Malamidou A., Pantazaki A.A. *, Koliakos G., Tsolaki M.

Transcript

1 10th Panhellenic Conference of Alzheimer's Disease and Related Disorders (PICAD) and 2nd Mediterranean Conference of Neurodegenerative Diseases (MeCOND) Malamidou A., Pantazaki A.A. *, Koliakos G., Tsolaki M. Μαλαμιδου Αγγελική Υποψήφια Διδακτωρ Tμήμα Χημείας, Εργαστήριο Βιοχημείας, ΑΠΘ

2 Anagh A. Sahasrabuddhe, 2016 Γονίδιο: αποτελείται απο 10 εξώνια και 9 ιντρόνια εδράζεται στον μικρό βραχίονα του χρωμοσώματος 10 (10p11.23) κωδικοποιεί μια 37kDa πρωτεΐνη η οποία αποτελείται απο 326 αμινοξέα. Δομή Πρωτεΐνης: Αμινοτελική RING finger επικράτεια Κεντρική HTH επικράτεια Καρβοξυτελική PEST επικράτεια Σήματα πυρινικού εντοπισμού

3 έχει εμπλακεί σε έναν αριθμό βιολογικών μονοπατιών συμπεριλαμβανομένων: της ανάπτυξης του κυτταρικού κύκλου της απόκρισης σε βλάβες του DNA (DDR), της γήρανσης των βλαστοκυττάρων και του καρκίνου Resham Bhattacharya et al, 2015

4 BMI1 εκφράζεται σε όλους σχεδόν τους τύπους ιστών. Ωστόσο, τα επίπεδα έκφρασής της είναι υψηλά στον εγκέφαλο, τους πνεύμονες, τον θύμο αδένα, στους νεφρούς, στον πλακούντα, στο αίμα, στο μυελό των οστών, και τα βλαστικά κύτταρα των διαφόρων σειρών. Υπερεκφράζεται σε διάφορους υποτύπους καρκίνου και χρησιμεύει ως βιοδείκτης για αυτούς τους τύπους καρκίνου. BMI1 διαδραματίζει έναν κρίσιμο ρόλο στην κυτταρική φυσιολογία και ως εκ τούτου τα επίπεδα μεταγραφής και μετάφρασής της ρυθμίζονται αυστηρά στους διάφορους τύπους κυττάρων.

5 Γιατί επιλέγουμε την Bmi1 Συγκατακρήμνιση της BMI1 με DING πρωτεΐνες (που φέρουν την χαρακτηριστική αλληλουχία αμινοξέων DING) σε ορό ασθενων με Alzheimer Εμπλοκή σε ποικίλα βιοχημικά μονοπάτια

6 Anagh A. Sahasrabuddhe, 2016 Εμπλοκή στο οξειδωτικό στρες

7 Τα νευρικά κυτταρα εμφανίζουν υψηλότερη (περίπου 10 φορές) κατανάλωση οξυγόνου σε σύγκριση με άλλους ιστούς. Υψηλή ζήτηση σε ενέργεια μη διαιρούμενα --> έχουν μεγάλη διάρκεια ζωής διάρκεια

8 Wassim Chatoo1 et al, 2009 Σε νευρώνες Bmi1 -/-, η p53 και οι συγκαταστολεις συσσωρεύονται στους υποδοχείς των αντιοξειδωτικών γονιδίων, οδηγώντας σε καταστόλή της χρωματίνης και καταστολή της εκφράσης των αντιοξειδωτικών γονιδίων. Ρυθμίση μέσω της Bmi1 της συγκέντρωσης των ελεύθερων ριζών

9 Mohamed Abdouh et al, 2012 Αυτές οι παρατηρήσεις αποκαλύπτουν ότι 1) οι νευρώνες στους οποίους το γονίδιο της Bmi1 έχει αφαιρεθεί, ομοιάζουν με του αγριου τύπου γηρασμένους νευρώνες 2) η υπερέκφραση της αποτελεί ισως πιθανή θεραπευτική προσέγγιση για τις νευροεκφυλιστηκές νόσους.

10 Εντοπίζεται σε βιολογικά υγρα; Υπάρχουν διαφορές μεταξύ υγιών και ασθενών;

11 Εντοπισμός Bmi1 Eντοπίζουμε με ανοσοαποτύπωση κηλίδας την πρωτεΐνη Bmi1 στον ορό αίματος υγιών και ασθενών ατόμων με τη νόσο Alzheimer Με ImageJ ποσοτικοποιήσουμε την ένταση των κηλίδων 1.5/1000 Μ.Ο AD ,1 Bmi1 Dot Blot L ,08 L , CTRL , , AD CTRL

12 Ποσοτικοποίηση των επιπέδων της Bmi1 Δείγματα ορών υγιών ατόμων (16) και ατόμων με Alzheimer (16) ελέγχθηκαν με τη μέθοδο Elisa για την προσδιορισμό των επιπέδων της πρωτεΐνης Bmi1 Bmi1 serum Δείγματα εγκεφαλονωτιαίου υγρού υγιών ατόμων (7), δείγματα ατόμων με ήπια διανοητική διαταραχή, MCI (13) και δείγματα ατόμων με Alzheimer, AD (20) ελέγχθηκαν με Elisa

13 Συμπεράσματα 1. Η Bmi1 εντοπίζεται σε βιολογικά υγρα ασθενών και υγιών ατόμων 2. Εντοπίστηκαν υψηλότερα επίπεδα Bmi1 στον ορό των ασθενών με AD από ότι υγιείς δότες. 3. Εντοπίστηκαν υψηλότερα επίπεδα Bmi1 στον ΕΝΥ των ασθενών με AD από ότι υγιείς δότες. 4. Τα επίπεδα της πρωτεΐνης είναι υψηλότερα σε ΕΝΥ ασθενών με MCI έναντι της ομάδας ελέγχου. Τα επίπεδα της Bmi1 άλλαζουν ανάλογα με το στάδιο της νόσου Αυτά τα αποτελέσματα είναι μη αναμενόμενα, επειδή Bmi1 θεωρείται ότι είναι μία νευροπροστατευτική πρωτεΐνη. Υποθέτουμε ότι, αυτά τα αυξημένα επίπεδα Bmi1 σε βιολογικά υγρά, είναι το αποτέλεσμα της απόπτωσης των νευρώνων σε MCI και ασθενών με AD.

14 Ευχαριστώ για την προσοχή σας