Anti-CCP IgG. For use on IMMULITE 2000 systems

Transcript

1 Anti-CCP IgG For use on IMMULITE 2000 systems

2 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG English Intended Use: The IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay is an in vitro diagnostic immunoassay for the semiquantitative determination of the IgG class of autoantibodies specific to cyclic citrullinated peptide (CCP) in human serum (including Serum Separator Tubes) or plasma (EDTA or lithium heparin) on the IMMULITE 2000 Systems Analyzers. Detection of anti-ccp antibodies is used as an aid in the diagnosis of Rheumatoid Arthritis (RA) and should be used in conjunction with other clinical information. Autoantibody levels represent one parameter in a multi-criteria diagnostic process, encompassing both clinical and laboratory-based assessments. Catalog Number: L2KPI2 (200 tests) Test Code: CCP Color: Red Summary and Explanation Anti-cyclic citrullinated peptide (anti-ccp) IgG is a specific marker for rheumatoid arthritis, a disease that affects one percent of the population worldwide. 1 Studies show that the presence of anti-ccp IgG can be detected in the early stages of rheumatoid arthritis, 2 4 and that it is indicative of a more progressive form of the disease. 4 The epitope for CCP is derived from a precursor protein belonging to filaggrin, a group of filament aggregating proteins. During the final stage of epidermal cell differentiation, arginine residues in filaggrin are deiminated to citrulline. 5 Autoantibodies targeting citrullinecontaining peptide sequences in the major antigenic epitopes are markers for rheumatoid arthritis in affected patients. 5,6 Various studies have shown between 41 89% sensitivity and 89 99% specificity of anti-ccp for RA diagnosis. 7 Given that anti-cyclic citrullinated protein antibodies (ACPA) is more specific than Rheumatoid Factor (RF), it is used to distinguish various causes of arthritis. 8 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG is a solid-phase, two-cycle sequential chemiluminescent immunometric assay. The solid phase, a polystyrene bead, is coated with a cyclic citrullinated peptide (CCP) antigen. The liquid phase consists of two reagents: 1) protein-based buffer and 2) alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to a monoclonal murine anti-human IgG antibody in buffer. In the first cycle, the patient sample and the buffer are incubated together with the coated bead for 30 minutes. During this time, human IgG in the sample binds to CCP on the bead. Unbound sample is then removed by centrifugal washes. In the second cycle, the enzymeconjugated monoclonal murine anti-human IgG is added to the original reaction tube for additional 30 minutes incubation. The enzyme conjugated monoclonal murine anti-human IgG antibody binds to immobilized anti-ccp IgG on the bead. The unbound enzyme conjugate is removed by centrifugal washes. Finally, chemiluminescent substrate is added to the reaction tube containing the bead and the signal is generated in proportion to the bound enzyme. Incubation Cycles: 2 30 minutes Time to First Result: 65 minutes Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed or grossly contaminated samples may give erroneous results. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. 2 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

3 Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 5 µl serum or plasma (EDTA and Lithium Heparin). After automatic predilution, 10 µl of diluted sample is used for the immunoassay. Automatic Predilution Factor: 40 Storage: Serum for 2 days at room temperature, 7 days at 2 8 C; or at or below 20 C up to 12 months. 9 Plasma for 2 days at room temperature, 7 days at 2 8 C; or at or below 20 C up to 8 months. 9 When both serum and plasma samples were subject to 4 freeze/thaw cycles, no clinically significant differences were observed. 9 Thoroughly mix thawed specimens and centrifuge. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. CAUTION! POTENTIAL BIOHAZARD Contains human source material. Each donation of human blood or blood component was tested by FDA-approved methods for the presence of antibodies to human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and type 2 (HIV-2) as well as for hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to hepatitis C virus (HCV). The test results were negative (not repeatedly reactive). No test offers complete assurance that these or other infectious agents are absent; this material should be handled using good laboratory practices and universal precautions CAUTION: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. H302 + H312, H411 P280, P273, P301 + P312, P302 + P312, P501 Warning! Harmful if swallowed or in contact with skin. Toxic to aquatic life with long lasting effects. Wear protective gloves/ protective clothing/eye protection/face protection. Avoid release to the environment. IF SWALLOWED: Call a POISON CENTER or doctor/physician if you feel unwell. IF ON SKIN: Call a POISON CENTER or doctor/physician if you feel unwell. Dispose of contents and container in accordance with all local, regional, and national regulations. Contains: sodium azide, 2-methyl-2H-isothiazol- 3-one; Anti-CCP IgG Adjustors Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Caution: This device contains material of animal origin and should be handled as a potential carrier and transmitter of disease. Safety data sheets (MSDS/SDS) available on Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 3

4 Anti-CCP IgG Bead Pack (L2PI12) With barcode. 200 beads, coated with cyclic citrullinated peptide (CCP) antigen. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPI2: 1 pack Anti-CCP IgG Reagent Wedge (L2PIA2) With barcode ml protein-buffer matrix and 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to a monoclonal murine anti-human IgG antibody in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPI2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Anti-CCP IgG Adjustors (LPIL, LPIH) Two vials (Low and High) of lyophilized human serum with IgG reactive to CCP, in buffer with preservative. At least 30 minutes before use reconstitute each vial with 2.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. (No further dilution is required.) Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution or for 12 months (aliquotted) at 20 C. L2KPI2: 1 set Anti-CCP IgG Controls (LPIC1, LPIC2) Two vials containing 2 ml each. LPIC1 (Negative Control): human serum nonreactive to anti-ccp IgG, with preservative. LPIC2 (Positive Control): human serum with IgG reactive to CCP, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening or for 12 months (aliquotted) at 20 C. L2KPI2: 1 set For the current control ranges in U/mL, please refer to the control insert. Aliquot Labels with barcodes are supplied with the kit, for use with the Adjustors and Controls. Before use, place the appropriate Aliquot Labels on test tubes, so the barcodes can be read by the barcode reader on the IMMULITE Autoantibody Sample Diluent (L2A1Z) For the on-board dilution of patient samples and controls. 50 ml concentrated (ready-to-use) protein/buffer matrix. Stable at 2 8 C for 30 days after opening or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KPI2: 1 vial Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2KPI2: 3 labels Kit Components Supplied Separately L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes ( mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: The controls supplied with the kit should be used as quality control material to monitor assay performance. Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Interpretation of Results The cutoff of the IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay was determined with positive and negative patient samples by a ROC analysis, with a balanced consideration of sensitivity and specificity. Reactive: A result greater than or equal to 4.00 U/mL is considered to be reactive, and indicates that anti-ccp IgG antibodies were detected in the sample. 4 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

5 Non-reactive: A result less than 4.00 U/mL is considered to be nonreactive, and indicates that anti-ccp IgG antibodies were not detected in the sample. The Anti-CCP IgG results determined for a given specimen with assays from different manufacturers can vary due to differences in assay methods and reagent specificity. Therefore, the results reported by the laboratory to the physician should include: "The following results were obtained with the IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay. Results obtained from other manufacturers' assay methods may not be used interchangeably." Expected Values A total of 197 serum samples from presumed healthy male (n = 99) and female (n = 98) donors were analyzed using the IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay. The results from this study suggest a median of < 1.50 U/mL and a nonparametric 2.5 th 97.5 th percentile range of < U/mL. Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Anti-CCP IgG test results alone are not sufficient to diagnose a patient with rheumatoid arthritis. Diagnosis should be made by the physician only after all clinical and laboratory findings have been evaluated. Lipemic, hemolyzed or grossly contaminated samples may give erroneous results. The results in HIV patients, in patients undergoing immunosuppressive therapy, or in patients with other disorders leading to immunosuppression, should be interpreted with caution. The performance characteristics of this assay have not been established for use with specimens from neonates, cord blood, or pretransplant patients. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.]. Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in U/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Reportable Range: U/mL The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: Limit of Blank (highest value expected for a sample with no analyte; determined in accordance with CLSI EP17-A 10 ): 0.26 U/mL Limit of Detection (lowest detectable concentration; determined in accordance with CLSI EP17-A 10 ): 1.50 U/mL Functional Sensitivity: (concentration with 20% coefficient of variation (CV) determined): U/mL Precision: Precision was evaluated according to CLSI guideline EP5-A2. 11 Serum samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, using 3 lots for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Specificity: The specificity assessment of the IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay was conducted on 8 subgroups of patients (n = 40) with potentially cross-reacting conditions and disease states where other autoantibodies may be present in the patient samples. The following disease states were evaluated: Systemic Lupus Erythematosus (SLE), Sjogren s Syndrome, Lyme Disease, Osteoarthritis, Scleroderma, Polymyositis, Thyroiditis and Mononucleosis. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 5

6 Total Tested Positive Disease State (n) (n) SLE 5 0 Sjogren s Syndrome 5 1 Lyme Disease 5 1 Osteoarthritis 5 0 Scleroderma 5 0 Polymyositis 5 1 Thyroiditis 5 0 Mononucleosis 5 0 Three out of 40 samples (1 Sjogren s syndrome; 1 Lyme Disease, and 1 Polymyositis) yielded positive results. All samples were also evaluated on a commercially available FDA-cleared predicate testing device for Anti-CCP. The three positive samples were confirmed positive by the predicate testing device. Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 20 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 500 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 1500 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Rheumatoid Factor: Evaluation of high levels of endogenous rheumatoid factor (RF) was achieved by screening RF positive samples and diluting them to 200 IU/mL. No clinically significant changes were observed. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, 39 matched sets of apparently healthy donors were drawn into heparinized (Li Heparin), EDTA and BD SST Vacutainer tubes. Twenty percent of these samples were spiked to achieve anti-ccp levels across the reportable range. All samples were analyzed by the IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay, with the following results: (Li Heparin) = 1.02 (Serum) 0.46 U/mL r = (SST) = 1.02 (Serum) 0.52 U/mL r = (EDTA) = 1.01 (Serum) 0.31 U/mL r = Means: 52.3 U/mL (Serum) 52.9 U/mL (Li Heparin) 53.0 U/mL (SST) 52.2 U/mL (EDTA) This study showed 100% positive and negative agreements between all samples collected in Serum, SST, EDTA and Lithium Heparin. Method Comparison: The IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG assay was compared to a commercially available Axis-Shield DIASTAT Anti-CCP IgG assay on 457 patient samples. Non- DIASTAT Reac Reac Positive Negative Total Agreement: 94.1% IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG % Positive Agreement % Negative Agreement 93.5% 94.6% Clinical Performance: The assay was performed on the IMMULITE 2000 to assess the clinical sensitivity and specificity of well-characterized samples. A total of 457 patient serum samples were collected for the study. 257 samples were rheumatoid arthritis (RA) positive 12 and the remaining 200 samples were from apparently healthy donors (non-ra). RA positive patients were classified according to the ACR criteria. 12 Clinical Status Reac Positive Negative References IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG Non- Reac Sensitivity Specificity 78.2% 99.5% 1) Yelin E, Callahan LF. The economic cost and social and psychological impact of musculoskeletal conditions. Arthritis Rheum. 1995;38: ) Kroot EJJA, de Jong BAW, van Leeuwen MA, et al. The prognostic value of anti-cyclic citrullinated peptide antibody in patients with recent-onset rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum. 2000;43: ) Bizzaro N, Mazzanti G, Tonutti E, et al. Diagnostic accuracy of the anti-citrulline antibody assay for rheumatoid arthritis. Clin Chem. 2001; IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

7 93. 4) Visser H, Cessie S, Vols K, Breedveld F, Hazes J. How to diagnose rheumatoid arthritis early. Arthritis Rheum. 2002;46: ) Girbal-Neuhauser E. Durieus JJ, Arnaud M, et al. The epitopes targeted by the rheumatoid arthritis-associated anti-filaggrin autoantibodies are postranslationally generated on various sites of (pro)filaggrin by deimination of arginine residues. J Immunol. 1999;162:585. 6) Vincet C, Simon M, Sebbag M, et al. Immunoblotting detection of autoantibodies to human epidermis filaggrin: a new diagnostic test for rheumatoid arthritis. J Rheumatol. 1998;25: ) Silveira I.G., Burlingame R.W., von Muhlen C.A., Bender A.L. and Staub, H.L. (Feb 2007). Anti-CCP antibodies have more diagnostic impact than rheumatoid factor (RF) in a population tested RF. Clin. Rheumatol. DOI /s ) Avouac J, Gossec L, Dougados M (July 2006). Diagnostic and predictive value of anti-cyclic citrullinated protein antibodies in rheumatoid arthritis: a systematic literature review. Ann. Rheum. Dis. 65 (7): ) Data on file at Siemens Healthcare Diagnostics. 10) CLSI. Protocols for the Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI document EP17-A Vol. 24 (No. 34). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania , USA, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formally NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Clinical Devices; Approved Guideline. Wayne PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document EP5-A. 12) Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, et al. The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum 1988;31(3): ) Centers for Disease Control. Update: Universal precautions for prevention of transmission of human immunodeficiency virus, hepatitis B virus and other bloodborne pathogens in healthcare settings. MMWR, 1988;37:377 82, ) Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Third Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document M29-A3. 15) Federal Occupational Safety and Health Administration, Bloodborne Pathogens Standard, 29 CFR Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (U/mL) Serum Pool Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 %CV 5 SD %CV Česky. 1 V rámci testu, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσοι όροι, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Česky Použití : Stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG je in vitro diagnostický test pro semikvantitativní stanovení specifických autoprotilátek třídy IgG proti cyklickému citrulinovému peptidu (CCP) v lidském séru (včetně zkumavek pro separaci séra) nebo plazmě (EDTA nebo heparinát lithný) na analyzátorech IMMULITE Detekce protilátek proti CCP slouží jako vodítko při diagnostice revmatoidní artritidy (RA) a má se používat ve spojení s dalšími klinickými informacemi. Hladiny autoprotilátek jsou jedním z parametrů multikriteriální diagnostiky, zahrnující jak klinické, tak i laboratorní hodnocení. Katalogové číslo : L2KPI2 (200 testů) Kód testu : CCP Barva : Červená Souhrn a výklad IgG proti cyklickému citrulinovanému peptidu (anti-ccp) IgG je specifický marker revmatoidní artritidy, nemoci, která postihuje jedno procento světové populace. 1 Studie ukazují, že přítomnost anti-ccp IgG lze detekovat již v raných stadiích tohoto onemocnění 2 4 a že to signalizuje progresivnější formu onemocnění. 4 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 7

8 Epitop pro CCP je odvozen od prekurzorového proteinu ze skupiny proteinů agregujících filamenta (filagrinu). Během závěrečné fáze diferenciace epidermálních buněk dochází k ve filagrinu k deiminaci argininových zbytků a vzniku citrulinu. 5 Autoprotilátky zaměřené proti peptidovým sekvencím s citrulinem ve velkých antigenních epitopech slouží jako markery revmatoidní artritidy u postižených pacientů. 5,6 Různé studie u anti-ccp prokázaly senzitivitu % a specificitu % při diagnostice RA. 7 Vzhledem k tomu, že jsou tyto protilátky specifičtější než revmatoidní faktor (RF), jsou využívány k rozlišení různých příčin artritidy. 8 Princip metody IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG je dvoufázové, sekvenční a chemiluminiscenční imunometrické stanovení v pevné fázi. Pevná fáze, polystyrenová kulička, je potažena antigenem cyklickým citrulinovaným peptidem (CCP). Kapalnou fázi tvoří dvě reagencie : 1) proteinový pufr a 2) alkalická fosfatáza (z telecího střeva) konjugovaná s monoklonální myší protilátkou proti lidskému IgG v pufru. V prvním cyklu je vzorek od pacienta a pufr po dobu 30 minut inkubován společně s potaženou kuličkou. Lidský IgG ve vzorku se během této doby naváže na CCP na kuličce. Nenavázaný vzorek se poté odstraní odstředivým promytím. Ve druhém cyklu se pak do původní reakční zkumavky přidá monoklonální myší protilátka proti lidskému IgG konjugovaná s enzymem a inkubuje se dalších 30 minut. S enzymem konjugovaná monoklonální myší protilátka proti lidskému IgG se naváže na anti-ccp IgG imobilizovaný na kuličce. Nenavázaný enzymový konjugát se odstraní odstředivým promytím. Nakonec se do reakční zkumavky s kuličkou přidá chemiluminiscenční substrát. Emitovaný signál je úměrný množství navázaného enzymu. Inkubační cykly : 2 30 minut. Doba do prvního výsledku : 65 minut Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje ultracentrifugace. Hemolyzované nebo silně kontaminované vzorky mohou poskytovat chybné výsledky. Pokud je vzorek séra odstředěn dříve, než proběhne úplná koagulace, může to mít za následek přítomnost fibrinu. Proto dbejte na to, aby před odstředěním vzorku proběhla úplná koagulace ; předejdete tak chybám ve výsledcích způsobených přítomností fibrinu. Některé vzorky, zejména od pacientů, jimž jsou podávány protisrážlivé přípravky, mohou k vysrážení vyžadovat delší dobu. Odběrové zkumavky od různých výrobců mohou poskytovat rozdílné výsledky podle materiálů a přísad, jako jsou gelové nebo mechanické separátory, aktivátory koagulace resp. antikoagulancia. Stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG nebylo testováno se všemi možnými typy zkumavek. Ověřené typy a podrobnosti najdete v části Alternativní typ vzorku. Potřebný objem : 5 µl séra nebo (EDTA a Lithium Heparin) plazmy. Po automatickém zředění se k imunologickému stanovení použije 10 µl zředěného vzorku. Faktor automatického ředění : 40 Uchovávání : Sérum lze uchovávat 2 dny při pokojové teplotě, 7 dnů při 2 8 C ; nebo maximálně 12 měsíců při teplotě 20 C nebo nižší. 9 Plazmu lze uchovávat 2 dny při pokojové teplotě, 7 dnů při 2 8 C ; nebo maximálně 8 měsíců při teplotě 20 C nebo nižší. 9 Při vystavení vzorků séra a plazmy 4 cyklům zmrazení/rozmrazení nebyly pozorovány žádné klinicky významné rozdíly. 9 Rozmrazené vzorky důkladně promíchejte a odstřeďte. 8 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

9 Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro diagnostické použití in vitro. POZOR! POTENCIÁLNÍ BIOHAZARD Obsahuje materiál lidského původu. Každé darování krve nebo jejích složek bylo testováno metodami schválenými FDA na přítomnost protilátek proti viru lidské imunodeficience typu 1 (HIV-1) a typu 2 (HIV-2) a také na povrchový antigen viru hepatitidy B (HBsAg) a protilátky proti viru hepatitidy C (HCV). Výsledky testu byly negativní (opakovaně nereaktivní). Žádný test však není absolutní zárukou nepřítomnosti uvedených nebo jiných infekčních zárodků; s materiálem proto zacházejte podle zásad správné laboratorní praxe a dbejte obecných bezpečnostních opatření UPOZORNĚNÍ : Souprava obsahuje material živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. H302 + H312, H411 P280, P273, P301 + P312, P302 + P312, P501 Výstraha! Zdraví škodlivý při požití a při styku s kůží. Toxický pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ ochranné brýle/obličejový štít. Zabraňte uvolnění do životního prostředí. PŘI POŽITÍ : Necítíte-li se dobře, volejte TOXIKO- LOGICKÉ INFORMAČNÍ STŘEDISKO nebo lékaře. PŘI STYKU S KŮŽÍ : Necítíte-li se dobře, volejte TOXIKOLOGICKÉ INFOR- MAČNÍ STŘEDISKO nebo lékaře. Odstraňte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje : azid sodný, 2-methyl-2H-isothiazol- 3-jedna; Kalibrátory stanovení anti-ccp IgG Reagencie : Uchovávejte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Upozornění : Souprava obsahuje materiál živočišného původu, se kterým je třeba zacházet jako s potenciálním nosičem a přenašečem nemocí. Bezpečnostní listy (MSDS/SDS) jsou k dispozici na Dodržujte všeobecná preventivní opatření a se všemi složkami zacházejte tak, jako by mohly přenášet původce infekčních nemocí. Materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivními na syfilidu, protilátky proti HIV 1 a HIV 2, povrchový antigen hepatitidy B a protilátky proti hepatitidě C. Jako konzervační přísada byl přidán azid sodný v koncentraci nižší než 0,1 g/dl. Likvidovaný materiál je třeba splachovat velkým množstvím vody, aby se v olověném a měděném potrubí a armaturách nemohly vytvořit potenciálně výbušné azidy kovů. Chemiluminiscenční substrát : Dbejte, aby nedošlo ke kontaminaci a vystavení přímému slunečnímu záření. (Viz příbalová informace.) Voda : Používejte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodané materiály Složky tvoří ucelenou sadu. K provedení stanovení jsou zapotřebí štítky nacházející se na vnitřní krabičce. Balení kuliček anti-ccp IgG (L2PI12) S čárovým kódem. 200 kuliček potažených antigenem cyklickým citrulinovaným peptidem (CCP). Při teplotě 2 8 C stabilní do data exspirace. L2KPI2 : 1 balení Zásobník reagencie anti-ccp IgG (L2PIA2) S čárovým kódem. 11,5 ml pufrované proteinové matrix a 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s monoklonální myší protilátkou proti lidskému IgG v pufru. Při teplotě 2 8 C stabilní do data exspirace. L2KPI2 : 1 zásobník Před použitím odtrhněte vršek štítku u perforace tak, aby se nepoškodil čárový kód. Z horní části zásobníku odstraňte fólii a posuvný kryt zasuňte dolů do vybrání ve víku reagencie. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 9

10 Kalibrátory stanovení anti-ccp IgG (LPIL, LPIH) Dvě lahvičky (s nízkou a vysokou koncentrací) lyofilizovaného lidského séra s IgG reaktivním vůči CCP, v pufru s konzervační látkou. Obsah každé lahvičky rekonstituujte přídavkem 2,0 ml destilované nebo deionizované vody alespoň 30 minut před použitím. Promíchejte opatrným kroužením nebo obracením tak dlouho, dokud se veškerý lyofilizovaný materiál dokonale nerozpustí. (Žádné další ředění již není zapotřebí.) Stabilní 30 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo (po rozdělení na alikvotní části) 12 měsíců při 20 C. L2KPI2 : 1 souprava Kontroly stanovení anti-ccp IgG (LPIC1, LPIC2) Dvě lahvičky po 2 ml. LPIC1 (negativní kontrola) : lidské sérum nereaktivní na anti-ccp IgG, s konzervační látkou. LPIC2 (pozitivní kontrola) : lidské sérum s IgG reaktivním vůči CCP, s konzervační látkou. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo (po rozdělení na alikvotní části) 12 měsíců při 20 C. L2KPI2 : 1 souprava Platné rozsahy kontrol v U/ml jsou uvedeny v příbalové informaci ke kontrolám. Se soupravou se pro alikvoty dodávají štítky s čárovými kódy ; používají se s kalibrátory a kontrolami. Před použitím nalepte příslušné štítky na zkumavky tak, aby na nich čtečka analyzátoru IMMULITE 2000 mohla přečíst čárové kódy. Diluent vzorků pro stanovení autoprotilátek (L2A1Z) Slouží k ředění vzorků pacientů i kontrol v přístroji. 50 ml koncentrované pufrované proteinové matrix, připravené k použití. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo (po rozdělení na alikvotní části) 6 měsíců při 20 C. L2KPI2 : 1 lahvička Pro použití s diluentem se dodávají štítky s čárovými kódy. Před použitím nalepte na zkumavku mm příslušný štítek tak, aby čtečka v přístroji mohla přečíst čárový kód. L2KPI2 : 3 štítky Součásti soupravy dodávané zvlášť L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok pro sondu L2KPM : Souprava na čištění sondy LRXT : Reakční zkumavky (jednorázové) L2ZT : 250 zkumavek na diluent pro vzorky ( mm) L2ZC : 250 uzávěrů na zkumavky na diluent pro vzorky Dále jsou zapotřebí Destilovaná nebo deionizovaná voda, zkumavky. Postup stanovení Upozorňujeme, že pro optimální funkci je třeba provádět veškerou běžnou údržbu, jak je uvedena v návodu k použití analyzátorů IMMULITE V návodu k použití analyzátorů IMMULITE 2000 jsou uvedeny postupy : přípravy, nastavení, ředění, kalibrace, stanovení a kontroly kvality. Doporučený interval kalibrace : 2 týdny Vzorky pro kontrolu kvality : Kontroly dodané v soupravě slouží ke kontrole kvality při sledování funkčnosti stanovení. Dodržujte vládní nařízení či akreditační požadavky týkající se četnosti kontrol jakosti. Interpretace výsledků Hodnota cutoff stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG byla stanovena na pozitivních a negativních vzorcích pacientů pomocí analýzy ROC, s vyvážením citlivosti a specificity. Reaktivní : Výsledek 4,00 U/ml a vyšší je považován za reaktivní, a signalizuje, že byly IgG protilátky proti CCP ve vzorku nalezeny. Nereaktivní : Výsledek nižší než 4,00 U/ml je považován za nereaktivní, a signalizuje, že IgG protilátky proti CCP ve vzorku nalezeny nebyly. Při použití stanovení od různých výrobců se výsledky anti-ccp IgG v daném vzorku mohou lišit v důsledku použití odlišných metod stanovení a specificity reagencií. U výsledků hlášených lékaři by proto měl být uveden následující text : Následující výsledky byly získány pomocí stanovení 10 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

11 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG. Nejsou ekvivalentní výsledkům získaným testy od jiných výrobců. Očekávané hodnoty Celkem 197 vzorky séra od předpokládaně zdravých mužů (n = 99) a žen (n = 98) bylo analyzováno pomocí stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG. Výsledky této studie naznačují střední hodnotu < 1,50 U/ml U/ml a neparametrický rozsah 2,5 97,5. percentil ve výši < 1,50 1,93 U/ml. Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svá vlastní referenční rozmezí. Omezení Výsledky testu anti-ccp IgG samy o sobě nestačí ke stanovení diagnózy revmatoidní artritidy. Diagnózu může lékař stanovit až po zvážení všech klinických a laboratorních nálezů. Lipemické, hemolyzované nebo silně kontaminované vzorky mohou poskytovat chybné výsledky. Výsledky pacientů podstupujících imunosupresivní terapii či s HIV nebo s jinými poruchami vedoucími k imunosupresi je třeba interpretovat opatrně. Pracovní charakteristika testu nebyla stanovena u vzorků od novorozenců, pupečníkové krve, nebo pacientů před transplantací. Heterofilní protilátky v lidském séru mohou reagovat s imunoglobuliny ve složkách soupravy a narušovat tak imunologické stanovení in vitro. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky od pacientů, kteří jsou v častém styku se zvířaty nebo produkty z živočišného séra mohou obsahovat interferující látky a případně dávat anomální výsledky. Složení těchto reagencií zajišťuje minimální riziko interference, může však potenciálně dojít k jejich interakci se vzácně se vyskytujícími složkami séra. Pro diagnostické účely je třeba výsledky získané touto metodou hodnotit vždy v kontextu s klinickým vyšetřením, anamnézou pacienta a dalšími nálezy. Funkčnost metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v tabulkách a grafech. Výsledky jsou uvedeny v U/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny pocházejí ze vzorků séra odebraných do zkumavek bez gelového separátoru a agregačních přísad.) Přijatelný rozsah : 1, U/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : Limit blanku (nejvyšší hodnota očekávaná u vzorku bez stanovované látky ; zjištěna v souladu s CLSI EP17-A 10 ) : 0,26 U/ml Detekční limit (nejnižší detekovatelná hodnota ; zjištěna v souladu s CLSI EP17-A 10 ) : 1,50 U/ml Funkční citlivost : (koncentrace s variačním koeficientem 20%) : 10 2,34 U/ml Přesnost : Přesnost byla kontrolována podle směrnic CLSI EP5-A2. 11 Vzorky séra byly testovány v duplikátech po 20 dní, 3 šarže ve dvou bězích za den (celkem 40 běhů a 80 replikátů). (Viz tabulka Přesnost.) Specificita : Specifičnost stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG test byla ověřována u 8 skupin pacientů (n = 40) s různými druhy onemocnění, které mohlo způsobit zkřížené reakce nebo přítomnost jiných autoprotilátek ve vzorcích. Ověřovaná onemocnění: systémový lupus erythematodes (SLE), Sjögrenův syndrom, lymeská nemoc, osteoartróza, skleroderma, polymyozitida a štítné žlázy a mononukleóza. Celkem Pozitivní Onemocnění testováno (n) (n) SLE 5 0 Sjögrenův syndrom 5 1 Lymeská nemoc 5 1 Osteoartritida 5 0 Skleroderma 5 0 Polymyozitida 5 1 Thyreoitida 5 0 Mononukleóza 5 0 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 11

12 Tři ze 40 vzorků (1 Sjogrenův syndrom, 1 lymeská nemoc a 1 polymyozitida) měly pozitivní výsledek. Všechny vzorky byly také změřeny pomocí komerčně dostupného referenčního stanovení anti- CCP, povolený FDA. Pozitivní výsledek tří pozitivních vzorků byl potvrzen v referenčním stanovení. Bilirubin : Přítomnost konjugovaného i nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích až 20 mg/dl neměla vliv na výsledky, v rámci mezí přesnosti stanovení. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích až 500 mg/dl neměla vliv na výsledky, v rámci mezí přesnosti stanovení. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 1500 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Revmatoidní faktor : Posouzení vlivu vysoké hladiny endogenního revmatoidního faktoru (RF) bylo provedeno screeningovým testem vzorků pozitivních na RF a jejich naředěním na 200 IU/ml. Žádné klinicky významné změny nebyly pozorovány. Alternativní typ vzorku : K posouzení vlivu alternativních typů vzorků byla krev odebrána od 39 vyvážených skupin dobrovolníků do zkumavek heparinizovaných (Li heparin), EDTA a zkumavek BD SST Vacutainer. Dvacet procent z těchto vzorků bylo obohaceno o anti-ccp na koncentrace v celém měřitelném rozsahu. Všechny vzorky byly analyzovány pomocí stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG, a to s následujícími výsledky : (Li heparin) = 1,02 (Sérum) 0,46 U/ml r = 1,000 (SST) = 1,02 (Sérum) 0,52 U/ml r = 1,000 (EDTA) = 1,01 (Sérum) 0,31 U/ml r = 1,000 Průměr : 52,3 U/ml (Sérum) 52,9 U/ml (Li heparin) 53,0 U/ml (SST) 52,2 U/ml (EDTA) Studie prokázala 100 % shodu pozitivních a negativních výsledků u všech odebraných vzorků v prostředí séra, SST, EDTA a heparinu lithného. Srovnání metod : Stanovení IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG bylo porovnáno s komerčně dostupnými soupravami Axis-Shield DIASTAT Anti-CCP IgG na 457 vzorcích pacientů. Negativní Celková shoda : 94,1 % IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG % pozitivní shody % negativní shody 93,5 % 94,6 % Klinická účinnost : Stanovení bylo použito na přístroji IMMULITE 2000, a to k posouzení klinické citlivosti a specifičnosti dobře charakterizovaných vzorků. Pro studii bylo od pacientů odebráno celkem 457 vzorků séra. 257 vzorků bylo pozitivních na revmatoidní artritidu (RA) 12, zbývajících 200 vzorků bylo od zřejmě zdravých dárců (non-ra). Pacienti s pozitivním nálezem RA byli klasifikováni podle kritérií ACR. 12 Nereakt DIASTAT Reakt Pozitivní Klinický Nereakt obraz Reakt Pozitivní Negativní IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG Citlivost Specificita 78,2 % 99,5 % Technická podpora K Pro technickou podporu kontaktujte svého národního distributora. Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά Ενδεδειγμένη χρήση: Ο προσδιορισμός IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG είναι ένας in vitro διαγνωστικός ανοσολογικός προσδιορισμός για τον ημιποσοτικό καθορισμό των αντισωμάτων κλάσης IgG τα οποία είναι ειδικά για το κυκλικό κιτρουλλινιωμένο πεπτίδιο (CCP) σε ανθρώπινο ορό (συμπεριλαμβανομένων των σωληναρίων διαχωριστή ορού) ή πλάσμα (EDTA ή ηπαρινικού λιθίου) στα 12 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

13 αναλυτικά συστήματα IMMULITE Η ανίχνευση των αντισωμάτων αντι-ccp χρησιμοποιείται ως βοήθημα στη διάγνωση της Ρευματοειδούς Αρθρίτιδας (ΡΑ) και θα πρέπει να χρησιμοποιείται σε συνδυασμό με άλλες κλινικές πληροφορίες. Τα επίπεδα των αυτοαντισωμάτων αντιπροσωπεύουν μία παράμετρο σε μια διαγνωστική διαδικασία πολλαπλών κριτηρίων, η οποία περιλαμβάνει τόσο κλινικές αξιολογήσεις όσο και αξιολογήσεις βασισμένες σε εργαστηριακές εξετάσεις. Αριθμός καταλόγου: L2KPI2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: CCP Χρώμα: Κόκκινο Περίληψη και επεξήγηση Η IgG έναντι του κυκλικού κιτρουλλινιωμένου πεπτιδίου (αντι-ccp) είναι ένας ειδικός δείκτης για τη ρευματοειδή αρθρίτιδα, η οποία είναι μια νόσος που επηρεάζει το ένα τοις εκατό του παγκόσμιου πληθυσμού. 1 Από μελέτες προκύπτει ότι η παρουσία της αντι-ccp IgG μπορεί να ανιχνευτεί στα αρχικά στάδια της ρευματοειδούς αρθρίτιδας 2 4 και ότι είναι ενδεικτική μιας πιο προοδευτικής μορφής της νόσου. 4 Ο επίτοπος για το CCP παράγεται από μια πρόδρομη πρωτεΐνη που ανήκει στη φιλαγγρίνη, μια ομάδα πρωτεϊνών συνάθροισης νηματίων. Κατά τη διάρκεια του τελικού σταδίου διαφοροποίησης των επιδερμικών κυττάρων, τα κατάλοιπα αργινίνης στη φιλαγγρίνη υφίστανται απαμίνωση και μετατρέπονται σε κιτρουλλίνη. 5 Τα αυτοαντισώματα που στοχεύουν της αλληλουχίες πεπτιδίων που περιέχουν κιτρουλλίνη στους κύριους αντιγονικούς επιτόπους είναι δείκτες για τη ρευματοειδή αρθρίτιδα στους αντίστοιχους ασθενείς. 5,6 Από διάφορες μελέτες έχει προκύψει ευαισθησία μετξύ 41 89% και 89 99% ειδικότητα του αντι-ccp για διάγνωση της ρευματοειδούς αρθρίτιδας. 7 Δεδομένου ότι τα αντισώματα έναντι της κυκλικής κιτρουλλινιωμένης πρωτεΐνης (ACPA) είναι πιο ειδικά από το Ρευματοειδή παράγοντα (ΡΠ)(RF), χρησιμοποιούνται για να διακίνουν τις διάφορες περιπτώσεις αρθρίτιδας. 8 Αρχή της διαδικασίας Ο IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG είναι ένας στερεής φάσης, δύο κύκλων σειριακός ανοσομετρικός προσδιορισμός χημειοφωταύγειας. Η στερεή φάση, ένα σφαιρίδιο από πολυστυρένιο, επικαλύπτεται με ένα αντιγόνο κυκλικού κιτρουλλινιωμένου πεπτιδίου (CCP). Η υγρή φάση συνίσταται από δύο αντιδραστήρια: 1) πρωτεϊνικό ρυθμιστικό διάλυμα και 2) αλκαλική φωσφατάση (από βόειο έντερο) συνδεδεμένη σε μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο IgG αντίσωμα ποντικού σε ρυθμιστικό διάλυμα. Στον πρώτο κύκλο, το δείγμα του ασθενούς και το ρυθμιστικό διάλυμα επωάζονται μαζί με το επικαλυμμένο σφαιρίδιο για 30 λεπτά. Κατά τη διάρκεια αυτού τoυ χρονικού διαστήματος, η ανθρώπινη IgG στο δείγμα συνδέεται με το CCP στο σφαιρίδιο. Το μη συνδεδεμένο δείγμα στη συνέχεια απομακρύνεται με φυγοκεντρικές εκπλύσεις. Στον δεύτερο κύκλο, το συνδεδεμένο σε ένζυμο μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα IgG ποντικού προστίθεται στο αρχικό σωληνάριο αντίδρασης για μία επιπλέον 30-λεπτη επώαση. Το συνδεδεμένο με ένζυμο μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα IgG ποντικού προσδένεται στο ακινητοποιημένο αντι-ccp IgG στο σφαιρίδιο. Το μη προσδεδεμένο συζευγμένο ένζυμο απομακρύνεται με φυγοκεντρικές εκπλύσεις. Τελικά, το χημειοφωταυγές υπόστρωμα προστίθεται στο σωληνάριο αντίδρασης που περιέχει το σφαιρίδιο και το σήμα παράγεται σε αναλογία με το συνδεδεμένο ένζυμο. Κύκλοι επώασης: 2 30 λεπτά Χρόνος έως το πρώτο αποτέλεσμα: 65 λεπτά Συλλογή δειγμάτων Συνιστάται η χρήση υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα ή τα πολύ μολυσμένα δείγματα μπορεί να δώσουν λανθασμένα αποτελέσματα. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 13

14 Η φυγοκέντριση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα τη δημιουργία ινώδους. Για να αποφευχθούν εσφαλμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας ινώδους, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντριση των δειγμάτων, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται μεγαλύτερο χρόνο πήξης. Τα σωληνάρια συλλογής αίματος από διαφορετικούς κατασκευαστές μπορεί να παράγουν διαφορετικές τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα πρόσθετα, συμπεριλαμβανομένων των τζελ ή των φυσικών φραγμών, των ενεργοποιητών πήξης και/ή των αντιπηκτικών. Ο IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG δεν έχει δοκιμαστεί με όλες τις δυνατές παραλλαγές σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την ενότητα για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος: 5 µl ορού ή πλάσματος (EDTA και ηπαρινικό λίθιο). Μετά την αυτόματη προαραίωση, 10 µl αραιωμένου δείγματος χρησιμοποιούνται για τον ανοσολογικό προσδιορισμό. Αυτόματος συντελεστής προαραίωσης: 40 Φύλαξη: Ορός για 2 ημέρες σε θερμοκρασία δωματίου, 7 ημέρες στους 2 8 C, έως 12 μήνες στους 20 C ή λιγότερο. 9 Πλάσμα για 2 ημέρες σε θερμοκρασία δωματίου, 7 ημέρες στους 2 8 C, έως 8 μήνες στους 20 C ή λιγότερο. 9 Όταν τα δείγματα ορού και πλάσματος υποβλήθηκαν σε 4 κύκλους κατάψυξης/απόψυξης, δεν παρατηρήθηκε καμία κλινικά σημαντική διαφορά. 9 Αναμείξτε σχολαστικά τα αποψυγμένα δείγματα και φυγοκεντρήστε. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. ΠΡΟΣΟΧΗ! ΔΥΝΗΤΙΚΟΣ ΒΙΟΛΟΓΙΚΟΣ ΚΙΝΔΥΝΟΣ Περιέχει υλικό ανθρώπινης προέλευσης. Κάθε δωρεά ανθρώπινου αίματος ή συστατικού αίματος ελέγχθηκε με μεθόδους εγκεκριμένες από τον FDA για την ύπαρξη αντισωμάτων ενάντια στους ιούς της ανοσοανεπάρκειας του ανθρώπου τύπου 1 (HIV-1) και τύπου 2 (HIV-2), καθώς και για επιφανειακό αντιγόνο της ηπατίτιδας Β (HBsAg) και για αντισώματα ενάντια στον ιό της ηπατίτιδας C (HCV). Τα αποτελέσματα των εξετάσεων ήταν αρνητικά (όχι επανειλημμένα αντιδραστικά). Επειδή καμία εξέταση δεν παρέχει πλήρη διασφάλιση για την απουσία αυτών ή άλλων μολυσματικών παραγόντων, ο χειρισμός αυτού του υλικού θα πρέπει να γίνεται σύμφωνα με τις ορθές εργαστηριακές πρακτικές και γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. H302 + H312, H411 P280, P273, P301 + P312, P302 + P312, P501 Προειδοποίηση! Επιβλαβές σε περίπτωση κατάποσης ή σε επαφή με το δέρμα. Τοξικό για τους υδρόβιους οργανισμούς, με μακροχρόνιες επιπτώσεις. Να φοράτε προστατευτικά γάντια/προστατευτικά ενδύματα/μέσα ατομικής προστασίας για τα μάτια/ πρόσωπο. Να αποφεύγεται η ελευθέρωση στο περιβάλλον. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΚΑΤΑΠΟΣΗΣ: Καλέστε το ΚΕΝΤΡΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΑ- ΣΕΩΝ ή ένα γιατρό εάν αισθανθείτε αδιαθεσία. ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΟ ΔΕΡΜΑ: Καλέστε το ΚΕΝΤΡΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΑ- ΣΕΩΝ ή ένα γιατρό εάν αισθανθείτε αδιαθεσία. Απορρίψτε το περιεχόμενο και τον περιέκτη σε συμμόρφωση με όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισμούς. Περιέχει: αζίδιο νατρίου, 2-μεθυλ-2H-ισοθειαζολ- 3-όνη, Anti-CCP IgG Ρυθμιστές 14 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

15 Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Απόρριψη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Προσοχή: Η συσκευή αυτή περιέχει υλικό ζωικής προέλευσης και ο χειρισμός της πρέπει να γίνεται ως εάν επρόκειτο περί δυνητικού φορέα και παράγοντα μετάδοσης νόσου. Τα δεδομένα ασφαλείας (MSDS/SDS) βρίσκονται στον διαδικτυακό χώρο Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας Β και για αντισώματα έναντι της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Αποφύγετε την μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Βλ. ένθετο) Νερό: Χρησιμοποιείτε αποσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για τον προσδιορισμό. Anti-CCP IgG Συσκευασία σφαιριδίων (L2PI12) Με γραμμωτό κώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με αντιγόνο κυκλικού κιτρουλλινιωμένου πεπτιδίου (CCP). Σταθερή στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KPI2: 1 συσκευασία Anti-CCP IgG Συσκευασία αντιδραστηρίων (L2PIA2) Με γραμμωτό κώδικα. 11,5 ml μήτρας πρωτεΐνης/ ρυθμιστικού διαλύματος και 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (βόειο έντερο) συζευγμένης με μονοκλωνικό αντι-ανθρώπινο αντίσωμα IgG ποντικού σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερή στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KPI2: 1 δοχείο Πριν από τη χρήση, σχίστε το πάνω μέρος της ετικέτας στα σημεία διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το γραμμωτό κώδικα. Αφαιρέστε το κάλυμμα από το επάνω μέρος του δοχείου και κουμπώστε το συρόμενο κάλυμμα στους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες στο κάλυμμα του αντιδραστηρίου. Anti-CCP IgG Ρυθμιστές (LPIL, LPIH) Δύο φιαλίδια (χαμηλής και υψηλής τιμής) λυοφιλοποιημένου ανθρώπινου ορού με IgG αντιδρώσα στο CCP, σε ρυθμιστικό διάλυμα με συντηρητικό. Τουλάχιστον 30 λεπτά πριν από τη χρήση κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 2,0 ml αποσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Αναμείξτε με απαλές κινήσεις ανάδευσης ή με αναστροφή έως ότου το λυοφιλοποιημένο υλικό διαλυθεί πλήρως. (Δεν απαιτείται περαιτέρω αραίωση.) Σταθεροί στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 12 μήνες (διαχωρισμένοι) στους 20 C. L2KPI2: 1 σετ Anti-CCP IgG Ρυθμιστές (LPIC1, LPIC2) Δύο φιαλίδια που το καθένα περιέχει 2 ml. LPIC1 (Αρνητικός ορός ελέγχου): ανθρώπινος ορός μη αντιδραστικός στο αντι-ccp IgG, με συντηρητικό. LPIC2 (Θετικός ορός ελέγχου): ανθρώπινος ορός με IgG αντιδραστικός στο CCP, με συντηρητικό. Σταθερό στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά το άνοιγμα ή για 12 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2KPI2: 1 σετ Για το τρέχον εύρος τιμών των ελέγχων σε U/mL, παρακαλείστε να ανατρέξετε στο ένθετο. Το κιτ περιλαμβάνει ετικέτες κλασμάτων με γραμμωτό κώδικα, για χρήση με τους Ρυθμιστές και τους Ορούς ελέγχου. Πριν από τη χρήση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες κλασμάτων σε σωληνάρια εξετάσεων, με τέτοιον τρόπο ώστε οι γραμμωτοί κώδικες να μπορούν να διαβαστούν από τον αναγνώστη γραμμωτού κώδικα στο IMMULITE IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 15

16 Αραιωτικό δείγματος αυτοαντισωμάτων (L2Α1Z) Για την επί του αναλυτή αραίωση των δειγμάτων των ασθενών και των ορών ελέγχου. 50 ml συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση) μήτρας πρωτεΐνης/ρυθμιστικού διαλύματος. Σταθερό στους 2 8 C για 30 ημέρες μετά το άνοιγμα ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2KPI2: 1 φιαλίδιο Ετικέτες με γραμμωτό κώδικα παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετήστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα σωληνάριο εξετάσεων 16 x 100 mm, έτσι ώστε οι γραμμωτοί κώδικες να μπορούν να διαβαστούν από τον αναγνώστη του αναλυτή. L2KPI2: 3 ετικέτες Συστατικά του κιτ που παρέχονται ξεχωριστά L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ρύγχους L2KPM: Κιτ καθαρισμού του ρύγχους LRXT: Σωληνάρια αντίδρασης (αναλώσιμα) L2ZT: 250 σωληνάρια εξετάσεων με αραιωτικό δειγμάτων ( mm) L2ZC: 250 πώματα σωληναρίων αραιωτικού δειγμάτων Απαιτούνται επίσης Αποσταγμένο ή απιονισμένο νερό, σωληνάρια εξετάσεων. Διαδικασία προσδιορισμού Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να εκτελεστούν όλες οι τυπικές διαδικασίες συντήρησης όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήσης των συστημάτων IMMULITE Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης των συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, ρύθμιση, αραιώσεις, προσαρμογή, προσδιορισμό και διαδικασίες ποιοτικού ελέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Οι οροί ελέγχου που παρέχονται με το κιτ θα πρέπει να χρησιμοποιούνται ως υλικό ποιοτικού ελέγχου για την παρακολούθηση της απόδοσης του προσδιορισμού. Ακολουθήστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Το όριο αποκοπής (cutoff) για τον προσδιορισμό IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG προσδιορίστηκε με βάση θετικά και αρνητικά δείγματα ασθενών από μια ανάλυση ROC, με ισορροπημένο συνυπολογισμό της ευαισθησίας και της ειδικότητας. Αντιδραστικό: Ένα αποτέλεσμα μεγαλύτερο ή ίσο του 4,00 U/mL θεωρείται ως αντιδραστικό και υποδεικνύει ότι αντισώματα anti-ccp IgG έχουν εντοπιστεί στο δείγμα. Μη αντιδραστικό: Ένα αποτέλεσμα μικρότερο του 4,00 U/mL θεωρείται ως μη αντιδραστικό και υποδεικνύει ότι αντισώματα anti-ccp IgG δεν έχουν εντοπιστεί στο δείγμα. Τα αποτελέσματα anti-ccp IgG που υπολογίζονται για ένα συγκεκριμένο δείγμα με προσδιορισμούς από διαφορετικούς κατασκευαστές μπορεί να μην δίνουν το ίδιο αποτέλεσμα εξαιτίας διαφορών στις μεθόδους των προσδιορισμών και στην ειδικότητα των αντιδραστηρίων. Για τον λόγο αυτό, τα αποτελέσματα που εκδίδονται στους κλινικούς γιατρούς από το εργαστήριο θα πρέπει να αναφέρουν ότι: Τα παρακάτω αποτελέσματα προέκυψαν με τον προσδιορισμό IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG. Aποτελέσματα που προέκυψαν από μεθόδους προσδιορισμού άλλων κατασκευαστών δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται εναλλακτικά μεταξύ τους. Αναμενόμενες τιμές Με τον προσδιορισμό IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG αναλύθηκαν δείγματα ορού συνολικά 197 αναφερομένων ως υγιών, ανδρών (n = 99) και γυναικών (n = 98), αιμοδοτών. Τα αποτελέσματα από αυτήν τη μελέτη προτείνουν μια διάμεση τιμή < 1,50 U/mL και μη παραμετρικό εύρος 2,5 ου 97,5 ου εκατοστημορίου < 1,50 1,93 U/mL. Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. 16 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

17 Περιορισμοί Τα αποτελέσματα της εξέτασης Anti-CCP IgG μόνο, δεν είναι αρκετά για τη διάγνωση ρευματοειδούς αρθρίτιδας σε έναν ασθενή. Θα πρέπει να υπάρξει διάγνωση από ιατρό μόνο μετά την αξιολόγηση όλων των κλινικών και εργαστηριακών ευρημάτων. Τα λιπιδαιμικα, τα αιμολυμένα ή τα πολύ μολυσμένα δείγματα μπορεί να δώσουν λανθασμένα αποτελέσματα. Τα αποτελέσματα των ασθενών με HIV, των ασθενών που υποβάλλονται σε ανοσοκατασταλτικές θεραπείες ή των ασθενών με άλλες νόσους που συνεπάγονται ανοσοκαταστολή, θα πρέπει να αξιολογούνται με προσοχή. Τα χαρακτηριστικά απόδοσης αυτού του προσδιορισμού δεν έχουν καθοριστεί για χρήση με δείγματα από νεογνά, αίμα ομφάλιου λώρου ή ασθενών πριν τη μεταμόσχευση. Ετεροφιλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά του προσδιορισμού παρεμποδίζοντας τους in vitro ανοσολογικούς προσδιορισμούς. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.]. Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της παρεμβολής. Ωστόσο, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτόν τον προσδιορισμό θα πρέπει πάντοτε να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Χαρακτηριστικά απόδοσης Βλ. Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της απόδοσης του προσδιορισμού. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε U/mL. (Εφόσον δεν αναφέρεται διαφορετικά, όλα προέκυψαν σε δείγματα ορού που συλλέχθηκαν σε σωληνάρια χωρίς φραγμούς γέλης ή πρόσθετων που διευκολύνουν την πήξη.) Αναφερόμενο εύρος: 1, U/mL Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: Όριο του τυφλού δείγματος (η υψηλότερη αναμενόμενη τιμή ενός δείγματος δίχως αναλύτη, η οποία καθορίζεται με την CLSI EP17-A 10 ): 0,26 U/mL Όριο ανίχνευσης (η χαμηλότερη ανιχνεύσιμη συγκέντρωση, η οποία καθορίζεταιμε την CLSI EP17-A 10 ): 1,50 U/mL Λειτουργική ευαισθησία: (συγκέντρωση με 20% συντελεστή διακύμανσης (ΣΔ) καθορισμένο): 10 2,34 U/mL Επαναληψιμότητα: Η επαναληψιμότητα αξιολογήθηκε σύμφωνα με το πρωτόκολλο EP5-A2 του CLSI. 11 Για 20 μέρες ορισμένα δείγματα ορού προσδιορίστηκαν εις διπλούν, δύο κύκλοι μέτρησης ανά ημέρα, με χρήση 3 παρτίδων συνολικά 40 φορές και 80 επαναλήψεις. (Βλ. πίνακα Επαναληψιμότητα.) Ειδικότητα: Η αξιολόγηση ειδικότητας του προσδιορισμού IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG διεξήχθη σε 8 υποομάδες ασθενών (n = 40) με συνθήκες ενδεχόμενης διασταυρούμενης αντιδραστικότητας και καταστάσεις νόσων στις οποίες ενδέχεται να υπάρχουν άλλα αυτοαντισώματα στα δείγματα των ασθενών. Αξιολογήθηκαν οι εξής καταστάσεις νόσων: συστηματικός ερυθηματώδης λύκος (SLE), σύνδρομο Sjogren, νόσος Lyme, οστεοαρθρίτιδα, σκληροδερμία, πολυμυοσίτιδα, θυρεοειδίτιδα και μονοπυρήνωση. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 17

18 Κατάσταση νόσου Σύνολο εξετασθέντων (n) Θετικά (n) SLE 5 0 Σύνδρομο Sjogren 5 1 Νόσος Lyme 5 1 Οστεοαρθρίτιδα 5 0 Σκληροδερμία 5 0 Πολυμυοσίτιδα 5 1 Θυρεοειδίτιδα 5 0 Μονοπυρήνωση 5 0 Τρία από 40 δείγματα (1 σύνδρομο Sjogren, 1 νόσος Lyme και 1 πολυμυοσίτιδα) έδωσαν θετικά αποτελέσματα. Όλα τα δείγματα αξιολογήθηκαν επίσης σε μια εμπορικά διαθέσιμη, αδειοδοτημένη από την υπηρεσία FDA, συσκευή αντιπαραβολής εξετάσεων για Anti-CCP. Τα τρία θετικά δείγματα επιβεβαιώθηκαν ως θετικά από τη συσκευή αντιπαραβολής εξετάσεων. Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης (συνδεδεμένης και μη συνδεδεμένης) σε συγκεντρώσεις έως 20 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα, μέσα στα όρια ακρίβειας του προσδιορισμού. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 500 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια επαναληψιμότητας του προσδιορισμού. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 1500 mg/dl δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της εξέτασης. Ρευματοειδής παράγοντας: Η αξιολόγηση των υψηλών επιπέδων του ενδογενούς ρευματοειδούς παράγοντα (RF) επιτεύχθηκε με επιλογή των θετικών σε RF δειγμάτων και αραίωσή τους στα 200 IU/mL. Δεν παρατηρήθηκαν κλινικά σημαντικές αλλαγές. Εναλλακτικός τύπος δείγματος: Για να αξιολογηθεί η επίδραση των εναλλακτικών τύπων δειγμάτων, 39 αντιστοιχισμένα σετ φαινομενικά υγιλών αιμοδοτών συλλέθηκαν σε σωληνάρια Vacutainer με ηπαρίνη (λιθιούχος ηπαρίνη), EDTA και BD SST. Το είκοσι τοις εκατό αυτών των δειγμάτων τιτλοδοτήθηκαν για να επιτευχθούν επίπεδα anti-ccp στο αναφερόμενο εύρος. Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν με τον προσδιορισμό IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG και έδωσαν τα ακόλουθα αποτελέσματα: (Li-Ηπαρίνη) = 1,02 (Ορός) 0,46 U/mL r = 1,000 (SST) = 1,02 (Ορός) 0,52 U/mL r = 1,000 (EDTA) = 1,01 (Ορός) 0,31 U/mL r = 1,000 Μέσοι όροι: 52,3 U/mL (Ορός) 52,9 U/mL (Li-Ηπαρίνη) 53,0 U/mL (SST) 52,2 U/mL (EDTA) H μελέτη αυτή έδειξε 100% συμφωνίες θετικών και αρνητικών μεταξύ όλων των δειγμάτων που συλλέχθηκαν σε ορό, SST, EDTA και ηπαρινικό λίθιο. Σύγκριση Μεθόδου: Ο προσδιορισμός IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG συγκρίθηκε με έναν εμπορικά διαθέσιμο προσδιορισμό Axis-Shield DIASTAT Anti-CCP IgG σε 457 δείγματα ασθενών. DIASTAT Αντιδρ. Θετικά IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG Μη αντιδρ. Αρνητικά Συνολική συμφωνία: 94,1% % συμφωνίας σε θετικά % συμφωνίας σε αρνητικά 93,5% 94,6% Κλινική Απόδοση: Ο προσδιορισμός εκτελέστηκε στο IMMULITE 2000 για να αξιολογηθεί η κλινική ευαισθησία και ειδικότητα των καλά χαρακτηρισμένων δειγμάτων. Συνολικά συλλέχθηκαν 457 δείγματα ορού ασθενών για τη μελέτη. 257 δείγματα ήταν θετικά 12 στη ρευματοειδή αρθρίτιδα (ΡΑ) και τα υπόλοιπα 200 δείγματα προέρχονταν από φαινομενικά υγιείς δωρητές (χωρίς ΡΑ). Οι ασθενείς που ήταν θετικοί στη ΡΑ ταξινομήθηκαν σύμφωνα με τα κριτήρια ACR. 12 Κλινική κατάσταση Αντιδρ. Θετικά Αρνητικά IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG Μη αντιδρ. Συαισθησία Σιδικότητα 78,2% 99,5% 18 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

19 Τεχνική βοήθεια Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι πιστοποιημένο κατά ISO 13485:2003. Polski Przeznaczenie: IMMULITE 2000 Anti- CCP IgG jest testem immunodiagnostycznym in vitro do półilościowego oznaczania autoprzeciwciał klasy IgG swoistych dla cyklicznego cytrulinowanego peptydu (CCP) w surowicy (przy użyciu probówek SST) lub osoczu (EDTA lub heparyna litowa) przy użyciu analizatorów IMMULITE Wykrywanie przeciwciał anty-ccp ma zastosowanie w diagnostyce reumatoidalnego zapalenia stawów; powinno być stosowane w połączeniu z innymi danymi klinicznymi. Poziom przeciwciał stanowi jeden z parametrów w procesie diagnostycznym uwzględniającym szereg parametrów i obejmującym ocenę kliniczną i laboratoryjną. Numery katalogowe: L2KPI2 (200 testów) Kod testu: CCP Kolor: Czerwony Streszczenie i opis testu IgG przeciw cyklicznemu cytrulinowanemu peptydowi (anty-ccp) jest swoistym markerem reumatoidalnego zapalenia stawów, choroby, na którą cierpi jeden procent populacji świata. 1 Badania wykazały, że obecność IgG anty-ccp można wykryć we wczesnych stadiach reumatoidalnego zapalenia stawów, 2 4 i że wskazuje na bardziej postępującą postać tej choroby. 4 Epitop CCP otrzymywany jest z białka prekursorowego z grupy filagryn, białek agregujących włókna keratynowe. W końcowej fazie różnicowania komórek śródbłonka zachodzi cytrulinowanie reszt argininy w filagrynie do cytruliny. 5 Autoprzeciwciała rozpoznające sekwencje peptydów zawierających cytrulinę w głównych epitopach antygenowych są markerami reumatoidalnego zapalenia stawów u pacjentów dotkniętych tą chorobą. 5,6 Różne badania wykazały czułość w zakresie od 41 89% oraz swoistość w zakresie od 89 99% dla anty-ccp w rozpoznaniu reumatoidalnego zapalenia stawów. 7 Ponieważ przeciwciała przeciwko antycyklicznemu cytrulinowanemu białku (ACPA) są bardziej swoiste niż czynnik reumatoidalny (RF), są wykorzystywane do rozróżniania różnych postaci zapalenia stawów. 8 Zasada oznaczania IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG jest sekwencyjnym, dwucyklicznym, chemiluminescencyjnym testem immunodiagnostycznym fazy stałej. Faza stała ma postać poliestrowej kulki opłaszczonej antygenem cyklicznego cytrulinowanego peptydu (CCP). Faza płynna składa się z dwóch odczynników: 1) matrycy bufora białkowego i 2) fosfatazy zasadowej (z jelita cielęcego) skoniugowanych z mysim monoklonalnym przeciwciałem przeciw ludzkiemu IgG w buforze. W pierwszym cyklu próbka badana i bufor inkubowane są przez 30 minut z opłaszczona kulką. Ludzkie IgG w próbce wiąże się wówczas z CCP na kulce. Niezwiązana próbka usuwana jest podczas cyklów płukania i odwirowania. W drugim cyklu mysie monoklonalne przeciwciało przeciw ludzkiemu IgG skoniugowane z enzymem dodawane jest do tej samej próbówki reakcyjnej I inkubowane przez kolejne 30 minut. Mysie monoklonalne przeciwciało anty-ludzkiej IgG skoniugowane z enzymem wiąże się z IgG anty-ccp unieruchomionej na kulce. Niezwiązany koniugat enzymu usuwany jest podczas cyklów płukania i odwirowania. Ostatecznie do próbówki reakcyjnej z kulką dodawany jest substrat chemiluminescencyjny, a wytworzony sygnał jest proporcjonalny do ilości związanego enzymu. Cykle inkubacji: 2 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 65 minuty IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 19

20 Pobieranie próbki W celu wyklarowania próbek lipemicznych należy zastosować ultrawirowanie. Próbki zhemolizowane lub silnie zanieczyszczone mogą dawać błędne wyniki. Odwirowanie próbek surowicy przed całkowitym wykrzepieniem może skutkować obecnością fibryny w materiale. Aby nie dopuścić do zafałszowania wyników z powodu obecności fibryny, należy upewnić się, że doszło do pełnego wykrzepienia przed wirowaniem próbek. Niektóre próbki, szczególnie pochodzące od osób przyjmujących leki obniżające krzepliwość krwi, mogą wymagać dłuższego czasu wykrzepiania. Próbówki do pobierania próbek pochodzące od różnych producentów mogą dawać różne wyniki spowodowane użytymi materiałami i dodatkami, takimi jak żele i bariery fizyczne, substancje przyspieszające wykrzepianie i/lub antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG nie został określony. Szczegóły dotyczące przetestowanych rodzajów materiału próbki zawarto w rozdziale Alternatywne typy próbek. Wymagana objętość próbki: 5 µl surowicy lub osocza (EDTA i Heparynizowane litowe). Po automatycznym rozcieńczeniu wstępnym do oznaczenia aparat zużywa 10 µl rozcieńczonej próbki. Współczynnik rozcieńczenia automatycznego: 40 Przechowywanie: Surowica przez 2 dni w temperaturze pokojowej, 7 dni w temperaturze 2 8 C; lub w temperaturze 20 C lub niższej do 12 miesięcy. 9 Osocze przez 2 dni w temperaturze pokojowej, 7 dni w temperaturze 2 8 C; lub w temperaturze 20 C lub niższej do 8 miesięcy. 9 Próbki surowicy i osocza poddano cyklowi czterokrotnego zamrażania i rozmrażania. Nie stwierdzono żadnych różnic w wynikach. 9 Rozmrożone próbki należy dokładnie wymieszać i odwirować. Ostrzeżenia i środki ostrożności Do diagnostyki in vitro. PRZESTROGA! POTENCJALNE ZAGROŻENIE BIOLOGICZNE Zawiera materiał pochodzenia ludzkiego. Każdą porcję ludzkiej krwi lub składnika krwi pochodzącą od dawców przetestowano metodami zaaprobowanymi przez FDA na obecność przeciwciał przeciwko ludzkiemu wirusowi nabytego niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) i typu 2 (HIV-2), antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby typu B (HBsAg) I przeciwciał przeciwko wirusowi zapalenia wątroby typu C (HCV). Wyniki tych badań były ujemne (nie wykazały powtarzalnej reaktywności). Jednak żadne badanie nie gwarantuje całkowitej pewności, że te lub inne czynniki chorobotwórcze nie są obecne w materiale; z tym materiałem należy postępować zgodnie z zasadami dobrej praktyki laboratoryjnej I stosować uniwersalne środki ostrożności PRZESTROGA: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. H302 + H312, H411 P280, P273, P301 + P312, P302 + P312, P501 Ostrzeżenie! Działa szkodliwie po połknięciu lub w kontakcie ze skórą. Działa toksycznie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. Stosować rękawice ochronne/ odzież ochronną/ochronę oczu/ochronę twarzy. Unikać uwolnienia do środowiska. W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: W przypadku złego samopoczucia skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub z lekarzem. W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ: W przypadku złego samopoczucia skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub z lekarzem. Pojemnik I zawartość usuwać zgodnie z wszystkimi lokalnymi, regionalnymi i krajowymi przepisami. Zawiera: azydek sodu, 2-metylo- 2H-izotiazol-3-on; Anti-CCP IgG - Kalibratory Odczynniki: Przechowywać w od 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. 20 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

21 Przestroga: Materiał pochodzenia zwierzęcego. Postępować tak jak z materiałem potencjalnie zakaźnym. Karty charakterystyk substancji i preparatów chemicznych (SDS/MSDS) są dostępne na Należy się z nimi obchodzić zgodnie z przyjętymi zasadami pracy w laboratorium i traktować je jak potencjalne nośniki czynników chorobotwórczych. Badania wykazały, że produkty wytworzone z ludzkiej krwi są ujemne w kierunku kiły, przeciwciał przeciw HIV 1 i 2, antygenu powierzchniowego WZW B i przeciwciał przeciw WZW C. Materiały zawierają azydek sodu jako środek konserwujący, w stężeniu poniżej 0,1 g/dl. Utylizując odczynniki należy je spłukiwać dużą ilością wody, aby zapobiec odkładaniu się w rurach potencjalnie wybuchowych azydków ołowiu i miedzi. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać kontaminacji i ekspozycji na bezpośrednie działanie światła słonecznego. (Zob. ulotka informacyjna) Woda: Stosować wodę destylowana lub dejonizowaną. Dostarczone materiały Elementy zestawu stanowią komplet. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. Anti-CCP IgG - Pojemnik z kulkami (L2PI12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych antygenem cyklicznego peptydu cytrulinowanego (CCP). Stabilne w od 2 8 C do daty ważności. L2KPI2: 1 pakiet Anti-CCP IgG - Klin odczynnikowy (L2PIA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml matrycy bufora białkowego i 11,5 ml fosfatazy zasadowej (z jelita cielęcego) skoniugowanych z mysim monoklonalnym przeciwciałem przeciw ludzkiemu IgG w buforze. Stabilne w od 2 8 C do daty ważności. L2KPI2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelkę komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Anti-CCP IgG - Kalibratory (LPIL, LPIH) Dwie fiolki (stężenie niskie i wysokie) zawierające liofilizowaną ludzką surowicę z IgG reaktywną w stosunku do CCP, w buforze z konserwantem. Co najmniej 30 minut przed użyciem dodać do każdej fiolki 2,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Delikatnie mieszać lub odwracać próbówkę do całkowitego rozpuszczenia materiału liofilizowanego. (Nie jest wymagane dodatkowe rozcieńczenie.) Po otwarciu stabilny przez 30 dni w od 2 8 C lub 12 miesięcy w 20 C (rozpipetowany). L2KPI2: 1 zestaw Anti-CCP IgG - Kontrole (LPIC1, LPIC2) Dwie fiolki po 2 ml. LPIC1 (Kontrola ujemna): ludzka surowica niereaktywna dla IgG anty-ccp, z konserwantem. LPIC2 (Kontrola dodatnia): ludzka surowica reaktywna dla IgG anty-ccp, z konserwantem. Po otwarciu stabilny 30 dni w od 2 8 C lub do 12 miesięcy w 20 C (rozpipetowany). L2KPI2: 1 zestaw Aktualne zakresy kontroli wyrażone w jednostkach na U/ml podane są w ulotce dołączonej do kontroli. Załączone nalepki z kodem kreskowym należy stosować na kalibratorach i kontrolach. Przed użyciem umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym tak, aby mogły być odczytane przez czytnik kodów kreskowych aparatu IMMULITE Rozcieńczalnik do autoprzeciwciał w próbce (L2A1Z) Do rozcieńczania próbek i kontroli w aparacie. 50 ml stężonej (gotowej do użycia) matrycy buforu białkowego. Po otwarciu stabilny 30 dni w od 2 8 C lub do 6 miesięcy w 20 C (rozpipetowany). L2KPI2:1 fiolka Do zestawu dołączone są nalepki z kodem kreskowym do użycia z rozcieńczalnikiem. IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 21

22 Przed użyciem umocować na probówce mm odpowiednią nalepkę z kodem kreskowym tak, aby mogły być odczytane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. L2KPI2: 3 nalepki Materiały dostarczane oddzielnie L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący do sondy L2KPM: Roztwór czyszczący do sondy LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 próbówek na rozcieńczalnik próbek ( mm) L2ZC: 250 korków do próbówek na rozcieńczalnik próbek Ponadto niezbędne Woda destylowana lub dejonizowana, probówki. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000, poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Podręcznik operatora aparatu IMMULITE 2000 omawia procedury: przygotowania, ustawiania, rozcieńczania, kalibracji, oznaczania i kontroli jakości. Zalecany odstęp pomiędzy kalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: Kontrole dołączone do zestawu należy stosować jako materiał kontroli jakości do monitorowania wyników oznaczenia. Kontrolę jakości należy przeprowadzać z częstotliwością wynikającą z przepisów obowiązujących w danym kraju lub wymogów akredytacji. Interpretacja wyników Punkt odcięcia testu IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG ustalono na podstawie dodatnich i ujemnych próbek pacjentów poprzez analizę ROC, z równym naciskiem na czułość i swoistość. Reaktywne: Wynik wyższy lub równy 4,00 U/ml uznawany jest za reaktywny, co oznacza, że w próbce wykryto przeciwciała IgG przeciw CCP. Niereaktywne: Wynik niższy niż 4,00 U/ml uznawany jest za niereaktywny, co oznacza, że w próbce nie wykryto przeciwciał IgG przeciw CCP. Wynik IgG przeciw CCP w danej próbce oznaczonej testami różnych producentów może różnić się z uwagi na odmienność zastosowanych metod oznaczania i swoistości odczynników. Dlatego też zaleca się, aby wyniki przesłane przez laboratorium do lekarza zawierały stwierdzenie: Poniższe wyniki uzyskano testem IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG. Nie można wymiennie korzystać z wyników testów różnych producentów. Oczekiwane wartości Łącznie 197 próbek surowicy pochodzących od dawców obojga płci, bez objawów chorobowych (n = 99 mężczyzn i n = 98 kobiet), oznaczono testem IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG. Wyniki w tym badaniu dały medianę < 1,50 U/ml i zakres od 2,5 97,5 centyli, uzyskany metodą nieparametryczną, wynoszący od < 1,50 1,93 U/ml. Powyższe zakresy należy traktować wyłącznie jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Sam wynik badania na IgG przeciw CCP nie wystarcza do rozpoznania reumatycznego zapalenia stawów u pacjenta. Lekarz powinien oprzeć diagnozę na ocenie wszystkich spostrzeżeń klinicznych i wyników laboratoryjnych. Próbki zhemolizowane lub silnie zanieczyszczone mogą dawać błędne wyniki. Z dużą ostrożnością należy interpretować wyniki uzyskane od chorych z HIV, przechodzących terapię immunosupresywną i cierpiących na inne schorzenia prowadzące do upośledzenia układu odpornościowego. Nie ustalono charakterystyki wykonania tego testu dla próbek pochodzących od noworodków, krwi pępowinowej lub pacjentów przed przeszczepami. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą reagować 22 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

23 z immunoglobulinami w składnikach testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Zob. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27 33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych na surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub pochodnymi surowicy zwierzęcej, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, ale interferencja taka może wystąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą należy interpretować w połączeniu z badaniem fizykalnym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi przesłankami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w części Tabele i wykresy. Wyniki podano w U/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez żelu separacyjnego i substancji przyspieszających wykrzepianie.) Zakres raportowanych: od 1, U/ml Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: Granica stężenia zerowego (najwyższa wartość oczekiwana dla próbki bez substancji oznaczanej, określona zgodnie z CLSI EP17-A 10 ): 0,26 U/ml Granica wykrywalności: (najniższe oznaczane stężenie; określone zgodnie z CLSI EP17-A 10 ): 1,50 U/ml Czułość funkcjonalna: (stężenie, przy którym współczynnik zmienności (CV) wynosi 20%): 10 2,34 U/ml Dokładność: Dokładność określono zgodnie ze wskazówkami CLSI EP5-A2. 11 Próbki surowicy testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, 3 seriami odczynników, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń. (Patrz: tabela Dokładność.) Swoistość: Ocenę swoistości testu IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG przeprowadzono na 8 podgrupach pacjentów (n = 40) ze schorzeniami mogącymi powodować reakcje krzyżowe i stanach, w których w próbkach mogą być obecne inne przeciwciała. Oceniono wpływ następujących schorzeń: liszaj rumieniowaty układowy, zespół Sjorgena, borelioza, choroba zwyrodnieniowa stawów, twardzina, zapalenie wielomięśniowe, zapalenie tarczycy i mononukleozę. Stan chorobowy Przetestowano łącznie (n) Dodatnie (n) SLE 5 0 Zespół Sjogrena 5 1 Borelioza 5 1 Choroba zwyrodnieniowa 5 0 stawów Twardzina skóry 5 0 Zapalenie wielomięśniowe 5 1 Zapalenie tarczycy 5 0 Mononukleoza 5 0 Trzy z 40 próbek (1 z zespołem Sjogrena, 1 z boreliozą i 1 z zapaleniem wielomięśniowym) wykazały wynik dodatni Wszystkie próbki przetestowano również dostępnym w handlu, zatwierdzonym przez FDA, urządzeniem do testów porównawczych na anty-ccp. Trzy próbki dodatnie zostały potwierdzone jako dodatnie przez urządzenie do testów porównawczych. Bilirubina: Obecność wolnej lub związanej bilirubiny w stężeniu do 20 mg/dl nie wpływa na wynik w zakresie precyzji testu. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 500 mg/dl nie wpływa na wynik w zakresie precyzji testu. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 1500 mg/dl nie wpływa na wynik w zakresie precyzji testu. Czynnik reumatoidalny: Ocenę wysokich stężeń endogennego czynnika reumatoidalnego (RF) osiągnięto poprzez badanie przesiewowe próbek dodatnich IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 23

24 w kierunku RF i rozcieńczanie ich do 200 IU/ml. Nie zaobserwowano żadnych klinicznie znaczących zmian. Rodzaj pobieranego materiału: Aby ocenić wpływ różnych typów próbek na wyniki, krew 39 ochotników bez objawów chorobowych pobierano do zestawów następujących próbówek: heparynizowanych (litowych), EDTA, i próżniowych BD SST Vacutainer. Do dwudziestu procent próbek dodano przeciwciała przeciw CCP, aby osiągnąć różne stężenia w zgłaszanym zakresie. Wszystkie próbki oznaczono testem IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG i uzyskano następujące wyniki: (Heparyna litowa) = 1,02 (Surowica) 0,46 U/ml r = 1,000 (SST) = 1,02 (Surowica) 0,52 U/ml r = 1,000 (EDTA) = 1,01 (Surowica) 0,31 U/ml r = 1,000 Średnie: 52,3 U/ml (Surowica) 52,9 U/ml (Heparyna Litowa) 53,0 U/ml (SST) 52,2 U/ml (EDTA) To badanie wykazało 100% zgodności pozytywnej i negatywnej wszystkich próbek pobranych do próbówek do surowicy, typu SST, z EDTA i heparyną litową. Porównanie metod: Test IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG porównano z ogólnodostępnym testem Axis-Shield DIASTAT Anti-CCP IgG oznaczając próbki pochodzące od 457 pacjentów. Ujemne Zgodność łączna: 94,1% IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG % zgodności dodatniej % zgodność ujemnej 93,5% 94,6% Charakterystyka wykonania: Test wykonano na analizatorze IMMULITE 2000 w celu oceny czułości klinicznej i swoistości na dobrze opisanych próbkach. Do badania pobrano łącznie 457 próbek surowicy. 257 próbek było dodatnich w kierunku choroby zwyrodnieniowej stawów 12, a pozostałe 200 próbek pochodziło od dawców bez objawów chorobowych (wolnych od choroby zwyrodnieniowej stawów). Pacjentów z objawami zwyrodnieniowymi sklasyfikowano według kryteriów ACR. 12 Status kliniczny IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG Dodatnie Ujemne Reaktywnreakt. Nie- DIASTAT Dodatnie Reaktywne Niereakt. Czułość Swoistość 78,2% 99,5% Pomoc techniczna Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. All other trademarks are the property of their respective owners Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Made in: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Glyn Rhonwy, Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KPI 3 {9} 24 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )

25 Changes in this Edition: cc#eu22548: 1) Under Warnings and Precautions, added biohazard symbol and potential biohazard statement, caution statement, required GHS pictograms/signal words/hazard and precautionary codes and statements, offending chemicals and sources. 2) Under References, added citations from the potential biohazard statement. 3) Changed Origin: UK to Made in: UK. 4) Updated the manufacturer address to include Glyn Rhonwy. 5) In Understanding the Symbols, revised the symbol for catalog number, added a GHS pictogram for health hazard, and updated existing symbols with GHS pictograms and terminology for exclamation mark, corrosion, skull and crossbones, and environment. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cs Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly : / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cs: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cs: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cs: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cs: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej Symbol Definition En: CE Mark Cs: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cs: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cs: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cs: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cs: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cs: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cs: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cs: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cs: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, ) 25

26 Symbol Definition En: Keep away from sunlight Cs: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym BEAD PACK Symbol Definition En: Bead Pack Cs: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Batch code Cs: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii TEST UNIT En: Test Unit Cs: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Contains sufficient for (n) tests Cs: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D En: Reagent Wedge Cs: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Date format (year-month) Cs: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cs: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Health Hazard Cz: Zdravotní riziko El: Κίνδυνος για την υγεία Pl: Zagrożenie dla zdrowia En: Exclamation Mark Cz: Vykřičník El: Θαυμαστικό Pl: Wykrzyknik En: Corrosion Cz: Koroze El: Διάβρωση Pl: Działanie żrące En: Skull and Crossbones Cz: Lebka se zkříženými hnáty El: Νεκροκεφαλή με διασταυρούμενα οστά Pl: Czaszka i skrzyżowane piszczele En: Environment Cz: Prostředí El: Περιβάλλον Pl: Środowisko ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB DIL CONTROL CONTROL 1 CONTROL 2 CONTROL 3 En: Adjustor Cs: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cs: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cs: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cs: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Sample Diluent Cs: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek En: Control Cs: Kontrola El: Έλεγχος Pl: Kontrola 26 IMMULITE 2000 Anti-CCP IgG (PIEL2KPI-3 {9}, )