Πληροφορίες παραγγελιών Αναλυτές στους οποίους μπορεί να χρησιμοποιηθεί το κιτ 11876562 316 Pancreatic α amylase liquid ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 16 ml) Roche/Hitachi MODULAR P 11555812 316 Pancreatic α amylase liquid ([1] 12 x 22 ml, [2] 6 x 10 ml) Roche/Hitachi 902 10759350 190 Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml) Κωδικός 401 10759350 360 Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml, για τις Η.Π.Α.) Κωδικός 401 10171743 122 Precinorm U (20 x 5 ml) Κωδικός 300 10171735 122 Precinorm U (4 x 5 ml) Κωδικός 300 12149435 122 Precinorm U plus (10 x 3 ml) Κωδικός 300 12149435 160 Precinorm U plus (10 x 3 ml, για τις Η.Π.Α.) Κωδικός 300 10171778 122 Precipath U (20 x 5 ml) Κωδικός 301 10171760 122 Precipath U (4 x 5 ml) Κωδικός 301 12149443 122 Precipath U plus (10 x 3 ml) Κωδικός 301 12149443 160 Precipath U plus (10 x 3 ml, για τις Η.Π.Α.) Κωδικός 301 05117003 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Κωδικός 391 05947626 190 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Κωδικός 391 05947626 160 PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml, για τις Η.Π.Α.) Κωδικός 391 05117216 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Κωδικός 392 05947774 190 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Κωδικός 392 05947774 160 PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml, για τις Η.Π.Α.) Κωδικός 392 Ορισμένοι αναλυτές και κιτ που παρουσιάζονται εδώ πιθανόν να μην είναι διαθέσιμα σε όλες τις χώρες. Για πρόσθετες εφαρμογές του συστήματος, επικοινωνήστε με τον τοπικό αντιπρόσωπο της Roche Diagnostics. Ελληνικά Πληροφορίες συστήματος Για τους αναλυτές Roche/Hitachi MODULAR P: ACN 571 Προοριζόμενη χρήση Ενζυμική in vitro εξέταση για τον ποσοτικό προσδιορισμό της παγκρεατικής α αμυλάσης σε ορό, πλάσμα και ούρα ανθρώπου, σε αυτοματοποιημένους αναλυτές κλινικής χημείας της Roche. Περίληψη 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10 Οι α αμυλάσες (1,4 α D γλυκανοϋδρολάσες, EC 3.2.1.1) καταλύουν την υδρολυτική αποικοδόμηση των πολυμερών υδατανθράκων όπως η αμυλόζη, η αμυλοπηκτίνη και το γλυκογόνο, διασπώντας τους 1,4 α γλυκοζιτικούς δεσμούς. Στους πολυσακχαρίτες και στους ολιγοσακχαρίτες υδρολύονται συγχρόνως πολλοί γλυκοζιτικοί δεσμοί. Η μαλτοτριόζη, η μικρότερη μονάδα αυτού του είδους, μετατρέπεται σε μαλτόζη και γλυκόζη, αν και με πολύ αργό ρυθμό. Διακρίνονται δύο τύποι α αμυλασών, ο παγκρεατικός τύπος (τύπος P) και ο σιελικός τύπος (τύπος S). Ο τύπος P αποδίδεται σχεδόν αποκλειστικά στο πάγκρεας και, ως εκ τούτου, είναι ειδικός για το όργανο αυτό, ενώ ο τύπος S μπορεί να προέρχεται από πολλά σημεία. Εμφανίζεται στους σιελογόνους αδένες, αλλά μπορεί επίσης να βρεθεί στα δάκρυα, στον ιδρώτα, στο ανθρώπινο γάλα, στο αμνιακό υγρό, στους πνεύμονες, στους όρχεις και στο επιθήλιο του ωαγωγού. Λόγω της σπανιότητας ειδικών κλινικών συμπτωμάτων των παγκρεατικών νόσων, οι ενζυμικοί προσδιορισμοί είναι μείζονος σημασίας στη διάγνωση των νόσων αυτών. Ο προσδιορισμός της ειδικής για το πάγκρεας α αμυλάσης αντί της ολικής α αμυλάσης πλεονεκτεί στη χρήση αυτή. Ο προσδιορισμός της παγκρεατικής α αμυλάσης είναι κατάλληλος για τη διάγνωση και την παρακολούθηση της οξείας παγκρεατίτιδας και των οξέων επεισοδίων κατά τη χρόνια παγκρεατίτιδα. Όσον αφορά την κλινική ευαισθησία και την ειδικότητα, η διαγνωστική αξία της ανάλυσης της παγκρεατικής α αμυλάσης είναι συγκρίσιμη με αυτήν της λιπάσης, η οποία είναι το γενικώς αποδεκτό ειδικό ένζυμο για το πάγκρεας. Η ευαισθησία της ανάλυσης της παγκρεατικής α αμυλάσης είναι 38 % υψηλότερη από αυτήν της ολικής α αμυλάσης για τη διάγνωση της οξείας παγκρεατίτιδας όταν όπως συνηθίζεται ως κριτήριο χρησιμοποιείται το τριπλάσιο του ανώτατου φυσιολογικού ορίου. Έχουν περιγραφεί διάφορες μέθοδοι για τον προσδιορισμό της παγκρεατικής α αμυλάσης: ραδιο και ενζυμοανοσολογικές μέθοδοι, καθώς και η μερική αναστολή της α αμυλάσης του σιέλου από έναν αναστολέα που προέρχεται από σπέρματα σιταριού, και κατόπιν υπολογισμός της παγκρεατικής α αμυλάσης από τις δραστικότητες της εναπομένουσας και της ολικής αμυλάσης. Η κινητική μέθοδος που περιγράφεται εδώ βασίζεται στην αναστολή της δραστικότητας του σιελικού τύπου της ανθρώπινης α αμυλάσης από δύο διαφορετικά μονοκλωνικά αντισώματα και στην αποδεδειγμένη διάσπαση της of 4,6 αιθυλιδενο (G 7 ) 1,4 νιτροφαινυλ (G 1 ) α,d μαλτοεπταοσίδης (Ethylidene Protected Substrate = EPS) από την παγκρεατική α αμυλάση και την επακόλουθη υδρόλυση όλων των προϊόντων της αποικοδόμησης προς p νιτροφαινόλη με τη βοήθεια της α γλυκοζιδάσης (100 % απελευθέρωση χρωμοφόρου). Τα αποτελέσματα της μεθόδου αυτής συσχετίζονται με εκείνα που προκύπτουν από την HPLC. Αρχή της μεθόδου (απλοποιημένη) 10,11 Ενζυμική χρωματομετρική ανάλυση Δείγμα και προσθήκη του R1 Προσθήκη του R2 και έναρξη της αντίδρασης: παγκρεατική α αμυλάση 5 αιθυλιδενο G 7 PNP + 5 H 2 O 2 αιθυλιδενο G 5 + 2 G 2 PNP + 2 αιθυλιδενο G 4 + 2 G 3 PNP + αιθυλιδενο G 3 + G 4 PNP Στο πρώτο στάδιο επώασης, η δραστικότητα του σιελικού τύπου της ανθρώπινης α αμυλάσης αναστέλλεται από δύο διαφορετικά μονοκλωνικά αντισώματα (που δεν επηρεάζουν την παγκρεατική α αμυλάση). Στο δεύτερο στάδιο αντίδρασης, συγκεκριμένοι ολιγοσακχαρίτες, όπως η 4,6 αιθυλιδενο (G 7 ) p νιτροφαινυλ(g 1 ) α,d μαλτοεπταοσίδη (αιθυλιδενο G 7 PNP) διασπώνται από την καταλυτική δράση των παγκρεατικών α αμυλασών. Τα κλάσματα G 2 PNP, G 3 PNP και G 4 PNP που σχηματίζονται κατ' αυτόν τον τρόπο υδρολύονται πλήρως προς p νιτροφαινόλη και γλυκόζη από την α γλυκοζιδάση. 2 G 2 PNP + 2 G 3 PNP + G 4 PNP + 14 H 2 O (PNP = P νιτροφαινόλη, G = γλυκόζη) α γλυκοζιδάση 5 PNP + 14 G Η ένταση του χρώματος της p νιτροφαινόλης που σχηματίζεται είναι ευθέως ανάλογη προς τη δραστικότητα της παγκρεατικής α αμυλάσης και μετράται φωτομετρικά. 1 / 5
Αντιδραστήρια διαλύματα εργασίας R1 R2 Ρυθμιστικό διάλυμα HEPES a : 52.4 mmol/l, ph 7 (37 C), χλωριούχο νάτριο: 87 mmol/l, χλωριούχο μαγνήσιο: 12.6 mmol/l, χλωριούχο ασβέστιο: 0.075 mmol/l, α γλυκοσιδάση (μικροοργανισμών): 4 ku/l, μονοκλωνικά αντισώματα (ποντικού): 97 mg/l, συντηρητικά Ρυθμιστικό διάλυμα HEPES a : 52.4 mmol/l, ph 7 (37 C), 4,6 αιθυλιδενο G 7 PNP: 22 mmol/l, συντηρητικά, σταθεροποιητής a) HEPES = 2 [4 (2 υδροξυαιθυλ) 1 πιπεραζινυλ] αιθανοσουλφονικό οξύ Προφυλάξεις και προειδοποιήσεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Να τηρούνται οι συνήθεις προφυλάξεις οι οποίες απαιτούνται κατά τον χειρισμό όλων των εργαστηριακών αντιδραστηρίων. Η απόρριψη όλων των αποβλήτων θα πρέπει να πραγματοποιείται σύμφωνα με τις τοπικές κατευθυντήριες οδηγίες. Διατίθεται, κατόπιν αιτήσεως, φύλλο δεδομένων ασφάλειας για επαγγελματίες χειριστές. Χειρισμός των αντιδραστηρίων R1: Έτοιμο προς χρήση R2: Έτοιμο προς χρήση Φύλαξη και σταθερότητα Συστατικά κλειστού κιτ: έως την ημερομηνία λήξης, σε θερμοκρασία 2 8 C R1: 4 εβδομάδες αφού ανοιχθεί και εφόσον φυλάσσεται ψυχόμενο στον αναλυτή R2: 4 εβδομάδες αφού ανοιχθεί και εφόσον φυλάσσεται ψυχόμενο στον αναλυτή Συλλογή δείγματος και προετοιμασία 10,12 Ορός/πλάσμα Για τη συλλογή και την προετοιμασία του δείγματος, να χρησιμοποιείτε αποκλειστικά κατάλληλα σωληνάρια ή περιέκτες συλλογής. Μόνον τα παρακάτω δείγματα ελέγχθηκαν και έγιναν αποδεκτά. Ορός Πλάσμα: Πλάσμα με Li, Na, NH 4+ ηπαρίνη ή με EDTA. (Οι τιμές του πλάσματος με EDTA είναι κατά 5 10 % χαμηλότερες από τις τιμές του ορού). Σταθερότητα: 13 7 ημέρες σε θερμοκρασία 15 25 C 1 μήνας σε θερμοκρασία 2 8 C Οι αναφερόμενοι τύποι δειγμάτων αναλύθηκαν με χρήση των σωληναρίων δειγματοληψίας που ήταν διαθέσιμα στο εμπόριο τη στιγμή της ανάλυσης, δηλαδή δεν εξετάστηκαν όλα τα διαθέσιμα σωληνάρια όλων των κατασκευαστών. Τα συστήματα δειγματοληψίας των διαφόρων κατασκευαστών ενδέχεται να περιέχουν διαφορετικά υλικά που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τα αποτελέσματα της ανάλυσης σε κάποιες περιπτώσεις. Όταν αναλύετε δείγματα σε πρωτογενή σωληνάρια (συστήματα δειγματοληψίας), να ακολουθείτε τις οδηγίες του κατασκευαστή των σωληναρίων. Ούρα Συλλέξτε δίχως πρόσθετα. Σταθερότητα: 14 2 ημέρες σε θερμοκρασία 15 25 C 10 ημέρες σε θερμοκρασία 2 8 C Η παγκρεατική α αμυλάση είναι ασταθής σε όξινα ούρα. Εκτελέστε αμέσως την ανάλυση ή ρυθμίστε το ph σε αλκαλική τιμή (ph 7 περίπου) πριν από την αποθήκευση. 13 Φυγοκεντρήστε τα δείγματα που περιέχουν ίζημα προτού εκτελέσετε την ανάλυση. Παρεχόμενα υλικά Για τα αντιδραστήρια, δείτε την ενότητα Αντιδραστήρια - διαλύματα εργασίας. Απαιτούμενα υλικά που δεν παρέχονται Δείτε την ενότητα Πληροφορίες παραγγελιών 0.9 % NaCl Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός Ανάλυση Για την καλύτερη δυνατή απόδοση της ανάλυσης, ακολουθήστε τις οδηγίες που παρέχονται σε αυτό το έντυπο και αφορούν τον αναλυτή που χρησιμοποιείτε. Ανατρέξτε στο αντίστοιχο εγχειρίδιο χρήσης για οδηγίες ανάλυσης ειδικές για τον συγκεκριμένο αναλυτή. Η απόδοση των εφαρμογών που δεν έχουν επικυρωθεί από τη Roche δεν είναι εγγυημένη και πρέπει να προσδιοριστεί από τον χειριστή. Βαθμονόμηση Ιχνηλασιμότητα: Αυτή η μέθοδος έχει τυποποιηθεί έναντι του αντιδραστηρίου της Roche, με χρήση βαθμονομημένων πιπετών μαζί με ένα μη αυτόματο φωτόμετρο που παρέχει απόλυτες τιμές και την ειδική μοριακή απορροφητικότητα για το υπόστρωμα, ε. S1: 0.9 % NaCl S2: C.f.a.s. (Βαθμονομητής για αυτοματοποιημένα συστήματα) Συχνότητα βαθμονόμησης Συνιστάται η βαθμονόμηση 2 σημείων: μετά την αλλαγή παρτίδας αντιδραστηρίων όπως απαιτείται σύμφωνα με τις διαδικασίες ελέγχου ποιότητας Έλεγχος ποιότητας Για τον έλεγχο ποιότητας, χρησιμοποιήστε τα υλικά ελέγχου που αναφέρονται στην ενότητα Πληροφορίες παραγγελιών. Επιπλέον, μπορεί να χρησιμοποιηθεί και άλλο κατάλληλο υλικό ελέγχου. Τα διαστήματα ελέγχου και τα όρια πρέπει να προσαρμόζονται στις απαιτήσεις κάθε εργαστηρίου. Οι τιμές που λαμβάνονται θα πρέπει να βρίσκονται εντός των καθορισμένων ορίων. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθιερώσει μέτρα για διορθωτικές ενέργειες οι οποίες θα πρέπει να εφαρμόζονται εάν οι τιμές βρεθούν εκτός των καθορισμένων ορίων. Ακολουθήστε τους ισχύοντες κρατικούς κανονισμούς και τις τοπικές κατευθυντήριες οδηγίες για τον έλεγχο ποιότητας. Υπολογισμός Ο αναλυτής υπολογίζει αυτόματα τη δραστικότητα της αναλυόμενης ουσίας κάθε δείγματος. Συντελεστές μετατροπής: U/L x 0.0167 = µkat/l µkat/l x 60.0 = U/L Περιορισμοί αλληλεπιδράσεις 12,15 Η υπολειπόμενη δραστικότητα του σιελικού τύπου της α αμυλάσης είναι περίπου 3 %. Σε σπάνιες περιπτώσεις, οι πολύ υψηλές δραστικότητες του σιελικού τύπου της α αμυλάσης μπορούν να οδηγήσουν στη μέτρηση αυξημένων τιμών παγκρεατικής α αμυλάσης. Κάποια μικρή αλλαγή στο κίτρινο χρώμα του διαλύματος 2 δεν επηρεάζει την απόδοση της εξέτασης. Μην αναρροφάτε με το στόμα και φροντίστε ώστε το αντιδραστήριο να μην έλθει σε επαφή με το δέρμα. (Ο σίελος και ο ιδρώτας περιέχουν α αμυλάση!) Κριτήριο: Ανάκτηση εντός ± 10 % της αρχικής τιμής. Ίκτερος: 16 Δεν παρατηρείται σημαντική αλληλεπίδραση έως τιμή δείκτη I ίση με 60 για τη συζευγμένη χολερυθρίνη (κατά προσέγγιση συγκέντρωση συζευγμένης χολερυθρίνης: 1026 µmol/l ή 60 mg/dl). b Αιμόλυση: 16 Δεν παρατηρείται σημαντική αλληλεπίδραση έως τιμή δείκτη Η ίση με 500 (κατά προσέγγιση συγκέντρωση αιμοσφαιρίνης: 310 µmol/l ή 500 mg/dl). b Λιπαιμία (Intralipid): 16 Δεν παρατηρείται σημαντική αλληλεπίδραση έως τιμή δείκτη L ίση με 1500. b Υπάρχει μικρή συσχέτιση μεταξύ του δείκτη L (αντιστοιχεί στη θολερότητα) και της συγκέντρωσης των τριγλυκεριδίων. Αναλυτές Roche/Hitachi MODULAR P: Σε σπάνιες περιπτώσεις, δείγματα με έντονη θολερότητα (δείκτης L) και υψηλές τιμές δραστικότητας της αμυλάσης ενδέχεται να οδηγήσουν σε επισημάνσεις Limt0, Limt1, Limt2 ή ABS?. Τα υπερβολικά θολά και έντονα λιπαιμικά δείγματα ενδέχεται να οδηγήσουν σε επισημάνσεις απορρόφησης. 2 / 5
Αντιπηκτικά: Διαπιστώθηκε αλληλεπίδραση με το κιτρικό και το φθόριο. Γλυκόζη: Δεν παρατηρείται αλληλεπίδραση με τη γλυκόζη σε συγκέντρωση έως και 111 mmol/l (2000 mg/dl). b Περίπου 10 % χαμηλότερες τιμές ανάκτησης παρατηρήθηκαν σε συγκεντρώσεις γλυκόζης ίσες με 250 mmol/l (4500 mg/dl). Ασκορβικό οξύ: Δεν παρατηρήθηκε αλληλεπίδραση σε επίπεδο ασκορβικού οξέος έως 5.68 mmol/l (100 mg/dl). b Περίπου 10 % χαμηλότερες τιμές ανάκτησης παρατηρήθηκαν σε συγκεντρώσεις ασκορβικού οξέος ίσες με 50 mmol/l (800 mg/dl). Τα φάρμακα που έχουν ως βάση την ισοδεξτρίνη πιθανόν να προκαλέσουν μειωμένες τιμές αμυλάσης. Εξετάστηκαν 31 κοινά φαρμακευτικά προϊόντα in vitro. Δεν διαπιστώθηκε αλληλεπίδραση με την ανάλυση. c b) Μέτρηση σε επίπεδα παγκρεατικής α αμυλάσης έως και 2.0 µkat/l (120 U/L). c) Μέτρηση σε επίπεδα παγκρεατικής α αμυλάσης έως και 0.67 µkat/l (40 U/L). Σε εξαιρετικά σπάνιες περιπτώσεις γαμμαπάθειας, και ιδιαίτερα τύπου IgM (μακροσφαιριναιμία Waldenström), ενδέχεται να ληφθούν αναξιόπιστα αποτελέσματα. 17 Οι ασθενείς με μακροαμυλάση ενδέχεται να δώσουν αυξημένα αποτελέσματα παγκρεατικής αμυλάσης. Η αύξηση δεν οφείλεται σε ανεπαρκή αναστολή του σιελικού τύπου της αμυλάσης στο ανοσοσύμπλεγμα του ορού. Προκαλείται από το υψηλότερο από το φυσιολογικό επίπεδο παγκρεατικής αμυλάσης, αφού το ανοσοσύμπλεγμα δεν υφίσταται σπειραματική διήθηση. Αυτή η αυξημένη τιμή παγκρεατικής αμυλάσης δεν είναι διαγνωστική για παγκρεατίτιδα. Ωστόσο, η μέτρηση αυξημένης παγκρεατικής αμυλάσης στα ούρα επιβεβαιώνει την ύπαρξη παγκρεατίτιδας, παγκρεατικού τραυματισμού ή παγκρεατικού καρκινώματος, καθώς η αμυλάση που απελευθερώνεται δεν δεσμεύεται πλήρως από το ανοσοσύμπλεγμα και συνεπώς μπορεί να διηθηθεί από το σπείραμα. 18 Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα θα πρέπει πάντοτε να αξιολογούνται σε συνδυασμό με το ιατρικό ιστορικό, την κλινική εξέταση και άλλα ευρήματα του ασθενούς. ΕΝΕΡΓΕΙΑ ΠΟΥ ΑΠΑΙΤΕΙΤΑΙ Προγραμματισμός ειδικής έκπλυσης: Η χρήση βημάτων ειδικής έκπλυσης είναι υποχρεωτική όταν εκτελούνται μαζί ορισμένοι συνδυασμοί εξετάσεων στους αναλυτές Roche/Hitachi. Ανατρέξτε στην τελευταία έκδοση του καταλόγου αποτροπής επιμόλυνσης εκ μεταφοράς και στο εγχειρίδιο χρήσης για περαιτέρω οδηγίες. Για οδηγίες σχετικά με την ειδική έκπλυση, οι χειριστές στις Η.Π.Α. θα πρέπει να ανατρέξουν στο έντυπο Προγραμματισμός ειδικής έκπλυσης, στην ιστοσελίδα usdiagnostics.roche.com, καθώς και στο εγχειρίδιο χρήσης. Όπου απαιτείται, πρέπει να εφαρμόζεται προγραμματισμός ειδικής έκπλυσης/αποτροπής επιμόλυνσης εκ μεταφοράς πριν από την αναφορά των αποτελεσμάτων αυτής της εξέτασης. Όρια και εύρη Εύρος μέτρησης 0.05 25.00 µkat/l (3 1500 U/L) Προσδιορίστε δείγματα με υψηλότερες τιμές δραστικότητας μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης. Στους αναλυτές που δεν διαθέτουν λειτουργία επανεκτέλεσης, αραιώστε μη αυτόματα τα δείγματα με NaCl 0.9 % ή απεσταγμένο/απιονισμένο νερό (π.χ. σε αναλογία 1 + 4). Πολλαπλασιάστε το αποτέλεσμα με τον κατάλληλο συντελεστή αραίωσης (π.χ. 5). Διευρυμένο εύρος μέτρησης με επανεκτέλεση: Αναλυτές Roche/Hitachi MODULAR P Ορός/πλάσμα: Προσδιορίστε δείγματα με υψηλότερες τιμές δραστικότητας μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης. Η αραίωση των δειγμάτων μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης γίνεται σε αναλογία 1:3.5. Τα αποτελέσματα για δείγματα που αραιώθηκαν μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης πολλαπλασιάζονται αυτόματα με έναν συντελεστή ίσο με 3.5. Ούρα: Προσδιορίστε δείγματα με υψηλότερες τιμές δραστικότητας μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης. Η αραίωση των δειγμάτων μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης γίνεται σε αναλογία 1:11. Τα αποτελέσματα για δείγματα που αραιώθηκαν μέσω της λειτουργίας επανεκτέλεσης πολλαπλασιάζονται αυτόματα με έναν συντελεστή ίσο με 11. Κατώτατα όρια μέτρησης Κατώτατο όριο ανίχνευσης της εξέτασης Όριο ανίχνευσης 3 U/L (0.05 µkat/l) Το κατώτατο όριο ανίχνευσης αποτελεί το χαμηλότερο μετρήσιμο επίπεδο αναλυόμενης ουσίας που μπορεί να διακριθεί από το μηδέν. Υπολογίζεται ως η τιμή που βρίσκεται 3 τυπικές αποκλίσεις πάνω από την τιμή του προτύπου χαμηλότερης συγκέντρωσης (πρότυπο 1 + 3 SD, αναπαραγωγιμότητα, n = 21). Τιμές αναφοράς 10 Ορός/πλάσμα Άνδρες/γυναίκες 0.22-0.88 µkat/l 13-53 U/L Ούρα από αυθόρμητη ούρηση Δείκτης παγκρεατικής α αμυλάσης/ κρεατινίνης Άνδρες Γυναίκες Άνδρες Γυναίκες 0.12-5.95 µkat/l 0.22-5.33 µkat/l 0.58-3.33 µkat/g 0.87-4.33 µkat/g 7-356 U/L 13-319 U/L 35-199 U/g 52-259 U/g Δείκτης παγκρεατικής α αμυλάσης/κρεατινίνης Προκειμένου να ληφθούν υπ' όψιν οι διακυμάνσεις της δραστικότητας της παγκρεατικής α αμυλάσης στα ούρα, συνιστάται ο προσδιορισμός του πηλίκου παγκρεατικής α αμυλάσης/κρεατινίνης. Προκειμένου να γίνει αυτό, προσδιορίστε τη δραστικότητα της παγκρεατικής α αμυλάσης και τη συγκέντρωση της κρεατινίνης στα ούρα από αυθόρμητη κένωση. Δείκτης [µkat/mmol ή U/g] = παγκρεατική α αμυλάση [µkat/l ή U/L] κρεατινίνη [mmol/l ή g/l] Λόγος κάθαρσης αμυλάσης/κρεατινίνης (Amylase/Creatinine Clearance Ratio ACCR) 13 Ο λόγος ACCR υπολογίζεται από τη δραστικότητα της αμυλάσης και τη συγκέντρωση της κρεατινίνης. Τα δείγματα ορού και τα δείγματα ούρων θα πρέπει να συλλέγονται την ίδια περίπου ώρα. ACCR [%] = Αμυλάση ούρων [U/L] x κρεατινίνη ορού [mg/l] Αμυλάση ορού [U/L] x κρεατινίνη ούρων [mg/l] Ο δείκτης ACCR είναι κατά προσέγγιση ίσος με 2 5 % Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να διερευνήσει την εγκυρότητα των τιμών αναφοράς για το δικό του πληθυσμό ασθενών και, εάν απαιτείται, να καθορίσει δικό του εύρος τιμών αναφοράς. x 100 Ειδικά στοιχεία απόδοσης Παρακάτω δίνονται αντιπροσωπευτικά στοιχεία απόδοσης για τους αναλυτές. Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται στα διάφορα εργαστήρια ενδέχεται να διαφέρουν. Επαναληψιμότητα Η επαναληψιμότητα προσδιορίστηκε με χρήση δειγμάτων ανθρώπου και προτύπων ελέγχου σε ένα εσωτερικό πρωτόκολλο, με αναπαραγωγιμότητα (n = 21) και ενδιάμεση επαναληψιμότητα (3 μερίδες ανά σειρά αναλύσεων, 1 σειρά αναλύσεων ανά ημέρα, 21 ημέρες). Ελήφθησαν τα παρακάτω αποτελέσματα: Δείγμα Αναπαραγωγιμότητα Μέση τιμή SD CV U/L µkat/l U/L µkat/l % Ορός ανθρώπου Ι 38.5 0.64 0.6 0.01 1.5 Ορός ανθρώπου ΙΙ 275 4.59 4 0.07 1.5 Precinorm U 89.0 1.49 0.5 0.01 0.6 Δείγμα Ενδιάμεση επαναληψιμότητα Μέση τιμή SD CV U/L µkat/l U/L µkat/l % Ορός ανθρώπου Ι 38.6 0.64 0.5 0.01 1.4 Ορός ανθρώπου ΙΙ 280 4.68 3 0.06 1.2 Precinorm U 90.2 1.51 1.0 0.02 1.1 Σύγκριση μεθόδου Ορός/Πλάσμα 3 / 5
Α. Μετά από σύγκριση του προσδιορισμού της παγκρεατικής α αμυλάσης EPS με μετατροπή των τιμών σε τιμές PNP (x) y = 0.444x - 2.12 y = 0.445x - 2.36 τ = 0.982 r = 1.000 Αριθμός μετρηθέντων δειγμάτων ορού ανθρώπου: 129 Οι τιμές δραστικότητας των δειγμάτων κυμαίνονταν μεταξύ 0.150 και 42.9 µkat/l (9 και 2574 U/L). Β. Χειριστές στις Η.Π.Α. Ούρα Μετά από σύγκριση του προσδιορισμού της παγκρεατικής α αμυλάσης EPS χωρίς μετατροπή των τιμών σε τιμές PNP (x) y = 1.11x + 0.2 y = 1.08x + 4.6 τ = 0.992 r = 1.000 Αριθμός μετρηθέντων δειγμάτων ορού ανθρώπου: 51 Οι τιμές δραστικότητας των δειγμάτων κυμαίνονταν μεταξύ 0.132 και 23.2 µkat/l (7.92 και 1392 U/L). Α. Μετά από σύγκριση του προσδιορισμού της παγκρεατικής α αμυλάσης EPS με μετατροπή των τιμών σε τιμές PNP (x) y = 0.429x - 0.714 y = 0.427x - 0.972 τ = 0.98 r = 0.998 Αριθμός μετρηθέντων δειγμάτων ούρων ανθρώπου: 222 Οι τιμές δραστικότητας των δειγμάτων κυμαίνονταν μεταξύ 2.04 και 21 µkat/l (122 και 1260 U/L). Β. Χειριστές στις Η.Π.Α. Μετά από σύγκριση του προσδιορισμού της παγκρεατικής α αμυλάσης EPS χωρίς μετατροπή των τιμών σε τιμές PNP (x) y = 1.18x + 0.4 y = 1.18x + 0.8 τ = 0.998 r = 1.000 Αριθμός μετρηθέντων δειγμάτων ούρων ανθρώπου: 51 Οι τιμές δραστικότητας των δειγμάτων κυμαίνονταν μεταξύ 0.052 και 20 µkat/l (3.12 και 1200 U/L). Βιβλιογραφία 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag 1995. 2 Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991:354-361. 3 Tietz NW, Burlina A, Gerhardt W, et al. Multicenter Evaluation of a Specific Pancreatic Isoamylase Assay Based on a Double Monoclonal Antibody Technique. Clin Chem 1988;34:2096-2102. 4 Junge W, Troge B, Klein G, et al. Evaluation of a New Assay for Pancreatic Amylase: Performance Characteristics and Estimation of Reference Intervals. Clin Biochem 1989;22:109-114. 5 Rizzotti P, Klein G. Evaluation of a specific immunoinhibition method for the determination of pancreatic α-amylase. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32:97-106. 6 Jalali MT, Laing I, Gowenlock AH, et al. Specific radioimmunoassays for human pancreatic and salivary isoamylases. Clin Chim Acta 1985;150:237-246. 7 Harmoinen A, Jokela H, Koivula T, et al. Evaluation of a new inhibitor test for isoamylase on Hitachi 705 analyzer. J Clin Chem Clin Biochem 1986;24:903-905. 8 Gerber M, Wulff K. Fortschritte in der spezifischen Bestimmung der Pankreas-α-amylase. Laboratoriumsmedizin 1988;12:110-113. 9 Kruse-Jarres JD, Hafkenscheid JCM, Hohenwallner W, et al. Evaluation of a New α-amylase Assay Using 4,6-Ethylidene- (G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-α-D-maltoheptaoside as Substrate. J Clin Chem Clin Biochem 1989;27:103-113. 10 Junge W, Wortmann W, Wilke B, et al. Development and evaluation of assays for the determination of total and pancreatic amylase at 37 C according to the principle recommended by the IFCC. Clin Biochem 2001;34:607-615. 11 Kurrle-Weittenhiller A, Hölzel W, Engel D, et al. Method for the determination of total and pancreatic α-amylase based on 100 % cleavage of the protected substrate ethylidiene-4-nitrophenylmaltoheptaoside. Clin Chem 1996;42(S6):S98. 12 Young DS. Effects of Preclinical Variables on Clinical Laboratory Tests. AACC Press 1997, 2nd edition 1997. 13 Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995;46-51. 14 Hohenwallner W, Hägele EO, Scholer A, et al. Bestimmung von alpha- Amylase mit p-nitrophenylmaltoheptaosid als Substrat. Ber Öster Ges Klin Chem 1983;6:101-112. 15 Gokal R, Moberly J, Lindholm B, et al. Metabolic and laboratory effects of icodextrin. Kidney Int 2002;62(81):62-71. 16 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32:470-475. 17 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243. 18 Lott J. Inflammatory diseases of the pancreas. CRC critical reviews in clinical laboratory sciences 1982;17:201-228. 19 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Ρυθμίσεις του αναλυτή Χειριστές στις Η.Π.Α.: Ανατρέξτε στο φύλλο εφαρμογών και στο έντυπο Προγραμματισμός ειδικής έκπλυσης, στην ιστοσελίδα usdiagnostics.roche.com, για πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με τον χειρισμό. Χειριστές των αναλυτών Roche/Hitachi MODULAR: Εισαγάγετε τις παραμέτρους εφαρμογής από το φύλλο γραμμικού κώδικα. Αναλυτής Roche/Hitachi 902 No. <Chemistry> 4 / 5
1 Test Name P AMY 2 Assay Code (Mthd) Rate A 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 10 5 Assay Point 1 28 6 Assay Point 2 35 7 Assay Point 3 0 8 Assay Point 4 0 9 Wavelength (SUB) 700 10 Wavelength (MAIN) 415 11 Sample Volume 10.0 12 R1 Volume 250 13 R1 Pos.... 14 R1 Bottle Size Small 15 R2 Volume 0 16 R2 Pos. 0 17 R2 Bottle Size Small 18 R3 Volume 50 19 R3 Pos.... 20 R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc. 1 0 24 Calib. Pos. 1... 25 Calib. Conc. 2... 26 Calib. Pos. 2... 27 Calib. Conc. 3 0 28 Calib. Pos. 3 0 29 Calib. Conc. 4 0 30 Calib. Pos. 4 0 31 Calib. Conc. 5 0 32 Calib. Pos. 5 0 33 Calib. Conc. 6 0 34 Calib. Pos. 6 0 35 S1 ABS 0 36 K Factor 10000 37 K2 Factor 10000 38 K3 Factor 10000 39 K4 Factor 10000 40 K5 Factor 10000 41 A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit 0.1 45 Duplicate Limit 100 46 Sens. Limit 270 47 S1 Abs. Limit (L) -32000 48 S1 Abs. Limit (H) 32000 49 Abs. Limit 20000 50 Abs. Limit (D/I) Increase 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) 35 54 Expect. Value (L)... 55 Expect. Value (H)... 56 Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting...... Δεδομένα που εισάγονται από τον χειριστή Για περισσότερες πληροφορίες, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης του συγκεκριμένου αναλυτή, στα αντίστοιχα φύλλα εφαρμογών και φύλλα μεθόδου όλων των απαραίτητων συστατικών. Σε αυτό το φύλλο μεθόδου χρησιμοποιείται πάντοτε μια τελεία (στιγμή) ως υποδιαστολή, προκειμένου να σηματοδοτεί το όριο μεταξύ του ακέραιου και του κλασματικού μέρους ενός δεκαδικού αριθμού. Δεν χρησιμοποιούνται τελείες ως διαχωριστικά στις χιλιάδες. Σύμβολα Η Roche Diagnostics χρησιμοποιεί τα ακόλουθα σύμβολα και σήματα πέραν αυτών που παρατίθενται στο πρότυπο ISO 15223 1. GTIN Περιεχόμενα του κιτ Αντιδραστήριο Βαθμονομητής Όγκος μετά την ανασύσταση ή την ανάμιξη Διεθνής Κωδικός Μονάδας Εµπορίας Οι σημαντικές προσθήκες ή αλλαγές υποδεικνύονται από μια λωρίδα υπόδειξης αλλαγής στο περιθώριο. 2014, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Διανομή στις Η.Π.Α.: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN US Customer Technical Support 1-800-428-2336 5 / 5