AlaTOP Allergy Screen. For use on IMMULITE 2000 systems

AlaTOP Allergy Screen For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the qualitative detection of IgE antibodies specific to inhalant allergens in serum, as an aid in the differential diagnosis of atopic allergy. Catalog Number: L2KAT2 (200 tests) Test Code: TOP Color: Dark Gray Summary and Explanation In patients with extrinsic asthma, hay fever or atopic eczema, symptoms may appear immediately after exposure to specific allergens. Allergic response of this type (atopic or anaphylactic) is a function of serum reagins, principally immunoglobulin E (IgE). IgE molecules act as points of contact between the allergen and specialized cells that release histamine and other agents upon exposure to the allergen; this initiates the events which we recognize as allergic reactions. 1,2 When evaluated in the light of other clinical and laboratory findings, in vitro allergy screening tests followed by allergenspecific IgE tests can help the physician identify the allergen (or allergens) to which an individual is sensitive. 5,6,7,8 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen is a chemiluminescent enzyme-labeled sequential immunoassay, based on liquid ligand-labeled allergens, monoclonal antibodies, and separation by anti-ligandcoated solid phase. AlaTOP assays use a patented technology (U.S. Patent No. 4,778,751) exploiting liquid-phase kinetics in a bead format. 3,4 It represents a significant advance over conventional methods relying on allergens attached to a solid-phase support, such as a paper disk. AlaTOP is unique in its use of allergens in a liquid format. The allergens are covalently bound to a soluble polymer/copolymer matrix, which in turn is labeled with a ligand; anti-ligand is coated on the polystyrene bead to capture the ligand-labeled allergens. Incubation Cycles: 2 30 minutes. Specimen Collection The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen has not been tested with all possible variations of tube types. Volume Required: 50 µl serum. Storage: 3 days at 2 8 C, 9,10 or 6 months at 20 C. 10 Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a 2 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. AlaTOP Bead Pack (L2AT12) With barcode. 200 beads, coated with anti-ligand. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KAT2: 1 pack. AlaTOP Reagent Wedge (L2ATA2) With barcode. 11.5 ml allergen screen, with preservative. 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to monoclonal murine anti-ige antibodies in buffer, with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KAT2: 1 wedge. Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. AlaTOP Adjustor (LATL) 2 ml IgE-free human serum. Stable at 2 8 C for 30 days after opening. Do not freeze L2KAT2: 1 vial. Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Alatop Allergy Screen Negative Control (L2ATC1) 2 ml IgE-free human serum. Stable at 2 8 C for 4 months after opening, or until the expiration date marked on the label. Do not freeze. Do not use if signs of microbiological contamination, such as a cloudy appearance, have occurred. L2KAT2: 1 vial. Place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. AlaTOP Allergy Screen Positive Control (L2ATC2) 2 ml human serum with IgE specific for the IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen assay. Stable at 2 8 C for 4 months after opening, or until the expiration date marked on the label. Do not freeze. Do not use if signs of microbiological contamination, such as a cloudy appearance, have occurred. L2KAT2: 1 vial. Place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) Also Required Distilled or deionized water; test tubes. Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for: preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 4 weeks. Quality Control Samples: The controls supplied with the kit should be used to monitor assay performance and the continued applicability of the stored Reactive/Nonreactive/Indeterminate Cutoff. Calculation of Cutoff and S/CO Ratio: The Master Cutoff of the assay was determined from representative samples to achieve optimal sensitivity and specificity for the assay. The cutoff is set equal to the average counts per second (mean cps) of the Adjustor (from the most recent IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 3

adjustment) multiplied by Curve Parameter 1. (See the "Low Adjustor CPS" and "Curve Parameter 1" fields in the IMMULITE 2000 Kit Information screen, which can be accessed from the menu via Data Entry: Kit Entry.) Calculation of a signal/cutoff (s/co) ratio is done by using the following formula: S/CO Ratio = Sample or Control cps Mean Adjustor cps P1 Calculation and reporting of qualitative (reactive/nonreactive/indeterminate) and s/co ratio results are handled automatically by the IMMULITE 2000. The result for a sample is reported as Indeterminate if the counts per second for that sample fall within ±10% of the cutoff. The result is reported as Reactive if the sample's counts are above the indeterminate range, and Nonreactive if below this range. Additional controls may be tested in accordance with guidelines or requirements of local, state and/or federal regulations or accrediting organizations. Interpretation of Results Reactive: A reactive result (ratio of 1.1) indicates that antibodies to one or more of the component allergens in the panel are present in the patient sample. Nonreactive: A nonreactive result (ratio of < 0.9) indicates nondetectable antibodies to the component allergens. Indeterminate: Any result of "Indeterminate" (ratio between 0.9 and <1.1) should be retested. Samples which still test as "Indeterminate" should be tested by an alternate method. Limitations The IMMULITE 2000 AlaTOP procedure provides qualitative (reactive/nonreactive/ Indeterminate) results only. It does not provide information on the amounts of IgE specific for any component allergens. As with all diagnostic screening tests, a definitive clinical diagnosis should not be based on the result of a single test, but should only be made by the physician after all clinical and laboratory findings have been evaluated. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data The following sections contain data representative of the IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen kit's performance. Results are expressed as a signal-tocutoff ratio. Unless otherwise specified, all results were generated on serum samples collected in tubes without anticoagulants, gel separators, or clot-promoting additives. Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See Precision table.) Specificity: The antibodies are highly specific for human IgE, with no crossreactivity to other human immunoglobulins (IgA, IgD, IgG, IgM). Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 500 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3,000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE AlaTOP (LKAT) on 110 patient specimens. 4 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

IML 2000 AlaTOP Allergy Screen Nonreactive IMMULITE Reactive Ind Reactive 64 0 0 Indeterminate 0 0 0 Nonreactive 3 2 41 Agreement: 95.5% Relative Sensitivity: 100%; Relative Specificity: 89.1% References 1) Halpern GM. Markers of human allergic disease. J Clin Immunoassay 1983;6:131 8. 2) Wide L, Bennich H, Johansson SGO. Diagnosis of allergy by an in vitro test for allergen antibodies. Lancet 1967;2:1105 7. 3) El Shami AS, Alaba O. Liquid-phase in vitro allergenspecific IgE assay with in situ immobilization. Adv Biosci 1989;74:191 201. 4) Alaba O, El Shami AS. Evaluation of non-specific IgE binding: comparison of two in vitro allergen assays. Adv Biosci 1989;74:203 14. 5) Lichtenstein LM, et al. IgE antibody measurements in ragweed hay fever; relationship to clinical severity and the results of immunotherapy. J Clin Invest 1973;52:472 82. 6) Lowenstein H. Cross reactions among pollen antigens. Allergy 1980;35:198 200. 7) Weber RW, Nelson HS. Pollen allergens and their interrelationships. Clin Rev Allergy 1985;3:291 318. 8) Merrett J, Merrett TG. Screening for IgEmediated allergy. J Clin Immunoassay 1993;16:164-72. 9) Bazaral M, Hamburger RN. Standardization and stability of immunoglobulin E (IgE). J Allergy 1972;49:189-91. 10) Tietz NW, editor. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders, 1995:358. Technical Assistance For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ratio) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 0.66 0.06 9.7% 0.07 10.6% 2 3.55 0.16 4.4% 0.17 4.9% 3 3.79 0.13 3.5% 0.16 4.2% 4 12.83 0.70 5.4% 0.69 5.4% 5 44.8 1.84 4.1% 2.07 4.6% 6 163 10.69 6.6% 10.03 6.2% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Με την ίδια μέθοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Česky IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen Použití: Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení přítomnosti specifických IgE protilátek proti inhalačním alergenům v séru, jakožto pomůcky při diferenciální diagnóze atopické alergie. Katalogové číslo: L2KAT2 (200 stanovení) Kód metody: TOP Barva: tmavě šedá Shrnutí a vysvětlení U pacientů s astmatem, sennou rýmou, nebo atopickým ekzémem se symptomy onemocnění můžou objevit okamžitě po styku se specifickými alergeny. Alergická reakce tohoto typu (atopická nebo anafylaktická) je funkcí sérových reaginů, zejména immunoglobulinu E (IgE). Molekuly IgE působí jako kontaktní molekula mezi alergenem a specializovanými buňkami, které při styku s alergenem uvolňují histamin a další látky. To má za následek reakce, které známe jako alergické. 1,2 Při vyhodnocování (s ohledem na další klinické a laboratorní nálezy) slouží in vitro skupinové testy, následované v případě IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 5

pozitivity alergen specifickými testy, lékaři ke zjištění, na který alergen (nebo alergeny) je pacient citlivý. 5,6,7,8 Princip Stanoveni Stanovení AlaTOP Allergy Screen na přístroji IMMULITE 2000 představuje chemiluminiscenční enzymatickou sekvenční imunochemickou reakci využívající ligandem značené alergeny v kapalné fázi, monoklonální protilátky a separaci pomocí antiligandu na pevné fázi. Stanovení AlaTOP používá patentovanou technologii (U.S. Patent č. 4 778 751) využívající kinetiku kapalné fáze na kuličkové struktuře. 3,4 Jedná se o významný pokrok ve srovnání s konvenčními metodami využívajícími alergeny navázané na nosič v pevné fázi, jako je například papírový disk. AlaTOP je unikátní tím, že pracuje s alergeny v kapalné fázi. Alergeny jsou navázané kovalentní vazbou na rozpustnou polymer/kopolymerní matrici, která je značená ligandem; antiligand je nanesen na polystyrenové kuličce a slouží k zachycení alergenů konjugovaných s ligandem. Inkubační cykly: 2 30 minut. Odebírání vzorků K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugací vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení AlaTOP Allergy Screen na přístroji IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku: 50 µl séra. Skladování: 3 dny při 2 8 C, 9,10 nebo 6 měsíců při 20 C. 10 Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. Reagencie: Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfilis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HBsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 1 g/l. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát: Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda: Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky s čárovým kódem na krabici. AlaTOP zásobník s kuličkami (L2AT12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček, potažené antiligandem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KAT2: 1 balení. AlaTOP Reagencie (L2ATA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml směs alergenů, s konzervačním prostředkem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s monoklonální myší protilátkou proti IgE v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při 6 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

teplotě 2 8 C do expirace. L2KAT2: 1 nádobka. Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. AlaTOP kalibrátor (LATL) 2 ml lidského séra bez IgE. Stabilní 30 dní po otevření při 2 8 C. Nezmrazujte L2KAT2: 1 ampulka. Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Alatop Allergy Screen negativní kontrola (L2ATC1) 2 ml lidského séra bez IgE. Stabilní 4 měsíce po otevření při 2 8 C, nebo do expirace vyznačené na štítku. Nezmrazujte. Pokud se objeví známky mikrobiologické kontaminace, jako např. zakalení, kontrolu nepoužívejte. L2KAT2: 1 ampulka. Na testovací zkumavky nalepte příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. AlaTOP Allergy Screen pozitivní kontrola (L2ATC2) 2 ml lidského séra se specifickým IgE pro stanovení AlaTOP Allergy Screen na přístroji IMMULITE 2000. Stabilní 4 měsíce po otevření při 2 8 C, nebo do expirace vyznačené na štítku. Nezmrazujte. Pokud se objeví známky mikrobiologické kontaminace, jako např. zakalení, kontrolu nepoužívejte. L2KAT2: 1 ampulka. Na testovací zkumavky nalepte příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť L2SUBM: Chemiluminiscenční substrát L2PWSM: Promývací roztok L2KPM: Čistící roztok na jehly LRXT: Reakční zkumavky (na jedno použití) Dále potřebujete: Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky. Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi: 4 týdny. Vzorky ke kontrole kvality: Kontroly dodané se soupravou jsou určeny ke kontrole funkční způsobilosti stanovení a ověření použitelnosti uložené reaktivní/ nereaktivní/neurčitý hodnoty cut-off. Výpočet hodnoty cut-off a poměru S/CO: Hlavní cut-off hodnota tohoto testu byla určena z reprezentativních vzorků tak, aby bylo dosaženo optimální citlivosti a specificity metody stanovení. Cut-off hodnota je rovná průměrnému cps (střední hodnota cps) kalibrátoru (od poslední adjustace) vynásobenému parametrem kalibrační křivky 1 (Curve Parameter 1). (Viz políčka Low Adjustor CPS (cps nízkého kalibrátoru) a Curve Parameter 1 (parametr kalibrační křivky 1) na obrazovce přístroje IMMULITE 2000. Přístup je možný z nabídky přes Data Entry: Kit Entry.) K výpočtu poměru signál / hodnota cut-off (s/co) se používá následující vztah: Cps vzorku nebo kontroly S/CO = Střední hodnota cps kalibrátoru P1 Výpočet poměru s/co a hlášení kvalitativních výsledků (udávaných ve tvaru reaktivní/nereaktivní/neurčitý) provádí analyzátor IMMULITE 2000 automaticky. Výsledek pro vzorek je Neurčitý když je cps vzorku v rámci intervalu ±10% hodnoty cut-off. Výsledek je Reaktivní, když je cps vzorku nad rozmezím neurčitého a Nereaktivní, když je pod tímto rozmezím. Dodatečné kontroly je možné testovat v souladu s pokyny a požadavky místních, IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 7

státních a/nebo federálních předpisů nebo akreditačních organizací. Vyhodnocení výsledků Reaktivní: Reaktivní výsledek (poměr 1,1) značí, že ve vzorku pacienta se nachází protilátky proti jednomu nebo více alergenům obsažených v komponentech soupravy. Nereaktivní: Nereaktivní výsledek (poměr < 0,9) značí, že protilátky proti alergenům obsažených v komponentech soupravy jsou nezjistitelné. Neurčitý: Každý neurčitý výsledek (poměr mezi 0,9 a <1,1) by měl být znovu testován. Vzorky, které jsou stále jako neurčité by měly být měřeny jinou metodou. Omezení Metoda AlaTOP na přístroji IMMULITE 2000 poskytuje pouze kvalitativní výsledky (reaktivní/nereaktivní/neurčitý). Neposkytuje údaje o množství IgE specifických proti některému z alergenů obsažených v komponentech soupravy. Tak jako u všech diagnostických screeningových testů, konečná klinická diagnóza by neměla být založená pouze na výsledku jediného testu, ale měl by ji stanovit lékař po vyhodnocení všech klinických a laboratorních nálezů. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavených kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, anamnézou pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení AlaTOP Allergy Screen na analyzátorech IMMULITE 2000 najdete v následující části. Výsledky se udávají jako signál/cutoff. Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez antikoagulačních činidel, gelových separátorů nebo přísad podporujících srážlivost. Přesnost: Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva cykly za den, celkem 40 cyklů a 80 replikátů. (Viz tabulka Přesnost.) Specificita: Protilátka proti lidskému IgE je silně specifická bez zkřížených reakcí s ostatními lidskými imunoglobuliny (IgA, IgD, IgG, IgM). Bilirubin: Přítomnost konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza: Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 500 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie: Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3 000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Srovnání metody: Stanovení bylo porovnáno s testem IMMULITE AlaTOP (LKAT) společnosti na 110 vzorcích pacientů. IML 2000 AlaTOP Allergy Screen IMMULITE Reaktivní Neurčitý Nereaktivní Reaktivní 64 0 0 Neurčitý 0 0 0 Nereaktivní 3 2 41 Shoda: 95,5% Relativní citlivost: 100%; Relativní specificita: 89,1% Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics 8 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά Εξέταση αλλεργιογόνων IMMULITE 2000 AlaTOP Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποιοτικό προσδιορισμό αντισωμάτων IgE στον ορό, έναντι εισπνεόμενων αλλεργιογόνων, ως βοήθημα για τη διαφορική διάγνωση της ατοπικής αλλεργίας. Αριθμός καταλόγου: L2KAT2 (200 εξετάσεις) Κωδικός εξέτασης: TOP Χρώμα: Σκούρο Γκρι Περίληψη και επεξήγηση Σε ασθενείς με εξωγενές άσθμα, αλλεργική καταρροή η ατοπικό έκζεμα, τα συμπτώματα είναι δυνατό να εμφανιστούν αμέσως μετά την έκθεση σε συγκεκριμένα αλλεργιογόνα. Η αλλεργική αντίδραση αυτού του τύπου (ατοπική ή αναφυλακτική) είναι μια λειτουργία των αντιδρασινών του ορού, και κυρίως της ανοσοσφαιρίνης Ε (IgE). Τα μόρια της IgE δρουν ως σημεία επαφής μεταξύ του αλλεργιογόνου και των εξειδικευμένων κυττάρων που εκλύουν ισταμίνη και άλλους παράγοντες κατά την έκθεση σε αλλεργιογόνα. Αυτό εκκινεί τα συμβάντα που αναγνωρίζουμε ως αλλεργικές αντιδράσεις. 1,2 Αξιολογούμενες υπό το φως άλλων κλινικών και εργαστηριακών ευρημάτων, οι δοκιμές ελέγχου in vitro για αλλεργίες που συνοδεύονται από δοκιμές IgE για αλλεργιογόνα μπορούν να βοηθήσουν το γιατρό να προσδιορίσει το αλλεργιογόνο (ή τα αλλεργιογόνα), στα οποία παρουσιάζει ευαισθησία το άτομο. 5,6,7,8 Αρχή της διαδικασίας Η εξέταση αλλεργιογόνων IMMULITE 2000 AlaTOP είναι μια χημειοφωταυγής ενζυμική, διαδοχική ανοσοεξέταση με βάση υγρά αλλεργιογόνα που λειτουργούν ως ligand, μονοκλωνικά αντισώματα και διαχωρισμό στερεάς φάσης με επικάλυψη anti-ligand. Οι αναλύσεις AlaTOP χρησιμοποιούν τυποποιημένη τεχνολογία (Αρ. διπλ. ευρεσιτεχνίας Η.Π.Α. 4 778 751), που αξιοποιεί κινητική υγρής φάσης με τη μορφή σφαιριδίων. 3,4 Συνιστά σημαντική πρόοδο έναντι των συμβατικών μεθόδων που στηρίζονται σε αλλεργιογόνα, τα οποία επισυνάπτονται σε στήριγμα ξηρής φάσης, όπως για παράδειγμα χάρτινους δίσκους. Η μέθοδος AlaTOP είναι μοναδική ως προς τη χρήση αλλεργιογόνων σε υγρή μορφή. Τα αλλεργιογόνα δεσμεύονται ισοσθενώς σε μια διαλυτή μήτρα πολυμερών/συμπολυμερών, η οποία στη συνέχεια σημαίνεται ως ligand. Το antiligant επιστρώνεται στο σφαιρίδιο πολυστυρενίου, ώστε να συλλάβει τα lingand-σημασμένα αλλεργιογόνα. Κύκλοι επώασης: 2 x 30 λεπτά. Συλλογή δειγμάτων Συνίσταται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν τα λιπιδαιμικά δείγματα. Τα αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων ορού πριν την πλήρη πήξη μπορεί να προκαλέσει θρόμβους. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν τη φυγοκέντρηση, το αίμα έχει πήξει πλήρως. Ορισμένα δείγματα, ιδιαίτερα εκείνα ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτικά, μπορεί να απαιτούν αυξημένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συλλογής αίματος διαφορετικών εταιριών μπορεί να δώσουν αποκλίνουσες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η εξέταση αλλεργιογόνων IMMULITE 2000 AlaTOP δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Απαιτούμενος όγκος: 50 µl ορού. IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 9

Φύλαξη: 3 μέρες στους 2 8 C 9,10 ή 6 μήνες στους 20 C. 10 Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Αντιδραστήρια: Φύλαξη στους 2 8 C. Η απόρριψη να γίνεται σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία. Ακολουθήστε τις γενικές προφυλάξεις και μεταχειριστείτε όλα τα συστατικά ως εάν ήταν ικανά να μεταδώσουν μολυσματικούς παράγοντες. Τα προέλευσης ανθρώπινου αίματος υλικά εξετάστηκαν για σύφιλη, για αντισώματα έναντι HIV 1 και 2, για επιφανειακό αντιγόνο ηπατίτιδας B και για αντισώματα ηπατίτιδας C και βρέθηκαν αρνητικά. Προστέθηκε αζίδιο του νατρίου ως συντηρητικό σε συγκεντρώσεις κάτω του 0,1 g/dl. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε με άφθονο νερό για την αποφυγή σχηματισμού πιθανών εκρηξιογόνων μεταλλικών αζιδίων στις αποχετεύσεις από μόλυβδο και χαλκό. Χημειοφωταυγές υπόστρωμα: Να αποφεύγεται η μόλυνση και η έκθεση σε άμεσο ηλιακό φως. (βλ. ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιείτε αποσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ένα ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό κουτί είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων AlaTOP (L2AT12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια, επικαλυμμένα με anti-ligand. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξης. L2KAT2: 1 συσκευασία. Δοχείο αντιδραστηρίου AlaTOP (L2ATA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml για εξέταση αλλεργιογόνων, με συντηρητικό. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένης με μονοκλωνικά αντισώματα ποντικού αντί-ige σε ρυθμιστικό διάλυμα, με συντηρητικό. Σταθερά στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KAT2: 1 δοχείο. Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα στο σημείο διάτρησης, χωρίς να καταστρέψετε το ραβδοκώδικα. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστής AlaTOP (LATL) 2 ml ανθρώπινου ορού χωρίς IgE. Σταθερός στους 2 8 C επί 30 ημέρες μετά το άνοιγμα. Να μην καταψύχεται L2KAT2: 1 φιαλίδιο. Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες των διαλυμάτων (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από σύστημα του αναλυτή. Αρνητικός έλεγχος αλλεργιογόνων AlaTOP (L2ATC1) 2 ml ανθρώπινου ορού χωρίς IgE. Σταθερά στους 2 8 C επί 4 μήνες μετά το άνοιγμα ή έως την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην ετικέτα. Να μην καταψύχεται. Να μην χρησιμοποιείται εάν παρατηρηθούν ενδείξεις μικροβιολογικής μόλυνσης, π.χ. θολή όψη. L2KAT2: 1 φιαλίδιο. Τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. Θετικός έλεγχος αλλεργιογόνων AlaTOP (L2ATC2) 2 ml ανθρώπινου ορού με IgE ειδικά για την εξέταση ελέγχου αλλεργιογόνων IMMULITE 2000 AlaTOP. Σταθερά στους 2 8 C επί 4 μήνες μετά το άνοιγμα ή έως την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα. Να μην καταψύχεται. Να μην χρησιμοποιείται εάν παρατηρηθούν ενδείξεις μικροβιολογικής μόλυνσης, π.χ. θολή όψη. L2KAT2: 1 φιαλίδιο. Τοποθετήστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. 10 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες αντίδρασης (μιας χρήσεως) Απαιτούνται επίσης: Αποσταγμένο ή απιονισμένο νερό, σωληνάρια. Διαδικασία της ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για: προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 4 εβδομάδες. Δείγματα ποιοτικού ελέγχου: Τα δείγματα ελέγχου που διατίθενται με το kit θα πρέπει να χρησιμοποιούνται για την παρακολούθηση των επιδόσεων της εξέτασης και της καταλληλότητας της θετικής/αρνητικής/ενδιάμεσης αποκοπής (cutoff). Υπολογισμός της αποκοπής (Cut Off) και της αναλογίας S/CO: Η κύρια αποκοπή (Cutoff) της εξέτασης υπολογίστηκε από αντιπροσωπευτικά δείγματα προκειμένου να επιτευχθεί η μέγιστη δυνατή ευαισθησία και η μέγιστη δυνατή ακρίβεια για την εξέταση. ΤΗ αποκοπή (cutoff) ορίστηκε ως ίση με τον μέσο όρο των χτύπων ανά δευτερόλεπτο (mean cps) του ρυθμιστή (από την πιο πρόσφατη ρύθμιση) πολλαπλασιασμένη με τη παράμετρο 1 της καμπύλης (Curve Parameter 1). (Βλ. τα πεδία "Low Adjustor CPS" το "Curve Parameter 1" στην οθόνη πληροφοριών του IMMULITE 2000 Kit, τα οποία μπορούν να προσπελαστούν από το Data Entry Kit Entry. Ο υπολογισμός της αναλογίας σήματος/αποκοπής (cutoff) (s/co) γίνεται με τον παρακάτω τύπο:: S/CO αναλ. Δείγμα ή Έλεγχος cps Μ.Ο. Ρυθμιστή cps P1 Ο υπολογισμός και η αναφορά των ποιοτικών αποτελεσμάτων (θετικά/αρνητικά/ενδιάμεσα) και της αναλογία s/co γίνονται αυτόματα από το IMMULITE 2000. Το αποτέλεσμα ενός δείγματος αναφέρεται ως Indeterminate (ενδιάμεσο) αν οι χτύποι ανά δευτερόλεπτο για το συγκεκριμένο δείγμα παρουσιάζουν απόκλιση ±10% από το cutoff. Το αποτέλεσμα αναφέρεται ως Reactive (θετικό), αν οι χτύποι ανά δευτερόλεπτο για το συγκεκριμένο δείγμα βρίσκονται πάνω από το «ενδιάμεσο» εύρος, και Nonreactive (αρνητικό), αν βρίσκονται κάτω από αυτό. Επιπλέον δείγματα ελέγχου μπορούν να δοκιμαστούν σε συμφωνία με οδηγίες ή απαιτήσεις τοπικών κρατικών ή ομοσπονδιακών ρυθμίσεων ή διαπιστευμένων οργανισμών. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Θετικό: Το θετικό αποτέλεσμα (reactive αναλογία 1,1) υποδηλώνει ότι στο δείγμα του ασθενούς ανιχνεύθηκαν ένα ή περισσσότερα αντισώματα στα επιμέρους αλλεργιογόνα της ομάδας. Αρνητικό: Το αρνητικό αποτέλεσμα (nonreactive αναλογία < 0,9) υποδηλώνει ότι στο δείγμα του ασθενούς δεν ανιχνεύθηκαν αντισώματα στα επιμέρους αλλεργιογόνα. Ενδιάμεσο: Οποιοδήποτε ενδιάμεσο αποτέλεσμα (indeterminate - αναλογία μεταξύ 0,9 και <1,1) θα πρέπει να επανεξεταστεί. Τα δείγματα που συνεχίζουν να είναι "ενδιάμεσα", θα πρέπει να εξεταστούν μια με εναλλακτική μέθοδο Περιορισμοί Η διαδικασία IMMULITE 2000 AlaTOP παρέχει μόνον ποιοτικά αποτελέσματα (θετικά/αρνητικά/ενδιάμεσα). Δεν παρέχει πληροφορίες για τις ποσότητες IgE που αντιστοιχούν σε επιμέρους αλλεργιογόνα. Όπως σε όλες τις αναλύσεις διαγνωστικού ελέγχου, η οριστική κλινική διάγνωση του γιατρού δεν θα πρέπει να στηρίζεται αποκλειστικά στα αποτελέσματα μιας μεμονωμένης εξέτασης, αλλά να λαμβάνει υπόψη όλα τα κλινικά και εργαστηριακά ευρήματα. IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 11

Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας αλληλεπιδράσεις με in vitro ανοσοαναλύσεις. [βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου μπορεί να εμφανιστούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Τα ακόλουθα τμήματα περιλαμβάνουν στοιχεία που είναι αντιπροσωπευτικά της απόδοσης του Kit εξέτασης αλλεργιογόνων IMMULITE 2000 AlaTOP. Τα αποτελέσματα εκφράζονται ως αναλογία σήματος/αποκοπή (Cut off). Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς αντιπηκτικά, τζελ ή προσθετικά που προκαλούν θρόμβους. Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision ) Ειδικότητα: Τα αντισώματα έχουν υψηλή ειδικότητα στην ανθρώπινη IgE, χωρίς διασταυρούμενη αντίδραση με άλλες ανθρώπινες ανοσοσφαιρίνες (IgA, IgD, IgG, IgM). Χολερυθρίνη: Η παρουσία χολερυθρίνης (συνδεδεμένης και έμμεσης) σε συγκέντρωσεις έως 200 mg/l δεν έχει επιδράσεις στα αποτελέσματα της εξέτασης. Αιμόλυση: Η παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις έως 500 mg/dl δεν έχει επιδράσεις στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας αυτής της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Η παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις έως 3 000 mg/dl δεν έχει επιδράσεις στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας αυτής της ανάλυσης. Σύγκριση της μεθόδου: Η ανάλυση συγκρίθηκε με την IMMULITE AlaTOP (LKAT) σε 110 δείγματα ασθενών. Εξέταση ελέχου αλλεργιογόνων IML 2000 AlaTOP IMMULITE Θετικά Ενδ. Αρνητικά Θετικά 64 0 0 Ενδιάμεσα 0 0 0 Αρνητικά 3 2 41 Συμφωνία: 95,5% Σχετική Ευαισθησία: 100% Σχετική Ειδικότητα: 89,1% Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 AlaTOP Skrining Alergologiczny Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do jakościowego oznaczania przeciwciał IgE specyficznych dla alergenów wziewnych w surowicy pomocny w różnicowej diagnostyce alergii atopowej. Numer katalogowy: L2KAT2 (200 oznaczeń) Kod testu: TOP Kolor: Ciemno szary Wprowadzenie U chorych z zewnątrzpochodną astmą, gorączką sienną lub atopowym wypryskiem uczuleniowym objawy mogą 12 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

wystąpić natychmiast po ekspozycji na krytyczne alergeny. W odpowiedzi alergicznej tego typu (atopowej lub anafilaktycznej) uczestniczą reaginy surowicy, głównie immunoglobuliny klasy E (IgE). Cząsteczki IgE stanowią miejsce kontaktu alergenu i wyspecjalizowanych komórek, które w jego wyniku wydzielają histaminę i mediatory. Reakcja taka stanowi początek sekwencji zmian określanych jako reakcja alergiczna. 1,2 Testy przesiewowe in vitro interpretowane w oparciu o wyniki innych badań laboratoryjnych i ocenę kliniczną są pomocne w odpowiednim kierunkowaniu badań poziomu IgE specyficznych w stosunku do poszczególnych alergenów, co w konsekwencji prowadzi do identyfikacji alergenów powodujących uczulenie. 5,6,7,8 Zasada testu Test IMMULITE 2000 AlaTOP Skrining alergologiczny jest chemiluminescencyjnym, enzymatycznym immunotestem, wykorzystującym sprzężone z ligandem ciekłe alergeny, przeciwciała monoklonalne oraz separację opartą na zastosowaniu opłaszczonej anty-ligandem fazy stałej. W testach AlaTOP wykorzystano opatentowaną technologię (U.S. Patent No. 4 778 751) stosująca kulki jako fazę stałą przy zapewnieniu kinetyki wiązania charakterystycznej dla fazy ciekłej. 3,4 Rozwiązanie to posiada istotną przewagę nad klasycznymi rozwiązaniami, w których alergeny związane są z unieruchomione są na fazie stałej w postaci papierowego krążka. Unikalnym rozwiązaniem jest zastosowanie alergenów w fazie ciekłej. Alergeny są kowalentnie związane z matrycą rozpuszczalnego kompleksu: polimer/kopolimer, która nadto sprzężona jest z ligandem; anty-ligand związany z polistyrenową kulką ma na celu wyłapywanie alergenu sprzężonego z ligandem. Czas inkubacji: 2 30 minut. Preparatyka próbek Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. Z zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 AlaTOP nie został określony. Wymagana objętość próbki: 50 µl surowicy. Przechowywanie: 3 dni w temp. 2 8 C, 9,10 lub 6 miesięcy w 20 C. 10 Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty- HCV. Azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl jest dodawany jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 13

Elementy Zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. AlaTOP Pojemnik z Kulkami (L2AT12) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych anty-ligandem. Stabilne w 2 8 C do daty ważności L2KAT2: 1 opakowanie. AlaTOP Klin Odczynnikowy (L2ATA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml badanych alergenów, z konserwantem. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z mysim przeciwciałem anty-ige w buforze, z konserwantem. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KAT2: 1 klin. Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. AlaTOP Kalibrator (LATL) 2 ml pozbawionej IgE surowicy ludzkiej. Po otwarciu stabilny 30 dni w 2 8 o C. Nie zamrażać. L2KAT2: 1 fiolka. Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. AlaTOP Skrining alergologiczny Kontrola ujemna (L2ATC1) Jedna fiolka zawierająca 2 ml surowicy ludzkiej bez IgE. Po otwarciu stabilny 4 miesięcy w 2 8 C, i do daty ważności. Nie zamrażać. Nie używać w przypadku objawów mikrobiologicznej kontaminacji w postaci zmętnienia lub kłaczków. L2KAT2: 1 fiolka. Na probówce umieścić odpowiednią nalepkę (dostarczaną z zestawem) by umożliwić odczytanie przez czytnik kodów w analizatorze. AlaTOP Skrining alergologiczny Kontrola dodatnia (L2ATC2) Jedna fiolka zawierająca 2 ml surowicy ludzkiej z IgE swoistą dla testu IMMULITE 2000 AlaTOP Skrining. Po otwarciu stabilna 4 miesiące w 2 8 C, i do daty ważności. Nie zamrażać. Nie używać w przypadku objawów mikrobiologicznej kontaminacji w postaci zmętnienia lub kłaczków. L2KAT2: 1 fiolka. Na probówce umieścić odpowiednią nalepkę (dostarczaną z zestawem) by umożliwić odczytanie przez czytnik kodów w analizatorze. Materiały dostarczane oddzielnie L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Zestaw czyszczący LRXT: Próbówki reakcyjne (jednorazowe) Ponadto niezbędne: woda destylowana lub dejonizowana, próbówki. Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 4 tygodnie. Próbki kontrolne: Kontrole dostarczone w zestawie powinny być stosowane do oceny poprawności wykonania testu i kontroli aktualności zapisanej wartości granicznej Reaktywna/Nieaktywna/ Wątpliwy. Obliczenia wartości granicznej i stosunku S/CO: Wzorcowa wartość graniczna dla testu została opracowana na podstawie zbioru próbek o liczebności pozwalającej na uzyskanie optymalnej czułości i specyficzności testu. Wartość graniczna testu została ustalona jako iloczyn średniej ilości zliczeń na sekundę (cps) dla kalibratora (w ostatniej kalibracji) i Parametru P1. Obie wartości można znaleźć w polu IMMULITE 2000 Okno informacyjne o zestawach dostępnym via Zestawy: jako CPS niskiego kalibratora i Parametr 1. 14 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)

Obliczanie stosunku S/CO [tj. stosunku natężenia sygnału do wartości granicznej testu (CO)] dokonywane jest wg wzoru: Stosunek S/CO = cps próbki lub kontroli średnia cps kalibratora x P1 Powyższe obliczenia wykonywane są automatycznie przez analizator IMMULITE 2000, a ostateczna forma wyniku ma charakter jakościowy (reaktywny,/niereaktywny/nieokreślony). Wynik oznaczenia zostaje uznany za Nieokreślony, gdy liczba cps plasuje się w zakresie wartości granicznej ±10%. Wynik oznaczenia zostaje uznany za Reaktywny, jeżeli ilość zliczeń (cps) dla próbki jest większa niż wartość graniczna, a za Niereaktywny, gdy mniejsza. Zgodnie z zaleceniami, wymaganiami lub przpisami laboratorium lub instytucji akredytujących możliwe jest stosowanie dodatkowych preparatów kontrolnych. Interpretacja wyników Reaktywny : Wynik taki (stosunek 1,1) wskazuje na obecność przeciwciał dla jednego lub kilku alergenowych składników panelu w badanej próbce. Nieraktywny: Wynik taki (stosunek < 0,9) świadczy o braku oznaczalnych przeciwciał dla składników alergenowych panelu. Nieokreślony: Każdy wynik nieokreślony (stosunek pomiędzy 0,9 i <1,1) powoduje konieczność ponownego oznaczenia próbki. Powtórny wynik wątpliwy kwalifikuje próbkę do oznaczenia alternatywną metodą. Ograniczenia Wyniki uzyskiwane w teście IMMULITE 2000 AlaTOP mają charakter wyłącznie jakościowy (reaktywny/niereaktywny/ nieokreślony). Nie zawierają informacji o poziomie przeciwciał specyficznych w stosunku do poszczególnych alergenów wchodzących w skład panelu. AlaTOP analogicznie do innych testów przesiewowych nie może być traktowany jako wyłączna podstawa diagnozy. Ostateczna diagnoza kliniczna wymaga lekarskiej analizy wyników wszystkich wykonanych badań laboratoryjnych i obserwacji klinicznych. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin. Chem. 1988: 34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test IMMULITE 2000 AlaTOP Skrining alergologiczny przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki wyrażono jako stosunek S/CO. O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą surowicy, a próbki pobierano do probówek bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie. Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (Patrz: Tabela Precyzji). Specyficzność: Przeciwciała zastosowane w teście wykazywały wysoką specyficzność w stosunku do immunoglobulin klasy IgE. Nie stwierdzono reaktywności krzyżowej z przeciwciałami innych klas (IgA IgD IgG IgM). Bilirubina: Obecność bilirubiny związanej i niezwiązanej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w stężeniu do 500 mg/dl nie wpływa na IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07) 15

wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3 000 mg/dl nie ma wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Porównanie metod: Zestaw porównywano z zestawem IMMULITE AlaTOP (LKAT) w grupie 110 próbek. IML 2000 AlaTOP Skrining Alergologiczny Niereaktywne IMMULITE Reaktywne Nieok Reaktywne 64 0 0 Nieokreślone 0 0 0 Niereaktywne 3 2 41 Zgodność: 95,5% Względna czułość: 100%; Względna specyficzność: 89,1% Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE and AlaTOP are trademarks of Siemens Healthcare Diagnostics. 2008 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom 2008-10-07 PIEL2KAT 1 {17} Changes in this Edition: cc#16311: Created a new package insert (PIEL2KAT 1 {17}) for use in Eastern Europe (Czech, Greek, Polish). cc#17988: Updated IMMULITE 2000 to IMMULITE 2000 Systems on front cover, and in Intended Use and Procedure sections. cc#17730: Updated Company name to Siemens Healthcare Diagnostics. Changed Manufacturer's address to Llanberis, UK. Added country of origin, website address, trademark and copyright statements, symbol glossary section. Standardized Technical Assistance section, changed the phone number. Removed EC Rep (responsibility transferred to Llanberis, UK). Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE 16 IMMULITE 2000 AlaTOP Allergy Screen (PIEL2KAT-1 {17}, 2008-10-07)