2012/01/31 A93A01228CEL A11A01665 29.5 ml Pentra C200 Προοριζόμενη χρήση: Διαγνωστικό αντιδραστήριο για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό του φωσφόρου σε ορό, πλάσμα και ούρα με χρωματομετρία. Κλινικό ενδιαφέρον (1) Ο φώσφορος που περιέχεται στο ανθρώπινο σώμα (80% στα οστά) υπάρχει μόνο με τη μορφή ανόργανων φωσφορικών αλάτων. Τα απαραίτητα επίπεδα φωσφορικών αλάτων παρέχονται μέσω της διατροφής. Τα φωσφορικά άλατα διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην αποθήκευση και κατανομή της ενέργειας που απαιτείται για το μεταβολισμό των κυττάρων. Τα φωσφορικά ιόντα που εντοπίζονται κυρίως στα εξωκυτταρικά υγρά, διαθέτουν επίσης και ιδιότητες ρυθμιστικού διαλύματος. Αύξηση των φωσφορικών ιόντων μπορεί να παρατηρηθεί σε περίπτωση υπερβιταμίνωσης D, υποπαραθυρεοειδισμού και νεφρικής ανεπάρκειας. Μείωση των τιμών του φωσφόρου ορού παρατηρείται σε περιπτώσεις έλλειψης βιταμίνης D και υπερπαραθυρεοειδισμού. Η πλασματική συγκέντρωση του μεταλλικού φωσφόρου εξαρτάται από τη δίαιτα και την εντερική απορρόφηση, τη νεφρική εξουδετέρωση, τη σωληναριακή επαναπορρόφηση και τον οστικό μεταβολισμό. Ενώ οι μετρήσεις των επιπέδων ανόργανου φωσφόρου συνήθως πραγματοποιούνται σε δείγματα αίματος, για την παρακολούθηση της αποβολής του φωσφόρου από τους νεφρούς μπορούν να χρησιμοποιηθούν και οι μετρήσεις του φωσφόρου στα ούρα σε διάφορες χρονικές στιγμές. Όλα αυτά τα φαινόμενα επηρεάζονται από τις ρυθμιστικές ορμόνες και τη συγκέντρωση ασβεστίου (παραθορμόνη PTH, καλσιτονίνη και βιταμίνη D). Κατά συνέπεια, η ρύθμιση του πλασματικού φωσφορικού άλατος σχετίζεται στενά με αυτήν του ασβεστίου. Οι διάφορες μορφές της υπερφωσφαταιμίας (PTH που διεγείρει τους νεφρούς για την εξουδετέρωση φωσφορικού άλατος και την κατακράτηση ασβεστίου), που οφείλονται σε δυσλειτουργία των προαναφερόμενων μηχανισμών, είναι συχνά αντίστροφες με αυτές της υπερασβεσταιμίας. Μέθοδος (2) Μέθοδος UV με χρήση φωσφομολυβδαινικού. Ο φώσφορος αντιδρά με το μολυβδαινικό αμμώνιο σε όξινο μέσο και σχηματίζει ένα κίτρινο φωσφομολυβδαινικό σύμπλοκο: Φώσφορος Μολυβδαινικό αμμώνιο+θειϊκό οξύ > Φωσφομολυβδαινικό σύμπλοκο Η ένταση της απόχρωσης είναι ανάλογη με τη συγκέντρωση του ανόργανου φωσφόρου στο δείγμα. Αντιδραστήρια Το είναι έτοιμο για χρήση. Αντιδραστήριο: Θειϊκό οξύ Μολυβδαινικό αμμώνιο 210 650 µmol/l Το πρέπει να χρησιµοποιείται σύµφωνα µε το παρόν φυλλάδιο αντιδραστηρίου. Ο κατασκευαστής δεν µπορεί να παρέχει καµία εγγύηση ως προς την απόδοσή του σε περίπτωση διαφορετικής χρήσης. Χειρισμός 1. Αφαιρέστε το καπάκι της κασέτας. 2. Εάν έχει σχηματιστεί αφρός, αφαιρέστε τον με μία πλαστική πιπέτα. 3. Τοποθετήστε την κασέτα στο ψυγείο αντιδραστηρίων του Pentra C200. Form-0846 Rev.4
Βαθμονομητής Για τη βαθμονόμηση χρησιμοποιήστε: Multical, Κωδ. A11A01652 (δεν 10 x 3 ml (λυοφιλίωμα) Ορός ελέγχου Για τον εσωτερικό ποιοτικό έλεγχο, χρησιμοποιήστε: N Control, κωδ. A11A01653 (δεν 10 x 5 ml (λυοφιλίωμα) P Control, κωδ. A11A01654 (δεν 10 x 5 ml (λυοφιλίωμα) Urine Control L/H, κωδ. A11A01674 (δεν 1 x 10 ml + 1 x 10 ml Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να υποβάλλεται σε δοκιμασία καθημερινά και/ή μετά από βαθμονόμηση. Η συχνότητα ανάλυσης ορών ελέγχου και τα διαστήματα εμπιστοσύνης πρέπει να ανταποκρίνονται στους κανονισμούς του εκάστοτε εργαστηρίου και στις οδηγίες που ισχύουν στη συγκεκριμένη χώρα. Για την εξέταση υλικών ποιοτικού ελέγχου πρέπει να ακολουθείτε τους ομοσπονδιακούς, πολιτειακούς και τοπικούς κανονισμούς. Τα αποτελέσματα πρέπει να βρίσκονται εντός των καθορισμένων ορίων εμπιστοσύνης. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει τη διαδικασία που θα ακολουθείται όταν τα αποτελέσματα υπερβαίνουν τα καθορισμένα όρια εμπιστοσύνης. Απαιτούμενα υλικά που δεν παρέχονται Αυτόματος βιοχημικός αναλυτής: Pentra C200 Βαθμονομητής: Multical, Κωδ. A11A01652 Υλικά ελέγχου: N Control, Κωδ. A11A01653, και P Control, Κωδ. A11A01654 Urine Control L/H, Κωδ. A11A01674 Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός. Δείγμα a b Μη αιμολυμένος ορός. Πλάσμα σε ηπαρίνη λιθίου. Πλάσμα σε EDTA (δεν χρησιμοποιείται στις ΗΠΑ). Φρέσκα ούρα που έχουν υποστεί φυγοκέντριση. Τα ούρα 24 ώρου πρέπει να συλλέγονται με HCl 6N Άλλα αντιπηκτικά εκτός από τα αναγραφόμενα δεν έχουν αξιολογηθεί από την HORIBA Medical και συνεπώς δεν συνιστάται η χρήση τους στην ανάλυση αυτή. Σταθερότητα: Ορός, πλάσμα (3): 1 εβδομάδα στους 2-8 C Ούρα (4, 5): 2 ημέρες στους 20-25 C εάν ph < 5,0 Εύρος τιμών αναφοράς Κάθε εργαστήριο πρέπει να καθιερώνει το δικό του εύρος φυσιολογικών τιμών. Οι τιμές που αναφέρονται εδώ χρησιμοποιούνται ως ενδεικτικές μόνο. Ορός, πλάσμα (1): Ούρα (6): Φύλαξη και σταθερότητα c 27-45 mg/l 2,7-4,5 0,87-1,45 Ενήλικες: 12,9-42,0 mmol/24 h (0,4-1,3 g/24h) Τα αντιδραστήρια, σε κασέτες που δεν έχουν ανοιχτεί, παραμένουν σταθερά μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα στους 2-8 C. Σταθερότητα μετά το άνοιγμα: ανατρέξτε στην παράγραφο "Απόδοση στον Pentra C200". Διαδικασία Ανάλυσης Οι οδηγίες της ανάλυσης για άλλα αυτοματοποιημένα συστήματα εκτός του Pentra C200, διατίθενται μετά από αίτηση (δεν διατίθενται στις ΗΠΑ). Αλλοίωση συσκευασίας Σε περίπτωση αλλοίωσης της προστατευτικής συσκευασίας, μη χρησιμοποιείτε το αντιδραστήριο εάν η αλλοίωση ενδέχεται να έχει επίπτωση στην απόδοση του προϊόντος. a Τροποποίηση: προσθήκη σύστασης. b Τροποποίηση: τροποποίηση "Δείγματος". c Τροποποίηση: τροποποίηση φύλαξης και σταθερότητας.
Διαχείριση Αποβλήτων Ανατρέξτε στις κατά τόπους νομικές απαιτήσεις. Γενικές Προφυλάξεις Το αντιδραστήριο αυτό προορίζεται μόνο για επαγγελματική διαγνωστική χρήση in vitro. ΕΡΕΘΙΣΤΙΚΟ (Xi). Το αντιδραστήριο περιέχει θειϊκό οξύ. R36/38: Ερεθίζει τα μάτια και το δέρμα. S26: Σε περίπτωση επαφής με τα μάτια, ξεπλύνετε αμέσως με άφθονο νερό και ζητήστε ιατρική συμβουλή. S37/39: Φοράτε κατάλληλα γάντια και προστασία για τα μάτια/πρόσωπο. Οι κασέτες των αντιδραστηρίων είναι μίας μόνο χρήσης και πρέπει να απορρίπτονται σύμφωνα με τις κατά τόπους νομικές απαιτήσεις. Παρακαλούμε να ανατρέξετε στο Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας Προϊόντος που αφορά το αντιδραστήριο. Μη χρησιμοποιείτε το προϊόν εάν υπάρχει εμφανής ένδειξη βιολογικής, χημικής ή φυσικής φθοράς. Απόδοση στον Pentra C200 Τα χαρακτηριστικά απόδοσης που αναγράφονται παρακάτω ελήφθησαν από τον αναλυτή Pentra C200. Ορός, πλάσμα Αριθμός αναλύσεων: περίπου 101 αναλύσεις Σταθερότητα αντιδραστηρίου μετά την τοποθέτηση στον αναλυτή: Αν, αφού ανοιχθεί, η κασέτα αντιδραστηρίων τοποθετηθεί στο διαμέρισμα ψύξης του Pentra C200 παραμένει σταθερή για 52 ημέρες. Όγκος δείγματος: 2,8 µl/ανάλυση Όριο ποσοτικοποίησης: Το όριο ποσοτικοποίησης καθορίζεται σύμφωνα με το πρωτόκολλο EP17-A του CLSI (NCCLS) (7) και ισούται με 0,25 (0,78 ). Ακρίβεια και ορθότητα: Επαναληψιμότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγματα χαμηλής, μέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 υλικά ελέγχου αναλύθηκαν 20 φορές, σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου Valtec (8). 1,11 3,44 2,39 1,80 5,59 2,23 Δείγμα 1 0,52 1,60 1,44 Δείγμα 2 1,53 4,75 2,01 Δείγμα 3 3,05 9,47 1,80 Αναπαραγωγιμότητα (συνολική ακρίβεια) 3 δείγματα χαμηλής, μέτριας και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου αναλύονταν εις διπλούν επί 20 ημέρες (2 σειρές ημερησίως) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP5-A2 του CLSI (NCCLS) (9). 1,17 3,62 3,13 1,94 6,01 2,27 Δείγμα 1 0,51 1,58 3,32 Δείγμα 2 1,52 4,72 3,14 Δείγμα 3 3,03 9,41 1,90 Εύρος μέτρησης: Η ανάλυση επιβεβαίωσε εύρος μέτρησης από 0,25 έως 8,07 (0,8 έως 25,0 ), με αυτόματη μεταγενέστερη αραίωση μέχρι 32,3 (100,0 ). Η γραμμικότητα του αντιδραστηρίου εκτιμήθηκε έως 8,07 (25,0 ) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP6-A του CLSI (NCCLS) (10). Συσχέτιση: 135 δείγματα ασθενών (ορός) συσχετίστηκαν με αντιδραστήριο του εμπορίου που ελήφθη ως σημείο αναφοράς σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP9-A2 του CLSI (NCCLS) (11). Οι τιμές κυμάνθηκαν από 0,28 έως 7,41 (0,9 έως 23,0 ). Η εξίσωση της αλλομετρικής γραμμής που προέκυψε με τη διαδικασία παλινδρόμησης Passing-Bablock (12) είναι: Y = 0,99 X + 0,02 () Y = 0,99 X + 0,05 () με συντελεστή συσχετισμού r 2 = 0,996. Αλληλεπιδράσεις d : Αιμοσφαιρίνη: έως τα 44 µmol/l (75 ).
Λιπαιμία: για επίπεδα Intralipid (για προσομοίωση λιπαιμίας) έως και 100,0. Ολική χολερυθρίνη: έως τα 100 µmol/l (5,9 ). Άμεση χολερυθρίνη: έως τα 188 µmol/l (11,0 ). Ο Young έχει δημοσιεύσει έναν κατάλογο με φάρμακα και προαναλυτικές μεταβλητές που είναι γνωστό ότι επηρεάζουν τη μεθοδολογία αυτή (13, 14). Σταθερότητα βαθμονόμησης: Το αντιδραστήριο βαθμονομείται την Ημέρα 0. Η βαθμονόμηση ελέγχεται με ανάλυση 2 δειγμάτων ορού ελέγχου. Η σταθερότητα βαθμονόμησης είναι 36 ημέρες. Σημείωση: Συνιστάται αναβαθμονόμηση όταν αλλάζουν οι αριθμοί παρτίδας των αντιδραστηρίων καθώς και όταν τα αποτελέσματα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισμένου εύρους τιμών. Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής: 01.xx Ούρα Αριθμός αναλύσεων: περίπου 101 αναλύσεις Σταθερότητα αντιδραστηρίου μετά την τοποθέτηση στον αναλυτή: Αν, αφού ανοιχθεί, η κασέτα αντιδραστηρίων τοποθετηθεί στο διαμέρισμα ψύξης του Pentra C200 παραμένει σταθερή για 52 ημέρες. Όγκος δείγματος: 5 µl/ανάλυση Όριο ποσοτικοποίησης: Το όριο ποσοτικοποίησης καθορίζεται σύμφωνα με το πρωτόκολλο EP17-A του CLSI (NCCLS) (7) και ισούται με 0,17 (0,53 ). Ακρίβεια και ορθότητα: Επαναληψιμότητα (ακρίβεια εντός της ανάλυσης) 3 δείγματα χαμηλής, μέσης και υψηλής συγκέντρωσης και 2 υλικά ελέγχου αναλύθηκαν 20 φορές, σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου Valtec (8). 7,60 23,5 2,06 15,33 47,5 2,54 Δείγμα 1 1,96 6,1 1,46 Δείγμα 2 9,46 29,3 1,20 Δείγμα 3 18,70 58,0 2,06 Αναπαραγωγιμότητα (συνολική ακρίβεια) 3 δείγματα χαμηλής, μέτριας και υψηλής συγκέντρωσης και 2 οροί ελέγχου αναλύονταν εις διπλούν επί 20 ημέρες (2 σειρές ημερησίως) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP5-A2 του CLSI (NCCLS) (9). 7,69 23,84 3,88 15,42 47,79 3,12 Δείγμα 1 1,92 5,95 2,77 Δείγμα 2 9,57 29,68 2,75 Δείγμα 3 18,92 58,65 2,63 Εύρος μέτρησης: Η ανάλυση επιβεβαίωσε εύρος μέτρησης από 0,17 έως 59,00 (0,6 έως 182,9 ), με αυτόματη μεταγενέστερη αραίωση μέχρι 118 (365,8 ). Η γραμμικότητα του αντιδραστηρίου εκτιμήθηκε έως 59 (182,9 ) σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP6-A του CLSI (NCCLS) (10). Συσχέτιση: 109 δείγματα ασθενών (ούρα) συσχετίστηκαν με αντιδραστήριο του εμπορίου που ελήφθη ως σημείο αναφοράς σύμφωνα με τις υποδείξεις του πρωτοκόλλου EP9-A2 του CLSI (NCCLS) (11). Οι τιμές κυμάνθηκαν από 0,52 έως 57,01 (1,6 έως 176,7 ). Η εξίσωση της αλλομετρικής γραμμής που προέκυψε με τη διαδικασία παλινδρόμησης Passing-Bablock (12) είναι: Y = 0,97 X + 0,03 () Y = 0,97 X + 0,07 () με συντελεστή συσχετισμού r 2 = 0,9952. d Τροποποίηση: τροποποίηση αλληλεπιδράσεων.
Αλληλεπιδράσεις e : Αιμοσφαιρίνη: Λιπαιμία: Άμεση χολερυθρίνη: Ασκορβικό οξύ: έως τα 400 µmol/l (690 ). για επίπεδα Intralipid (για προσομοίωση λιπαιμίας) έως και 200,0. έως τα 375 µmol/l (21,9 ). έως τα 2,55 (44,9 ). Ο Young έχει δημοσιεύσει έναν κατάλογο με φάρμακα και προαναλυτικές μεταβλητές που είναι γνωστό ότι επηρεάζουν τη μεθοδολογία αυτή (13, 14). Σταθερότητα βαθμονόμησης: Το αντιδραστήριο βαθμονομείται την Ημέρα 0. Η βαθμονόμηση ελέγχεται με ανάλυση 2 δειγμάτων ορού ελέγχου. Η σταθερότητα βαθμονόμησης είναι 36 ημέρες. Σημείωση: Συνιστάται αναβαθμονόμηση όταν αλλάζουν οι αριθμοί παρτίδας των αντιδραστηρίων καθώς και όταν τα αποτελέσματα του ποιοτικού ελέγχου βρίσκονται εκτός του προκαθορισμένου εύρους τιμών. Έκδοση πρωτοκόλλου εφαρμογής: 01.xx Συντελεστής μετατροπής: x 31 = mg/l x 3,1 = Προειδοποίηση Είναι ευθύνη των χρηστών να ελέγξουν εάν το έγγραφο αυτό αφορά το αντιδραστήριο που χρησιμοποιείται. 4. Guder WG, Zawta B. The quality of diagnostics samples. Samples: from the patient to the laboratory. 1 st ed. Guder WG, Narayanan S, Zawta B, (WHILEY- VCH, Darmstadt, Germany), (2001): 52-53. 5. National Committee for Clinical Laboratory Standards, Urinalysis and Collection, Transportation, and Preservation of Urine Specimens; Approved Guideline-Second Edition; NCCLS document GP16- A2 (2001). 6. Roberts WL, McMillin GA, Burtis CA, Bruns DE. Reference Information for the Clinical Laboratory, TIETZ Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics, 4 th ed., Burtis CA, Ashwood ER, Bruns DE, (Elsevier Saunders eds., St Louis, USA), (2006): 2290. 7. Protocols for determination of limits of detection and limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34). 8. Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole de validation de techniques (document B). Ann. Biol. Clin. (1986) 44: 686-745. 9. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Method. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25). 10. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS) document EP6-A (2003) 23 (16). 11. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples. Approved Guideline, 2 nd ed., CLSI (NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19). 12. Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure for testing the equality of measurements from two different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1983) 21: 709-20. 13. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 4 th Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 143-163. 14. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory Tests. 2 nd Edition, Washington, DC, AACC Press (1997) 3: 120-132. Βιβλιογραφία 1. Endres DB, Rude RK. Mineral and bone metabolism. Tietz Fundamentals of Clinical Chemestry, Burtis CA and Ashwood ER (WB. Saunders eds. Philadelphia USA), (2001): 795. 2. Daly JA, Ertingshausen G. Direct method for determining inorganic phosphorus in serum with the Centrifichem. Clin. Chem. (1972) 18: 263. 3. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1 st ed. Frankfurt: THBooks Verlagsgesellshaft (1998): 241-247. e Τροποποίηση: τροποποίηση αλληλεπιδράσεων.