Τ.Ε.Ι. Ηπείρου Σχολή Τεχνολογίας Γεωπονίας Τμήμα Φυτικής Παραγωγής ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΕΣ IN VITRO ΚΕΦΑΛΑΙΟ 4 Ο Εξοπλισμός Δούμα Δήμητρα Άρτα, 2013
ΧΩΡΟΙ ΤΟΥ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟΥ Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να διαθέτει χώρους για: την αποθήκευση, την προετοιμασία και την αποστείρωση των θρεπτικών διαλυμάτων τον ασηπτικό χειρισμό του φυτικού υλικού την ανάπτυξη των φυτικών τμημάτων με ελεγχόμενες συνθήκες θερμοκρασίας και φωτισμού την παρατήρηση και καταγραφή των αποτελεσμάτων τον καθαρισμό και την αποθήκευση των γυαλικών, των πλαστικών και των άλλων αντικειμένων που χρησιμοποιούνται στο εργαστήριο.
1. Χώρος Καθαρισμού Περιλαμβάνει: αυτόματο πλυντήριο και στεγνωτήριο μεγάλες λεκάνες με ανθεκτικά τοιχώματα τρεχούμενο ζεστό και κρύο νερό βρύσες με απιονισμένο, απεσταγμένο και διπλά απεσταγμένο νερό θέσεις για στέγνωμα και φύλαξη δοχείων και γυαλικών. Συνήθως τοποθετούνται: Α) Στήλη απιονισμού ύδατος Β) Συσκευή απόσταξης του νερού
2. Χώρος προετοιμασίας θρεπτικών διαλυμάτων Περιλαμβάνει: χώρο για αποθήκευση των χημικών ουσιών, των δοχείων καλλιέργειας και των υαλικών πάγκους για τοποθέτηση μαγνητικών αναδευτήρων, phμέτρων, ζυγαριών και οργάνων για μέτρηση, ανάδευση και αραίωμα των διαλυμάτων.
3. Θάλαμος αποστείρωσης Καλλιέργεια in vitr (= μέσα σε γυαλί): Περιλαμβάνει: Α) Κλίβανο υγρής αποστείρωσης(autclave) Αποστειρώνει νερό, θρεπτικά διαλύματα, δοχεία και άλλα εργαλεία. Δουλεύει σε ορισμένη πίεση(1,1 ατμόσφαιρες). Με την θερμοκρασία επιτυγχάνεται αποστείρωση και με την πίεση τα υγρά δεν βράζουν. Β) Κλίβανο ξηρής αποστείρωσης Χρησιμοποιείται για τα υαλικά και τα μεταλλικά εργαλεία. Έχειμέγιστηθερμοκρασία15έως250 ο C. Τα αντικείμενα τυλίγονται σε φύλλα αλουμινίου. Συνήθειςσυνθήκεςαποστείρωσηςείναιοι150 ο Cεπί3ώρες.
4. Χώρος ασηπτικής Καλλιέργεια μεταφοράς τουin φυτικού vitrυλικού (= μέσα σε γυαλί): Η επιτυχία της ιστοκαλλιέργειας βασίζεται: 1. Στην επιτυχή αποστείρωση των θρεπτικών διαλυμάτων. 2. Στην επιτυχή αποστείρωση του φυτικού υλικού. 3. Στον επιτυχή εμβολιασμό των εκφύτων στο υπόστρωμα. Για τον επιτυχή εμβολιασμό απαιτείται ειδικός χώρος που ονομάζεται «θάλαμος εμβολιασμού» (Laminar Air Flw ή θάλαμος οριζόντιας ροής ρεύματος αέρος).
5. Χώρος καλλιέργειας Καλλιέργεια in vitr (= μέσα σε γυαλί): Πρέπει να έχει τη δυνατότητα: Διακύμανσης της θερμοκρασίας από 13 30 (+ ή 0,5 ο C) με σύστημα συναγερμού, αυτογραφικό όργανο συνεχούς καταγραφής θερμοκρασίας και μικρό ανεμιστήρα. Ρύθμιση φωτισμού σε ένταση μέχρι τα 10.000 lux (έλεγχος ποιότητας και διάρκειας). Ρύθμισητηςυγρασίαςαπότο20 98%(διακύμανσηκατά3%).
ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΑ ΟΡΓΑΝΑ 1. Θερμαινόμενες πλάκες ή μικρό ηλεκτρικός φούρνος ή φούρνος μικροκυμάτων. 2. Γυάλινα ή ατσάλινα δοχεία για θέρμανση και διάλυση των θρεπτικών διαλυμάτων. 3. ph-μετρο. 4. Βαθμολογημένους κυλίνδρους, πιπέτες και μικροπιπέτες. 5. Αναλυτικούς ζυγούς ακριβείας και κοινούς ζυγούς. 6. Κωνικές φιάλες, δοκιμαστικούς σωλήνες ή άλλα γυάλινα ή πλαστικά δοχεία με κατάλληλα καλύμματα για την καλλιέργεια των φυτικών τμημάτων. 7. Συσκευές διάλυσης αιωρημάτων. 8. Μικρά εργαλεία μεταφοράς(σπάτουλες, λαβίδες κλπ). 9. Ψυγείο με καταψύκτη. 10. Ισχυρός μεγεθυντικός φακός φωτιζόμενος ή στερεομικροσκόπιο. 11. Αναδευτήρες μαγνητικούς με θερμαινόμενη βάση. 12. Διάφορες χημικές ουσίες για την παρασκευή των θρεπτικών διαλυμάτων ή έτοιμα θρεπτικά διαλύματα. 13. Αποστειρωτικά.
ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΑ ΟΡΓΑΝΑ Διάγραμμα τυπικού εργαστηρίου ιστοκαλλιέργειας Α: Σκοτεινός θάλαμος 1. Πάγκοι Β: Χώρος για πλύσιμο 2. Νιπτήρες με βρύσες ζεστού-κρύου και απεσταγμένου νερού 3. Αποστακτήρας 4. Απιονιστήρας Γ: Θάλαμος αποστείρωσης 5. Κλίβανος υγρής αποστείρωσης 6. Κλίβανος ξηρής αποστείρωσης Δ: Χώρος εμβολιασμού 7. Θάλαμοι εμβολιασμού Ε: Θάλαμος ανάπτυξης φυτών Ζ: Κύριος χώρος Εργαστηρίου 8. Πάγκοι για την προετοιμασία των θρεπτικών διαλυμάτων 9. Πάγκοι με στερεοσκόπια και μικροσκόπια για παρατηρήσεις.
Συσκευή απόσταξης νερού Στήλη απιονισμού του ύδατος
Κλίβανος υγρής αποστείρωσης
Θάλαμος εμβολιασμού
Θάλαμος επώασης