ΕΞΩΣΩΜΑΤΙΚΗ ΓΟΝΙΜΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΑ ΚΥΤΤΑΡΑ (STEM CELLS).

Transcript

1 ΕΞΩΣΩΜΑΤΙΚΗ ΓΟΝΙΜΟΠΟΙΗΣΗ ΚΑΙ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΑ ΚΥΤΤΑΡΑ (STEM CELLS). ΚΩΝΣΤΑΝΤΙΝΟΣ ΣΤΕΦΑΝΙΔΗΣ Επικ. Καθηγητής Α ΜΑΙΕΥΤΙΚΗ & ΓΥΝΑΙΚΟΛΟΓΙΚΗ ΚΛΙΝΙΚΗ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΔΙΕΥΘΥΝΤΗΣ ΚΑΘ. Α. ΑΝΤΣΑΚΛΗΣ

2 ΜΕΛΛΟΝΤΙΚΟΙ ΣΤΟΧΟΙ ΤΗΣ ΕΞΩΣΩΜΑΤΙΚΗΣ ΓΟΝΙΜΟΠΟΙΗΣΗΣ ΚΑΛΥΤΕΡΟ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑ. ΕΜΒΡΥΟΜΕΤΑΦΟΡΑ ΕΝΟΣ ΕΜΒΡΥΟΥ ΜΕ ΠΟΣΟΣΤΟ ΕΠΙΤΥΧΙΑΣ 80%. ΑΠΛΑ ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΑ ΠΡΟΚΛΗΣΗΣ. ΕΞΕΤΑΣΗ ΤΟΥ ΕΜΒΡΥΟΥ ΜΕ ΜΗ ΕΠΕΜΒΑΤΙΚΕΣ ΜΕΘΟΔΟΥΣ. IN VITRO ΩΡΙΜΑΝΣΗ ΩΑΡΙΩΝ. ΚΑΤΑΨΥΞΗ ΩΟΘΗΚΙΚΟΥ ΙΣΤΟΥ, ΩΑΡΙΩΝ. ΕΜΒΡΥΪΚΑ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΑ ΚΥΤΤΑΡΑ. ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΓΑΜΕΤΩΝ.

3 IN VITRO FERTILIZATION (IVF) Oocyte Sperm Fertilized Egg/Zygote Blastocyst (5 days) Over a million such babies already born Implantation Frozen blastocysts in excess of clinical needs Embryonic Stem Cells

4 ΕΜΒΡΥΪΚΑ ΑΡΧΕΓΟΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΤΑ ΕΜΒΡΥΪΚΑ ΑΡΧΕΓΟΝΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΠΡΟΕΡΧΟΝΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΕΣΩ ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΜΑΖΑ ΑΝΑΠΤΥΣΣΟΜΕΝΩΝ ΒΛΑΣΤΟΚΥΣΤΕΩΝ. ΕΝΑ ΤΕΤΟΙΟΥ ΕΙΔΟΥΣ ΚΥΤΤΑΡΟ ΕΙΝΑΙ ΑΥΤΟΑΝΑΝΕΩΣΙΜΟ (ΜΠΟΡΕΙ ΝΑ ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΤΕΙ), ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΟ (ΜΠΟΡΕΙ ΝΑ ΣΧΗΜΑΤΙΣΕΙ ΟΛΟΥΣ ΤΟΥ ΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥΣ ΤΥΠΟΥΣ ΠΟΥ ΑΠΑΝΤΩΝΤΑΙ ΣΤΟ ΣΩΜΑ) ΚΑΙ ΘΕΩΡΗΤΙΚΑ ΕΙΝΑΙ ΑΘΑΝΑΤΟ.

5

6 GENERATION OF EMBRYONIC STEM CELLS

7 ΕΣΩ ΣΤΙΒΑΔΑ ΒΛΑΣΤΟΚΥΣΤΗΣ

8 ΛΗΨΗ ΕΣΩ ΣΤΙΒΑΔΑΣ ΒΛΑΣΤΟΚΥΣΤΗΣ

9 ΕΝΑΠΟΘΕΣΗ ΣΕ ΙΝΟΒΛΑΣΤΕΣ

10 ΘΕΡΑΠΕΥΤΙΚΗ ΧΡΗΣΗ ΤΩΝ STEM CELLS ΣΗΜΕΡΑ

11

12

13 ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗ ΙΑΤΡΙΚΗ ΙΑΤΡΙΚΕΣ ΠΑΡΕΜΒΑΣΕΙΣ ΠΟΥ ΣΤΟΧΕΥΟΥΝ ΣΤΟ ΝΑ ΑΠΟΚΑΤΑΣΤΗΣΟΥΝ ΚΑΤΕΣΤΡΑΜΜΕΝΑ ΟΡΓΑΝΑ, ΚΥΡΙΩΣ ΜΕ ΤΗ ΧΡΗΣΗ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΓΙΑ ΝΑ ΑΝΑΝΕΩΣΟΥΝ ΚΥΤΤΑΡΑ ΚΑΙ ΙΣΤΟΥΣ ΠΟΥ ΚΑΤΑΣΤΡΑΦΗΚΑΝ ΑΠΟ ΤΗ ΓΗΡΑΝΣΗ ΚΑΙ ΑΠΟ ΑΣΘΕΝΕΙΕΣ.

14 HUMAN STEM CELLS EMBRYONIC ADULT UMBILICAL CORD GERM STEM CELLS AMNIOTIC FLUID

15 ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΓΑΜΕΤΩΝ ΑΠΟ ΕΜΒΡΥΪΚΑ STEM (ES) CELLS Inner Cell Mass Blastocyst (5 days) Embryonic Stem Cells Culture in vitro Appropriate Growth Factors (Azim Azim S, Nature 2004;427: ). 107). GERM Stem Cells

16 ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΓΑΜΕΤΩΝ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΕΜΒΡΥΪΚΩΝ STEM CELLS ΣΕ ΩΑΡΙΟ. (Hϋbner K, et al. Science 2003). ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΕΜΒΡΥΪΚΩΝ STEM CELLS ΣΕ ΣΠΕΡΜΑΤΟΖΩΑΡΙΟ. (Geijsen N, et al. Nature 2004). HAW TO MAKE EGGS AND SPERM. (Azim S, Nature 2004;427: ). 107).

17 ΓΑΜΕΤΕΣ ΜΕ ΤΗ ΒΟΗΘΕΙΑ ΤΗΣ ΒΙΟΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑΣ. ΤΟΣΟ ΤΑ ΩΑΡΙΑ ΟΣΟ ΚΑΙ ΤΑ ΣΠΕΡΜΑΤΟΖΩΑΡΙΑ ΠΟΥ ΕΧΟΥΝ ΚΑΛΛΙΕΡΓΗΘΕΙ ΣΤΟ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΕΙΝΑΙ ΣΤΟ ΠΟΝΤΙΚΙ. ΟΙ ΜΟΡΦΕΣ ΑΥΤΕΣ ΜΕΧΡΙ ΤΩΡΑ ΕΧΟΥΝ ΔΩΣΕΙ ΑΡΧΙΚΕΣ ΜΟΡΦΕΣ ΕΜΒΡΥΟΥ ΟΤΑΝ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ ΓΙΑ ΓΟΝΙΜΟΠΟΙΗΣΗ. ΜΕΧΡΙ ΣΗΜΕΡΑ ΔΕΝ ΥΠΑΡΧΕΙ ΑΝΑΦΟΡΑ ΓΕΝΝΗΣΗΣ ΕΜΒΡΥΟΥ ΑΠΟ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΗ ΤΕΧΝΙΤΩΝ ΓΑΜΕΤΩΝ.

18 *TRANSDIFFERENTATION*- ΜΕΤΑΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ Η ΙΚΑΝΟΤΗΤΑ ΕΝΟΣ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟΥ ΚΥΤΤΑΡΟΥ ΕΝΟΣ ΙΣΤΟΥ, ΟΡΓΑΝΟΥ Η ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ, ΣΥΜΠΕΡΙΛΑΜΒΑΝΟΜΕΝΩΝ ΑΡΧΕΓΟΝΩΝ Η ΠΡΟΓΟΝΙΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ, ΝΑ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΟΥΝΤΑΙ ΣΕ ΕΙΔΗ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΕΝΟΣ ΑΛΛΟΥ ΙΣΤΟΥ, ΟΡΓΑΝΟΥ, Η ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ; Π.Χ. ΑΡΧΕΓΟΝΑ ΑΙΜΟΠΟΙΗΤΙΚΑ ΠΟΥ ΜΕΤΑΤΡΕΠΟΝΤΑΙ ΣΕ ΗΠΑΤΟΚΥΤΤΑΡΑ.

19 PLASTICITY OF ADULT STEM CELLS

20 ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΩΑΡΙΩΝ ΑΠΟ ΕΝΗΛΙΚΑ STEM CELLS. Dyce P W, et al.nature cell biology, 2006.

21 ΕΦΑΡΜΟΓΕΣ ΤΩΝ ΓΑΜΕΤΩΝ ΠΟΥ ΠΡΟΕΡΧΟΝΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ STEM CELLS ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΒΛΑΣΤΟΚΥΣΤΕΩΝ ΚΑΙ ΜΕΤΕΤΕΠΕΙΤΑ ΠΟΛΛΑΠΛΩΝ ΣΕΙΡΩΝ ΕΜΒΡΥΪΚΩΝ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ. ΜΕΛΕΤΗ ΜΗΧΑΝΙΣΜΩΝ ΚΑΡΚΙΝΟΓΕΝΝΕΣΗΣ ΤΟΣΟ ΣΤΙΣ ΩΟΘΗΚΕΣ ΟΣΟ ΚΑΙ ΣΤΟΥΣ ΟΡΧΕΙΣ. ΜΕΛΕΤΗ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΔΙΑΦΟΡΩΝ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΚΑΙ ΝΕΕΣ ΑΝΑΚΑΛΥΨΕΙΣ ΣΤΗΝ ΜΟΡΙΑΚΗ ΒΙΟΛΟΓΙΑ.

22 ΗΘΙΚΟ ΔΙΛΗΜΜΑ. ΕΙΝΑΙ ΛΙΓΟΤΕΡΟ ΑΝΗΘΙΚΟ ΝΑ ΚΑΤΑΣΤΡΕΦΕΤΑΙ ΕΝΑ ΕΜΒΡΥΟ ΠΟΥ ΕΧΕΙ ΠΡΟΕΛΘΕΙ ΑΠΟ ΤΕΧΝΗΤΟΥΣ ΓΑΜΕΤΕΣ ΑΠΟ ΕΝΑ ΕΜΒΡΥΟ ΠΟΥ ΕΧΕΙ ΠΡΟΕΛΘΕΙ ΑΠΟ ΔΩΡΕΑ ΑΠΟ ΕΞΩΣΩΜΑΤΙΚΗ ΓΟΝΙΜΟΠΟΙΗΣΗ?? ΚΑΤΑ ΠΑΡΑΓΓΕΛΙΑ ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΓΑΜΕΤΩΝ (ΓΕΝΕΤΙΚΕΣ ΠΑΡΕΜΒΑΣΕΙΣ).

23 ΤΕΧΝΗΤΟΙ ΓΑΜΕΤΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΘΕΡΑΠΕΙΑ ΤΗΣ ΣΤΕΙΡΟΤΗΤΑΣ. ΑΝΔΡΙΚΗ ΣΤΕΙΡΟΤΗΣ. ΓΥΝΑΙΚΕΙΑ ΣΤΕΙΡΟΤΗΣ. ΔΩΡΕΑ ΩΑΡΙΩΝ.

24 ΜΠΟΡΕΙ ΤΟ ΕΜΒΡΥΪΚΟ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΟ ΚΥΤΤΑΡΟ ΝΑ ΓΙΝΕΙ ΓΟΝΙΟΣ???? ΜΕ ΤΗΝ ΤΕΛΕΙΟΠΟΙΗΣΗ ΤΗΣ ΕΡΕΥΝΑΣ ΤΕΧΝΗΤΟΙ ΓΑΜΕΤΕΣ ΘΑ ΜΠΟΡΟΥΝ ΝΑ ΔΩΣΟΥΝ ΕΜΒΡΥΑ ΠΟΥ ΘΑ ΓΕΝΝΗΘΟΥΝ. ΟΙ ΣΕΙΡΕΣ ΤΩΝ ΕΜΒΡΥΪΚΩΝ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΘΑ ΠΡΕΠΕΙ ΝΑ ΔΙΑΧΩΡΙΖΟΝΤΑΙ ΩΣΤΕ ΝΑ ΔΙΝΟΥΝ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΕΣ ΣΕΙΡΕΣ ΩΑΡΙΑ ΚΑΙ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΕΣ ΣΕΙΡΕΣ ΝΑ ΔΙΝΟΥΝ ΣΠΕΡΜΑΤΟΖΩΑΡΙΑ???

25 ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ STEM CELLS ΝΟΣΟΚΟΜΕΙΟ ΑΛΕΞΑΝΔΡΑ

26 ΕΡΕΥΝΗΤΙΚΑ ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΑ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟΥ ΑΝΑΠΑΡΑΓΩΓΙΚΗΣ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΚΑΙ ΑΝΑΓΕΝΝΗΤΙΚΗΣ ΙΑΤΡΙΚΗΣ Α ΜΑΙΕΥΤΙΚΗΣ ΓΥΝΑΙΚΟΛΟΓΙΚΗΣ ΚΛΙΝΙΚΗΣ. ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ STEM CELLS ΑΠΌ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΜΝΙΑΚΟΥ ΥΓΡΟΥ ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΚΑΙ ΙΔΙΟΤΗΤΕΣ ΙΝΟΒΛΑΣΤΩΝ ΑΠΟ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΜΝΙΑΚΟΥ ΥΓΡΟΥ ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΤΗΣ ΩΚΥΤΟΚΙΝΗΣ ΣΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΑΜΝΙΑΚΟΥ ΥΓΡΟΥ Η ΕΠΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΝΕΒΕΡΑΠΙΝΗΣ ΣΕ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΚΑΡΚΙΝΙΚΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΤΟΥ ΤΡΑΧΗΛΟΥ ΤΗΣ ΜΗΤΡΑΣ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΕΝΔΟΜΗΤΡΙΩΣΕΩΣ

27 EMBRYONIC- LIKE STEM CELL

28

29 OTR AND RT-PCR a b c 95 for 1 390bp 60 for 1 72 for1 40 cycles And 72 for 10 minutes Otr1:CCTTCATCGTGTGCTGGACG Otr2:CTAGGAGCAGAGCACTTATG

30 ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ 1. Τα εμβρυϊκά πολυδύναμα κύτταρα φαίνεται να έχουν εξαιρετικές προοπτικές στην ιατρική επιστήμη. 2. Η χρησιμοποίηση τους στην κλινική πράξη θα πραγματοποιηθεί εφόσον αρκετές ιδιότητες τους διευκρινισθούν πλήρως.

31 ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ 3. ΗΘΙΚΑ ΔΙΛΗΜΜΑΤΑ ΥΠΑΡΧΟΥΝ ΚΑΙ ΘΑ ΥΠΑΡΧΟΥΝ ΩΣ ΠΡΟΣ ΤΗΝ ΠΡΟΕΛΕΥΣΗ ΤΟΥΣ. 4. Η ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΓΑΜΜΕΤΩΝ ΑΠΟ ΤΑ ΕΜΒΡΥΙΚΑ STEM CELLS ΦΑΙΝΕΤΑΙ ΟΤΙ ΘΑ ΕΙΝΑΙ Η ΝΕΑ ΕΠΑΝΑΣΤΑΣΗ ΣΤΗΝ ΑΝΘΡΩΠΙΝΗ ΑΝΑΠΑΡΑΓΩΓΗ Z. Master Embryonic stem-cell gametes: the new frontier in human reproduction Hum. Reprod., April 1, 2006; 21(4): [Abstract] [Full Text] [PDF]

32 ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ 5. Η ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ ΓΑΜΕΤΩΝ ΠΟΥ ΕΧΟΥΝ ΠΡΟΕΛΘΕΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΤΩΝ ΠΟΛΥΔΥΝΑΜΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΕΓΕΙΡΕΙ ΠΟΛΛΑ ΗΘΙΚΑ ΔΙΛΗΜΜΑΤΑ ΚΑΙ ΟΙ ΚΑΝΟΝΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΡΕΥΝΑ ΣΤΟ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟ ΤΟΜΕΑ ΘΑ ΠΡΕΠΕΙ ΝΑ ΤΕΘΟΥΝ.

33 EMBRYONIC- LIKE STEM CELLS THANK YOU FOR YOUR ATTENTION