RPR

RPR 100 72515 500 72516 ΚΙΤ ΓΙΑ ΤΗΝ ΠΟΙΟΤΙΚΗ ΚΑΙ ΗΜΙΠΟΣΟΤΙΚΗ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΩΝ ΑΠΟ ΑΥΤΑ ΕΝΑΝΤΙ ΤΟΥ ΤΡΕΠΟΝΗΜΑΤΟΣ ΣΧΕΤΙΚΩΝ ΜΕ ΤΗ ΣΥΦΙΛΗ, ΑΝΤΙΔΡΑΣΙΝΗΣ, ΣΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ΟΡΟ Ή ΤΟ ΑΝΘΡΩΠΙΝΟ ΠΛΑΣΜΑ ΜΕΣΩ ΜΑΚΡΟΣΚΟΠΙΚΗΣ ΣΥΓΚΟΛΛΗΣΗΣ ΣΕ ΚΑΡΤΕΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ ΜΙΑΣ ΧΡΗΣΗΣ 883684-12/2014

ΠΙΝΑΚΑΣ ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΩΝ 1. ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ... 3 2. ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΤΗΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ... 3 3. ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ... 3 4. ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ... 4 5. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ... 4 6. ΔΕΙΓΜΑΤΑ... 6 7. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ... 6 8. ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ... 9 9. ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ... 9 10. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ.... 10 [GR] 2

1. ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Τα κιτ RPR προορίζονται για χρήση για την ποιοτική και ηµιποσοτική ανίχνευση αντισωµάτων διαφορετικών από αυτά έναντι του τρεπονήµατος σχετικών µε τη σύφιλη (αντιδρασίνης) στον ανθρώπινο ορό ή το ανθρώπινο πλάσµα ως βοήθηµα στη διάγνωση µόλυνσης από σύφιλη. 2. ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ ΤΗΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ Η σύφιλη είναι µια χρόνια λοίµωξη που εξελίσσεται σε διακριτά στάδια µόλυνσης: πρωτογενές, δευτερογενές, τριτογενές και τεταρτογενές. Αυτά τα στάδια συνοδεύονται από διάφορα κλινικά συµπτώµατα, τα οποία δηµιουργούν συνήθως αρχικά συφιλιδικά έλκη και, εν συνεχεία, συφιλιδικά εξανθήµατα που ακολουθούνται από µακροχρόνιες περιόδους λανθάνουσας κατάστασης. Εάν η λοίµωξη δεν αντιµετωπιστεί, ενδέχεται να έχει ως αποτέλεσµα την εµφάνιση καρδιαγγειακών προβληµάτων και νευρικής σύφιλης. Η λοίµωξη προκαλείται από τη σπειροχαίτη Treponema pallidum και µεταδίδεται κυρίως µέσω σεξουαλικής επαφής, παρόλο που η ασθένεια µπορεί να µεταδοθεί µέσω µετάγγισης µολυσµένου αίµατος. Είναι επίσης δυνατή η ενδοµήτρια µόλυνση. Η καλλιέργεια του οργανισµού σε τεχνητά µέσα έχει αποδειχθεί σχεδόν αδύνατη και η διάγνωση της λοίµωξης συνήθως εξαρτάται από τη διαπίστωση της παρουσίας αντισωµάτων στο αίµα, τα οποία εµφανίζονται σύντοµα µετά την αρχική µόλυνση και ενδέχεται να εξακολουθήσουν να υπάρχουν για πολλά χρόνια. Οι εξετάσεις για τη σύφιλη χωρίζονται σε τέσσερις κατηγορίες: άµεση εξέταση στο µικροσκόπιο, εξετάσεις για αντισώµατα έναντι τρεπονήµατος, εξετάσεις για αντισώµατα διαφορετικά από αυτά έναντι του τρεπονήµατος και άµεσες εξετάσεις αντιγόνων. Η εξέταση RPR (Ταχεία αντιδρασίνη πλάσµατος) είναι µια εξέταση για αντισώµατα διαφορετικά από αυτά έναντι του τρεπονήµατος, εφόσον τα αντισώµατα που ανιχνεύονται δεν είναι ειδικά για το T pallidum, παρόλο που η παρουσία τους στον ορό ή το πλάσµα του ασθενούς σχετίζεται στενά µε µόλυνση από τον οργανισµό. Αυτό το είδος εξέτασης καταµετρά τα αντισώµατα (IgG και IgM) που παράγονται ως απόκριση στο λιποειδές υλικό που απελευθερώνεται από τα κύτταρα ξενιστές τα οποία έχουν υποστεί βλάβη, καθώς και στο υλικό που είναι παρόµοιο µε λιποπρωτεΐνη και απελευθερώνεται από τις σπειροχαίτες. Τα συγκεκριµένα αντισώµατα τείνουν να εξαφανίζονται µετά την επιτυχηµένη θεραπεία της λοίµωξης. 3. ΑΡΧΕΣ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ Τα κιτ RPR χρησιµοποιούν σωµατίδια άνθρακα επικαλυµµένα µε ένα µίγµα αντιγόνων λιπιδίων, τα οποία θα συνδυαστούν µε το αντίσωµα αντιδρασίνης που βρίσκεται στον ορό ή το πλάσµα του ασθενούς. Τα σωµατίδια υποβάλλονται σε εναιώρηση σε ένα µέσο που περιέχει συστατικά για την εξουδετέρωση µη ειδικών αντιδράσεων. Οι θετικές αντιδράσεις εµφανίζονται µέσω µακροσκοπικής συγκόλλησης (συστάδων) των σωµατιδίων. Παρόλο που το κιτ προορίζεται κυρίως για χρήση ως ποιοτική εξέταση, τα επίπεδα αντισωµάτων µπορούν να τιτλοδοτηθούν µέσω διπλάσιων αραιώσεων. Τα µοτίβα συγκόλλησης ερµηνεύονται διά γυµνού οφθαλµού. [GR] 3

4. ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ 4.1. Περιγραφή Αναγνωριστικά στοιχεία ετικέτας R1 RPR Antigen R2 Positive control R3 Negative control Περιγραφή Αντιγόνο RPR Σωµατίδια άνθρακα επικαλυµµένα µε αντιγόνο καρδιολιπίνης, λεκιθίνης και χοληστερόλης σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικού άλατος Δείγµα ελέγχου θετικού Ανθρώπινος ορός που περιέχει αντισώµατα σχετικά µε T.pallidum, αρνητικός για αντιγόνο HBs, αντισώµατα έναντι του HIV1/2 και έναντι του HCV, αραιωµένος σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικού άλατος Δείγµα ελέγχου αρνητικού Ορός κονίκλου σε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικού άλατος Φιάλη χορήγησης (επαναχρησιµοποιούµενη) Βελόνα χορήγησης (επαναχρησιµοποιούµενη) Παρουσίαση 72515 72516 100 εξετάσεις 500 εξετάσεις 1 φιαλίδιο 2 ml 1 φιαλίδιο 1 ml 1 φιαλίδιο 1 ml 1 φιαλίδιο 10 ml 1 φιαλίδιο 2 ml 1 φιαλίδιο 2 ml 1 1 1 1 Κάρτες εξέτασης (10 κύκλοι) 10 50 4.2. Απαιτήσεις αποθήκευσης και χειρισµού Αυτό το κιτ θα πρέπει να αποθηκεύεται στους +2-8 C. Φυλάσσετε τις φιάλες σε όρθια θέση. Μην τις καταψύχετε. Κάθε στοιχείο του κιτ το οποίο διατηρείται στους +2-8 C µπορεί να χρησιµοποιηθεί έως την ηµεροµηνία λήξης που αναγράφεται στη συσκευασία. Μετά το άνοιγµα και εφόσον δεν υπάρχει επιµόλυνση, τα αντιδραστήρια R1, R2 και R3 που έχουν συντηρηθεί στους +2-8 C µπορούν να χρησιµοποιηθούν έως την ηµεροµηνία λήξης που υποδεικνύεται στην ετικέτα. 5. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ Για διαγνωστική χρήση in vitro. Για χρήση από επαγγελµατίες στον χώρο της υγειονοµικής περίθαλψης. [GR] 4

5.1. Προφυλάξεις υγείας και ασφαλείας: Ο χειρισµός του παρόντος κιτ εξέτασης θα πρέπει να διεξάγεται µόνο από ειδικευµένο προσωπικό, καταρτισµένο στις εργαστηριακές διαδικασίες και εξοικειωµένο µε τους δυνητικούς κινδύνους τους. Φορέστε κατάλληλο προστατευτικό ρουχισµό, γάντια και προστατευτικά για τα µάτια/το πρόσωπο και χειριστείτε τον εξοπλισµό σύµφωνα µε την απαιτούµενη Ορθή Εργαστηριακή Πρακτική. Τα υλικά ελέγχου που παρέχονται προέρχονται από ανθρώπινο ορό. Έχουν εξεταστεί σε επίπεδο δότη και έχουν διαπιστωθεί αρνητικά για αντιγόνο HBs, αντισώµατα έναντι του HIV1/2 και έναντι του HCV. Καµία γνωστή µέθοδος εξέτασης δεν µπορεί να εξασφαλίσει την πλήρη απουσία µολυσµατικών παραγόντων. Για τον λόγο αυτό, η διαχείριση όλων των παραγώγων του ανθρώπινου αίµατος, των αντιδραστηρίων και των ανθρώπινων δειγµάτων θα πρέπει να γίνεται ως ικανών να µεταδώσουν µολυσµατικές ασθένειες, ακολουθώντας τις συνιστώµενες Γενικές Προφυλάξεις για µεταδιδόµενα διά του αίµατος παθογόνα, όπως αυτές ορίζονται από τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισµούς. Εκχύσεις βιολογικών υλικών: Οι εκχύσεις υλικών ανθρώπινης προέλευσης θα πρέπει να αντιµετωπίζονται ως δυνητικά µολυσµατικές. Οι εκχύσεις που δεν περιέχουν οξύ θα πρέπει να απολυµανθούν άµεσα, µαζί µε την περιοχή έκχυσης, τα υλικά και όλες τις επιµολυσµένες επιφάνειες ή τον εξοπλισµό, µε κατάλληλο χηµικό απολυµαντικό το οποίο είναι αποτελεσµατικό για δυνητικά βιολογικά επικίνδυνα υλικά που σχετίζονται µε τα χρησιµοποιούµενα δείγµατα (συνήθως χλωρίνη οικιακής χρήσης αραίωσης 1:10, αιθανόλη ή ισοπροπανόλη 70-80%, κάποιο ιωδοφόρο [όπως Wescodyne Plus 0,5%] κλπ.) και να σκουπιστούν καλά. Οι εκχύσεις που περιέχουν οξύ θα πρέπει να απορροφηθούν κατάλληλα (να σκουπιστούν) ή να εξουδετερωθούν, ενώ η περιοχή πρέπει να καθαριστεί καλά µε νερό και να σκουπιστεί τελείως. Τα υλικά που χρησιµοποιήθηκαν για την απορρόφηση της έκχυσης ενδεχοµένως να πρέπει να απορριφθούν ως βιολογικά επικίνδυνα απόβλητα. Στη συνέχεια, η περιοχή θα πρέπει να απολυµανθεί µε κάποιο χηµικό απολυµαντικό. ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Μην τοποθετείτε διαλύµατα που περιέχουν χλωρίνη µέσα στο αυτόκαυστο! Απορρίπτετε όλα τα δείγµατα και τα υλικά που χρησιµοποιούνται για τη διεξαγωγή της εξέτασης ως εάν περιείχαν µολυσµατικό παράγοντα. Η διαχείριση και η απόρριψη των εργαστηριακών, των χηµικών ή των βιολογικά επικίνδυνων αποβλήτων πρέπει να γίνεται σύµφωνα µε όλους τους τοπικούς, περιφερειακούς και εθνικούς κανονισµούς. Το Δελτίο Δεδοµένων Ασφαλείας διατίθεται στη διεύθυνση www.bio-rad.com. [GR] 5

5.2. Προφυλάξεις ως προς τη διαδικασία 5.2.1. Προετοιµασία Η αξιοπιστία των αποτελεσµάτων εξαρτάται από τη σωστή εφαρµογή της παρακάτω Ορθής Εργαστηριακής Πρακτικής: Μην αναµιγνύετε ή συσχετίζετε αντιδραστήρια από διαφορετικές παρτίδες σε µία εκτέλεση της εξέτασης. Μην χρησιµοποιείτε αντιδραστήρια που έχουν λήξει. Πριν από τη χρήση, περιµένετε για 30 λεπτά µέχρι τα αντιδραστήρια να σταθεροποιηθούν σε θερµοκρασία δωµατίου (18-30 C). 5.2.2. Επεξεργασία Μην αλλάζετε τη διαδικασία της δοκιµασίας. Χρησιµοποιείτε νέο ρύγχος κατανοµής για κάθε δείγµα. Μην αγγίζετε την επιφάνεια αντίδρασης των καρτών συγκόλλησης. 6. ΔΕΙΓΜΑΤΑ Τα δείγµατα ορού ή πλάσµατος (EDTA, κιτρικό νάτριο, νατριούχος ηπαρίνη και ACD) θα πρέπει να µην περιέχουν ερυθρά αιµοσφαίρια. Είναι δυνατή η αποθήκευσή τους στους +2-8 C για έως 7 ηµέρες πριν από την εξέταση. Τα δείγµατα που χρειάζονται πιο µακρόχρονη αποθήκευση θα πρέπει να καταψύχονται στους -20 C ή σε χαµηλότερη θερµοκρασία. Τα κατεψυγµένα δείγµατα θα πρέπει να έχουν αποψυχθεί και να είναι καλά αναµεµιγµένα πριν από την εξέταση. Μην επαναλαµβάνετε περισσότερους από 5 κύκλους κατάψυξης/απόψυξης. Τα δείγµατα που θερµαίνονται στους 56 C για 1 ώρα δεν επηρεάζουν τα αποτελέσµατα. Τα δείγµατα που περιέχουν έως 120 g/l αλβουµίνης, 200 mg/l χολερυθρίνης, 33 g/l τριελαΐνης και δείγµατα που περιέχουν έως 2 g/l αιµοσφαιρίνης δεν επηρεάζουν τα αποτελέσµατα. Ωστόσο, δεν συνιστάται η χρήση υπερλιπαιµικών δειγµάτων και δειγµάτων που έχουν υποστεί υπεραιµόλυση. Εάν τα δείγµατα πρόκειται να µεταφερθούν, πρέπει να συσκευάζονται σύµφωνα µε τους κανονισµούς που ισχύουν σχετικά µε τη µεταφορά αιτιολογικών παραγόντων και, κατά προτίµηση, να µεταφέρονται κατεψυγµένα. 7. ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ 7.1. Απαιτούµενα υλικά 7.1.1. Παρεχόµενα υλικά Κατάλληλα βαθµονοµηµένη µίας χρήσης φιάλη ένσταξης και βελόνα ένσταξης για τη χορήγηση των σωµατιδίων άνθρακα. 7.1.2. Απαιτούµενα υλικά που δεν παρέχονται Περιστροφέας για την περιστροφή των καρτών εξέτασης σε 100 rpm, σε έναν κύκλο διαµέτρου 1 cm κατά προσέγγιση. [GR] 6

Κατάλληλα βαθµονοµηµένη και συντηρηµένη πιπέτα και αναλώσιµα ρύγχη για την παροχή όγκου 50 µl. Αλατούχο διάλυµα 0,9% (για την ηµιποσοτική διαδικασία) 7.2. Διαδικασία δοκιµασίας Τα δείγµατα ελέγχου θετικού (R2) και αρνητικού (R3) του κιτ πρέπει να εκτελούνται µε κάθε εκτέλεση εξετάσεων. 7.2.1. Ποιοτική εξέταση 1. Τοποθετήστε 50 µl δείγµατος ή δείγµατος ελέγχου σε έναν κύκλο στην κάρτα εξέτασης. 2. Απλώστε οµοιόµορφα το δείγµα και τα δείγµατα ελέγχου στην κυκλική περιοχή της εξέτασης. 3. Ανακινήστε το φιαλίδιο του αντιγόνου RPR για να διασφαλίσετε ότι έχει αναµιχθεί καλά, ακριβώς πριν από τη χρήση, ώστε να αποφύγετε την καθίζηση. 4. Προσαρτήστε τη βελόνα ένσταξης στη φιάλη ένσταξης και αναρροφήστε το αντιγόνο RPR. 5. Αντιστρέψτε το σταγονόµετρο και πιέστε ελαφρά, ώστε να αφαιρέσετε τον αέρα από τη βελόνα. 6. Κρατώντας τη φιάλη ένσταξης κατακόρυφα επάνω από το δείγµα της εξέτασης, χορηγήστε µία µόνο σταγόνα αντιγόνου RPR. 7. Τοποθετήστε την κάρτα εξέτασης σε έναν περιστροφέα καρτών και περιστρέψτε σε 100 rpm για 8 λεπτά. 8. Διαβάστε αµέσως και ερµηνεύστε τα αποτελέσµατα οπτικά σε επαρκή φωτισµό. (Ανατρέξτε στην παράγραφο 7.4) Σηµείωση: Εάν δεν είναι δυνατή η άµεση ανάγνωση, η κάρτα πρέπει να διατηρηθεί στον περιστροφέα καρτών για έως 15 λεπτά 9. Επιστρέψτε το αντιγόνο που δεν χρησιµοποιήθηκε από τη βελόνα ένσταξης στο γυάλινο φιαλίδιο. 10. Καθαρίστε τη φιάλη ένσταξης και τη βελόνα ένσταξης µε αποσταγµένο νερό και αφήστε τις να στεγνώσουν, προτού τις χρησιµοποιήσετε ξανά. 7.2.2. Ηµιποσοτική εξέταση 1. Δηµιουργήστε διπλάσιες αραιώσεις από µη αραιωµένο δείγµα σε 1:16 σε αλατούχο διάλυµα 0,9%. 2. Τοποθετήστε 50 µl κάθε αραίωσης και των δειγµάτων ελέγχου σε έναν ξεχωριστό κύκλο στην κάρτα εξέτασης. 3. Απλώστε κάθε αραίωση οµοιόµορφα στον κύκλο εξέτασης. 4. Συνεχίστε τη διαδικασία από την ενότητα 3 της Ποιοτικής εξέτασης. Ο τίτλος του δείγµατος εκφράζεται ως το αντίστροφο της υψηλότερης αραίωσης που παρουσιάζει συγκόλληση των σωµατιδίων άνθρακα. Εάν η υψηλότερη αραίωση που θα εξεταστεί (1:16) είναι αντιδραστική, συνεχίστε µε µια περαιτέρω σειρά αραιώσεων, προετοιµάζοντας διπλάσιες αραιώσεις του δείγµατος από 1:32 έως 1:512 χρησιµοποιώντας αλατούχο διάλυµα 0,9%. Αναµίξτε καλά και συνεχίστε τη διαδικασία από το βήµα 2 της ηµιποσοτικής εξέτασης. 7.3. Ποιοτικός έλεγχος Χρησιµοποιήστε το Δείγµα ελέγχου θετικού (R2) και το Δείγµα ελέγχου αρνητικού (R3) σε κάθε εκτέλεση, για να επικυρώσετε τη δοκιµασία. [GR] 7

7.4. Ερµηνεία των αποτελεσµάτων και Κριτήρια επικύρωσης εξέτασης Έντονα αντιδραστικό (SR): Μεγάλες συστάδες σωµατιδίων άνθρακα µε διαυγές φόντο. Αντιδραστικό (R): Μεγάλες συστάδες σωµατιδίων άνθρακα κάπως πιο διεσπαρµένες από ό,τι στο Έντονα αντιδραστικό. Αδύναµα αντιδραστικό (WR): Μικρές συστάδες σωµατιδίων άνθρακα µε ανοιχτό γκρίζο φόντο. Ίχνη αντίδρασης (TR): Ελάχιστη δηµιουργία συστάδων από σωµατίδια άνθρακα, η οποία παρουσιάζεται συνήθως ως ένα κουµπί συσσωµατωµάτων στο κέντρο του κύκλου εξέτασης ή διεσπαρµένων στα άκρα του κύκλου εξέτασης. Μη αντιδραστικό (NR): Συνήθως ένα λείο γκρίζο µοτίβο ή ένα κουµπί µη συσσωµατωµένων σωµατιδίων άνθρακα στο κέντρο του κύκλου εξέτασης ή ένας µεγάλος κύκλος σωµατιδίων άνθρακα χωρίς συστάδες στο εσωτερικό του. Τα αντιδραστικά δείγµατα θα πρέπει να καταγράφονται ως θετικά σε αντισώµατα και (λόγω της µη συγκεκριµένης φύσης των αντισωµάτων που ανιχνεύονται) να υπόκεινται σε περαιτέρω εξετάσεις, προκειµένου να προσδιοριστεί η παρουσία ή η απουσία συγκεκριµένων αντισωµάτων έναντι του τρεπονήµατος. Για να είναι έγκυρη η δοκιµασία, το Δείγµα θετικού ελέγχου πρέπει να έχει ως αποτέλεσµα ένα Έντονα αντιδραστικό µοτίβο, ενώ το Δείγµα αρνητικού ελέγχου θα πρέπει να έχει ως αποτέλεσµα ένα σαφώς Μη αντιδραστικό αποτέλεσµα. [GR] 8

8. ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΣ ΕΞΕΤΑΣΗΣ Δεν διατίθενται µεµονωµένες εξετάσεις ή οριστικά πρότυπα αναφοράς για κάθε στάδιο της ασθένειας. Ως εκ τούτου, η διάγνωση της σύφιλης βασίζεται κυρίως στις ορολογικές εξετάσεις και απαιτεί αποτελέσµατα τόσο από µεθόδους αντισωµάτων διαφορετικών από αυτά έναντι του τρεπονήµατος όσο και από µεθόδους αντισωµάτων έναντι του τρεπονήµατος. Όταν η ανάγνωση δεν γίνεται αµέσως µετά την περιστροφή ενδέχεται να παρατηρηθούν ψευδώς θετικά αποτελέσµατα. Η δοκιµή άνθρακα RPR δεν είναι ειδική για τη σύφιλη. Όλα τα αντιδραστικά δείγµατα θα πρέπει να επανεξετάζονται µε µεθόδους αντισωµάτων έναντι του τρεπονήµατος, όπως η TPHA, για επιβεβαίωση των αποτελεσµάτων. 9. ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ 9.1. Μελέτη ακριβείας Ένα πάνελ δειγµάτων που αποτελείτο από ένα αρνητικό δείγµα ελέγχου, 1 χαµηλό δείγµα θετικού ελέγχου (τίτλος 1:4) και 1 δείγµα θετικού ελέγχου (τίτλος 1:16) εξετάστηκε για επαναληψιµότητα σε 8 επαναλήψεις κατά τη διάρκεια της ίδιας εκτέλεσης. Για µελέτες ενδιάµεσης ακριβείας και αναπαραγωγιµότητας µεταξύ παρτίδων, τα δείγµατα εξετάστηκαν σε 2 όµοια αντίγραφα ανά ηµέρα για διάστηµα 5 ηµερών (ανάγνωση από δύο διαφορετικούς χειριστές) και σε δύο διαφορετικές παρτίδες. 9.1.1. Επαναληψιµότητα Όλα τα όµοια αντίγραφα αρνητικών δειγµάτων έδωσαν αρνητικά αποτελέσµατα και όλα τα όµοια αντίγραφα θετικών δειγµάτων έδωσαν θετικά αποτελέσµατα. 9.1.2. Ενδιάµεση ακρίβεια/αναπαραγωγιµότητα µεταξύ παρτίδων Όλα τα όµοια αντίγραφα αρνητικών δειγµάτων έδωσαν αρνητικά αποτελέσµατα και όλα τα όµοια αντίγραφα θετικών δειγµάτων έδωσαν θετικά αποτελέσµατα, ανεξαρτήτως συνθηκών. 9.2. Κλινική απόδοση 9.2.1. Προσδιοριστικότητα Η µελέτη προσδιοριστικότητας ήταν µια αναδροµική µελέτη που πραγµατοποιήθηκε σε 102 κατεψυγµένα δείγµατα ορού από τη ρουτίνα του εργαστηρίου ενός Κέντρου σεξουαλικά µεταδιδόµενων νοσηµάτων στη Γαλλία. Τα αποτελέσµατα από τη δοκιµασία RPR σύφιλης συγκρίθηκαν µε µια δοκιµασία RPR/VDRL µε πιστοποίηση CE. Συνολικός αριθµός δειγµάτων Αρχικά αντιδραστικό (IR) Αντιδραστικό κατ' επανάληψη (RR) Προσδιοριστικότητα RR (%) Διάστηµα αξιοπιστίας 95% 102 2 (διφορούµενο) 0 100% 102/102 [96,4% - 100,0%] Σε 102 δείγµατα, 2 βρέθηκαν διφορούµενα. Μετά την επανάληψη της εξέτασης, όλα τα δείγµατα ήταν αρνητικά. [GR] 9

Η διαγνωστική προσδιοριστικότητα στα αναδροµικά δείγµατα ήταν ισοδύναµη µε 102/102 = 100% µε όριο εµπιστοσύνης 95% [96,4% - 100,0%]. 9.2.2. Ευαισθησία Η µελέτη ευαισθησίας ήταν µια αναδροµική µελέτη που πραγµατοποιήθηκε σε 101 κατεψυγµένα δείγµατα ορού από τη ρουτίνα του εργαστηρίου ενός Κέντρου σεξουαλικά µεταδιδόµενων νοσηµάτων στη Γαλλία. Τα αποτελέσµατα από τη δοκιµασία RPR σύφιλης συγκρίθηκαν µε µια δοκιµασία RPR/VDRL µε πιστοποίηση CE. Συνολικός αριθµός δειγµάτων Αρχικά αντιδραστικό (IR) Αντιδραστικό κατ' επανάληψη (RR) Προσδιοριστικότητα RR (%) Διάστηµα αξιοπιστίας 95% 101 100 (1 διφορούµενο) 101 100% 101/101 [96,4% - 100,0%] Σε 101 δείγµατα, 1 βρέθηκε διφορούµενο. Μετά την επανάληψη της εξέτασης, όλα τα δείγµατα ήταν θετικά. Η διαγνωστική ευαισθησία στα αναδροµικά δείγµατα ήταν ισοδύναµη µε 100% (101/101) µε όριο εµπιστοσύνης 95% [96,4% - 100,0%]. 9.3. Αναλυτική ειδικότητα - Μελέτη διασταυρούµενης αντιδραστικότητας Η αναλυτική ειδικότητα της δοκιµασίας RPR σύφιλης αξιολογήθηκε σε ένα σύνολο 65 δειγµάτων διασταυρούµενης αντιδραστικότητας τα οποία επελέγησαν από άλλες µολυσµατικές ασθένειες ή/και άλλες παθήσεις που µπορούν να παρουσιάσουν ψευδώς θετικό αποτέλεσµα λόγω της µη προσδιοριστικότητας (ρευµατοειδής παράγοντας, νόσος του Lyme, EBV, ερυθρά, λεπτοσπείρωση, ΣΕΛ (λύκος), ηπατίτιδα B, ηπατίτιδα C, HIV ½, πολύτοκες γυναίκες, έγκυες γυναίκες). Η προσδιοριστικότητα της δοκιµασίας που επετεύχθη ισοδυναµεί µε 100,0% (65/65) µε όριο εµπιστοσύνης 95% [94,5% - 100,0%]. 9.4. Φαινόµενο προζώνης Τρία (3) εξαιρετικά υψηλά θετικά δείγµατα Ab σύφιλης (>1:128) εξετάστηκαν µη αραιωµένα και αραιωµένα, προκειµένου να επαληθευτεί η απουσία φαινοµένου προζώνης. Όλα τα µη αραιωµένα θετικά δείγµατα είναι θετικά. Κανένα φαινόµενο προζώνης δεν παρατηρείται µε τίτλους έως 1:256. 10. ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΚΕΣ ΑΝΑΦΟΡΕΣ. 1. Larsen SA.,Pettit, et coll., EDTA treated plasma in the Rapid Plasma Reagin card test and the toluidine red unheated serum test for serodiagnosis of syphilis. J Clin Microbiology 1983;17;431-5 2. Larsen S.A., Pope V., et coll., A manual of Tests for Syphilis. 9th Edition ;1998; 193 207 [GR] 10

3. Portnoy J. Modifications of the rapid plasma reagin (RPR) card test for syphilis, for use in large-scale testing.am J Clin Pathol;1963;40;473-9 4. Singh AE and Romanowski. Syphilis: Review with emphasis on clinical, epidemiological, and some biologic features. Clin Microbiol Rev. 1999 Apr; 12(2):187 209. 5. Stability of selected serum proteins after long-term storage in the Janus Serum Bank. Clin Chem Lab Med. 2009. 47:596-606. [GR] 11

[GR] 12

Bio-Rad 3, Boulevard Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette Γαλλία Τηλ.: +33 (0) 1 47 95 60 00 Φαξ: +33 (0) 1 47 41 91 33 12/2014 www.bio-rad.com 883684 [GR] 13