ΕΓΨΕΤΕΜΙ ΟΚΤΟΡΙ (Πη..) ΡΤΕΚΕΖ Σ Τ ΖΙΣΕΙ. ϑ Μ ΣΖΕΡΕΚ ΑΖ ΑΚΥΤ ΛΕΥΚ ΜΙIΚ. ΙΑΓΝΟΣΖΤΙΚIϑIΒΑΝ Σ ΠΡΟΓΝΟΣΖΤΙΚΑΙ ΜΕΓ Τ Λ Σ ΒΕΝ. ρ.

Transcript

1 ΕΓΨΕΤΕΜΙ ΟΚΤΟΡΙ (Πη..) ΡΤΕΚΕΖ Σ Τ ΖΙΣΕΙ ϑ Μ ΣΖΕΡΕΚ ΑΖ ΑΚΥΤ ΛΕΥΚ ΜΙIΚ ΙΑΓΝΟΣΖΤΙΚIϑIΒΑΝ Σ ΠΡΟΓΝΟΣΖΤΙΚΑΙ ΜΕΓ Τ Λ Σ ΒΕΝ ρ. Καρ σζι ϖα Τ µαϖεζετ!: ρ. Καππελµαψερ ϑ νοσ εγψετεµι δοχενσ ΕΒΡΕΧΕΝΙ ΕΓΨΕΤΕΜ ΟΡςΟΣ Σ ΕΓ ΣΖΣ ΓΤΥ ΟΜIΝΨΙ ΧΕΝΤΡΥΜ ΚΛΙΝΙΚΑΙ ΒΙΟΚ ΜΙΑΙ Σ ΜΟΛΕΚΥΛIΡΙΣ ΠΑΤΟΛ ΓΙΑΙ ΙΝΤ ΖΕΤ εβρεχεν, 2002.

2 1

3 Ταρταλοµϕεγψζ κ Ταρταλοµϕεγψζ κ... 2 Βεϖεζετ σ... 3 Χ λκιτ ζ σεκ Μ δσζερεκ Ερεδµ νψεκ Μεγβεσζ λ σ Κ σζ νετνψιλϖ ν τ σ Ρ ϖιδ τ σεκ ϕεγψζ κε. 59 Α τ ζισεκβεν ελ!φορδυλ ηιϖατκοζ σοκ ϕεγψζ κε. 60 Α τ ζισεκετ µεγαλαποζ τυδοµ νψοσ µυνκ κ ϕεγψζ κε. 79 Α τ ζισεκβεν φελ νεµ ηασζν λτ εγψ β τυδοµ νψοσ µυνκ κ ϕεγψζ κε 80 Φ γγελ κ α τ ζισεκ αλαπϕ υλ σζολγ λ κ ζλεµ νψεκ

4 ΒΕςΕΖΕΤ Σ Α µαλιγνυσ ηεµατολ γιαι βετεγσ γεκ γψ γψυλ σι εσ λψ νεκ ϕαϖ τ σ βαν, α τερ πια σικερεσσ γ νεκ ν ϖελ σ βεν λ νψεγεσ σζερεπετ ϕ τσζικ α ποντοσ διαγν ζισ φελ λλ τ σα, α λευκ µια τ πυσ νακ κορρεκτ µεγηατ ροζ σα. Α κεζελ σ ϖ ρηατ κιµενετελ νεκ ελ!ρεϕελζ σ τ σζολγ λϕα α κ λ νβ ζ! προγνοσζτικαι φακτοροκ δετεκτ λ σα µ ρ α βετεγσ γ κεζδετ ν, µελψεκ ισµερετε α κεµοτερ πι σ κεζελ στ ισ βεφολψ σοληατϕα. Μινδεηηεζ α τυµοροσ σεϕτεκ µιν λ σοκολδαλ ββ καρακτεριζ λ σα, ν. µυλτιπαραµετρικυσ αναλ ζισε σζ κσ γεσ, µελψνεκ σορ ν εγψσζερρε τ ββ αδατοτ νψερηετ νκ α σεϕτεκ στρυκτυρ λισ σ φυνκχιον λισ ϕελλεµζ!ιρ!λ. Αζ ιµµυνφενοτ πυσ ϖιζσγ λατοκ α σεϕτϖοναλ σ α σεϕτ ρεττσ γι λλαποτ νακ ποντοσ µεγ λλαπ τ σα µελλεττ ινφορµ χι τ νψ ϕτανακ α τυµοροσ σεϕτεκ αρ νψ ρ λ, α κ ροσ µαρκερ εξπρεσσζι κρ λ σ α µαλιγνυσ σεϕτχσοπορτον βελ λ αζ εσετλεγεσ σζυβποπυλ χι κρ λ. Α λευκ µι σ σεϕτεκ κοµπλεξ ιµµυνολ γιαι σ γενετικαι ϕελλεµζ σε νεµ χσακ α διαγν ζισ φελ λλ τ σ βαν σ α προγν ζισ ελ!ρεϕελζ σ βεν φοντοσ, ηανεµ κ ϖετ σεσ ϖιζσγ λατοκ φορµ ϕ βαν α βετεγσ γ λεφολψ σα σορ ν ιγεν ναγψ σζερεπ κ ϖαν α ρεµισσζι δετεκτ λ σ βαν, α µινιµ λισ ρεζιδυ λισ βετεγσ γ (ΜΡ ) κιµυτατ σ βαν σ α ρελαπσζυσοκ κοραι φελισµερ σ βεν ισ. Α µαλιγνυσ ηεµατολ γιαι κ ρκ πεκ διαγνοσζτικ ϕ βαν σ αζ ΜΡ ιµµυνολ γιαι 3

5 κιµυτατ σ βαν µα α διρεκτ ϕελ λτ µονοκλον λισ αντιτεστεκκελ ϖ γζεττ ραµλ σι χιτοµετριαι αναλ ζισ ϕελεντι α λεγοβϕεκτ ϖεββ σ λεγτ ββ ινφορµ χι τ ηορδοζ ϖιζσγ λατι µ δσζερτ. Α µαρκερϖιζσγ λατοκ διαγνοσζτικαι ϕελεντ!σ γε Α σεϕτφελσζ νι σ ιντραχιτοπλαζµατικυσ µαρκερκ ντ ισµερτ φεη ρϕ κ ζ µε ρελατ ϖε ναγψ κ πιασζ µβαν σζ µβαν µυτατηατ κι νορµ λ σ λευκ µι σ σεϕτεκεν εγψαρ ντ. Ακυτ λευκ µι σ µιντ κ εσετ ν, α κ ροσ σεϕτϖοναλ ( λινεαγε ) λεγµεγβ ζηατ ββ µεγηατ ροζ σ ρα αζονβαν αζ ιντραχιτοπλαζµατικυσ αντιγ νεκ σζολγ λνακ, µελψεκ λταλ βαν µ ρ α φελσζ νι µαρκερεκ µεγϕελεν σε ελ!ττ κιµυτατηατ ακ (1,2). Αζ ιντραχελλυλ ρισ µαρκερεκ µεγηατ ροζ σ ηοζ α σεϕτεκετ περµεαβιλιζ λνι κελλ, µελψ ϕελεντ!σεν βεφολψ σοληατϕα α ϖιζσγ λατ σζενζιτιϖιτ σ τ σ σπεχιφιχιτ σ τ ισ (3,4) εζ ρτ κ λ ν φιγψελµετ ιγ νψελ α µιντα ελ!κ σζ τ σ τεχηνικαι ολδαλα, αζαζ α µεγφελελ! περµεαβιλιζ λ σ φιξ λ σζερ ηασζν λατα. Α µψελοιδ, α Τ σ Β λψµπηοιδ ϖοναλακ ελκ λ ν τ σ ρε λεγινκ ββ α µιελοπεροξιδ ζ (ΜΠΟ), χψχ 3 σ χψχ 79α ηασζν ληατ (5 8). Εζεν αντιγ νεκ ελλεν τ ββ αντιτεστ κλ ν λλ ρενδελκεζ σρε, µελψεκ σπεχιφιχιτ σα σ σζενζιτιϖιτ σα ελτ ρ!. Εµελλεττ αζ αλκαλµαζοττ φλυορεσζχενσ φεστ κεκ ισ βεφολψ σολϕ κ α δετεκτ λ σ σζενζιτιϖιτ σ τ. Εζ ρτ α περµεαβιλιζ λ σζερ µεγϖ λασζτ σα µελλεττ νεµ 4

6 λ νψεγτελεν αζ αλκαλµαζοττ αντιτεστ κλ νοκ ιλλ. α κ λ νβ ζ! φλυοροφ ροκ κοµβιν χι ϕ νακ ϖιζσγ λατα α σεϕτϖοναλ µεγβ ζηατ αζονοσ τ σ νακ χ λϕ β λ. Β ρ αζ ραµλ σι χιτοµετριαι ϖιζσγ λατοκκαλ α µαλιγνιτ σ αζ εσετεκ τ ββσ γ βεν ϕ λ βεσοροληατ α ϕελενλεγ ισµερτ µαρκερεκ σεγ τσ γ ϖελ, φοντοσ ολψαν ϕ µαρκερεκ κερεσ σε, µελψεκ αζ εγψεσ αλτ πυσοκ ελκ λ ν τ σ τ βιζτονσ γοσαββ τεσζικ. Κ λ ν σεν αχυτ µψελοιδ λευκ µι κ (ΑΜΛ) εσετ ν ϕελεντηετ νεη ζσ γετ εγψεσ εσετεκβεν α ΦΑΒ τ πυσ σζεριντι κλασσζιφικ χι αζ ιµµυνφενοτ πυσ ϖιζσγ λατοκ αλαπϕ ν. Α δε νοϖο εσετεκ διαγνοσζτικαι µαρκερ ϖιζσγ λαται σορ ν α η ρµασ ϖαγψ ν γψεσ ϕελ λ σ ραµλ σι χιτοµετριαι αναλ ζισ αλκαλµαζ σ ϖαλ λεηετ µεγφελελ! µ δον καρακτεριζ λνι α σεϕτεκετ, ιλλετϖε εζ βιζτοσ τϕα ρεζιδυ λισ βετεγσ γ εσετ ν α κ ροσ σεϕτεκ σζενζιτ ϖ σ µα ελφογαδοττ κιµυτατ σι λεηετ!σ γ τ ισ (9,10). Α σζ λεσ κ ρβεν ηασζν λτ η ρµασ ϕελ λ σ εσετ ν αζ ιρ νψδιαγν ζισ αλαπϕ ν ϖ λασζτοττ πανελεκ αζ ιρ νψαδ ακ, αζ εζεκεν κ ϖ λ αλκαλµαζανδ εγψ β ιντραχιτοπλαζµατικυσ σ φελσζ νι µαρκερεκ κοµβιν χι ϕ τ αζ αδοττ εσετ αναµνεσζτικυσ, κλινικαι ϖαγψ λαβορατ ριυµι σπεχιφικυµαι βεφολψ σοληατϕ κ. Α τ ββεσ µαρκερκοµβιν χι κ αλκαλµαζ σ ν κ ϖ λ, ιλλετϖε εζζελ εγψιδεϕ λεγ, εγψ µ σικ διαγνοσζτικαι µεγκ ζελ τ σ αζ ολψαν µαρκερεκ αλκαλµαζ σα, µελψεκ κ λ νβ ζ! ιντενζιτ σσαλ ϕελεννεκ µεγ νορµ λ ιλλετϖε µαλιγνυσ σεϕτεκεν. Α ϕελ λ σι ιντενζιτ σ κ λ νβσ γε µεγαδηατ α ηαγψοµ νψοσ διµ/βριγητ ελνεϖεζ σσελ, 5

7 (α διµ ϕελζ σ α γψενγε ϕελ λ!δ σρε υταλ, µ γ α βριγητ ελνεϖεζ στ αζ ιντενζ ϖ ϕελ λ!δ σρε ηασζν λϕυκ) ϖαγψ αζ εγζακτ αντιγ νσζ µ/σεϕτ κϖαντιτατ ϖ µεγηατ ροζ σ ϖαλ, µελψετ βεαδ εκκελ τ ρτ ν! καλιβρ χι αλαπϕ ν ϖ γζ νκ. Αζ ιροδαλοµβαν µ ρ τ ββ µαρκερ εσετ ν ιγαζολτακ κϖαντιτατ ϖ ελτ ρ σεκετ νορµ λ σ λευκ µι σ σεϕτεκ κ ζτ (11 13). Αζ ελτ ρ! σεϕτφελσζ νι δενζιτ στ µυτατ φεη ρϕ κ κ ζτ κ λ ν σ φοντοσακ αζοκ, µελψεκ α µαλιγνυσ σεϕτεκ φυνκχι ϕα πλ. αδη ζι, αγγρεγ χι, τρανσζενδοτηελι λισ µιγρ χι σζεµποντϕ β λ ϕελεντ!σ γγελ β ρνακ, µιντ πλ. αζ ιντεγρινεκ ϖαγψ σζελεκτιν λιγανδοκ (14 16). Μυλτιδρογ ρεζισζτενχια µεχηανιζµυσοκ: µεµβρ ν τρανσζπορτερεκ Α µεµβρ ν φεη ρϕ κ εγψ ρ σζε εσετ ν α φεντι ιµµυνολ γιαι κιµυτατ σ νεµ µινδιγ χ λραϖεζετ!, εγψρ σζτ µερτ αζοκ ϖαγψ ρενδκ ϖ λ αλαχσονψ κ πιασζ µβαν ϖαννακ ϕελεν, ϖαγψ νεµ ρενδελκεζ νκ α µεγφελελ! αντιτεσττελ αζ εξτραχελλυλ ρισ δοµ ννελ σζεµβεν, ιλλετϖε λεγφ!κ ππεν αζ ρτ µερτ α φεη ρϕε ϕελενλ τ ν λ σοκκαλ φοντοσαββ αννακ φυνκχιον λισ ακτιϖιτ σα. Ιδε ταρτοζνακ βιζονψοσ µεµβρ ν τρανσζπορτερεκ, µελψεκ σζ µοσ µολεκυλ τ τ ϖολ τανακ ελ α σεϕτβ!λ ακτ ϖ πυµπαφυνκχι ϖαλ (17). Α σεϕτβ!λ ναγψ σεβεσσ γγελ ελτ ϖολ τοττ ανψαγοκ κ ζ ταρτοζικ α µαλιγνυσ ηεµατολ γιαι κ ρκ πεκ κεζελ σ βεν αλκαλµαζοττ χιτοσζτατικυµοκ εγψ ρ σζε ισ, µι λταλ α σεϕτ ιλλετϖε α βετεγ εγψιδεϕ λεγ τ ββ χιτοσζτατικυµµαλ σζεµβεν 6

8 ρεζισζτενσ ϖ λικ (µυλτι δρογ ρεζισζτενχια ϕελενσ γ Μ Ρ) (18,19). Αζ ελνεϖεζ σ αββ λ αδ δικ, ηογψ σζεµβεν α σζερϖεζετ εγψ β σπεχιφικυσ τρανσζπορτ φολψαµαταιϖαλ αηολ α σζυβσζτρ τοκ κ ρε λταλ βαν ϕ λ µεγηατ ροζοττ κ µιαι σζερκεζετ ϖεγψ λετρε κορλ τοζ δικ, εζεκ α φεη ρϕ κ σζ µοσ ελτ ρ! σζερκεζετ µολεκυλ τ κ πεσεκ πυµπα µεχηανιζµυσυκ ρ ϖ ν α σεϕτβ!λ ελτ ϖολ τανι, αζαζ αζ λταλυκ οκοζοττ δρογ ρεζισζτενχια τ ββ κ λ νβ ζ! χιτοσζτατικυµ χσοπορτοτ ριντ. Α µαρκερ ϖιζσγ λατοκ διαγνοσζτικυσ σζερεπ ϖελ σζεµβεν εννεκ δετεκτ λ σα ελσ!σορβαν τερ πι σ σ προγνοσζτικαι σζεµποντβ λ φοντοσ. Α χιτοσζτατικυµοκ ηατ σταλανσ γ ηοζ σζ µοσ τ νψεζ! ϖεζετηετ. Εζ λεηετ µαγ νακ α τυµορνακ ιλλ. τυµορ σεϕτεκνεκ α ϕελλεγζετεσσ γε, ϖαγψ αδ δηατ α σζερϖεζετ σαϕ τοσσ γαιβ λ. Υτ ββιηοζ λεγινκ ββ φαρµακοκινετικαι ελτ ρ σεκ ταρτοζνακ, µιντ α γψ γψσζερ νεµ µεγφελελ! ακτιϖ λ δ σα (πλ. προ δρογ εσετ ν), γψορσ µεταβολιζµυσα ϖαγψ ηα α τυµορ λοκαλιζ χι ϕα ιλλ. κερινγ σε νεµ τεσζι λεηετ!ϖ α γψ γψσζερ ελϕυτ σ τ α µαλιγνυσ σεϕτεκηεζ. Α χιτοσζτατικυµ ρεζισζτενχια ϖιζσγ λατ ν λ αζονβαν ελσ!σορβαν µαγυκνακ α τυµορ σεϕτεκνεκ α τυλαϕδονσ γαιτ σ ϖ δελµι ρενδσζερειτ τυδϕυκ ιν ϖιτρο µ δσζερεκκελ ϖιζσγ λνι. Ηεµατολ γιαι κ ρκ πεκβεν σ σζολιδ τυµοροκ εσετ ν ισ αζ εγψικ λεγϕελεντ!σεββνεκ ταρτοττ τ νψεζ! αζ ν. µεµβρ ν τρανσζπορτερεκ ϕελενλ τε, 7

9 µελψεκ α χιτοσζτατικυµοκατ µ γ ηατ συκ κιφεϕτ σε ελ!ττ ελτ ϖολ τϕ κ α σεϕτβ!λ, γψ νεµ τεσζικ λεηετ!ϖ α κεµοτερ πι σ σζερ ολψαν ιντραχελλυλ ρισ κονχεντρ χι ϕ νακ ελ ρ σ τ, µελψ α µαλιγνυσ σεϕτ ελπυσζτ τ σ ηοζ σζ κσ γεσ. Α φεντι µεµβρ ν φεη ρϕ κ αζ ΑΒΧ τρανσζπορτερεκ (20,21) ναγψ χσοπορτϕ βα ταρτοζνακ (ΑΒΧ=ΑΤΠ βινδινγ χασσεττε), ιδε ταρτοζικ α Π γλικοπροτειν (Πγπ), αζ ΜΡΠ χσαλ δ φεη ρϕ ι (µυλτιδρυγ ρεσιστανχε ρελατεδ προτειν) σ αζ ϕαββαν λε ρτ ΒΧΡΠ (βρεαστ χανχερ ρελατεδ προτειν). ςαλαµεννψι φεη ρϕ νεκ κ ζ σ σαϕ τσ γα, ηογψ αζ ιντραχελλυλ ρισ ρ γι βαν ταλ ληατ νυκλεοτιδ κ τ! ρ γι (ΝΒ =νυχλεαρ βινδινγ δοµαιν) κ πεσ ΑΤΠ µολεκυλ τ µεγκ τνι σ ΑΤΠ ηιδρολ ζισε µελλεττ βιζτοσ τϕα α κ λ νβ ζ! µολεκυλ κ τρανσζπορτϕ τ. Εζεν ΑΒΧ τρανσζπορτερεκ προγνοσζτικαι σζερεπε, α τερ πι τ κεδϖεζ!τλεν λ βεφολψ σολ ηατ σα µα µ ρ βιζονψ τοττνακ τεκιντηετ! (22 24). Α φ! µεµβρ ν τρανσζπορτερεκ ϕελλεµζ σε α. Π γλικοπροτειν Α φεη ρϕ τ α 7. κροµοσζ µ ν εληελψεζκεδ! Μ Ρ1 γ ν κ δολϕα αµινοσαϖβ λ λλ, µολεκυλα σ λψα 170 κ, εζ ρτ Π 170 νεκ ισ νεϖεζικ. Κ τ ηοµολ γ δοµ νβ!λ λλ διµερ, µελψνεκ µινδκ τ δοµ νϕα 6 τρανσζµεµβρ ν σζεγµεντετ ταρταλµαζ σ µινδκ τ δοµ νβαν ιντραχελλυλ ρισαν ηελψεζκεδικ ελ α νυκλεοτιδ κ τ! ρ γι (25, 26). Εµλ!σ κβεν εγψ γ ν κ δολϕα α κ τ δοµ ντ σ α κ τ νυκλεοτιδ κ τ! ρ γι τ. Α κ λσ! φελσζ νεν αζ ελσ! σ µ σοδικ 8

10 τρανσζµεµβρ ν σζεγµεντεκ κ ζ ττ ταλ ληατ γλικοζιλ χι σ ηελψ, αηολ Ν ηεζ καπχσολ δϖα κ τ!δικ α σζ νηιδρ τ χσοπορτ. Εµβερβεν α µυλτι δρογ ρεζισζτενχι τ οκοζ Μ Ρ1 γ ν λταλ κ δολτ φεη ρϕε µελλεττ λ τεζικ εγψ Μ Ρ3 γ ν λταλ κ δολτ προτειν ισ, µελψνεκ α γψ γψσζερ ρεζισζτενχι βαν νινχσ σζερεπε. Εζ α προτειν µ κ δ σ τ τεκιντϖε εγψ φλιππ ζ, (φοσζφατιδιλ κολιν τρανσζλοκ ζ), µελψ φοσζφολιπιδεκ επ βε ϖαλ τρανσζπορτϕ τ βιζτοσ τϕα (27). Α Π γλικοπροτειν τρανσζπορτ µ κ δ σε νεµ µινδεν ρ σζλετ βεν ισµερτ, σζ µοσ βιζονψ τ κ σζ λ αµελλεττ, ηογψ α Πγπ ηεζ κ ζϖετλεν λ κ τ!δνεκ α γψ γψσζερµολεκυλ κ (σζυβσζτρ τοκ) σ αζ ν. ρεϖερτ λ γενσεκ (µοδυλ τοροκ) ισ, υτ ββιακ α γψ γψσζερµολεκυλ κ τρανσζπορτϕ τ γ τολϕ κ σ εζ λταλ α κεµοτερ πι ϖαλ εγψ ττ αδϖα ν ϖελικ αννακ ηατ κονψσ γ τ (28 30). Α σζυβσζτρ τοκ ιλλ. µοδυλ τοροκ κ τ!δ σε α Π γπ σζερκεζετ βεν κονφορµ χι ϖ λτοζ στ οκοζ. Α µολεκυλ κ ελτ ϖολ τ σα κορ ββι ελµ λετεκ σζεριντ α τρανσζµεµβρ ν δοµ νεκ λταλ λ τρεηοζοττ χσατορν ν κερεσζτ λ τ ρτ νικ, ϕαββ ελκ πζελ σεκ αλαπϕ ν α φλιππ ζ ιλλ. ϖαχυυµ χλεανερ µοδελλ ρϕα λε ποντοσαββαν α τρανσζπορτερ µ κ δ σ τ (31,32): εσζεριντ α σζυβσζτρ τοκ µ γ α µεµβρ ν λιπιδ ρ τεγ β!λ κιπυµπ λ δνακ, µιελ!ττ α χιτοπλαζµ τ ελ ρν νεκ. Κλινικαι σζεµποντβ λ φοντοσ, ηογψ α λευκ µια κεζελ σ βεν ηασζν λτ σζερεκ εγψ ρ σζε α Πγπ σζυβσζτρ τϕα, γψ ϕελενλ τε α τερ πια ηατ σταλανσ γ τ οκοζηατϕα α ϖινκα αλκαλοιδοκ (ϖινκρισζτιν, ϖινβλασζτιν), αντραχικλινεκ (δαυνορυβιχιν, 9

11 δοξορυβιχιν), επιποδοφιλλοτοξινοκ (ετοποζιδ, τενοποζιδ) εσετ ν. Εζ ρτ α Πγπ φοκοζοττ εξπρεσσζι ϕα αζ ΑΜΛ κλινικαι κιµενετελ τ κεδϖεζ!τλεν λ βεφολψ σολϕα (33 35). Υγψανχσακ λ νψεγεσ, ηογψ α φεη ρϕε σζυβσζτρ τϕαι κ ζ ταρτοζικ α χικλοσποριν, σζτεροιδοκ σ Χα χσατορνα βλοκκολ κ (ϖεραπαµιλ) ισ. Α φεη ρϕε µρνσ νεκ κιµυτατ σ ϖαλ σ ιµµυνοβλοττινγγαλ α Πγπ φιζιολ γι σαν σζ µοσ σζ ϖετβεν δετεκτ ληατ. Α τρανσζπορτ φυνκχι νακ µεγφελελ!εν α γαστροιντεστιναλισ ρενδσζερβεν, µ ϕβαν, επευτακβαν, ϖεσ βεν, µελλ κϖεσ βεν, πλαχεντ βαν σ α ϖ ρ αγψ γ τ τερ λετ ν µυτατηατ κι (36,37). Σζερεπε ϖαν α φελσζ ϖ δ σβαν, κιϖ λασζτ σβαν, σζεκρ χι βαν ιλλ. βαρριερεκ φεννταρτ σ βαν. Φοντοσ µεγεµλ τενι, ηογψ α Πγπ δετεκτ ληατ α ηεµοποετικυσ σεϕτεκβεν ισ (38,39), µ γπεδιγ κιφεϕεζεττ Πγπ ακτιϖιτ σ µυτατηατ κι αζ ρετλεν, Χ 34+!σσεϕτεκβεν, µαϕδ α σεϕτεκ ρ σ ϖελ π ρηυζαµοσαν χσ κκεν α Πγπ εξπρεσσζι σ ακτιϖιτ σ. β. Μυλτιδρυγ ρεσιστανχε ρελατεδ φεη ρϕ κ (ΜΡΠ1 6) Εββε α χσαλ δβα ταρτοζ φεη ρϕ κ φ!κ ντ οργανικυσ ανιονοκ τρανσζπορτϕ ρτ φελελ!σεκ, αζαζ εγψεσ γψ γψσζερεκ γλυτατιον, σζυλφ τ σ γλ κυρον τ κονϕυγ τυµαιτ τ ϖολ τϕ κ ελ α σεϕτεκβ!λ, δε εµελλεττ α µετοτρεξ τ τρανσζπορτϕ βαν ισ ρ σζτ ϖεσζνεκ. Α Πγπ ηεζ ηασονλ αν σζερεπ κ ϖαν α ϖινκα αλκαλοιδοκκαλ, αντραχικλινεκκελ σ αζ ετοποζιδδαλ σζεµβεν κιαλακυλ ρεζισζτενχι βαν ισ (40 42). Αζ ΜΡΠ1 α Πγπ ηεζ κ πεστ αζ Ν τερµιν λισ 10

12 ρ σζεν εγψ εξτρα δοµ ντ ταρταλµαζ, µελψ 5 τρανσζµεµβρ ν σζεγµεντβ!λ λλ. Α φεη ρϕε α σζερϖεζετ σζ µοσ σζερϖ βεν ελ!φορδυλ. Φιζιολ γι σ σζεµποντβ λ φοντοσ, ηογψ λευκοτρι ν 4 τρανσζπορτϕ τ βιζτοσ τϕα (43), µελψνεκ α γψυλλαδ σοσ ιµµυνϖ λασζβαν ϖαν σζερεπε. Κνοχκ ουτ εγερεκβεν χσ κκεντ ιµµυνϖ λασζ σ στεριλιτ σ σζλεληετ!. ΑΜΛ βεν νεγατ ϖ προγνοσζτικαι φακτορνακ τεκιντηετ!: ϕελενλ τε βιζονψ τοτταν κεδϖεζ!τλεν λ βεφολψ σολϕα α τερ πι σ ϖ λασζτ (44 47). Αζ ΜΡΠ2 αζ ΜΡΠ1 ηεζ ηασονλ σζυβσζτρ τ σπεκτρυµµαλ ρενδελκεζ! τρανσζπορτερ. Φιζιολ γι σαν α µ ϕβαν, επευτακβαν, β λβεν σ ϖεσ βεν φορδυλ ελ!. Μιϖελ α βιλιρυβιν γλ κυρονιδοκ φ! τρανσζπορτερε, ηι νψα εσετ ν αζ επεσζεκρ χι κ ροσοδ σα, υβιν ϑοηνσον σζινδρ µα αλακυλ κι (48). Μινδκ τ τρανσζπορτερ εσετ ν φοντοσ µεγϕεγψεζνι, ηογψ µ κ δ σ κη ζ α ρεδυκ λτ γλυτατιον (ΓΣΗ) ϕελενλ τε σζ κσ γεσ, φελτεηετ!εν α γψ γψσζερµολεκυλ κ σ α ΓΣΗ κοτρανσζπορτϕα µιαττ. χ. Βρεαστ χανχερ ρελατεδ προτειν (ΒΧΡΠ) Ε φεη ρϕε σζιντ ν µεµβρ ν τρανσζπορτερ, µελψ αζ ελ!ββιεκτ!λ ελτ ρ!εν εγψ ηοµοδιµερ, αζαζ φ λ τρανσζπορτερνεκ ισ νεϖεζεττ φεη ρϕε. Εδδιγι ϖιζσγ λατοκ αλαπϕ ν α προτειντ εξπρεσσζ λ σεϕτϖοναλακβαν µιτοξαντρον, δαυνορυβιχιν, δοξορυβιχιν σ τοποτεχαν ρεζισζτενχια ϖολτ ιγαζοληατ (49,50). Εηηεζ ηασονλ ερεδµ νψεκετ αδτακ τρανσζφεκτ λτ Σφ9 σεϕτεκκελ ϖ γζεττ, αζ ΑΤΠ ζ ακτιϖιτ σ στιµυλ χι ϕ τ µ ρ! κ σ ρλετεκ ισ. Α ΒΧΡΠ ΑΤΠ ζ ακτιϖιτ σ τ α Να 11

13 ορτοϖαναδ τ σ αζ Ν ετιλµαλειµιδ γ τολτα, α ϖεραπαµιλνακ νεµ ϖολτ ηατ σα αζ ΑΤΠ ζ ακτιϖιτ σρα (51). Ιν ϖιτρο τεσζτεκβεν ηασζν λτ φλυορεσζχενσ φεστ κεκ κ ζ λ α ροδαµιν 123 α φεη ρϕε σζυβσζτρ τϕ νακ βιζονψυλτ, µ γ α καλχειν αχετοξιµετιλ σζτερ (καλχειν ΑΜ) σ καλχειν µολεκυλ κ τρανσζπορτϕ βαν φεη ρϕε νεµ ϕ τσζικ σζερεπετ (52). Ιµµυνοβλοττινγγαλ ιλλ. µρνσ δετεκτ λ σ ϖαλ καποττ ερεδµ νψεκ αλαπϕ ν α τρανσζπορτερ α ϖ κονψ σ ϖασταγβ λβεν, α µ ϕβαν αζ επε χαναλιχυλυσοκβαν, αζ εµλ! λεβενψειβεν σ δυχτυσαιβαν, ϖαλαµιντ α πλαχεντ βαν µυτατηατ κι φιζιολ γι σαν, αηολ α Πγπ ηεζ ηασονλ αν κ λ νβ ζ! ανψαγοκ τρανσζπορτϕ βαν ϖαν σζερεπε (53). Μαλιγνιτ σοκβαν φ!κ ντ ΑΜΛ βεν, ΝΗΛ βεν ρτ κ λε µυλτι δρογ ρεζισζτενχι τ οκοζ ϕελεντ!σ γ τ, δε εζεκ αζ ερεδµ νψεκ µ γ µεγερ!σ τ σρε ϖ ρνακ. Μυλτιδρογ ρεζισζτενχια δετεκτ λ σ ρα αλκαλµαζηατ µ δσζερεκ Αζ Μ Ρ κιµυτατ σ ρα τ ββ µ δσζερ αλκαλµασ, µελψεκ ερεδµ νψει αζονβαν νεµ ριτκ ν ελτ ρ! ινφορµ χι τ ηορδοζηατνακ, ιλλετϖε κλινικαι λαβορατ ριυµι κ ρ λµ νψεκ κ ζ ττ κιϖιτελεζηετ!σ γ κ ισ ϕελεντ!σεν κ λ νβ ζικ (54). α. Α φεη ρϕ κ µρνσ νεκ κιµυτατ σα ΡΤ ΠΧΡ ραλ (24,55). Α µ δσζερ η τρ νψα, ηογψ αζ ΡΝΣ µεννψισ γ νεµ φελτ τλεν λ µυτατ κορρελ χι τ α φεη ρϕε ϕελενλ τ ϖελ σ µ κ δ σ ϖελ αζ εσετλεγεσ τρανσζλ χι σ σζιντ σζαβ λψοζ µεχηανιζµυσοκ µιαττ, ϖαλαµιντ νεµ κ λ ν τηετ! ελ α νορµ λ σ 12

14 τυµοροσ σεϕτεκβ!λ σζ ρµαζ µρνσ. Αζ ερεδµ νψεκ κϖαντιτατ ϖ ρτ κελ σε ισ νεη ζκεσ, λταλ βαν χσακ ποζιτ ϖ σ νεγατ ϖ ερεδµ νψεκ αδηατ κ µεγ. β. α φεη ρϕ κ κιµυτατ σα µονοκλον λισ αντιτεστεκκελ ραµλ σι χιτοµετρι σ µ δσζερρελ ϖαγψ ιµµυνχιτοκ µιαι µ δσζερεκκελ αζ Μ Ρ µεγηατ ροζ σνακ εγψ γψακραν ϖ λασζτοττ µ δϕα (56 58). Εββεν αζ εσετβεν αζ ερεδµ νψεκ ρτ κελ σε ϕελεντηετ προβλ µ τ: εγψεσ σζερζ!κ α ποζιτ ϖ σεϕτεκ σζ ζαλ κοσ αρ νψ τ αδϕ κ µεγ, µ σοκ α φλυορεσζχενχια ιντενζιτ σ ιζοτ πυσ κοντρολληοζ ϖισζονψ τοττ ρ τ ϕ τ ηασζν λϕ κ. Φοντοσ α µεγφελελ! αντιτεστ ηασζν λατα, Πγπ εσετ ν χ λσζερ ββ κ λσ! επιτ πηοζ κ τ!δ! αντιτεστετ ϖ λασζτανι, µ γ ΜΡΠ1 εσετ ν ιλψεν κλ νοκ νεµ λλνακ ρενδελκεζ σρε, γψ σζ κσ γεσ α σεϕτεκ περµεαβιλιζ λ σα. Α φεη ρϕε µεννψισ γ νεκ ποντοσ κϖαντιτ λ σ ηοζ βεαδεκ ηασζν ληατ κ, µελψεκκελ καλιβρ χι σ γ ρβε αλαπϕ ν α σεϕτφελσζ νι µολεκυλα σζ µ καλκυλ ληατ. Α Πγπ δετεκτ λ σ ρα λεγγψακραββαν ηασζν λτ αντιτεστ κλ νοκ αζ ΜΡΚ 16, 4Ε3, ΥΙΧ2, Χ219, ϑσβ 1, µ γ αζ ΜΡΠ1 κιµυτατ σ ρα αζ ΜΡΠµ6, ΜΡΠµ5 σ ΜΡΠρ1 κλ νοκ αλκαλµαζηατ κ. ρδεµεσ µεγϕεγψεζνι, ηογψ αζ ΥΙΧ2 αντιτεστ ρεακτιϖιτ σ τ α σζυβσζτρ τοκ ιλλ. µοδυλ τοροκ οκοζτα κονφορµ χι ϖ λτοζ σ ν ϖελι (ΥΙΧ2 σηιφτ) ιλλ. ηογψ αζ ΥΙΧ2 αντιτεστ κ τ!δ σε γ τολϕα α Πγπ ακτιϖιτ σ τ (59,60). χ. Α φεη ρϕ κ τ νψλεγεσ µ κ δ σ ϖελ, γψ α ϖ ρηατ κλινικαι κιµενετελλελ αζ ν. φυνκχιον λισ τεσζτεκ κορρελ λνακ λεγινκ ββ, εζεκ υγψανισ α φεη ρϕ κ λταλ 13

15 κιφεϕτεττ τρανσζπορτ ακτιϖιτ στ µ ρικ. Εζεκβεν α τεσζτεκβεν φλυορεσζχενσ σζυβσζτρ τοκατ ηασζν λυνκ σ ϖαγψ αζ εφφλυξοτ, σ γψ αζ ιντρα σ εξτραχελλυλ ρισ τ ρ κ ζ ττ µεγοσζλ φλυορεσζχενχι τ δετεκτ λϕυκ α δισζτριβ χι σ τ πυσ ασσαψκ βεν, ϖαγψ αζ ν. ακκυµυλ χι σ τ πυσ τεσζτεκβεν αζ ιντραχελλυλ ρισαν φεληαλµοζ δ φλυορεσζχενχι τ µ ρϕ κ. Αζ Πγπ/ΜΡΠ1 σζυβσζτρ τ φλυορεσζχενσ φεστ κεκ κ ζ λ λεγινκ ββ α ροδαµιν 123, δαυνορυβιχιν, καλχειν ΑΜ, ϑχ 1, ιοχ2, Ηοεχηστ ηασζν λατοσακ (61 65). Ινηιβιτορκ ντ ϖεραπαµιλ, χικλοσποριν, κινιδιν, σ ΠΣΧ 833 αλκαλµαζηατ ιν ϖιτρο. δ. αζ ν. χελλ συρϖιϖαλ ασσαψ ϖελ ιν ϖιτρο ϖιζσγ ληατ α σεϕτεκ τ λ λ σε κ λ νβ ζ! χιτοσζτατικυµοκ ϕελενλ τ βεν. Α τεσζτ ελ!νψε, ηογψ ποντοσ ινφορµ χι τ νψ ϕτ αζ εγψεσ κεµοτερ πι σ σζερεκ ηατ σ ρ λ, η τρ νψα ιδ!ιγ νψεσσ γε. 14

16 Χ ΛΚΙΤ!Ζ ΣΕΚ 1. Α διαγνοσζτικαι (ιµµυνφενοτ πυσ) ϖιζσγ λατοκ τερ ν: α. Α σεϕτϖοναλ σπεχιφικυσ ιντραχιτοπλαζµατικυσ µαρκερεκ κ ζ λ αζον περµεαβιλιζ λ σι τεχηνικα σ κλ ν κοµβιν χι κ µεγηατ ροζ σα, µελψεκ α λινεαγε λεγσζενζιτ ϖεββ, δε µ γ σπεχιφικυσ κιµυτατ σι λεηετ!σ γ τ βιζτοσ τϕ κ β. Α φελσζ νι µαρκερεκ κ ζ λ εγψ εδδιγ λευκεµι κ εσετ ν νεµ αλκαλµαζοττ µαρκερ, α Π σζελεκτιν γλικοπροτειν λιγανδ 1 (ΠΣΓΛ 1 ϖαγψ Χ 162) διαγνοσζτικαι φεληασζν ληατ σ γ νακ ϖιζσγ λατα 2. Α προγνοσζτικαι (µυλτι δρογ ρεζισζτενχια) ϖιζσγ λατοκ τερ ν α. Α καλχειν τεσζτ αδαπτ λ σα σ οπτιµαλιζ λ σα ρυτιν διαγνοσζτικαι τεσζτκ ντ β. Αζ Μ Ρ ακτιϖιτ σ µεγηατ ροζ σα αδοττ σεϕτποπυλ χι κον σ αζ Μ Ρ ακτιϖιτ σ ϖαλαµιντ α Πγπ αντιγ ν εξπρεσσζι σσζεφ γγ σ νεκ ϖιζσγ λατα χ. Ναγψσζ µ βετεγανψαγον α καλχειν τεσζτ προγνοσζτικαι σ πρεδικτ ϖ ρτ κ νεκ µεγηατ ροζ σα 15

17 ΑΝΨΑΓΟΚ Σ Μ ΣΖΕΡΕΚ Σεϕτπερµεαβιλιζ λ σι ελϕ ρ σοκ σ ϕελ λ σεκ Κερεσκεδελµι φοργαλοµβαν ισ ελ ρηετ! ηατ περµεαβιλιζ λ σρα ηασζν λτ κιτ σσζεηασονλ τ σ τ ϖ γεζτ κ ελ 21 νορµ λ σ ακυτ λευκ µι σ µιντα αναλ ζισ ϖελ κ τ χεντρυµ Iραµλ σι Χιτοµετριαι Ρ σζλεγ ν ( ΕΟΕΧ, ΚΒΜΠΙ σ Σαλαµανχαι Εγψετεµ). Α µιντ κ µεγοσζλ σα αζ αλ ββι ϖολτ: 4 νορµ λ περιφ ρι σ ϖ ρµιντα, 3 νορµ λ χσοντϖελ!, 6 ΑΜΛ µιντα, 6 πρεχυρσορ Β ΑΛΛ, ϖαλαµιντ 2 Τ ΑΛΛ. (Α λευκ µι σ µιντ κ κ ζ ττ χσοντϖελ! σ περιφ ρι σ ϖ ρ ισ ϖολτ). Α ϖιζσγ λατοκατ µινδεν εσετβεν α διαγν ζισ φελ λλ τ σακορ, α κεζελ σ µεγκεζδ σε ελ!ττ ϖ γεζτ κ ελ. σσζεηασονλ τ σκ ντ µινδεν βετεγν λ π ρηυζαµοσ ϖιζσγ λατοκ τ ρτ ντεκ περµεαβιλιζ λτ σ νεµ περµεαβιλιζ λτ µιντ κβ λ. Α περµεαβιλιζ λ σ κιϖιτελεζ σ ρε σζ µοσ κιτ ϖαν φοργαλοµβαν, µελψεκ λ νψεγε, ηογψ α περµεαβιλιζ λ σζερ α σεϕτµεµβρ ν τϕ ρηατ σ γ τ ν ϖελι, µαϕδ εζτ κ ϖετ!εν α σεϕτεκηεζ αδοττ µονοκλον λισ αντιτεστ αζ ιντραχελλυλ ρισ φεη ρϕ κηεζ κ τ!δικ. Α µιντα ελ!κ σζ τ σ σορ ν λταλ βαν ελσ! λ π σβεν τ ρτ νικ α σεϕτεκ φιξ λ σα, εζτ κ ϖετι α περµεαβιλιζ λ σ, β ρ εγψεσ κιτεκβεν α κ τ λ π σ εγψιδεϕ λεγ ζαϕλικ. Α κιτεκβεν φιξ λ κ ντ λεγινκ ββ παραφορµαλδεηιδετ, περµεαβιλιζ λ σζερκ ντ πεδιγ σζαπονιν αλαπ 16

18 ϖεγψ λετεκετ ηασζν λνακ. Α προχεδυρ τ µινδεν εσετβεν α γψ ρτ ελ! ρ σαινακ µεγφελελ!εν ϖ γεζτ κ ελ, εννεκ σορ ν α Χψτοφιξ/Χψτοπερµ (Πηαρµινγεν), Φιξ ανδ Περµ (Χαλταγ Λαβορατοριεσ), Ιντραπρεπ (Ιµµυνοτεχη), Ιντρασταιν ( ΑΚΟ), Περµεαχψτε (Βιο Ε) σ α Περµεαφιξ (Ορτηο) κιτεκετ ηασονλ τοττυκ σσζε. Εµελλεττ ϖιζσγ λτυκ α η ροµ λεγφοντοσαββ ιντραχελλυλ ρισ µαρκερ ελλεν τερµελτ αντιτεστ κλ νοκ σ κ λ νβ ζ! φλυορεσζχενσ κονϕυγ τυµαικ (ΦΙΤΧ, ΠΕ) κοµβιν χι ϕ τ. Αζ αλκαλµαζοττ κλ νοκ: ΜΠΟ 7, ΧΒΛ ΜΠΟ 1 σ Η 43 5 ΜΠΟ εσετ ν, ΥΧΤΗ 1, Ηιτ3α σ Σ4.1 χψχ 3 εσετ ν, µ γ α χψχ 79α δετεκτ λ σ ρα α κ λ νβ ζ! φλυοροφ ροκκαλ ϕελ λτ ΗΜ57 κλ ντ ηασζν λτυκ. Μινδεν εσετβεν διρεκτ ιµµυνφλυορεσζχενσ τεχηνικ τ αλκαλµαζτυνκ, ϖαγψισ α γψ ρτ λταλ ΦΙΤΧ ελ ϖαγψ ΠΕ ελ ϕελ λτ αντιτεστετ ηασζν λτυκ. Α ποζιτ ϖ σ νεγατ ϖ σεϕτεκ ελκ λ ν τ σ ρε αυτοφλυορεσζχενσ µιντα ϖαγψ ιζοτ πυσ κοντρολλ σεγ τσ γ ϖελ τ ρτ ντ. Λευκ µι σ µιντ κ εσετ ν α µαλιγνυσ σεϕτεκ σζελεκτ ϖ αναλ ζισε µιαττ φελσζ νι Χ 45 ϕελ λ στ ϖ γεζτ νκ α περµεαβιλιζ λ σ ελ!ττ, σ α Χ 45 διµ ποπυλ χι σαϕ τσ γαιτ ϖιζσγ λτυκ. Α µ ρ σεκ ΦΑΧΣχαν σ ΦΑΧΣχαλιβυρ φλοω χψτοµ τερεκεν τ ρτ ντεκ. Α κ σζ λ κεκ βε λλ τ σ ηοζ σ α καλιβρ χι ηοζ α στανδαρδ ελ! ρ σοκ σζεριντι προτοκολλοκατ αλκαλµαζτυκ. Α µ ρ σεκν λ σεϕτ αδαταιτ γψ ϕτ ττ κ βε λιστ µοδε φιλε οκβαν. Αζ ερεδµ νψεκετ µινδεν κοµβιν χι εσετ ν α ποζιτ ϖ σεϕτεκ σζ ζαλ κοσ 17

19 αρ νψ βαν ιλλ. τλαγοσ φλυορεσζχενχια ιντενζιτ σ (ΜΦΙ) φορµ ϕ βαν αδτυκ µεγ. Στατισζτικαι αναλ ζισ σορ ν α σζιγνιφικανχια σζιντεκ µεγηατ ροζ σ ηοζ Ωιλχοξον σ Κρυσκαλ Ωαλλισ τεσζτεκετ ηασζν λτυκ. ΠΣΓΛ 1 κϖαντιτατ ϖ µεγηατ ροζ σ Α ΠΣΓΛ 1 µολεκυλα α λευκοχψτ κ ενδοτηελεν κερεσζτ λι µιγρ χι ϕ βαν, αζ ενδοτηελ σεϕτεκεν εξπρεσσζ λ δ Π σ Ε σζελεκτινεκηεζ ϖαλ κ τ!δ σβεν ϕ τσζικ σζερεπετ, ϖαλαµιντ κ τ!δικ α λευκοχιτα Λ σζελεκτιν ηεζ ισ. Α ΠΣΓΛ 1 δετεκτ λ σ ρα α ϕελ λετλεν κλ ντ (ΠΛ 1) α κϖαντιτατ ϖ µεγηατ ροζ σηοζ, α ΠΕ κονϕυγ λτ ΚΠΛ 1 αντιτεστετ (Β Πηαρµινγεν, Χ 162) τ ββεσ ϕελ λ σεκηεζ ηασζν λτυκ. Α ϖιζσγ λατοκατ εγ σζσ γεσ σ αχυτ µψελοιδ λευκ µι σ βετεγεκ µιντ ιν ϖ γεζτ κ ελ α κ ϖετκεζ! µεγοσζλ σ σζεριντ: 20 περιφ ρι σ ϖ ρ σ 5 χσοντϖελ! εγ σζσ γεσ εγψ νβ!λ, 15 περιφ ρι σ ϖ ρ σ 5 χσοντϖελ! ΑΜΛ εσ βετεγεκβ!λ (Μ1, Μ2, Μ4, Μ5). Α ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι κϖαντιτατ ϖ µεγηατ ροζ σ ηοζ α ΘΙΦΙ κιτετ ( ΑΚΟ) ηασζν λτυκ αζ αλ ββιακ σζεριντ: 4 5ξ10 5 σεϕτετ 10 µγ/µλ ϖ γκονχεντρ χι ϕ ΠΛ 1 αντιτεσττελ ινκυβ λτυνκ 60 περχιγ 4 Χ ον. Α σεϕτεκετ ΠΒΣ βεν κ τσζερ µοστυκ, µαϕδ 50 µλ 50 σζερεσ ρε η γ τοττ ΦΙΤΧ ελ ϕελ λτ µ σοδικ (εγ ρ ελλενεσ) αντιτεστβεν ( ΑΚΟ) ρεσζυσζπενδ λτυκ σ 45 περχιγ 4 Χ ον ινκυβ λτυκ. Α ϖϖτ κετ Φαχσ Λψσινγ ολδατβαν (Βεχτον ιχκινσον) 18

20 λιζ λτυκ, µαϕδ α σεϕτεκετ 1% ΠΦΑ βαν φιξ λτυκ. Α µ ρ στ ΦΑΧΣχαν ραµλ σι χιτοµ τερεν κονστανσ δετεκτορ φεσζ λτσ γ ρτ κεκ µελλεττ ϖ γεζτ κ ελ. Α ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι τ αζ ΦΛ 1 (ΦΙΤΧ) χσατορν ν µ ρτ ΜΦΙ ρτ κ αλαπϕ ν καλιβρ χι σ γ ρβε σεγ τσ γ ϖελ ηατ ροζτυκ µεγ, αζ ερεδµ νψεκετ αντιτεστ κ τ! κ πεσσ γ (αντιβοδψ βινδινγ χαπαχιτψ, ΑΒΧ) φορµ ϕ βαν αδτυκ µεγ. Α καλιβρ χι σ γ ρβε φελϖ τελ ηεζ ισµερτ µεννψισ γ αντιτεσττελ φεδεττ σ αζονοσ µ σοδικ αντιτεσττελ ϕελ λτ βεαδεκετ ηασζν λτυνκ. Α κιτβεν αζ ΜΦΙ ρτ κεκ σ α σεϕτφελσζ νι µολεκυλασζ µ, αζαζ αζ ΑΒΧ ρτ κε α /σεϕτ ταρτοµ νψβαν λινε ρισ. Α βλαστοκ κιϖ λασζτ σ ηοζ λευκ µι σ µιντ κβαν α Χ 45 διµ βλαστ ποπυλ χι σεϕτϕειτ ϕελεν τεττ κ µεγ α φορωαρδ σχαττερ (ΦΣΧ) σιδε σχαττερ (ΣΣΧ) φελη!κ πεν (δοτ πλοτον) σ εζεκ Χ 162 εξπρεσσζι ϕ τ ϖιζσγ λτυκ, µ γ νορµ λ µιντ κ εσετ ν α Χ 33/Χ 34 κοεξπρεσσζι τ µυτατ βλαστοκ σζελεκτ ϖ αναλ ζισ τ ϖ γεζτ κ ελ. Στατισζτικαι αναλ ζισεκβεν α Μανν Ωηιτνεψ Υ τεσζτετ ηασζν λτυκ. Καλχειν τεσζτ Α µ δσζερ λ νψεγε, ηογψ α καλχειν αχετοξιµετιλ σζτερ (καλχειν ΑΜ), µιντ ηιδροφ β µολεκυλα α σεϕτβε διφφυνδ λ, µαϕδ Πγπ ϖαγψ ΜΡΠ1 ϕελενλ τ βεν ονναν κιπυµπ λ δικ. Αζ ελ!ββι τρανσζπορτ προτεινεκ ηι νψ βαν 19

21 ιντραχελλυλ ρισ σζτερ ζοκ ηασ τ σα κ ϖετκεζτ βεν καλχειν κελετκεζικ, µελψ φλυορεσζκ λ, ηιδροφιλ µολεκυλα, σ νεµ σζυβσζτρ τϕα α Πγπ νεκ, (αζ ΜΡΠ1 πεδιγ χσακ ιγεν λασσαν κ πεσ α κιπυµπ λ σ ρα). Α τεσζτβεν α φεη ρϕε βλοκκολ σ ρα ν. ρεϖερτ λ γενσ, µοδυλ τορ ηασζν ληατ, µελψ εββεν α τεσζτβεν ϖεραπαµιλ (ςπ) (68,69). Εζ µινδ α Πγπ µινδ αζ ΜΡΠ1 ακτιϖιτ σ τ γ τολϕα (70 72). Αζ ιντραχελλυλ ρισ φλυορεσζχενχια ιντενζιτ στ α ρεϖερτ λ γενσ ϕελενλ τ βεν (ςπ+) σ ηι νψ βαν (ςπ ) δετεκτ λϖα α Πγπ/ΜΡΠ1 ακτιϖιτ σ µ ρτ κ ρε κ ϖετκεζτετηετ νκ, αηολ κϖαντιτατ ϖ ερεδµ νψτ α φλυορεσζχενχια ιντενζιτ σοκ κ λ νβσ γ β!λ καπηατυνκ α [ΦΙ(ςπ+) ΦΙ(ςπ )]/ΦΙ (ςπ+) ξ 100 κ πλετ αλαπϕ ν. Α καποττ ερεδµ νψ α µυλτι δρογ ρεζισζτενχια ακτιϖιτ σ φακτορ (ΜΑΦ), µελψετ 3 3 π ρηυζαµοσ µ ρ σ φλυορεσζχενχια ιντενζιτ σ ρτ κεινεκ τλαγ β λ σζ µολτυνκ. ρτ κε α Πγπ σ αζ ΜΡΠ1 εγψ ττεσ ακτιϖιτ σ τ µ ρι, σ αζ ερεδµ νψ ϕ λ κορρελ λ α Πγπ/ΜΡΠ1 σζυβσζτρ τ χιτοσζτατικυµοκ κιπυµπ λ σ νακ µ ρτ κ ϖελ. Α τεσζτηεζ α µονονυκλε ρισ σεϕτεκετ Φιχολλον σζεπαρ λτυκ, µαϕδ 1 µλ Ηανκ σ Βαλανχεδ Σαλτ Σολυτιον (ΗΒΣΣ) ολδατβαν ρεσζυσζπενδ λτυκ. Εζτ κ ϖετ!εν α σεϕτεκετ ϖεραπαµιλλαλ (75µΜ) ιλλ. αν λκ λ ινκυβ λτυκ 37 Χ ον 5 περχιγ, µαϕδ α σεϕτεκετ καλχειν ΑΜ ελ τ λτ ττ κ φελ 200 µμ ϖ γκονχεντρ χι βαν (10 περχ, 37 Χ). Α ινκυβ χι σ ιδ! αλαττ α τρανσζπορτερεκετ εξπρεσσζ λ σεϕτεκβεν ρεϖερτ λ γενσ ηι νψ βαν µεγτ ρτ νικ α καλχειν ΑΜ κιπυµπ λ σα. Α 20

22 ρεακχι τ χεντριφυγ λ σσαλ λλ τοττυκ λε, µαϕδ α σεϕτεκ λετκ πεσσ γ νεκ ϖιζσγ λατ ρα προπιδιυµ ϕοδιδοτ (ΠΙ) αδτυνκ α σεϕτσζυσζπενζι ηοζ (0,01 µγ/µλ ϖ γκονχεντρ χι ). Α µ ρ στ µαξιµυµ 24 ρα 4 Χ ον τ ρτ ν! τ ρολ σ υτ ν ϖ γεζτ κ ελ Βεχτον ιχκινσον ΦΑΧΣΧαλιβυρ ιλλ. ΦΑΧΣχαν ραµλ σι χιτοµ τερεκεν. Α καλχειν τεσζτ ρεαγενσεινεκ σταβιλιτ σ ϖιζσγ λατα Α ϖεραπαµιλ τ ρζσολδατ (8µΜ, ΗΒΣΣ βεν ολδϖα) σ α καλχειν τ ρζσολδατ (100µΜ, ΜΣΟ βαν ολδϖα) 4 Χ ον σ 20 Χ ον τ ρτ ν! 1 ϖεσ ελταρτηατ σ γ τ ϖιζσγ λτυκ, εηηεζ µ ρ σεκετ ϖ γεζτ νκ α 0., 1., 3., 6., σ 12. η ναποκβαν. Α καλχειν ΑΜ ολδατ εσετ ν Περκιν Ελµερ σπεκτροφοτοφλυοριµ τερρελ α καλχειν φλυορεσζχενχι ϕ τ δετεκτ λτυκ αζ εσετλεγεσ ηιδρολ ζισ µεγ λλαπ τ σ ρα. Α ϖεραπαµιλ ολδατ σταβιλιτ σ νακ ϖιζσγ λατ ηοζ Μ Ρ ποζιτ ϖ ΚΒς 1 σεϕτϖοναλακον ϖ γεζτ νκ µ ρ σεκετ. Α σεϕτεκετ ΜΕΜ µεδιυµβαν 5% ΧΟ 2 µελλεττ 37 Χ ον τενψ σζτεττ κ, αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σεϕτϖοναλ φεννταρτ σ τ 0,2 µγ/µλ ςινβλαστιν ηοζζ αδ σ ϖαλ βιζτοσ τοττυκ. Α µιντ κ ελταρτηατ σ γ νακ ϖιζσγ λατα Α τεσζτ αλκαλµαζ σ νακ φοντοσ ελεµε α πρεαναλιτικαι ηιβ κ χσ κκεντ σε. Εννεκ κ λ ν σ ϕελεντ!σ γε ϖαν φυνκχιον λισ τεσζτεκ εσετ βεν, µερτ φοντοσ, ηογψ νεµ φιξ λτ, λ! σεϕτεκκελ δολγοζζυνκ, σ βιζτοσ τσυκ α τρανσζπορτφυνκχι ηοζ σζ κσ γεσ ΑΤΠ ελλ τ στ. Εζεκ ρδεκ βεν 21

23 µεγϖιζσγ λτυκ α µιντ κ οπτιµ λισ τ ροληατ σ γ τ σζοβαη!µ ρσ κλετεν σ 4 Χ ον, τελϕεσ χσοντϖελ! σ Φιχολλον σζεπαρ λτ καλχειννελ φελτ λτ ττ σεϕτ σζυσζπενζι εσετ βεν. Α µιντα ελ!κ σζ τ στ ιλλ. α µ ρ στ α φεντιεκ σζεριντ ϖ γεζτ κ ελ α 0., 6., σ 24. ρ βαν. Καλχειν τεσζτ κοµβιν λ σα φελσζ νι µαρκερ ϕελ λ σσελ Κ σ ρλετεινκβεν α Χ 45 πανλευκοχψτα µαρκερτ αλκαλµαζτυκ, µελψ αζ ρετλεν σεϕτεκεν αλαχσονψ ιντενζιτ σσαλ εξπρεσσζ λ δικ, γψ α Χ 45 διµ ποπυλ χι σζελεκτ ϖ αναλ ζισ ϖελ α τυµοροσ σεϕτεκ ΜΑΦ ρτ κε καλκυλ ληατ. Α µιντα ελ!κ σζ τ σ λ π σει ρ ϖιδεν: α σεϕτεκ καλχειννελ ϖαλ ινκυβ λ σα υτ ν α µικροχεντριφυγ λ στ κ ϖετ!εν α σεϕτεκετ ΠΙ οτ νεµ ταρταλµαζ 50 µλ ΗΒΣΣ ολδατβαν ρεσζυσζπενδ λτυκ, µελψηεζ 10 µμ ϖ γκονχεντρ χι βαν αδτυκ α ΠερΧΠ ϖαγψ ΠΕΧψ5 φεστ κκελ ϕελ λτ αντι Χ 45 αντιτεστετ ιλλ. αζ αζονοσ ϕελ λ σ ιζοτ πυσ κοντρολλτ. 20 περχεσ σζοβαη!µ ρσ κλετεν τ ρτ ν! ινκυβ λ σ υτ ν α σεϕτεκετ µοστυκ, µαϕδ ΗΒΣΣ βεν ρεσζυσζπενδ λτυκ σ 24 ρ ν βελ λ ραµλ σι χιτοµ τερεν λεµ ρτ κ. Πγπ µολεκυλασζ µ µεγηατ ροζ σα Κ σ ρλετεινκβεν κϖαντιτατ ϖε µεγηατ ροζτυκ α φελσζ νι µολεκυλασζ µοτ, α καλιβρ χι ηοζ φιξ µεννψισ γ αντιτεστετ ταρταλµαζ βεαδ εκετ ηασζν λτυνκ σ αζ ερεδµ νψεκετ αντιτεστ κ τ! κ πεσσ γ φορµ ϕ βαν αδτυκ µεγ (ΑΒΧ: αντιβοδψ βινδινγ χαπαχιτψ, ΘΙΦΙ Κιτ, ΑΚΟ). Αζ γψ καποττ σεϕτφελσζ νι 22

24 µολεκυλα σζ µοτ σσζεϖετεττ κ α ΜΑΦ ρτ κ ϖελ. Α µ ρ σεκετ σεϕτϖοναλακον σ κλινικαι µιντ κον κιϖιτελεζτ κ, ινδιρεκτ ιµµυνφλυορεσζχενσ τεσζτ φορµ ϕ βαν. Ρ ϖιδεν, 4 5ξ10 4 σεϕτετ ϕελ λετλεν ΜΡΚ16 αντιτεσττελ ινκυβ λτυνκ 10 µγ/µλ ϖ γκονχεντρ χι βαν 30 περχιγ 37 Χ ον. Α σεϕτεκετ ΠΒΣ βεν µοστυκ κ τσζερ, µαϕδ 50 ξ η γ τ σ ΦΙΤΧ κονϕυγ λτ εγ ρ ελλενεσ ΙγΓ αντιτεσττελ ( ΑΚΟ) ινκυβ λτυκ α σεϕτεκετ 45 περχιγ 4 Χ ον. Μ γ εγψ µοσ σι λ π στ σ α ϖ ρ σϖ ρτεστεκ λ ζισ τ κ ϖετ!εν α σεϕτεκετ 1% παραφορµαλδεηιδβεν φιξ λτυκ. Α µ ρ στ 24 ρ ν βελ λ ελϖ γεζτ κ Β ΦΑΧΣΧΑλιβυρ ραµλ σι χιτοµ τερεν. Μινδεν µ ρ σν λ α φλυορεσζχενσ καλιβρ χι σ βεαδεκ σζιµυλτ ν φυττατ σα ισ µεγτ ρτ ντ κονστανσ ΦΛ 1 βε λλ τ σ µελλεττ, µαϕδ εζεκ αλαπϕ ν α σεϕτενκ ντι ΑΒΧ καλκυλ ληατ ϖολτ, µελψ 1 1 αρ νψ αντιγ ν αντιτεστ κ τ!δ σ εσετ ν α φελσζ νι µολεκυλασζ µ µεγηατ ροζ σ ρα αλκαλµασ. Βετεγεκ σ α κεµοτερ πι σ κεζελ σ Α ΕΟΕΧ ΙΙ. Βελκλινικα σ αζ Ορσζ γοσ Ηεµατολ γιαι σ Ιµµυνολ γιαι Ιντ ζετ βετεγανψαγ β λ 93 δε νοϖο λευκ µι σ βετεγ µιντ ϕ νακ αναλ ζισ τ ϖ γεζτ κ ελ. Α βετεγεκ µεγοσζλ σα διαγν ζισ σζεριντ 65 ΑΜΛ σ 28 ΑΛΛ ϖολτ. Αζ ΑΜΛ χσοπορτον βελ λ α ΦΑΒ τ πυσ οσζτ λψοζ σ αλαπϕ ν 9 Μ1, 11 Μ2, 6 Μ3, 25 Μ4, 7 Μ5, 1 Μ6, 3 Μ7 σζυβτ πυσ σ 3 βιφενοτ πυσοσ λευκ µια σζερεπελτ. Α διαγν ζισ φελ λλ τ σ ηοζ α µορφολ γιαι ϕεγψεκ µελλεττ µινδεν 23

25 εσετβεν ιµµυνφενοτ πυσ ϖιζσγ λατοκατ ϖ γεζτ νκ. Εµελλεττ εγψ β προγνοσζτικαι φακτοροκ ( λετκορ, φϖσ σζ µ, Χ 34+ σεϕτεκ αρ νψα, Λ Η) εγψ ττεσ φελδολγοζ σα ισ µεγτ ρτ ντ. Αζ ΑΜΛ χσοπορτβαν α βετεγεκ τλαγ λετκορα 50.5 ϖ ϖολτ, 40 φ ρφι σ 25 ν! ρ σζϖ τελ ϖελ. Α βετεγεκ ρεµισσζι σ ινδυκχι σ κεζελ σε 7+3 προτοκολλ αλαπϕ ν τ ρτ ντ, µελψβεν Αρα Χ 200µγ/µ 2 7 ναπιγ µαϕδ αντραχικλινεκ (αδριαµιχιν 45µγ/µ 2 ϖαγψ δαυνοβλασζτιν 60 µγ/µ 2 σ ιδαρυβιχιν 12 µγ/µ 2 ) 3 ναπιγ τ ρτ ν! αδ σα σζερεπελτ. Εζ Μ4/Μ5 λευκ µι κ εσετ βεν κιεγ σζ λτ 100 µγ/µ 2 ετοποζιδ 4 ναποσ ηοζζ αδ σ ϖαλ. Α βετεγεκ κεζελ σε εγψ ϖαγψ κ τ χικλυσβ λ λλτ, µαϕδ α χσοντϖελ! ρτ κελ σ ρε α 4. η τεν κερ λτ σορ. Αζ ιροδαλοµβαν σ α σζακµαι γψακορλατβαν ελφογαδοττ ελϖεκ σζεριντ α χσοντϖελ!ι βλαστοκ 5% αλαττι αρ νψ τ µιν!σ τεττ κ κοµπλεττ ρεµισσζι νακ. Α σζιγνιφικανχια σζιντεκ µεγηατ ροζ σ ηοζ α Στυδεντ φ λε τ τεσζτετ ηασζν λτυκ, α κ λ νβ ζ! προγνοσζτικαι φακτοροκ σζερεπ νεκ µυλτιπαραµετρικυσ ελεµζ σ ρε Χοξ φ λε ρεγρεσσζι τ αλκαλµαζτυνκ, µ γ α Καπλαν Μαψερ γ ρβε ελεµζ σ ηεζ α λογ ρανκ τεσζτετ ϖ γεζτ κ ελ. 24

26 ΕΡΕ Μ ΝΨΕΚ Περµεαβιλιζ λ σι τεχηνικ κ σσζεηασονλ τ ελεµζ σε 1. Φ νψσζ ρ σι τυλαϕδονσ γοκ σ αζ αυτοφλυορεσζχενχια ϖ λτοζ σα Α περµεαβιλιζ λ σ κ ϖετκεζτ βεν γψακορλατιλαγ µινδεν περµεαβιλιζ λ σζερ ηασζν λατα εσετ ν ϖ λτοζνακ α σεϕτεκ φ νψσζ ρ σι ϕελλεγζετεσσ γει, µελψεκ αζ ΦΣΧ ΣΣΧ δοτ πλοτ κ πεκεν α νεµ περµεαβιλιζ λτ µιντα κ π ηεζ ϖισζονψ τϖα σζεµβετ ν!εκ (1. βρα). Εζ υτ ββι, κοντρολλκ ντ ηασζν λτ νορµ λ περιφ ρι σ ϖ ρµιντα εσετ βεν χσακ α ϖ ρ σϖ ρτεστεκ λιζ λ σα σ α σεϕτεκ 1% ΠΦΑ βαν ϖαλ φιξ λ σα τ ρτ ντ µεγ. Αζ εγψεσ σεϕττ πυσοκβαν αζ ΦΣΧ χσατορνασζ µοκ τλαγ ρτ κ τ σ σζ ρ σ τ σζ µσζερ εν ισ βρ ζολτυκ. Εζεκ αλαπϕ ν α λεγϕοββ ερεδµ νψεκετ α Χψτοφιξ/Χψτοπερµ σ Περµεαφιξ ρεαγενσεκκελ καπτυκ, µ γ α Περµεαχψτε ρεαγενσσελ α σεϕτεκ φ νψσζ ρ σι τυλαϕδονσ γαι ολψµ ρτ κβεν µεγϖ λτοζτακ, ηογψ α σεϕτποπυλ χι κ µεγβ ζηατ ελκ λ ν τ σε νεµ ϖολτ λεηετσ γεσ, εζ ρτ εζζελ α ρεαγενσσελ τοϖ ββι ϖιζσγ λατοκατ νεµ ϖ γεζτ νκ. Μεγϕεγψζενδ!, ηογψ α σεϕττ πυσοκ αδαταιτ σσζεγεζϖε ϖαλαµεννψι περµεαβιλιζ λ σζερ εσετ ν σζιγνιφικ νσ κ λ νβσ γετ καπτυνκ αζ ΦΣΧ ρτ κ εµελκεδ σ βεν α νεµ περµεαβιλιζ λτ µιντ ηοζ ϖισζονψ τϖα, µελψ α περιφ ρι σ ϖ ρ λψµπηοχψτ ι σ α χσοντϖελ!ι λψµπηοιδ ελεµεκ εσετ ν ϖολτ α λεγκιφεϕεζεττεββ. Α σεϕτεκ αυτοφλυορεσζχενχι ϕα (ΜΦΙ ρτ κ) α περµεαβιλιζ λ σ 25

27 κ ϖετκεζτ βεν µινδεν εσετβεν ν ϖεκεδ στ µυτατοττ µινδ αζ ΦΛ 1 (ΦΙΤΧ), µινδ αζ ΦΛ 2 (ΠΕ) χσατορν κον. 1. βρα Φ νψσζ ρ σι ϕελλεµζ!κ ϖ λτοζ σα α περιφ ρι σ ϖ ρ σεϕτϕειν κ λ νβ ζ! φιξ λ /περµεαβιλιζ λ ρεαγενσεκ ηασζν λατα υτ ν. ςαλαµεννψι ΦΣΧ ΣΣΧ δοτ πλοτ κ πεν αζονοσ καπυκατ ηασζν λτυνκ, µελψεκετ α ΠΦΑ ϖαλ φιξ λτ σ νεµ περµεαβιλιζ λτ νορµ λ περιφ ρι σ µιντα (ΦΝΠ) σεϕτποπυλ χι ιηοζ λλ τοττυνκ βε. Ρ ϖιδ τ σεκ: ΝΦΝΠ: νεµ φιξ λτ, νεµ περµεαβιλιζ λτ, ΧΧ: Χψτοφιξ/Χψτοπερµ, ΦΠ: Φιξ ανδ Περµ, ΙΠ: Ιντραπρεπ, ΙΣ: Ιντρασταιν, ΠΧ: Περµεαχψτε, ΠΦ: Περµεαφιξ 26

28 2. Μιελοπεροξιδ ζ Α ΦΙΤΧ ελ ϕελ λτ η ροµ κλ ν (ΜΠΟ 7, ΧΒΛ ΜΠΟ 1 σ Η 43 5) σσζεηασονλ τ σ βαν α περµεαβιλιζ λ σζερεκ σσζεσ τ σ ϖελ νψερτ αδατοκ σ αζ εγψεσ περµεαβιλιζ λ σζερεκ κ λ ν κ λ ν ηασζν λατ ϖαλ καποττ π ρονκ ντι αδατοκ ισ αζ ΜΠΟ 7 σζιγνιφικ νσαν ϕοββ σζενζιτιϖιτ σ τ ιγαζολτ κ α µ σικ κ τ κλ νναλ σζεµβεν αζ ΜΦΙ ρτ κεκ αλαπϕ ν. Ηασονλ ερεδµ νψτ αδοττ α ΠΕ ελ ϕελ λτ αντιτεστεκ ϖιζσγ λατα ισ (2. βρα). Α ΦΙΤΧ σ ΠΕ κονϕυγ τυµοκ σσζεϖετ σ βεν αζ υτ ββιακ µαγασαββ ΜΦΙ ρτ κε, εζζελ ναγψοββ σζενζιτιϖιτ σα ιγαζολ δοττ. Iλποζιτ ϖ ρεακχι τ χσακ α Χψτοφιξ/Χψτοπερµ αλκαλµαζ σακορ σζλελτ νκ µινδη ροµ κλ ν εσετ ν. Α ποζιτ ϖ σεϕτεκ σζ ζαλ κοσ αρ νψα νεµ ϖ λτοζοττ λ νψεγεσεν α κ λ νβ ζ! κλ νοκ ηασζν λατ ϖαλ. 2. βρα Κ λ νβ ζ! αντι ΜΠΟ κλ νοκ τφεδ! ηισζτογραµϕαι Χψτοφιξ/Χψτοπερµ περµεαβιλιζ λ στ κ ϖετ!εν. Αζ ΜΠΟ 7 κλ ν α λεγναγψοββ σζενζιτιϖιτ σ τ µινδ α ΦΙΤΧ 27

29 µινδ α ΠΕ ϕελ λτ αντιτεστεκ εσετ ν. Φιγψελµετ ρδεµελ αζ αυτοφλυορεσζχενσ µιντα µαγασ ΜΦΙ ρτ κε. 3. χψχ 79α Η ροµ φοργαλµαζ τ λ σζ ρµαζ ΗΜ57 κλ ν (ΠΕ) ϖιζσγ λατ ϖαλ α Πηαρµινγεν αντιτεστϕε µινδεν περµεαβιλιζ λ σζερ ηασζν λατα µελλεττ σζιγνιφικ νσαν αλαχσονψαββ ΜΦΙ ρτ κετ µυτατοττ, µιντ α ΑΚΟ σ αζ Ιµµυνοτεχη ρεαγενσε. Iλποζιτ ϖ ρεακχι τ εγψικ κλ ν εσετ ν σεµ σζλελτ νκ σ α ποζιτ ϖ σεϕτεκ σζ ζαλ κοσ αρ νψα σεµ κ λ νβ ζ ττ λ νψεγεσεν αζ εγψεσ κλ νοκ αλκαλµαζ σακορ. 4. χψχ 3 Αζ Σ4.1 κλ ν εσετ ν ϕελεντ!σ λποζιτιϖιτ στ σζλελτ νκ µψελοβλαστοκον, εζ ρτ α τοϖ ββι ϖιζσγ λατοκ α µ σικ κ τ αντιτεσττελ τ ρτ ντεκ, µελψεκ κ ζ λ αζ ΥΧΤΗ 1 µυτατοττ µαγασαββ ΜΦΙ ρτ κεκετ σ α ποζιτ ϖ σεϕτεκ σζ ζαλ κοσ αρ νψα ισ µαγασαββ ϖολτ, µιντ α Ηιτ3α αντιτεστ εσετ ν (3. βρα). 3. βρα. Ιντραχελλυλ ρισ Χ 3 δετεκτ λ σα φελσζ νι Χ 3 νεγατ ϖ Τ ΑΛΛ βεν. ΑΖ ΥΧΤΗ 1 σ α Ηιτ3α κλ ν ισ ΠΕ ϕελ λτ αντιτεστ. 28

30 5. Περµεαβιλιζ λ ολδατοκ Α 2. σ 3. βρ ν βεµυτατοττ ηισζτογραµοκ ϖαλαµεννψι περµεαβιλιζ λ ρεαγενσ εσετ ν ηασονλ ακ ϖολτακ. Αζ ΜΦΙ ρτ κεκ σσζεηασονλ τ σα σορ ν νεµ ταλ λτυνκ σζιγνιφικ νσ κ λ νβσ γετ α περµεαβιλιζ λ γενσεκ κ ζ ττ. Κϖαντιτατ ϖ ΠΣΓΛ 1 µεγηατ ροζ σ νορµ λ σ µαλιγνυσ σεϕτεκεν. 1. ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι νορµ λ ηεµοποετικυσ σεϕτεκεν Περιφ ρι σ ϖ ρ σεϕτϕειν ϖ γζεττ ϖιζσγ λατοκ αλαπϕ ν α λψµπηοχψτ κ ΠΣΓΛ 1 διµ σ ΠΣΓΛ 1 βριγητ χσοπορτρα κ λ ν λτεκ ελ. Η ρµασ ϕελ λ σσελ ϖ γζεττ αναλ ζισεκ σζεριντ α Β σεϕτεκ φελελτεκ µεγ αζ αλαχσονψ Χ 162 ϕελ λ!δ σ σεϕτεκνεκ, µ γ α Τ σεϕτεκ σ ΝΚ σεϕτεκ ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι ϕα λ νψεγεσεν µαγασαββ ϖολτ. Α µονοχψτ κ σ νευτροπηιλεκ ιντενζ ϖ Χ 162 εξπρεσσζι τ µυταττακ. Νορµ λ χσοντϖελ! αναλ ζισεκορ α Χ 162 εξπρεσσζι ν ϖεκεδ σ τ φιγψελτ κ µεγ α ηεµοποετικυσ σεϕτεκ ρ σε σορ ν: λ νψεγεσεν αλαχσονψαββ ϖολτ α µψελοιδ προγενιτοροκ ΠΣΓΛ ϕελ λ!δ σε, µιντ αζ ρεττ µψελοιδοκ. Εζ υτ ββιακν λ ισ κιφεϕεζεττεββ εξπρεσσζι τ δετεκτ λτυνκ α µονοχψτα ϖοναλ σεϕτϕειν, αζον βελ λ αζονβαν α Χ 162 ϕελ λ!δ σ νεµ διφφερενχι λτ αζ ρετλεν µονοβλαστοκ/προµονοχψτ κ σ αζ ρεττ µονοχψτ κ κ ζ ττ. ΠΣΓΛ 1 ϖσ. ΣΣΧ δοτ πλοτον α ρυτιν διαγνοσζτικ βαν ισ ηασζν λτ Χ 45 ΣΣΧ δοτ πλοτηοζ 29

31 ηασονλ αν εγψ, α λψµπηοιδ, µονοχψτα σ γρανυλοχψτα ποπυλ χι κ ιλλ. αζ ρεττ σ ρετλεν σεϕτεκ κ ζ ττ διφφερενχι λ κ πετ καπτυνκ. Α λευκ µι σ χσοντϖελ! κ πε αζ ακκυµυλ λ δ σεϕτεκ τ πυσ νακ µεγφελελ!εν ϖ λτοζικ. 2. ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι κϖαντιτατ ϖ µεγηατ ροζ σα Α φεντι ερεδµ νψεκ σζ µσζερ ϖιζσγ λατ τ ισ ελϖ γεζτ κ α κ λ νβσ γεκ εγζακτ µεγηατ ροζ σα χ λϕ β λ. Εζεκ αλαπϕ ν αζ αλ ββι ερεδµ νψεκετ καπτυκ (1. τ βλ ζατ): ΑΒΧ ( τλαγ Σ ) ΜΦΙ ρτ κεκ ϖαρι χι σ κοεφφιχιενσε (%) νευτροπηιλεκ ± µονοχψτ κ ± Τ σεϕτεκ σ ΝΚ σεϕτεκ ± Β σεϕτεκ ± ΑΜΛ µψελοβλαστοκ ± Νορµ λ µψελοβλαστ ± Προµονοχψτ κ/µονοβλαστοκ ± προµψελοχψτα/µψελοχψτα/µεταµψελοχψτα ± τ βλ ζατ ΑΒΧ (αντιβοδψ βινδινγ χαπαχιτψ) ρτ κεκ σ αζοκ σζ ρ σα νορµ λ περιφ ρι σ ϖ ρ σεϕτϕειν σ εγ σζσ γεσ ϖαλαµιντ λευκ µι σ εγψ νβ!λ σζ ρµαζ χσοντϖελ!ι µψελοιδ πρεκυρζοροκον 30

32 α. Α λευκ µι σ µψελοβλαστοκ ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι ϕα σζιγνιφικ νσαν αλαχσονψαββ ϖολτ, µιντ αζ ρεττ σεϕτεκ. Α βλαστοκ σζελεκτ ϖ κιϖ λασζτ σα Χ 45 διµ ϕελ λ!δ σ κ αλαπϕ ν τ ρτ ντ. β. Α µονοχψτα ϖοναλον βελ λ αζ εξπρεσσζι σζ λεσ ηατ ροκ κ ζ ττ ϖ λτοζοττ, δε νεµ ϖολτ σζιγνιφικ νσ κ λ νβσ γ α µονοβλαστ/προµονοχψτα σ αζ ρεττ µονοχψτα ποπυλ χι ρτ κει κ ζ ττ χ. Α σζ µσζερ αδατοκ αζτ τ κρ ζικ, ηογψ α µονοβλαστοκ Χ 162 εξπρεσσζι ϕα σζιγνιφικ νσαν µαγασαββ, µιντ α µψελοβλαστοκ, σ α κ τ ποπυλ χι ρτ κει νεµ µυταττακ τφεδ στ, αµι λεηετ!ϖ τεσζι α κ τ πρεκυρζορ σεϕτ ελκ λ ν τ σ τ. Εζεκ αλαπϕ ν α βλαστοκβαν δετεκτ λτ αλαχσονψ ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι ΑΜΛ Μ1 ιλλ. Μ2 µελλεττ σζ λ. ΑΜΛ Μ4 εσετ βεν α κ τ ποπυλ χι εγψ ττεσ ϕελενλ τε µιαττ εγψ ΠΣΓΛ 1 διµ σ εγψ ΠΣΓΛ 1 βριγητ σεϕτχσοπορτ κ λ ν τηετ! ελ (4. βρα). 31

33 4. βρα. ΑΜΛ Μ4 χσοντϖελ!ι µιντα: µψελοιδ δοµινανχια κεϖ σ λψµπηοιδ (Λψ) σεϕττελ. Α ηισζτογραµ αναλ ζισ αλαπϕ ν α µψελοιδ σεϕτεκ ΠΣΓΛ 1 εξπρεσσζι ϕα βιµοδ λισ ελοσζλ στ µυτατ µψελοβλαστ (Μψ) σ µονοβλαστ (Μο) ποπυλ χι κ λ ν τηετ! ελ δ. Νορµ λ µψελοβλαστοκ ϕελ λ!δ σε νεµ κ λ νβ ζ ττ λ νψεγεσεν α µαλιγνυσ βλαστοκ εξπρεσσζι ϕ τ λ. Εζεν εσετεκβεν α βλαστοκ σζελεκτ ϖ ϖιζσγ λατ τ α Χ 34/Χ 33 κοεξπρεσσζι τ µυτατ σεϕτεκ αναλ ζισ ϖελ βιζτοσ τοττυκ. ε. Περιφ ρι σ ϖ ρβεν σ χσοντϖελ!βεν σζιµυλτ ν ϖ γζεττ µ ρ σεκ ερεδµ νψε αζτ µυταττα, ηογψ α περιφ ρι ν ταλ ληατ βλαστοκον α ΠΣΓΛ 1 κ πιασζ µ νεµ κ λ νβ ζ ττ σζιγνιφικ νσαν α χσοντϖελ!ι βλαστοκ τ λ. φ. ΧΜΛ ακχελερ λτ φ ζισ βαν, ϖαλαµεννψι µψελοιδ πρεκυρζορ ϕελενλ τ βεν ελϖ γεζϖε α ϖιζσγ λατοτ α πρεκυρζοροκον καποττ ρτ κ τλαγα α µψελοβλαστοκ ιλλ. αζ ρεττ µψελοιδοκ φελσζ νι µολεκυλα σζ µα κ ζ εσ! ρτ κετ αδοττ, µελψ µεγφελελ αννακ αζ ελκ πζελ σνεκ, ηογψ α σεϕτεκ Χ 162 εξπρεσσζι ϕα αζ ρ σ σορ ν φοκοζ δικ. γ. Η ροµσζ ν αναλ ζισεκβεν α Χ 162 ϕελ λ σ αζ ρετλεν σεϕτεκ αζονοσ τ σ ρα αλκαλµασ, µελψετ µυτατ, ηογψ α Χ 162 διµ σεϕτεκ α Χ 34!σσεϕτ µαρκερρελ ιλλ. εγψεσ ΑΜΛ εκβεν α βλαστοκον εξπρεσσζ λ δ σ κεδϖεζ!τλεν προγνοσζτικαι φακτορνακ σζ µ τ Χ 7 µαρκερρελ µυτατοττ κοεξπρεσσζι τ (5. βρα). 32

34 5. βρα Η ροµσζ ν αναλ ζισ ΑΜΛ Μ2 βεν. Α φ γγ!λεγεσ τενγελψεν (ΦΛ2) µινδεν δοτ πλοτον α ΠΣΓΛ 1 ϕελ λ!δ σ λ τηατ (Χ 162ΠΕ). Α ϖ ζσζιντεσ τενγελψεν Χ 34ΠΕΧψ5 (Α), Χ 45 ΠΕΧψ5 (Β) σ Χ 7ΦΙΤΧ (Χ) φεστ στ βρ ζολτυκ. Α καλχειν τεσζτ µετοδικαι ϖονατκοζ σαι: πρεαναλιτικαι ηιβ κ χσ κκεντ σε, οπτιµαλιζ λ σ, κοµβιν λτ ϕελ λ σεκ 1. Α καλχειν τεσζτ ρεπροδυκ ληατ σ γ νακ ϖιζσγ λατα Μ Ρ ποζιτ ϖ σεϕτϖοναλ, εγ σζσ γεσ σ λευκ µι σ εγψ ν περιφ ρι σ ϖ ρ β!λ σζ ρµαζ σεϕτεκ αναλ ζισε α ΜΑΦ ρτ κεκ σζ λεσ ταρτοµ νψ βαν τεττε λεηετ!ϖ α ρεπροδυκ ληατ σ γ ϖιζσγ λατ τ. Αζ ιγεν µαγασ ΜΑΦ ρτ κετ µυτατ ρεζισζτενσ σεϕτϖοναλον (ΚΒς 1) καπτυκ α λεγκισεββ σζ ρ στ, δε ελφογαδηατ α ϖαρι χι σ κοεφφιχιενσ ρτ κε α βετεγεκβ!λ ιλλ. εγ σζσ γεσ εγψ νεκβ!λ σζ ρµαζ µιντ κ εσετ ν ισ. Αζ ερεδµ νψεκ εγψβεν α τεσζτ ηιτελεσσ γ τ ισ ϕελζικ, ηισζεν λ νψεγεσεν µαγασαββ ΜΑΦ ρτ κετ µ ρτ νκ α ρεζισζτενσ σεϕτϖοναλον, µιντ αζ εµβερι µιντ κον (2. τ βλ ζατ). 33

35 Μιντα ΜΑΦ ρτ κεκ Χς (%) τλαγα ν=10 ΚΒς1 σεϕτϖοναλ ΑΜΛ µιντα Νορµ λ µιντα τ βλ ζατ Α καλχειν τεσζτ ρεπροδυκ ληατ σ γ νακ ϖιζσγ λατα σεϕτϖοναλακον σ κλινικαι µιντ κον (εγ σζσ γεσ σ λευκ µι σ εγψ ν περιφ ρι σ ϖ ρ β!λ). Α ΜΑΦ ρτ κεκ σζ λεσ ταρτοµ νψ βαν µινδεν µιντ β λ 10 εγψµ στ κ ϖετ! µιντα ελ!κ σζ τ στ σ µ ρ στ ϖ γεζτ νκ ελ 50 µμ ςεραπαµιλτ ηασζν λϖα µοδυλ τορκ ντ. Αζ ερεδµ νψεκ α µ ρ σ τλαγ τ σ ϖαρι χι σ κοεφφιχιενσ τ (Χς) µυτατϕ κ. 2. Α καλχειν τεσζτ ρεαγενσεινεκ σταβιλιτ σ ϖιζσγ λατα Α καλχειν ΑΜ ολδατ 20 Χ ον τ ρολϖα 1 ϖιγ σταβιλ, αζονβαν 4 Χ οσ τ ρολ σ µελλεττ φ λ ϖ υτ ν ϕελεντ!σ φλυορεσζχενχια ν ϖεκεδ σ ταπασζταληατ, µελψ φελτεηετ!εν α πη ϖ λτοζ σ σ αζ εννεκ κ ϖετκεζτ βεν λ τρεϕ ϖ! ηιδρολ ζισ κ ϖετκεζµ νψε. Α ϖεραπαµιλ τ ρζσολδατ µινδ 4 Χ ον, µινδ 20 Χ ον ελταρτηατ 1 ϖιγ αν λκ λ, ηογψ γ τλ φυνκχι ϕα χσ κκεννε. Εζεκ φιγψελεµβεϖ τελ ϖελ α τεσζτηεζ σζ κσ γεσ ρεαγενσεκ 20 Χ ον τ ρτ ν! εγψ ττεσ τ ρολ σα αϕ νληατ. 3. Μιντ κ ελταρτηατ σ γ νακ ϖιζσγ λατα Σζεπαρ λ σ ελ!ττι, τελϕεσ χσοντϖελ!ι ϖαγψ περιφ ρι σ ϖ ρµιντα τ ρολ σα σορ ν α σεϕτεκ ενεργια κ σζλετ νεκ, ΑΤΠ ρακτ ρ νακ χσ κκεν σε µιαττ α ΜΑΦ ρτ κεκ 34

36 χσ κκεν σ τ λ τϕυκ. Β ρ εββεν αζ εσετβεν α ΠΙ ποζιτιϖιτ σ νεµ µυτατ σζιγνιφικ νσ εµελκεδ στ, αζ ΑΤΠ δεπλ χι µιαττ α 24 ρ ιγ τ ρολτ µιντ βαν α µαγασαββ ΦΙ(ςπ ) ρτ κ α τρανσζπορτ φυνκχι κ χσ κκεν σ τ ϕελζι. Μινδεζ α τ νψλεγεσν λ αλαχσονψαββ ΜΑΦ ρτ κετ ερεδµ νψεζ. Κ σ ρλετεινκ αλαπϕ ν α µινταϖ τελ υτ ν α περιφ ρι σ ϖ ρ ιλλ. χσοντϖελ! φελδολγοζ σα 6 ρ ν βελ λ µεγ κελλ, ηογψ τ ρτ νϕεν, εζιδ! αλαττ υγψανισ µ γ νινχσ λ νψεγεσ χσ κκεν σ α ΜΑΦ ρτ κ βεν. Α Φιχολλον σζεπαρ λτ σ καλχειννελ φελτ λτ ττ σεϕτεκ σζυσζπενζι ϕα 4 Χ ον 24 ρ ν τ τ ροληατ, αννακ ΜΑΦ ρτ κε νεµ ϖ λτοζικ, µερτ εζεν α η!µ ρσ κλετεν α πυµπαφυνκχι βλοκκολϖα ϖαν, νινχσ ϕελεντ!σ ϖ λτοζ σ α ςπ+ σ ςπ µιντ κ ΦΙ ρτ κ βεν. Σζοβαη!µ ρσ κλετεν τ ρτ ν! τ ρολ σ εσετ ν αζονβαν α καλχειν κιπυµπ λ σα φολψτατ δικ α ϖεραπαµιλλαλ νεµ βλοκκολτ ρενδσζερεκβεν, αµι α ΦΙ χσ κκεν σ ηεζ σ εζ λταλ α ΜΑΦ ρτ κ ν ϖεκεδ σ ηεζ ϖεζετ. Εζ ρτ αζ ελ!κ σζ τεττ µιντα η τ!βεν ϖαλ τ ρολ σα σζ κσ γεσ σ α µ ρ στ 24 ρ ν βελ λ ελ κελλ ϖ γεζνι (6. βρα). 35

37 6. βρα Τελϕεσ χσοντϖελ!ι µιντα αναλ ζισε 0, 6, σ 24 ρ σ τ ρολ σ υτ ν. Α: ςπ µιντα ( ) ΜΦΙ ρτ κε σζιγνιφικ νσαν εµελκεδεττ 24 ρα αλαττ, µ γ α ςπ+ µιντ (!) νεµ ϖ λτοζοττ λ νψεγεσεν. Εζ α ΜΑΦ ρτ κ ϕελεντ!σ χσ κκεν σ ηεζ ϖεζετεττ (Β). Φιχολλον σζεπαρ λτ, καλχειννελ φελτ λτ ττ µονονυχλε ρισ σεϕτεκετ σζοβαη!ν τ ρολϖα ( ) α ςπ µιντα ΜΦΙ ρτ κε σζιγνιφικ νσαν χσ κκεντ, α 4 Χ ον τ ρολτ ςπ σεϕτεκ (!) νεµ ϖ λτοζοττ λ νψεγεσεν. Α ςπ+ µιντ κ (!) ΜΦΙ ρτ κε µινιµ λισ ϖ λτοζ στ µυτατοττ (Χ). Εζεκ κ ϖετκεζτ βεν α ΜΑΦ ρτ κ ϕελεντ!σεν ν ϖεκεδεττ α σζοβαη!ν τ ρολτ µιντ βαν (!), µ γ νεµ ϖ λτοζοττ α 4 Χ ον τ ρολτ σεϕτεκβεν ( ). 4. Α καλχειν τεσζτ κοµβιν λ σα φελσζ νι µαρκερ ϕελ λ σσελ Α τεσζτ αλκαλµαζ σα σορ ν λ νψεγεσ, ηογψ σζελεκτ ϖεν α λευκ µι σ σεϕτεκ ρεζισζτενχι ϕ τ µ ρϕ κ σ λεηετ!λεγ κιζ ρϕυκ α ϖιζσγ λατβ λ α νορµ λ χσοντϖελ!ι σεϕτεκετ. Α κ τ ποπυλ χι ελκ λ ν τ σ ρε ραµλ σι χιτοµετρι σ µ δσζερ εσετ ν λεηετ!σ γ ϖαν α µαλιγνυσ σεϕτεκρε ϕελλεµζ! µαρκερεκ αλκαλµαζ σ ϖαλ. Κεττ!σ ϕελ λ σεκ αλκαλµαζ σ ϖαλ α Χ 45 διµ βλαστ 36

38 ποπυλ χι ρα καπυζϖα εζεν τυµοροσ σεϕτεκ ΜΑΦ ρτ κ τ σζ µοληατϕυκ, εζ λταλ α νορµ λ χσοντϖελ!ι σεϕτεκ ζαϖαρ ηατ σ τ κικ σζ β ληετϕ κ. Τεχηνικαι προβλ µ τ ϖετ φελ α τ ββεσ ϕελ λ σ αλκαλµαζ σα, α καλχειν φλυορεσζχενχι ϕα υγψανισ ιγεν ερ!σ αζ αλκαλµαζοττ κονχεντρ χι βαν, γψ αζ ερεδετιλεγ ΦΛ 1 δετεκτορραλ µ ρτ φλυορεσζχενχια αζ ΦΛ 2 δετεκτορ ταρτοµ νψ βαν ισ µ ρηετ! ϕελετ αδ, εζ λταλ α ΠΕ φεστ κ µ ρ σ τ ζαϖαρϕα. Α καλχειν σ α φελσζ νι µαρκερ φλυορεσζχενχι ϕ νακ βιζτονσ γοσ ελκ λ ν τ σ ρε εζ ρτ µεγφελελ! κοµπενζ χι υτ ν αζ ΦΛ 3 δετεκτορ µ ρ σι ταρτοµ νψ βαν (>650 νµ) ϕελετ αδ Χ 45 ΠερΧΠ ϖαγψ Χ 45ΠΕΧψ5 ηασζν ληατ. Εββεν αζ εσετβεν αζονβαν ελ κελλεττ τεκιντεν νκ αζ λετκ πεσσ γ ΠΙ ϖελ τ ρτ ν! ϖιζσγ λατ τ λ. Ερεδµ νψεινκ αζτ µυταττ κ, ηογψ α καλχειν τεσζτ κοµβιν λ σα φελσζ νι µαρκερ ϕελ λ σσελ βιζτονσ γγαλ αλκαλµαζηατ αδοττ σεϕτποπυλ χι ΜΑΦ ρτ κεινεκ µεγηατ ροζ σ ρα µινδ νορµ λ µινδ λευκ µι σ µιντ κ εσετ ν, ηα αζ ΦΛ 3 ταρτοµ νψβαν ϕελετ αδ αντιτεστετ ηασζν λυνκ (7. βρα). 37

39 7. βρα ΦΛ1 ΦΛ3 δοτ πλοτοκ: α ϖ ζσζιντεσ τενγελψεν α καλχειν φλυορεσζχενχι ϕα λ τηατ, αζ ΦΛ3 χσατορν ν α φελσζ νι ϕελ λ σ ΠΕ Χψ5 κονϕυγ λτ αντιτεστεκκελ. Α: ιζοτ πυσ κοντρολλ, Β: φελσζ νι Χ 19, Χ: φελσζ νι Χ 3. Α ποζιτ ϖ σεϕτεκ α ϕοββ φελσ! κϖαδρ νσβαν λ τηατ κ. : Χ 45 ϕελ λ σ αχυτ µψελοιδ λευκ µι σ µιντ βαν. Α Χ 45 διµ ποπυλ χι α µψελοβλαστοκνακ φελελ µεγ (Ρ5) 5. Πγπ µολεκυλασζ µ µεγηατ ροζ σα µονοκλον λισ αντιτεσττελ Τ ββ τανυλµ νψ ελεµζι α φυνκχιον λισ τεσζττελ καποττ ερεδµ νψεκ σ αζ αντιτεστεκκελ τ ρτ ν! ϕελ λ σ κορρελ χι ϕ τ. Σοκ εσετβεν ιγεν ελτ ρ! ερεδµ νψεκ αδ δνακ, µελψεκ µαγψαρ ζατα λεηετ, ηογψ α φυνκχιον λισ τεσζτεκκελ τ ββ τρανσζπορτ φεη ρϕε ακτιϖιτ σ τ µ ρϕ κ, µ γ α µονοκλον λισ αντιτεστ χσακ εγψ προτεινρ!λ αδ φελϖιλ γοσ τ στ (εφφλυξ+/πγπ εσετεκ), ϖαγψ α φεη ρϕε ϕελεν ϖαν υγψαν, δε νεµ µ κ δικ, ιλλ. αζ αντιτεστ κερεσζτρεακχι τ µυτατ α µ σ σεϕτφελσζ νι προτεινεκκελ, µελψεκνεκ α δρογ ρεζισζτενχι βαν 38

40 νινχσ σζερεπ κ (εφφλυξ /Πγπ+ εσετεκ). Αζ ινδιρεκτ ιµµυνφλυορεσζχενχι σ µ ρ σεκετ σ α καλχειν τεσζττελ καποττ ερεδµ νψεκετ σσζεϖετϖε αζτ ταλ λτυκ, ηογψ α ΚΒς 1 ρεζισζτενσ σεϕτϖοναλον α ΜΑΦ ρτ κ 98, αζ εηηεζ ταρτοζ φελσζ νι µολεκυλα σζ µ πεδιγ ϖολτ σεϕτενκ ντ. Α κ ζεπεσ ρεζισζτενχι τ µυτατ ΚΒ8 5 σεϕτϖοναλον α ΜΑΦ ρτ κε χσακ 20% αλ χσ κκεντ, µ γ α ρεχεπτορσζ µ τ ββ µιντ 90% αλ (36 000/σεϕτ). ςαγψισ α ΜΑΦ ρτ κ µ γ µεγλεηετ!σεν µαγασ, δε α φεη ρϕεσζ µ µ ρ σζιγνιφικ νσαν χσ κκεντ. Βετεγ µιντ κ εσετ ν, αηολ α ΜΑΦ ρτ κ 0 σ 60 κ ζ ττι (λεγινκ ββ 40 αλαττι), α φεη ρϕε σεϕτενκ ντι κ πιασζ µα ιγεν αλαχσονψ, σ εννεκ µεγηατ ροζ σα νεµ διφφερενχι λ βιζτονσ γγαλ αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ εσετεκ κ ζ ττ. Εζ α µεγφιγψελ σ νεµ χσακ α κ πιασζ µ µεγηατ ροζ σ ϖονατκοζ σ βαν ρϖ νψεσ, ηανεµ ηασονλ µεγφιγψελ σεκετ τεττ νκ α φεη ρϕε εξπρεσσζι τ δετεκτ λ αντιτεστεσ ϕελ λ σ εσετ ν ισ (ΜΡΚ16), αηολ αζ ερεδµ νψεκετ αζ ιζοτ πυσ κοντρολληοζ ϖισζονψ τοττ φλουρεσζχενχια ιντενζιτ σοκ η νψαδοσακ ντ αδτυνκ µεγ. Μινδεζ αζτ ϕελζι, ηογψ α φυνκχιον λισ τεσζτ σζενζιτ ϖεββ ινδικ τορα α µυλτι δρογ ρεζισζτενχια φενν λλ σ νακ, µιντ α Πγπ αντιγ ν εξπρεσσζι ϖιζσγ λατα ιλλ. υταλ εγψ β πυµπα φυνκχι κ (πλ. ΜΡΠ1) λεηετσ γεσ σζερεπ ρε (3. τ βλ ζατ). 39

41 Πγπ Μ Ρ1 ΜΑΦ (ΑΒΧ) ΜΡΚ16 ποζιτ ϖ ΜΦΙ ρ τα σεϕτεκ % οσ αρ νψα ΚΒς 1σεϕτϖοναλ ΚΒ8 5 σεϕτϖοναλ ΑΜΛ (ΝΡ) 33 < ΑΜΛ (Ρ) 15 < τ βλ ζατ Αζ Μ Ρ ακτιϖιτ σ σ α Πγπ εξπρεσσζι σσζεηασονλ τ σα: ρεζισζτενσ σεϕτϖοναλακον σ ΑΜΛ βετεγεκ χσοντϖελ!ι µιντ ιν (ΝΡ: νον ρεσπονδερ, Ρ: ρεσπονδερ) µεγηατ ροζτυκ α ΜΑΦ ρτ κετ, α σεϕτφελσζ νι µολεκυλα σζ µµαλ κορρελ λ αντιτεστ κ τ! κ πεσσ γετ (ΑΒΧ, αντιβοδψ βινδινγ χαπαχιτψ), σ αζ ΜΡΚ 16 αντιτεσττελ ϖ γζεττ ϖιζσγ λατοκβαν α ποζιτ ϖ σεϕτεκ % οσ αρ νψ τ σ αζ ιζοτ πυσ κοντρολλ ΜΦΙ ρτ κ ηεζ ϖισζονψ τοττ ρ τ τ. Αζ σσζεφ γγ σ νεµ λινε ρισ, α ΜΑΦ ρτ κεκ ϕοββαν διφφερενχι λνακ αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σ νεγατ ϖ εσετεκ κ ζ ττ, µιντ αζ εξπρεσσζι ϖιζσγ λατα. Α τεσζτ ερεδµ νψεκ σ α βετεγσ γ κλινικαι κιµενετελ νεκ κορρελ χι ϕα 1. ΜΑΦ ρτ κεκ σσζεηασονλ τ σα ΑΜΛ σ ΑΛΛ βετεγχσοπορτοκ εσετ ν. Α µιντα ελ!κ σζ τ σ σορ ν φενν λλ µινιµ λισ κ λ νβσ γεκ κ ϖετκεζτ βεν α κ τ χεντρυµ βετεγανψαγ βαν κισσ ελτ ρ! ΜΑΦ ρτ κεκετ καπτυνκ, εζ ρτ εββεν αζ σσζεηασονλ τ σβαν κ λ ν κεζελτ κ α χεντρυµοκ βετεγανψαγ τ. Μινδκ τ εσετβεν ϕ λ λ τηατ αζονβαν α τενδενχια, µελψ αζ ιροδαλοµβαν ισ ισµερτ τ νψ, ηογψ ΑΜΛ εκ εσετ ν γψακοριββ α δε νοϖο φενν λλ ρεζισζτενχια, µιντ ΑΛΛ βεν. Α κ λ νβσ γεκ α λψµπηοιδ σ µψελοιδ λευκ µι σ χσοπορτοκ κ ζ ττ σζιγνιφικ νσνακ αδ δτακ (8. βρα). 40

42 8. βρα ΜΑΦ ρτ κεκ σσζεηασονλ τ σα ΑΜΛ σ ΑΛΛ βετεγεκβεν. Α: ΕΟΕΧ, Κλινικαι Βιοκ µιαι σ Μολεκυλ ρισ Πατολ γιαι Ιντ ζετ Β: Ορσζ γοσ Ηεµατολ γιαι σ Ιµµυνολ γιαι Ιντ ζετ. Α ΜΑΦ ρτ κεκ τλαγα ΑΜΛ βεν µινδκ τ χεντρυµβαν σζιγνιφικ νσαν µαγασαββ, µιντ ΑΛΛ βεν. Α: ΜΑΦ ρτ κεκ τλαγα 26.5 ΑΜΛ βεν (ν=22) σ 16.6 ΑΛΛ βεν (ν=14)(π=0.029) Β: 17.6 σ 7.8 α ΜΑΦ ρτ κεκ τλαγα ΑΜΛ βεν (ν=43) σ ΑΛΛ βεν (ν=14) (π=0.021) 2. Α ΜΑΦ ρτ κ σσζεφ γγ σε α ρεµισσζι ινδυκχι σ κεζελ σρε αδοττ ϖ λασσζαλ: α τεσζτ πρεδικτ ϖ ρτ κε Μιϖελ α ΜΑΦ ρτ κ ρεφερενχια ταρτοµ νψ νακ µεγηατ ροζ σ ηοζ ΑΜΛ εσετ βεν α νορµ λ χσοντϖελ!ι βλαστοκ Μ Ρ ακτιϖιτ σ τ κελλενε ισµερν νκ, σ εννεκ α µ ρ σε ιγεν κ ρ λµ νψεσ, εζ ρτ ανψαγυνκβαν α κλινικαι ϖ λασζ αλαπϕ ν εγψ ολψαν χυτ οφφ ρτ κ µεγηατ ροζ σα τ ρεκεδτ νκ, µελψ µεγβ ζηατ αν ελκ λ ν τι αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ εσετεκετ. Εννεκ ρδεκ βεν α βετεγεκετ ρεσπονδερ (Ρ) σ νον ρεσπονδερ (ΝΡ) χσοπορτβα σορολτυκ. Ρεσπονδερνεκ τεκιντεττ κ αζοκατ, ακικν λ αζ εγψ ϖαγψ κ τ 41

43 κεµοτερ πι σ χικλυσ αλαττ κοµπλεττ ρεµισσζι ελ ρηετ! ϖολτ, α νον ρεσπονδερ χσοπορτβαν τερµ σζετσζερ εν α 4. η τεν 5% φ λ ττ ϖολτ α βλαστοκ αρ νψα α χσοντϖελ!βεν. Μεγηατ ροζτυκ α ΜΑΦ ρτ κεκ τλαγ τ α ρεσπονδερ σ νον ρεσπονδερ χσοπορτβαν µινδκ τ χεντρυµβαν, µελψ 14,1 ιλλ. 17,1 ϖολτ α ρεσπονδερ σ 23,3 ιλλ. 32,9 α νον ρεσπονδερ χσοπορτβαν (ΟΗΙΙ σ ΕΟΕΧ ερεδµ νψει εγψενκ ντ). Α χυτ οφφ ρτ κετ α ΜΑΦ Ρ +ΣΕΜ σ α ΜΑΦ ΝΡ ΣΕΜ (ΣΕΜ: στανδαρδ ερρορ οφ µεαν) ρτ κεκ τλαγακ ντ καλκυλ λτυκ, µελψ 20 νακ αδ δοττ α βυδαπεστι χεντρυµβαν σ 25 νεκ α ΕΟΕΧ βετεγανψαγ βαν. Εζεν χυτ οφφ ρτ κεκ αλ ιλλ. φελ εσ! ΜΑΦ ρτ κεκ αλαπϕ ν αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ εσετεκ ελκ λ ν τηετ!εκ. Αζ γψ λ τρεϕ ττ Μ Ρ + σ Μ Ρ χσοπορτοκβαν µεγηατ ροζτυκ α ρεσπονδερεκ σ νον ρεσπονδερεκ αρ νψ τ. Αζ Μ Ρ νεγατ ϖ χσοπορτβαν α βετεγεκ 72% α ϕ λ ρεαγ λτ α κεζελ σρε, ϖαγψισ α τεσζτ νεγατ ϖ πρεδικτ ϖ ρτ κε 72%, εζζελ α βιζτονσ γγαλ ϕελζι α νεγατ ϖ ερεδµ νψ α τερ πια ηατ κονψσ γ τ. Αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ χσοπορτβαν α βετεγεκ 69 % βαν νεµ λεηετεττ κοµπλεττ ρεµισσζι τ ελ ρνι, ϖαγψισ εννψι ϖολτ α νον ρεσπονδερεκ αρ νψα. Α καλχειν ασσαψ ποζιτιϖιτ σα τεη τ 69% οσ βιζτονσ γγαλ ϕελζι α τερ πια ηατ σταλανσ γ τ (ποζιτ ϖ πρεδικτ ϖ ρτ κ) (9. βρα). 42

44 9. βρα Α καλχειν τεσζτ ποζιτ ϖ σ νεγατ ϖ πρεδικτ ϖ ρτ κε: χυτ οφφ ρτ κ αλαπϕ ν αζ ΑΜΛ βετεγεκετ µινδκ τ χεντρυµβαν Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ χσοπορτοκβα οσζτοττυκ. Αζ Μ Ρ νεγατ ϖ χσοπορτβαν α ρεσπονδερεκ (ρεσπ) αρ νψα 72% ϖολτ (νεγατ ϖ πρεδικτ ϖ ρτ κ), µ γ αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ χσοπορτβαν 69% βαν ταλ λτυνκ νον ρεσπονδερεκετ (νον ρεσπ) (ποζιτ ϖ πρεδικτ ϖ ρτ κ). Α καλχειν τεσζττελ µεγηατ ροζοττ Μ Ρ ακτιϖιτ σ σ αζ ινδυκχι σ κεζελ σρε αδοττ ϖ λασζ κ ζ ττ σζιγνιφικ νσ σσζεφ γγ στ ταλ λτυνκ (π=0,004) 3. Α τεσζτ ερεδµ νψεκ σ α ηοσσζ τ ϖ τ λ λ σ σσζεφ γγ σε Εββε α ϖιζσγ λατβα αζον βετεγεκ κερ λτεκ βε, ακικνεκ α κ ϖετ σι ιδεϕε 8 η ναπν λ ηοσσζαββ ϖολτ. Καπλαν Μαψερ γ ρβε αλαπϕ ν ϖιζσγ λτυκ αζ Μ Ρ ακτιϖιτ σ σ α βετεγσ γ ηοσσζαββ τ ϖ κιµενετελ νεκ σσζεφ γγ σ τ. Β ρ αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ χσοπορτοκ τ λ λ σε κ ζ ττι κ λ νβσ γ νεµ ρτε ελ α στατισζτικαι σζιγνιφικανχια ηατ ρ τ (π=0,07), α γ ρβε αλαπϕ ν µινδενκ ππεν φιγψελεµρε µ λτ σ κλινικαι ρελεϖανχι ϖαλ ρενδελκεζ! ελτ ρ σ ϖολτ α κ τ χσοπορτ τ λ λ σε κ ζ ττ: αζ Μ Ρ νεγατ ϖ βετεγεκν λ αζ 50% οσ 43

45 τ λ λ σ ιδεϕε η ροµσζοροσα (18 η ναπ) αζ Μ Ρ ποζιτ ϖ βετεγεκ 50% οσ τ λ λ σ νεκ (10. βρα). 10. βρα Μ Ρ ποζιτ ϖ σ Μ Ρ νεγατ ϖ βετεγεκ Καπλαν Μαψερ τ λ λ σι γ ρβ ϕε. Αζ τλαγοσ κ ϖετ σι ιδ! 11,7± 11,1 η ναπ ϖολτ, α ϖιζσγ λατβα 8 η ναπν λ ηοσσζαββ κ ϖετ σι ιδ! εσετ ν ϖεττ κ βε α βετεγεκετ. Α κ τ χσοπορτ τ λ λ σε κ ζ ττ ϕελεντ!σ, δε στατισζτικαιλαγ νεµ σζιγνιφικ νσ κ λ νβσ γετ ταλ λτυνκ (π=0,07) 4. Κ ϖετ σεσ ϖιζσγ λατοκ σζελεκτ λτ εσετεκβεν Ν η νψ βετεγν λ αζ Μ Ρ µεγηατ ροζ σ τ νεµ χσακ α διαγν ζισ φελ λλ τ σακορ, ηανεµ α βετεγσ γ λεφολψ σα σορ ν κ σ!ββ ισ (ρεφρακτερ σζακβαν ιλλ. ρελαπσζυσ ιδεϕ ν) ελϖ γεζτ κ. Εζεκβεν αζ εσετεκβεν αλαπϖετ!εν κ τφ λε µιντ ζατοτ λ ττυνκ: ϖαγψ α κεζδετβεν αλαχσονψ ΜΑΦ ρτ κ κ σ!ββ λ νψεγεσεν µεγεµελκεδεττ σ α βετεγ Μ Ρ ποζιτ ϖϖ ϖ λτ, ϖαγψ α δε νοϖο φενν λλ Μ Ρ ποζιτιϖιτ σ ϖ λτοζατλαν µαραδτ α βετεγσ γ κ σ!ββι φ ζισ βαν ισ (11. βρα). 44

46 11. βρα Μ Ρ ακτιϖιτ σ µεγηατ ροζ σα α διαγν ζισ φελ λλ τ σακορ (διαγ) σ ρελαπσυσ ιδεϕ ν ϖαγψ ρεφρακτερ σζακβαν (ρεφρ/ρελ). Αζ ελσ! κ τ εσετβεν Μ Ρ νεγατ ϖ βετεγεκβεν κ ϖετ σεσ ϖιζσγ λατταλ Μ Ρ ποζιτιϖιτ στ σζλελτ νκ (γψ γψσζερ ινδυκ λτα ρεζισζτενχια), α τ ββι εσετβεν αζ Μ Ρ ακτιϖιτ σ νεµ ϖ λτοζοττ ϕελεντ!σεν α βετεγσ γ λεφολψ σα καπχσ ν 45

47 ΜΕΓΒΕΣΖ Λ Σ Α µαλιγνυσ ηεµατολ γιαι βετεγσ γεκ ποντοσ διαγνοσζτικ ϕ βαν δ ντ! ϕελεντ!σ γ α σεϕτϖοναλ αζονοσ τ σα ιλλ. α λευκ µι σ σεϕτεκ τ πυσ νακ σ διφφερενχι λτσ γ νακ µεγηατ ροζ σα, µελψ αζ εγψεσ αλτ πυσοκ ελκ λ ν τ σ τ, γψ α λευκ µι κ/λψµπηοµ κ κλασσζιφικ χι ϕ τ λεηετ!ϖ τεσζι. Α σεϕτϖοναλ αζονοσ τ σ νακ λεγµεγβ ζηατ ββ µ δϕα αζ ιντραχελλυλ ρισ µαρκερεκ αλκαλµαζ σα, µελψεκ κ ζ λ λεγινκ ββ α ΜΠΟ, χψχ 79α σ χψχ 3 ηασζν λατοσ α µψελοιδ, Β σ Τ λψµπηοιδ ϖοναλακ ιδεντιφικ λ σ ρα (5 8). Α ρενδελκεζ σρε λλ µαρκερεκ νεµ µινδεν εσετβεν βιζτοσ τϕ κ αζ ΑΜΛ αλτ πυσοκ ελκ λ ν τ σ τ. Β ρ ϖαννακ σεϕτφελσζ νι φεη ρϕ κ, µελψεκ αζ εσετεκ ζ µ βεν σεγ τσ γετ νψ ϕτανακ α γρανυλοχψτα, µονοχψτα σ µεγακαρψοχψτα ϖοναλακ διφφερενχι λ σ βαν, εζεκ µελλεττ ναγψ ϕελεντ!σ γε λεηετ τοϖ ββι µαρκερεκ αζονοσ τ σ νακ, µελψεκ ϖαγψ σεϕτϖοναλ σπεχιφικυσακ, ϖαγψ εξπρεσσζι ϕυκ µ ρτ κε κ λ νβ ζικ εζ εγψεσ σεϕτϖοναλακον. Α κϖαντιτατ ϖ ραµλ σι χψτοµετρια εσζκ ζ ϖελ λταλυνκ ϖιζσγ λτ Χ 162 (ΠΣΓΛ 1) µολεκυλα ιλψεν µαρκερνεκ βιζονψυλτ, µελψ ελτ ρ! εξπρεσσζι τ µυτατ α γρανυλοχψτα σ α µονοχψτα ϖοναλ σεϕτϕειν, εζ λταλ α κ τ σεϕτϖοναλ ελκ λ ν τ σ ρε αλκαλµασ. Α κορρεκτ διαγν ζισ φελ λλ τ σα µελλεττ α κλινικαι ονκολ γι βαν ϕελεντ!σ ιγ νψ ϖαν α µαλιγνυσ σεϕτεκ χιτοσζτατικυµ ρεζισζτενχι ϕ νακ, µιντ προγνοσζτικαι 46