QUANTA Flash GBM 701143 Για In Vitro διαγνωστική χρήση ΜΟΝΟ ΠΡΟΣ ΕΞΑΓΩΓΗ. ΔΕΝ ΔΙΑΤΙΘΕΤΑΙ ΠΡΟΣ ΠΩΛΗΣΗ ΣΤΙΣ ΗΝΩΜΕΝΕΣ ΠΟΛΙΤΕΙΕΣ Σκοπός χρήσης Το QUANTA Flash GBM αποτελεί μια ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) για τον ημιποσοτικό εντοπισμό αυτοαντισωμάτων IgG έναντι της σπειραματικής βασικής μεμβράνης (GBM) στον ανθρώπινο ορό. Αυτή η δοκιμασία προορίζεται για χρήση σε συνδυασμό με κλινικά ευρήματα για τη διάγνωση του συνδρόμου Goodpasture. Περίληψη και επεξήγηση της δοκιμασίας Τα αυτoαντισώματα αντι-gbm θεωρούνται σημαντικά για την παθογένεια και τη διάγνωση της ταχέως εξελισσόμενης σπειραματονεφρίτιδας του συνδρόμου Goodpasture (GPS) 1. Πειράματα παθητικής μεταφοράς έχουν καταδείξει ότι τα αντισώματα αντι-gbm μπορούν να αναπαράγουν τη βλάβη του οργάνου-στόχου. Εάν δεν αντιμετωπιστεί, το σύνδρομο Goodpasture (GPS) μπορεί να ακολουθήσει μια εκρηκτική πορεία με ταχεία επιδείνωση της νεφρικής λειτουργίας, συνοδευόμενη μερικές φορές από σοβαρή αιμορραγία των πνευμόνων. Η έγκαιρη αναγνώριση αυτών των ασθενών είναι ιδιαίτερα σημαντική όσον αφορά στη διαχείριση και την πρόγνωση, καθώς η ανοσοθεραπεία και η πλασμαφαίρεση μπορούν να βελτιώσουν το αποτέλεσμα εάν εφαρμοστούν σε επαρκώς πρώιμο στάδιο 2. Στις αναλύσεις για την κυκλοφορία των αντισωμάτων αντι-gbm περιλαμβάνονται η ανάλυση έμμεσου ανοσοφθορισμού, οι αναλύσεις RIA, ELISA καθώς και οι πολλαπλές αναλύσεις 3,4. Η σπειραματική βασική μεμβράνη αποτελείται από πολλές διαφορετικές πρωτεΐνες. Έχει προσδιοριστεί ότι τα περισσότερα αυτοαντισώματα ασθενών που πάσχουν από το σύνδρομο GPS αντιδρούν με την περιοχή χωρίς κολλαγόνο (NC1) της αλυσίδας κολλαγόνου 3(IV). Έχει αποδειχτεί ότι οι αναλύσεις ELISA που χρησιμοποιούν ειδικό αντιγόνο 3(IV) παρουσιάζουν υψηλή ευαισθησία και ειδικότητα για το σύνδρομο GPS 1,4. Τα αντισώματα αντι-gbm εντοπίζονται σπάνια σε υγιή άτομα και οι ασθενείς που υποβάλλονται σε θεραπεία ή βρίσκονται σε ύφεση τείνουν να έχουν χαμηλότερα επίπεδα αντισωμάτων. Οι ασθενείς με σύνδρομο GPS μπορεί να εκδηλώνουν κλινικά χαρακτηριστικά που υποδεικνύουν ορισμένους τύπους αυτοάνοσης αγγειοπάθειας. Για το λόγο αυτό, προτείνεται να συμπεριλαμβάνεται η ανίχνευση των αυτοαντισωμάτων αντι-gbm μαζί με την ανάλυση των αντι-ουδετερόφιλων κυτοπλασματικών αντισωμάτων (ANCA) ως μέρος της οροδιαγνωστικής ανάλυσης ασθενών με υποψία νεφροπνευμονικού συνδρόμου. Με βάση την ταχέως εξελισσόμενη φύση του συνδρόμου GPS, η έγκαιρη ανίχνευση των αντισωμάτων αντι-gbm έχει μεγάλη σημασία για τη διάγνωση και τη θεραπεία των ασθενών 2,3. Αρχές της διαδικασίας Η αμιγώς κεκαθαρμένη GBM επικαλύπτει παραμαγνητικούς κόμβους, οι οποίοι αποθηκεύονται στο φυσίγγιο του αντιδραστηρίου υπό συνθήκες οι οποίες συντηρούν το αντιγόνο στην αντιδραστική του κατάσταση. Όταν το φυσίγγιο της ανάλυσης είναι έτοιμο να χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά, πρέπει να αντιστρέψετε ολόκληρο το φυσίγγιο πολλές φορές για να αναμιχθούν σωστά τα αντιδραστήρια. Στη συνέχεια, το φυσίγγιο του αντιδραστηρίου τοποθετείται στη συσκευή BIO-FLASH. Ένα δείγμα ορού ασθενούς προαραιώνεται από τη συσκευή με χρήση του διαλύματος πλύσης συστήματος που προστίθεται σε μια πλαστική κυψελίδα μίας χρήσης. Μικρές ποσότητες από τον αραιωμένο ορό ασθενούς, οι κόμβοι με GBM καθώς και το ρυθμιστικό διάλυμα της ανάλυσης τοποθετούνται μαζί σε μια δεύτερη κυψελίδα και αναμειγνύονται. Αυτή η κυψελίδα επωάζεται στους 37 C. Στη συνέχεια, οι κόμβοι υπόκεινται σε μαγνητισμό και πλύσεις αρκετές φορές. Κατόπιν, στην κυψελίδα προστίθεται αντίσωμα συζευγμένο με ισολουμινόλη και επωάζεται στους 37 C. Οι κόμβοι 1
υπόκεινται ξανά σε μαγνητισμό και πλύσεις αρκετές φορές. Το σύζευγμα ισολουμινόλης προκαλεί μια φωταυγή αντίδραση, όταν τα αντιδραστήρια ("Ενεργοποιητές") προστίθενται στην κυψελίδα. Το φως που παράγεται από αυτήν την αντίδραση μετράται ως Σχετικές μονάδες φωτός (RLU) από το οπτικό σύστημα BIO-FLASH. Οι μονάδες RLU είναι ανάλογες με την ποσότητα του δεσμευμένου συζεύγματος ισολουμινόλης, η οποία, με τη σειρά της, είναι ανάλογη με την ποσότητα των αντισωμάτων αντι-gbm που δεσμεύονται στους κόμβους με GBM. Η ανάλυση QUANTA Flash GBM χρησιμοποιεί μια προκαθορισμένη Κύρια καμπύλη ειδική για την παρτίδα, η οποία αποστέλλεται στη συσκευή μέσω του γραμμικού κώδικα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Με βάση τα αποτελέσματα που προκύπτουν από τη χρήση δύο ορών βαθμονόμησης, δημιουργείται μια ειδική Καμπύλη εργασίας για τη συσκευή, η οποία χρησιμοποιείται για τον υπολογισμό των μονάδων χημιφωταύγειας (CU) που προκύπτουν από τις μονάδες RLU που λαμβάνονται για κάθε ασθενή. Αντιδραστήρια 1. Το φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash GBM περιέχει τα παρακάτω αντιδραστήρια: α. Παραμαγνητικοί κόμβοι επικαλυμμένοι με GBM σε υγρό που περιέχει ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικό. β. Ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης χρώματος ροζ, που περιέχει Tris ρυθμιστικό αλατούχο διάλυμα, Tween 20, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά. γ. Ανιχνευτής IgG αντισώματα αντι-ανθρώπινης IgG σημασμένα με ισολουμινόλη, που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικό. Προειδοποιήσεις 1. Το ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης περιέχει μια χημική ουσία (0,02 % χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης με άφθονο νερό, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 4. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων. Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Αυτή η ανάλυση προορίζεται για χρήση μόνο με τη συσκευή BIO-FLASH. 3. Αυτό το φυσίγγιο αντιδραστηρίου πρέπει να φυλάσσεται, μετά από το άνοιγμά του, στην περιστρεφόμενη θήκη αντιδραστηρίων της συσκευής. Πρέπει να ληφθεί μέριμνα, ώστε να μη χυθούν τα αντιδραστήρια, όταν το φυσίγγιο αντιδραστηρίου τοποθετηθεί για πρώτη φορά στη συσκευή. 4. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χρήσης της συσκευής BIO-FLASH. 2
Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τα φυσίγγια αντιδραστηρίου που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Τα αντιδραστήρια είναι σταθερά για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τα αποθηκεύετε και τα χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Τα ανοιγμένα φυσίγγια αντιδραστηρίου πρέπει να αποθηκεύονται επάνω στη συσκευή και είναι σταθερά για 42 ημέρες. Μετά από αυτό το χρονικό διάστημα πρέπει να απορρίπτονται. Το λογισμικό BIO-FLASH παρακολουθεί τις ημερομηνίες λήξης των τοποθετημένων φυσιγγίων, των καμπυλών βαθμονόμησης καθώς και των παρτίδων των φυσιγγίων αντιδραστηρίου. Συλλογή δείγματος Η διαδικασία πρέπει να εκτελείται με δείγματα ορού. Δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται δείγματα που έχουν επιμολυνθεί με μικρόβια, έχουν υποστεί θερμική επεξεργασία ή περιέχουν ορατά σωματίδια. Δεν πρέπει να χρησιμοποιείται έντονα αιμολυμένος ή λιπαιμικός ορός. Μετά από τη συλλογή του δείγματος ο ορός θα πρέπει να διαχωρίζεται άμεσα από το ολικό αίμα. Το Έγγραφο CLSI H18-A3 προτείνει τις παρακάτω συνθήκες συντήρησης και αποθήκευσης των δειγμάτων: 1) Τα δείγματα πρέπει να διατηρούνται σε θερμοκρασία δωματίου όχι περισσότερο από 8 ώρες. 2) Εάν η ανάλυση δεν ολοκληρωθεί μέσα σε 8 ώρες, καταψύξτε το δείγμα στους 2-8 C. 3) Εάν η ανάλυση δεν ολοκληρωθεί μέσα σε 48 ώρες ή απαιτείται η αποστολή του δείγματος, καταψύξτε στους -20 C ή σε χαμηλότερη θερμοκρασία. Τα κατεψυγμένα δείγματα πρέπει να αναμιχθούν καλά μετά την απόψυξη και πριν από την δοκιμασία. Διαδικασία Υλικά που παρέχονται 1 Φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash GBM Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται Συσκευή BIO-FLASH συνδεδεμένη με υπολογιστή Δοχείο πλύσης συστήματος BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: 3000-8205) Ενεργοποιητές BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: 3000-8204) Κυψελίδες BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: 3000-8206) Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash GBM (Αρ. προϊόντος: 701141) Οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM (Αρ. προϊόντος: 701142) 3
Χρήση του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH 1. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης που παρέχεται με το σύστημα BIO- FLASH. Για περαιτέρω πληροφορίες και για αντιμετώπιση των προβλημάτων που προκύπτουν από τη χρήση αυτής της ανάλυσης, επικοινωνήστε με το τμήμα τεχνικής υποστήριξης της INOVA Diagnostics, Inc. στη διεύθυνση ή τον αριθμό τηλεφώνου που αναγράφεται στο τέλος του παρόντος Ένθετου φύλλου οδηγιών. 2. Για να εκκενώσετε το δοχείο στερεών αποβλήτων, ανοίξτε το συρτάρι αποβλήτων. Αφαιρέστε το δοχείο στερεών αποβλήτων και απορρίψτε τις χρησιμοποιημένες κυψελίδες κατάλληλα. Τοποθετήστε ξανά το δοχείο στερεών αποβλήτων στη θέση του, κλείστε το συρτάρι αποβλήτων και κάντε κλικ στην επιλογή Yes στο παράθυρο Empty Waste Drawer. 3. Για να αντικαταστήσετε τους ενεργοποιητές, κάντε κλικ στο κουμπί Bulks Inventory F9 (επάνω δεξιά). α. Στην οθόνη Inventory Bulks κάντε κλικ στο κουμπί Triggers που βρίσκεται στα αριστερά. Θα αναδυθεί ένα νέο παράθυρο με τον τίτλο Add Triggers Remove old bottles. β. Ανοίξτε και αφαιρέστε το συρτάρι αποβλήτων της συσκευής BIO-FLASH. Απορρίψτε τυχόν κυψελίδες που βρίσκονται στο συρτάρι ξηρών αποβλήτων. Κάντε κλικ στο κουμπί Yes στο παράθυρο Εmpty Waste Drawer. Αφαιρέστε τις φιάλες ενεργοποιητών από τις βάσεις τους και κάντε κλικ στο κουμπί Next. Ξεβιδώστε τις παλιές φιάλες ενεργοποιητών από τα πώματά τους και αντικαταστήστε τις με νέους ενεργοποιητές. Φροντίστε να ξεβιδώνετε μία φιάλη κάθε φορά και να τις αντιστοιχείτε με τα πώματα ακολουθώντας τη χρωματική κωδικοποίησή τους (τη λευκή φιάλη στο λευκό πώμα και την κόκκινη φιάλη στο κόκκινη πώμα). γ. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο νέο παράθυρο Add Triggers Add Trigger 2 bottle. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, τοποθετήστε τον Ενεργοποιητή 2 στη λευκή βάση. Κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. δ. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο παράθυρο Add Triggers Add Trigger 1 bottle. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, τοποθετήστε τον Ενεργοποιητή 1 στην κόκκινη βάση. Κάντε κλικ στο κουμπί Finish. Τοποθετήστε το συρτάρι αποβλήτων στη θέση του και κλείστε το. 4. Για να αντικαταστήσετε το Δοχείο πλύσης συστήματος, κάντε κλικ στο κουμπί Bulks Inventory F9 (στην επάνω δεξιά γωνία). Στην οθόνη Inventory Bulks κάντε κλικ στο κουμπί Sys. Rinse. Στο νέο παράθυρο Add System Rinse Remove bottles, κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο νέο παράθυρο Add System Rinse Add bottle. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, κάντε κλικ στο κουμπί Finish, εφόσον χρειάζεται. 5. Για να εκκενώσετε το Δοχείο υγρών αποβλήτων, από την οθόνη Inventory Bulks κάντε κλικ στο κουμπί Fluid Waste. Εξαγάγετε και απορρίψτε τα υγρά απόβλητα. Κάντε κλικ στο κουμπί Next. Όταν αντικαταστήσετε την κενή φιάλη, κάντε κλικ στο κουμπί Finish. 4
Μέθοδος Προετοιμασία φυσιγγίου αντιδραστηρίου Την πρώτη φορά που πρόκειται να χρησιμοποιηθεί το φυσίγγιο αντιδραστηρίου, πρέπει να ακολουθήσετε τα παρακάτω βήματα για να εγκαταστήσετε το φυσίγγιο με ακρίβεια στη συσκευή BIO- FLASH. Σημείωση: Μην χρησιμοποιήσετε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου, εάν παρατηρήσετε οποιαδήποτε σημάδια φθοράς. Φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash GBM: Τα μικροσωματίδια κατακάθονται κατά την αποστολή και αποθήκευση και απαιτείται ανάμειξη για την επαναιώρησή τους. 1. Την πρώτη φορά που θα χρησιμοποιηθεί το φυσίγγιο, αναποδογυρίστε απαλά το φυσίγγιο 30 φορές, αποφεύγοντας τη δημιουργία αφρού. Ελέγξτε για την πλήρη επαναιώρηση των μικροσωματιδίων. Εάν η επαναιώρηση των μικροσωματιδίων δεν είναι πλήρης συνεχίστε να αναποδογυρίζετε το φυσίγγιο μέχρι την πλήρη επαναιώρηση των μικροσωματιδίων. Εάν τα μικροσωματίδια δεν επαναιωρηθούν, ΜΗ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΕΤΕ ΤΟ ΦΥΣΙΓΓΙΟ. 2. Όταν επαναιωρηθούν τα μικροσωματίδια, τοποθετήστε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σε μια σταθερή επιφάνεια για να αφαιρέσετε την κόκκινη γλωττίδα. Κρατήστε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σταθερά με το ένα χέρι. Με το άλλο χέρι, πιάστε σταθερά την κόκκινη γλωττίδα στο πίσω μέρος του φυσιγγίου αντιδραστηρίου και αφαιρέστε την τελείως. 3. Πιέστε τις δύο γλωττίδες στις πλευρές του καπακιού (γκρι τμήμα) και εφαρμόστε πίεση στο επάνω τμήμα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου μέχρι να κλειδώσει στη θέση του. Οι γλωττίδες δεν πρέπει να είναι ορατές πλέον. ΜΗΝ ΑΝΑΠΟΔΟΓΥΡΙΖΕΤΕ ΤΟ ΑΝΟΙΚΤΟ ΦΥΣΙΓΓΙΟ. 4. Τοποθετήστε προσεκτικά το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σε οποιαδήποτε ανοιχτή υποδοχή της περιστρεφόμενης θήκης αντιδραστηρίων της συσκευής BIO-FLASH. Μόλις τοποθετηθεί το φυσίγγιο στην περιστρεφόμενη θήκη αντιδραστηρίων, η συσκευή εκτελεί πρόσθετη περιοδική ανάμειξη των κόμβων. Βαθμονόμηση ανάλυσης 1. Κάθε νέα παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου πρέπει να βαθμονομείται προτού χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά και κάθε 75 ημέρες μετά από την πρώτη χρήση. Το λογισμικό δεν θα επιτρέψει τη χρήση μιας παρτίδας, εάν δεν πληρούνται αυτές οι απαιτήσεις. 2. Για αναλυτικές οδηγίες σχετικά με τη βαθμονόμηση του φυσιγγίου αντιδραστηρίου ανατρέξτε στην ενότητα με τίτλο QUANTA Flash GBM Οροί βαθμονόμησης 701141 στο παρόν Ένθετο φύλλο οδηγιών. 3. Μόλις επικυρωθεί η βαθμονόμηση, η παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου στην οποία πραγματοποιήθηκε η βαθμονόμηση είναι έτοιμη προς χρήση. 5
Προγραμματισμός και εξέταση δειγμάτων 1. Πιέστε το κουμπί Worklist που βρίσκεται στο επάνω μέρος της οθόνης και επιλέξτε την καρτέλα Racks στο κάτω μέρος. 2. Επιλέξτε τη ράβδο δειγμάτων που θέλετε να χρησιμοποιήσετε επισημαίνοντας τη ράβδο στην οθόνη ή σαρώνοντας το γραμμικό κώδικά της με τη φορητή συσκευή ανάγνωσης γραμμικού κώδικα. Σαρώστε ή πληκτρολογήστε το όνομα του δείγματος, επιλέξτε τον τύπο του δείγματος, τον τύπο του δοχείου (σωληνάριο/κύπελλο) και επιλέξτε την ανάλυση GBM από τον πίνακα αναλύσεων. Επαναλάβετε αυτά τα βήματα για όλα τα δείγματα. 3. Φορτώστε τα δείγματα στις επιλεγμένες θέσεις της ράβδου δειγμάτων και φορτώστε τη ράβδο στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής. 4. Εάν έχουν τοποθετηθεί όλα τα απαιτούμενα υλικά στη συσκευή, στο επάνω μέρος της οθόνης θα εμφανιστεί το εικονίδιο έναρξης με πράσινο χρώμα. Πιέστε το εικονίδιο έναρξης, για να ξεκινήσετε την εξέταση. Έλεγχος ποιότητας Οι οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM (πωλούνται χωριστά - Αρ. προϊόντος INOVA 701142) περιέχουν τόσο τους Θετικούς όσο και τους Αρνητικούς ορούς ελέγχου GBM. Για αναλυτικές οδηγίες σχετικά με τον τρόπο εισαγωγής της τιμής μονάδας και της τυπικής απόκλισης κάθε ορού ελέγχου στο λογισμικό καθώς και σχετικά με τον τρόπο χρήσης των ορών ελέγχου, ανατρέξτε στην ενότητα με τίτλο QU AN T A Flash GBM Οροί ελέγχου 701142 στο παρόν Ένθετο φύλλο οδηγιών. Συνιστάται η χρήση των ορών ελέγχου μία φορά κάθε ημέρα χρήσης της ανάλυσης. Ωστόσο, οι χρήστες πρέπει, επίσης, να λαμβάνουν υπόψη και τις απαιτήσεις των εθνικών/τοπικών κανονισμών. Υπολογισμός των αποτελεσμάτων Για κάθε νέα παρτίδα QUANTA Flash GBM δημιουργείται στην INOVA μια Κύρια καμπύλη έξι σημείων. Αυτή η λογιστική καμπύλη τεσσάρων παραμέτρων κωδικοποιείται στο γραμμικό κώδικα κάθε φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Μετά από τη βαθμονόμηση ενός φυσιγγίου αντιδραστηρίου, θα χρησιμοποιηθεί μια ειδική καμπύλη εργασίας για τη συσκευή, η οποία θα μετατρέψει τις μονάδες RLU σε CU. Η αντιδραστικότητα των αντισωμάτων σε σχέση με την GBM μπορεί, στη συνέχεια, να ταξινομηθεί σύμφωνα με τον παρακάτω πίνακα. Αντιδραστικότητα Μονάδες CU Αρνητική <20 Θετική 20 Η αντιδραστικότητα σε μονάδες CU σχετίζεται άμεσα με τον τίτλο του αυτοαντισώματος στο δείγμα του ασθενούς. Οι αυξήσεις και οι μειώσεις στις συγκεντρώσεις των αντισωμάτων του ασθενούς θα αντικατοπτρίζονται από μια αντίστοιχη άνοδο ή πτώση στις μονάδες CU, η οποία είναι ανάλογη με την ποσότητα των αντισωμάτων. Οι τιμές της ανάλυσης είναι άξιες αναφοράς, όταν κυμαίνονται μεταξύ 2,9 CU και 1437,8 CU. Εάν το αποτέλεσμα ενός δείγματος ασθενούς είναι μικρότερο από 2,9 CU, τότε το σύστημα BIO-FLASH θα το αναφέρει ως "<2,9 CU". Σε περίπτωση που το αποτέλεσμα είναι μικρότερο από 20 CU, θεωρείται αρνητικό αποτέλεσμα. Εάν το αποτέλεσμα ενός δείγματος ασθενούς είναι μεγαλύτερο από 1 437,8 CU, τότε το σύστημα BIO-FLASH θα το αναφέρει ως ">1437,8 CU". Αυτό θεωρείται θετικό αποτέλεσμα. Το λογισμικό BIO-FLASH διαθέτει την επιλογή "Αυτόματη επανεξέταση". Εάν επιλεγεί αυτή η ρύθμιση, η συσκευή θα επανεξετάσει αυτόματα τα δείγματα που φέρουν αποτέλεσμα >1 437,8 CU με περαιτέρω αραίωση με παράγοντα του 10 και θα υπολογίσει τις τρέχουσες μονάδες CU χρησιμοποιώντας αυτόν τον πρόσθετο παράγοντα αραίωσης. 6
Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Η ανάλυση QUANTA Flash είναι ικανή να ανιχνεύσει μικρές διαφορές σε πληθυσμούς ασθενών. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει το δικό του φυσιολογικό εύρος τιμών που θα βασίζεται στους δικούς του ελέγχους και στον πληθυσμό ασθενών σύμφωνα με τις δικές του καθορισμένες διαδικασίες. Συνιστάται η συμπερίληψη της παρακάτω δήλωσης στα αποτελέσματα που καταγράφονται από το εργαστήριο: "Τα παρακάτω αποτελέσματα λήφθηκαν με την ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας QUANTA Flash GBM της INOVA. Τα αποτελέσματα αυτά δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται εναλλάξ με τιμές που λήφθηκαν με μεθόδους ανάλυσης άλλων κατασκευαστών. Το ύψος των αναφερόμενων επιπέδων αντισωμάτων δεν είναι δυνατόν να συσχετίζεται πάντα με ένα τίτλο τελικού σημείου." Περιορισμοί της διαδικασίας 1. Δεν είναι όλοι οι ασθενείς που πάσχουν από το σύνδρομο Goodpasture θετικοί στα αντισώματα GBM. 2. Τα αποτελέσματα αυτής της ανάλυσης θα πρέπει να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με κλινικά ευρήματα και άλλες ορολογικές εξετάσεις. 3. Η αποτυχία της επαρκούς ανάμειξης των αντιδραστηρίων πριν από την πρώτη χρήση ενδέχεται να προκαλέσει εσφαλμένα αποτελέσματα. 4. Τα χαρακτηριστικά επιδόσεων αυτής της ανάλυσης δεν έχουν διαπιστωθεί για μεσοκυττάριες ουσίες εκτός του ορού. Αναμενόμενες Τιμές Για τον καθορισμό των αναμενόμενων τιμών αναλύθηκαν οροί από 400 φαινομενικά υγιείς αιμοδότες. Ο μέσος όρος ήταν 3,3 CU και το 95% των δειγμάτων υπολογίστηκε ως 5,1 CU. Σύγκριση μεθόδων με επιβεβαιωτική συσκευή Τα δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν για τη συγκριτική ανάλυση των μεθόδων περιλάμβαναν δείγματα από τις κλινικές μελέτες αξιοπιστίας, τα οποία βρίσκονταν εντός του εύρους των αξιοαναφερθέντων αποτελεσμάτων της ανάλυσης. Αυτά τα δείγματα υποβλήθηκαν στη δοκιμασία τόσο της ανάλυσης QUANTA Flash GBM όσο και της επιβεβαιωτικής ανάλυσης ELISA. Σύγκριση μεθόδων (N=120) QUANTA Flash GBM CIA GBM ELISA Θετικά Αρνητικά Σύνολο Ποσοστό συμφωνίας (Αξιοπιστία 95%) Θετικά 85 1* 86 Συμφωνία θετικών = 98,8% (93,7-100,0%) Αρνητικά 1* 33 34 Συμφωνία αρνητικών = 97,1% (84,7-99,9%) Σύνολο 86 34 120 Συμφωνία συνόλου = 98,3% (94,1-99,8%) * Και τα δύο ασύμβατα δείγματα προέρχονταν από ασθενείς που πάσχουν από το σύνδρομο Goodpasture (GS) 7
Κλινική Ευαισθησία και Ειδικότητα Η κλινική μελέτη αξιοπιστίας περιλάμβανε 90 δείγματα από ασθενείς με σύνδρομο Goodpasture (GPS), 50 από ασθενείς με ρευματοειδή αρθρίτιδα, 67 από ασθενείς με συστημικό ερυθηματώδη λύκο, 50 από ασθενείς με μη διαφοροποιημένη φλεγμονώδη εντερική νόσο, 50 από ασθενείς με συστηματική σκλήρυνση, 2 από ασθενείς με σκλήρυνση κατά πλάκας, 10 από ασθενείς με μη διαφοροποιημένη νόσο του συνδετικού ιστού, 10 από ασθενείς με ελκώδη κολίτιδα, 32 από φορείς του ιού της ηπατίτιδας B, 58 από φορείς του ιού της ηπατίτιδας C, 10 από φορείς του ιού ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας, 10 από ασθενείς με σύφιλη και 30 από ασθενείς που πάσχουν από άλλες ασθένειες. Επίσης, στη μελέτη περιλαμβάνονταν 400 δείγματα φυσιολογικών αιμοδοτών. Τα αποτελέσματα αυτής της δοκιμασίας παρουσιάζονται παρακάτω: Κλινική μελέτη (N=887) GPS Διάγνωση Χωρίς GPS Σύνολ ο Ανάλυση (αξιοπιστία 95%) Θετικά QUANTA Flash 86 3* 89 Ευαισθησία = 95,6% (89,0-98,8%) Αρνητικά 4 797 798 Ειδικότητα = 99,6% (98,9-99,9%) GBM Σύνολο 90 797 887 *Δύο δείγματα προέρχονταν από προφανώς υγιείς αιμοδότες και ένα δείγμα προερχόταν από ασθενή που πάσχει από τον ιό της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας (HIV). Ακρίβεια και επαναληψιμότητα Η ακρίβεια της ανάλυσης QUANTA Flash GBM αξιολογήθηκε με εξέταση 8 ασθενών σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP5-A2 και παρακάτω παρουσιάζονται τα δεδομένα που προέκυψαν: Εντός της εξέτασης Μεταξύ των εξετάσεων Κατά τη διάρκεια της ημέρας Σύνολο Δείγμα Αρ. Μέση τιμή TA % CV TA % CV TA % CV TA % CV Α 84 657,7 20,7 3,1% 17,1 2,6% 14,8 2,3% 30,7 4,7% B 84 401,5 11,2 2,8% 10,9 2,7% 6,4 1,6% 16,9 4,2% C 84 96,4 6,5 6,7% 0,0 0,0% 2,2 2,2% 6,6 6,9% D 84 49,8 1,6 3,3% 1,3 2,6% 0,6 1,3% 2,2 4,4% E 84 31,1 1,1 3,6% 0,6 1,9% 0,5 1,6% 1,4 4,4% F 84 34,0 0,9 2,6% 1,1 3,1% 0,7 2,0% 1,5 4,5% G 84 29,1 1,2 4,1% 0,8 2,9% 0,0 0,0% 1,4 4,9% H 84 15,5 0,5 3,1% 0,5 3,1% 0,3 1,7% 0,7 4,7% 8
Οριακές τιμές ανίχνευσης. Γραμμικό εύρος και εύρος άξιων αναφοράς τιμών Η χαμηλότερη τιμή ανίχνευσης αυτής της ανάλυσης σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP17-A είναι περίπου 851 RLU, τιμή η οποία είναι ισοδύναμη με 0,7 CU και είναι αρκετά χαμηλότερη από τη μικρότερη τιμή των άξιων αναφοράς τιμών. Η μέγιστη τιμή ανίχνευσης είναι περίπου 620 000 RLU, η οποία είναι περίπου 38% μεγαλύτερη από τη μεγαλύτερη τιμή των άξιων αναφοράς τιμών. Το συνολικό εύρος των άξιων αναφοράς τιμών, δηλαδή από 2,9 CU έως 1437,8 CU, είναι γραμμικό. Σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP6-A πραγματοποιήθηκε μελέτη γραμμικότητας, της οποίας τα δεδομένα συνοψίζονται παρακάτω: Δείγμα Εύρος δοκιμασίας Κλίση (95% CI (διάστημα Σημείο τομής άξονα Y (CU) εμπιστοσύνης) (95% CI) R² 1 1,7 έως 17,6 0,95 (0,91 έως 1,00) 0,02 (-0,29 έως 0,69) 0,99 2 3,5 έως 35,1 1,01 (0,97 έως 1,05) -0,277 (-1,14 έως 0,59) 0,99 3 4,7 έως 46,9 0,99 (0,95 έως 1,04) -0,202 (-1,35 έως 1,94) 0,99 4 10,6 έως 97,1 0,98 (0,95 έως 1,01) -1,252 (-2,89 έως 0,39) 1,00 5 60,9 έως 610,5 0,90 (0,96 έως 1,01) -0,666 (-9,89 έως 8,56) 1,00 6 155,9 έως 1558,6 0,93 (0,87 έως 1,00) 22,640 (-37,80 έως 83,08) 0,98 9
QUANTA Flash GBM 701141 Οροί βαθμονόμησης Για In Vitro διαγνωστική χρήση Σκοπός χρήσης Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash GBM προορίζονται για χρήση με την ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) QUANTA Flash GBM στη συσκευή BIO-FLASH. Κάθε ορός βαθμονόμησης ορίζει ένα σημείο αναφοράς για την καμπύλη εργασίας, η οποία χρησιμοποιείται για τον καθορισμό των Μονάδων χημιφωταύγειας (CU) κατά τη μέτρηση των αντισωμάτων GBM στον ορό. Περίληψη και βασικές αρχές της διαδικασίας Η ανάλυση QUANTA Flash GBM CIA χρησιμοποιεί μια προκαθορισμένη Κύρια καμπύλη ειδική για την παρτίδα, η οποία αποθηκεύεται στο γραμμικό κώδικα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash GBM έχουν σχεδιαστεί για να παράγουν μια ειδική Καμπύλη εργασίας για τη συσκευή από τις παραμέτρους της Κύριας καμπύλης, με κριτήριο τα χαρακτηριστικά της απόδοσης και την κλινική αξιολόγηση της ανάλυσης QUANTA Flash GBM CIA. Οι οροί βαθμονόμησης ελέγχονται σε πολλές συσκευές με πολλές παρτίδες αντιδραστηρίων πριν από την αξιολόγησή τους. Αντιδραστήρια 1. Ορός βαθμονόμησης 1 QUANTA Flash GBM: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού έναντι GBM, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,7 ml (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). 2. Ορός βαθμονόμησης 2 QUANTA Flash GBM: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού έναντι GBM, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,7 ml (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). Προειδοποιήσεις 1. Οι οροί βαθμονόμησης περιέχουν μια χημική ουσία (0,02 % χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης με άφθονο νερό, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Όλο το ανθρώπινο υλικό που χρησιμοποιήθηκε στην προετοιμασία των ορών ελέγχου για αυτό το προϊόν έχει εξεταστεί με εγκεκριμένες μεθόδους FDA και βρέθηκε αρνητικά στα αντισώματα HIV, HBsAg και HCV. Ωστόσο, καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να προσφέρει πλήρη διασφάλιση για την απουσία των HIV, HBV, HCV ή άλλων μολυσματικών παραγόντων. Για αυτόν το λόγο, οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash GBM πρέπει να τυγχάνουν της ίδιας μεταχείρισης με ένα πιθανώς μολυσματικό προϊόν. 5 4. Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό, όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 10
5. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων. Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash GBM προορίζονται για χρήση με την ανάλυση QUANTA Flash GBM. 3. Μην μεταφέρετε τα αντιδραστήρια των ορών βαθμονόμησης σε άλλα σωληνάρια. Οι γραμμικοί κώδικες που υπάρχουν στα σωληνάρια χρησιμοποιούνται από τη συσκευή για την αντιστοίχιση των ορών βαθμονόμησης με τον κατάλληλο τύπο ανάλυσης. 4. Μετά από το άνοιγμά του, το σωληνάριο του ορού βαθμονόμησης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για 8 ώρες ή για 4 βαθμονομήσεις το μέγιστο και μετά από αυτό το χρονικό διάστημα το αντιδραστήριο πρέπει να απορρίπτεται. 5. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χρήσης της συσκευής BIO-FLASH. Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τους ορούς βαθμονόμησης που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Τα αντιδραστήρια είναι σταθερά για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τα αποθηκεύετε και τα χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Οι οροί βαθμονόμησης που έχουν ανοιχθεί πρέπει να απορρίπτονται μετά από 8 ώρες. Διαδικασία 1. Κάθε νέα παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου πρέπει να βαθμονομείται προτού χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά. Το λογισμικό δεν θα επιτρέψει τη χρήση μιας νέας παρτίδας μέχρι να βαθμονομηθεί. Περαιτέρω, κάθε παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου πρέπει να βαθμονομείται κάθε 75 ημέρες. 2. Κάθε ορός βαθμονόμησης πρέπει να αναμειγνύεται ελαφρώς πριν από τη χρήση του, προκειμένου να διασφαλιστεί η ομοιογένειά του. Αποφεύγετε το σχηματισμό αφρού, καθώς οι φυσαλίδες ενδέχεται να παρεμποδίσουν την ανίχνευση της στάθμης υγρού της συσκευής. Αφαιρέστε το πώμα από κάθε σωληνάριο ορού βαθμονόμησης και τοποθετήστε και τα δύο σωληνάρια σε μια ράβδο δειγμάτων με τους γραμμικούς κώδικες στραμμένους προς τα κενά της ράβδου. Τοποθετήστε τη ράβδο δειγμάτων στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής BIO-FLASH και κλείστε τη θύρα. Η συσκευή θα πραγματοποιήσει ανάγνωση των γραμμικών κωδίκων που βρίσκονται στα σωληνάρια ορού βαθμονόμησης και θα προσδιορίσει το απαιτούμενο φυσίγγιο αντιδραστηρίου. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης που παρέχεται με το σύστημα BIO-FLASH. 3. Η συσκευή θα εξετάσει κάθε ορό βαθμονόμησης τρεις φορές. Μετά από την εξέταση των ορών βαθμονόμησης, το λογισμικό θα ζητήσει την επικύρωση της βαθμονόμησης. Από την οθόνη Instrument Summary, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Choose more options Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο Calibration Ctrl-F3. Στο παράθυρο "Βαθμονόμηση", επισημάνετε την επιθυμητή ανάλυση και κάντε κλικ στο στοιχείο Details. 11
4. Στο νέο παράθυρο Calibration Details επιλέξτε τη βαθμονόμηση που πραγματοποιήσατε. Η Κύρια καμπύλη εμφανίζεται ως διακεκομμένη γραμμή, ενώ η νέα Καμπύλη εργασίας εμφανίζεται ως συμπαγής γραμμή. Εάν τα αποτελέσματα της βαθμονόμησης είναι έγκυρα, θα εμφανιστεί ένα κουμπί επαλήθευσης στο κάτω αριστερό τμήμα της οθόνης. Κάντε κλικ στο κουμπί Validate Calibration. 5. Μόλις επικυρωθεί η βαθμονόμηση, η παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου στην οποία πραγματοποιήθηκε η βαθμονόμηση είναι έτοιμη προς χρήση. Μετά από τη βαθμονόμηση μιας παρτίδας φυσιγγίων αντιδραστηρίων συνιστάται η χρήση των Ορών ελέγχου QUANTA Flash GBM (πωλούνται χωριστά - Αρ. προϊόντος 701142). Ανιχνευσιμότητα Προς το παρόν δεν υπάρχει αναγνωρισμένο διεθνές πρότυπο για τη μέτρηση των αντισωμάτων αντι-gbm. Περιορισμοί Αυτοί οι οροί βαθμονόμησης έχουν σχεδιαστεί για 4 βαθμονομήσεις. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού βαθμονόμησης μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 8 ώρες. Εάν οι οροί βαθμονόμησης παραμείνουν ανοιχτοί πάνω στη συσκευή για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα, πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση των ίδιων σωληναρίων ορού βαθμονόμησης για περισσότερες από 4 βαθμονομήσεις ή/και για περισσότερες από 8 ώρες μπορεί να προκαλέσει λανθασμένη βαθμονόμηση της ανάλυσης, η οποία, με τη σειρά της, ενδέχεται να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 12
QUANTA Flash GBM 701142 Οροί ελέγχου Για In Vitro διαγνωστική χρήση Σκοπός χρήσης Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM προορίζονται για τον έλεγχο ποιότητας του κιτ ανάλυσης ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) QUANTA Flash GBM σε μια συσκευή BIO-FLASH. Περίληψη και βασικές αρχές της διαδικασίας Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM αποτελούνται από έναν Αρνητικό και έναν Θετικό ορό ελέγχου. Κάθε ορός περιέχει μια διαφορετική ποσότητα αντισωμάτων GBM. Ο Αρνητικός ορός ελέγχου έχει σχεδιαστεί για την αξιολόγηση της ακρίβειας και της ορθότητας της ανάλυσης σε πολύ χαμηλά επίπεδα αντισωμάτων. Ο Θετικός ορός ελέγχου έχει σχεδιαστεί για την αξιολόγηση της ακρίβειας και της ορθότητας της ανάλυσης σε μεσαία έως υψηλά επίπεδα αντισωμάτων. Αντιδραστήρια 1. Αρνητικός ορός ελέγχου QUANTA Flash GBM: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού έναντι GBM, έτοιμα προς χρήση, 0,5 ml (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). 2. Θετικός ορός ελέγχου QUANTA Flash GBM: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού έναντι GBM, έτοιμα προς χρήση, 0,5 ml (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). Προειδοποιήσεις 1. Οι οροί ελέγχου περιέχουν μια χημική ουσία (0,02 % χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης με άφθονο νερό, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Όλο το ανθρώπινο υλικό που χρησιμοποιήθηκε στην προετοιμασία των ορών ελέγχου για αυτό το προϊόν έχει εξεταστεί με εγκεκριμένες μεθόδους FDA και βρέθηκε αρνητικά στα αντισώματα HIV, HBsAg και HCV. Ωστόσο, καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να προσφέρει πλήρη διασφάλιση για την απουσία των HIV, HBV, HCV ή άλλων μολυσματικών παραγόντων. Για αυτόν το λόγο, οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM πρέπει να τυγχάνουν της ίδιας μεταχείρισης με ένα πιθανώς μολυσματικό προϊόν. 5 4. Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό, όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 5. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων. 13
Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash GBM προορίζονται για χρήση με την ανάλυση QUANTA Flash GBM. 3. Μην μεταφέρετε τα αντιδραστήρια των ορών ελέγχου σε άλλα σωληνάρια. Οι γραμμικοί κώδικες που υπάρχουν στα σωληνάρια χρησιμοποιούνται από τη συσκευή για τον προσδιορισμό του ορού ελέγχου. 4. Μετά το άνοιγμά του, κάθε σωληνάριο ορού ελέγχου μπορεί να χρησιμοποιηθεί 15 φορές το μέγιστο και μπορεί να παραμείνει πάνω στη συσκευή για μέγιστο χρονικό διάστημα 10 λεπτών ανά χρήση. 5. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χρήσης της συσκευής BIO-FLASH. Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τους ορούς ελέγχου που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Τα αντιδραστήρια είναι σταθερά για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τα αποθηκεύετε και τα χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Μετά από το άνοιγμά τους, οι οροί ελέγχου μπορούν να χρησιμοποιηθούν 15 φορές το μέγιστο και μπορούν να παραμείνουν πάνω στη συσκευή για μέγιστο χρονικό διάστημα 10 λεπτών ανά χρήση. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού ελέγχου μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 2 ½ ώρες ή 10 λεπτά ανά χρήση. Εάν οι οροί ελέγχου παραμείνουν ανοιχτοί πάνω στη συσκευή για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα από 2 ½ ώρες, πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση του ίδιου σωληναρίου ορού ελέγχου για περισσότερες από 15 χρήσεις ή/και για περισσότερες από 2 ½ ώρες συνολικά μπορεί να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 3. Για βέλτιστη σταθερότητα, αφαιρέστε τους ορούς ελέγχου από το σύστημα αμέσως μετά τη δειγματοληψία και αποθηκεύστε τους σε θερμοκρασία 2-8 C με κλειστό το αρχικό φιαλίδιο. Διαδικασία Για να δημιουργήσετε νέο υλικό ποιοτικού ελέγχου για την ανάλυση GBM 1. Πριν από την πρώτη χρήση των Ορών ελέγχου QUANTA Flash GBM στη συσκευή, καταχωρήστε στο λογισμικό το όνομα, την παρτίδα, την ημερομηνία λήξης, την τιμή (ή τη δόση) και τα στοιχεία τυπικής απόκλισης προορισμού. 2. Από την οθόνη Instrument Summary, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Remove old bottles Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο QC Ctrl-F2. Κάντε κλικ στο κουμπί New QC Material. 3. Κάθε σετ Ορών ελέγχου συνοδεύεται από ένα ειδικό φύλλο δεδομένων για την παρτίδα. Καταχωρήστε το όνομα, τον αριθμό παρτίδας και τη λήξη από αυτό το φύλλο δεδομένων στο λογισμικό. Στη συνέχεια, κάντε κλικ στο κουμπί Add Assay. Στο νέο παράθυρο, βεβαιωθείτε ότι είναι επιλεγμένο το πλαίσιο Show All Assays. Επιλέξτε την ανάλυση GBM από τη λίστα και κάντε κλικ στην επιλογή Add. Τέλος, καταχωρήστε την προοριζόμενη δόση και την τυπική απόκλιση προορισμού. Κάντε κλικ στο κουμπί Save. Εκτελέστε αυτήν τη διαδικασία και για τους δύο ορούς ελέγχου. 14
Για να δημιουργήσετε μια νέα παρτίδα για υπάρχον υλικό ποιοτικού ελέγχου 1. Πριν από την πρώτη χρήση μιας νέας παρτίδας Ορών ελέγχου QUANTA Flash GBM, πρέπει να καταχωρήσετε στο λογισμικό την παρτίδα, την ημερομηνία λήξης, την τιμή (ή τη δόση) και τα στοιχεία τυπικής απόκλισης προορισμού. 2. Από την οθόνη Instrument Summary, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Choose more options Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο QC Ctrl-F2. Επισημάνετε την ανάλυση GBM στη στήλη που βρίσκεται στα αριστερά. Στη συνέχεια, επισημάνετε το κατάλληλο υλικό ορού ελέγχου στα δεξιά ("GBMN" για τον Αρνητικό ορό ελέγχου ή "GBMP" για το Θετικό ορό ελέγχου). Κάντε κλικ στο κουμπί New QC Lot. 3. Κάθε σετ Ορών ελέγχου συνοδεύεται από ένα ειδικό φύλλο δεδομένων για την παρτίδα. Καταχωρήστε τις πληροφορίες αυτού του φύλλου δεδομένων στο λογισμικό. Οι πληροφορίες αυτές πρέπει να περιλαμβάνουν τον αριθμό παρτίδας, την ημερομηνία λήξης, την προοριζόμενη δόση και τα δεδομένα τυπικής απόκλισης προορισμού. Εάν χρειάζεται, κάντε κλικ στο κουμπί Add Assay. Στο νέο παράθυρο, βεβαιωθείτε ότι είναι επιλεγμένο το πλαίσιο Show All Assays. Επιλέξτε την ανάλυση GBM από τη λίστα και κάντε κλικ στην επιλογή Add. Κάντε κλικ στο κουμπί Save. Εκτελέστε αυτήν τη διαδικασία και για τους δύο ορούς ελέγχου. Συνιστάται η χρήση των Ορών ελέγχου QUANTA Flash GBM μία φορά την ημέρα για κάθε ημέρα που θα χρησιμοποιηθεί η ανάλυση. Ωστόσο, οι χρήστες πρέπει, επίσης, να λαμβάνουν υπόψη και τις απαιτήσεις των εθνικών/τοπικών κανονισμών. Κάθε ορός ελέγχου πρέπει να αναμειγνύεται ελαφρώς πριν από τη χρήση του, προκειμένου να διασφαλιστεί η ομοιογένειά του. Αποφεύγετε το σχηματισμό αφρού, καθώς οι φυσαλίδες ενδέχεται να παρεμποδίσουν την ανίχνευση της στάθμης υγρού της συσκευής. Αφαιρέστε το πώμα από κάθε σωληνάριο ορού ελέγχου και τοποθετήστε και τα δύο σωληνάρια σε μια ράβδο δειγμάτων με τους γραμμικούς κώδικες στραμμένους προς τα κενά της ράβδου. Τοποθετήστε τη ράβδο δειγμάτων στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής BIO-FLASH και κλείστε τη θύρα. Η συσκευή θα πραγματοποιήσει ανάγνωση των γραμμικών κωδίκων που βρίσκονται στα σωληνάρια των ορών ελέγχου και θα προσδιορίσει το απαιτούμενο φυσίγγιο αντιδραστηρίου. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης που παρέχεται με το σύστημα BIO-FLASH. Ανιχνευσιμότητα Προς το παρόν δεν υπάρχει αναγνωρισμένο διεθνές πρότυπο για τη μέτρηση των αντισωμάτων αντι-gbm. Περιορισμοί Αυτοί οι οροί ελέγχου έχουν σχεδιαστεί για 15 χρήσεις. Η ετικέτα κάθε σωληναρίου ορού ελέγχου διαθέτει μια σειρά 15 πλαισίων, τα οποία μπορείτε να σημειώνετε για να παρακολουθείτε τον αριθμό χρήσεων. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού ελέγχου μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 2 ½ ώρες ή 10 λεπτά ανά χρήση. Εάν οι οροί ελέγχου παραμείνουν ανοιχτοί πάνω στη συσκευή για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα, πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση των ίδιων σωληναρίων ορού ελέγχου για περισσότερες από 15 χρήσεις ή/και για περισσότερες από 2 ½ ώρες συνολικά μπορεί να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 15
Παραπομπές 1. Pedchenko V, Bondar O, Fogo AB, Vanacore R, Voziyan P, Kitching AR et al.: Molecular architecture of the Goodpasture autoantigen in anti-gbm nephritis. N Engl J Med 2010, 363: 343-354. 2. Westman KW, B ygr e n PG, Eilert I, W iik A, Wieslander J: Rapid screening assay for anti-gbm antibody and ANCAs; an important tool for the differential diagnosis of pulmonary renal syndromes. Nephrol Dial Transplant 1997, 12: 1863-1868. 3. Mahler M, Radice A, Sinico RA, Damoiseaux J, Seaman A, Buckmelter K et al.: Performance evaluation of a novel chemiluminescence assay for detection of anti-gbm antibodies: an international multicenter study. Nephrol Dial Transplant 2011. 4. Jaskowski TD, Martins TB, Litwin CM, Hill HR: Comparison of four enzyme immunoassays for the detection of immunoglobulin G antibody against glomerular basement membrane. J Clin Lab Anal 2002, 16: 143-145. 5. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health 2007, Fifth Edition. 16
Σύμβολα που χρησιμοποιούνται In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Ανατρέξτε στις οδηγίες χρήσης Περιορισμοί θερμοκρασίας Προϊόν μίας χρήσης Βιολογικοί κίνδυνοι Κωδικός παρτίδας Αριθμός καταλόγου Ανάλωση κατά προτίμηση έως Κατασκευαστής Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος Περιέχει επαρκές υλικό για < n > δοκιμασίες Θετικός ορός ελέγχου Αρνητικός ορός ελέγχου Ορός βαθμονόμησης 1 Ορός βαθμονόμησης 2 Ανακυκλώσιμη χάρτινη συσκευασία Αυτή η πλευρά πρέπει να βρίσκεται προς τα πάνω 17
Η επωνυμία QUANTA Flash είναι καταχωρημένο εμπορικό σήμα της INOVA Diagnostics Inc. Η επωνυμία BIO-FLASH είναι καταχωρημένο εμπορικό σήμα της Biokit S.A. 2012 Κατασκευαστής: INOVA Diagnostics, Inc. 9900 Old Grove Road San Diego, CA 92131 United States of America Τεχνική υποστήριξη (Μόνο για τις Η.Π.Α. & τον Καναδά) : 877-829-4745 Τεχνική υποστήριξη (Εκτός των Η.Π.Α.) : 00+ 1 858-805-7950 support@inovadx.com Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ε.Ε.: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D-66386 St. Ingbert, Germany Τηλ.: +49-6894-581020 Φαξ: +49-6894-581021 www.mt-procons.com 621140GRC Μάιος 2012 Έκδοση αναθεώρησης 1 18