PSA. For use on IMMULITE 2000 systems

For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of prostate-specific antigen () in human serum, as an aid in the detection of prostate cancer when used in conjunction with digital rectal examination (DRE) in men aged 50 years or older. This assay is further indicated as an adjunctive test aid in the management of prostate cancer patients. Catalog Number: L2KPS2 (200 tests) L2KPS6 (600 tests) Test Code: Color: Brown The concentration of in a given specimen determined with different assays can vary due differences in assay methods and reagent specificity. The results reported by the laborary the physician must include the identity of the assay used. Values obtained with different assays cannot be used interchangeably. Before changing assays, the laborary must confirm the baseline values for patients being serially monired. Summary and Explanation Prostate specific antigen () first identified and characterized by Wang et al in 1979 is a glycoprotein monomer with protease activity. 1,2 has an isoelectric point of approximately 6.9 and a molecular weight of approximately 33 34 kilodalns containing approximately 10% carbohydrate by weight. 1,2 Subsequently the amino acid sequence of was reported, 3 and the gene has been cloned. 4 is biochemically and immunologically distinct from PAP and es not exhibit enzymatic phosphatase activity. 5 is localized in the cyplasm of prostatic ductal epithelium and in secretions of the ductal lumina. 6 Because is a secrery protein of the prostate, it can be recovered and purified both from prostatic tissue and from seminal plasma. 7 has been found be primarily associated with prostate tissue, and elevated serum has been found in patients with prostate cancer, benign prostatic hypertrophy, and inflammary conditions of other adjacent geniurinary tissues but not in healthy men, men with nonprostatic carcinoma, healthy women or women with cancer. 5,8 Serum alone is not suitable as a screen for prostate cancer because elevated concentrations are also observed in patients with benign prostatic hypertrophy (BPH) 8 ; nor is it recommended as a guide in disease staging. The combination of measurement and rectal examination with ultrasonography in the event of abnormal findings may provide a better method of detecting prostate cancer than rectal examination alone. Measurement of offers several advantages over digital rectal examination or ultrasonography in detecting prostate cancer: the result is objective, quantitative, and obtained independent of the examiner's skill, and the procedure is more acceptable patients than other procedures. 9 determinations can be useful in detecting metastatic or persistent disease in patients following surgical or medical treatment of prostate cancer. 10,11 Persistent elevation of following treatment or an increase in the pretreatment concentrations is indicative of recurrent or residual disease. 12 16 Hence is widely accepted as an aid in the management of prostate cancer patients. 12 16 Concurrent measurement of PAP may contribute additional information. 17 The American Cancer Society has recommended that both the blood test and digital rectal examination be offered annually, beginning at age 50, men who have at least a 10-year life expectancy, as well as younger men who are at high risk. Patients should be given information regarding potential risks and benefits of early detection and treatment. Men in high risk groups, such as those with two or more affected first-degree 2 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

relatives may consider screening at a younger age, perhaps 45. 27 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 is a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay. The solid phase (bead) is coated with goat anti- polyclonal antibody. Patient sample and the reagent are incubated gether with the bead coated with anti- polyclonal antibody. in the patient sample is bound the alkaline phosphatase (bovine calf intestine)- conjugated murine anti- monoclonal antibody and the antibody on the bead form an antibody-sandwich complex. Unbound enzyme conjugate is then removed by a centrifugal wash. Finally, chemiluminescent substrate is added the bead and signal is generated in proportion the bound enzyme. Incubation Cycles: 1 30 minutes Specimen Collection Samples should be obtained before biopsy, prostatecmy or prostatic massage, since manipulation of the prostate gland may lead elevated levels persisting for up 3 weeks. 18 Studies have shown conflicting results on the existence of an effect of digital rectal examination on level. 19,20 Therefore, when possible, obtain samples before digital rectal examination. EDTA plasma is not recommended for use. The use of an ultracentrifuge is recommended clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laborary; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activars and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 10 µl serum. Srage: 48 hours at 2 8 C or for longer at 20 C. 21 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Sre at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. Bead Pack (L2PS12) With barcode. 200 beads, coated with polyclonal goat anti- antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPS2: 1 pack L2KPS6: 3 packs Reagent Wedge (L22) With barcode. 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated monoclonal murine anti- antibody in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KPS2: 1 wedge L2KPS6: 3 wedges Before use, tear off the p of the label at the perforations, without damaging the IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 3

barcode. Remove the foil seal from the p of wedge; snap the sliding cover wn in the ramps on the reagent lid. Adjusrs (LPSL LPSH) Two vials (Low and High) 1.5 ml each of in a chicken serum/buffer matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KPS2: 1 set L2KPS6: 2 sets Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of high samples. One vial containing concentrated (ready-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Srage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 100 mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operar's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operar's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfacry level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laborary quality control scheme. Expected Values in Detection of Prostate Cancer In a retrospective study at one clinical site for prostate cancer detection purposes, samples were collected from 477 men, aged 50 or older. Of these, 20 (4%) were Asian; 8 (2%) were African American; 440 (92%) were Caucasian; 7 (< 1%) were other and 2 (< 1%) provided no ethnic information. All patients also underwent digital rectal examination (DRE). Of these, 52 were biopsied for elevated (> 4.0 ng/ml) and/or suspicious DRE. The following table summarizes these clinical studies: No. of Subjects (%) All Subjects No. of Biopsies (%) No. of Prostate Cancers % Positive Biopsies 477 52 18 34.6% > 4.0 70 38 15 39.5% 14.7% 54.3% (24.0% 55.7%) DRE + 54 17 8 47.1% 11.3% 31.5% (25.3% 72.2%) > 4.0 DRE + 23 12 6 50.0% 4.8% 52.2% (23.6% 76.4%) 4.0 DRE + 31 5 2 40.0% 6.5% 16.1% (7.6% 81.1%) 4 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

No. of Subjects (%) No. of Biopsies (%) > 4.0 DRE No. of Prostate Cancers % Positive Biopsies 47 26 9 34.6% 9.9% 55.3% (18.0% 54.2%) 4.0 DRE 376 9 1 11.1% 78.8% 2.4% (0.3% 48.3%) The study demonstrated that testing, when used in conjunction with DRE, was more effective in detecting prostate cancer than DRE alone. determinations detected 50% (9/18) of cancers that DRE did not; elevations greater than 4 ng/ml may warrant additional testing even if the DRE is negative. However, the converse is also true: a subject with suspicious DRE and a normal may also require additional testing since DRE detected 11% (2/18) of cancers that determinations did not. In the same study, 376 participants were identified as asympmatic subjects. The following table contains the distribution of values by age decade for these asympmatic subjects in the clinical study who had both a negative and DRE, and therefore, were not biopsied as well as for those subjects who were negative for cancer biopsy. There is no certainty that all of these subjects were indeed free of prostate disease. Therefore, these data should be interpreted with caution since it is questionable whether these subjects represent a truly normal population. There are presently no data proving that the use of age-specific reference ranges are safe or effective. Distribution of Levels n Median 95 th %ile All subjects 376 0.78 2.98 50 59 age group 159 0.60 2.30 60 69 age group 143 0.91 2.84 70 age group 74 1.17 3.17 In studies performed at four clinical sites, 2618 samples collected from 1965 patients were tested. Shown below is the distribution of IMMULITE results from this study. Number of Subjects / Samples 0 4 ng/ml 4 10 10 20 20 40 ng/ml ng/ml ng/ml 40 ng/ml Female Subjects 253/253 100% 0% 0% 0% 0% Healthy 149/149 100% 0% 0% 0% 0% Nonmalignant Diseases 28/28 100% 0% 0% 0% 0% Malignant Diseases 76/76 100% 0% 0% 0% 0% Healthy Male Subjects 473/473 99.4% 0.6% 0% 0% 0% Non-Malignant Diseases 548/548 76.2% 19.3% 3.5% 0.9% 0% BPH 333/333 67.9% 25.8% 5.4% 0.9% 0% Other Prostatic Diseases 66/66 80.3% 18.2% 1.5% 0% 0% Other Nonprostatic Diseases 149/149 93.2% 5.4% 0% 1.3% 0% Non-Prostatic Malignancies 312/312 93.0% 6.1% 0.6% 0.3% 0% Prostate Cancer (single specimens) 274/274 42.3% 21.2% 13.1% 7.3% 16.1% Prostate Cancer (serially monired) 105/758 54.8% 11.7% 10.7% 7.5% 15.3% Stage A 17/174 64.9% 9.8% 9.2% 3.5% 12.6% Stage B 31/200 54.0% 14% 12% 8.5% 11.5% Stage C 19/102 56.9% 6.9% 7.8% 8.8% 19.6% Stage D 38/282 48.2% 13.1% 11.7% 8.9% 18.0% Total: 1965/2618 1962 275 138 83 160 Consider these limits as guidelines only. Each laborary should establish its own reference ranges. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 5

Limitations Serum concentrations should not be interpreted as absolute evidence for the presence or absence of malignant disease, nor should serum be used alone as a screening test for malignant disease. 8 Prediction of malignant prostatic disease recurrence should be based on a complete clinical evaluation of the patient, which may also include serial serum determinations. Samples should be obtained before biopsy, prostatecmy or prostatic massage, since manipulation of the prostate gland may lead elevated levels persisting up 3 weeks. 18 expression may be altered due hormonal therapy for prostate cancer. Consequently, a low result following a prostatic cancer treatment which includes hormonal therapy may not adequately reflect the presence of residual or recurrent disease. 25 Some individuals have antibodies mouse protein which can cause interference in immunoassays that employ antibodies derived from mice. In particular, specimens from patients who have received preparations of mouse monoclonal antibodies for diagnosis or therapy may contain human anti-mouse antibodies (HAMA). These specimens may show erroneous results in such assays. 22 24 Therefore, results should be interpreted with caution for such patients. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Bosca LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Samples from patients routinely exposed animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical hisry, and other findings. Performance Data The following sections contain data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Working Range: 0.04 150 ng/ml [WHO NIBSC 1st IS 96/670] Analytical Sensitivity: 0.04 ng/ml High-se Hook Effect: None up 22,500 ng/ml Precision: Samples were processed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a tal of 40 runs and 80 replicates. Results are expressed in ng/ml. Within-Run Total Mean SD CV SD CV 1 2.8 0.10 3.6% 0.14 5.0% 2 7.4 0.23 3.1% 0.36 4.9% 3 11.4 0.34 3.0% 0.60 5.3% 4 25 0.70 2.8% 1.1 4.4% 5 65 1.4 2.2% 2.5 3.9% 6 126 3.2 2.5% 4.7 3.7% Linearity: Samples were assayed under various dilutions. Results are expressed in ng/ml. Dilution Observed Expected %O/E 1 16 in 16 1.03 8 in 16 0.48 0.52 92% 4 in 16 0.23 0.26 91% 2 in 16 0.13 0.13 100% 1 in 16 0.06 0.06 100% 2 16 in 16 7.8 8 in 16 3.96 3.90 101% 4 in 16 2.05 1.95 105% 2 in 16 0.98 0.98 100% 1 in 16 0.51 0.49 105% 3 16 in 16 27.2 8 in 16 13.9 13.6 102% 4 in 16 7.0 6.8 103% 2 in 16 3.6 3.4 106% 1 in 16 1.7 1.7 100% 6 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Dilution Observed Expected %O/E 4 16 in 16 99 8 in 16 48 50 96% 4 in 16 25 25 100% 2 in 16 13 12 108% 1 in 16 6.7 6.2 108% 5 16 in 16 126 8 in 16 61 63 97% 4 in 16 33 32 103% 2 in 16 17 16 106% 1 in 16 8.9 7.9 113% Recovery: Samples spiked 1 19 with four solutions (107, 208, 653 and 817 ng/ml) were assayed. Results are expressed in ng/ml. Spiking Solution Observed Expected %O/E 1 0.46 A 6.0 5.8 103% B 11.2 10.8 104% C 33 33 100% D 42 41 102% 2 6.4 A 11.8 11.5 103% B 16 17 94% C 42 39 108% D 49 47 104% 3 26 A 28 30 93% B 32 35 91% C 56 58 97% D 65 66 98% Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of packed red blood cells in concentrations up 30 µl/ml has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up 5000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Specificity: The assay is highly specific for prostate-specific antigen, with a particularly low crossreactivity other naturally occurring compounds and chemotherapeutic agents that might be present in patient samples. Compound ng/ml Added % Crossreactivity AFP 10,000 ND Amethopterin 100,000 ND CEA 100 ND Cisplatin 100,000 ND Cyclophosphamide 1,000,000 ND Diethylstilbestrol 10,000,000 ND Doxazosin mesylate 1,000,000 ND Doxorubicin Hydrochloride 100,000 ND Ferritin 10,000 ND Finasteride 10,000,000 ND 5-Fluorouracil 1,000,000 ND Flutamide 100,000 ND HCG 10,000 ND Lactalbumin 1,000,000 ND Leuprolide acetate 100,000 ND Megesterol 1,000,000 ND Mimycin C 100,000 ND PAP 1000 ND Prolactin 500 ND Vincristine 1,000,000 ND ND: not detectable Method Comparison: All four of nonisopic assays were compared using Deming regression analysis. Samples used were within the working range of the assays. The table below presents the results of the Deming regressions, with columns as Y, and rows as X. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 7

IMMULITE IML IML 2000 IML 3rd Gen. IML 2000 3rd Gen. n 477 474 473 Slope Intercept Correlation Coefficient IMMULITE 2000 0.94 (0.93 0.95) 0.11 ( 0.15 0.07) 0.99 (0.98 1.00) 0.05 (0.02 0.09) 1.08 (1.07 1.10) 0.06 (0.02 0.11) 0.992 0.993 0.991 n 477 474 473 Slope 1.06 (1.05 1.08) 1.06 (1.05 1.08) 1.16 (1.14 1.17) 0.12 0.15 0.18 Intercept Correlation Coefficient (0.08 0.16) (0.11 0.20) (0.14 0.23) 0.992 0.988 0.990 IMMULITE 3rd Generation n 474 474 472 Slope 1.01 (1.00 1.03) 0.94 (0.93 0.96) 1.10 (1.09 1.11) 0.06 0.15 0.00 Intercept Correlation Coefficient ( 0.09 0.02) ( 0.19 0.10) ( 0.05 0.05) 0.993 0.988 0.990 IMMULITE 2000 3rd Generation n 473 473 472 Slope 0.92 (0.91 0.94) 0.86 (0.85 0.87) 0.91 (0.90 0.92) 0.06 0.16 0.00 Intercept Correlation Coefficient ( 0.10 0.02) ( 0.20 0.12) ( 0.04 0.04) 0.991 0.990 0.990 The following graph presents the comparison between IMMULITE 2000 and IMMULITE on 477 patient samples. (Concentration range: nondetectable approximately 20 ng/ml.) By linear regression: (IML 2000) = 0.94 (IML) 0.11 ng/ml r = 0.992 Means: 2.05 ng/ml (IMMULITE 2000) 2.30 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 25 20 15 10 5 0 y = 0.9396x - 0.1123 0 5 10 15 20 25 IMMULITE References 1) Wang MC et al. Purification of a human prostate specific antigen. Invest Urol 1979;17:159-63. 2) Kuriyama M et al. Prostatic acid phosphatase and prostate- specific antigen in prostate cancer. In: International Advances in Surgical Oncology. New York: Alan R. Liss Inc. 1982; 5:29-49. 3) Watt WK, Lee PJ et al. Human prostate-specific antigen: structural and functional similarity with serine proteases. Proc Natl Acad Sci USA 1986;83:3166-70. 4) Lundwall A. Characterization of the gene for prostate specific antigen a human glandular kallikrein. Biochem Biophys Res Commun 1989;161:1151-9. 5) Papsidero LD et al. A prostate antigen in sera of prostatic cancer patients. Cancer Res 1980;40:2428-31. 6) Nadji M et al. Prostatic-specific antigen: an immunohislogic marker for prostatic neoplasms. Cancer 1981;48:1229-32. 7) Wang MC et al. Prostate antigen of human cancer patients. In: Methods in cancer research. Academic Press Inc. 1982; 19:179-97. 8) Kuriyama M et al. Quantitation of prostatespecific antigen in serum by a sensitive enyzme immunoassay. Cancer Res 1980;40:4658-62. 9) Catalona WJ et al. Measurement of prostatespecific antigen in serum as a screening test for prostate cancer. New Engl J Med 8 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

1991;324:1156-61. 10) Brawer MK, Lange PH. Prostate-specific antigen: its role in early detection staging and moniring prostatic carcinoma. J Encrinol 1989;3:227-36. 11) Killian CS et al. Prognostic importance of prostate specific antigen for moniring patients with stages B2 D1 prostate cancer. Cancer Res 1985;45:886-91. 12) Stamey TA. Prostate specific antigen in the diagnosis and treatment of adenocarcinoma of the prostate. In: Stamey TA edir. Monographs in Urology. Princen NY: Medical Directions Publishing Co. Inc. 1989; 10(4):50-64. 13) Ercole CJ et al. Prostatic specific antigen and prostatic acid phosphatase in the moniring and staging of patients with prostatic cancer. J Urol 1987;138:1181-4. 14) Chan DW et al. Prostate-specific antigen as a marker for prostatic cancer: a monoclonal and a polyclonal immunoassay compared. Clin Chem 1987;33:1916-20. 15) Lange PH et al. The value of serum prostate specific antigen determinations before and after radical prostatecmy. J Urol 1989;141:873-9. 16) Oesterling JE. Prostate specific antigen: a critical assessment of the most useful tumor marker for adenocarcinoma of the prostate. J Urol 1991;145:907-23. 17) Kuriyama M et al. Multiple marker evaluation in human prostate cancer with the use of tissue-specific antigens. J Natl Cancer Inst 1982;68:99-105. 18) Stamey TA, Yang N et al. Prostate specific antigen as a serum marker for adenocarcinoma of the prostate. N Engl J Med 1987;317:909-16. 19) Brawer MK et al. The effect of digital rectal examination on serum levels of prostatic specific antigen. Arch Pathol Lab Med 1988;112:1110-2. 20) Hughes HR et al. Serum prostatic specific antigen: in vitro stability and the effect of ultrasound rectal examination in vivo. Ann Clin Biochem 1987;24:(Suppl)206-8. 21) Jacobs DS, Grady HD, edirs. Laborary Test Handbook. 4th ed. Hudson (Cleveland): Lexi-Comp Inc., 1996; 193. 22) Primus FJ et al. "Sandwich"-type immunoassay of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine antibody for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34:261-4. 23) Hansen HJ et al. Solving the problem of antibody interference in commercial "sandwich"- type immunoassay of carcinoembryonic antigen. Clin Chem 1989;35:146-51. 24) Schroff RJ et al. Human anti-murine immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody therapy. Cancer Res 1985;45:879-85. 25) Morgan WR et al. Prostate specific antigen values after radical retropubic prostatecmy for adenocarcinoma of the prostate: impact of adjuvant treatment (hormonal and radiation). J Urol 1991;145:319-23. 26) National Committee for Clinical Laborary Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4 Wayne PA: NCCLS 1998. 27) Smith RA, et al. American Cancer Society guidelines for the early detection of cancer. CA Cancer J Clin 2000; 50(1):34-49. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distribur. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 2.8 0.10 3.6% 0.14 5.0% 2 7.4 0.23 3.1% 0.36 4.9% 3 11.4 0.34 3.0% 0.60 5.3% 4 25 0.70 2.8% 1.1 4.4% 5 65 1.4 2.2% 2.5 3.9% 6 126 3.2 2.5% 4.7 3.7% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 Wewnątrz serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 16 in 16 5 1.03 8 in 16 0.48 0.52 92% 4 in 16 0.23 0.26 91% 2 in 16 0.13 0.13 100% 1 in 16 0.06 0.06 100% 2 16 in 16 7.8 8 in 16 3.96 3.90 101% 4 in 16 2.05 1.95 105% 2 in 16 0.98 0.98 100% 1 in 16 0.51 0.49 105% 3 16 in 16 27.2 8 in 16 13.9 13.6 102% 4 in 16 7.0 6.8 103% 2 in 16 3.6 3.4 106% 1 in 16 1.7 1.7 100% IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 9

Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 4 16 in 16 5 99 8 in 16 48 50 96% 4 in 16 25 25 100% 2 in 16 13 12 108% 1 in 16 6.7 6.2 108% 5 16 in 16 126 8 in 16 61 63 97% 4 in 16 33 32 103% 2 in 16 17 16 106% 1 in 16 8.9 7.9 113% Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 16 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούνη (O), 3 Ανανόνη (E), 4 % O/E, 5 16 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 16 w 16. Recovery (ng/ml) Spiking Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 0.46 A 6.0 5.8 103% B 11.2 10.8 104% C 33 33 100% D 42 41 102% 2 6.4 A 11.8 11.5 103% B 16 17 94% C 42 39 108% D 49 47 104% 3 26 A 28 30 93% B 32 35 91% C 56 58 97% D 65 66 98% Česky. 1 Rozk s přídavkem, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούνη (O), 3 Ανανόνη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Compound 1 ng/ml Added 2 % Crossreactivity 3 AFP 10,000 ND Amethopterin 100,000 ND CEA 100 ND Cisplatin 100,000 ND Cyclophosphamide 1,000,000 ND Diethylstilbestrol 10,000,000 ND Doxazosin mesylate 1,000,000 ND Doxorubicin Hydrochloride 100,000 ND Ferritin 10,000 ND Finasteride 10,000,000 ND 5-Fluorouracil 1,000,000 ND Flutamide 100,000 ND HCG 10,000 ND Lactalbumin 1,000,000 ND Leuprolide acetate 100,000 ND Megesterol 1,000,000 ND Mimycin C 100,000 ND PAP 1000 ND Prolactin 500 ND Vincristine 1,000,000 ND ND: not detectable 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % ιασταυρ.αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 ND: Nieoznaczlne. Method Comparison: Deming regression analysis 1 The table below presents the results of the Deming regressions, with columns as Y, and rows as X. 2 10 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

IML IML 2000 IML 3rd Gen. IML 2000 3rd Gen. IMMULITE n 3 477 474 473 Slope 4 5 0.94 (0.93 0.95) 0.99 (0.98 1.00) 1.08 (1.07 1.10) Intercept 6 0.11 ( 0.15 0.07) 0.05 (0.02 0.09) 0.06 (0.02 0.11) Correlation 7 0.992 0.993 0.991 Coefficient IMMULITE 2000 n 477 474 473 Slope 1.06 (1.05 1.08) 1.06 (1.05 1.08) 1.16 (1.14 1.17) 0.12 0.15 0.18 Intercept Correlation Coefficient (0.08 0.16) (0.11 0.20) (0.14 0.23) 0.992 0.988 0.990 IMMULITE 3rd Generation n 474 474 472 Slope 1.01 (1.00 1.03) 0.94 (0.93 0.96) 1.10 (1.09 1.11) 0.06 0.15 0.00 Intercept Correlation Coefficient ( 0.09 0.02) ( 0.19 0.10) ( 0.05 0.05) 0.993 0.988 0.990 IMMULITE 2000 3rd Generation n 473 473 472 Slope 0.92 (0.91 0.94) 0.86 (0.85 0.87) 0.91 (0.90 0.92) 0.06 0.16 0.00 Intercept Correlation Coefficient ( 0.10 0.02) ( 0.20 0.12) ( 0.04 0.04) 0.991 0.990 0.990 English. Deming regression analysis 1, The table below presents the results of the Deming regressions, with columns as Y, and rows as X 2, n 3, Slope 4, 5, Intercept 6, Correlation Coefficient 7. Česky. 1 Srovnání medy pomocí Demingovy regresní analýzy, 2 Následující tabulka přináší výsledky Demingovy regrese, přičemž v sloupcích jsou hodnoty Y, v řádcích hodnoty X, 3 n, 4 Směrnice 5 (95% IS), 6 Průsečnice (95% IS), 7 Korelační koeficient. Ελληνικά. 1 Ανάλυσις παλινδρόμισης Deming, 2 Ο πίνακας παρακάτω παρουσιάζει τα αποτελέσματα των παλινδρομίσεων Deming, στήλες Y και γραμμές X, 3 n, 4 κλίση 5, 6 Ανακοπή, 7 Συντελεστής συσχέτισης. Polski. 1 Porównanie med amalizą regresji Deminga, 2 W poniższej tabeli zawar wyniki regressji Deminga regressions, z Y w kolumnach i X w rzędach, 3 n, 4 Nachylenie 5, 6 Odchylenie, 7 Współczynnik korelacji. Method Comparison Graph IMMULITE 2000 25 20 15 10 5 0 y = 0.9396x - 0.1123 0 5 10 15 20 25 IM M ULITE (IML 2000) = 0.94 (IML) 0.11 ng/ml r = 0.992 Česky IMMULITE 2000 Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzárech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace specifického antigenu prostaty () v lidském séru, jakož pomůcky při odhalení rakoviny prostaty v kombinaci s digitálním rektálním vyšetřením (DRE) u mužů stáří 50 let a starších. To stanovení se rovněž uvádí jako podpůrný test v péči o pacienty s rakovinou prostaty. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 11

Katalogové číslo : L2KPS2 (200 stanovení) L2KPS6 (600 stanovení) Kód medy : Barva : Hnědá Koncentrace v určitém vzorku stanovené různými medami se mohou lišit s ohledem na rozdíly v použité medě stanovení a specificity reagencií. Výsledky stanovení, které laborař posílá lékaři, musí zahrnovat označení použitého testu. Výsledky získané pomocí rozličných med stanovení se nesmí zaměňovat. Před změnou medy musí laborař provést konfirmaci počátečních hodnot pravidelně slevaných pacientů. Shrnutí a vysvětlení Specifický antigen prostaty (), poprvé identifikovaný a popsaný Wabgem a kol. v roce 1979, je glykoproteinový monomer vykazující proteázovou aktivitu. 1,2 Izoelektrický bod je přibližně 6,9 a molekulová hmotnost přibližně 33 34 kda a asi 10 % hmotnosti představují karbohydráty. 1,2 Následně bylo objeveno pořadí aminokyselin v 3 a gen byl klonován. 4 je biochemicky i imunologicky odlišný od PAP a nevykazuje enzymatickou fosfatázovou aktivitu. 5 je lokalizován v cyplazmě duktálního epitelu prostaty a v sekretech duktálního lumina. 6 Prože je sekrečním proteinem, je možné jej odebrat a rafinovat jak z prostatickém tkáně, tak ze semenné plazmy. 7 Bylo zjištěno, že je především spojen s prostatickou tkání a zvýšená hladina v séru byla indikována u pacientů s rakovinou prostaty, benigní hypertrofií prostaty a při zánětech přilehlých tkání, ale nikoli u zdravých mužů, mužů s jiným karcinomem, nebo u žen zdravých nebo s karcinomem. 5,8 Samotné stanovení v séru není vhodné pro screening rakoviny prostaty, prože zvýšená koncentrace se rovněž objevuje u pacientů s benigní prostatickou hypertrofií (BPH); 8 rovněž se neporučuje jako vodítko při určování stadia onemocnění. Kombinace měření a ultrasonografického rektálního vyšetření v případě palogického nálezu může představovat lepší medu zjištění rakoviny prostaty než samotné rektální vyšetření. Stanovení má při odhalení rakoviny prostaty oproti digitálnímu rektálnímu vyšetření nebo ultrasonografii několik výhod. Výsledek je objektivní, vyjádřený kvantitativně a získaný nezávisle na vednostech vyšetřujícího. Způsob vyšetření je rovněž pro pacienty přijatelnější než jiné medy. 9 Stanovení je užitečné při detekci metastatického nebo přetrvávajícího onemocnění u pacientů po chirurgickém zákroku nebo léčbě rakoviny prostaty. 10,11 Přetrvávající zvýšená hladina po léčbě, nebo nárůst koncentrace vůči stavu před léčbou, jsou znaky recidivy nebo residuálního onemocnění. 12-16 Pro je stanovení obecně akcepváno jako pomůcka při péči o pacienty s rakovinou prostaty. 12-16 Současné měření PAP může přispět dalšími informacemi. 17 American Cancer Society (Americká onkologická společnost) navrhla, aby se 50-letým mužům, kteří mají předpokládanou délku života ještě alespoň 10 roků, a rovněž mladším, ale rizikovějším pacientům, kročně nabídlo stanovení pomocí krevních testů a digitální rektální vyšetření. Pacientům je třeba poskytnout informace o možných rizicích a přínosech časného zjištění onemocnění a léčby. Muži ze skupin s vysokým rizikem, jako například ti, u kterých dva nebo i víc příbuzných prvního stupně bylo zaseno tím onemocněním, můžou zvážit podsupení screeningu v mladším věku, tak kolem 45. 27 Princip stanovení Stanovení na analyzárech IMMULITE 2000 je chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Pevná fáze (kulička) je potena kozí polyklonální protilátkou proti. Vzorek pacienta a reagencie jsou společně inkubovány s kuličkou potenou polyklonální protilátkou proti. ve vzorku pacienta je vázaná na alkalickou fosfatázu (z telecího střeva) konjugovanou s myší monoklonální protilátkou proti a s protilátkou navázanou na kuličce tvoří sendvičový komplex. Nenavázaný enzymový konjugát 12 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

je poté odstraněn centrifugačním mytím. Na závěr je ke kuličce přidán chemiluminiscenční substrát a vzniklý signál odpovídá navázanému enzymu. Inkubační cykly : 1 30 minut Odebírání vzorků Vzorky je třeba odebírat před biopsií, prostatekmií nebo prostatickou masáži, prože manipulace s předsjnou žlázou může způsobit zvýšené hodnoty koncentrace, které přetrvávají i tři týdny. 18 Výzkumy prokázaly odporující si výsledky způsobené existencí vlivu digitálního rektálního vyšetření na množství. 19,20 Pokud je možné, odebírejte tedy vzorky před digitálním rektálním vyšetřením. Použití EDTA plazmy při m stanovení se neporučuje. K úpravě lipemických vzorků se poručuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím laboraře; pro by výsledky měly být interprevány s obezřetností. Centrifugací vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přímnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přímností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžavat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivárů srenin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení na analyzárech IMMULITE 2000 nebylo tesváno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Potřebný objem vzorku : 10 μl séra Sklavání : 48 hodin při 2 8 C déle při 20 C. 21 Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly tesvány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminescenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovými kódy. zásobník s kuličkami (L2PS12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potených polyklonální kozí protilátkou proti. Stabilní při teplotě 2 8 C expirace. L2KPS2 : 1 balení L2KPS6 : 3 balení reagencie (L22) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s monoklonální myší protilátkou proti v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C expirace. L2KPS2 : 1 nábka L2KPS6 : 3 nábky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nábky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte ramp na víčku reagencie. kalibráry (LPSL, LPSH) Dvě ampulky s nízkou a vysokou koncentrací v kuřecím séru/pufrovaném matrixu, kdá 1,5 ml s IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 13

konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KPS2 : 1 sada L2KPS6 : 2 sady Před adjustací nalepte na tesvací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dané se soupravou) tak, aby zabuvaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Určeno k aumatickému ředění koncentrovaných vzorků analyzárem. Jedna ampulka koncentrovaného (připraveného k použití) nehumánního bílkovinového/pufrového matrixu, s konzervačním prostředkem. Sklavání : 30 dní (po otevření) při 2 8 C nebo 6 měsíců (rozdělené na alikvotní části) při 20 C. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na tesvací zkumavku 16 100 mm tak, aby zabuvaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : Chemiluminescenční substrát L2PWSM : Promývací rozk L2KPM : Čistící rozk na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 Tesvací zkumavky na diluent vzorků (16 100 mm) L2ZC : 250 Uzávěru na tesvací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; tesvací zkumavky, kontroly Postup stanovení K sení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzárům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzárům IMMULITE 2000 najdete postupy přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontrolní vzorky nebo směsný vzorek s alespoň dvěma koncentracemi (nízkou a vysokou). Společnost Siemens Healthcare Diagnostics poručuje používat obchodně stupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se sahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzáru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboraře. Očekávané hodnoty při zjišťování karcinomu prostaty Při retrospektivním výzkumu na oddělení, které se věnuje zjišťování karcinomu prostaty na jedné klinice, byly odebrány vzorky od 477 mužů stáří 50 let a starších. Z té skupiny bylo 20 (4 %) mužů asijského původu, 8 (2 %) Američanů afrického původu, 440 (92 %) Kavkazanů, 7 (< 1 %) mělo jinou národnost a 2 (< 1 %) svou národnost neudali. Všichni ti pacienti rovněž prošli digitálním rektálním vyšetřením (DRE). Z té skupiny bylo 52 mužům provedena biopsie kvůli zvýšené koncentraci (> 4,0 ng/ml) a/nebo podezřelému výsledku z DRE. Ta klinická studie přinesla následující výsledky: Počet osob (%) Počet biopsií (%) Všechny osoby Počet karcinomů prostaty % pozitivní biopsie 477 52 18 34,6% > 4,0 70 38 15 39,5% 14,7% 54,3% (24,0% 55,7%) DRE + 54 17 8 47,1% 11,3% 31,5% (25,3% 72,2%) 14 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Počet osob (%) Počet biopsií (%) > 4,0 DRE + Počet karcinomů prostaty % pozitivní biopsie 23 12 6 50,0% 4,8% 52,2% (23,6% 76,4%) 4,0 DRE + 31 5 2 40,0% 6,5% 16,1% (7,6% 81,1%) > 4,0 DRE 47 26 9 34,6% 9,9% 55,3% (18,0% 54,2%) 4,0 DRE 376 9 1 11,1% 78,8% 2,4% (0,3% 48,3%) Výzkum prokázal, že stanovení ve spojení s DRE představuje účinnější nástroj zjištění karcinomu prostaty než samotné DRE. Stanovení odhalilo 50 % (9/18) karcinomů, které DRE neodhalilo. Zvýšená koncentrace převyšující 4 ng/ml může být důvodem datečného vyšetření, i když je výsledek DRE negativní. Ale platí i opačný přístup: osoba s podezřelými výsledky DRE a normálním výsledkem ze stanovení může rovněž potřebovat další vyšetření, prože DRE prokázalo 11 % (2/18) karcinomů, které stanovení neodhalilo. Stejný výzkum označil 376 mužů jako asympmatické subjekty. V následující tabulce jsou hodnoty rozložení podle dekády věku těch asympmatických osob, u kterých byly výsledky i DRE negativní a pro jim nebyla dělaná biopsie, a rovněž těch mužů, kteří měli výsledek rakovinové biopsie negativní. Nemůžeme s určistí říct, že žádná z těch osob skutečně neměla žádné onemocnění prostaty. Pro je nutné interprevat ty údaje s obezřetností, nakolik je sporné, zda ty osoby skutečně reprezentují normální populaci. V současnosti nemáme žádné údaje, které by potvrdili, že použití referenčního rozmezí na základě věku je spolehlivé a účinné. Rozložení koncentrace n medián 95. percentil Všechny osoby 376 0,78 2,98 50 59 věková skupina 159 0,60 2,30 60 69 věková skupina 143 0,91 2,84 70 věková skupina 74 1,17 3,17 Při výzkumu na čtyřech klinikách bylo odebráno a tesváno 2618 vzorků od 1965 pacientů. Následující tabulka přináší rozdělení výsledku stanovení na analyzáru IMMULITE v rámci zmíněného výzkumu. Počet osob/vzorků 0 4 ng/ml 4 10 ng/ml 10 20 ng/ml 20 40 ng/ml 40 ng/ml Ženy 253/253 100% 0% 0% 0% 0% Zdravé 149/149 100% 0% 0% 0% 0% Nezhoubná onemocnění 28/28 100% 0% 0% 0% 0% Zhoubná onemocnění 76/76 100% 0% 0% 0% 0% Zdraví muži 473/473 99,4% 0,6% 0% 0% 0% Nezhoubná onemocnění 548/548 76,2% 19,3% 3,5% 0,9% 0% BPH 333/333 67,9% 25,8% 5,4% 0,9% 0% Ostatní onemocnění prostaty 66/66 80,3% 18,2% 1,5% 0% 0% Onemocnění jiná než onemocnění prostaty 149/149 93,2% 5,4% 0% 1,3% 0% Zhoubná onemocnění jiné než onemocnění prostaty 312/312 93,0% 6,1% 0,6% 0,3% 0% Karcinom prostaty (test jednoho vzorku) 274/274 42,3% 21,2% 13,1% 7,3% 16,1% IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 15

Počet osob/vzorků 0 4 ng/ml 4 10 ng/ml 10 20 ng/ml 20 40 ng/ml 40 ng/ml Karcinom prostaty (opakované testy vzorků) 105/758 54,8% 11,7% 10,7% 7,5% 15,3% Stadium A 17/174 64,9% 9,8% 9,2% 3,5% 12,6% Stadium B 31/200 54,0% 14% 12% 8,5% 11,5% Stadium C 19/102 56,9% 6,9% 7,8% 8,8% 19,6% Stadium D 38/282 48,2% 13,1% 11,7% 8,9% 18,0% Celkem: 1965/2618 1962 275 138 83 160 Ty hodnoty povujte pouze za orientační. Kdá laborař by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Koncentrace v séru by neměla být povována za absolutní důkaz přímnosti nebo absence zhoubného onemocnění, ani by samotné stanovení v séru nemělo být použité jako screening zhoubné choroby. 8 Prognóza recidivy zhoubného onemocnění prostaty by se měla zakládat na úplném klinickém hodnocení pacienta, které může rovněž zahrnovat opakované stanovení v séru. Vzorky je třeba odebírat před biopsií, prostatekmií nebo prostatickou masáži, prože manipulace s předsjnou žlázou může způsobit zvýšené hodnoty, které přetrvávají i tři týdny. 18 Koncentrace se může měnit následkem hormonální léčby karcinomu prostaty. Pro tedy nízká hladina po léčbě karcinomu prostaty, která zahrnuje i hormonální terapii, nemusí správně odrážet přímnost reziduálního onemocnění nebo recidivy. 25 Někteří jedinci mají protilátky proti myšímu proteinu, což může ovlivnit imunologické stanovení využívající protilátky získané z myší. Jedná se zejména o vzorky od pacientů, kteří užívali přípravky s myšími monoklonálními protilátkami při diagnóze nebo léčbě. Ty vzorky můžou obsahovat lidské protimyší protilátky (HAMA) a výsledky stanovení těch vzorků můžou vykázat chybné výsledky. 22-24 Pro je výsledky těch pacientů nutné vykládat s obezřetností. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsenými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Bosca LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat ten typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Ty reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky ho stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, anamnézou pacienta a ostatními nálezy. Znaky medy Reprezentativní výsledky stanovení najdete v následující části. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných zkumavek bez gelových separárů nebo přísad podporujících srážlivost.) Pracovní rozsah : 0,04 150 ng/ml [WHO NIBSC 1st IS 96/670] Analytická citlivost : 0,04 ng/ml High-se Hook Effect : Do 22 500 ng/ml žádný Přesnost medy : Vzorky byly opakovaně stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, celkem 40 cyklů a 80 replikátů. Výsledky se udávají v ng/ml. 16 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Střední hodnota V rámci testu Směrodatná odchylka Variační koeficient Střední hodnota Celkem Směrodatná odchylka 1 2,8 0,10 3,6% 0,14 5,0% 2 7,4 0,23 3,1% 0,36 4,9% 3 11,4 0,34 3,0% 0,60 5,3% 4 25 0,70 2,8% 1,1 4,4% 5 65 1,4 2,2% 2,5 3,9% 6 126 3,2 2,5% 4,7 3,7% Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. Výsledky se udávají v ng/ml. Ředění % Naměř./ Naměřená Očekávaná Očekávan 1 16 v 16 1,03 8 v 16 0,48 0,52 92% 4 v 16 0,23 0,26 91% 2 v 16 0,13 0,13 100% 1 v 16 0,06 0,06 100% 2 16 v 16 7,8 8 v 16 3,96 3,90 101% 4 v 16 2,05 1,95 105% 2 v 16 0,98 0,98 100% 1 v 16 0,51 0,49 105% 3 16 v 16 27,2 8 v 16 13,9 13,6 102% 4 v 16 7,0 6,8 103% 2 v 16 3,6 3,4 106% 1 v 16 1,7 1,7 100% 4 16 v 16 99 8 v 16 48 50 96% 4 v 16 25 25 100% 2 v 16 13 12 108% 1 v 16 6,7 6,2 108% 5 16 v 16 126 8 v 16 61 63 97% 4 v 16 33 32 103% 2 v 16 17 16 106% 1 v 16 8,9 7,9 113% Výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků s přídavkem čtyř rozků (107, 208, 653 a 817 ng/ml) v poměru 1 : 19. Přidávaný rozk Naměřená Očekávaná % Naměř./ Očekávan 1 0,46 A 6,0 5,8 103% B 11,2 10,8 104% C 33 33 100% D 42 41 102% 2 6,4 A 11,8 11,5 103% B 16 17 94% C 42 39 108% D 49 47 104% 3 26 A 28 30 93% B 32 35 91% C 56 58 97% D 65 66 98% Bilirubin : Přímnost bilirubinu v koncentracích 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přímnost červených krvinek oddělených od plazmy v koncentracích 30 µl/ml nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přímnost triglyceridů v koncentracích 5000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 17

Specificita : je silně specifický se zvláště nízkou zkříženou reaktiviu na ostatní přirozeně se vyskytující sloučeniny a chemoterapeutické prostředky, které se můžou se objevit ve vzorcích pacientů. Sloučenina Přidané množství ng/ml % Zkřížená reaktivita AFP 10 000 ND Amepterin 100 000 ND CEA 100 ND Cisplatin 100 000 ND Cyklofosfamid 1 000 000 ND Dietylstilbestrol 10 000 000 ND Doxazosin mesylát 1 000 000 ND Doxorubicin Hydrochlorid 100 000 ND Ferritin 10 000 ND Finasterid 10 000 000 ND 5-Fluorouracil 1 000 000 ND Flutamid 100 000 ND HCG 10 000 ND Laktalbumin 1 000 000 ND Leuprolid acetát 100 000 ND Megesterol 1 000 000 ND Mimycin C 100 000 ND PAP 1000 ND Prolaktin 500 ND Vinkristin 1 000 000 ND ND: nezjistitelné. Srovnání medy : Všechny čtyři neizopová stanovení od byly porovnány za použití Demingovy regresní analýzy. V následující tabulce jsou výsledky Demingovy regrese, přičemž v sloupcích jsou hodnoty osy Y a v řádcích osy X. IMMULITE IML IML 2000 IML 3 gen. IML 2000 3 gen. n 477 474 473 Směrnice (95% IS) Průsečník (95% IS) Korelační koeficient IMMULITE 2000 0,94 (0,93 0,95) 0,11 ( 0,15 0,07) 0,99 (0,98 1,00) 0,05 (0,02 0,09) 1,08 (1,07 1,10) 0,06 (0,02 0,11) 0,992 0,993 0,991 N 477 474 473 Směrnice (95% IS) 1,06 (1,05 1,08) 1,06 (1,05 1,08) 1,16 (1,14 1,17) 0,12 0,15 0,18 Průsečník (95% IS) Korelační koeficient (0,08 0,16) (0,11 0,20) (0,14 0,23) 0,992 0,988 0,990 IMMULITE 3. Generace n 474 474 472 Směrnice (95% IS) 1,01 (1,00 1,03) 0,94 (0,93 0,96) 1,10 (1,09 1,11) 0,06 0,15 0,00 Průsečník (95% IS) Korelační koeficient ( 0,09 0,02) ( 0,19 0,10) ( 0,05 0,05) 0,993 0,988 0,990 IMMULITE 2000 3. Generace n 473 473 472 Směrnice (95% IS) 0,92 (0,91 0,94) 0,86 (0,85 0,87) 0,91 (0,90 0,92) 0,06 0,16 0,00 Průsečník (95% IS) Korelační koeficient ( 0,10 0,02) ( 0,20 0,12) ( 0,04 0,04) 0,991 0,990 0,990 18 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Následující graf přináší srovnání stanovení na analyzárech IMMULITE 2000 a analyzáru IMMULITE na 477 vzorcích pacientů. (Koncentrační rozsah : nezjistitelné množství přibližně 20 ng/ml.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,94 (IML) 0,11 ng/ml r = 0,992 Střední hodnoty : 2,05 ng/ml (IMMULITE 2000) 2,30 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 25 20 15 10 5 0 y = 0.9396x - 0.1123 0 5 10 15 20 25 IMMULITE Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distribura. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για την ποσοτική μέτρηση του προστατικού ειδικού αντιγόνου () στον ανθρώπινο ορό, ως βοήθημα για την ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη όταν χρησιμοποιείται σε συνδυασμό την δακτυλική πρωκτική εξέταση (DRE) σε άνδρες ηλικίας 50 ετών και άνω. Η μέθοδος συνιστάται περαιτέρω σαν πρόσθετη ανάλυση για να βοηθήσει στη διαχείριση της κατάστασης των ασθενών καρκίνο του προστάτη. Αριθμός Καταλόγου: L2KPS2 (200 αναλύσεις) L2KPS6 (600 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: Χρώμα: Καφέ Η συγκέντρωση του σε ένα δεδομένο δείγμα που προσδιορίζεται διαφορετικές θόδους μπορεί να διαφέρει εξαιτίας των διαφορών των αναλυτικών θόδων και της ακρίβειας των αντιδραστηρίων. Τα αποτελέσματα που αναφέρονται από το εργαστήριο στο γιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν και το ποια μέθοδος χρησιμοποιήθηκε. Οι τιμές που αποκτώνται διαφορετικές αναλύσεις δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ εναλλαγήν. Πριν αλλάξει θοδολογίες, το εργαστήριο πρέπει να επιβεβαιώσει τις βασικές τιμές για τους ασθενείς που ελέγχονται συνεχώς. Περίληψη και Επεξήγηση Το Ειδικό Προστατικό Αντιγόνο (), πρωτοταυτοποιήθηκε και χαρακτηρίστηκε από τους Wang, et al το 1979, σαν ένα μονορές γλυκοπρωτεΐνης δράση πρωτεάσης. 1,2 Το έχει ισοηλεκτρικό σηίο περίπου 6,9 και μοριακό βάρος περίπου 33 34 kilodalns, περιέχει περίπου 10% υδατάνθρακα κατά βάρος. 1,2 Στην συνέχεια αναφέρθηκε η αλληλουχία των αμινοξέων του 3 και το γονίδιο κλωνοποιήθηκε. 4 Το είναι βιοχημικά και ανοσολογικά διακριτό από το PAP και δεν εμφανίζει ενζυμική δραστηριότητα φωσφατάσης. 5 Το εντοπίζεται στο κυτταρόπλασμα του επιθηλίου του αγωγού του προστάτη και τις εκκρίσεις της ουρήθρας. 6 Επειδή το είναι μια εκκρινόνη πρωτεΐνη του προστάτη, μπορεί να ανακτηθεί και να καθαριστεί και από τον προστατικό ιστό και από σπέρμα. 7 Το βρέθηκε να σχετίζεται αποκλειστικά τον προστατικό ιστό και αυξημένο στον ορό βρέθηκε σε ασθενείς καρκίνο του προστάτη, καλοήθη υπερτροφία του προστάτη και καταστάσεις φλεγμονών παρακείνων γεννητικών ιστών, αλλά όχι σε υγιείς άνδρες, άνδρες όχι προστατικό IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 19

καρκίνωμα, υγιείς γυναίκες ή γυναίκες καρκίνο. 5,8 Η μέτρηση του στον ορό δεν είναι κατάλληλη για τον έλεγχο του καρκίνου του προστάτη, επειδή οι αυξημένες συγκεντρώσεις παρατηρούνται επίσης και σε ασθενείς καλοήθη υπερπλασία του προστάτη (BPH) 8 ούτε συνιστάται και σαν οδηγός κατηγοριοποίησης του σταδίου του καρκίνου του προστάτη. Ο συνδυασμός της μέτρησης του και η πρωκτική εξέταση υπερηχογραφία στην περίπτωση ανώμαλων ευρημάτων μπορεί να αποτελέσουν μια καλύτερη μέθοδο για την ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη από ότι η πρωκτική εξέταση από μόνη της. Η μέτρηση του προσφέρει αρκετά πλεονεκτήματα από την πρωκτική εξέταση ή την υπερηχογραφία στην ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη: το αποτέλεσμα είναι αντικεινικό, ποσοτικό και λαμβάνεται ανεξάρτητα από την εμπειρία του εξεταστή και επιπλέον η διαδικασία είναι περισσότερο αποδεκτή από τους ασθενείς από ότι άλλες διαδικασίες. 9 Προσδιορισμοί του μπορεί να είναι χρήσιμοι στον προσδιορισμό ταστατικής ή επίμονης ασθένειας σε ασθενείς που ακολουθουν χειρουργική ή ιατρική θεραπεία του καρκίνου του προστάτη. 10,11 Επίμονη αύξηση του που ακολουθεί τη θεραπευτική αγωγή ή μια αύξηση στην προετοιμασία των συγκεντρώσεων του είναι ενδεικτικό επανεμφάνισης ή κατάλοιπου μιας ασθένειας. 12 16 Έτσι, το είναι ευρέως αποδεκτό σαν βοήθεια στον έλεγχο ασθενών καρκίνο του προστάτη. 12 16 Ταυτόχρονη μέτρηση του PAP μπορεί να δώσει πρόσθετες πληροφορίες. 17 Η American Cancer Society έχει προτείνει ότι και η εξέταση αίματος και η πρωκτική εξέταση θα πρέπει να γίνεται κάθε χρόνο, ξεκινώντας από τα πενήντα, στους άνδρες που έχουν τουλάχιστον 10 χρόνια προσδόκιμο ζωής, καθώς επίσης και σε νεότερους άνδρες οι οποίοι είναι σε υψηλό κίνδυνο. Οι ασθενείς θα πρέπει να ενηρώνονται σχετικά τους δυνητικούς κινδύνους, αλλά και τα πλεονεκτήματα μιας έγκαιρης ανίχνευσης και θεραπευτικής αγωγής. Άνδρες σε ομάδες υψηλού κινδύνου, όπως αυτοί δύο ή περισσότερους προσβεβλημένους πρώτου βαθμού συγγενείς θα πρέπει να ξεκινούν τον έλεγχο σε νεότερη ηλικία, ίσως τα 45. 27 Αρχή της ιαδικασίας Η IMMULITE 2000 είναι μια ξηρής φάσης, χηιοφωταυγής, ανοσοτρική ανάλυση. Η ξηρή φάση (σφαιρίδιο) είναι επικαλυμμένη πολυκλωνικό αντίσωμα κατσίκας anti-. Το δείγμα του ασθενή και το αντιδραστήριο επωάζονται μαζί το επικαλυμμένο σφαιρίδιο anti- πολυκλωνικό αντίσωμα. Το στο δείγμα του ασθενή είναι ενωμένο την αλκαλική φωσφατάση (βόειου εντέρου)- συνδεδεμένη μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού anti- και το αντίσωμα στο σφαιρίδιο ώστε να σχηματιστεί ένα σύμπλεγμα αντισώματοςsandwich. Το ελεύθερο από χημικό δεσμό ενζυμικό παράγωγο απομακρύνεται φυγόκεντρη πλύση. Τελικά, προστίθεται το χηιοφωταυγές υπόστρωμα στο σφαιρίδιο και παράγεται σήμα σε αναλογία το ενωμένο ένζυμο. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Συλλογή είγματος Τα δείγματα πρέπει να λαμβάνονται πριν τη βιοψία, προστατεκτομή ή μάλαξη του προστάτη, αφού ο ερεθισμός του προστατικού αδένα μπορεί να οδηγήσει σε αυξημένα επίπεδα που εμμένουν για μέχρι 3 εβδομάδες. 18 Μελέτες έχουν δείξει αντικρουόνα αποτελέσματα στο αν η μέθοδος πρωκτικής εξέτασης επηρεάζει τα επίπεδα του χρησιμοποιώντας συμβατικές θόδους ανάλυσης. 19,20 Για αυτό το λόγο, όταν είναι δυνατό, τα δείγματα του να λαμβάνονται πριν από την πρωκτική εξέταση. Το EDTA πλάσμα δεν συνιστάται για χρήση. Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή ταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται προσοχή. 20 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα τα υλικά και τα πρόσθετα, συμπεριλαμβανομένων των τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 δεν έχει δοκιμαστεί όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούνος όγκος: 10 µl ορού Φύλαξη: 48 ώρες στους 2 8 C ή για γαλύτερη αποθήκευση στους 20 C. 21 Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Υπόκεινται στην ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της θόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του νατρίου σε συγκεντρώσεις μικρότερες από 0,1 g/dl, έχει προστεθεί ως συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών ταλλικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χηιοφωταύγειας: Το υπόστρωμα χηιοφωταύγειας δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. εν πρέπει να μολυνθεί. ( ες ένθετο.) Νερό: Χρήση απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες ( γραμμογράφηση) στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων (L2PS12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα μονοκλωνικά αντι- αντισώματα κατσίκας. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ηρομηνία λήξης. L2KPS2: 1 συσκευασία L2KPS6: 3 συσκευασίες οχείο αντιδραστηρίου (L22) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού αντι- σε ρυθμιστικό διάλυμα, συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ηρομηνία λήξης. L2KPS2: 1 δοχείο L2KPS6: 3 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί ή γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές (LPSL, LPSH) ύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό), 1,5 ml το καθένα, σε μήτρα ορού κότας / ρυθμιστικού, συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C για 30 ημέρες τά το άνοιγμα, ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KPS2: 1 σετ L2KPS6: 2 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται το kit) στους δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την on-board αραίωση υψηλών δειγμάτων. Ένα φιαλίδιο που περιέχει συμπυκνωμένη (έτοιμη για χρήση), μήτρα μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ρυθμιστικού, συντηρητικό. Αποθήκευση: 30 μέρες (τά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 21

Ετικέτες barcode παρέχονται για χρήση το αραιωτικό. Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται το kit) σε δοκιμαστικό σωλήνα 16 100 mm, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από κατάλληλο σύστημα. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χηιοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για διάλυση του δείγματος (16 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες διάλυσης δείγματος Απαιτούνται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δοκιμαστικοί σωλήνες, δείγματα ελέγχου ιαδικασία της Ανάλυσης Σηιώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώνος χρόνος ταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες είγματα ποιοτικού ελέγχου: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό). Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Ανανόνες τιμές στην ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη Σε μια λέτη ανασκόπησης σε μια κλινική τοποθεσία για σκοπούς ανίχνευσης του καρκίνου του προστάτη, δείγματα συλλέχθηκαν από 477 άνδρες, ηλικίας 50 ή γαλύτερους. Απ αυτούς, 20 (4%) ήταν Ασιάτες, 8 (2%) ήταν Αφρικανοαρικανοί, 440 (92%) ήταν Καυκάσιοι, 7 (< 1%) ήταν από αλλού και 2 (< 1%) δεν έδωσαν πληροφορίες για την εθνικότητα. Όλοι οι ασθενείς επίσης είχαν εξεταστεί πρωκτικά (DRE). Απ αυτούς, σε 52 βρέθηκε ανεβασμένο (> 4,0 ng/ml) και/η ύποπτο DRE. Ο παρακάτω πίνακας συνοψίζει αυτές τις κλινικές λέτες: Αριθμός ατόμων (%) Όλα τα άτομα Αριθμός Βιοψιών (%) Αριθμός καρκίνων του προστάτη % Θετικές βιοψίες 477 52 18 34,6% > 4,0 70 38 15 39,5% 14,7% 54,3% (24,0% 55,7%) DRE + 54 17 8 47,1% 11,3% 31,5% (25,3% 72,2%) > 4,0 DRE + 23 12 6 50,0% 4,8% 52,2% (23,6% 76,4%) 4,0 DRE + 31 5 2 40,0% 6,5% 16,1% (7,6% 81,1%) > 4,0 DRE 47 26 9 34,6% 9,9% 55,3% (18,0% 54,2%) 4,0 DRE 376 9 1 11,1% 78,8% 2,4% (0,3% 48,3%) Η λέτη έδειξε ότι ο έλεγχος, όταν ήταν συνδεδεμένος τη DRE, ήταν περισσότερο αποτελεσματικός στην ανίχνευση του καρκίνου του προστάτη από ότι η DRE από μόνη της. Οι προσδιορισμοί του ανίχνευσαν 50% (9/18) των καρκίνων που δεν ανίχνευσε η 22 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

DRE. Αυξήσεις του γαλύτερες από 4 ng/ml πιθανόν απαιτούν συμπληρωματικές εξετάσεις, ακόμα και αν η DRE είναι αρνητική. Παρόλ αυτά, συμβαίνει και το αντίθετο: ένα δείγμα ύποπτη DRE και κανονικό μπορεί επίσης να απαιτεί συμπληρωματικές εξετάσεις αφού η DRE ανίχνευσε 11% (2/18) των καρκίνων που δεν ανίχνευσαν οι προσδιορισμοί του. Στη ίδια λέτη, 376 συμτέχοντες ταυτοποιήθηκαν σαν ασυμπτωματικά δείγματα. Ο ακόλουθος πίνακας περιέχει την κατανομή των τιμών του την ηλικία σε δεκαετίες για αυτά τα συμπτωματικά δείγματα στην κλινική λέτη που είχαν αρνητικά και και DRE, και για το λόγο αυτό, δεν υπεβλήθησαν σε βιοψία, καθώς και για αυτά τα δείγματα που ήταν αρνητικά για βιοψία καρκίνου. εν είναι βέβαιο ότι όλα αυτά τα δείγματα ήταν ελεύθερα προστατικών ασθενειών. Για αυτό το λόγο, αυτά τα δεδομένα θα πρέπει να αντιτωπιστούν προσοχή, αφού είναι αμφισβητήσιμο το αν αυτά τα δείγματα αντιπροσωπεύουν έναν αληθινά «φυσιολογικό» πληθυσμό. εν υπάρχουν καθόλου δεδομένα που να αποδεικνύουν ότι η χρήση εύρους αναφοράς σχετικά την ηλικία είναι ασφαλής ή αποτελεσματική. Κατανομή των επιπέδων n Ενδιά ση τιμή 95 th %ile Όλα τα άτομα 376 0,78 2,98 50 59 ηλ.ομάδα 159 0,60 2,30 60 69 ηλ.ομάδα 143 0,91 2,84 70 ηλ.ομάδα 74 1,17 3,17 Σε λέτες που πραγματοποιήθηκαν σε τέσσερις κλινικές τοποθεσίες, αναλύθηκαν 2618 δείγματα που συλλέχθηκαν από 1965 ασθενείς. Παρακάτω φαίνεται η κατανομή των αποτελεσμάτων από τη λέτη τη χρήση του IMMULITE. Αριθμός ατόμων / δειγμάτων Γυναίκες 0 4 ng/ml 4 10 10 20 20 40 ng/ml ng/ml ng/ml 40 ng/ml 253/253 100% 0% 0% 0% 0% Υγιείς 149/149 100% 0% 0% 0% 0% Καλοήθεις ασθένειες 28/28 100% 0% 0% 0% 0% Κακοήθεις ασθένειες 76/76 100% 0% 0% 0% 0% Υγιείς άντρες 473/473 99,4% 0,6% 0% 0% 0% Καλοήθεις ασθένειες 548/548 76,2% 19,3% 3,5% 0,9% 0% BPH 333/333 67,9% 25,8% 5,4% 0,9% 0% Άλλες ασθένειες του προστάτη 66/66 80,3% 18,2% 1,5% 0% 0% Άλλες μη ασθένειες του προστάτη 149/149 93,2% 5,4% 0% 1,3% 0% Μη προστατικές κακοήθειες 312/312 93,0% 6,1% 0,6% 0,3% 0% Καρκίνος του προστάτη (μονωμένα δείγματα) 274/274 42,3% 21,2% 13,1% 7,3% 16,1% Καρκίνος του προστάτη (συνεχώς ελεγχόνος) 105/758 54,8% 11,7% 10,7% 7,5% 15,3% Στάδιο A 17/174 64,9% 9,8% 9,2% 3,5% 12,6% Στάδιο B 31/200 54,0% 14% 12% 8,5% 11,5% Στάδιο C 19/102 56,9% 6,9% 7,8% 8,8% 19,6% Στάδιο D 38/282 48,2% 13,1% 11,7% 8,9% 18,0% Συνολικά: 1965/2618 1962 275 138 83 160 Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 23

Περιορισμοί Οι συγκεντρώσεις του στον ορό δεν θα πρέπει να εκτιμώνται σαν απόλυτη απόδειξη για την παρουσία ή την απουσία κακοήθους ασθένειας, ούτε η παρουσία στον ορό θα πρέπει να χρησιμοποιείται από μόνη της ως προληπτική εξέταση για κακοήθεια. 8 Πρόβλεψη επανεμφάνισης κακοήθους ασθένειας του προστάτη θα πρέπει να βασίζεται σε πλήρη κλινική εκτίμηση του ασθενούς, η οποία επίσης μπορεί να περιλαμβάνει συνεχείς προσδιορισμούς του στον ορό. Τα δείγματα θα πρέπει να παίρνονται πριν τη βιοψία, προστατεκτομή ή μάλαξη του προστάτη, αφού ο ερεθισμός του προστατικού αδένα μπορεί να οδηγήσει σε αυξημένα επίπεδα που εμμένουν για μέχρι 3 εβδομάδες. 18 Η έκφραση του μπορεί να ταβληθεί εξαιτίας ορμονικής θεραπείας για καρκίνο του προστάτη. Συνεπώς, ένα χαμηλό αποτέλεσμα σε άτομα που ακολουθούν μια ορμονική θεραπεία μπορεί να μην αντικατοπτρίζει επακριβώς την παρουσία υπολειπόνης ασθένειας ή ασθένειας που επανεμφανίστηκε. 25 Κάποια άτομα έχουν αντισώματα στην πρωτεΐνη του ποντικού, πράγμα που μπορεί να επηρεάσει τις ανοσοθόδους που περιλαμβάνουν αντισώματα που προέρχονται από ποντίκια. Ιδιαίτερα, δείγματα από ασθενείς που έχουν υποστεί προετοιμασία μονοκλωνικών αντισωμάτων ποντικού για διάγνωση ή θεραπεία μπορεί να περιέχουν ανθρώπινα αντισώματα ποντικού (HAMA). Αυτά τα δείγματα μπορεί να δείξουν εσφαλμένα αποτελέσματα σε τέτοιες θόδους. 22-24 Για αυτό το λόγο, τα αποτελέσματα θα πρέπει να χειρίζονται προσοχή για τέτοιους ασθενείς. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της θόδου προκαλώντας δυσκολίες σε εργαστηριακές θόδους ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Bosca LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] είγματα ασθενών που, σαν ρουτίνα, εκτίθενται σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλοεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε, να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλοεπίδρασης παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις ταξύ των σπάνιων ορών και των συστατικών της θόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Οι παρακάτω ενότητες περιέχουν δεδομένα αντιπροσωπευτικά της εκτέλεσης της θόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σηιώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος εργασίας: 0,04 150 ng/ml [WHO NIBSC 1st IS 96/670] Αναλυτική Ευαισθησία: 0,04 ng/ml Επίδραση υψηλής δόσης φαινομένου Hook: Κανένα μέχρι 22500 ng/ml Ακρίβεια: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ηρών, δύο τρεξίματα την ημέρα, για ένα σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. Κατά την ίδια περίοδο Συνολικά Μέσος ορός SD CV SD CV 1 2,8 0,10 3,6% 0,14 5,0% 2 7,4 0,23 3,1% 0,36 4,9% 3 11,4 0,34 3,0% 0,60 5,3% 4 25 0,70 2,8% 1,1 4,4% 5 65 1,4 2,2% 2,5 3,9% 6 126 3,2 2,5% 4,7 3,7% Γραμμικότητα: Τα δείγματα υφίσταντο αναλύσεις διαφορετικές διαλύσεις. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. 24 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Παρατηρού Ανανό Αραίωση νη νη %Π/Α 1 16 στα 16 1,03 8 στα16 0,48 0,52 92% 4 στα 16 0,23 0,26 91% 2 στα 16 0,13 0,13 100% 1 στα 16 0,06 0,06 100% 2 16 στα 16 7,8 8 στα 16 3,96 3,90 101% 4 στα 16 2,05 1,95 105% 2 στα 16 0,98 0,98 100% 1 στα 16 0,51 0,49 105% 3 16 στα 16 27.2 8 στα 16 13,9 13,6 102% 4 στα16 7,0 6,8 103% 2 στα 16 3,6 3,4 106% 1 στα 16 1,7 1,7 100% 4 16 στα 16 99 8 στα 16 48 50 96% 4 στα 16 25 25 100% 2 στα 16 13 12 108% 1 στα 16 6,7 6,2 108% 5 16 στα 16 126 8 στα 16 61 63 97% 4 στα 16 33 32 103% 2 στα 16 17 16 106% 1 στα 16 8,9 7,9 113% Ανάκτηση: Τα δείγματα εμπλουτίστηκαν 1 19 τέσσερα διαλύματα (107, 208, 653 και 817 ng/ml). Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. οκιμαζό Παρατηρού νο διάλυμα νη Ανανό νη %Π/Α 1 0,46 A 6,0 5,8 103% B 11,2 10,8 104% C 33 33 100% D 42 41 102% 2 6,4 A 11,8 11,5 103% B 16 17 94% C 42 39 108% D 49 47 104% 3 26 A 28 30 93% B 32 35 91% C 56 58 97% D 65 66 98% Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία ερυθρών αιμοσφαιρίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 30 µl/ml mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκερίδιων σε συγκεντρώσεις μέχρι 5000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης,. Ειδικότητα: Η ανάλυση παρουσιάζει υψηλή ειδικότητα για το προστατικό ειδικό αντιγόνο, μια ιδιαίτερα χαμηλή διασταυρούνη αντίδραση σε άλλα συστατικά και χηιοθεραπευτικούς παράγοντες που μπορεί να υπάρχουν στα δείγματα των ασθενών. IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 25

Συστατικό % ng/ml ιασταυρο Προστιθένη ύνη ποσότητα αντίδραση AFP 10000 ND Amethopterin 100000 ND CEA 100 ND Cisplatin 100000 ND Cyclophosphamide 1000000 ND Diethylstilbestrol 10000000 ND Doxazosin mesylate 1000000 ND Doxorubicin Hydrochloride 100000 ND Ferritin 10000 ND Finasteride 10000000 ND 5-Fluorouracil 1000000 ND Flutamide 100000 ND HCG 10000 ND Lactalbumin 1000000 ND Leuprolide acetate 100000 ND Megesterol 1000000 ND Mimycin C 100000 ND PAP 1000 ND Prolactin 500 ND Vincristine 1000000 ND ND: μη ανιχνεύσιμη Σύγκριση της θόδου: Και οι τέσσερις μη ισοτοπικές μέθοδοι για το συγκρίθηκαν χρησιμοποιώντας την παλινδρομική ανάλυση Deming. Τα δείγματα χρησιμοποιήθηκαν μέσα στα λειτουργικά όρια της θόδου. Οι πίνακες παρακάτω παρουσιάζουν τα αποτελέσματα της παλινδρόμησης Deming, στήλες Y και γραμμές X. IMMULITE IML IML 2000 IML 3 ης γενιάς IML 2000 3 ης γενιάς n 477 474 473 Κλίση Ανακοπή Συντελεστής συσχέτισης IMMULITE 2000 0,94 (0,93 0,95) 0,11 ( 0,15 0,07) 0,99 (0,98 1,00) 0,05 (0,02 0,09) 1,08 (1,07 1,10) 0,06 (0,02 0,11) 0,992 0,993 0,991 n 477 474 473 κλίση 1,06 (1,05 1,08) 1,06 (1,05 1,08) 1,16 (1,14 1,17) 0,12 0,15 0,18 Ανακοπή Συντελεστής συσχέτισης (0,08 0,16) (0,11 0,20) (0,14 0,23) 0,992 0,988 0,990 IMMULITE 3 ης γενιάς n 474 474 472 κλίση 1,01 (1,00 1,03) 0,94 (0,93 0,96) 1,10 (1,09 1,11) 0,06 0,15 0,00 ανακοπή Συντελεστής συσχέτισης ( 0,09 0,02) ( 0,19 0,10) ( 0,05 0,05) 0,993 0,988 0,990 IMMULITE 2000 3 ης γενιάς n 473 473 472 Κλίση 0,92 (0,91 0,94) 0,86 (0,85 0,87) 0,91 (0,90 0,92) 0,06 0,16 0,00 Ανακοπή Συντελεστής συσχέτισης ( 0,10 0,02) ( 0,20 0,12) ( 0,04 0,04) 0,991 0,990 0,990 26 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Το παρακάτω γράφημα αναπαριστά την σύγκριση ταξύ του IMMULITE 2000 και του IMMULITE σε 477 δείγματα ασθενών. (Εύρος καμπύλης: μη ανιχνεύσιμο μέχρι περίπου 20 ng/ml.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,94 (IML) 0,11 ng/ml r = 0,992 Μέσοι όροι: 2,05 ng/ml (IMMULITE 2000) 2,30 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 25 20 15 10 5 0 y = 0.9396x - 0.1123 0 5 10 15 20 25 IMMULITE Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizarów systemów IMMULITE 2000 ilościowego oznaczenia poziomu specyficznego antygenu prostaty () w surowicy, przydatny w diagnostyce klinicznej raka prostaty w połączeniu z badaniem palpacyjnym per rectum prostaty u mężczyzn od 50 roku życia. Oznaczenie jest również pomocne w prowadzeniu chorych na raka prostaty. Numery katalogowe: L2KPS2 (200 testów), L2KPS6 (600 testów) Kod testu: Kolor: Brązowy Stężenia w badanej próbce określane różnymi medami mogą się różnić w związku z różnicami w technik i specyficzności odczynników Wyniki wydawane lekarzowi powinny zawierać nazwę med. Warści uzyskane przy użyciu różnych med nie mogą być ssowane zamiennie. Przed zmianą medy laborarium powinno ustalić warści odniesienia dla pacjentów pozostających w trakcie monirowania. Znaczenie Diagnostyczne Antygen specyficzny prostaty () został po raz pierwszy zidentyfikowany i określony przez Wanga i współpracowników w 1979 roku, jako monomeryczna glikoproteina o enzymatycznej aktywności proteazy. 1,2 Punkt izoelektryczny wynosi w przybliżeniu 6,9, a jego ciężar 33 34 kd, z czego około 10% wagowych stanowią węglowodany. 1,2 Sekwencja aminokwasów została określona 3, a gen sklonowany. 4 jest biochemicznie i immunologicznie różny od kwaśnej fosfatazy sterczowej (PAP) i nie wykazuje aktywności enzymatycznej fosfatazy. 5 jest zlokalizowany w cyplazmie komórek nabłonkowych przewodów gruczołu krokowego i wydzielinie tych przewodów. 6 Ponieważ jest białkiem wydzielniczym prostaty może być izolowany i oczyszczany z tkanki gruczołu prostaty oraz z płynu nasiennego. 7 jest przede wszystkim związany z tkanką gruczołu krokowego - podwyższony poziom występuje u pacjentów z rakiem prostaty, łagodnym przerostem gruczołu krokowego oraz stanami zapalnymi tkanek sąsiadujących z układem moczowo płciowym. Poziom pozostaje w normie u zdrowych mężczyzn, mężczyzn z nowotworami złośliwymi innych narządów, zdrowych kobiet i kobiet z nowotworami złośliwymi. 5.8 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 27

Wyłączne oznaczenie w surowicy nie może być trakwane jako test przesiewowy w kierunku raka prostaty, ponieważ podwyższone stężenie tego antygenu obserwuje się także u pacjentów z łagodnym przerostem gruczołu prostaty (BPH). 8 Z tych samych przyczyn nie poleca się go jako wskaźnika określającego stadium choroby. Połączenie oznaczenia i badania prostaty per rectum pod kontrolą ultrasonografu stanowi lepszą medę w wykryciu raka prostaty niż samo badanie palpacyjne. Pomiar daje wiele korzyści przewyższających badanie palpacyjne lub ultrasonograficzne: wynik jest obiektywny, ilościowy, nie zależy od umiejętności osoby badającej, i jest lepiej przyjmowany przez pacjentów. 9 Określenie poziomu może być przydatne w wykryciu przerzutów lub przewlekłej choroby u pacjentów po operacyjnym lub farmakologicznym leczeniu raka prostaty. 10,11 Utrzymujący się podniesiony poziom po leczeniu lub jego wzrost przed włączeniem leczenia świadczy o wznowie lub nieszczętnym wyleczeniu. 12 16 Dlatego też oznaczanie jest powszechnie uznawane za pomocne w określeniu postępowania z chorymi na raka prostaty. 12 16 Współistniejąca meda pomiaru PAP może starczyć datkowych informacji. 17 The American Cancer Society zaleca coroczne równoczesne oznaczanie we krwi i palpacyjne badanie gruczołu krokowego u mężczyzn od 50 roku życia, mężczyzn mających szansę co najmniej dziesięcioletniego przeżycia, jak również u młodszych z grupy ryzyka. Pacjenci powinni stawać informację o potencjalnym ryzyku choroby i korzyściach płynących z wczesnego jej rozpoznania i leczenia. Mężczyźni z grupy wysokiego ryzyka, u których dwoje lub więcej krewnych pierwszego spnia miało raka prostaty, powinni rozpocząć badania wcześniej, być może w wieku 45 lat. 27 Zasada Testu Immunoenzymatyczny, chemiluminescencyjny, test kanapkowy fazy stałej. Faza stała (kulka) opłaszczona jest kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-. Próbka badana i odczynnik inkubowane są z opłaszczona przeciwciałem anty- na kulce. obecny w próbce wiąże się z koniugatem fosfatazy alkalicznej (izolowanej z jelita cieląt) i mysiego przeciwciała monoklonalnego anty- i przeciwciałem spłaszczającym kulkę tworząc kompleks w postaci kanapki. Niezwiązany koniugat usuwany jest przez wirowanie i płukanie. Ostatecznie kulki dawany jest substrat chemiluminescencyjny, a wygenerowany sygnał jest proporcjonalny enzymu związanego z kulką. Czas Inkubacji: 1 30 minut Preparatyka Próbek Próbki powinny być pobierane przed biopsją, prostatekmią lub masażem prostaty, ponieważ zabiegi na gruczole mogą prowadzić wzrostu poziomu utrzymującego się 3 tygodni. 18 Wpływ badania palpacyjnego prostaty na poziom w surowicy nie jest jednoznacznie określony. 19,20 Jeśli możliwe, próbki należy pobierać przed badaniem palpacyjnym. Osocze EDTA nie jest zalecanym materiałem dla oznaczenia. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboraryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Na wynik oznaczenia może wpływać rodzaj probówek których pobierana jest krew. Istne znaczenia mają: producent i tworzywo oraz obecność lub brak bariery żelowej lub innego środka ułatwiającego oddzielenie surowicy, obecność aktywarów skrzepu oraz brak/obecność antykoagulantów. Wpływ wszystkich 28 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

wymienionych czynników na wynik testu IMMULITE 2000 nie jest znany. Wymagana objęść próbki: 10 µl surowicy Przechowywanie materiału: 48 godzin w 2 8 C lub dłużej w 20 C. 21 Ostrzeżenia i Warunki Wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w temp. 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym.w materiałach izolowanych z krwi ludzkiej wykluczono obecność: reaktywności w kierunku syfilisu, przeciwciał anty-hiv 1 i HIV 2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl, użyty jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może prowadzić wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka.) Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy Zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne wykonania oznaczenia. pojemnik z kulkami (L2PS12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych kozim przeciwciałem poliklonalnym specyficznym w ssunku. Stabilne w 2 8 C daty ważności. L2KPS2: 1 opakowanie L2KPS6: 3 opakowania - klin z odczynnikiem (L22) Oznaczony kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z mysim przeciwciałem monoklonalnym anty- w buforowanym roztworze ze środkiem konserwującym. Stabilny w temp. 2 8 C daty ważności. L2KPS2: 1 klin L2KPS6: 3 kliny Nie uszkadzając kodu kreskowego klina zerwij taśmę zabezpieczającą w okresie transportu przesuwne zamknięcie komór z odczynnikiem. Usuń tymczasowe foliowe uszczelnienie komór i wsuń zamknięcie komór na prowadnice w pokrywie klina. - kalibrary zestawu (LPSL, LPSH) Dwie fiolki (kalibrar niski i wysoki) zawierające po 1,5 ml w buforowanej matrycy surowicy kurczęcia, z konserwantami. Po otwarciu stabilne przez 30 dni w temp. 2 8 C lub 6 miesięcy w temp. 20 C (rozpipewane). L2KPS2: 1 zestaw L2KPS6: 2 zestawy Przed przystąpieniem kalibracji umocuj na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (starczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały Dostarczane Oddzielnie Rozcieńczalnik próbek - multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do aumatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka skoncentrowanej, gowej użycia, buforowanej matrycy białka zwierzęcego, z konserwantami. Stabilny w temp. 2 8 C przez 30 dni (po otwarciu) lub 6 miesięcy w temp. 20 C (rozpipewany). L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Nalepki z odpowiednimi kodami kreskowymi są starczane wraz z rozcieńczalnikiem. Nalepkę umieścić na probówce (16 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM : Roztwór czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek rozcieńczania próbek (16 100 mm) L2ZC: 250 korków probówek na rozcieńczalnik Ponad niezbędne Woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 29

Procedura Oznaczania Przestrzeganie procedur tyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operara obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygowania aparatu, ustawień aparatu, przygowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operara obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstliwości kontroli jakości. Ssować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca ssowanie stępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane warści analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizara lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboraryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane Warści w Rozpoznawaniu Raka Prostaty W badaniach retrospektywnych wykonanych w jednej z klinik przebadano surowice pochodzące od 477 mężczyzn w wieku 50 lat i starszych. Z pośród nich: 20 (4%) było Azjatami, 8 (2%) Afro-Amerykanami, 440 (92%) było rasy Kaukaskiej, 7 (< 1%) innej rasy a 2 (< 1%) nie starczyło danych etnicznych. Wszyscy pacjenci poddani zostali badaniu palpacyjnemu prostaty (DRE). U 52 spośród nich wykonano biopsję w związku z podniesionym poziomem (> 4,0 ng/ml) i/lub podejrzanym wynikiem DRE. Poniższa tabela podsumowuje badania kliniczne: Liczba badanych (%) Liczba biopsji (%) Wszyscy badani Liczba nowotworów złośliwych prostaty % Biopsji pozytywnych (środkowe 95%) 477 52 18 34,6% > 4,0 70 38 15 39,5% 14,7% 54,3% (24,0% 55,7%) DRE + 54 17 8 47,1% 11,3% 31,5% (25,3% 72,2%) > 4,0 DRE + 23 12 6 50,0% 4,8% 52,2% (23,6% 76,4%) 4,0 DRE + 31 5 2 40,0% 6,5% 16,1% (7,6% 81,1%) > 4,0 DRE 47 26 9 34,6% 9,9% 55,3% (18,0% 54,2%) 4,0 DRE 376 9 1 11,1% 78,8% 2,4% (0,3% 48,3%) Badania wykazały, że pomiar poziomu w surowicy w połączeniu z badaniem DRE jest bardziej efektywny w wykryciu raka prostaty niż wyłączne badanie DRE. Oznaczenie wykryło 50% (9/18) nowotworów złośliwych, które nie zostały rozpoznane w DRE. Wzrost poziomu powyżej 4 ng/ml, stanowi podstawę dla dalszych badań, nawet jeśli DRE daje wynik ujemny. Sytuacja odwrotna jest także możliwa: pacjent z podejrzeniem raka prostaty w DRE ale z prawidłowym poziomem także powinien zostać poddany dalszym badaniom, ponieważ DRE wykryło 11% (2/18) nowotworów złośliwych, których nie potwierdziły oznaczenia. W tych samych badaniach 376 uczestników zostało określonych jako bezobjawowi. Następna tabela przedstawia zależność pomiędzy poziomem i wiekiem badanych (podzielonych na dekady), u których zarówno pomiar jak i badanie DRE dały wynik ujemny (mężczyźni ci nie byli 30 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

poddani biopsji), jak również u pacjentów, u których nie stwierdzono raka prostaty w badaniu biopsyjnym. Ponieważ nie uzyskano pewności, że wszyscy badani rzeczywiście byli wolni od chorób prostaty wyniki tych badań powinny być trakwane z dużą ostrożnością. Nie ma bowiem pewności, że osoby objęte badaniami reprezentują populację zdrową. Obecnie nie ma więc danych wodzących, że zakresy referencyjne zależne od wieku są bezpieczne i skuteczne Rozkład poziomów n 95- mediana percentyle Wszyscy badani 376 0,78 2,98 50 59 lat życia 159 0,60 2,30 60 69 lat życia 143 0,91 2,84 70 lat życia 74 1,17 3,17 W badaniach przeprowadzonych w czterech klinikach uzyskano 2618 próbek pochodzących od 1965 osób. Poniżej przedstawiono wyniki oznaczeń w surowicy, które otrzymano przy użyciu medy IMMULITE. Ilość badanych/ próbek 0 4 ng/ml 4 10 10 20 20 40 ng/ml ng/ml ng/ml 40 ng/ml Kobiety 253/253 100% 0% 0% 0% 0% Zdrowe 149/149 100% 0% 0% 0% 0% Choroby nienowotworowe 28/28 100% 0% 0% 0% 0% Choroby nowotworowe 76/76 100% 0% 0% 0% 0% Zdrowi Mężczyźni 473/473 99,4% 0,6% 0% 0% 0% Choroby nienowotworowe 548/548 76,2% 19,3% 3,5% 0,9% 0% BPH (łagodny przerost) 333/333 67,9% 25,8% 5,4% 0,9% 0% Inne choroby prostaty 66/66 80,3% 18,2% 1,5% 0% 0% Inne choroby (nie prostaty) 149/149 93,2% 5,4% 0% 1,3% 0% Ilość badanych/ próbek 0 4 ng/ml Nowotwory inne niż prostaty 4 10 10 20 20 40 ng/ml ng/ml ng/ml 40 ng/ml 312/312 93,0% 6,1% 0,6% 0,3% 0% Rak prostaty (pojedyncze próbki) 274/274 42,3% 21,2% 13,1% 7,3% 16,1% Rak prostaty (wielokrotne badania) 105/758 54,8% 11,7% 10,7% 7,5% 15,3% Faza A 17/174 64,9% 9,8% 9,2% 3,5% 12,6% Faza B 31/200 54,0% 14% 12% 8,5% 11,5% Faza C 19/102 56,9% 6,9% 7,8% 8,8% 19,6% Faza D 38/282 48,2% 13,1% 11,7% 8,9% 18,0% W sumie: 1965/2618 1962 275 138 83 160 Powyższe warści należy trakwać jako orientacyjne. Każde laborarium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Stężenie w surowicy nie może być trakwane jako jednoznaczna przesłanka wskazująca na obecność lub nieobecność choroby nowotworowej. Oznaczenie w surowicy bez datkowych badań nie może być trakwane jako test przesiewowy w wykrywaniu choroby nowotworowej. 8 Prognozowanie nawrotu choroby nowotworowej prostaty powinno się opierać na kompletnej klinicznej ocenie pacjenta, której elementem mogą również być wyniki serii oznaczeń w surowicy. Próbki powinny być pobierane przed biopsją, prostatekmią lub masażem prostaty, ponieważ zabiegi na gruczole mogą prowadzić wzrostu poziomu utrzymującego się 3 tygodni. 18 Ekspresja może ulec zmianie pod wpływem terapii hormonalnej raka prostaty. W związku z tym, niskie stężenie w trakcie terapii mogą maskować IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 31

obecność szczątkowego nowotworu lub wznowę. 25 Niektórzy pacjenci posiadają przeciwciała przeciw białku mysiemu, mogące fałszować wyniki oznaczeń immunotestów, w których mysie przeciwciała zassowane są jako odczynniki. Szczególnie próbki pochodzące od chorych otrzymujących w celach diagnostycznych lub terapeutycznych preparaty zawierające mysie przeciwciała monoklonalne, mogą zawierać ludzkie przeciwciała anty-mysie (HAMA). 22-24 Tak więc wyniki oznaczeń wykonanych w próbkach zawierających HAMA przy pomocy testów, w których mysie przeciwciała monoklonalne pełnią rolę odczynników, mogą być fałszywe. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Bosca LM, Stuart MC Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34:27-33.] Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni bór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. Parametry Testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki podano w ng/ml. O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki tyczą próbek pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie. Zakres pracy: 0,04 150 ng/ml [WHO NIBSC 1st IS 96/670] Czułość Analityczna: 0,04 ng/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje stężenia 22 500 ng/ml Precyzja: Próbki teswano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela precyzji). Wyniki wyrażone są w ng/ml. W serii Całość Średnia SD CV SD CV 1 2,8 0,10 3,6% 0,14 5,0% 2 7,4 0,23 3,1% 0,36 4,9% 3 11,4 0,34 3,0% 0,60 5,3% 4 25 0,70 2,8% 1,1 4,4% 5 65 1,4 2,2% 2,5 3,9% 6 126 3,2 2,5% 4,7 3,7% Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom. Wyniki wyrażone są w ng/ml. Rozcieńczenie Zmierzone Oczekiwane %Z/O 1 16 w 16 1,03 8 w 16 0,48 0,52 92% 4 w 16 0,23 0,26 91% 2 w 16 0,13 0,13 100% 1 w 16 0,06 0,06 100% 2 16 w 16 7,8 8 w 16 3,96 3,90 101% 4 w 16 2,05 1,95 105% 2 w 16 0,98 0,98 100% 1 w 16 0,51 0,49 105% 3 16 w 16 27,2 8 w 16 13,9 13,6 102% 4 w 16 7,0 6,8 103% 2 w 16 3,6 3,4 106% 1 w 16 1,7 1,7 100% 4 16 w 16 99 8 w 16 48 50 96% 4 w 16 25 25 100% 2 w 16 13 12 108% 1 w 16 6,7 6,2 108% 5 16 w 16 126 8 w 16 61 63 97% 4 w 16 33 32 103% 2 w 16 17 16 106% 1 w 16 8,9 7,9 113% 32 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w ssunku objęściowym 1 19 roztworami o stężeniach, kolejno: 107, 208, 653 i 817 ng/ml. Roztwór Zmierzone Oczekiwane %Z/O 1 0,46 A 6,0 5,8 103% B 11,2 10,8 104% C 33 33 100% D 42 41 102% 2 6,4 A 11,8 11,5 103% B 16 17 94% C 42 39 108% D 49 47 104% 3 26 A 28 30 93% B 32 35 91% C 56 58 97% D 65 66 98% Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność krwinek czerwonych w stężeniu 30 μl/ml nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu 5000 mg/dl nie wpływają na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w ssunku, z niską reakcją krzyżową z innymi naturalnymi składnikami surowicy oraz ewentualnymi chemioterapeutykami Składnik Ilość dana ng/ml % reaktywności krzyżowej AFP 10 000 Nieoznaczalny Amfoteryna 100 000 Nieoznaczalny CEA 100 Nieoznaczalny Cisplatyna 100 000 Nieoznaczalny Cyklofosfamid 1 000 000 Nieoznaczalny Dietylostilbestrol 10 000 000 Nieoznaczalny Doxazosin mesylate Doxorubicin Hydrochloride 1 000 000 Nieoznaczalny 100 000 Nieoznaczalny Ferrytyna 10 000 Nieoznaczalny Finasteride 10 000 000 Nieoznaczalny 5-Fluorouracyl 1 000 000 Nieoznaczalny Flutamide 100 000 Nieoznaczalny HCG 10 000 Nieoznaczalny Lakalbumina 1 000 000 Nieoznaczalny Leuprolide acetate 100 000 Nieoznaczalny Megesterol 1 000 000 Nieoznaczalny Mimycyna C 100 000 Nieoznaczalny PAP 1000 Nieoznaczalny Prolaktyna 500 Nieoznaczalny Vinkrystyna 1 000 000 Nieoznaczalny Porównanie med: Wszystkie cztery medy nieizopowego oznaczania w surowicy były porównane z zassowaniem regresji Deminga. Użyte próbki mieściły się w zakresach liniowości med; X-kolumny, Y-rzędy. IMMULITE IML IML 2000 IML Trzeciej Generacji IML 2000 Trzeciej Generacji n 477 474 473 Nachylenie (95% poziom ufności) Odchylenie (95% poziom ufności) Współczyn. korelacji 0,94 (0,93 0,95) 0,11 ( 0,15 0,07) 0,99 (0,98 1,00) 0,05 (0,02 0,09) 1,08 (1,07 1,10) 0,06 (0,02 0,11) 0,992 0,993 0,991 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 33

IML IMMULITE 2000 IML 2000 IML Trzeciej Generacji IML 2000 Trzeciej Generacji n 477 474 473 Nachylenie (95% poziom ufności) Odchylenie (95% poziom ufności) Współczyn. korelacji 1,06 (1,05 1,08) 0,12 (0,08 0,16) 1,06 (1,05 1,08) 0,15 (0,11 0,20) 1,16 (1,14 1,17) 0,18 (0,14 0,23) 0,992 0,988 0,990 IMMULITE Trzeciej Generacji n 474 474 472 Nachylenie (95% poziom ufności) Odchylenie (95% poziom ufności) Współczyn. korelacji 1,01 (1,00 1,03) 0,06 ( 0,09 0,02) 0,94 (0,93 0,96) 0,15 ( 0,19 0,10) 1,10 (1,09 1,11) 0,00 ( 0,05 0,05) 0,993 0,988 0,990 IMMULITE 2000 Trzeciej Generacji n 473 473 472 Nachylenie (95% poziom ufności) Odchylenie (95% poziom ufności) Współczyn. korelacji 0,92 (0,91 0,94) 0,06 ( 0,10 0,02) 0,86 (0,85 0,87) 0,16 ( 0,20 0,12) 0,91 (0,90 0,92) 0,00 ( 0,04 0,04) 0,991 0,990 0,990 Wykres ilustruje porównanie pomiędzy IMMULITE 2000 i IMMULITE w grupie 477 próbek badanych. (Zakres stężeń od nieoznaczalnych około 20 ng/ml.) Uzyskano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,94 (IML) 0,11 ng/ml r = 0,992 Średnie: 2,05 ng/ml (IMMULITE 2000) 2,30 ng/ml (IMMULITE) IMMULITE 2000 25 20 15 10 5 0 y = 0.9396x - 0.1123 0 5 10 15 20 25 IMMULITE Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybur udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. 2014 Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingm 2014-12-02 PIEL2KPS 5 {19} Changes in this Edition: cc#eu21848, cc#eu21848b: Removed Siemens control (TMCO) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. Removed US-specific information. Added additional information the Principle of the Procedure section. 34 IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02)

Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Aurizované zasupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Auryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej LOT Symbol Definition En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii IMMULITE 2000 (PIEL2KPS-5 {19}, 2014-12-02) 35