(Αιμόλυσης) Κωδ.: A11A01702 όγκος R1: 1 x 23 ml όγκος R2: 1 x 23 ml όγκος R3: 1 x 110 ml όγκος R4: 2 x 21 ml όγκος R5: 1 x 25 ml ABX Pentra Αιμόλυσης ÁíôéäñáóôÞñéï ãéá in-vitro ðïóïôéêü ðñïóäéïñéóìü ôçò Áéìïóöáéñßíçò A1c (HbA1c). 2008/11/12 A93A01052M EL A11A01702 1 x 23 ml Form-0846 Rev. 2 Κλινικό ενδιαφέρον (1,7) H HbA1c προκύπτει από τη μη ενζυματική σταθεροποίηση του Ν- τελικού τμήματος της β αλυσίδας της αιμοσφαιρίνης A0. Τα επίπεδα HbA1c που είναι ανάλογα προς τα επίπεδα γλυκόζης του αίματος, αντιστοιχούν στη μέση ημερήσια συγκέντρωση γλυκόζης κατά τους δύο μήνες πριν από τη λήψη του δείγματος. Πρόσφατες μελέτες έδειξαν ότι τακτικές μετρήσεις της HbA1c μπορούν να οδηγήσουν σε αλλαγές στη θεραπεία του διαβήτη και σε καλύτερο μεταβολικό έλεγχο όπως υποδεικνύει η μείωση των τιμών της HbA1c. Η παρούσα διαγνωστική μέθοδος in vitro χρησιμοποιείται για τον ποσοτικό προσδιορισμό της αιμοσφαιρίνης A1c (HbA1c), που αποτελεί ένδειξη διαβήτη, στο ανθρώπινο αίμα. Οι μετρήσεις που λαμβάνονται με αυτή τη διαδικασία μπορούν να χρησιμοποιηθούν για μακροχρόνιο έλεγχο των διαβητικών. Μέθοδος Η HbA1c εκφράζεται ως ποσοστό της περιεκτικότητας ολικής αιμοσφαιρίνης. Για τον προσδιορισμό των συγκεντρώσεων THb με τη μέθοδο της φασματοφωτομετρίας, οι διαφορετικές μορφές αιμοσφαιρίνης πρέπει να μετατραπούν σε μία ενιαία μορφή με ομοιόμορφο φάσμα απορρόφησης. Οι τιμές της HbA1c και της ολικής αιμοσφαιρίνης (THb) σε µmol που λαμβάνονται από την ανάλυση χρησιμοποιούνται για τον υπολογισμό του λόγου HbA1c/THb και δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται μεμονωμένα για διαγνωστικούς σκοπούς. Αρχή (8): Οι συγκεντρώσεις της HbA1c και της ολικής αιμοσφαιρίνης μετρώνται και ο λόγος εκφράζεται ως ποσοστό της HbA1c. Για τον προσδιορισμό του ποσοστού της HbA1c, απαιτείται η χρήση πέντε αντιδραστηρίων: του Antibody Reagent (R1) αραιωμένου με Diluent I (R5), του Agglutinator Reagent (R2), του Hemolysis Reagent (R3) και του Total Hemoglobin Reagent (R4). Το δείγμα ολικού αίματος αναμιγνύεται χειροκίνητα με το Hemolysis Reagent (R3) (1 όγκου δείγμα σε 50 όγκους R3): Πραγματοποιείται λύση των ερυθρών αιμοσφαιρίων και υδρόλυση της αιμοσφαιρινικής αλυσίδας με τη δράση μιας πρωτεάσης που υπάρχει στο αντιδραστήριο. Το Total Hemoglobin Reagent (R4) χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της ολικής αιμοσφαιρίνης. Η μέθοδος βασίζεται στη μετατροπή κάθε μορφής αιμοσφαιρίνης σε αλκαλική αιματίνη σε ένα αλκαλικό διάλυμα μη ιοντικού καθαριστικού όπως περιγράφεται στην αρχική διαδικασία από τους Wolf et al. Η αντίδραση προκαλείται από την προσθήκη δείγματος αίματος που έχει υποβληθεί σε προεπεξεργασία με το Total Hemoglobin Reagent (R4), με αποτέλεσμα τη λήψη διαλύματος πράσινου χρώματος. Η μετατροπή των διαφορετικών τύπων αιμοσφαιρίνης σε αλκαλική αιματίνη με καθορισμένο φάσμα απορρόφησης επιτρέπει τον υπολογισμό της συγκέντρωσης της ολικής αιμοσφαιρίνης. Η αιμοσφαιρίνη μετράται με τη μέθοδο τελικού σημείου στα 550nm. 1 x 23 ml 1 x 110 ml 2 x 21 ml 1 x 25 ml HORIBA ABX SAS BP 7290 34184 Montpellier - cedex 4 - France Τα επίπεδα αιμοσφαιρίνης είναι ευθέως ανάλογα προς την οπτική πυκνότητα (OD) που παρατηρείται..για τη μέτρηση της ειδικής HbA1c χρησιμοποιείται μέθοδος συμπλοκοποίησης latex με αναστολή. Μια συγκολλητίνη (συνθετικό πολυμερές που περιέχει πολλαπλά αντίγραφα του ανοσοαντιδρώντος τμήματος της HbA1c) προκαλεί τη συμπλοκοποίηση των σωματιδίων latex που καλύπτονται με ειδικά μονοκλωνικά αντισώματα ποντικιού της HbA1c. Απουσία της HbA1c στο δείγμα, πραγματοποιείται συμπλοκοποίηση της συγκολλητίνης στο Agglutinator Reagent (R2) και των μικροσωματιδίων που καλύπτονται με το Antibody Reagent (R1). Η συμπλοκοποίηση οδηγεί σε αύξηση της απορρόφησης του αιωρήματος. Η παρουσία της HbA1c στο δείγμα μειώνει το ρυθμό συμπλοκοποίησης, καθώς η HbA1c ανταγωνίζεται με το Agglutinator Reagent (R2) για τα σημεία πρόσδεσης του αντισώματος των μικροσωματιδίων. Όσο μεγαλύτερη είναι η ποσότητα HbA1c στο δείγμα, τόσο χαμηλότερος είναι ο ρυθμός συμπλοκοποίησης. Η αντίδραση μετράται με την απορρόφηση στα 550 nm και ο ρυθμός συμπλοκοποίησης χρησιμοποιείται για τον υπολογισμό της συγκέντρωσης από μια καμπύλη βαθμονόμησης. Το ποσοστό της HbA1c υπολογίζεται στη συνέχεια χρησιμοποιώντας τις τιμές της HbA1c και της ολικής αιμοσφαιρίνης σε µmol.
Αντιδραστήρια Το ABX Pentra είναι κιτ πολλαπλού αντιδραστηρίου. Το κιτ περιλαμβάνει: Αντιδραστήριο 1: Antibody Reagent 1 x 23 ml Αντιδραστήριο 2: Agglutinator Reagent 1 x 23 ml Αντιδραστήριο 3: Hemolysis Reagent 1 x 110 ml Αντιδραστήριο 4: Total Hemoglobin Reagent 2 x 21 ml Αντιδραστήριο 5: Diluent I 1 x 25 ml Το Antibody Reagent (R1) περιέχει: σωματίδια συζευγμένα με αντισώματα HbA1c (ποντικιού), βόεια λευκωματίνη ορού, ρυθμιστικό διάλυμα, επιφανειοδραστικά, συντηρητικά. Το Agglutinator Reagent (R2) περιέχει: πολυμερές απτίνης ομοιοπολικά συζευγμένο, βόεια λευκωματίνη ορού, ρυθμιστικό διάλυμα, συντηρητικό, επιφανειοδραστικό. Το Hemolysis Reagent (R3) περιέχει: χοίρεια πεψίνη, ρυθμιστικό διάλυμα, συντηρητικό. Το παρόν αντιδραστήριο διατίθεται και ξεχωριστά, ο κωδικός του είναι ο A11A01730. Το Total Hemoglobin Reagent (R4) περιέχει: υδροξείδιο του νατρίου, επιφανειοδραστικό. Το Diluent I (R5) περιέχει: συντηρητικό, NaCl. Στη μέθοδο της μη αυτόματης αιμόλυσης, τόσο τα δείγματα όσο και οι οροί ελέγχου πρέπει να αραιωθούν σε κλίμακα 1:51 με το Hemolysis Reagent (R3). Αναμίξτε προσεκτικά (αποφύγετε το σχηματισμό αφρού) και αφήστε να σταθεροποιηθεί για πέντε λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου (μέχρι να επιτευχθεί ένα πρασινωπό χρώμα) πριν διενεργήσετε την ανάλυση στη συσκευή. Για το πιπετάρισμα ολικού αίματος συνιστάται η χρήση πιπέτας θετικής εκτόπισης. Βαθμονομητής Για τη βαθμονόμηση, χρησιμοποιήστε: Το ABX Pentra HbA1C WB Cal, Κωδ. A11A01703 (δεν περιλαμβάνεται) 1 x 8 ml + 5 x 2 ml Η ολική αιμοσφαιρίνη βαθμονομείται με το ABX Pentra Cal (CAL 1) χρησιμοποιώντας μια τιμή στόχο ολικής αιμοσφαιρίνης. Οι βαθμονομητές και τα αντιδραστήρια δεν εξαρτώνται από την παρτίδα και υποβάλλονται σε εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο στην HORIBA Medical. Η βαθμονόμηση της μεθόδου HbA1c πραγματοποιείται με τη χρήση του ABX Pentra Cal, το οποίο περιέχει έξι επίπεδα βαθμονομητών HbA1c. Αυτές οι διαδικασίες βαθμονόμησης είναι συμβατές με την πιστοποίηση NGSP/DCCT. Tοποθετήστε τους βαθμονομητές στο calibrator sample rack a : Το ABX Pentra πρέπει να χρησιμοποιείται σύμφωνα με τις παρούσες οδηγίες. Η HORIBA Medical δεν μπορεί να παρέχει καμία εγγύηση ως προς την απόδοσή του σε περίπτωση διαφορετικής χρήσης. Χειρισμός Antibody Reagent (R1): 1. Αναμίξτε 3 όγκους Antibody Reagent (R1) με 2 όγκους Diluent I (R5) 2. Αφήστε το μίγμα να σταθεροποιηθεί για περίπου μία ώρα στο ψυγείο του ABX Pentra 400 πριν από την πρώτη χρήση. Όλα τα υπόλοιπα αντιδραστήρια, το Agglutinator Reagent (R2), το Hemolysis Reagent (R3), και το Total Hemoglobin Reagent (R4), είναι έτοιμα προς χρήση. 1. Αναμίξτε το περιεχόμενο των αντιδραστηρίων προσεκτικά με αναστροφή και μεταγγίστε τα σε κατάλληλα δοχεία αντιδραστηρίου. 2. Αφήστε τα αντιδραστήρια να σταθεροποιηθούν στο ψυγείο του ABX Pentra 400 πριν από τη χρήση. βλέπε διάγραμμα παρακάτω (το τμήμα B και C λειτουργεί ως παράδειγμα) Total Hemoglobin Reagent Αντιδραστήριο 4 Agglutinator Reagent Αντιδραστήριο 2 Antibody Reagent Αντιδραστήριο 1 (αραίωσα) 1. CAL 1 (200 µl) 2. CAL 1 (150 µl) 3. CAL 2 (150 µl) 4. CAL 3 (150 µl) 5. CAL 4 (150 µl) 6. CAL 5 (150 µl) 7. CAL 6 (150 µl) Σημείωση: η θέση 1 CAL 1 λαμβάνεται ως παράδειγμα. Tο CAL 1 μπορεί επίσης να τοποθετηθεί στη θέση 8, 9 ή 10. Ορός ελέγχου Για τον εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο της εξέτασης, χρησιμοποιήστε: Το ABX Pentra HbA1C WB Control, Κωδ. A11A01704 (δεν περιλαμβάνεται) Φυσιολογικός ορός ελέγχου: 2 x 0.25 ml (λυοφιλίωμα) Παθολογικός ορός ελέγχου: 2 x 0.25 ml (λυοφιλίωμα) Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να αναλύεται καθημερινά και/ ή μετά από κάθε βαθμονόμηση. Η συχνότητα των ορών ελέγχου και τα μεσοδιαστήματα διασποράς θα πρέπει να ακολουθούν τις οδηγίες του εργαστηρίου και τις κατά τόπους οδηγίες. Τα αποτελέσματα πρέπει να βρίσκονται εντός του εύρους τιμών των προκαθορισμένων ορίων εμπιστοσύνης. Κάθε εργαστήριο πρέπει να a.ôñïðïðïßçóç áðü åõñåôþñéï L óå M: ñçóéìïðïéþóôå ôïí CAL 1 (âáèìïíïìçôþ 1) óôç èýóç ôïõ öõóéïëïãéêïý ïñïý óôç èýóç 2.
καθιερώσει μια διαδικασία την οποία θα ακολουθεί, σε περίπτωση που τα αποτελέσματα υπερβαίνουν τα προκαθορισμένα όρια. Απαιτούμενα μη παρεχόμενα υλικά Αυτόματος βιοχημικός αναλυτής Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός νερό Δείγμα (9) Τα δείγματα τριχοειδικού ή φλεβικού αίματος μπορούν να χρησιμοποιηθούν με αυτή τη μέθοδο. Τα αποδεκτά αντιπηκτικά είναι το καλιούχο αιθυλενοδιαμινοτετραοξικό οξύ (K2-EDTA) και η εναμμώνια ηπαρίνη (NH 4 -ηπαρίνη). Δείγματα ολικού αίματος που συλλέγονται σε K 2 -EDTA ή NH 4 -ηπαρίνη μπορούν να αποθηκευτούν στους -70 C για μέχρι και έξι μήνες, στους 5 C για μέχρι και δύο εβδομάδες, ή στους 25 C και άνω για μέχρι και μια εβδομάδα. Τα κατεψυγμένα δείγματα πρέπει να αποψύχονται σε θερμοκρασία δωματίου και στη συνέχεια να αναμειγνύονται προσεκτικά πριν από τη χρήση. Αναμίξτε προσεκτικά τα δείγματα αίματος αμέσως πριν τη διεξαγωγή της ανάλυσης προκειμένου να εξασφαλίσετε ακριβή αποτελέσματα THb. Εύρος φυσιολογικών τιμών (4,11,13,14) Κάθε εργαστήριο οφείλει να φροντίζει ώστε οι συνήθεις τιμές του να είναι συμβατές με τις τιμές αναφοράς του NGSP. Η τεχνική αυτή έχει πιστοποιηθεί από το NGSP με 4-6% HbA1c ως φυσιολογική τιμή σε μη διαβητικούς, με θεραπευτικό στόχο τη λήψη τιμής < 7%, όπως συνιστά η ADA (Αμερικανική Διαβητολογική Εταιρία). Όλα τα αποτελέσματα ασθενών πρέπει να ερμηνεύονται υπό το φως των συνολικών κλινικών εξετάσεων του ασθενή. Όρια της μεθόδου (10): Οι περισσότεροι ασθενείς παρουσιάζουν επίπεδα αιμοσφαιρίνης μεταξύ 4.4 mmol/l και 14.4 mml/l. Ωστόσο, σύμφωνα με δημοσιεύσεις ειδικών, τα επίπεδα αιμοσφαιρίνης ασθενών με οξεία αναιμία ενδέχεται να είναι χαμηλότερα από 4.4 mmol/ l ενώ τα επίπεδα αιμοσφαιρίνης ασθενών με πολυκυτταραιμία ενδέχεται να υπερβαίνουν τα 14.4 mmol/l. Οι ασθενείς με αυτά τα συμπτώματα θα πρέπει να υποβάλλονται σε ανάλυση με άλλη μέθοδο αν οι τιμές αιμοσφαιρίνης τους βρίσκονται εκτός του εύρους μέτρησης. Κάθε συνθήκη που επηρεάζει το χρόνο ζωής των ερυθρών αιμοσφαιρίων (όπως η αιμολυτική αναιμία ή άλλες αιμολυτικές παθήσεις, εγκυμοσύνη ή σημαντική απώλεια αίματος ) οδηγεί σε μείωση της έκθεσης αυτών των κυττάρων στη γλυκόζη και κατά συνέπεια σε χαμηλότερο ποσοστό των επιπέδων γλυκοζυλιωμένης αιμοσφαιρίνης (Ghb). Τα αποτελέσματα των ποσοστών της Ghb δεν είναι αξιόπιστα σε ασθενείς που πάσχουν από χρόνια απώλεια αίματος και ως εκ τούτου έχουν μεταβλητούς χρόνους ζωής των ερυθροκυττάρων. Δείγματα που περιέχουν αιμοσφαιρίνη S και C, όταν αναλύονται με αυτή τη μέθοδο, ενδέχεται να οδηγήσουν σε αύξηση έως και 40% της αναμενόμενης τιμής της HbA1c. Από δείγματα που περιέχουν υψηλά επίπεδα αιμοσφαιρίνης F (περισσότερο από 10%) ενδέχεται να προκύψουν αποτελέσματα της HbA1c χαμηλότερα από τα αναμενόμενα με αυτή τη μέθοδο. Επομένως, τα αποτελέσματα της αιμοσφαιρίνης Alc που λαμβάνονται με αυτή την ανάλυση για δείγματα αίματος που περιέχουν τις μορφές S, C και F (περισσότερο από 10%) δεν πρέπει να συγκρίνονται με τις φυσιολογικές ή μη φυσιολογικές δημοσιευμένες τιμές. Έχει διαπιστωθεί ότι ένα δείγμα που περιέχει αιμοσφαιρίνη Ε δεν προκαλεί παρεμβολή στη μέτρηση της HbA1c κατά τη χρήση αυτής της μεθόδου. Παρεμβολές από καρβαμυλιωμένες ή ακετυλιωμένες αιμοσφαιρίνες δεν έχουν αξιολογηθεί για το παρόν αντιδραστήριο. Το ασταθές κλάσμα γλυκοζυλιωμένης αιμοσφαιρίνης (σημείο πρόσδεσης γλυκόζης του Schiff στην αιμοσφαιρίνη Α ή Alc) δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα, καθώς το αντίσωμα είναι ειδικό για σταθερή κετοαμίνη. Αποθήκευση και Σταθερότητα Προστατέψτε από υψηλή θερμοκρασία, ηλιακή ακτινοβολία και ψύξη. Διάρκεια ζωής αντιδραστηρίου (σφραγισμένο και μετά το άνοιγμα): Τα αντιδραστήρια παραμένουν σταθερά μέχρι την ημερομηνία λήξης που υποδεικνύεται στην ετικέτα εφόσον αποθηκεύονται σε θερμοκρασία μεταξύ 2-8 C στην αρχική τους συσκευασία και προστατεύονται από μολύνσεις. Διαδικασία Ανάλυσης Το πρωτόκολλο εφαρμογής της εξέτασης σε αναλυτές πλην του ΑBX Pentra 400 διατίθεται κατόπιν παραγγελίας. Διαχείριση Αποβλήτων Παρακαλούμε ανατρέχετε στις κατά τόπους νομικές διατάξεις. Γενικές Προφυλάξεις 1. Αντιδραστήριο, μόνο για επαγγελματική in-vitroδιαγνωστική χρήση. 2. Antibody Reagent (R1) : Για την παρασκευή αυτού του προϊόντος χρησιμοποιήθηκαν συστατικά ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε μονάδα δότη έχει αναλυθεί για το επιφανειακό αντιγόνο της Ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για τα αντισώματα της Ηπατίτιδας C (HCV) και του Ιού Ανθρώπινης Ανοσοανεπάρκειας (HIV-1 και HIV- 2). Από την ανάλυση προέκυψαν αρνητικά αποτελέσματα (απουσία υποτροπιάζουσας δραστικότητας). Προσοχή. Εφόσον καμία ανάλυση δεν εγγυάται πλήρως την απουσία των ιών HIV, ηπατίτιδας Β ή C ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, τα προϊόντα αυτά πρέπει να αντιμετωπίζονται ως εν δυνάμει μολυσματικά δείγματα ανθρώπινου αίματος. Σε περίπτωση έκθεσης, ακολουθήστε τους κατά τόπους κανονισμούς των υγειονομικών αρχών. Προκαλεί ερεθισμό. S24: Αποφεύγετε την επαφή με το δέρμα. S37: Nα φοράτε κατάλληλα γάντια. R43: Η επαφή με το δέρμα μπορεί να προκαλέσει ευαισθητοποίηση. 3. Agglutinator Reagent (R2) : Προκαλεί ερεθισμό. S24: Αποφεύγετε την επαφή με το δέρμα. S37: Nα φοράτε κατάλληλα γάντια. R43: Η επαφή με το δέρμα μπορεί να προκαλέσει ευαισθητοποίηση.
4. Antibody Reagent (R1), Agglutinator Reagent (R2), Hemolysis Reagent (R3), Total Hemoglobin Reagent (R4): Αποφύγετε την επαφή με τα μάτια, το δέρμα και τα ρούχα. Ξεπλύνετε τα χέρια σας προσεκτικά με νερό μετά τη χρήση του προϊόντος. Απαγορεύεται η κατάποση. 5. Diluent I (R5): Προκαλεί ερεθισμό. R36/38: Μπορεί να προκαλέσει ερεθισμούς στα μάτια και το δέρμα. R43: Η επαφή με το δέρμα μπορεί να προκαλέσει ευαισθητοποίηση. 6. Τα φιαλίδια αντιδραστηρίων πρέπει να απορρίπτονται μετά από κάθε χρήση. 7. Παρακαλούμε να ανατρέξετε στο Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Προϊόντος που αφορά στο αντιδραστήριο. Απόδοση στο ABX Pentra 400 Τα χαρακτηριστικά απόδοσης που αναγράφονται παρακάτω προσδιορίστηκαν στον αναλυτή ABX Pentra 400. Αριθμός εξετάσεων: 345 εξετάσεις Διάρκεια ζωής του ανασυσταθέντος διαλύματος latex: Η διάρκεια ζωής του ανασυσταθέντος διαλύματος latex είναι 2 μήνες εφόσον αποθηκευτεί σε θερμοκρασία μεταξύ 2 και 8 C μετά την ανασύσταση. Χρησιμοποιήστε μόνο την απαιτούμενη ποσότητα και τοποθετήστε αμέσως τα αντιδραστήρια σε ψυχρό περιβάλλον μετά τη χρήση. Όγκος δείγματος (μετά τη θεραπεία): Hb: 25 µl/εξέταση HbA1c: 2.5 µl/εξέταση Όριο ανίχνευσης: Το όριο ανίχνευσης καθορίζεται σύμφωνα με το πρωτόκολλο CLSI (NCCLS), EP17-A (19) και ισούται με: για ολική αιμοσφαιρίνη:1.60 µmol/l για HbA1c: 0.40 µmol/l Ακρίβεια και επαναληψιμότητα: Επαναληψιμότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγματα χαμηλής, μέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου αναλύονται 20 φορές, σύμφωνα με τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο Valtec (15). Μέση τιμή % CV % Φυσιολογικός ορός ελέγχου 5.20 1.87 Παθολογικός ορός ελέγχου 9.70 2.72 Δείγμα 1 4.95 1.51 Δείγμα 2 7.77 1.60 Δείγμα 3 10.57 1.44 Αναπαραγωγιμότητα (ακρίβεια μεταξύ των αναλύσεων) 3 δείγματα χαμηλής, μέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου υποβλήθηκαν σε διπλή ανάλυση για 20 ημέρες (2 σειρές ημερησίως), σύμφωνα με τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο CLSI (NCCLS), EP5-A (16). Μέση τιμή % CV % Φυσιολογικός ορός ελέγχου 5.27 1.41 Παθολογικός ορός ελέγχου 10.11 2.42 Δείγμα 1 5.27 2.18 Δείγμα 2 8.52 2.21 Δείγμα 3 12.22 2.46 Γραμμικότητα και Εύρος Μέτρησης: Η γραμμικότητα του αντιδραστηρίου καθορίζεται σύμφωνα με τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο CLSI (NCCLS), EP6-A (17). Κάτω όριο γραμμικότητας: για ολική αιμοσφαιρίνη: 8 µmol/l για HbA1c: 0.6 µmol/l Άνω όριο γραμμικότητας: για ολική αιμοσφαιρίνη: 76.0 µmol/l για HbA1c: 10.8 µmol/l Σημείωση: αν η συγκέντρωση της HbA1c είναι υψηλότερη από αυτήν του βαθμονομητή ανώτατης συγκέντρωση (10.80 µmol/l), μην εκτελείτε αραίωση του δείγματος. Yπολογίστε τη μέγιστη δυνατή τιμή σύμφωνα με τη συγκέντρωση της ολικής αιμοσφαιρίνης HbT και εκφράστε την τιμή ως υψηλότερη από.... Παράδειμα: αν η συγκέντρωση ολικής αιμοσφαιρίνης HbT που καθορίζεται από το όργανο είναι 54.00 µmol/l, υπολογίστε την τιμή: 10.80/54.00 x 100 = 20.00% HbA1c. Tο αποτέλεσυα είναι: υψηλότερη από 20.00% της HbA1c. Συσχετισμός: 125 δείγματα ασθενών συσχετίζονται με ένα αντιδραστήριο του εμπορίου που λαμβάνεται ως σημείο αναφοράς σύμφωνα με τις υποδείξεις στο πρωτόκολλο CLSI (NCCLS), EP9-A (18). Η εξίσωση της αλλομετρικής γραμμής που προκύπτει είναι: Y = 0.86 x + 0.78 με συντελεστή συσχετισμού r 2 = 0.981. Παρεμβολές: Τριγλυκερίδια: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση ως 7 mmol/l Oλικής Χολερυθρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση ως 500 µmol/l Αμεσης Χολερυθρίνη: Δεν παρατηρείται σημαντική επίδραση ως 500 µmol/l Σταθερότητα Βαθμονόμησης: Το αντιδραστήριο βαθμονομείται στην Ημέρα 0. Η σταθερότητα της βαθμονόμησης ελέγχεται με την ανάλυση 2 δειγμάτων ορού ελέγχου. Η σταθερότητα της βαθμονόμησης είναι 3 εβδουάδες. Σημείωση: Συνιστάται αναβαθμονόμηση όταν αλλάζουν οι παρτίδες των αντιδραστηρίων, όταν αλλάζει το αιώρημα latex και όταν τα αποτελέσματα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισμένου εύρους τιμών. Ratio NGSP: Y = (100*53*X + 194)/100 Σημείωση: X = HbA1c/HbT. Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής για τη ανάλυση HbA1c (A1c-H): 4.xx Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής για τη ανάλυση ολική αιμοσφαιρίνη (THb-H): 5.xx
Προειδοποίηση Εναπόκειται στην ευθύνη των χρηστών να ελέγξουν ότι το έγγραφο αυτό αφορά στο αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται. Βιβλιογραφία 1. Mayer TK and Freedman ZR: Protein glycosylation in diabetes mellitus: A review of laboratory measurements and of their clinical utility. Clin. Chim. Acta 127; 147-184 (1983). 2. Baynes JW.Bunn HF, Goldstein DE, et al : National Diabetes Group; Report of the expert committee on glucosylated hemoglobin. Diabetes Care 7; 602-606 (1984). 3. Koenig RJ, Peterson CM, Kilo C. et al: Hemoglobin A1c as an indicator of the degree of glucose intolerance in diabetes. Diabetes 25; 230-232 (1976). 4. Nathan DM, Singer DE, Hurxthal K, and Goodson JD: The clinical information value of the glycosylated hemoglobin assay. NE J. Med. 310; 341-346 (1984). 5. McCarren M: DCCT; and it works: Intensive therapy reduces the risk of diabetic eye, kidney, and nerve disease. Diabetes forecast 49-51 (September 1993). 6. Larsen ML, Horder M, and Mogensen EF: Effect of long-term monitoring of glycosylated hemoglobin levels in insulindependent diabetes mellitus. NE. J. Med. 323; 1021-1025 (1990). 7. Nathan DM: Hemoglobin A 1c. Infatuation or the real thing? NE. J. Med. 323; 1062-1063 (1990). 8. Wolf HU, Lang W, and Zander R; Alkaline haematin D-575, a new tool for the determination of haemoglobin as an alternative to the cyanhaemoglobin method. Clin. Chim. Acta. 136; 83-104 (1984). 9. National Committee for Clinical Laboratory Standards Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Skin Puncturethird edition; approved standard. NCCLS publication H4-A3. Villanova, PA: NCCLS; 1991. 10. Knowles BJ, Haigh WB, and Michaud GC: A monoclonal antibodybased immunoassay for hemoglobin A 1c. Diabetes 35; Supplement: 94A (1986). 11. Goldstein DE, Little RR, Wiedmayer HM, et al: Glycated hemoglobin: Methodologies and clinical applications Clin. Chem. 32; 864-870 (1986). 12. Ellis G. Diamandis EP, Giesbrecht EE, et al. An automated «high pressure» liquid chromatographic assay for hemoglobin A 1c. Clin. Chem. 30: 1746-11752 (1984). 13. Burtis CA and Ashwood ER, eds: Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2 nd edition, WB Saunders Company, Philadelphia, PA. p.2021 (1994). 14. Diabetes Care 2002; 25 (suppl. 1); 33-49. 15. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745. 16. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices, Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A, Vol. 19, No. 2, february 1999. 17. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods, Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A, Vol. 23, No. 16, april 2003. 18. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples, Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2, Vol. 22, No. 19, 2002. 19. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation, Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A, Vol. 24, No. 34, 2004.