εξέταση () Όγκος δείγµατος (µετά τη θεραπεία): Hb: 25 µl/εξέταση HbA1c: 2.5 µl/εξέταση Όριο ανίχνευσης: Το όριο ανίχνευσης καθορίζεται σύµφωνα µε το πρωτόκολλο Valtec (15) και ισούται µε 50.02 µmol/l για προσδιορισµό ολικής αιµοσφαιρίνης. Ακρίβεια και επαναληψιµότητα: Επαναληψιµότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγµατα χαµηλής, µέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου αναλύονται 20 φορές, σύµφωνα µε τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο Valtec (15). Μέση τιµή % CV % Φυσιολογικός ορός ελέγχου 5.37 1.78 Παθολογικός ορός ελέγχου 10.73 1.52 είγµα 1 5.48 1.03 είγµα 2 8.00 2.07 είγµα 3 12.49 1.28 Αναπαραγωγιµότητα 2 δείγµατα χαµηλής και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου υποβλήθηκαν σε διπλή ανάλυση για 20 ηµέρες (2 σειρές ηµερησίως), σύµφωνα µε τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο NCCLS, EP5-A (16). Μέση τιµή % CV % Φυσιολογικός ορός ελέγχου 5.49 2.62 Παθολογικός ορός ελέγχου 11.10 2.73 είγµα 1 5.16 2.34 είγµα 2 13.67 2.18 Γραµµικότητα και Εύρος Μέτρησης: Η γραµµικότητα του αντιδραστηρίου καθορίζεται σύµφωνα µε τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο NCCLS, EP6-P (17). Κάτω όριο γραµµικότητας:για ολική αιµοσφαιρίνη:203 mol/l για HbA1c: 54.94 mol/l Άνω όριο γραµµικότητας: για ολική αιµοσφαιρίνη:5125 mol/l για HbA1c: 7.80 mol/l Σηµείωση: αν η συγκέντρωση της HbA1c είναι υψηλότερη από αυτήν του βαθµονοµητή ανώτατης συγκέντρωση (7.80 µmol/l, 319.80 µmol/l στην αυτόµατη µέθοδο), µην εκτελείτε αραίωση του δείγµατος. Yπολογίστε τη µέγιστη δυνατή τιµή σύµφωνα µε τη συγκέντρωση της ολικής αιµοσφαιρίνης HbT και εκφράστε την τιµή ως υψηλότερη από.... Παράδειµα: αν η συγκέντρωση ολικής αιµοσφαιρίνης HbT που καθορίζεται από το όργανο είναι 2214.00 µmol/l, υπολογίστε την τιµή: 319.80/2214.00 x 100 = 14.44% HbA1c. Tο αποτέλεσυα είναι: υψηλότερη από 14.44% της HbA1c. Συσχετισµός: 98 δείγµατα ασθενών συσχετίζονται µε ένα αντιδραστήριο του εµπορίου που λαµβάνεται ως σηµείο αναφοράς σύµφωνα µε τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο NCCLS, EP9-A2 (18). Η εξίσωση της αλλοµετρικής γραµµής που προκύπτει είναι: Y = 1.07 x + 0.04 µε συντελεστή συσχετισµού r 2 = 0.947. Παρεµβολές: Τριγλυκερίδια: εν παρατηρείται σηµαντική επίδραση ως 7 mmol/l Oλικής Χολερυθρίνη: εν παρατηρείται σηµαντική επίδραση ως 353 µmol/l Αµεσης Χολερυθρίνη: εν παρατηρείται σηµαντική επίδραση ως 368 µmol/l λυκόζη: εν παρατηρείται σηµαντική επίδραση ως 167 mmol/l Σταθερότητα Βαθµονόµησης: Το αντιδραστήριο βαθµονοµείται στην Ηµέρα 0. Η σταθερότητα της βαθµονόµησης ελέγχεται µε την ανάλυση 2 δειγµάτων ορού ελέγχου. Η σταθερότητα της βαθµονόµησης είναι 4 εβδουάδες. Σηµείωση: Συνιστάται αναβαθµονόµηση όταν αλλάζουν οι παρτίδες των αντιδραστηρίων, όταν αλλάζει το αιώρηµα latex και όταν τα αποτελέσµατα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισµένου εύρους τιµών. Ratio: Y = (100*963X-240)/1000 Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρµογής: 3.00 Προειδοποίηση Εναπόκειται στην ευθύνη των χρηστών να ελέγξουν ότι το έγγραφο αυτό αφορά στο αντιδραστήριο που χρησιµοποιείται. Βιβλιογραφία 1. Mayer TK and Freedman ZR: Protein glycosylation in diabetes mellitus: A review of laboratory measurements and of their clinical utility. Clin. Chim. Acta 127; 147-184 (1983). 2. Baynes JW.Bunn HF, Goldstein DE, et al : National Diabetes Group; Report of the expert committee on glucosylated hemoglobin. Diabetes Care 7; 602-606 (1984). 3. Koenig RJ, Peterson CM, Kilo C. et al: Hemoglobin A1c as an indicator of the degree of glucose intolerance in diabetes. Diabetes 25; 230-232 (1976). 4. Nathan DM, Singer DE, Hurxthal K, and Goodson JD: The clinical information value of the glycosylated hemoglobin assay. NE J. Med. 310; 341-346 (1984). 5. McCarren M: DCCT; and it works: Intensive therapy reduces the risk of diabetic eye, kidney, and nerve disease. Diabetes forecast 49-51 (September 1993). 6. Larsen ML, Horder M, and Mogensen EF: Effect of long-term monitoring of glycosylated hemoglobin levels in insulindependent diabetes mellitus. NE. J. Med. 323; 1021-1025 (1990). 7. Nathan DM: Hemoglobin A 1c. Infatuation or the real thing? NE. J. Med. 323; 1062-1063 (1990). S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 000 42 - APE 332 B

8. Wolf HU, Lang W, and Zander R; Alkaline haematin D-575, a new tool for the determination of haemoglobin as an alternative to the cyanhaemoglobin method. Clin. Chim. Acta. 136; 83-104 (1984). 9. National Committee for Clinical Laboratory Standards Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Skin Puncturethird edition; approved standard. NCCLS publication H4-A3. Villanova, PA: NCCLS; 1991. 10. Knowles BJ, Haigh WB, and Michaud GC: A monoclonal antibodybased immunoassay for hemoglobin A 1c. Diabetes 35; Supplement: 94A (1986). 11. Goldstein DE, Little RR, Wiedmayer HM, et al: Glycated hemoglobin: Methodologies and clinical applications Clin. Chem. 32; 864-870 (1986). 12. Ellis G. Diamandis EP, Giesbrecht EE, et al. An automated «high pressure» liquid chromatographic assay for hemoglobin A 1c. Clin. Chem. 30: 1746-11752 (1984). 13. Burtis CA and Ashwood ER, eds: Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2 nd edition, WB Saunders Company, Philadelphia, PA. p.2021 (1994). 14. Diabetes Care 2002; 25 (suppl. 1); 33-49. 15. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745. 16. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices, Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2, february 1999. 17. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods, Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18, september 1986. 18. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples, Approved Guideline, 2 nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No. 19, 2002. S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B

S.A. au capital de 44.000.000 - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 000 42 - APE 332 B