Κιτ δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure PJI

Κιτ δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure PJI Δοκιμασία α-ντεφενσίνης για περιπροθετική αρθρική λοίμωξη Διανέμεται από Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με το προϊόν, επισκεφθείτε τη διεύθυνση www.cddiagnostics.com Οι χρήστες πρέπει να διαβάσουν ολόκληρο αυτό το ένθετο συσκευασίας πριν χρησιμοποιήσουν το προϊόν. Ακολουθήστε προσεκτικά τις οδηγίες όταν διεξάγετε τη δοκιμασία. Διαφορετικά, η δοκιμασία ενδέχεται να δώσει ανακριβή αποτελέσματα. ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ Η παρούσα μέθοδος δεν έχει επικυρωθεί για χρήση σε πληθυσμούς ασθενών που δεν έχουν υποβληθεί σε ολική αρθροπλαστική. ΟΝΟΜΑΣΙΑ ΚΑΙ ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Η δοκιμασία πλευρικής ροής Synovasure PJI είναι μια μέθοδος ανοσοπροσδιορισμού που προορίζεται να χρησιμοποιηθεί ως επικουρικό μέσο ανίχνευσης περιπροθετικής αρθρικής λοίμωξης (PJI) στο αρθρικό υγρό ασθενών που παρουσιάζουν πόνο ή/και φλεγμονή σε τεχνητή άρθρωση. Η δοκιμασία πλευρικής ροής Synovasure PJI μετρά τις ανθρώπινες α-ντεφενσίνες 1-3 στο αρθρικό υγρό ατόμων που έχουν υποβληθεί σε ολική αρθροπλαστική. Οι α-ντεφενσίνες είναι αντιμικροβιακά πεπτίδια που απελευθερώνονται από ενεργοποιημένα ουδετερόφιλα ως απάντηση στη λοίμωξη. Τα αποτελέσματα της δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure PJI προορίζονται να χρησιμοποιηθούν σε συνδυασμό με άλλα κλινικά και διαγνωστικά ευρήματα, ως βοήθημα στη διάγνωση της λοίμωξης. Η δοκιμασία πλευρικής ροής Synovasure PJI προορίζεται να χρησιμοποιηθεί για να διαπιστωθεί αν υπάρχει λοίμωξη στο αρθρικό υγρό. Δεν προορίζεται για την αναγνώριση συγκεκριμένου τύπου λοίμωξης ή για τη διαπίστωση της προέλευσης ή της βαρύτητας μιας λοίμωξης. Προορίζεται να χρησιμοποιηθεί προκειμένου να παρέχει στον ιατρό συγκεκριμένο θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα ως προς την παρουσία των α-ντεφενσινών 1-3 στο αρθρικό υγρό ως αποτέλεσμα της λοίμωξης. ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ Η δοκιμασία πλευρικής ροής Synovasure PJI είναι μια μέθοδος ανοσοπροσδιορισμού για την ανίχνευση των επιπέδων α-ντεφενσίνης στο αρθρικό υγρό ασθενών με ενδεχόμενη περιπροθετική αρθρική λοίμωξη. Το σύστημα δοκιμασίας αποτελείται από μια κασέτα μίας χρήσης, ένα φιαλίδιο προμετρημένου όγκου με ρυθμιστικό διάλυμα αραίωσης, ένα σωληνάριο Microsafe μίας χρήσης και ένα δοχείο δείγματος. Κάθε κασέτα περιέχει μια ταινία αντιδραστηρίων με όλα τα απαραίτητα συστατικά για τον προσδιορισμό. Η αραίωση πραγματοποιείται με τη συλλογή αρθρικού υγρού στο σωληνάριο μίας χρήσης Microsafe και την προσθήκη του δείγματος στο προμετρημένο ρυθμιστικό διάλυμα αραίωσης. Για να ξεκινήσει η διαδικασία δοκιμασίας προστίθενται τρεις (3) σταγόνες του αραιωμένου δείγματος στην κασέτα δοκιμασίας. Το κυτταρικό υλικό αφαιρείται από την πρώτη επιφάνεια. Στη συνέχεια το διάλυμα μετακινείται στη ρυθμιστική επιφάνεια και αναμιγνύεται με το σύζευγμα σωματιδίων χρυσού το οποίο έχει σημανθεί με ένα αντίσωμα έναντι της ντεφενσίνης. Το μίγμα της δοκιμασίας έπειτα διασχίζει τη γραμμή δοκιμασίας και τη γραμμή μάρτυρα. Θα σχηματιστεί μια γραμμή αποτελέσματος δοκιμασίας () αν το επίπεδο α-ντεφενσίνης στο δείγμα είναι μεγαλύτερο από την οριακή συγκέντρωση. Θα σχηματιστεί μια γραμμή μάρτυρα («C») που θα επιβεβαιώνει ότι το διάλυμα έρρευσε σωστά κατά μήκος της συσκευής. Τα αποτελέσματα διαβάζονται μετά από δέκα (10) λεπτά. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ Για διαγνωστική χρήση in vitro Πρέπει να διαβάσετε ολόκληρο αυτό το ένθετο συσκευασίας πριν χρησιμοποιήσετε το προϊόν. Σε περίπτωση μη τήρησης των παρεχόμενων οδηγιών, μπορεί να προκύψουν ανακριβή αποτελέσματα. Αυτό το κιτ σχεδιάστηκε για χρήση μόνο με αρθρικό υγρό. Η χρήση αυτού του κιτ δοκιμασίας με άλλον τύπο δείγματος ενδέχεται να οδηγήσει σε ανακριβή αποτελέσματα. Η χρήση αλλοιωμένου αρθρικού υγρού, όπως υγρό που έχει ληφθεί με πλύση με αλατούχο διάλυμα ή υγρό που έχει συλλεχθεί αμέσως μετά από ένεση, θα επηρεάσει την απόδοση της δοκιμασίας. Σελίδα 1 από 5

Αυτή η δοκιμασία πρέπει να χρησιμοποιείται μόνο σε ασθενείς που φέρουν πρόθεση ολικής αρθροπλαστικής. Αυτή η δοκιμασία δεν προορίζεται να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της κατάλληλης χρονικής στιγμής για επανεμφύτευση σε διαδικασίες δύο σταδίων. Αυτή η δοκιμασία θα πρέπει να εκτελείται σε θερμοκρασία δωματίου (15-30 C) και σε καμία περίπτωση έξω από αυτό το εύρος. Η συνιστώμενη θερμοκρασία φύλαξης του κιτ δοκιμασίας είναι 2-30 C. Μην εναλλάσσετε τις συσκευές ή τα συστατικά της δοκιμασίας με άλλες συσκευές ή συστατικά από κιτ με διαφορετικούς αριθμούς παρτίδας. ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ Προφυλάξεις ασφάλειας Να χειρίζεστε τα δείγματα και τα υλικά ως ικανά να μεταδώσουν μολυσματικούς παράγοντες. Φοράτε γάντια μίας χρήσης όταν χειρίζεστε και εξετάζετε τα δείγματα. Αλλάζετε γάντια και πλένετε τα χέρια σας σχολαστικά μετά την εκτέλεση κάθε δοκιμασίας. Απορρίψτε όλα τα δείγματα και τα υλικά που χρησιμοποιήθηκαν για την εκτέλεση της δοκιμασίας, ως υλικά που περιέχουν μολυσματικούς παράγοντες. Η απόρριψη όλων των δειγμάτων και υλικών θα πρέπει να συμμορφώνεται με τις τοπικές, περιφερειακές και εθνικές απαιτήσεις απόρριψης αποβλήτων. Προφυλάξεις χειρισμού της συσκευής Χρησιμοποιήστε όλα τα συστατικά του κιτ δοκιμασίας μόνο μία φορά και απορρίψτε τα καταλλήλως. Μην επαναχρησιμοποιείτε κανένα από τα συστατικά της δοκιμασίας. Να ελέγχετε πάντοτε την ημερομηνία λήξης πριν από την εκτέλεση της δοκιμασίας. Μη χρησιμοποιείτε κιτ δοκιμασίας των οποίων η αναγραφόμενη στο κουτί ημερομηνία λήξης έχει παρέλθει. Επιθεωρείτε επίσης τα συστατικά του κιτ δοκιμασίας για τυχόν ζημιά. Αν κάποιο από τα συστατικά έχει υποστεί ζημιά, απορρίψτε το κιτ και προμηθευτείτε ένα νέο κιτ δοκιμασίας για την εκτέλεση της δοκιμασίας. ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ ΚΑΙ ΥΛΙΚΑ Κιτ δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure PJI (5 τμχ) ΚΩΔ 00-8888-125-05 Φύλαξη: 2 έως 30 C. Χρησιμοποιήστε έως την υποδεικνυόμενη ημερομηνία λήξης. Μίας χρήσης. Μην επαναχρησιμοποιείτε. Συσκευή δοκιμασίας (ΚΩΔ P50023), ποσότητα 5 (περιέχει μια επιστρωμένη μεμβράνη με γραμμή δοκιμασίας με αντίσωμα έναντι της α-ντεφενσίνης και γραμμή μάρτυρα με αντίσωμα έναντι των ανοσοσφαιρινών ποντικού, επιφάνεια σφαιριδίων χρυσού επικαλυμμένων με αντίσωμα έναντι της α-ντεφενσίνης, επιφάνεια ρύθμισης δείγματος και επιφάνεια αφαίρεσης κυτταρικού υλικού, μέσα σε προστατευτικό πλαστικό περίβλημα σφραγισμένο σε θήκη με ξηραντικό μέσο) Διάταξη προετοιμασίας δειγμάτων (ΚΩΔ P50024), ποσότητα 5 (Σφραγισμένη θήκη που περιέχει προγεμισμένη σταγονομετρική φιάλη με ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών (ΚΩΔ P50025), σωληνάριο Microsafe μίας χρήσης(περιλαμβάνεται ανταλλακτικό), δοχείο δείγματος. Οδηγίες χρήσης ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ Χρονόμετρο ΠΡΟΣΘΕΤΑ ΥΛΙΚΑ Κιτ μαρτύρων δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure (2 τμχ) ΚΩΔ 00-8888-125-02 Διαθέσιμο ως συμπλήρωμα του κιτ δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure Σελίδα 2 από 5

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΧΡΗΣΗΣ ΤΟΥ ΚΙΤ ΔΟΚΙΜΑΣΙΑΣ ΠΛΕΥΡΙΚΗΣ ΡΟΗΣ SYNOVASURE PJI 1. Αραίωση: Ανοίξτε τη διάταξη προετοιμασίας δειγμάτων. Αφαιρέστε το μοβ πώμα από τη σταγονομετρική φιάλη και αφήστε το στην άκρη. Χρησιμοποιήστε το σωληνάριο Microsafe για να συλλέξετε αρθρικό υγρό για αραίωση. Κρατήστε το σωληνάριο Microsafe οριζόντια και αγγίξτε το δείγμα αρθρικού υγρού με το ρύγχος του σωληναρίου Microsafe. Το δείγμα θα αναρροφηθεί αυτομάτως έως τη γραμμή πλήρωσης μέσω του τριχοειδούς φαινομένου και έπειτα θα σταματήσει. ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Κατά τη δειγματοληψία μην καλύπτετε τα ανοίγματα αερισμού και μην πιέζετε το σωληνάριο. Αφήστε το υγρό να φτάσει στη γραμμή πλήρωσης πριν συνεχίσετε. Αν δεν μπορεί να ληφθεί αρθρικό υγρό από τον περιέκτη όπου βρίσκεται το αρθρικό υγρό, μεταφέρετε μια μικρή ποσότητα του υγρού στο παρεχόμενο δοχείο δείγματος. Τα δείγματα αρθρικού υγρού με υψηλό ιξώδες ίσως χρειάζονται περισσότερο χρόνο για να συλλεχθούν. Αφού ληφθεί το αρθρικό υγρό, μεταφέρετέ το στην προγεμισμένη σταγονομετρική φιάλη. Εκπλύνετε το σωληνάριο Microsafe στην προγεμισμένη σταγονομετρική φιάλη πιέζοντας το πουάρ στο άκρο του σωληναρίου Microsafe πέντε (5) φορές, έτσι ώστε να εκρεύσει το παχύρρευστο αρθρικό υγρό. Τοποθετήστε ξανά το πώμα στη σταγονομετρική φιάλη και αναμείξτε αναστρέφοντας αργά. 2. Αφαιρέστε τη συσκευή δοκιμασίας από την αλουμινένια θήκη, ακριβώς πριν από τη χρήση. Μη χρησιμοποιείτε αν η αλουμινένια θήκη δεν είναι άθικτη. 3. Τοποθετήστε τη συσκευή σε μια επίπεδη επιφάνεια. Αφαιρέστε το διάφανο πώμα από τη σταγονομετρική φιάλη και αφήστε τρεις (3) σταγόνες αραιωμένου δείγματος αρθρικού υγρού να πέσουν ελεύθερα μέσα στο μικροβύθισμα δείγματος της συσκευής δοκιμασίας. Για καλύτερα αποτελέσματα, κρατήστε τη σταγονομετρική φιάλη σε κατακόρυφη θέση ενώ μεταφέρετε το δείγμα υγρού στη συσκευή δοκιμασίας. Κατά την επεξεργασία η συσκευή πρέπει να παραμένει σε οριζόντια θέση. 4. Αφήστε τη δοκιμασία να προχωρήσει χωρίς να διαταράξετε τη θέση της συσκευής για δέκα (10) λεπτά και κατόπιν ερμηνεύστε τα αποτελέσματα σύμφωνα με την περιγραφή στην ενότητα «Ερμηνεία αποτελεσμάτων». Μη διαβάσετε τα αποτελέσματα μετά την πάροδο είκοσι (20) λεπτών. Καθώς το φόντο του παραθύρου ένδειξης καθαρίζει, εμφανίζεται μια ροδοκόκκινη γραμμή μάρτυρα. Η γραμμή μάρτυρα [C] είναι η επάνω γραμμή στον αυλό δοκιμασίας. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΧΡΗΣΗΣ ΤΟΥ ΚΙΤ ΜΑΡΤΥΡΩΝ ΔΟΚΙΜΑΣΙΑΣ ΠΛΕΥΡΙΚΗΣ ΡΟΗΣ SYNOVASURE 1. Προετοιμάστε τους μάρτυρες σύμφωνα με τις οδηγίες χρήσης που παρέχονται στο κιτ μαρτύρων δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure. 2. Αναλύστε τους μάρτυρες όπως και τα κλινικά δείγματα, σύμφωνα με τις παραπάνω οδηγίες για το κιτ δοκιμασίας πλευρικής ροής Synovasure PJI. ΕΣΩΤΕΡΙΚΟΣ ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ: Κάθε συσκευή δοκιμασίας περιλαμβάνει μια γραμμή μάρτυρα διαδικασίας («C»), που υποδεικνύει ότι το υγρό ρέει σωστά μέσα στη συσκευή. ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Σημείωση: Η α-ντεφενσίνη αναπαρίσταται με το σύμβολο στην κασέτα. Η ένταση του χρώματος των γραμμών μάρτυρα και αποτελέσματος στη συσκευή μπορεί να διαφέρει. Κάθε ροδοκόκκινη γραμμή, ανεξάρτητα από την ένταση του χρώματος ή το μέγεθος, θεωρείται έγκυρη. Μην ερμηνεύετε τα αποτελέσματα μετά την πάροδο είκοσι (20) λεπτών. : Πριν διαβάσετε τις γραμμές αποτελεσμάτων της δοκιμασίας, βεβαιωθείτε ότι έχει σχηματιστεί η γραμμή μάρτυρα της συσκευής, με την ένδειξη «C». Αν η γραμμή μάρτυρα της συσκευής δεν εμφανίζεται, η δοκιμασία δεν είναι έγκυρη και τα αποτελέσματά της δεν πρέπει να χρησιμοποιηθούν. Η δοκιμασία θα πρέπει να επαναληφθεί με μια νέα συσκευή. Αρνητικό: Ένα ΑΡΝΗΤΙΚΟ ως προς την α-ντεφενσίνη αποτέλεσμα υποδηλώνεται με μια ροδοκόκκινη γραμμή μάρτυρα ΜΟΝΟ στη συσκευή, χωρίς γραμμή αποτελέσματος μετά από δέκα (10) λεπτά. Θετικό (μη αρνητικό): Ένα ΘΕΤΙΚΟ ως προς την α-ντεφενσίνη αποτέλεσμα υποδηλώνεται με μια ροδοκόκκινη γραμμή μάρτυρα στη συσκευή ΚΑΙ μια ροδοκόκκινη γραμμή αποτελέσματος. Σελίδα 3 από 5

Παραδείγματα αποτελεσμάτων Μη έγκυρη δοκιμασία - Αρνητικό + Θετικό Γραμμή δοκιμασίας ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ ΤΩΝ Α-ΝΤΕΦΕΝΣΙΝΩΝ Η κλινική απόδοση του βιολογικού δείκτη α-ντεφενσίνη για τη διάγνωση της περιπροθετικής αρθρικής λοίμωξης διαπιστώθηκε μέσω μιας ανάλυσης ELISA για τον προσδιορισμό των α-ντεφενσινών σε μια μελέτη 158 ασθενών, όπου εφαρμόστηκαν τα ακόλουθα κριτήρια ένταξης: (1) Ολική αρθροπλαστική ισχίου ή γόνατος/προσωρινό εμφύτευμα, με εκτίμηση για αναθεωρητική αρθροπλαστική ισχίου ή γόνατος. (2) Επαρκή κλινικά στοιχεία για την εφαρμογή των κριτηρίων κατά MSIS για την περιπροθετική αρθρική λοίμωξη. (3) Επαρκής όγκος αρθρικού υγρού για τις μεθόδους της μελέτης. Στη μελέτη αυτή συμπεριλήφθηκαν ασθενείς που έλαβαν αντιβιοτικά πριν από τη δειγματοληψία, ασθενείς στους οποίους είχε διαγνωστεί συστηματική φλεγμονώδης νόσος, και ασθενείς με λοίμωξη μακριά από την άρθρωση. Με τη χρήση της α-ντεφενσίνης τέθηκε η σωστή διάγνωση σε 152 από τις 158 αρθροπλαστικές, με συνολική ειδικότητα 95,8% (ΔΕ 95%: 90,5-98,6%) και ευαισθησία 97,4% (ΔΕ 95%: 86.1-99.6%). Ακόμη, βάσει της α-ντεφενσίνης προσδιορίστηκαν σωστά λοιμώξεις αρνητικές στην καλλιέργεια, που αντιστοιχούσαν περίπου στο 36% των ασθενών με περιπροθετική αρθρική λοίμωξη στην παρούσα μελέτη. Χαρακτηριστικά απόδοσης της πλευρικής ροής Η απόδοση της πλευρικής ροής αξιολογήθηκε έναντι της εργαστηριακής εξέτασης. Η θετική συμφωνία ήταν 100% (59/59) και η αρνητική συμφωνία ήταν 95,6% (175/183). Πιστότητα Δεξαμενές πιστότητας (4 δεξαμενές: χαμηλή αρνητική τιμή, υψηλή αρνητική τιμή, χαμηλή θετική τιμή και υψηλή θετική τιμή) αναλύθηκαν εις διπλούν 2 φορές/ημέρα επί 5 ημέρες ώστε να υπολογιστεί η πιστότητα της μεθόδου. Το ποσοστό (%) ορθών αποτελεσμάτων ήταν 100, 97,5, 95 και 100 αντίστοιχα. Παρεμβαλλόμενες ουσίες Η επίδραση της αιμοσφαιρίνης, των τριγλυκεριδίων και της χολερυθρίνης (συζευγμένης και μη συζευγμένης) εξετάστηκε σε δείγμα αρνητικό και σε ένα δείγμα θετικό στις α-ντεφενσίνες 1-3, με βάση τις διαδικασίες που περιγράφονται στην οδηγία πρωτοκόλλου EP7-A2 3 κατά CLSI. Για κάθε ουσία, η μέγιστη συγκέντρωση που θεωρήθηκε ότι δεν επηρεάζει την κλινική ερμηνεία των αποτελεσμάτων είναι η εξής: αιμοσφαιρίνη 0,5 g/dl, τριγλυκερίδια 600 mg/dl, χολερυθρίνη συζευγμένη 5 mg/dl και χολερυθρίνη μη συζευγμένη 15 mg/dl. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με το προϊόν, επισκεφθείτε τη διεύθυνση www.cddiagnostics.com Σελίδα 4 από 5

ΠΑΡΑΠΟΜΠΕΣ 1. Deirmengian C, Kardos K, Kilmartin P, Cameron A, Schiller K, Parvizi J. Diagnosing Periprosthetic Joint Infection: Has the Era of the Biomarker Arrived? Clin Orthop Relat Res. 2014 Mar 4. [Epub ahead of print] 2. Parvizi, J., Zmistowski, B., Della Valle, C., Bauer, T. W., Malizos, K. N., Alavi, A., Bedair, H., et al. (2013). Diagnosis of Periprosthetic Joint Infection. The Journal of arthroplasty p200-220. 3. CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline Second Edition. CLSI document EP7-A2 (ISBN 1-56238-584-4). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA, 2005. ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΣΥΜΒΟΛΩΝ CD Diagnostics, Inc. 650 Naamans Road Suite 100 Claymont, DE 19703 ΗΠΑ Obelis S.A. Bd Général Wahis 53 1030 Brussels, Βέλγιο Σελίδα 5 από 5