Μελέτη Σεσκιτερπενικών Λακτονών ενδημικών ειδών του γένους Crepis L. Υπ. Διδακτ. ΜΠΑΡΔΑ ΧΡΙΣΤΙΝΑ ΒΙΟΧΗΜΙΚΟΣ Θεσσαλονίκη 2018 Επιβλ. Καθ. κ Ελένη Σκαλτσά
Μελέτη Σεσκιτερπενικών Λακτονών ενδημικών ειδών του γένους Crepis L. Γένος Crepis L. Σεσκιτερπενικές λακτόνες
Σεσκιτερπενικές λακτόνες Φυσικά προϊόντα με 15 άτομα άνθρακα (σεσκιτερπένια) τερπένια Κυρίως βιοσυντίθονται από την οικ Asteraceae Ένα σημαντικό χαρακτηριστικό αυτών των μορίων είναι η παρουσία ενός τμήματος α-μεθυλ-γ-λακτόνης Είναι μια κατηγορία βιοδραστικών φυσικών προϊόντων που εμφανίζουν μια σειρά από βιολογικές και φαρμακολογικές δράσεις όπως αντιμικροβιακές, κυτταροτοξικές, αντιφλεγμονώδεις, αντι-ιικές, αντιβακτηριακές και αντιμυκητιασικές. A: Germacranolides, B: Heliangolides, C+D: Guaianolides, E: Pseudoguaianolides, F: Hypocretenolides, G: Eudesmanolides.
Σεσκιτερπενικές λακτόνες R 4 guaiane 1 9 R 1 5 7 R 3 germacrane R 2 O R5 O eudesmane
Αρτεμισινίνη Artemisia sp. Aνθελονοσιακή δράση
Aim of the study Απομόνωση και η ταυτοποίηση φυσικών προϊόντων Σεσκιτερπενικών λακτονών Asteraceae family Crepis Bρώσιμα φυτά ( χόρτα)
Στα πλαίσια αυτής της έρευνας επιλέχθηκαν προς μελέτη ενδημικά είδη του γένους Crepis L., της οικογένειας Asteraceae (tribe Cichorieae) τα οποία είναι εδώδιμα και ονομάζονται κν. Πικραλίδες. Τα Asteraceae είναι μία από τις μεγαλύτερες οικογένειες αγγειόσπερμων και χαρακτηρίζονται από φυτά πλούσια σε Σεσκιτερπενικές Λακτόνες Το γένος Crepis L. αποτελείται από 250 περίπου είδη, που ενδημούν στις εύκρατες περιοχές του βόρειου ημισφαιρίου και στην τροπική Αφρική με μεγαλύτερη ποικιλομορφία στην Μεσόγειο. Τα είδη του γένους Crepis L. εμφανίζονται σε διάφορους τύπους ενδιαιτημάτων, από αλπικές ζώνες, βάλτους και χαμηλά λιβάδια έως παραλιακά δάση. Γένος Crepis L. Το μέγεθος κυμαίνεται από λίγα μόνο εκατοστά σε ύψος π.χ. C. pygmaea L. μέχρι σχεδόν δύο μέτρα στο C. sibirica L. Κυρίως είναι μονοετείς, διετείς ή πολυετείς πόες με κυρίαρχο χρώμα ανθέων το λαμπερό κίτρινο
Mεθοδολογία VLC, CC and RP18-HPLC cyclohexane:et2o:meoh (1:1:1) Καθαρές ουσίες
NMR Φασματοσκοπία Πυρηνικού Μαγνητικού Συντονισμού (ΝΜR) 1 H-NMR 13 C-NMR COSY HSQC HMBC
Πίνακας 13 C-NMR Πίνακας 1 Η-NMR
Αριθμό τύπων Η 1 H-NMR Σχάση - χημικό περιβάλλον (n+1) Χημική μετατόπιση
COSY (CΟrrelation SpectroscopY) CH 2 OH CH 3
HSQC (Heteronuclear Single Quantum Correlation) Εντοπίζουμε και αντιστοιχίζουμε τους πρωτονιόμενους άνθρακες Ουσία : 4-β-O-D-γλυκοσυλο-3,4-διυδροξυβενζυλο-αλκοόλη
HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) J2 και J3
13 C NMR H Συνολικός αριθμός ανθράκων του μορίου CH 2 CH 3, CH
NMR Φασματοσκοπία Πυρηνικού Μαγνητικού Συντονισμού (ΝΜR) Λακτονικός δακτύλιος CH2 CH3 R 4 1 9 R 1 5 2 διπλές κορυφές σε δη 5.5 και 6.5 αντίστοιχα 7 1 διπλή κορύφη σε δη 0.8 εώς 1.7 R 3 R 2 O R5 O
Από τη θεωρία στη πράξη Μέσα από τις τεχνικές 1D και 2D NMR (Nuclear magnetic resonance / Πυρηνικός μαγνητικός συντονισμός) μας δίνεται η δυνατότητα να προσδιορίσουμε τη δομή και να ταυτοποιήσουμε δευτερογενείς μεταβολίτες.
Ουσία Γροσεϊμίνη [4-υδροξυ-9-μεθυλο-3,6-διμεθυλιδενο-οκταϋδρο-αζουλενο[4,5-b]φουρανο-2,8(3H,4H)-διόνη] Φάσμα 1H-NMR (CDCl3) 13 14 15
Η-7/CΗ2-13 Η-4/Η-5/Η-6/Η-7/Η-8/ CΗ2-9 Η-1/CΗ2-2, Η-1/Η-5 Φάσμα COSY
Φάσμα HSQC Φάσμα HMBC Η παρουσία καρβονυλίου στη θέση 3 επιβεβαιώνεται από το διασταυρούμενο σήμα του με τα πρωτόνια του μεθυλίου της θέσης 15 και των Η-2a και Η-2b σε δc 218.0 στο φάσμα HMBC.
Ουσία: 8-επι-ισολιπιδιόλη [8β-υδροξυ-ισολιπιδιόλη] [(3S, 3aR,4R,8S, 9aS,9bR)-4, 8-διυδροξυ-3,9-διμεθυλο-6-μεθυλενο-δεκαϋδρο-αζουλενο[4,5-b]φουρανο-2(3H)-όνη] Φάσμα 1 Η-ΝΜR (CD 4 O) CH 3-13 CH 2-14 CH 3-15 1.18 5.06/4.95 1.17 H-3: 3.62, H-6: 4.26, H-8: 3.96
CH 3-15/Η-4 H-3/H-4 H-5/H-4 H-11/H-7 CH 3-13/Η-11 Φάσμα COSY (CD 3 OD) H-6/H-7 H-6/H-5 CH 3-15 / Η-4 Η-4 / H-3/ Η-2 / Η-1 Η-1 / Η-5 / Η-4 Η-1 / Η-5/ Η-6 / Η-7/ Η-8/ Η-9 Η-7 / Η-11/ CH 2-13
Crepis incana Sm.
Crepis heldreichiana
Είναι η πρώτη φυτοχημική μελέτη στα είδη Απομονώθηκαν και τακτοποιήθηκαν 20 δευτερογενείς μεταβολίτες 10 Σεσκιτερπενικες λακτόνες Γροσειϊμίνη Κοινός μεταβολίτης Ενδημικά είδη του γένους Χημειοταξονομικός δείκτης
C. dioscorides C. incana C. commutata
Email : cbarda@pharm.uoa.gr