Third Generation TSH. For use on IMMULITE 2000 systems

Third Generation TSH For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 Third Generation TSH English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of thyrotropin (TSH) in serum, as an aid in the clinical assessment of thyroid status. Catalog Numbers: L2KTS2 (200 tests) L2KTS3M (3000 tests) L2KTS6 (600 tests) L2KTS6M (6000 tests) Test Code: TSH Color: Red Summary and Explanation Thyroid stimulating hormone (thyrotropin, TSH) is a pituitary hormone which, through its action on the thyroid gland, plays a major role in maintaining normal circulating levels of the iodothyronines, T4 and T3. TSH is controlled by negative feedback from circulating T4 and T3, and by the hypothalamic hormone TRH (thyrotropin releasing hormone). TSH exhibits a small circadian rhythm. In primary hypothyroidism, where there is impaired production of thyroid hormones, the TSH level is typically highly elevated. In secondary or tertiary hypothyroidism, on the other hand, where thyroid hormone production is low as a consequence of pituitary or hypothalamic lesions, the TSH level is usually low. In hyperthyroidism, the TSH level is typically suppressed to subnormal levels. Less often, this condition may result from hyperstimulation of the thyroid, due to hypothalamic or pituitary lesions, in which case the TSH level is usually increased. Measurement of circulating TSH has been used as a primary test for differential diagnosis of hypothyroidism and as an aid in monitoring the adequacy of thyroid hormone replacement therapy. It should be remembered that hyperthyroidism and hypothyroidism are graded conditions. This implies that not all patients in these disease categories can be expected to have TSH levels far outside the euthyroid range. On the other hand, TSH levels exit the euthyroid reference range in the very early phases of developing thyroid disease, while the patient's disease is still subclinical and thyroid hormone levels remain within their euthyroid reference ranges. Research studies have found that the apparently healthy patients with TSH >2.0 µiu/ml have increased risk to develop thyroid diseases in the next 20 years. It has been suggested that it is likely that the upper limit of the serum TSH euthyroid reference range will be reduced to 2.5 µiu/ml because >95% of rigorously screened normal euthyroid volunteers have serum TSH values between 0.4 and 2.5 µiu/ml. 7 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Third Generation TSH is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 1 60 minutes. Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. EDTA plasma should not be used as a sample type. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Third Generation TSH 2 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 75 µl serum. Storage: 5 days at 2 8 C, or 1 month at 20 C. 1 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. TSH Bead Pack (L2TS12) With barcode. 200 beads, coated with monoclonal murine anti-tsh antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KTS2: 1 pack. L2KTS3M: 15 packs. L2KTS6: 3 packs. L2KTS6M: 30 packs. TSH Reagent Wedge (L2TSA2) With barcode. 23 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to polyclonal goat anti-tsh antibody in buffer (with preservative), dispensed equally into chambers A and B. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KTS2: 1 wedge. L2KTS3M: 15 wedges. L2KTS6: 3 wedges. L2KTS6M: 30 wedges. Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. TSH Adjustors (LTSL, LTSH) Two vials (Low and High) of lyophilized human TSH in a serum/buffer matrix. Reconstitute each vial with 4.0 ml distilled or deionized water. Let stand for 30 minutes, then mix by gentle swirling or inversion. Stable at 2 8 C for 30 days, after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KTS2: 1 set. L2KTS3M: 3 sets. L2KTS6: 2 sets. L2KTS6M: 4 sets. Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately TSH Sample Diluent (L2TSZ) For on-board dilution of high samples. 25 ml of concentrated (ready-to-use) TSH-free serum/buffer matrix. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or 6 months (aliquotted) at 20 C. Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 100 mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2TSZ: 3 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps CON6: Tri-level, multi-constituent control LTGCM: Third Generation TSH Control (single-level, low control) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 3

See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks. Quality Control Samples: Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of TSH. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Third Generation TSH (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same euthyroid reference range: Euthyroid: 0.4 4 µiu/ml TSH levels in frank hyperthyroidism are typically less than 0.01 µiu/ml. Values between 0.01 µiu/ml and 0.4 µiu/ml should be further evaluated, as they may indicate borderline hyperthyroidism, or may be due to severe nonthyroidal illness (NTI) or acute drug therapy. 1 A cross-sectional study of pediatric thyroid values performed with IMMULITE Third Generation TSH at a wellness clinic in the southwestern United States yielded the following results. Age (years) Median (µiu/ml) Central 95% Range 1.0 2.09 0.40 8.6 2.0 1.85 0.36 7.6 3.0 1.65 0.33 6.7 4.0 1.62 0.33 6.3 5.0 1.59 0.34 6.1 6.0 1.58 0.34 6.0 7.0 1.57 0.35 5.8 8.0 1.56 0.35 5.7 9.0 1.55 0.35 5.6 10.0 1.54 0.36 5.5 11.0 1.53 0.36 5.5 12.0 1.53 0.36 5.4 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations The IMMULITE 2000 Third Generation TSH assay is not indicated for use with neonatal blood spots for newborn screening. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in µiu/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: Up to 75 µiu/ml (WHO 2nd IRP 80/558). Analytical Sensitivity: 0.004 µiu/ml. High-Dose Hook Effect: None up to 14,000 μiu/ml Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three TSH solutions (273, 1,387 and 3,290 µiu/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for TSH. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no 4 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of packed red blood cells in concentrations up to 30 µl/ml has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 5,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 10 volunteers into plain, heparinized, EDTA and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. All samples were assayed by the IMMULITE 2000 Third Generation TSH procedure. By linear regression: (Heparin) = 0.95 (Serum) + 0.06 µiu/ml r = 0.999 (EDTA) = 0.64 (Serum) + 0.02 µiu/ml r = 0.998 (SST) = 0.99 (Plain Tubes) 0.11 µiu/ml r = 0.991 Means: 1.65 µiu/ml (Serum) 1.62 µiu/ml (Heparin) 1.07 µiu/ml (EDTA) 1.52 µiu/ml (SST) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Third Generation TSH on 106 samples. (Concentration range: approximately 0.006 to 60 µiu/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.94 (IML) + 0.23 µiu/ml r = 0.985 Means: 6.4 µiu/ml (IMMULITE 2000) 6.5 µiu/ml (IMMULITE) References 1) Hay ID, Bayer MF, et al. American Thyroid Association assessment of current free thyroid hormone and thyrotropin measurements and guidelines for future clinical assays. Clin Chem 1991;37:2002-8. 2) Lindstedt G, et al. Clinical use of laboratory thyroid tests and investigations. JIFCC 1994;6:136-41. 3) Mandel SJ, Brent GA, Larsen PR. Levothyroxine therapy in patients with thyroid disease. Ann Intern Med 1993;119:492-502. 4) Singer PA, Cooper DS, et al. Treatment guidelines for patients with hyperthyroidism and hypothyroidism. JAMA 1995;273:808-12. 5) Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M, et al. Interlaboratory/intermethod differences in functional sensitivity of immunometric assays of thyrotropin (TSH) and impact on reliability of measurement of subnormal concentrations of TSH. Clin Chem 1995;41:367-74. 6) Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M. Current status and performance goals for serum thyrotropin (TSH) assays. Clin Chem 1996;42:140-5. 7) Baloch Z, Carayon P, Conte-Devolx B, Demers LM, Feldt-Rasmussen U, Henry JF, et al.; Guidelines Committee, National Academy of Clinical Biochemistry (NACB). Laboratory medicine practice guidelines (LMPG). Laboratory support for the diagnosis and monitoring of thyroid disease. Thyroid 2003 Jan;13(1):3-126. Also available at http://www.nacb.org/lmpg/thyroid_lmpg_word. stm (accessed January 2005). Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (µiu/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 0.016 0.002 12.5% 0.002 12.5% 2 0.32 0.017 5.3% 0.017 5.3% 3 1.3 0.05 3.8% 0.06 4.6% 4 3.3 0.13 3.9% 0.16 4.8% 5 7.3 0.37 5.1% 0.37 5.1% 6 19 0.73 3.8% 0.85 4.5% 7 39 2.0 5.1% 2.5 6.4% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 5

Linearity (µiu/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 16 in 16 5 6.4 8 in 16 3.1 3.2 97% 4 in 16 1.6 1.6 100% 2 in 16 0.86 0.80 108% 1 in 16 0.42 0.40 105% 2 16 in 16 21 8 in 16 10.3 10.6 97% 4 in 16 4.7 5.3 89% 2 in 16 2.4 2.6 92% 1 in 16 1.1 1.3 85% 3 16 in 16 58 8 in 16 30 29 103% 4 in 16 15 15 100% 2 in 16 7.6 7.3 104% 1 in 16 3.7 3.6 103% Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 16 v 16. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 %O/E, 5 16 στα 16. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 %Z/O, 5 16 w 16. Specificity ng/ml % Cross Compound 1 Added 2 reactivity 3 FSH 100 ND LH 200 ND HCG 1,000 ND ND: Not detectable. 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 Nieoznaczlne. Method Comparison Recovery (µiu/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 0.72 A 14 14 100% B 71 70 101% C 166 165 101% 2 4.7 A 18 18 100% B 75 74 101% C 164 169 97% 3 7.2 A 20 20 100% B 78 76 103% C 173 171 101% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 %O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 %Z/O. (IML 2000) = 0.94 (IML) + 0.23 µiu/ml r = 0.985 English. Third Generation TSH Česky. 3. Generace TSH. Ελληνικά. Τρίτης γενιάς TSH. Polski. TSH Trzeciej Generacji. Česky IMMULITE 2000 3. Generace TSH Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace tyreotropinu (TSH) v séru, jakožto pomůcky při klinickém hodnocení stavu štítné žlázy. Katalogová čísla: L2KTS2 (200 stanovení) L2KTS6 (600 stanovení) L2KTS3M (3 000 stanovení) L2KTS6M (6 000 stanovení) 6 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

Kód Metody: TSH Barva: Červená Shrnutí a vysvětlení Hormon stimulující štítnou žlázu (tyreotropin, TSH) je hormonem hypofýzy, který prostřednictvím svého působení na štítnou žlázu hraje hlavní úlohu při udržování normální úrovně cirkulujících jodotyreoninů, T4 a T3. TSH je regulován negativní zpětnou vazbou cirkulujícími T4 a T3 a hypotalamickým hormonem TRH (thyrotropin releasing hormone). Koncentrace TSH v rámci dne mírně kolísá. U primární hypotyreózy, kdy je narušená tvorba hormonů štítné žlázy, je množství TSH typicky velmi zvýšené. Na druhé straně, u sekundární nebo terciární hypotyreózy, kdy je tvorba hormonů štítné žlázy nízká z důvodu léze hypofýzy nebo hypotalamu, je koncentrace TSH obvykle nízká. U hypertyreózy je množství TSH typicky stlačené pod normální úroveň. Méně často může tento stav být výsledkem hyperstimulace štítné žlázy z důvodu léze hypotalamu nebo hypofýzy a tehdy je koncentrace TSH obyčejně zvýšená. Měření cirkulujícího TSH se používá jako primární test diferenciální diagnostiky hypotyreózy a jako pomůcka při monitorování přiměřenosti substituční terapie hormonů štítné žlázy. Je třeba mít na paměti, že hyper a hypotyreóza jsou odstupňované stavy. Z toho vyplývá, že ne všichni pacienti s těmito chorobami budou mít koncentraci TSH zcela mimo eutyroidní rozmezí. Na druhé straně, koncentrace TSH opouští eutyroidní referenční rozmezí už v raných fázích rozvíjejícího se onemocnění štítné žlázy, ještě když je pacientovo onemocnění subklinické a hladina hormonů štítné žlázy se pohybuje v rámci jejich eutyroidního referenčního rozmezí. Výzkumné studie prokázaly, že je zvýšené riziko výskytu tyroidního onemocnění během příštích 20 let u evidentně zdravých jedinců s hladinou TSH > 2,0 µiu/ml. Je proto doporučeno snížit horní limit eutyroidního referenčního rozmezí na 2,5 µiu/ml, protože více než 95% pravidelně sledované skupiny normálních eutyroidních dobrovolníků mělo hodnoty TSH v rozmezí mezi 0,4 až 2,5 µiu/ml. 7 Princip stanovení Stanovení 3. generace TSH na analyzátorech IMMULITE 2000 je oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly: 1 60 minut. Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. EDTA plazmu nepoužívejte jako typ vzorku. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení 3. generace TSH na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku: 75 µl séra. Skladování: 5 dní při teplotě 2 8 C nebo 1 měsíc při teplotě 20 C. 1 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 7

syfylis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. TSH zásobník s kuličkami (L2TS12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti TSH. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KTS2: 1 balení. L2KTS3M: 15 balení. L2KTS6: 3 balení L2KTS6M: 30 balení. TSH reagencie (L2TSA2) Opatřeno čárovým kódem. 23 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální kozí protilátkou proti TSH v pufru, s konzervačním prostředkem, rovnoměrně rozdělené do komor A a B. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KTS2: 1 nádobka. L2KTS3M: 15 nádobek. L2KTS6: 3 nádobky. L2KTS6M: 30 nádobek. Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. TSH kalibrátory (LTSL, LTSH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného lidského TSH v sérovém/pufrovaném matrixu. Rekonstituujte každou ampulku přidáním 4,0 ml destilované nebo deionizované vody. Nechte stát 30 minut, pak míchejte mírným překlápěním nebo inverzí. Stabilní 30 dní po rekonstituci při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. L2KTS2: 1 sada. L2KTS6: 2 sady. L2KTS3M: 3 sady. L2KTS6M: 4 sady. Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť TSH diluent vzorků (L2TSZ) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. 25 ml koncentrovaného (připraveného k použití) sérového/pufrovaného matrixu bez TSH. Skladování: 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při teplotě 20 C. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku 16 100 mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2TSZ: 3 štítky L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT: 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků (16 100 mm) L2ZC: 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků CON6: Trojúrovňová vícesložková kontrola LTGCM: Kontrola 3. generace TSH (jednoúrovňová, s nízkou koncentrací) Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 4 týdny. 8 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

Vzorky ke kontrole kvality: Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) TSH. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti tohoto stanovení s testem 3. generace TSH na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je možné očekávat prakticky stejné eutyroidní referenční rozmezí: Eutyreóza: 0,4 4 µiu/ml Množství TSH u klinicky zjištěné hypertyreózy je typicky nižší než 0,01 µiu/ml. Hodnotu mezi 0,01 µiu/ml a 0,4 µiu/ml je třeba dále zhodnotit, protože může znamenat hraniční hypertyreózu, nebo může být důsledkem závažného onemocnění jiného než je onemocnění štítné žlázy nebo důsledkem akutní léčby nějakým preparátem. 1 Průřezová studie u dětí provedená pomocí testu 3. generace TSH na analyzátoru IMMULITE na "wellness" klinice na jihozápadě Spojených států poskytla následující výsledky: Věk (roky) Medián (µiu/ml) Střední 95% rozmezí 1,0 2,09 0,40 8,6 2,0 1,85 0,36 7,6 3,0 1,65 0,33 6,7 4,0 1,62 0,33 6,3 5,0 1,59 0,34 6,1 6,0 1,58 0,34 6,0 7,0 1,57 0,35 5,8 8,0 1,56 0,35 5,7 9,0 1,55 0,35 5,6 10,0 1,54 0,36 5,5 11,0 1,53 0,36 5,5 12,0 1,53 0,36 5,4 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Stanovení 3. generace TSH na analyzátorech IMMULITE 2000 není určeno pro testování kapek krve v rámci screeningu novorozenců. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v µiu/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah: Do 75 µiu/ml (WHO 2nd IRP 80/558). Analytická citlivost: 0,004 µiu/ml. High-Dose Hook Effect: Do 14 000 µiu/ml žádný. Přesnost: Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Precision.) Linearita: Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearity.) Zpětná výtěžnost: Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků TSH (273, 1 387 a 3 290 µiu/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Recovery.) Specificita: Protilátka je silně specifická vůči TSH. (Viz tabulka "Specificity".) Bilirubin: Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 9

Hemolýza: Přítomnost červených krvinek oddělených od plazmy v koncentracích do 30 µl/ml nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 5 000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku: K určení vlivu použití alternativních typů vzorků byla odebrána krev 10 dobrovolníkům do obyčejných, heparinizovaných, EDTA a Becton Dickinson SST vacutainer zkumavek. Všechny vzorky byly stanovené testem 3. generace TSH na analyzátorech IMMULITE 2000. Podle lineární regrese: (Heparin) = 0,95 (Sérum) + 0,06 µiu/ml r = 0,999 (EDTA) = 0,64 (Sérum) + 0,02 µiu/ml r = 0,998 (SST) = 0,99 (obyčejné zkumavky) 0,11 µiu/ml r = 0,991 Střední hodnoty: 1,65 µiu/ml (Sérum) 1,62 µiu/ml (Heparin) 1,07 µiu/ml (EDTA) 1,52 µiu/ml (SST) Srovnání metody: Stanovení bylo porovnáno s testem 3. generace TSH na analyzátoru IMMULITE od na 106 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně 0,006 až 60 µiu/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese: (IML 2000) = 0,94 (IML) + 0,23 µiu/ml r = 0,985 Střední hodnoty: 6,4 µiu/ml (IMMULITE 2000) 6,5 µiu/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά Τρίτης γενιάς TSH Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της θυρεοτροπίνης (TSH) στον ορό, ως βοήθημα στην κλινική αποτίμηση της κατάστασης του θυρεοειδούς Αριθμοί Καταλόγου: L2KTS2 (200 αναλύσεις) L2KTS6 (600 αναλύσεις) L2KTS3M (3000 αναλύσεις) L2KTS6M (6000 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: TSH Χρώμα: Κόκκινο Περίληψη και επεξήγηση Η θυρεοτροπίνη (TSH) είναι μια ορμόνη της υπόφυσης η οποία ενεργώντας στον θυρεοειδή αδένα παίζει σημαντικό ρόλο στην διατήρηση φυσιολογικών επιπέδων των κυκλοφορουσών ορμονών Τ3 και T4. Η TSH ελέγχεται από αρνητική ανάδραση από τις κυκλοφορούσες Τ3,Τ4 και από την ορμόνη του υποθαλάμου TRH (Ορμόνη αποδέσμευσης της TSH). Η TSH παρουσιάζει μικρό κιρκάδιο ρυθμό. Στον πρωτογενή υποθυρεοειδισμό, που εξασθενεί η παραγωγή των ορμονών του θυρεοειδούς, τα επίπεδα της TSH είναι υψηλά. Στον δευτερογενή ή τριτογενή υποθυρεοειδισμό από την άλλη, όπου η παραγωγή των ορμονών του θυρεοειδούς είναι χαμηλή ως αποτέλεσμα βλάβης της υπόφυσης ή του υποθαλάμου, τα επίπεδα της TSH είναι συνήθως χαμηλά. Στον υπερθυρεοειδισμό, τα επίπεδα της TSH είναι κατεσταλμένα σε χαμηλά επίπεδα. Λιγότερο συχνά, αυτή η κατάσταση μπορεί να προέρχεται από υπερδιέγερση του θυρεοειδούς εξαιτίας κάποιας βλάβης της υπόφυσης ή του υποθαλάμου, κατά την οποία η TSH εμφανίζεται αυξημένη. Η μέτρηση της κυκλοφορούσης TSH χρησιμοποιείται ως πρώτη τη τάξει εξέταση για την διαφορική διάγνωση του υποθυρεοειδισμού και ως βοήθημα στον έλεγχο επάρκειας της θεραπείας με ορμονική αναπλήρωση. Πρέπει να θυμόμαστε ότι ο υπέρ- και ο υπόθυρεοειδισμός είναι διαβαθμισμένες καταστάσεις. Αυτό υποδηλώνει ότι δεν 10 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

αναμένεται ότι όλοι οι ασθενείς αυτών των κατηγοριών θα έχουν επίπεδα TSH μακράν εκτός του φυσιολογικού (ευθυρεοειδικού) εύρους. Από την άλλη μεριά, τα επίπεδα της TSH είναι μη φυσιολογικά στα πολύ πρώιμα στάδια ανάπτυξης κάποιας νόσου του θυρεοειδούς και ενώ η ασθένεια θεωρείται ακόμη υποκλινική τα δε επίπεδα των ορμονών του θυρεοειδούς παραμένουν φυσιολογικά. Έρευνες έδειξαν ότι οι φαινομενικά υγιείς ασθενείς με τιμές TSH > 2,0 μiu/ml παρουσιάζουν αυξημένο κίνδυνο να αναπτύξουν θυρεοειδικές νόσους τα επόμενα 20 χρόνια. Έχει προταθεί ότι είναι πολύ πιθανό το άνω όριο του ευθυρεοειδικού εύρους του ορού TSH να μειώνεται στο 2,5 μiu/ml επειδή >95% των αυστηρά εξεταζόμενων ευθυρεοειδικών εθελοντών έχουν TSH τιμές ορού μεταξύ 0,4 και 2,5 μiu/ml. 7 Αρχή της διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Τρίτης γενιάς TSH είναι μια ξηρής φάσης, δι-φασική (two-site) χημειοφωταυγής ανοσομετρική εξέταση. Κύκλοι Επώασης: 1 60 λεπτά. Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Το EDTA πλάσμα δεν πρέπει να χρησιμοποιείται ως τύπος δείγματος. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Τρίτης γενιάς TSH δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος ανά τεστ: 75 µl ορός. Αποθήκευση: 5 μέρες στους 2 8 C, ή 1 μήνα στους 20 C. 1 Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για διαγνωστική in vitro χρήση Αντιδραστήρια : Αποθηκεύετε στους 2 8 C. Καταστρέψτε σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. Ακολουθείτε τις κοινές οδηγίες και μεταχειρίζεστε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς λοιμωδών ασθενειών. Τα ανθρώπινου αίματος προέλευσης υλικά που χρησιμοποιούνται στην παρασκευή αυτού του κιτ εξετάστηκαν για σύφιλη, για αντισώματα έναντι Human Immunodeficiency Virus (HIV) 1 και 2, για ηπατίτιδας B αντιγόνο επιφανείας, και για αντισώματα ηπατίτιδας C και βρέθηκαν αρνητικά. Αζίδιο του Νατρίου έχει προστεθεί σε συγκέντρωση μικρότερη του 0,1 g/dl,σαν συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Το υπόστρωμα χημειοφωταύγειας είναι φωτοευαίσθητο και δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Δεν πρέπει να μολυνθεί. Προσφύγετε στο εσώκλειστο για λεπτομέρειες. Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 11

TSH σε συσκευασία σφαιριδίων (L2TS12) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια καλυμμένα με μονοκλωνικά αντί TSH αντισώματα ποντικού. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία L2KTS2: 1 συσκευασία. L2KTS6: 3 συσκευασίες. L2KTS3M: 15 συσκευασίες. L2KTS6M: 30 συσκευασίες. TSH Δοχείο Αντιδραστηρίου (L2TSA2) Με γραμμογράφηση. 23 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης σε πολυκλωνικό αντί-tsh αντίσωμα κατσίκας, σε ρυθμιστικό(με συντηρητικό) διανεμημένη ισότιμα στους θαλάμους Α και Β. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία L2KTS2: 1 δοχείο. L2KTS6: 3 δοχεία. L2KTS3M: 15 δοχεία. L2KTS6M: 30 δοχεία. Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί το πλαστικό κάλυμμα ή η γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. TSH Ρυθμιστές (LTSL, LTSH) Δύο φιαλίδια (Χαμηλό και Υψηλό) λυοφιλοποιημένης ανθρώπινης TSH σε μήτρα ορού/ρυθμιστή. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλιδίου με 4,0 ml δισαπεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Αφήστε για 30 λεπτά και ανακινήστε με απαλές κινήσεις ή με αναστροφή. Αποθηκεύονται στο ψυγείο: στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση. Για μακροβιότερη αποθήκευση, διαχωρίστε και καταψύξτε: σταθερά στους 20 C για 6 μήνες. L2KTS2: 1 σετ L2KTS6: 2 σετ. L2KTS3M: 3 σετ. L2KTS6M: 4 σετ. Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) στους δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά Του Kit που Προμηθεύονται ξεχωριστά Αραιωτικό TSH (L2TSZ) Για την αραίωση, επί του οργάνου, των δειγμάτων με υψηλή συγκέντρωση. 25 ml συμπυκνωμένης έτοιμης προς χρήση μήτρας ορού/ ρυθμιστικού δίχως TSH. Διατηρείται για 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. Χωριστές γραμμογραφημένες ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με το Αραιωτικό. Πριν την χρήση τοποθετείστε την κατάλληλη ετικέτα σε ένα σωληνάριο 16 100 mm, ούτως ώστε η ετικέτα να μπορεί να διαβαστεί από τον αναγνώστη των γραμμογραφήσεων. L2TSZ: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για διάλυση του δείγματος (16 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες διάλυσης δείγματος CON6: Τριών επιπέδων, πολυσυστατικό δείγμα ελέγχου LTGCM: Έλεγχος Τρίτης γενιάς TSH (ενός επιπέδου για πολύ χαμηλές συγκεντρώσεις TSH). Χρειάζονται επίσης: Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ποιότητας, γυάλινα σωληνάρια. Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες. Δείγματα ελέγχου ποιότητας: Χρησιμοποιείτε δείγματα ελέγχου ποιότητας σε δύο τουλάχιστον 12 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

επίπεδα(χαμηλό και υψηλό) συγκέντρωσης της TSH. Αναμενόμενες τιμές Βασιζόμενη στην σχέση με την IMMULITE Τρίτης γενιάς TSH της (βλ. Σύγκριση Μεθόδων), η εξέταση αναμένεται να έχει τις ίδιες τιμές αναφοράς: Ευθυρεοειδή άτομα: 0,4 4 µiu/ml Τα επίπεδα της TSH σε διαπιστωμένα υπερθυρεοειδικά δείγματα είναι συνήθως κάτω από 0,01 µiu/ml. Τιμές μεταξύ 0,01 µiu/ml και 0,4 µiu/ml πρέπει να εκτιμηθούν περαιτέρω, καθότι μπορεί να δηλώνουν οριακό υπερθυρεοειδισμό, ή μπορεί να προέρχονται από οξεία ασθένεια όχι του θυρεοειδούς ή από έντονη θεραπεία με φάρμακα. 1 Μια διατμηματική έρευνα σε παιδιά που εκτελέστηκε με την IMMULITE Τρίτης γενιάς TSH σε μια κλινική τύπου wellness των νοτιοδυτικών ΗΠΑ έδωσε τα παρακάτω αποτελέσματα Ηλικία (χρόνια) Ενδιάμεση τιμή (µiu/ml) Μέσο εύρος 95% (µiu/ml) 1,0 2,09 0,40 8,6 2,0 1,85 0,36 7,6 3,0 1,65 0,33 6,7 4,0 1,62 0,33 6,3 5,0 1,59 0,34 6,1 6,0 1,58 0,34 6,0 7,0 1,57 0,35 5,8 8,0 1,56 0,35 5,7 9,0 1,55 0,35 5,6 10,0 1,54 0,36 5,5 11,0 1,53 0,36 5,5 12,0 1,53 0,36 5,4 Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά στα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς για την διαγνωστική εκτίμηση των αποτελεσμάτων των ασθενών. Περιορισμοί Η IMMULITE 2000 Τρίτης γενιάς TSH δεν συνιστάται για χρήση σε νεογνικά δείγματα αίματος για παρακολούθηση (screening) νεογέννητων. Τα ετεροφιλικά αντισώματα που περιέχονται στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιλαμβάνονται στα συστατικά της εξέτασης έχοντας ως αποτέλεσμα την παρεμβολή τους στις ανοσομετρικές εξετάσεις in vitro. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα από ανθρώπους που εκτίθενται συχνά σε ζώα ή σε προϊόντα ορού ζώων μπορεί να έχουν τέτοια παρεμβολή και ως εκ τούτου λανθασμένο αποτέλεσμα. Τα αντιδραστήρια σχεδιάστηκαν έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται αυτός ο κίνδυνος; παρόλα αυτά ενδεχόμενες αλληλεπιδράσεις μεταξύ κάποιων σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης μπορεί να συμβούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης πρέπει πάντοτε να συνδυάζονται με την κλινική εξέταση, το ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Δείτε παρακάτω τους πίνακες και τα γραφικά που αναπαριστούν την απόδοση της εξέτασης. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε µiu/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος Καμπύλης (Calibration): Μέχρι 75 µiu/ml (WHO 2nd IRP 80/558). Ευαισθησία: 0,004 µiu/ml. Φαινόμενο Hook: Δεν εμφανίζεται μέχρι τις 14000 μiu/ml Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision ) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις (Βλ. Πίνακα Linearity ). Ανάκτηση: Κάποια δείγματα εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα TSH (273, 1387 και 3290 µiu/ml) και αναλύθηκαν (Βλ. Πίνακα Recovery για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). Ειδικότητα: Το αντίσωμα είναι εξαιρετικά ειδικό για TSH (Βλ. Πίνακα Specificity για αντιπροσωπευτικά δεδομένα). IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 13

Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία ερυθρών αιμοσφαιρίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 30 μl/ml δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 5000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. Εναλλακτικοί Τύποι Δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 10 εθελοντές σε απλούς ηπαρινισμένους, EDTA και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Όλα τα δείγματα εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της IMMULITE 2000 Τρίτης γενιάς TSH. Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (Ηπαρίνη) = 0,95 (Ορός) + 0,06 µiu/ml r = 0,999 (EDTA) = 0,64 (Ορός) + 0,02 µiu/ml r = 0,998 (SST) = 0,99 (Απλοί σωλήνες) 0,11 µiu/ml r = 0,991 Μέσοι όροι: 1,65 µiu/ml (Ορός) 1,62 µiu/ml (Ηπαρίνη) 1,07 µiu/ml (EDTA) 1,52 µiu/ml (SST) Σύγκριση μεθόδου : Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE Τρίτης γενιάς TSH της σε 106 δείγματα. (Εύρος συγκεντρώσεων: περίπου 0,006 ως 60 µiu/ml. Βλ. Σχετικά γραφικά). Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμησης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,94 (IML) + 0,23 µiu/ml r = 0,985 Μέσοι όροι: 6,4 µiu/ml (IMMULITE 2000) 6,5 µiu/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 TSH Trzeciej Generacji Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu TSH w surowicy, przydatny w ocenie klinicznej stanu tarczycy. Numery katalogowe: L2KTS2 (200 testów) L2KTS3M (3000 testów) L2KTS6 (600 testów) L2KTS6M (6000 testów) Kod Testu: TSH Kolor: Czerwony Wprowadzenie TSH (tyrotropina, hormon stymulujący tarczycę) jest przysadkowym hormonem, odgrywającym ważną rolę w utrzymaniu prawidłowego poziomu jodotyronin - T4 i T3. Poziom TSH jest kontrolowany na zasadzie ujemnego sprzężenie zwrotnego przez krążące T4 i T3, oraz poprzez TRH - hormon wydzielany przez podwzgórze (hormon uwalniający tyreotropinę). Dla pierwotnej niedoczynności tarczycy charakterystyczny jest silnie podniesiony poziom TSH przy obniżonej produkcji hormonów tarczycy. Natomiast w drugolub trzeciorzędowej niedoczynności tarczycy, gdy produkcja hormonów tarczycy jest obniżona wskutek zaburzeń przysadkowych lub podwzgórzowych, stwierdzany jest na ogół niski poziom TSH. W typowej nadczynności tarczycy poziom TSH plasuje się poniżej normy. Rzadziej obniżenie poziomu TSH w nadczynności wiąże się ze zwiększoną stymulacją tarczycy przez zmienione chorobowo podwzgórze i przysadkę w sytuacjach takich poziom TSH jest zazwyczaj podniesiony. Oznaczenie TSH było pierwszym testem różnicującym niedoczynność tarczycy stosowanym również w monitorowaniu przebiegu leczenia tarczycy zastępczą terapią hormonalną. Należy pamiętać, że nadczynność i niedoczynność tarczycy są stanami nasilającymi się stopniowo. Powoduje to, że nie u wszystkich pacjentów z tego typu schorzeniami poziom TSH będzie znacznie wykraczał poza normę. Z drugiej jednak strony 14 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

poziom TSH wykracza poza zakres eutyreozy w bardzo wczesnych, subklinicznych, fazach rozwijającej się choroby tarczycy, gdy hormony tarczycowe pozostają w normie. Naukowe badania kliniczne wykazały, że u osób sprawiających wrażenie zdrowych poziom TSH przekraczający 2,0 µiu/ml stanowi przesłankę dla wzrostu ryzyka choroby tarczycy w okresie najbliższych 20 lat. Prawdopodobne jest obniżenie górnej granicy zakresu referencyjnego do 2,5 µiu/ml gdyż w rygorystycznie dobranej do badań przesiewowych grupie zdrowych ochotników z prawidłowo funkcjonującą tarczycą poziom TSH utrzymywał się pomiędzy 0,4 i 2,5 µiu/ml. 7 Zasada Testu IMMULITE 2000 TSH Trzeciej Generacji jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym, dwupunktowym testem kanapkowym (imunometrycznym) fazy stałej. Czas Inkubacji: 60 minut. Preparatyka Próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Osocze EDTA nie jest materiałem zalecanym dla oznaczenia Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 TSH Trzeciej Generacji generacji nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ Materiału Na Oznaczenie. Wymagana Objętość Próbki: 75 µl surowicy. Przechowywanie Materiału: 5 dni w 2 8 C lub 1 miesiąc w 20 C. 21 Ostrzeżenia i Warunki Wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty- HCV. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat Chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (Patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy Zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. TSH Pojemnik z Kulkami (L2TS12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-tsh. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KTS2: 1 opakowanie. L2KTS6: 3 opakowania. L2KTS3M: 15 opakowań. L2KTS6M: 30 opakowań. TSH Klin z Odczynnikiem (L2TSA2) Z kodem kreskowym. 23 ml fosfatazy alkalicznej (izolowanej z jelita cieląt) IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 15

związanej z kozim przeciwciałem poliklonalnym anty-tsh, w buforze (z konserwantem), rozdzielonej równo do komory A i B. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KTS2: 1 klin. L2KTS6: 3 kliny. L2KTS3M: 15 klinów. L2KTS6M: 30 klinów. Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. TSH Kalibratory Zestawu (LTSL, LTSH) Dwie fiolki (kalibrator niski i wysoki) zawierające liofilizat TSH w buforowanej matrycy ludzkiej surowicy. Zawartość każdej z fiolek rekonstytuować 4,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej, odstawić na 30 minut, potem mieszać przez delikatne wytrząsanie i obracanie. Po rekonstytucji stabilne 30 dni w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C (rozpipetować). L2KTS2: 1 zestawy. L2KTS6: 2 zestawy. L2KTS3M: 3 zestawy. L2KTS6M: 4 zestawy. Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały Dostarczane Oddzielnie TSH Rozcieńczalnik Próbek (L2TSZ) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. 25 ml skoncentrowanej, gotowej do użycia, matrycy ludzkiej surowicy buforowanej wolnej od TSH. Po otwarciu stabilny 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 x 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2TSZ: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek 16 100 mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik CON 6: Trzypoziomowa multikontrola. LTGCM: Jednopoziomowa, niska kontrola TSH Trzeciej Generacji. Ponadto niezbędne: woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany Odstęp Pomiędzy Rekalibracjami: 4 tygodnie. Próbki Kontrolne: stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie TSH. Oczekiwane Wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE - TSH Trzeciej Generacji firmy (patrz: Porównanie Metod) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne. Eutyreoza: 0,4 4,0 µiu/ml Poziom TSH w przebiegającej nadczynności tarczycy typowo plasuje się poniżej 0,01 µiu/ml. Wartości pozostające w przedziale 0,01 µiu/ml 0,4 µiu/ml należy poddać weryfikacji, gdyż mogą być objawem granicznej nadczynności tarczycy lub mogą się wiązać z ostrymi nietarczycowymi chorobami (NTI) lub z terapią wysokimi dawkami leków. 1 Zakresy pediatryczne dla Testu IMMULITE - TSH Trzeciej Generacji opracowano w ramach przekrojowych badań hormonów tarczycy przeprowadzonych w klinice Zdrowego Dziecka na południowym zachodzie Stanów Zjednoczonych. Otrzymano następujące wyniki: 16 IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13)

Wiek (lata) Mediana (µiu/ml) Środkowe 95% 1,0 2,09 0,40 8,6 2,0 1,85 0,36 7,6 3,0 1,65 0,33 6,7 4,0 1,62 0,33 6,3 5,0 1,59 0,34 6,1 6,0 1,58 0,34 6,0 7,0 1,57 0,35 5,8 8,0 1,56 0,35 5,7 9,0 1,55 0,35 5,6 10,0 1,54 0,36 5,5 11,0 1,53 0,36 5,5 12,0 1,53 0,36 5,4 Wartości te mają charakter orientacyjny. Każde laboratorium powinno opracować własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Test IMMULITE 2000 TSH Trzeciej Generacji nie jest przystosowany do przesiewowych badań poziomu TSH u noworodków. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry Testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki podano w µiu/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie). Zakres Kalibracji: Do 75 µiu/ml (WHO 2nd IRP 80/558). Czułość Analityczna: 0,004 µiu/ml Efekt Wysokiej Dawki: Nie występuje do stężenia 14 000 µiu/ml. Precyzja: Próbki oznaczano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń. (patrz: Tabela Precyzja). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (patrz: Tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami TSH o stężeniach kolejno: 273, 1 387 i 3 290 µiu/ml (patrz: Tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciała użyte w teście są wysoce specyficzne w stosunku do TSH (patrz: Tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność erytrocytów w ilości do 30 µl/ml nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 5 000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ Materiału na Oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 10 ochotników do probówek systemu Vacutainer BD: bez antykoagulantu (zwykłych), z heparyną, z EDTA oraz probówek z barierą żelową SST, systemu. Wszystkie próbki oznaczano testem IMMULITE 2000 TSH Trzeciej Generacji. Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: IMMULITE 2000 Third Generation TSH (PIEL2KTS-4 {15}, 2008-08-13) 17