OM-MA. For use on IMMULITE 2000 systems

OM-MA For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 OM-MA English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of CA125 antigen in serum, as an aid in monitoring the response to therapy for patients with epithelian ovarian cancer, and in detecting residual ovarian cancer in patients who have undergone first-line therapy and would be considered for diagnostic second-look procedures. Catalog Number: L2KOP2 (200 tests) Test Code: OV Color: Aqua Caution: In the United States, federal law restricts this device to sale by or on the order of a physician. CA125 antigen levels in a given specimen determined with assays from different manufacturers can vary due to differences in assay methods and reagent specificity. Results reported by the laboratory to the physician must include the identity of the assay used to measure CA125 antigen levels. Values obtained with different assays cannot be used interchangeably. Before changing assays, the laboratory must confirm baseline values for patients being serially monitored. Summary and Explanation The CA125 determinant was originally identified by a monoclonal antibody, selected for reactivity with a cell line from a patient with serous papillary cystadenocarcinoma of the ovary. This antibody was found to react with cell lines derived from epithelial ovarian carcinomas but not with nonmalignant tissues including normal adult and fetal ovary. 1,2 Although the precise nature of the CA125 determinant remains unclear, there is agreement that the molecule is a high molecular weight (1000 kda) glycoprotein with a smaller quantity of carbohydrate than mucins. 2 There is some evidence that more than one form of the CA125 molecule exists. 3,4 Epithelial neoplasms of the ovary originate from the single layer of cells covering the ovary. These epithelial cells have a high proliferative capacity, repairing the ovarian surface after ovulation. Suppression of ovulation by oral contraceptives, pregnancy and lactation may therefore reduce the risk of ovarian cancer. 5 Ovarian malignancy has been associated with a variety of peptide growth factors, oncogenes and tumor suppressor genes. 5 According to a recent study comprising approximately 10% of the US population, more than 48% of ovarian cancer can be found in women 65 years of age and older, rather than in younger women. The incidence increases with age, reaching a peak of 54 in every 100,000 women in the age group 75 to 79 years. 6 Measurement of CA125 before and after cytoreductive surgery for ovarian cancer has been shown to predict the likelihood of a patient being left with residual disease. 11 IMMULITE 2000 OM-MA uses a murine monoclonal antibody for the capture and a rabbit polyclonal antibody for detection of the CA125 antigen. The monoclonal antibody was established by immunization with human mucin prepared from a pool of patients with epithelial ovarian cancer. The monoclonal antibody, which forms the basis of specificity for the kit, recognizes a repetitive protein determinant expressed in the protein core of the CA125 antigen. This antibody has specificity for an epitope that overlaps with, or is very near to, that bound by the M11 monoclonal antibody. The M11 monoclonal is incorporated in many commercially available CA125 immunoassays. 15 The polyclonal antibody is affinity-purified against CA125 antigen, resulting in a reagent reacting with multiple epitopes on this antigen. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 OM-MA is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. Incubation Cycles: 2 30 minutes 2 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 OM-MA has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 50 µl serum Storage: 1 day at 2 8 C or 2 months at 20 C. 14 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Results reported by the laboratory to the physician must include the identity of the assay used to measure CA125 antigen levels. Values obtained with different assays cannot be used interchangeably. Materials Supplied Components are a matched set. The barcode labels are needed for the assay. OM-MA Bead Pack (L2OP12) With barcode. 200 beads, coated with murine monoclonal anti-ca125 antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KOP2: 1 pack OM-MA Reagent Wedge (L2OPA2) With barcodes. 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to rabbit polyclonal anti-ca125 antibody in buffer, with preservative; 6.5 ml of a buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KOP2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. OM-MA Adjustors (LOPL, LOPH) Two vials (Low and High), 3 ml each, of CA125 in a nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KOP2: 1 set Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately OM-MA Sample Diluent (L2OPZ) For the on-board dilution of high samples. 25 ml of concentrated (ready-to-use) processed, CA125-free nonhuman protein/buffer matrix. Storage: 30 days (after opening) at 2 8 C or for 6 months (aliquotted) at 20 C. Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 100 mm test IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 3

tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2OPZ: 3 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water, test tubes, controls Assay Procedure See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or sample pools with at least two levels (low and high) of CA125. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Interpretation of Results An IMMULITE 2000 OM-MA result of 21 U/mL or greater is considered elevated and a result less than 21 U/mL is considered normal. Users should be aware that a result greater than or equal to 21 U/mL may be found in a small percentage of healthy individuals and in patients with nonmalignant conditions, such as pericarditis, cirrhosis, severe hepatic necrosis, endometriosis (Stages II-IV), first trimester pregnancy, and ovarian cysts, or in patients with non-ovarian malignancies, such as uterine carcinoma, hepatoma, pancreatic adenocarcinoma, and lung cancers. A result below 21 U/mL does not necessarily indicate the absence of residual or recurrent ovarian cancer because some patients with histopathologic evidence of ovarian carcinoma may have CA125 measurements below 21 U/mL. The unit (U/mL) adopted by the IMMULITE 2000 OM-MA is arbitrary. Since there are no existing standard reference units, users should not make quantitative comparisons between different methods of measuring CA125. Results reported by the laboratory to the physician must include the identity of the assay used to measure CA125 antigen levels. Values obtained with different assays cannot be used interchangeably. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE OM-MA (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. Sixty-four serum samples from female adults (age range: 17 86 years) in apparent good health were included in the two clinical sites. They were tested by the IMMULITE OM-MA assay. The results ranged from 1.9 to 16.3 U/mL, with a median of 4.8 U/mL. The graph shows the distribution of the CA125 values. (See Female Normals Graph.) The same studies also included adult female patients with ovarian cancer, nonmalignant (gastrointestinal, genitourinary and other nonmalignant diseases) and malignant conditions (breast, gastrointestinal, genitourinary and other cancers). The distributions of these patients, as well as male and female healthy individuals included in the studies, are shown below for the ranges of CA125 measurement indicated. 4 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Healthy Subjects: Healthy 21 21 50 100 Subjects U/mL 50 U/mL 100 U/mL U/mL n Female 64 0 0 0 64 50 years 50 0 0 0 50 50 years 14 0 0 0 14 Male 28 0 0 0 28 Patients: Patients Ovarian Cancer 21 U/mL 21 50 50 U/mL 100 U/mL 100 U/mL 36 10 7 43 96 Nonmalignant Conditions GI 5 0 1 0 6 GU 7 0 0 1 8 Others 40 4 0 0 44 Malignant Conditions Breast 11 2 1 0 14 GI 3 2 1 0 6 GU 4 1 2 4 11 Others 9 3 0 6 18 Elevated levels of CA125 may be associated with endometriosis, 12 the first trimester of pregnancy, 13 menstruation, and cancer of the pancreas, stomach, colon or rectum. 2 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitation Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this n assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in U/mL. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Calibration Range: Up to 500 U/mL The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 1 U/mL High-dose Hook Effect: None up to 80,000 U/mL Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three CA125 solutions (1025, 1950 and 4080 U/mL) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 192 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Specificity: The antibody is highly specific for CA125. (See "Specificity" table.) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE OM-MA (mono/poly, LKOP) on 161 samples. (Concentration range: 4.16 to 364.7 U/mL. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.97 (IML) + 0.30 U/mL r = 0.985 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 5

Means: 106 U/mL (IMMULITE 2000) 109 U/mL (IMMULITE) References 1) Bast RC Jr, et al. Reactivity of a monoclonal antibody with ovarian carcinoma. J Clin Invest 1981;68:1331-7. 2) Jacobs I, et al. The CA 125 tumour-associated antigen: a review of the literature. Hum Reprod 1989;4(1):1-12. 3) Hosono MN, et al. Different antigenic nature in apparently healthy women with high serum CA 125 levels compared with typical patients with ovarian cancer. Cancer 1992;70(12): 2851-6. 4) Kaneko Y, et al. Study for the nature of interfering substances responsible for nonspecific reactive phenomena occurred occasionally in EIA determination of CA125. Rinsho-Byori 1992;40(9):948-52. 5) Bast RC Jr, et al. Cell growth regulation in epithelial ovarian cancer. Cancer 1993;71(4):1597-601. 6) Yancik R. Ovarian cancer. Cancer 1993;71(2):517-23. 7) Nagell JR van. Ovarian cancer screening. Cancer 1993;71(4):1523-8. 8) Kramer BS et al. A National Cancer Institute sponsored screening trial for prostatic, lung, colorectal and ovarian cancers. Cancer 1993;71(2):589-93. 9) Bast RC Jr, et al. Perspectives on the future of cancer markers. Clin Chem 1993;39(11):2444-51. 10) Jacobs I, et al. Multimodal approach to screening for ovarian cancer. Lancet 1988;i: 268-71. 11) Brand E, et al. The decline of CA 125 level after surgery reflects the size of residual ovarian cancer. Obstet Gynecol 1993;81(1):29-32. 12) Pittaway DE. CA-125 in women with endometriosis. Obstet Gynecol Clin North Am 1989;16(1):237-52. 13) Niloff JM, et al. CA125 antigen levels in obstetric and gynecologic patients. Obstet Gynecol 1984;64(5):703-7. 14) Bonfrer JMG, et al. Technical evaluation of three second generation CA125 assays. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1994;32:201-7. 15) Nustad K, Bast RC, O'Brien TJ, et al. Specificity and affinity of 26 monoclonal antibodies against CA125 antigen: first report from the ISOBM TD-1 Workshop. Tumor Biol 1996;17:196-219. 16) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (U/mL) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 5.6 0.22 3.9% 0.61 11% 2 23 1.1 4.8% 1.2 5.2% 3 41 1.8 4.4% 1.9 4.6% 4 92 3.7 4.0% 4.7 5.1% 5 111 4.5 4.1% 5.0 4.5% 6 184 8.2 4.5% 9.2 5.0% 7 292 12 4.1% 15 5.1% 8 394 20 5.1% 21 5.3% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 Wewnątrz serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (U/mL) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 8 in 8 5 99 4 in 8 53 50 106% 2 in 8 27 25 108% 1 in 8 13 12 108% 2 8 in 8 103 4 in 8 57 52 110% 2 in 8 30 26 115% 1 in 8 16 13 123% 3 8 in 8 118 4 in 8 65 59 110% 2 in 8 35 30 117% 1 in 8 17 15 113% 4 8 in 8 137 4 in 8 68 69 99% 2 in 8 35 34 103% 1 in 8 16 17 94% Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. 6 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Recovery (U/mL) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 11 A 52 62 84% B 97 108 90% C 172 215 80% 2 18 A 66 68 97% B 114 115 99% C 206 221 93% 3 45 A 90 94 96% B 136 140 97% C 230 247 93% 4 67 A 116 115 101% B 157 161 98% C 245 268 91% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 ιάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Expected Values OM-MA, U/mL 20 16 12 8 4 0 Female Normals English. OM-MA 1, Female Normals 2 Česky. 1 OM-MA, 2 Očekávané hodnoty ženy. Ελληνικά. 1 OM-MA, 2 Κανονικές τιμές γυναικών. Polski. 1 OM-MA, 2 Zdrowe kobiety. Method Comparison Specificity Amount Added 2 Apparent U/mL 3 % Crossreactivity 4 AFP 10,000 IU/mL ND ND CA15-3 1753 U/mL 7.1 0.41% CA19-9 4000 U/mL ND ND CEA 10,000 ng/ml 4.8 0.05% Cisplatin 100 µg/ml ND ND Cyclophosphamide 1000 µg/ml ND ND Doxorubicin 100 µg/ml ND ND hydrochloride 5-Fluorouracil 1000 µg/ml ND ND Mitomycin C 100 µg/ml ND ND Vincristine 1000 ng/ml ND ND ND: not detectable 5 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 Zjevná koncentrace, 4 % Zkřížená reaktivita, 5 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 Εμφανής συγκέντρωση, 4 % ιασταυρ.αντίδραση, 5 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 Zmierzona, 4 % reaktywności Krzyżowej, 5 ND: Nieoznaczlne. (IML 2000) = 0.97 (IML) + 0.30 U/mL r = 0.985 English. OM-MA Česky. OM-MA. Ελληνικά. OM-MA. Polski. OM-MA. IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 7

Česky IMMULITE 2000 OM-MA Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace antigenu CA125 v séru, jakožto pomůcky při monitorování odezvy na terapii u pacientek s epiteliálním karcinomem vaječníků a při detekci reziduálního karcinomu vaječníků u pacientek, které podstoupily terapii prvního sledu a uvažuje se o jejich zařazení do následných diagnostických procedur. Katalogové číslo : L2KOP2 (200 stanovení) Kód metody : OV Barva : Tyrkysová Koncentrace antigenu CA125 v daném vzorku stanovená pomocí testů od různých výrobců se může lišit s ohledem na rozdíly v použité metodě stanovení a specificitu reagencií. Výsledky stanovení, které laboratoř posílá lékaři, musí obsahovat označení typu testu použitého ke stanovení koncentrace antigenu CA125. Výsledky získané pomocí různých testovacích metod se nesmí zaměňovat. Před změnou používané metody stanovení musí laboratoř potvrdit výchozí hodnoty koncentrací u pacientů, kteří jsou sériově monitorováni. Shrnutí a vysvětlení Determinant CA125 byl původně identifikován pomocí monoklonální protilátky zvolené pro reaktivitu k buněčným liniím pacientů se serózním papilárním cystadenokarcinomem vaječníků. Tato protilátka reagovala s buněčnými liniemi odvozenými od epiteliálních karcinomů vaječníků, ale nikoliv s nemaligními tkáněmi včetně zdravých dospělých nebo fetálních vaječníků. 1,2 I když přesná podstata determinantu CA125 je nejasná, předpokládá se, že se jedná o glykoprotein s vysokou molekulovou hmotností (1000 kda) a s menším množstvím uhlohydrátů než mají muciny. 2 Podle některých důkazů existuje víc než jedna forma molekuly CA125. 3,4 Epiteliální neoplazmy vaječníků vznikají z monobuněčné vrstvy obalující vaječník. Tyto epiteliální buňky se vyznačují vysokou proliferativní kapacitou a spravují povrch vaječníku po ovulaci. Potlačení ovulace orální antikoncepcí, těhotenstvím nebo kojením může proto snížit riziko rakoviny vaječníků. 5 Malignity vaječníků jsou spojeny s různými peptidickými růstovými faktory, onkogeny a nádorovými supresními geny. 5 Podle nedávné studie zahrnující přibližně 10 % populace Spojených států se více než 48 % rakoviny vaječníků vyskytuje spíše u žen ve věku 65 let a starších než u mladších žen. Výskyt se zvyšuje s rostoucím věkem s maximem 54 případů rakoviny vaječníků na každých 100 000 žen ve věkové kategorii od 75 do 79 let. 6 Stanovení CA125 před a po cytoredukční operaci rakoviny vaječníků pomáhá předpovědět pravděpodobnost výskytu residuálního onemocnění. 11 Stanovení OM-MA na analyzátorech IMMULITE 2000 používá myší monoklonální protilátku k navázání a králičí polyklonální protilátku k detekci antigenu CA125. Monoklonální protilátka byla vytvořena imunizací s lidským mucinem připraveným od skupiny pacientů s epiteliálním karcinomem vaječníků. Monoklonální protilátka, která tvoří základ specificity této soupravy, rozeznává repetiční proteinový determinant vyjádřený v proteinovém jádru antigenu CA125. Tato protilátka je specifická vůči epitopu, který se překrývá, nebo je velmi blízko, epitopu vázaném monoklonální protilátkou M11. Monoklonální protilátka M11 je obsažená v mnohých komerčně dostupných imunologických stanoveních CA125. 15 Polyklonální protilátka je afinitně očištěná vůči antigenu CA125, což vede k reakci reagencie s četnými epitopy na tomto antigenu. Princip Stanovení IMMULITE 2000 OM-MA je oboustranná chemiluminiscenční imunochemická reakce v pevné fázi. Inkubační cykly : 2 30 minut 8 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení se vzorkem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení OM-MA na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Potřebný objem vzorku : 50 μl séra Skladování : 1 den při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. 14 Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Výsledky stanovení, které laboratoř posílá lékaři, musí obsahovat označení typu testu použitého ke stanovení koncentrace antigenu CA125. Výsledky získané pomocí různých testovacích metod se nesmí zaměňovat. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovými kódy. OM-MA zásobník s kuličkami (L2OP12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených myší monoklonální protilátkou proti CA125. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KOP2 : 1 balení OM-MA reagencie (L2OPA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s králičí polyklonální protilátkou proti CA125 v pufru, s konzervačním prostředkem. 6,5 ml pufru s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KOP2 : 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. OM-MA kalibrátory (LOPL, LOPH) Dvě lahvičky po 3 ml s vysokou a nízkou koncentrací CA125 v bílkovinové/pufrované matrici nehumánního původu, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KOP2 : 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 9

Materiál dodávaný zvlášť OM-MA diluent vzorků (L2OPZ) K automatickému ředění koncentrovaných vzorků. 25 ml koncentrované (připravené k použití) zpracované bílkovinové/pufrované matrice nehumánního původu bez CA125. Skladování: Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku 16 100 mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2OPZ : 3 štítky L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků (16 100 mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu, testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. Doporučený interval mezi adjustacemi : 4 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěma koncentracemi (vysokou a nízkou) CA125. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Vyhodnocení výsledků Výsledek stanovení OM-MA na analyzátorech IMMULITE 2000 rovný nebo vyšší než 21 U/ml je považován za zvýšenou koncentraci a výsledek pod 21 U/ml za normální. Uživatel analyzátoru by si měl být vědom, že výsledek rovný nebo vyšší než 21 U/ml může být naměřený také u malého procenta zdravých jedinců a pacientů s nezhoubným onemocněním nebo stavem jako jsou zánět osrdečníku, cirhóza, těžká jaterní nekróza, endometrióza (stádium II-IV), první trimestr těhotenství a cysty na vaječnících, nebo u pacientů s jiným karcinomem než karcinomem vaječníků jako jsou děložní karcinom, hepatom, adenokarcinom pankreatu a rakovina plic. Výsledek pod 21 U/ml nemusí nutně svědčit o absenci residuální nebo recidivující rakoviny vaječníků, protože někteří pacienti s histopatologickým nálezem karcinomu vaječníků můžou mít naměřené množství CA125 pod 21 U/ml. Jednotka U/ml zavedena pro stanovení IMMULITE 2000 na analyzátoru OM-MA je arbitrární. Protože neexistují žádné standardní referenční jednotky, uživatel nemá srovnávat množství naměřená pomocí různých metod stanovení CA125. Výsledky stanovení, které laboratoř posílá lékaři, musí obsahovat označení typu testu použitého ke stanovení koncentrace antigenu CA125. Výsledky získané pomocí různých testovacích metod se nesmí zaměňovat. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti s testem OM-MA na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je možné u tohoto stanovení očekávat prakticky stejná referenční rozmezí. 10 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Do studie na dvou klinikách bylo zařazeno 64 vzorků séra od dospělých žen (věkový interval: 17 86 roků) zjevně dobrého zdraví. Stanovení bylo provedeno pomocí testu OM-MA na analyzátoru IMMULITE. Výsledky se pohybovaly od 1,9 do 16,3 U/ml, medián byl 4,8 U/ml. Rozdělení hodnot CA125 je znázorněno na grafu. (Viz graf Female Normals.) Do stejné studie byly také zařazeny ženy s rakovinou vaječníků, nezhoubnými stavy (zažívacího traktu, genitourinárními a dalšími nezhoubnými onemocněními) a zhoubnými stavy (prsu, zažívacího traktu, genitourinárními a dalšími druhy rakoviny). V následující tabulce se nachází rozdělení zmíněných pacientů, a také zdravých mužů a žen zahrnutých do studie, do jednotlivých intervalů CA125 určených tímto měřením. Zdraví Jedinci : Zdraví jedinci 21 U/ml 21 50 U/ml 50 100 U/ml 100 U/ml n Ženy 64 0 0 0 64 50 roků 50 0 0 0 50 50 roků 14 0 0 0 14 Muži 28 0 0 0 28 Pacienti : Pacienti Rakovina vaječníků 21 U/ml Nezhoubné Stavy Zažívacího traktu 21 50 U/ml 50 100 U/ml 100 U/ml n 36 10 7 43 96 5 0 1 0 6 Genitourinární 7 0 0 1 8 Ostatní 40 4 0 0 44 Zhoubné Stavy Prsou 11 2 1 0 14 Zažívacího 3 2 1 0 6 traktu Genitourinární 4 1 2 4 11 Ostatní 9 3 0 6 18 Zvýšená koncentrace CA125 může být spojená s endometriózou, 12 prvním trimestrem těhotenství, 13 menstruací a rakovinou pankreatu, žaludku, tlustého střeva nebo konečníku. 2 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v U/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Kalibrační rozsah : Do 500 U/ml Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 1 U/ml High-dose Hook Effect : Do 80 000 U/ml žádný Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka Precision.) IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 11

Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při různém ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Linearity.) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků CA125 (1025, 1950 a 4080 U/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce Recovery.) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 192 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Specificita : Protilátka je silně specifická vůči CA125. (Viz tabulka Specificity.) Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s testem OM-MA na analyzátoru IMMULITE (mono/poly, LKOP) na 161 vzorcích. (Koncentrační rozsah 4,16 až 364,7 U/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,97 (IML) + 0,30 U/ml r = 0,985 Střední Hodnoty : 106 U/ml (IMMULITE 2000) 109 U/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 OM-MA Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό του CA125 αντιγόνου στον ορό ως βοήθημα στην θεραπεία των ασθενών με επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών, και στον εντοπισμό των υπολειμμάτων του καρκίνου των ωοθηκών σε ασθενείς που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία πρώτης γραμμής(first-line therapy) και θα υποβληθούν σε διαγνωστικές διαδικασίες επανεξέτασης. Αριθμός Καταλόγου: L2KOP2 (200 αναλύσεις) Κωδικός ανάλυσης: OV Χρώμα: Του νερού Τα επίπεδα του αντιγόνου CA125 σε ένα συγκεκριμένο δείγμα όπως προσδιορίζονται από αναλύσεις διαφορετικών κατασκευαστών μπορεί να διαφέρουν λόγω διαφορών στις μεθόδους ανάλυσης και στην ειδικότητα του αντιδραστηρίου. Τα αποτελέσματα που ανακοινώνονται από το εργαστήριο στον ιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν την ταυτότητα της ανάλυσης που χρησιμοποιήθηκε για την μέτρηση των επιπέδων του αντιγόνου CA125. Οι τιμές που αποκτώνται με διαφορετικές αναλύσεις δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ εναλλαγήν. Πριν αλλάξετε αναλύσεις,το εργαστήριο πρέπει να επιβεβαιώσει τις κατώτατες τιμές (baseline) των ασθενών που υποβάλλονται σε σειριακή παρακολούθηση. Περίληψη και Επεξήγηση Ο καθοριστικός παράγοντας CA125 αρχικά ταυτοποιήθηκε από ένα μονοκλωνικό αντίσωμα που επιλέχθηκε για αντιδραστικότητα με μια κυτταρική σειρά από μια ασθενή με ορογόνο θηλώδες κυστικό αδενοκαρκίνωμα της ωοθήκης. Το αντίσωμα βρέθηκε να αντιδρά με κυτταρικές σειρές προερχόμενες από επιθηλιακά 12 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

καρκινώματα της ωοθήκης αλλά όχι με καλοήθεις ιστούς που συμπεριλαμβάνουν τις ωοθήκες φυσιολογικού ενήλικα και εμβρύου. 1,2 Αν και η ακριβής φύση του καθοριστικού παράγοντα CA125 παραμένει ασαφής, υφίσταται συμφωνία ότι το μόριο είναι μια υψηλού μοριακού βάρους (1000 kda) γλυκοπρωτεϊνη με μικρότερη ποσότητα υδατανθράκων απ ότι οι βλεννίνες (mucins). 2 Υπάρχουν κάποιες ενδείξεις ότι υπάρχουν περισσότερες από μια μορφές του μορίου CA125. 3,4 Επιθηλιακά νεοπλάσματα της ωοθήκης ξεκινούν από το μονό στρώμα κυττάρων που καλύπτουν την ωοθήκη. Αυτά τα επιθηλιακά κύτταρα έχουν μια υψηλή πολλαπλασιαστική ικανότητα, αποκαθιστώντας την επιφάνεια της ωοθήκης μετά την ωορρηξία. Η καταστολή της ωορρηξίας λόγω χρήσης αντισυλληπτικών, εγκυμοσύνης και θηλασμού μπορεί να μειώσει τον κίνδυνο εμφάνισης καρκίνου των ωοθηκών. 5 Η ανάπτυξη κακοήθειας στις ωοθήκες έχει συσχετισθεί με μια σειρά πεπτιδικών αυξητικών παραγόντων, ογκογονιδίων και γονιδίων καταστολής όγκων. 5 Σύμφωνα με μια πρόσφατη μελέτη που καλύπτει περίπου το 10% του πληθυσμού των Ηνωμένων Πολιτειών,πάνω από το 48% των καρκίνων στις ωοθήκες συναντάται σε γυναίκες πάνω από 65 χρονών, παρά σε νεότερες γυναίκες. Η εμφάνιση του καρκίνου των ωοθηκών αυξάνεται με την ηλικία, και κορυφώνεται στην ηλικιακή ομάδα 75 με 79 χρονών (54 σε κάθε 100000 γυναίκες). 6 Η μέτρηση του CA125 πριν και μετά από κυτταρομειωτική επέμβαση για τον καρκίνο των ωοθηκών φαίνεται να προβλέπει την πιθανότητα ο ασθενής να μείνει με κατάλοιπα της ασθένειας. 11 Η ανάλυση με IMMULITE 2000 OM-MA χρησιμοποιεί ένα μονοκλωνικό αντίσωμα ποντικού για την αιχμαλώτιση και ένα πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού για την ανίχνευση του αντιγόνου CA125. Το μονοκλωνικό αντίσωμα καθιερώθηκε με ανοσοποίηση με ανθρώπινη βλεννίνη που ετοιμάστηκε από μια ομάδα ασθενών με επιθηλιακό καρκίνο των ωοθηκών. Το μονοκλωνικό αντίσωμα που αποτελεί την βάση για την ειδικότητα αυτού του kit,αναγνωρίζει έναν καθοριστικό παράγοντα επαναλαμβανόμενης πρωτεΐνης που εκφράζεται στον πρωτεϊνικό πυρήνα του αντιγόνου CA125. Το αντίσωμα αυτό έχει ειδικότητα για αντιγονικό καθοριστή που αλληλοεπικαλύπτεται με,ή είναι πολύ κοντά με, αυτό που συνδέεται με το μονοκλωνικό αντίσωμα M11. Το μονοκλωνικό M11 ενσωματώνεται σε πολλές εμπορικά διαθέσιμες CA125 ανοσοεξετάσεις. 15 Το πολυκλωνικό αντίσωμα είναι κεκαθαρμένο έναντι του αντιγόνου CA125, καταλήγοντας σε ένα αντιδραστήριο που αντιδρά με πολλαπλούς αντιγονικούς καθοριστές αυτού του αντιγόνου. Αρχή της ιαδικασίας Η IMMULITE 2000 OM-MA είναι μια ξηρής φάσης, δύο θέσεων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Κύκλοι Επώασης: 2 30 λεπτά Συλλογή δείγματος Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 OM-MA δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 50 µl ορού Φύλαξη: 1 μέρα στους 2 8 C ή 2 μήνες στους 20 C. 14 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 13

Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για διαγνωστική in vitro χρήση Αντιδραστήρια: Αποθηκεύετε στους 2 8 C. Καταστρέψτε σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. Ακολουθείστε τις γενικές προφυλάξεις και χειριστείτε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς μολυσματικών παραγόντων. Όλα τα υλικά της μεθόδου που προέρχονται από ανθρώπινο αίμα έχουν ελεγχθεί και βρέθηκαν αρνητικά για σύφιλη, για αντισώματα στον HIV 1 και 2, για τα επιφανειακά αντιγόνα της ηπατίτιδας B και για αντισώματα της ηπατίτιδας C. Αζίδιο του Νατρίου έχει προστεθεί σε συγκέντρωση μικρότερη του 0,1 g/dl,σαν συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: εν πρέπει να μολυνθεί και δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Τα αποτελέσματα που ανακοινώνονται από το εργαστήριο στον ιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν την ταυτότητα της ανάλυσης που χρησιμοποιήθηκε για την μέτρηση των επιπέδων του αντιγόνου CA125. Οι τιμές που αποκτώνται με διαφορετικές αναλύσεις δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ εναλλαγήν. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. OM-MA σε Συσκευασία σφαιριδίων (L2OP12) Με barcode. 200 σφαιρίδια καλυμμένα με μονοκλωνικά αντί-ca125 αντισώματα ποντικού. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία. L2KOP2: 1 συσκευασία οχείο αντιδραστηρίου OM-MA (L2OPA2) Με barcodes.11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένη σε πολυκλωνικό anti-ca125 αντίσωμα κουνελιού, σε ρυθμιστικό διάλυμα (με συντηρητικό). 6,5 ml ρυθμιστικού διαλύματος με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως. L2KOP2: 1 δοχείο Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί το barcode. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές OM-MA (LOPL, LOPH) ύο φιαλίδια (Χαμηλό και Υψηλό), 3 ml το καθένα, CA125 σε μήτρα μη ανθρώπινης πρωτεϊνης/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C για 30 μέρες μετά το άνοιγμα,ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2KOP2: 1 σετ Χωριστές γραμμογραφημένες ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με τους Ρυθμιστές. Πριν την χρήση, κολλήστε τις κατάλληλες ετικέτες στα δοκιμαστικά σωληνάρια έτσι ώστε η γραμμογράφηση (barcodes) να μπορεί να αναγνωστεί. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Αραιωτικό δείγματος OM-MA (L2OPZ) Για την on-board αραίωση των υψηλών δειγμάτων. 25 ml συμπυκνωμένης (έτοιμης για χρήση) επεξεργασμένης μήτρας μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ρυθμιστικού χωρίς CA125. Αποθήκευση: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή για 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. Χωριστές γραμμογραφημένες (barcode) ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με το Αραιωτικό. Πριν την χρήση τοποθετείστε την κατάλληλη ετικέτα σε ένα σωληνάριο 16 100 mm, ούτως ώστε η ετικέτα να μπορεί να διαβαστεί. L2OPZ: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή 14 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης του δείγματος Χρειάζονται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, έλεγχοι, σωληνάρια ιαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες είγματα ελέγχου ποιότητας: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιείτε δείγματα ελέγχου ποιότητας σε δύο τουλάχιστον επίπεδα(χαμηλό και υψηλό) συγκέντρωσης του CA125. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Ένα αποτέλεσμα με IMMULITE 2000 OM-MA της τάξεως του 21 U/mL ή μεγαλύτερο θεωρείται ανεβασμένο και ένα αποτέλεσμα λιγότερο από 21 U/mL θεωρείται κανονικό. Οι χρήστες πρέπει να γνωρίζουν ότι ένα αποτέλεσμα μεγαλύτερο ή ίσο με 21 U/mL μπορεί να βρεθεί σε ένα μικρό ποσοστό υγιών ατόμων και σε ασθενείς με καλοήθεις καταστάσεις όπως η περικαρδίτιδα, η κίρρωση, η οξεία ηπατική νέκρωση, η ενδομητρίωση (στάδια II-IV),το πρώτο τρίμηνο της εγκυμοσύνης,και κύστεις στην ωοθήκη ή σε ασθενείς με μη ωοθηκικές κακοήθειες όπως το καρκίνωμα της μήτρας, το ηπάτωμα, το παγκρεατικό αδενοκαρκίνωμα, και οι καρκίνοι των πνευμόνων. Ένα αποτέλεσμα χαμηλότερο των 21 U/mL δεν δείχνει απαραίτητα την απουσία υπολειμματικού ή υποτροπιάζοντος καρκίνου αφού κάποιοι ασθενείς με ιστοπαθολογικές ενδείξεις καρκινώματος στην ωοθήκη μπορεί να έχουν CA125 μετρήσεις κάτω από 21 U/mL. Η μονάδα μέτρησης (U/mL) που υιοθετήθηκε από το IMMULITE 2000 OM-MA είναι αυθαίρετη. Λόγω της απουσίας ύπαρξης προτύπων μονάδων αναφοράς, οι χρήστες δεν πρέπει να κάνουν ποσοτικές συγκρίσεις μεταξύ διαφορετικών μεθόδων μέτρησης CA125. Τα αποτελέσματα που ανακοινώνονται από το εργαστήριο στον ιατρό πρέπει να περιλαμβάνουν την ταυτότητα της ανάλυσης που χρησιμοποιήθηκε για την μέτρηση των επιπέδων του αντιγόνου CA125. Οι τιμές που αποκτώνται με διαφορετικές αναλύσεις δεν θα πρέπει να χρησιμοποιούνται κατ εναλλαγήν. Αναμενόμενες τιμές Βασισμένο στην σχέση του με την ανάλυση IMMULITE OM-MA (βλ. Σύγκριση της Μεθόδου), η ανάλυση αναμένεται να έχει ουσιαστικά τα ίδια εύρη αναφοράς. 64 δείγματα ορού ενηλίκων γυναικών (εύρος ηλικίας: 17 86 έτη) με φαινομενικά καλή υγεία συμπεριλήφθηκαν σε δύο κλινικές τοποθεσίες. Εξετάστηκαν με την ανάλυση IMMULITE OM-MA. Τα αποτελέσματα κυμαίνονται από 1,9 με 16,3 U/mL, με μια ενδιάμεση τιμή 4,8 U/mL. Το γράφημα δείχνει την κατανομή των τιμών του CA125. (Βλ. Γράφημα Female Normals.) IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 15

Οι ίδιες μελέτες συμπεριέλαβαν επίσης ενήλικες γυναίκες ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών, με καλοήθεις (γαστρεντερικές, ουροποιογεννητικές και άλλες καλοήθεις ασθένειες) και κακοήθεις παθήσεις (μαστού, γαστρεντερικές, ουροποιογεννητικές και άλλους καρκίνους). Οι κατανομές αυτών των ασθενών, καθώς και των υγιών ατόμων (ανδρών και γυναικών) που συμπεριλήφθηκαν στις μελέτες φαίνονται παρακάτω όπως δείχνουν τα εύρη των μετρήσεων του CA125. Υγιή άτομα: 21 21 50 100 Υγιή άτομα U/mL 50 U/mL 100 U/mL U/mL n Γυναίκες 64 0 0 0 64 50 έτη 50 0 0 0 50 50 έτη 14 0 0 0 14 Άνδρες 28 0 0 0 28 Ασθενείς: Ασθενείς Καρκίνος των ωοθηκών 21 U/mL 21 50 50 U/mL 100 U/mL 100 U/mL 36 10 7 43 96 Καλοήθεις καταστάσεις GI 5 0 1 0 6 GU 7 0 0 1 8 Άλλοι 40 4 0 0 44 Κακοήθεις καταστάσεις Μαστού 11 2 1 0 14 GI 3 2 1 0 6 GU 4 1 2 4 11 Άλλοι 9 3 0 6 18 Αυξημένα επίπεδα CA125 μπορεί να σχετίζονται με ενδομητρίωση, 12 με το πρώτο τρίμηνο της εγκυμοσύνης, 13 με την έμμηνο ρύση και με τον καρκίνο του παγκρέατος, του στομάχου, στο κόλον, και του ορθού. 2 Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά στα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο πρέπει να θεσπίσει τα δικά του εύρη αναφοράς. n Περιορισμοί Τα ετεροφυλικά αντισώματα που περιέχονται στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιλαμβάνονται στα συστατικά της εξέτασης έχοντας ως αποτέλεσμα την παρεμβολή τους στις ανοσομετρικές εξετάσεις in vitro. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] είγματα από ανθρώπους που εκτίθενται συχνά σε ζώα ή σε προϊόντα ορού ζώων μπορεί να έχουν τέτοια παρεμβολή και ως εκ τούτου λανθασμένο αποτέλεσμα. Τα αντιδραστήρια σχεδιάστηκαν έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται αυτός ο κίνδυνος; παρόλα αυτά ενδεχόμενες αλληλεπιδράσεις μεταξύ κάποιων σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης μπορεί να συμβούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης πρέπει πάντοτε να συνδυάζονται με την κλινική εξέταση, το ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Βλέπε Πίνακες και Γραφήματα για αντιπροσωπευτικά δεδομένα της εκτέλεσης της μεθόδου. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε U/mL. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Εύρος καμπύλης: μέχρι 500 U/mL Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Αναλυτική ευαισθησία: 1 U/mL High-dose επίδραση φαινομένου Hook: Κανένα μέχρι 80000 U/mL Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα Linearity.) 16 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα CA125 (1025, 1950 και 4080 U/mL) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα.) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 192 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. ( ες Πίνακα Lipemia.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή ειδικότητα για το CA125. (Βλ. Πίνακα Specificity.) Σύγκριση της Μεθόδου: Η εξέταση συγκρίθηκε με την IMMULITE OM-MA (mono/poly, LKOP) σε 161 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: 4,16 με 364,7 U/mL. ες γράφημα.) Η ανάλυση γραμμικής παλινδρόμισης έδωσε τα ακόλουθα αποτελέσματα: (IML 2000) = 0,97 (IML) + 0,30 U/mL r = 0,985 Μέσοι όροι: 106 U/mL (IMMULITE 2000) 109 U/mL (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 OM-MA Przeznaczenie testu: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu antygenu CA125, przydatny przy monitorowaniu skuteczności terapii u chorych z nabłonkowym rakiem jajników oraz do wykrywania szczątkowego raka jajników u chorych poddanych pierwszej fazie leczenia i branych pod uwagę pod kątem drugiej fazy. Numer katalogowy: L2KOP2 (200 testów) Kod Testu: OV Kolor: Błękitny Poziom antygenu CA125 oznaczany w tej samej próbce zestawami różnych producentów może być różny. Niezgodności wynikają z różnic pomiędzy metodami i specyficzności odczynników. Wynik przekazany lekarzowi musi zawierać dane o zastosowanej metodzie oznaczenia poziomu CA125. Nie należy interpetować wyników uzyskanych różnymi testami. W przypadku zmiany systemu oznaczenia w trakcie monitoringu danego chorego należy ustalić wartość odniesienia. Zaczenie diagnostyczne Determinanta CA125 została pierwotnie zidentyfikowana przy użyciu przeciwciała monoklonalnego, uzyskanego w celu rozpoznawania linii wyprowadzonych z komórek surowiczych chorych na torbielakogruczolakoraka brodawkowatego jajnika. Wykazano, że przeciwciało to reaguje z liniami komórek wyizolowanych z nabłonkowego raka jajników, a nie reaguje z niezłośliwą tkanką, w tym tkanką jajnika dorosłych i jajnika płodu. 1,2 Chociaż istota determinanty CA125 nie została jeszcze dokładnie wyjaśniona to istnieje zgodność, co do faktu, że jest ona glikoproteiną o dużej masie cząsteczkowej (1000 kda) z mniejszą ilością węglowodanów niż mucyn. 2 Istnieje dowód na to, że występuje więcej niż jedna forma CA125. 3,4 Nowotwory nabłonkowe jajników wywodzą się z pojedynczej warstwy komórek pokrywających jajnik. Komórki te mają wysoką zdolność do proliferacji, regenerując powierzchnię jajnika po owulacji. Hamowanie owulacji poprzez stosowanie doustnej antykoncepcji, ciążę oraz laktację może więc zmniejszać ryzyko raka jajnika. 5 Proces złośliwego nowotworzenia w jajnikach został powiązany z różnymi białkowymi czynnikami wzrostu, onkogenami oraz IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 17

genami supresyjnymi nowotworów. 5 Według ostatnich badań, które objęły około 10% populacji USA, ponad 48% raków jajnika występuje raczej u kobiet po 65 roku życia niż młodszych. Ryzyko zachorowania wzrasta z wiekiem osiągając maksimum 54 zachorowań na 100 000 kobiet w grupie wiekowej od 75 do 79 lat. 6 Pomiar CA125 przed i po operacji redukującej raka jajnika pozwala przewidzieć prawdopodobieństwo pozostawienia szczątkowego nowotworu u operowanej. 11 W teście IMMULITE 2000 OM-MA wykorzystano mysie przeciwciało monoklonalne jako przeciwciało wychwytujące i królicze przeciwciało poliklonalne jako przeciwciało detekcyjne dla antygenu CA125. Przeciwciała monoklonalne uzyskano poprzez immunizację myszy mucyną ludzką uzyskaną z puli surowicy chorych na nabłonkowego raka jajnika. Przeciwciało monoklonalne, decydujące o specyficzności zestawu, rozpoznaje powtarzającą się determinantę białkową w rdzeniu białkowym antygenu CA125. Przeciwciało jest specyficzne dla epitopu, który nakłada się lub jest bardzo bliski epitopowi dla przeciwciała M11. Przeciwciało monoklonalne M11 jest zastosowane w wielu dostępnych na rynku immunotestów dla CA125. 15 Przeciwciało poliklonalne oczyszczone na drodze chromatografii powinowactwa skierowane jest przeciw antygenowi CA125 i powoduje, że odczynnik rozpoznaje wiele epitopów na tym antygenie. Zasada testu IMMULITE 2000 OM-MA Immunoenzymatyczny, chemiluminescencyjny, sekwencyjny test kanapkowy fazy stałej. Czas inkubacji: 2 30 minut Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych na drodze ultrawirowania. Hemoliza może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Na wynik oznaczenia może wpływać rodzaj probówek, do których pobierana jest krew. Istotne znaczenia mają: producent i tworzywo oraz obecność lub brak bariery żelowej lub innego środka ułatwiającego oddzielenie surowicy, obecność aktywatorów skrzepu oraz brak/obecność antykoagulantów. Wpływ wszystkich wymienionych czynników na wynik testu IMMULITE 2000 OM-MA nie jest znany. Wymagana objętość próbki: 50 µl surowicy Przechowywanie materiału: 1 dzień w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. 14 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w temp. 2 8 C. Pozbywać się zgodnie z obowiązującymi przepisami. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach izolowanych z krwi ludzkiej wykluczono obecność: reaktywności w kierunku syfilisu, przeciwciał anty-hiv 1 i HIV 2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl, użyty jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. 18 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Wyniki z laboratorium wydawane lekarzowi powinny zawierać nazwę testu, którym oznaczano CA125. wartości uzyskane różnymi metodami nie mogą być porównywane. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. OM-MA - pojemnik z kulkami (L2OP12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-ca125. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KOP2: 1 opakowanie OM-MA - klin z odczynnikiem (L2OPA2) Oznakowany kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z poliklonalnym kozim przeciwciałem anty-ca125 w buforowanym roztworze z konserwantami; 6,5 ml buforu z konserwantami. Stabilny w temp. 2 8 C do daty ważności. L2KOP2: 1 klin Nie uszkadzając kodu kreskowego klina zerwij taśmę zabezpieczającą suwak na czas transportu odczynnika. Usuń tymczasowe foliowe uszczelnienie komór i wsuń suwak na prowadnice w pokrywie klina. OM-MA - kalibratory zestawu (LOPL, LOPH) Dwie fiolki (kalibrator niski i wysoki) zawierające po 3 ml CA125 w białkowej, buforowanej matrycy zwierzęcej, z konserwantami. Stabilne przez 30 dni w temp. 2 8 C (po otwarciu) lub 6 miesięcy w temp. 20 C (rozporcjowane). L2KOP2: 1 zestaw Przed przystąpieniem do kalibracji umieść na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem), aby mogły być rozpoznane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie OM-MA - rozcieńczalnik próbek (L2OPZ) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. 25 ml skoncentrowanej, gotowej do użycia, spreparowanej białkowej, buforowanej matrycy surowicy ludzkiej wolnej od CA125. Stabilny w temp. 2 8 C przez 30 dni (po otwarciu) lub 6 miesięcy w temp. 20 C (rozporcjowany). Nalepki z odpowiednimi kodami kreskowymi są dostarczane wraz z rozcieńczalnikiem. Nalepkę umieścić na probówce (16 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2OPZ: 3 nalepki L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw czyszczący LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek na rozcieńczalnik próbek 16 100 mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik Ponadto niezbędne są woda destylowana lub dejonizowana, probówki i kontrole Procedura wykonania testu Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany odstęp między rekalibracjami: 4 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic, co najmniej o niskim i wysokim poziomie CA125 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 19

Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Interpretacja wyników Wyniki uzyskane przy użyciu testu IMMULITE 2000 OM-MA: większe lub równe 21 U/mL uznawane są za podniesione, a mniejsze niż 21 U/mL za prawidłowe. Należy pamiętać, że wyniki równe lub wyższe niż 21 U/mL mogą wystąpić u niewielkiego procentu osób zdrowych i chorych na schorzenia nienowotworowe takie jak zapalenie osierdzia, marskość wątroby, ciężka martwica wątroby, endometrioza (stadium II-IV), torbiele jajnika oraz w pierwszym trymestrze ciąży, a także u chorych na choroby złośliwe inne niż jajnika: raka macicy, wątrobiaka, raka gruczołowego trzustki i raki płuc. Wynik poniżej 21 U/mL nie świadczy jednoznacznie o braku szczątkowego raka jajnika lub nieobecności wznowy, ponieważ niektóre chore ze stwierdzoną histopatologicznie obecnością raka jajnika mają poziom CA125 poniżej 21 U/mL. Jednostka (U/mL) przyjęta w teście IMMULITE 2000 OM-MA ma charakter umowny, gdyż nie istnieje standardowa jednostka referencyjna. Nie należy, więc dokonywać ilościowych porównań pomiędzy różnymi metodami pomiaru CA125. Wyniki wydawane lekarzowi powinny zawierać nazwę testu, którym oznaczano poziomy antygenu CA125, a wyniki uzyskiwane różnymi testami nie mogą być stosowane zamiennie. Oczekiwane wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE OM-MA (patrz: Porównanie metod) można oczekiwać że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne. Badaniu testem IMMULITE OM-MA poddano 64 próbki surowic od zdrowych kobiet (wiek: 17 86 lat) z dwóch ośrodków klinicznych. Wyniki mieściły się w zakresie 1,9 16,3 U/mL z medianą = 4,8 U/mL. Rozkład wartości CA125 uzyskanych w badaniach przedstawiono na wykresie: Female Normals Te same badania objęły także dorosłe kobiety chore na raka jajników, choroby nienowotworowe (żołądkowo-jelitowe, układu moczowo płciowego i inne) oraz chorych na choroby złośliwe (piersi, żołądkowo jelitowe, moczowo płciowe i inne). Rozkład wartości wyników u tych chorych, a także wyników od zdrowych kobiet i mężczyzn objętych badaniami, przedstawiono w tabelach poniżej. Zdrowi: Zdrowe 21 21 50 100 osoby U/mL 50 U/mL 100 U/mL U/mL n Kobiety 64 0 0 0 64 50 lat 50 0 0 0 50 50 lat 14 0 0 0 14 Mążczyźni 28 0 0 0 28 Chorzy: 21 Chorzy U/mL Rak jajników 21 50 50 U/mL 100 U/mL 100 U/mL 36 10 7 43 96 Choroby nienowotworowe Żołądkowo -jelitowe 5 0 1 0 6 Piersi 11 2 1 0 14 Moczowopłciowe 7 0 0 1 8 Inne 40 4 0 0 44 Nowotwory złośliwe Żołądkowo -jelitowe 3 2 1 0 6 Moczowopłciowe 4 1 2 4 11 Inne 9 3 0 6 18 Podniesione poziomy CA125 mogą towarzyszyć endometriozie, 12 pierwszemu trymestrowi ciąży, 13 menstruacji i rakom trzustki, żołądka, okrężnicy i odbytnicy. 2 n 20 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

Wartości te mają charakter orientacyjny. Każde laboratorium powinno opracować własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach. Wyniki podano w U/mL. O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy uzyskanych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie. Zakres kalibracji: do 500 U/mL Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 1 U/mL Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia 80 000 U/mL Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela Precision). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniem (patrz: tabela Linearity). Odzysk: Badano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami CA125 o stężeniach, kolejno: 1025, 1950 i 4080 U/mL (patrz: tabela Recovery). Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej lub wolnej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 192 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3000 mg/dl nie ma wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Specyficzność: Metoda jest wysoce specyficzna w stosunku do CA125 (patrz: tabela Specifity). Porównanie metod: Wyniki porównywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu IMMULITE OM-MA (mono/poly, LKOP) w grupie 161 próbek (zakres stężeń od 4,16 do 364,7 U/mL). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,97 (IML) + 0,30 U/mL r = 0,985 Średnie: 106 U/mL (IMMULITE 2000) 109 U/mL (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. 2014 Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 21

Origin: UK 2014-03-19 Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom PIEL2KOP 5 {14} Changes in this Edition: cc#eu21848: Removed Siemens control (TMCO) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent Symbol Definition En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! υνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) 22 IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19)

LOT Symbol Definition En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: ιατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów 2008-01 En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Harmful Cz: Škodlivé El: Επιβλαβές Pl: Szkodliwy lub drażniący En: Corrosive Cz: Korozivní El: ιαβρωτικό Pl: Żrący BEAD PACK TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H ADJUSTOR AB Symbol Definition En: Dangerous for the environment Cz: Nebezpečné pro životní prostředí El: Επικίνδυνο για το περιβάλλον Pl: Niebezpieczny dla środowiska En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: οχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki En: Adjustor Antibody Cz: Protilátka proti kalibrátoru El: Ρυθμιστής αντισώματος Pl: Przeciwciało Kalibratora En: Toxic Cz: Toxické El: Τοξικό Pl: Toksyczny DIL En: Sample Diluent Cz: Diluent Vzorků El: Αραιωτικό δείγματος Pl: Rozcieńczalnik próbek IMMULITE 2000 OM-MA (PIEL2KOP-5 {14}, 2014-03-19) 23