.Α.Κ Από την Προβιοτική Χηµεία στη Βιοχηµεία των Ζωντανών Οργανισµών ηµήτριοςα. Κυριακίδης ΚαθηγητήςΒιοχηµείας, Α.Π.Θ. -Πρόεδρος/ ιευθυντήςειε

Transcript

1 .Α.Κ Από την Προβιοτική Χηµεία στη Βιοχηµεία των Ζωντανών Οργανισµών ηµήτριοςα. Κυριακίδης ΚαθηγητήςΒιοχηµείας, Α.Π.Θ. -Πρόεδρος/ ιευθυντήςειε

2 .Α.Κ Η προέλευση της ζωής

3

4 Ιδεαλιστές: Υλιστές: Μηχ/κός υλισµός: ιαλεκτικός υλισµός: Manfred Eigen: ΖΩΗ (ΟΡΙΣΜΟΣ) Ψυχή (αθάνατο πνεύµα, τυχαία γένεση) Ψυχή Πλάτων : Αριστοτέλης:Ενδελέχεια Ενδελέχεια (αλληλεπίδραση της ύλης, σώµα έµψυχον) ύναµη της ζωής Επικρατέστερηιδέα Βιταλιστές : ύναµη Νεοβιταλιστές: Επικρατέστερη Ηζωή αποτελείται από ύλη Απλές φυσικές και χηµικές αντιδράσεις Μορφή κίνησης της ύλης διαφοροποιηµένη απότα υλικά του ανόργανου κόσµου Ζωή είναι µια δυναµική κατάσταση της ύλης που είναι οργανωµένη από πληροφορία και εξελίσσεται µε βάση το µηχανισµό της φυσικής επιλογής

5 Τόπος και χρόνος εµφάνισης της ζωής

6 Ηεξέλιξη απότο BIG BANGστον άνθρωπο

7 Εν αρχή εποίησεν οθεός τον ουρανόν και την γήν, ηδεγηήν αόρατος και ακατασκεύαστος, και σκότος επάνω της αβύσσου, και πνεύµα Θεού επεφέρετο επάνω του ύδατος. (Παλαιά ιαθήκη Κεφ.. 1, στ 1,2)

8 H ιδέα της Μεγάλης Έκρηξης προτάθηκε από τον Georges LeMaitre το 1927

9

10 Σχηµατισµός γήινων πλανητών από πλανητίσκους. Οργανοµεταλλικές αντιδράσεις θεωρείται ότι συνέβαιναν στους πλανητίσκους (υδρόθερµες και θερµικές)

11 Το ηλιακό σύστηµά µας σχηµατίσθηκε από ένα γιγαντιαίο σύννεφο αερίου και σκόνης όπως αυτό του νεφελώµατος rion

12 Τοηλιακό ηλιακόµαςσύστηµα

13 Πού δηµιουργήθηκε η ζωή που υπάρχει στη Γη; ΣεκάποιοµέροςεκτόςτηςΓης και µεταφέρθηκε στον πλανήτη µας (πανσπερµία) ΣτηΓη Στην επιφάνεια της Γης στην ατµόσφαιρα, στους ωκεανούς ή σε κάποιο µικροπεριβάλλον (θεωρία προβιοτικής σούπας ) Στις υδρόθερµες διεξόδους του ωκεάνιου πυθµένα (µαύρες και άσπρες καµινάδες) αυτοτροφική υπόθεση

14 Big Bang Θερµοκρασία χρόνου µηδέν Κ (πλάσµα πυκνόαέριο) µετά από 30 sec Κ µετά από 1 χρόνο Κ µετάαπό 1 εκατ. χρόνια Κ 3 Κ σηµερινή θερµοκρασία της backgroundακτινοβολίας

15 Από αστραπές Κοσµική ακτινοβολία Θερµότητα από ηφαίστεια UV ακτινοβολία Ραδιενέργεια Κρουστικά κύµατα Πηγές ενέργειας για τη σύνθεση σύνθετων µορίων στην ατµόσφαιρα της Γης κατά την χρονική περίοδο της εµφάνισης της ζωής

16 ιατήρησε το ηλιακό σύστηµα τη «χηµική µνήµη» των µορίων του νέφους από το οποίο δηµιουργήθηκε; Η απάντηση στο ερώτηµα αυτό έχει πολλές επιπτώσεις στην ερµηνεία των παραµέτρων υναµικές: Αν διατηρήθηκαν τα µόρια του αρχικού νεφελώµατος, σηµαίνει ότι η διαδικασία σχηµατισµού του ηλιακού συστήµατος από το ηλιακό νεφέλωµα, ήταν τουλάχιστον ήπια. Χηµικές: Η σύσταση των σωµάτων του εξωτερικού τµήµατος του ηλιακού συστήµατος αποτελείται από κάποια µόρια του µεσοαστρικού διαστήµατος που υπήρχαν στο αρχικό ηλιακό νεφέλωµα. Βιολογικές: Αν διατηρήθηκαν προβιοτικά οργανικά µόρια που αργότερα ήρθαν στη Γη µε κοµήτες και αστεροειδείς έχει βιολογικές επιπτώσεις για το σχηµατισµό της ζωής. To ανθρακούχο υλικό αφθονεί στο εξωτερικό ηλιακό σύστηµα π.χ. στην επιφάνεια και την ατµόσφαιρα του Τιτάνα, στην επιφάνεια του µεγαλύτερου δορυφόρου του Ποσειδώνα του Τρίτωνα, στην επιφάνεια την εξωτερικής ζώνης των αστεροειδών και στα σώµατα της ζώνης Kuiper, πιθανόν σε περιοχές άλλων δορυφόρων όπως του Ιαπετού, και βεβαίως στους κοµήτες.

17 Τα πρώτα µόρια - Προβιοτική Χηµεία

18 ιαδιακασία 13,8 δισεκατοµµυρίων χρόνων Προέλευση του σύµπαντος Σχηµατισµός του δικού µας ΚΟΣΜΟΥ Κοσµική (άτοµα) Χηµική (µόρια) Βιολογική (κύτταρο) Πολιτιστική (άνθρωπος)

19 Ηεξέλιξη απότο BIG BANGστον άνθρωπο

20 ύο προσεγγίσεις στο θέµα της προέλευσης της ζωής

21 a, Κυλινδρικό προκαρυωτικό ινίδιο 770 εκ. χρόνων απότη Ν. Αυστραλία. b. Gunflintia grandis ~2.100 εκ. χρόνων απότο ntario του Καναδά. c, d, Προκαρυωτικά εκ. χρόνων απότη την. Αφρική e-i, Κυτταρικά µικροβιακά ινίδια ~3.465 εκ. χρόνων απότη. Αυστραλία

22 Φωσφορική οµάδα Αζωτούχος Βάση P Σάκχαρο B

23 C H 2 H 2 C + H 2 Γλυκόζη = C 6 H 12 6 = (CH 2 ) 6 (CH 2 =φορµαλδεΰδη)

24 H 2 N CH CH + H 2 N CH CH R 1 R 2 H 2 N CH C N CH CH R 1 H R 2

25 NH 2 NH 2 RCH αλδεϋδη NH 3 HCN - H 2 C R CN H αµινονιτρίλιο + 2H 2 NH 3 R C CH H αµινοξύ

26 Η δηµιουργία της ζωής

27 Τα δύο πρώτα στάδια της χηµικής εξέλιξης της ζωής, περιλαµβάνουν: την αβιοτική σύνθεση και συσσώρευση των µικρών οργανικών µορίων, ή των δοµικών λίθων της ζωής, όπως αµινοξέων, νουκλεοτιδίων, σακχάρων και λιπαρών οξέων τη σύνδεση αυτών των µονοµερών σε πολυµερή, δηλαδή σε πρωτεΐνες, νουκλεϊνικά οξέα, υδατάνθρακες και λιπίδια

28

29 Πως µπορούµε να δείξουµε ότι: Η πρωταρχική ατµόσφαιρα αµινοξέα νουκλεοτίδια πρωτεΐνες DNA, RNA πρωτοκύτταρο

30 Προβιοτικά µονοµερή της «πρωταρχικής σούπας» πολυµεταφωσφορικό πολυφωσφορικός αιθυλεστέρας Α. I. parin ( ) J.B.S Haldane ( )

31 Harold Urey ( ) 1934 βραβείο Nobel Χηµείας Stanley L. Miller ( ).Α.Κ. 2009

32 Μερικές από τις ενώσεις που σχηµατίστηκαν σε πειράµατα τύπου Miller-Urey και πιστεύεται ότι υπήρχαν στην προβιοτική Γη HCH HCH HCN CH 3 CH NH 2 CH 2 CH CH 3 CH(H)CH NH 2 CH(CH 3 )CH CH 3 NHCH 2 CH H 2 NCNH 2 HCCH 2 CH(NH 2 )CH φορµαλδεύδη (µεθανάλη) µυρµηγκικό οξύ (µεθανικό οξύ) υδροκυάνιο οξικό οξύ (αιθανικό οξύ) γλυκίνη γαλακτικό οξύ αλανίνη σαρκοσίνη ουρία ασπαραγινικό οξύ

33 αλανίνη αργινίνη ασπαραγίνη ασπαραγινικό οξύ βαλίνη γλουταµινικό οξύ γλυκίνη θρεονίνη ισολευκίνη ιστιδίνη κυστεΐνη λευκίνη λυσίνη µεθειονίνη προλίνη σερίνη τρυπτοφάνη τυροσίνη φαινυλαλανίνη α,β-διαµινοπροπιονικό οξύ α,γ-διαµινοβουτυρικό οξύ α-αµινο n-βουτυρικό οξύ α-αµινο n-επτανοϊκό οξύ α-αµινο ισοβουτυρικό οξύ αλλοθρεονίνη αλλοϊσολευκίνη β-αλανίνη β-αµινο ισοβουτυρικό οξύ γ-αµινο n-βουτυρικό οξύ ισοσερίνη νορβαλίνη νορλευκίνη οµοκυστεΐνη οµοσερίνη ορνιθίνη πιπεκολικό οξύ τριτοταγής λευκίνη

34 Προβιοτικός σχηµατισµός οργανικών ενώσεων

35 Prebiotic Formation of rganic Compounds Basic Biological Molecules CH 2 Ca(H) 2 sugars, ribose electric CH 4 + NH 3 + H 2 amino acids discharges HCN ammonia adenine solution HC C C N cyanides or cytosine urea

36 Λιπίδιο DNA Πρωτείνη Τα βασικά είδη των βιολογικών µορίων Ριβόζυµο Υδατάνθρακας

37 Frederick Sanger Βραβείο Nobel 1958 Βραβείο Nobel 1980 James Watson Francis Crick Βραβείο Nobel 1959 Stanley L. Miller ( )

38 Προβιοτικός σχηµατισµός αδενίνης

39 4 HCN HCN + NH 3 NC NH 2 NC NH 2 + NH NH 2 NC NH 2 Προτεινόµενος προβιοτικός µηχανισµός σύνθεσης αδενίνης & υποξανθίνης NC NH 2 NH 2 N NH 3 N NC H 2 N NC NH 2 N HN N H -H NH 2 NC H N HN N H HN N H HCN HCN H 2 N NH N H 2 N N NH NH 2 H 2 N H N CN CN H 2 N N H CN NH 2 NH 2 CN N N N N H N N N H N H 2 N N H N H 2 N N H N Αδενίνη ιαµινοπουρίνη Γουανίνη

40

41 P - B P CH 2 ΟΗ - B Η Η θρεόζη Η Η Η ριβόζη Η P - B ΤΝΑ Threofoura nosyl-na

42 3,5 φωσφορικά 2,5 πυροφωσφορικά αδενίνη, γουανίνη 2,2 πολυφωσφορικά διαµινοπουρίνη 3,3 αλκυλφωσφορικά υποξανθίνη 5,5 ξανθίνη ισογουανίνη Ν6-υποκατεστηµένες πουρίνες 8 N N H 2 6 N C8-υποκατεστηµένες πουρίνες P 5 N N - 3 N H 2 H 5 N P - N β D ριβο φουρανόζη α L ξυλο πυρανόζη αραβινο H κυτοσίνη, ουρακίλη διαµινοπυριµιδίνη τετρόζες εξόζες διακλαδισµένα σάκχαρα διυδροουρακίλη οροτικό οξύ C5-υποκατεστηµένες πυριµιδίνες Πλήθος προβιοτικών ενώσεων µε δοµή παρόµοια του RNA

43 DNA πυρανόσυλ ανάλογο του RNA (p-rna) πεπτιδονουκλεϊνικό οξύ (ΡΝΑ) B NH B P - B H - P B N NH B P - P - B H - P H - P B B N NH N B

44 Προβιοτικός κόσµος Προ-RNA κόσµος γενετικό υλικό: ΤΝΑ PNA p-rna άλλο RNA κόσµος Προ-RNA κόσµος µε διαφορετικό γενετικό υλικό

45 Η θέση των θειοστέρων ως κεντρικά µόρια στον σηµερινό κόσµο και στον «θειοεστερικό κόσµο»

46 Κύριες εξελίξεις του RNA κόσµου Πρωτόγονο γονιδίωµα (RNA) Πρωτεϊνοσύνθεση Γενετικός κώδικας Πρώτα ένζυµα

47 DNA εκµαγείο ενίσχυση µε PCR in vitro µεταγραφή cdna SELEX πληθυσµός µορίων RNA αντίστροφη τρανσκριπτάση επιλεγµένος πληθυσµός µορίων RNA Επιλογή Σχηµατική αναπαράσταση της in vitro εξέλιξης- επιλογής (SELEX) (In vitro selection-evolution, SELEX)

48 µεγένθυση x690 Sidney W. Fox ( ) µεγένθυση x7800 πρωτεϊνοειδείς µικρόσφαιρες.α.κ. 2009

49

50

51 ΠΡΩΤΟΚΥΤΤΑΡΟ

52 Θεωρία της προβιοτικής σούπας

53 Λιπίδια (αµφίφιλα µόρια) µε µήκος ανθρακικής αλυσίδας 2-4 ατόµων άνθρακα παραµένουν ως διαλυτά µονοµερή σε υδατικό διάλυµα µε µήκος αλυσίδας 6-8 ατόµων άνθρακα υπάρχει ισορροπία µεταξύ µικυλλίων και µονοµερών µε µήκος 10 ατόµων άνθρακα σχηµατίζουν µικύλλια και µη σταθερές µεµβράνες µε µήκος ατόµων άνθρακα σχηµατίζουν σταθερές διπλοσποιβάδες οι οποίες δηµιουργούν κοινούς βραχύβιους µε µήκος ατόµων άνθρακα σχηµατίζουν σταθερές διπλοστοιβάδες που σπάνια έχουν παροδικούς πόρουςι (βιολογικές µεµβράλες λιπιδίων) Αυτοσυγκρότηση των αµφιφιλικών µορίων Οταν το µήκος της ανθρακικής αλυσίδες περιέχουν 2-4 άτοµα, τα µόρια είναι διαλυτά στο νερό. Όταν το µήκος της ανθρακικής αλυσίδας αυξάνει σε 6-8 άτοµα άνθρακα η διαλυτότητα µειώνεται και πάνω από ορισµένες συγκεντρώσεις τα µόρια αρχίζουν να σχηµατίζουν µικκύλια. Λιπίδια µε µήκη ανθρακικής αλυσίδας γύρω στα 10 άτοµα άνθρακα αρχίζουν να σχηµατίζουν και µικκύλια και δοµές διπλοστοιβάδων, καιοι τελευταίες κυριαρχούν στις δοµές που παράγονται από λιπίδια µε άτοµα άνθρακα.

54 ραστικότητα RNA πολυµεράσης µέσα σε κυστίδιο 1. Φωσφορυλάση πολυνουκλεοτιδίου συνθέτει RNA χρησιµοποιώντας ADP ως υπόστρωµα. Το ADP µπορεί να φθάσει στο ένζυµο µε παθητική διάχυση µέσω βραχύβιων ατελειών της λιπιδικής διπλοστοιβάδας. 2. Η T7 RNA πολυµεράση χρησιµοποιεί ένα εκµαγείο DNA για να κατευθύνει τη σύνθεση του RNA και έχει αποδειχτεί ότι συνθέτει RNA µέσα σε λιποσώµατα, όπως φαίνεται στην εικόνα. ADP PNAάση ADP RNA DNA Pol NTP RNA ATP, UTP GTP, CTP (NTP) 1. φωσφο ρυλά ση πολυνουκλεοτιδίου (PNPάση) µέσα σε κυστίδιο 2. T7 RNA πολυµεράση (Pol) µέσα σε κυστίδιο

55 Αύξηση κυστιδίων και διαίρεση αυτών Η µεµβράνη των κυστιδίων µπορεί να µεγαλώσει είτε βαθµιαία είτε µε διακριτά βήµατα, και µπορεί να διαιρεθεί είτε αυθόρµητα είτε κάτω από την επίδραση εξωτερικών περιβαλλοντικών δυνάµεων

56 Α. Πωγωνοφόρα (Riftia pachyptila) Α. Πωγωνοφόρα (Riftia pachyptila) Β. Πωγωνοφόρα και δίθυρα Β. Πωγωνοφόρα και δίθυρα

57 Αντιδράσεις στον κόσµο σιδήρου-θείου

58 Μοντέλο προέλευσης της ζωής σε µια βαθµίδωση οξειδοαναγωγής, ph και θερµοκρασίας σε ένα υδρόθερµο υποθαλάσσιο σύστηµα. Χρησιµοποιούνται οι όροι RNA, RNP και DNA εποχή (αντί για κόσµος) για να υπογραµµιστεί ότι δεν µπορούσε να υπάρξει εξέλιξη των νουκλεϊνικών οξέων χωρίς τη στήριξη της γεωχηµείας, αργότερα της βιογεωχηµείας και τελικά της βιοχηµείας µε την παροχή µιας σταθερής ροής επαρκών συγκεντρώσεων πρόδροµων πολυµερών (π.χ. νουκλεοτιδίων) και έτσι να υποστηρίζεται οποιαδήποτε είδους αντιγραφής ο κοινός πρόγονος (δεν ζούσε ελεύθερα) ψυχρότεροι, πιο οξειδωτικοί, πιο όξινοι ωκεανοί της Αρχαϊκής περιόδου ο < 30 C, ph ~ 5 διαβάθµιση θε ρµοκρασίας οξειδοαναγωγής και ph DNA εποχή RNP εποχή RNA εποχή προβιοτική χηµεία γεωχηµεία θερµό, αναγωγικό, αλ καλικό υδρόθερµο διάλυµα ο ~100 C, ph ~10

59 Παγκόσµιος χάρτης που παρουσιάζει µερικές υδρόθερµες περιοχές βαθιά στη θάλασσα,, (κύκλοι( κύκλοι), υδροθερµικές περιοχές στη στεριά (ρόµβοι) και αρχαία ηφαιστειακά ογκώδη κοιτάσµατα σουλφιδίων (τετράγωνα)

60 ηµιουργίαζωής ζωήςσευποθαλάσσιεςρωγµές Corlins and Ballard (1977) οξείδωση Ειρηνικός Ωκεανός Νησιά Galapagos

61 Υδρόθερµεςυπόγειες υπόγειεςκαµινάδες

62 Η εξέλιξη της ζωής

63

64

65 Φυλογενετικό δένδρο κατά Woese (1990)

66

67 µεµβράνη κυτταρόπλασµα κυτ. τοίχωµα DNA φωτοσυνθετικές µεµβράνες

68

69 Αρχαία Methanococcus jannischiiwas Methanopyrus kandleri Methanobacterium thermoautotrophicum Methanosarcina barkeri

70

71 Απότη Θεωρία της ηµιουργίας στην Εξέλιξη Jean-Baptiste Lamarck ( ) Λαµαρκισµός: Εξηγεί τη βιολογική εξέλιξη ως Εξέλιξη: Οι οργανισµοί δεν ήταν αµετάβλητα προϊόντα µιας καταπληκτικής δράσης της δηµιουργίας, αλλά αναπτύχθηκαν σε διαφορετικές κατευθύνσεις ως προϊόντα πολλών µεταλλάξεων που συνέβησαν λόγω προσαρµογής στο περιβάλλον (1801) 1. νοµοτελειακά-κατευθυνόµενη 2. τελολογικά ως αυτο-προσαρµοζόµενους τους οργανισµούς στο περιβάλλον τους 3. µε τη δυνατότητα να µεταβιβάζουν τα απαραίτητα χαρακτηριστικά

72 Lamarck

73

74 50 χρόνια αργότερα Alfred Russel Wallace ( ) Charles Darwin ( ) Κινητήρια δύναµη είναι η διατήρηση του καταλληλότερου από το φάσµα της ποικιλοµορφίας του οργανισµού σε δεδοµένο περιβάλλον (Linnean Society 1858) «Η εξέλιξη µέσω της φυσικής επιλογής» Βιβλίο, 1859 Η προέλευση των ειδών είναι αποτέλεσµα «φυσικήςεπιλογής» -µόνο τα είδη που προσαρµόζονται µπορούν να επιβιώσουν και να εξελιχθούν (Linnean Society 1858)

75 Το ταξίδι µε το πλοίο Βeagle

76 Ταξιδεύοντας 5 χρόνια µε το Beagle 27/12/ /10/1836

77 Τα νησιά Galapagos

78

79 Συνθετική Θεωρία ήνεοδαρβινισµός 1. Οι µεταλλάξεις διαδραµατίζουν κυρίαρχο ρόλο στη δηµιουργία της γενετικής ποικιλοµορφίας, αλλά η διατήρησή τους στον πληθυσµό κατευθύνεται και εξαρτάται αποκλειστικά από τη φυσική επιλογή Theodosius Dobzhansky ( ) Εξέλιξη: ηµιουργικήδιεργασία 2.Τανέαείδητωνοργανισµών εµφανίζονται µέσω της αναπαραγωγικής αποµόνωσης τµηµάτων του αρχικού πληθυσµού σε συνάρτηση µε τη σταδιακή συσσώρευση νέων µεταλλάξεων

80 Θεωρία της Ουδέτερης εξέλιξης (Motoo Kimura, 1968) Οι Μεταλλάξεις που δηµιούργησαν τα τόσα πολλά αλληλόµορφα γονίδια είναι επιλεκτικά ουδέτερες και η παρουσία τους εξαρτάται από την τύχη (τυχαία σταθεροποίηση)

81 Ηλιακή ενέργεια H 2 18 φως + C 2 CH Φωτοσύνθεση

82 Σχηµατική αναπαράσταση των φωτοσυνθετικών διαδικασιών όπως εµφανίζονται στα φυτά, τα φύκη και τα κυανοβακτήρια

83

84

85 Απολιθώµατα Ψάριαπόταβράχιατου Colorado (προϊστορικήςεποχής) Κουνούπι σε κεχριµπάρι (προϊστορικήςεποχής) Ψάρι 50 εκ. xρόνων (Eocene Green River, USA) Αµµωνίτης από τη Χιλή

86

87

88 Επίπεδα βιολογικής οργάνωσης

89 Breakthrough of the Year Equipped with genome data and field observations of organisms from microbes to mammals, biologists made huge strides toward understanding the mechanisms by which living creatures evolve Evolution in Action

90 DNA ΑΝΘΡΩΠΟΥ - ΧΙΜΠΑΤΖΗ ΑΠΟΚΛΙΣΗΠΡΟ 6 ΕΚ. ΕΤΩΝ 29% ΓΟΝΙ ΙΩΝ ΑΠΟΛΥΤΩΣ ΟΜΟΙΑ 50 ΑΝΘΡΩΠΙΝΑ ΓΟΝΙ ΙΑ ΛΕΙΠΟΥΝ ΣΤΟΝ ΧΙΜΠΑΤΖΗ 3 ΓΟΝΙ ΙΑ ΦΛΕΓΜΟΝΗΣ ΛΕΙΠΟΥΝ ΣΤΟΝ ΧΙΜΠΑΤΖΗ

91 ΣΥΝΕΧΙΖΟΜΕΝΗ ΕΞΕΛΙΞΗ

92 Επίλογος

93

94

95 εχόµαστε ένα πρώτο ξεκίνηµα µε αποτέλεσµα τη δηµιουργία του σύµπαντος σε κάποιο χρόνο του παρελθόντος ή την στιγµή της ΜΕΓΑΛΗΣ ΕΚΡΗΞΗΣ Υπάρχουµε γιατί έγινε το πρώτο ξεκίνηµα, ηαρχή σε µια σειρά αλυσιδωτών αντιδράσεων που ηενέργειά τουςήτο τέλος τους δεν µπορεί από κανέναν να προβλεφθεί ΕΠΙΛΟΓΟΣ

96 Οάνθρωπος µέσα σε αυτόν τον κύκλο προβάλλει ως ο ηθοποιός του σύµπαντος. Ένας ηθοποιός που εγωιστικά ψάχνει γιατη δική του προέλευση Ωστόσο µπορούµε να θεωρούµε τους εαυτούς µας, µέσασ αυτή αυτή τη µαταιοδοξία, ότι είµαστε κάτι το ασύγκριτο, κάτι το θαυµαστό! Ευτυχείς αυτοί που δενθα ξεχάσουν ότι είναι άνθρωποι

97 Ευχαριστώ

98

99