Nal Von Minden Cardiac Combo Schnelltest (282003)

Transcript

1 Nal Von Minden Cardiac Combo Schnelltest (282003) Προβλεπόμενη Χρήση Το διαγνωστικό τεστ μυοσφαιρίνης / CK-MB / τροπονίνης I CARDIAC COMBO της είναι μια ταχεία χρωματογραφική ανοσολογική εξέταση για την ποιοτική ανίχνευση των επιπέδων της ανθρώπινης μυοσφαιρίνης, CK-MB και καρδιακής τροπονίνης στο ολικό αίμα, ορό ή το πλάσμα ως βοήθημα στη διάγνωση του εμφράγματος του μυοκαρδίου. Σύνοψη Η Μυοσφαιρίνη (MYO), η κρεατινική κινάση (CK-MB) και η καρδιακή τροπονίνη Ι (ctni) είναι πρωτεΐνες που απελευθερώνονται στην κυκλοφορία του αίματος μετά από καρδιακό επεισόδιο. Η μυοσφαιρίνη είναι μια πρωτεΐνη που συνήθως βρίσκεται στους καρδιακούς και σκελετικούς μύες με μοριακό βάρος 17,8 kda. Αποτελεί περίπου 2 τοις εκατό του συνόλου των πρωτεϊνών των μυών και είναι υπεύθυνη για τη μεταφορά οξυγόνου σε μυϊκά κύτταρα. Όταν τα μυϊκά κύτταρα καταστρέφονται, απελευθερώνεται μυοσφαιρίνη στο αίμα γρήγορα λόγω του σχετικά μικρού μεγέθους της. Μέσα σε 2-4 ώρες μετά από έμφραγμα το επίπεδο την μυοσφαιρίνης αυξάνεται σε μετρήσιμο βαθμό πάνω από την αρχική τιμή, κορυφώνεται σε 9-12 ώρες, και επιστρέφει στις αρχικές τιμές στις ώρες.το CK-MB είναι ένα ένζυμο που επίσης υπάρχει στους καρδιακούς μύες, με μοριακό βάρος του 87,0 kda. Η κρεατινική κινάση είναι διμερής μορφή μορίου που σχηματίζεται από δύο υπομονάδες που χαρακτηρίζονται ως "Μ" και "Β", και συνδυάζονται για να σχηματίσουν τρία διαφορετικά ισοένζυμα, CKMM, CK-BB και CK-MB. Το CK-MB είναι το ισοένζυμο της κινάσης της κρεατίνης που εμπλέκεται περισσότερο στο μεταβολισμό του καρδιακού μυϊκού ιστού. Η απελευθέρωση της CK-MB στο αίμα μετά από ένα καρδιακό επεισόδιο μπορεί να ανιχνευθεί εντός 3-8 ωρών μετά την έναρξη των συμπτωμάτων. Φτάνει τη μέγιστη τιμή μετά από 9 και ως 30 ώρες μετά το επεισόδιο, και επιστρέφει στα αρχικά επίπεδα μετά από 48 έως 72 ώρες. Η Καρδιακή τροπονίνη I είναι μια πρωτεΐνη που βρίσκεται στους καρδιακούς μύες, με μοριακό βάρος 22,5 kda. Η τροπονίνη Ι αποτελεί μέρος ενός υποσυνόλου που αποτελείται από την τροπονίνη Τ και τροπονίνης C Μετά από καρδιακό επεισόδιο, η τροπονίνη Ι απελευθερώνεται στο αίμα 4-6 ώρες μετά την έναρξη του πόνου. Η μορφή απελευθέρωσης της τροπονίνης θα είναι παρόμοια με αυτή της CK-MB, αλλά ενώ η CK-MB θα επανέλθει στα κανονικά επίπεδα μετά από 72 ώρες, η τροπονίνη θα παραμείνει σε υψηλά επίπεδα για 6-10 ημέρες, παρέχοντας έτσι για μεγαλύτερο χρονικό περιθώριο για την ανίχνευση του καρδιακού εμφράγματος. Το διαγνωστικό τεστ μυοσφαιρίνης / CK-MB / τροπονίνης I Combo CARDIAC COMBO της NAL VON MINDEN χρησιμοποιεί ένα συνδυασμό από σωματίδια με επικαλυμμένα αντισώματα και αντιδραστήρια για την ποιοτική ανίχνευση της μυοσφαιρίνης, CK-MB και τροπονίνης στο αίμα, ορό ή πλάσμα. To ελάχιστo επίπεδο ανίχνευσης είναι 50 ng / ml μυοσφαιρίνης, 5 ng / ml CK-MB και 0,5 ng / ml τροπονίνης Ι. ΑΡΧΗ Το διαγνωστικό τεστ μυοσφαιρίνης / CK-MB / τροπονίνης I CARDIAC COMBO της NAL VON MINDEN είναι μια ποιοτική χρωματογραφική ανοσολογική εξέταση για την ανίχνευση των επιπέδων της ανθρώπινης μυοσφαιρίνης, CK-MB και καρδιακής τροπονίνης στο ολικό αίμα, ορό ή το πλάσμα. Η μεμβράνη είναι προ-επικαλυμμένη με συγκεκριμένα αντισώματα σε κάθε μία από τις περιοχές γραμμής δοκιμής του τεστ. Κατά τη διάρκεια του τεστ, το δείγμα αίματος, ορού ή πλάσματος αντιδρά με τα επικαλυμμένα σωματίδια. Το δείγμα μεταφέρεται προς τα πάνω στη μεμβράνη με τριχοειδή δράση και αντιδρώντας με τα αντισώματα δημιουργούν μια κόκκινη γραμμή. Η παρουσία κόκκινης γραμμής στην περιοχή δοκιμής σημαίνει θετικό αποτέλεσμα. Επιπλέον, μια κόκκινη γραμμή πρέπει να σχηματιστεί στην περιοχή ελέγχου ( C) ανεξάρτητα από τη συγκέντρωση του ctni στο δείγμα. Η γραμμή ελέγχου χρησιμεύει ως έλεγχος διαδικασίας και πιστοποιεί ότι έχει προστεθεί επαρκής όγκος δείγματος και η μεμβράνη έχει ενεργοποιηθεί. 1

2 Συνοδευτικά υλικά 1. Τεστ CARDIAC COMBO Test 2. Πιπέττες μιας χρήσης (μέσα στο θύλακο) 3. Σταγονόμετρο με ρυθμιστικό. 4. Οδηγίες χρήσεως Απαραίτητα αλλά μη συμπεριλαμβανόμενα υλικά 1. Σωλήνες για τη λήψη δειγμάτων αίματος 2. Φυγόκεντρο (για διαχωρισμό πλάσμα/ορό) 3. Εργαλείο τομής (μόνο για πλήρες αίμα από το δάκτυλο) 4. Χρονόμετρο Αποθήκευση και σταθερότητα Αποθηκεύεται όπως βρίσκεται μέσα στο σφραγισμένο θύλακο σε θερμοκρασία δωματίου (2-30 B. Κελσίου/36-86 Β. Φαρενάιτ). Το CARDIAC COMBO τεστ είναι σταθερό μέχρι την ημερομηνία λήξης που είναι τυπωμένη στο σφραγισμένο θύλακο. Το τεστ πρέπει να παραμένει στο σφραγισμένο θύλακο μέχρι τη χρήση. ΜΗΝ ΚΑΤΑΨΥΧΕΤΕ. Μην το χρησιμοποιείτε μετά την ημερομηνία λήξης. Προφυλάξεις Μόνο για μια επαγγελματική διαγνωστική χρήση in vitro. Μη χρησιμοποιείτε μετά την ημερομηνία λήξης. Διαβάστε καλά τις οδηγίες χρήσεως Το τεστ πρέπει να παραμένει στο σφραγισμένο θύλακο μέχρι τη χρήση. Μην τρώτε, πίνετε η καπνίζετε στην περιοχή όπου χρησιμοποιούνται δείγματα. Μη χρησιμοποιείτε το τεστ αν ο θύλακος έχει υποστεί ζημιά. Το χρησιμοποιημένο τεστ πρέπει να απορρίπτεται σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. Η υγρασία και η θερμότητα μπορούν να επηρεάσουν τα αποτελέσματα. Όλα τα δείγματα μπορούν να είναι μολυσματικά. Πρέπει να ακολουθείται ο κατάλληλος χειρισμός και η απόρριψη. Φοράτε προστατευτική ενδυμασία όπως ιατρικές μπλούζες, γάντια μιας χρήσης και προστασία των ματιών όταν ελέγχονται δείγματα. Συλλογή και παρασκευή δείγματος Το CTNI K-20 Test μπορεί να εκτελεστεί χρησιμοποιώντας πλήρες αίμα (ενδοφλέβιο η από την άκρη του δακτύλου), ορό η πλάσμα. Συλλογή πλήρους αίματος από την άκρη του δακτύλου: Πλύνατε το χέρι του ασθενούς με σαπούνι και ζεστό νερό η καθαρίστε με οινόπνευμα. Κάντε μασάζ στο χέρι χωρίς να αγγίξετε το σημείο της αιμοληψίας τρίβοντας το χέρι προς τα κάτω προς την άκρη του μέσου η παράμεσου. Τρυπήστε το δέρμα με αποστειρωμένο εργαλείο. Σκουπίστε το πρώτο αίμα. Τρίψτε απαλά το χέρι από τον καρπό ως την παλάμη και το δάκτυλο ώστε να σχηματιστεί μια στρογγυλή σταγόνα αίματος στο τρυπημένο σημείο. Συλλογή πλήρους αίματος από την άκρη του δακτύλου με τριχοειδή σωλήνα: Πάρτε ένα δείγμα αίματος γεμίζοντας το σωλήνα με 120 μl από το δείγμα. Αποφύγετε τις φούσκες αέρα. Βάλτε τη φούσκα μεταφοράς στο επάνω μέρος του σωλήνα και πιέστε τη για να μεταφέρετε το δείγμα αίματος στο δοχείο ( S) του τεστ. Συλλογή πλήρους αίματος από το δάκτυλο με αιρούμενες σταγόνες Τοποθετήστε το δάκτυλο του ασθενούς ακριβώς επάνω από το δοχείο δείγματος ( S) του τεστ. Ρίξτε 2-3 αιωρούμενες σταγόνες πλήρους αίματος από το τρύπημα του δακτύλου στο δοχείο δείγματος ( S). Το δάκτυλο του ασθενούς μπορεί να μετακινηθεί πάνω από το δοχείο δείγματος έτσι ώστε η σταγόνα να έχει επαφή με το δοχείο. Η απευθείας επαφή του δακτύλου και του δοχείου πρέπει να αποφεύγεται. Γενικά σχόλια Διαχωρίστε τον ορό η το πλάσμα από το αίμα το συντομότερο δυνατό ώστε να αποφεύγεται η αιμόλυση. Μπορείτε να εξάγετε το πλάσμα από αίμα με heparin, EDTA η κιτρικό νάτριο. Χρησιμοποιείτε μόνο καθαρά, μη αιμολυμένα δείγματα. 2

3 Η δοκιμή πρέπει να γίνεται αμέσως μετά τη συλλογή του δείγματος. Μην αφήνετε τα δείγματα σε θερμοκρασία δωματίου για μακρές περιόδους. Τα δείγματα πλήρους ενδοφλέβιου αίματος πρέπει να αποθηκευτούν ψυγμένα στους 2-8 Β. Κελσίου για 24 ώρες αν το τεστ πρόκειται να γίνει μέσα σε 2 μέρες από τη συλλογή. Τα δείγματα ορού και πλάσματος μπορούν να αποθηκευτούν στους 2-8 Β. Κελσίου για μέχρι 3 μέρες. Για αποθήκευση μεγάλης διαρκείας, τα δείγματα πρέπει να φυλάσσονται κάτω από -20 Β. Κελσίου. Το πλήρες αίμα που έχει συλλεγεί από την άκρη του δάχτυλου πρέπει να δοκιμάζεται αμέσως. Φέρτε τα δείγματα σε θερμοκρασία δωματίου πριν τη δοκιμή. Τα παγωμένα δείγματα πρέπει να υγροποιηθούν και να αναμιχθούν καλά πριν τη δοκιμή. Τα δείγματα δεν πρέπει να παγώνονται και να υγροποιούνται κατ'επανάληψη. Αν τα δείγματα πρόκειται να μεταφερθούν, πρέπει να πακετάρονται σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία για τη μεταφορά αιτιολογικών ουσιών. Αφήστε το τεστ CARDIAC COMBO, το δείγμα και/η τα δείγματα ελέγχου να έρθουν σε ισορροπία σε θερμοκρασία δωματίου (15-30 Β. Κελσίου) πριν τη δοκιμή Διαδικασία τεστ Βγάλτε το τεστ από το σφραγισμένο θύλακο και χρησιμοποιήστε το συντομότερο δυνατό. Τα βέλτιστα 1 αποτελέσματα θα επιτευχθούν αν το τεστ χρησιμοποιηθεί εντός μιας ώρας. Τοποθετήστε το τεστ σε μια καθαρή και επίπεδη επιφάνεια Ορός η πλάσμα Κρατήστε την πιπέττα που παρέχεται κάθετα και μεταφέρετε 3 σταγόνες ορού η πλάσματος (περίπου 120 μl) μέσα στο στρογγυλό δοχείο δείγματος ( S) του τεστ. 2 Πλήρες ενδοφλέβιο αίμα Κρατήστε την πιπέττα που παρέχεται κάθετα και μεταφέρετε 3 σταγόνες (περίπου 120 μl) πλήρους αίματος μέσα στο στρογγυλό δοχείο δείγματος ( S) του τεστ. Στη συνέχεια, προσθέστε μια σταγόνα ρυθμιστικού Πλήρες αίμα από δάκτυλο Αφήστε να πέσουν 2-3 αιωρούμενες σταγόνες πλήρους αίματος από το τρύπημα στην άκρη του δακτύλου απ ευθείας στο στρογγυλό δοχείο δείγματος (S) Στη συνέχεια, προσθέστε μια σταγόνα ρυθμιστικού. Δεν θα πρέπει να χυθεί καθόλου δείγμα στον πίνακα αποτελεσμάτων του τεστ. 3 Αρχίστε το χρονόμετρο. Περιμένετε να εμφανιστούν οι κόκκινες γραμμές. Το αποτέλεσμα πρέπει να διαβαστεί στα 10 λεπτά. Μη διαβάζετε αποτελέσματα μετά από περισσότερο από 20 λεπτά 3

4 Εκτίμηση αποτελεσμάτων Αρνητικό Μια κόκκινη γραμμή εμφανίζεται στην περιοχή ελέγχου ( C). Καμιά κόκκινη γραμμή δεν εμφανίζεται στις περιοχές δοκιμής (MYO), (CK-MB), (TRO) Θετικό Δυο ή παραπάνω διακριτές κόκκινες γραμμές εμφανίζονται Μια γραμμή εμφανίζεται στην περιοχή ελέγχου και οι άλλες στην περιοχή δοκιμής. Δίπλα σε κάθε γραμμή υπάρχει και η συντομογραφία του δείκτη. κάθε συνδυασμός των γραμμών πρέπει να θεωρείται ως ένδειξη ενός πιθανού εμφράγματος του μυοκαρδίου. Οι εικόνες δείχνουν μόνο μια επιλογή των πιθανών συνδυασμών γραμμών.. Η ένταση του χρώματος των γραμμών μπορεί να ποικίλλει, ανάλογα με το δείγμα. Όλες οι γραμμές, ανεξαρτήτως έντασης θα πρέπει να ερμηνεύονται ως θετικό αποτέλεσμα. Άκυρο Η γραμμή ελέγχου ( C) δε σχηματίζεται. Σε αυτή την περίπτωση το αποτέλεσμα είναι απορριπτέο ακόμα κι αν υπάρχει αποτέλεσμα στην περιοχή δοκιμής. Ανεπαρκής όγκος δείγματος η εσφαλμένη διαδικασία τεχνικής είναι οι πιο πιθανές αιτίες για τη μη εμφάνιση της γραμμής ελέγχου. Αναθεωρήστε τη διαδικασία και επαναλάβετε το τεστ με μια νέα συσκευή. Αν το πρόβλημα παραμείνει, σταματήστε αμέσως να χρησιμοποιείτε το τεστ και επικοινωνήστε με τον τοπικό προμηθευτή σας. Έλεγχος ποιότητας Το CARDIAC COMBO Test περιλαμβάνει τη γραμμή ελέγχου ως εσωτερικό έλεγχο διαδικασίας. Σχηματίζεται μόνο αν έχει προστεθεί επαρκής όγκος δείγματος και η χρωματογραφία έχει τελειώσει με επιτυχία. Οι προδιαγραφές ελέγχου δε συνοδεύουν τη συσκευή. Παρόλα αυτά, συνιστούμε τη δοκιμή θετικών και αρνητικών ελέγχων ως καλή πρακτική εργαστηρίου για την επιβεβαίωση της διαδικασίας δοκιμής και την επαλήθευση της απόδοσης του τεστ. Για να προσδιοριστεί η ακρίβεια του τεστ δοκιμάστηκαν 274 θετικά δείγματα ασθενών παράλληλα με ένα άλλο διαγνωστικό τεστ σύμφωνο με τις προδιαγραφές του κατασκευαστή και άδεια διάθεσης στην ΕΕ. Τα αποτελέσματα είναι στους παρακάτω 3 πίνακες. 4

5 Marker ctni CARDIAC COMBO Test Σύνολο Marker CK-MB CARDIAC COMBO Test Σύνολο Marker Myoglobin CARDIAC COMBO Test Σύνολο Αναλυτική Ευαισθησία Η ελάχιστη ευαισθησία του τεστ είναι 1,0 ng / ml για ctni, 50 ng / ml για μυοσφαιρίνη, και 5 ng / ml για CK-MB. Γίνεται περιοδική επανεξέταση της ελάχιστης ευαισθησίας για τα πρότυπα υλικά του τεστ, των ακόλουθων κατασκευαστών: ctni (Hytest, ctni), CK-MB (Biorad), Myo (Serotec). Παρακαλούμε να σημειώσετε ότι, λόγω της ετερογένειας των εμπορικά διαθέσιμων πρότυπων υλικών, η ευαισθησία της δοκιμής μπορεί να διαφέρει όταν χρησιμοποιούνται διαφορετικά πρότυπα. Cross-Reactivity Οροί που περιείχαν γνωστές ποσότητες του αντιγόνου ctni δοκιμάστηκαν με 10,000 ng/ml Skeletal Troponin I, 2,000 ng/ml Troponin T and 20,000 ng/ml Cardiac Myosin. Δεν παρατηρήθηκαν αλληλεπιδράσεις, δείχνοντας ότι το CARDIAC COMBO Test έχει υψηλό βαθμό ειδικότητας για το cardiac Troponin I (ctni). To CARDIAC COMBO Test δοκιμάστηκε χωρίς να παρατηρηθούν επιδράσεις σε δείγματα που περιείχαν 110 μg/ml human albumin, 6 mg/ml χολερυθρίνη, 1 mg/ml αιμογλοβίνη, 100 μg/ml χοληστερόλη και 10 mg/ml τριγλυκερίδια. Σε κανονικό αίμα προστέθηκε 1,5 ng / ml ctni, 75 ng / ml μυοσφαιρίνης.και 7,5 ng / ml, CK-MB. Σε πολλαπλά τεστ που έγιναν με το CARDIAC COMBO Test υπήρχε 99% συμφωνία μεταξύ των αναμενόμενων αποτελεσμάτων και των αποτελεσμάτων του τεστ. Βιβλιογραφία 1. Wong SS. Strategic utilization of cardiac markers for diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Clin Lab Sci, 26:301-12, Kagen LJ. Myoglobin methods and diagnostic uses. CRC Crit. Rev. Clin. Lab. Sci., 2:273, Chapelle JP. et al. Serum myoglobin determinations in the assessment of acute myocardial infarction. Eur. Heart Journal, 3:122, Apple FS, Preese LM. Creatine kinase-mb: detection of myocardial infarction and monitoring reperfusion. J Clin Immunoassay, 17:24-9, Lee TH, Goldman L. Serum enzyme assays in the diagnosis of acute myocardial infarction. Ann Intern Med, 105: , Kallner A, Sylven C, Brodin. U, et al. Early diagnosis of acute myocardial infarction; a comparison between chemical predictors. Scand J Clin Lab Invest, 49:633-9, Adams, et al. Biochemical markers of myocardial injury, Immunoassay Circulation 88: , Mehegan JP, Tobacman LS. Cooperative interaction between troponin molecules bound to the cardiac thin fi lament. J.Biol.Chem. 266:966, ΑΝΤΙΠΡΟΣΩΠΟΙ ΕΙΣΑΓΩΓΕΙΣ DIAGNOSTIC SUPPORT ΧΑΝΙΩΝ 1. ΛΥΚΟΒΡΥΣΗ-ΑΘΗΝΑ ΤΗΛ ΦΑΞ info@diagnosticsupport.gr 5