Προβλήματα σχετιζόμενα με την τυποποίηση αντιγόνων Ι

Μέγεθος: px

Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "Προβλήματα σχετιζόμενα με την τυποποίηση αντιγόνων Ι"

Βασιλική Αγγελίδου
8 χρόνια πριν
Προβολές:

1 Β Προβλήματα Φαινότυπος Β(Α): ασθενής αντίδραση με αντι-α, έντονη αντίδραση με αντι-β, και ο ορός αντιδρά με ερυθρά Α₁. Ο αντιορός Α περιέχει τον κλώνο ΜΗΟ4? Επίκτητος Β φαινότυπος: έντονη αντίδραση με αντι-α, ασθενής αντίδραση με αντι-β, και ο ορός αντιδρά έντονα με ερυθρά Β

2 Προβλήματα σχετιζόμενα με την τυποποίηση αντιγόνων Ι Ελαττωμένη έκφραση αντιγόνων: ποικιλίες Α και Β, λευχαιμία Πρόσφατη μετάγγιση ή μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων Μεγάλη συγκέντρωση Α και Β διαλυτών αντιγόνων στον ορό Κάλυψη των αντιγονικών θέσεων από αυτοαντίσωμα Μεγάλη συγκέντρωση στον ορό πρωτεϊνών και μακρομοριακών διαλυμάτων-rouleaux

Μεγάλη συγκέντρωση Α και Β διαλυτών αντιγόνων στον ορό Κάλυψη των αντιγονικών θέσεων

3 Προβλήματα σχετιζόμενα με την τυποποίηση αντιγόνων 2 Ερυθρά σε εναιώρημα πλάσματος ή ορού δυνατόν να παρουσιάσουν ψευδείς συγκολλήσεις παρουσία μονοκλωνικού αντισώματος Β(Α) ομάδα, παρουσία μονοκλωνικού ΜΗΟ4 Επίκτητος Β φαινότυπος Κληρονομούμενες ή επίκτητες διαταραχές της μεμβράνης με εμφάνιση νεοαντιγόνου

μονοκλωνικού αντισώματος Β(Α) ομάδα, παρουσία μονοκλωνικού ΜΗΟ4 Επίκτητος Β

4 Προβλήματα σχετιζόμενα με τον καθορισμό των αιμοσυγκολλητινών Παρουσία ινικής που μπορεί να παρερμηνευτεί ως συγκόλληση Εξέταση βρεφών < 4-6 μηνών ή νεογνών Ποικιλίες Α και Β Μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων Ανοσοκατασταλμένοι ασθενείς Ψυχρά άλλο ή αυτοαντισώματα Πρόσφατη μετάγγιση πλάσματος, χορήγηση ανοσοσφαιρίνης που περιέχει αιμοσυγκολλητίνες

και Β Μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων Ανοσοκατασταλμένοι ασθενείς Ψυχρά άλλο ή

5 ιπλός κυτταρικός πληθυσμός Ονομάζεται και συγκόλληση μικτού πεδίου, χίμαιρα Μετάγγιση Ο ερυθρών σε ασθενή άλλης ομάδας Μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων με ασυμβατότητα ΑΒΟ Χιμαιρισμός διδύμων

6 ιπλός ερυθροκυτταρικός πληθυσμός ΑΒΟ CEcE K

7 Τεχνικά σφάλματα Ανάμιξη διαφορετικών δειγμάτων Πολύ πυκνά ή αραιά διαλύματα ερυθρών Μη προσθήκη αντιδραστηρίων Μη αξιολόγηση της αιμόλυσης εν ακολουθούνται οι οδηγίες χρήσης των αντιδραστηρίων Λάθος φυγοκέντριση Λάθος εκτίμηση του αποτελέσματος Λάθος καταγραφή του αποτελέσματος

αιμόλυσης εν ακολουθούνται οι οδηγίες χρήσης των αντιδραστηρίων Λάθος

8 Επίλυση προβλήματος Επανάληψη εξέτασης από το ίδιο δείγμα Πλύσιμο των ερυθρών Επανεκτίμηση της έμμεσης Coombs Έλεγχος προηγούμενων καταγραφών Ιστορικό του ασθενή Επανάληψη με νέο δείγμα

9 εν ανευρίσκονται τα αναμενόμενα αντιγόνα? Επώαση των ερυθρών παρουσία των αντίστοιχων αντιορών Κατεργασία των ερυθρών με πρωτεολυτικά ένζυμα Επώαση των ερυθρών με τον ανάλογο αντιορό, προσρόφηση και έκλουση

10 εν ανευρίσκονται τα αναμενόμενα αντισώματα? Επώαση του ορού με ερυθρά Α₁ και Β, σε θερμοκρασία δωματίου και 4 C Κατεργασία των αντιδραστηρίων που περιέχουν τα ερυθρά Α₁ και Β με πρωτεολυτικά ένζυμα Ύπαρξη υποομάδων Α Ύπαρξη ψυχροσυγκολλητινών Ύπαρξη αλλοαντισωμάτων που αντιδρούν με τα ερυθρά των αντιδραστηρίων Μεγάλη ποσότητα πρωτεϊνών ή παραπρωτεϊνών

αντιδραστηρίων που περιέχουν τα ερυθρά Α₁ και Β με πρωτεολυτικά ένζυμα Ύπαρξη υποομάδων

11 Ειδικές περιπτώσεις Ερυθρά νεογνών με HDFN είγμα ασθενή με αυτοάνοση αιμολυτική αναιμία είγμα ασθενή που περιέχει ψυχροσυγκολλητίνες

12 Πρόβλημα

13 Πρόβλημα

14 Μοριακές τεχνικές και ΑΒΟ Γονίδιο Α101, παραγωγή Α1 τρανσφεράσης, 65 αλληλόμορφα Γονίδιο Β101, παραγωγή Β τρανσφεράσης, 47 αλληλόμορφα Γονίδιο Ο01, 58 αλληλόμορφα Η μοριακή τυποποίηση ΑΒΟ εξαιρετικά σπάνια συμβάλλει στην επίλυση προβλημάτων μετάγγισης!

τρανσφεράσης, 47 αλληλόμορφα Γονίδιο Ο01, 58 αλληλόμορφα Η

15 Μέθοδοι ελέγχου ΑΒΟ Ανοσολογικό επίπεδο: ανάστροφη ομάδα, τιτλοποίηση Αντιγονικό επίπεδο: αντι-οροί, προσρόφηση/έκλουση, κυτταρομετρία ροής Ενζυμικό επίπεδο:δραστικότητα τρανσφερασών Γονιδιακό επίπεδο: καθορισμός γονοτύπου

προσρόφηση/έκλουση, κυτταρομετρία ροής Ενζυμικό

16 RH1- D αντιγόνο Ιδιαίτερα ανοσογόνο Μεγάλος αριθμός αντιγόνων με αποτέλεσμα την ύπαρξη πολλών αντισωμάτων ιαφορετική πληθυσμιακή κατανομή Ποικιλία αντιδραστηρίων εξέτασης: πολυκλωνικά, μονοκλωνικά, έναντι συγκεκριμένων επιτόπων

ιαφορετική πληθυσμιακή κατανομή Ποικιλία αντιδραστηρίων

17 Τυποποίηση D αντιγόνου Ι Πολυκλωνικοί αντι-οροί: ανθρώπινης προέλευσης, γρήγορα αποτελέσματα, αλλά και ψευδώς θετικά (όταν υπάρχουν rouleaux, παράταση του χρόνου εξέτασης) ή ψευδώς αρνητικά (σε πολύ πυκνά ή αραιά εναιωρήματα ερυθρών, παρουσία φυσιολογικού ορού, στα ασθενή D)

υπάρχουν rouleaux, παράταση του χρόνου εξέτασης) ή ψευδώς αρνητικά

18 Τυποποίηση D αντιγόνου ΙΙ Μονοκλωνικοί αντι-οροί: έντονες αντιδράσεις, ειδικότητα και ευαισθησία, δεν αντιδρούν με κάποιες ποικιλίες Μίγμα μονοκλωνικού + μονοκλωνικού αντιορού Μίγμα μονοκλωνικού + πολυκλωνικού αντιορού Απαραίτητη η γνώση της ειδικότητας κάθε αντιδραστηρίου

ποικιλίες Μίγμα μονοκλωνικού + μονοκλωνικού αντιορού Μίγμα

19 Γονίδια D και CE

20 Ποικιλίες D

21 Η συχνότερη κλινικά σημαντική ποικιλία D στον Ευρωπαϊκό πληθυσμό

22 Απεικόνιση των PCR προϊόντων RH

23 Αντιγόνο D και κύηση D- έγκυος που πιθανόν κυοφορεί D+ έμβρυο Τακτικός έλεγχος έμμεσης Coombs Ανίχνευση εμβρυικών ερυθρών Τυποποίηση του D αντιγόνου του εμβρύου με μοριακές τεχνικές από δείγμα αμνιοκέντησης ή από το πλάσμα της μητέρας Χορήγηση αντι-d ανοσοσφαιρίνης

Σχετικά έγγραφα

ΠΡΟΜΕΤΑΓΓΙΣΙΑΚΟΣ ΑΝΟΣΟΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ. Μαρία Γκανίδου Αιμοδοσία «ΓΝΘ Γ.Παπανικολάου»

ΠΡΟΜΕΤΑΓΓΙΣΙΑΚΟΣ ΑΝΟΣΟΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ Μαρία Γκανίδου Αιμοδοσία «ΓΝΘ Γ.Παπανικολάου» Ανοσοαιματολογικός έλεγχος Καθορισμός ομάδας αίματος Ανίχνευση και τυποποίηση αντιερυθροκυτταρικών αντισωμάτων