ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΚΟ ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΚΤΠΡΟΤ ΥΟΛΖ ΓΔΩΣΔΥΝΗΚΩΝ ΔΠΗΣΖΜΩΝ ΚΑΗ ΓΗΑΥΔΗΡΗΖ ΠΔΡΗΒΑΛΛΟΝΣΟ Μεταπτστιακή διατριβή ΒΗΟΓΗΑΠΑΖ ΠΔΣΡΔΛΑΗΟΤ ΑΠΟ ΣΟΝ CANDIDA SP. OR6 Δ ΥΑΜΖΛΑ ph Σηηηψλε Αλδξνχιια
Λεκεζφο 2014
ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΚΟ ΠΑΝΔΠΗΣΖΜΗΟ ΚΤΠΡΟΤ ΥΟΛΖ ΓΔΩΣΔΥΝΗΚΩΝ ΔΠΗΣΖΜΩΝ ΚΑΗ ΓΗΑΥΔΗΡΗΖ ΠΔΡΗΒΑΛΛΟΝΣΟ ΣΜΖΜΑ ΔΠΗΣΖΜΖ ΚΑΗ ΣΔΥΝΟΛΟΓΗΑ ΠΔΡΗΒΑΛΛΟΝΣΟ ΒΗΟΓΗΑΠΑΖ ΠΔΣΡΔΛΑΗΟΤ ΑΠΟ ΣΟΝ CANDIDA SP. OR6 Δ ΥΑΜΖΛΑ ph ηεο Αλδξνχιιαο Σηηηψλε ii
Λεκεζφο 2014 iii
ΕΝΣΤΠΟ ΕΓΚΡΙΗ Μεταπτυχιακή διατριβή ΒΗΟΓΗΑΠΑΖ ΠΔΣΡΔΛΑΗΟΤ ΑΠΟ ΣΟΝ CANDIDA SP. OR6 Δ ΥΑΜΖΛΑ ph. Παξνπζηάζηεθε απφ Αλδξνχιια Σηηηψλε Δπηβιέπσλ/νπζα θαζεγεηήο/ηξηα:... Βπξίδεο Ησάλλεο Μέινο επηηξνπήο: Κνπηίλαο Μηράιεο Μέινο επηηξνπήο: Αλδξένπ Κψζηαο iv
Σερλνινγηθφ Παλεπηζηήκην Κχπξνπ Γεθέκβξηνο, 2014 v
Πνεσματικά δικαιώματα Copyright Ανδροφλλα Σιττϊνη, 2014 Με επιφφλαξη παντόσ δικαιϊματοσ. All rights reserved. Η ζγκριςη τησ μεταπτυχιακήσ διατριβήσ από το Σμήμα Επιςτήμησ και Σεχνολογίασ Περιβάλλοντοσ του Σεχνολογικοφ Πανεπιςτημίου Κφπρου δεν υποδηλϊνει απαραιτήτωσ και αποδοχή των απόψεων του ςυγγραφζα εκ μζρουσ του Σμήματοσ. vi
Θα ήζεια λα επραξηζηήζσ ηδηαίηεξα ηνλ επηβιέπσλ θαζεγεηή κνπ θ. Ησάλλε Βπξίδε γηα ηελ ζηήξημε θαη βνήζεηα πνπ κνπ έδεημε γεληθά ζαλ άλζξσπνο θαη ζαλ θαζεγεηήο κνπ θαηά ηε δηάξθεηα ηεο εθπφλεζεο ηεο εξγαζίαο κνπ θαη γηα ηελ επθαηξία θαη εκπηζηνζχλε πνπ κνπ έδεημε ζηελ πινπνίεζε ηεο κειέηεο κνπ. Θα ήζεια επίζεο λα επραξηζηήζσ ηελ επηβιέπσλ δηδαθηνξηθφ κνπ Διέλε Ξελνθφλησο γηα ηελ πνιχηηκε βνήζεηά ηεο πνπ είρα ηνπο κήλεο απηνχο. Θα ήζεια επίζεο λα επραξηζηήζσ ηελ νηθνγέλεηα κνπ γηα ηελ ζηήξημε θαη ζπκπαξάζηαζή ηεο. vii
ΠΔΡΙΛΗΦΗ Ζ βηνδηάζπαζε πεηξειαίνπ απνηειεί ζηηο κέξεο καο κηα ελαιιαθηηθή, νηθνλνκηθά εθηθηή θαη πεξηβαιινληηθά ππνζρφκελε πξνζέγγηζε απνδφκεζεο πδξνγνλαλζξάθσλ ζηηο κεγάιεο εδαθηθέο ξππάλζεηο πνπ επηθέξεη ε ρξήζε ηνπ θαη δηαλνκή ηνπ ζηηο εγθαηαζηάζεηο επεμεξγαζίαο ηνπ. Οη εδαθηθέο ξππάλζεηο παξ φια απηά κπνξεί λα ζπλνδεχνληαη απφ επηθξάηεζε αθξαίσλ ζπλζεθψλ φπσο νμχηεηαο, αιαηφηεηαο, ζεξκνθξαζίαο. ηα αθξαία απηά ελδηαηηήκαηα έρνπλ απνκνλσζεί κηθξννξγαληζκνί πνπ θαίλεηαη λα επηβηψλνπλ ζηηο ζπλζήθεο απηέο, θπξίσο Βαθηήξηα, ελψ ηα ηειεπηαία ρξφληα έρεη θαηαγξαθεί ε απνκφλσζε Δπθαξπσηψλ. Έλαο ηέηνηνο νμεφθηινο Δπθαξπψηεο, ν Candida sp. OR6, πνπ αλήθεη ζην γέλνο Candida είρε απνκνλσζεί απφ δηαδηθαζία εχξεζεο ηξφπσλ αχμεζεο ηεο βηνέθπιπζεο ηνπ ραιθνχ απφ ρακειά κεηαιιεχκαηα ζείνπ. Ο κηθξννξγαληζκφο ζε κηα πξψηε κειέηε ήηαλ ηθαλφο λα βηνδηαζπά πδξνγνλάλζξαθεο ζε ζπγθέληξσζε πεηξειαίνπ 0.5% ζε ph 2, νπφηε εθηελέζηεξε κειέηε ηνπ πξαγκαηνπνηήζεθε ζηελ εξγαζία απηή. Ο κηθξννξγαληζκφο έρεη ηελ ηθαλφηεηα λα αλαπηχζζεηαη πάλσ απφ 24 εκέξεο ζε ζπγθεληξψζεηο 1%, 5%, 10%, 15% θαη 20% ζε πεηξέιαην. Αλάιπζε ηνπ κε αέξηα ρξσκαηνγξαθία έδεημε βηνδηάζπαζε γηα φιεο ηηο ζπγθεληξψζεηο πιελ ηεο ζπγθέληξσζεο 5%, ζηελ 11 ε εκέξα επψαζεο ελψ ζε πεηξέιαην 20% παξνπζίαζε βηνδηάζπαζε κέρξη θαη ηελ 24 ε εκέξα. Σελ κεγαιχηεξε κείσζε ζηνλ νιηθφ αξηζκφ πδξνγνλαλζξάθσλ παξνπζηάδεη ε 5% κε πνζνζηφ γχξσ ζηα 87%. Πξφθεηηαη γηα έλαλ αλζεθηηθφ κηθξννξγαληζκφ κε δπλαηφηεηα πεξαηηέξσ κειέηεο ηνπ. Λέξεις κλειδιά: Candida sp. OR6, βηνδηάζπαζε, νμεφθηινη, αθξαίν πεξηβάιινλ, πεηξέιαην. viii
ABSTRACT Biodegradation is nowadays an alternative, economically feasible and environmentally promising approach for hydrocarbon degradation from a large scale land pollution caused by the utilization of petroleum and its distribution in processing refineries. Nevertheless, soil contamination may be accompanied by the prevalence of extreme condition, such as acidity, salinity and temperature. In these extreme habitants, isolation of microorganisms, especially Bacteria, seems to survive in those conditions. In the last few years, the isolation of Eukaryotes has also been ascertained. The acidophilic microorganism Candida species OR6 was isolated from a previews study during the process of finding ways to increase the bioleaching of copper from low sulfide ore. The microorganism was able to biodegrade hydrocarbons in 0.5% oil at ph 2, so an extensive study was carried out in this work. The microorganism has the ability to grow for over 24 days in 1%, 5%, 10%,15% and 20% oil. Gas chromatography analysis showed signs of biodegradation for almost all concentrations, except in 5% oil after incubated for 11 days in 30 C, 100rpm. Biodegradation in 20% oil showed up after 24 days of incubation. The greatest reduction in the total petroleum hydrocarbons presented the 5% oil with 87%. Candida sp. OR6 is a high resistant microorganism that could be further studied. Keywords: Candida sp. OR6, biodegradation, acidophilic, extreme environment, oil. ix