ANTISERUM SALMONELLA ΠΡΟΣ ΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΟΡΟΤΥΠΩΝ ΣΤΕΛΕΧΩΝ ΣΑΛΜΟΝΕΛΛΑΣ

ANTISERUM SALMONELLA ΠΡΟΣ ΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΟΡΟΤΥΠΩΝ ΣΤΕΛΕΧΩΝ ΣΑΛΜΟΝΕΛΛΑΣ 1. ΚΛΙΝΙΚΗ ΑΞΙΑ Οι τύποι στελεχών Salmonella είναι υπεύθυνοι για σοβαρές λοιµώξεις οι οποίες ποικίλουν λόγω της πληθώρας των οροτύπων και ποικίλων συνδρόµων που αυτοί συνεπάγονται. Το είδος Salmonella περιλαµβάνει 2 υπο-είδη : S. bongori (20 ορότυποι) και S. enterica (2415 ορότυποι). Το είδος S. enterica διαιρείται σε 6 υπο-είδη : - S. enterica subsp. enterica (I ή 1) - S. enterica subsp. salamae (II ή 2) - S. enterica subsp. arizonae (IIIa ή 3a) - S. enterica subsp. diarizonae (IIIb ή 3b) - S. enterica subsp. houtenae (IV ή 4) - S. enterica subsp. indica (VI ή 6). Οι ορότυποι του υπο-είδους enterica (1435 ορότυποι) αντιπροσωπεύουν 99,5% των αποµονωµένων στελεχών (1). Στο διάγραµµα Kauffmann White (1) οι ορότυποι ταξινοµούνται συναρτήσει του συνδυασµού των σωµατικών (O) και µιστιγιοειδών (H) αντιγόνων της Salmonella. Αυτός ο συνδυασµός αντιγόνων προσδιορίζεται µε τη βοήθεια συγκολλητικών ορών (anti-o και anti-h). Χαρακτηρισµός της οµάδας Ο Οι οµάδες Ο, οι πρώτες που αποµονώθηκαν, χαρακτηρίζονται µε γράµµατα της αλφαβήτου. Στη συνέχεια απαιτήθηκε να δοθούν σε αυτές και αριθµοί. Επί του παρόντος, θεωρείται πιο λογικό κάθε οµάδα Ο να χαρακτηρίζεται από τον χαρακτηριστικό παράγοντα Ο. Αντιστοιχία αλφαβητικής ονοµασίας και χαρακτηριστικού παράγοντα Ο Αλφαβητική ονοµασία οµάδας Αντιγόνο Ο οµάδας Αλφαβητική ονοµασία οµάδας Αντιγόνο Ο οµάδας Αλφαβητική ονοµασία οµάδας Αντιγόνο Ο οµάδας A 2 I 16 R 40 B 4 J 17 S 41 C1 C2 C3 6, 7, 8 K 18 T 42 D 9 L 21 U 43 E1 E2 3, 10 M 28 V 44 E4 1, 3, 19 N 30 W 45 F 11 O 35 X 47 G1 G2 13 P 38 Y 48 H 6, 14 Q 39 Z 50 2- ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΟΚΙΜΗΣ Οι αντιοροί Salmonella (anti-o και anti-h) προορίζονται για την ορολογική ταυτοποίηση των καλλιεργειών Salmonella µε τη µέθοδο συγκόλλησης σε αντικειµενοφόρο πλάκα, στο πλαίσιο επιδηµιολογικών και διαγνωστικών σκοπών. 3- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗ Η δοκιµή προκαλεί τη συγκόλληση, µέσω ειδικών ορών (anti-o και anti-h), των βακτηρίων που φέρουν τα αντίστοιχα αντιγόνα. Οι αντιοροί αυτοί παράγονται µέσω της ανοσοποίησης κουνελιού µε επιλεγµένα στελέχη Salmonella. Οι µονοσθενείς οροί απορροφούνται προκειµένου να αυξηθεί η ειδικότητά τους. Υπόκεινται σε διήθηση µε µεµβράνη και τους προστίθεται αζίδιο νατρίου συγκέντρωσης 0.1%. 1

1. Οροι για συγκολληση σε αντικειμενοφορο πλακα a) Οροί Ο Πολυσθενείς οροί O για προσδιορισµό του τύπου Αυτοί οι πολυσθενείς οροί Ο δεν απορροφούνται. Προορίζονται για τον προσδιορισµό του τύπου. Η χρήση τους συνιστάται κυρίως προς όσους διερευνούν τα στελέχη Salmonella στα προϊόντα διατροφής και στο περιβάλλον. Η συντριπτική πλειοψηφία (της τάξης του 98%) των Salmonella που απαντούν στον άνθρωπο και στα θερµόαιµα ζώα περιέχουν ένα αντιγόνο O που αντιστοιχεί στις συγκολλητίνες που περιέχονται στους ορούς OMA και OMB. Οροί O για τον προσδιορισµό του τύπου του αντιγόνου Αυτοί οι οροί προορίζονται για την ταυτοποίηση της οµάδας Ο. Πρέπει να χρησιµοποιούνται διαδοχικά και µε λογική σειρά (πολυσθενή και µετά µονοσθενή ειδικά της οµάδας ), ενδεχοµένως ανάλογα µε τα ιδιαίτερα βιοχηµικά χαρακτηριστικά (περίπτωση οροτύπων Typhi και Paratyphi A). Οι δευτερεύοντες παράγοντες Ο διερευνώνται σε δεύτερο στάδιο. Για παράδειγµα, η διερεύνηση - των παραγόντων O:7 και O:8 θα γίνεται µόνο εάν παρατηρείται συγκόλληση στον ορό Ο: 6, 7, 8. - του παράγοντα O:15 θα γίνεται µόνο εάν παρατηρείται συγκόλληση στον ορό Ο: 3, 10, 15 Μόνο η συγκόλληση µε τους µονοσθενείς ορούς O επιτρέπει την ταυτοποίηση της οµάδας O. Ορός Anti Vi Το αντιγόνο Vi είναι ένα επιφανειακό και θερµοµεταβλητό αντιγόνο που µπορεί να αποκρύψει την δραστικότητα του σωµατικού αντιγόνου. Εκφράζεται κατά κύριο λόγο από τα στελέχη S. Typhi, και σπανίως από τα στελέχη S. paratyphi C. Τα στελέχη Salmonella που περιέχουν αυτό το αντιγόνο δεν συγκολλούνται µε τους αντιορούς O. Όταν ένα βακτήριο δεν προκαλεί συγκόλληση ούτε µε το "µίγµα" OMA ούτε µε το "µίγµα" OMB, τότε συνιστάται η δοκιµή του εν λόγω βακτηρίου µε τον ορό Vi. Εάν η αντίδραση είναι θετική, τότε πρέπει να θερµάνετε το βακτηριακό εναιώρηµα στους 100 C επί 30 λεπτά και, στη συνέχεια, να υποβάλετε σε νέα δοκιµή τους πολυσθενείς ορούς OMA και OMB και, κατόπιν, τους αντίστοιχους µονοσθενείς. β) Οροί Η Οροί Η για προσδιορισµό του τύπου Όπως και οι ειδικοί οροί anti-o, είναι ιδιαίτερα χρήσιµοι όταν πρέπει να ταυτοποιηθεί µεγάλη ποικιλία οροτύπων (βακτηριολογία τροφίµων, βακτηριολογία περιβάλλοντος). Οροί Η για τον προσδιορισµό του τύπου του αντιγόνου Για τη χρήση αυτών των ορών, ακολουθείται η ίδια λογική µε τους ορούς Ο. Για παράδειγµα, χρησιµοποιείτε : - τους µονοσθενείς ορούς H:2, H:5, H:6, H:7 εφόσον παρατηρήσετε συγκόλληση στον πολυσθενή ορό H1 - τους µονοσθενείς ορούς z10 και z15 εφόσον παρατηρήσετε συγκόλληση στον πολυσθενή ορό HE, κτλ. 2. Oροι για αναστροφη φασησ Οροί anti-h για αντιστροφή φάσης (µέθοδος Sven Gard) : Εάν ο πληθυσµός των βακτηρίων βρίσκεται σε ισορροπία µεταξύ των φάσεων 1 και 2 του αντιγόνου Η, τότε η ανίχνευσή τους είναι εφικτή και συνεπώς η ταυτοποίηση του οροτύπου. Εάν, αντιθέτως, διακρίνεται µόνο µία εκ των δύο φάσεων του αντιγόνου Η, τότε πρέπει να προσδιορισθεί η ειδικότητα της δεύτερης φάσης χρησιµοποιώντας τη γέλη Sven Gard για την αντιστροφή της φάσης, µε προσθήκη µιας σταγόνας αντιορού SG που περιέχει συγκολλητίνη της ήδη προσδιορισµένης φάσης. Το µέσον Sven-Gard (κωδικός 53431) συνίσταται σε µια γέλη αρκούντως εύπλαστη ώστε µια κινητή Salmonella, η οποία τοποθετήθηκε ως σπορά στο κέντρο ενός τρυβλίου Petri, να µπορεί να διεισδύσει την επιφάνεια του µέσου µετά από µία νύκτα επώασης στον κλίβανο. 4- ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΗ Οι πολυσθενείς και µονοσθενείς οροί διατίθενται σε σταγονοµετρικές φιάλες των 3 ml (60 δοκιµές). ΟΡΟΙ O Πολυσθενείς οροί για προσδιορισµό του τύπου Πολυσθενείς οροί Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMA Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMΒ Περιέχει τις συγκολλητίνες της οµάδας A, B, D, E, L C, F, G, H Αντίστοιχο σωµατικό αντιγόνο Ο 1, 2,12 + 4, 5,12 + 9,12 + 9,46 + 3,10 + 3,15 + 1,3,19 +21 6, 7 + 6, 8 + 11 + 13, 22 + 13, 23 + 6, 14, 24 + 8, 20 Κωδικοί Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMC I, J, K, M, N, O, P 16 + 17 + 18 + 28 + 30 + 35 + 38 60821 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMD Q, R, S, T, U, V, W 39 + 40 + 41 + 42 + 43 + 44 + 45 60831 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OME X, Y, Z, 51 έως 53 47 + 48 + 50 + 51 + 52 + 53 + 61 60841 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMF 54 + 55 + 56 + 57 + 58 + 59 60851 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella OMG 60 + 62 + 63 + 65 + 66 + 67 60861 60801 60811 2

Μονοσθενείς Οροί για τον προσδιορισµό του τύπου του αντιγόνου Μονοσθενείς οροί Οµάδα Κωδικοί Μονοσθενείς οροί Οµάδα Κωδικοί Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:1, 2 A 59031 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:3, 10, 15 E1, E2 59112 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:4,5, B 59021 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:15 59127 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:6,7,8 C 59062 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:1, 3, 19 E4 59131 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:7 59081 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:11 F 59141 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:8 59091 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:13, 22, 23 G 59162 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:9 D 59101 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella O:6, 14, 24 59171 Μονοσθενής αντιορός Salmonella Vi (κωδικός 60951) ΟΡΟΙ Η Πολυσθενείς οροί για προσδιορισµό του τύπου Πολυσθενείς οροί Αντίστοιχο µαστιγιοειδές αντιγόνο Κωδικοί Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HMA a + b + c + d + i + z10 + z29 60451 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HMB e, h + e, n, x + e, n, z15 +G 60461 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HMC k + y + z + L + Z4 + r 60471 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HMD z35 + z36 + z38 + z39 + z41 + z42 + z44 + z60 60481 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HMIII παράγοντας H των υπο-ειδών III (Arizona) z52 + z53 + z54 + z55 + z57 + z61 60493 Πολυσθενείς οροί για τον προσδιορισµό του τύπου του αντιγόνου Πολυσθενείς οροί Κωδικοί Πολυσθενής Αντιορός Salmonella H1 H1 = 1,2 +1,5 + 1,6 + 1,7 + z6 60401 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HL HL = l, v + l, w + l, z13 + l, z28 + l, z40 60411 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HE HE = e, h + e, n, x + e, n, z15 60391 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HZ4 HZ4 = z4,z23 + z4,z24 + z4,z32 60431 Πολυσθενής Αντιορός Salmonella HG HG = f, g + g, p + g, m, s + g, m + m, t 60441 Μονοσθενείς οροί για τον προσδιορισµό του τύπου του αντιγόνου Μονοσθενείς οροί Κωδικοί Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella H:r 60201 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella H:a 60111 Μονοσθενείς Αντιοροί Salmonella H:v 61115 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:b 60121 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:w 61116 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:c 60131 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:x 61123 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:d 60141 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:y 60211 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:g, m 61121 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:z 60221 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:g, p 61122 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:z10 60241 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:h 61119 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H: z15 61120 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:i 60161 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H: 2 61111 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H: k 60171 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H 5 61112 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:m 61117 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:6 61113 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:p 61118 Μονοσθενείς αντιοροί Salmonella H:7 61114 3

Οροι anti-h για αντιστροφη φασησ (μεθο οσ sven gard) Πολυσθενείς οροί Συγκολλητίνες Κωδικοί Αντιορός Salmonella SG1 a + b+ c+ z10 61011 Αντιορός Salmonella SG2 d + i + e, h 61021 Αντιορός Salmonella SG3 k + y + l, v + l, w + l, z13 + l, z28 61031 Αντιορός Salmonella SG4 r + z 61041 Αντιορός Salmonella SG5 e, n, x + e, n, z15 61051 Αντιορός Salmonella SG6 1, 2 + 1, 5 + 1, 6 + 1, 7 + z6 61061 5- ΙΑΤΗΡΗΣΗ Οι οροί παραµένουν σταθεροί έως την ηµεροµηνία λήξης τους που αναγράφεται στο κιβώτιο, υπό την προϋπόθεση να φυλάσσονται στους +2 έως 8 C απουσία µολυσµατικών παραγόντων (ακόµη και µετά το άνοιγµά τους). 6- ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΟ ΑΛΛΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ Γυάλινες αντικειµενοφόρες πλάκες Πλαστική ή πλατινένια ράβδος µε δακτυλιοειδές άκρο Φυσιολογικό υδατικό διάλυµα 7- ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ ΚΑΤΑ ΤΗ ΧΡΗΣΗ Τηρείτε µε ακρίβεια τις τεχνικές και τις ισχύουσες προφυλάξεις σχετικά µε την προστασία από µικροβιολογικούς κινδύνους, τόσο κατά τη διαδικασία της δοκιµής όσο και κατά την αποµάκρυνση των υλικών και των βιολογικών προϊόντων που χρησιµοποιούνται για την αντίδραση συγκόλλησης. Αυτός ο ορός περιέχει αζίδιο νατρίου σε συγκέντρωση < 0,1%. Το αζίδιο του νατρίου ενδέχεται να αντιδράσει µε τον µόλυβδο ή τον χαλκό των σωληνώσεων αποχέτευσης και να σχηµατισθούν µεταλλικά αζίδια τα οποία είναι εκρηκτικά. Κατά την απόρριψή τους, ξεπλένετε µε άφθονο νερό για να αποφύγετε τις αποθέσεις αζιδίων. Μην αραιώνετε τα αντιδραστήρια. 8- ΙΑ ΙΚΑΣΙΑ ΟΚΙΜΗΣ 1) Οροι για συγκολληση σε αντικειμενοφορο πλακα Ο προσδιορισµός του οροτύπου γίνεται, µετά από την ταυτοποίηση του είδους, βάσει καθαρής και πρόσφατης καλλιέργειας Salmonella αποµονωµένης σε µη επιλεκτικό γελώδες µέσον. Ελέγξτε το υπό δοκιµή στέλεχος µε φυσιολογικό υδατικό διάλυµα : Λάβετε ένα δακτυλιοειδές δείγµα της καλλιέργειας Salmonella µε τη ράβδο. Τοποθετήστε αυτά τα βακτήρια σε µια σταγόνα φυσιολογικού υδατικού διαλύµατος µεριµνώντας για την καλή οµοιογενοποίηση του εναιωρήµατος. Με το φυσιολογικό υδατικό διάλυµα δεν πρέπει να προκύψει συγκόλληση. Εάν προκύψει συγκόλληση, τότε πρόκειται για αυτοσυγκολλούµενο στέλεχος και η δοκιµή µε τον αντιορό δεν µπορεί να διεξαχθεί. ιερευνήστε καταρχήν για συγκόλληση µε τους πολυσθενείς ορούς και κατόπιν µε τους ειδικούς ορούς οι οποίοι αντιστοιχούν στο µίγµα που δίνει σαφή συγκόλληση (πολυσθενείς O και µονοσθενείς O και, κατόπιν, πολυσθενείς H και µονοσθενείς H). Αποθέστε σε µια αντικειµενοφόρο πλάκα 1 σταγόνα αντιορού. Λάβετε δείγµα της καλλιέργειας Salmonella µε τον δακτύλιο της ράβδου (από το πλέον υγρό µέρος εάν πρόκειται για διερεύνηση αντιγόνων Η). ηµιουργήστε εναιώρηµα βακτηρίων µε τη σταγόνα του αντιορού µεριµνώντας ώστε το εναιώρηµα να είναι οµοιογενές, προσθέτοντας προοδευτικά τα βακτήρια στον ορό. Ανακινήστε την αντικειµενοφόρο πλάκα µε µια απαλή περιστροφική κίνηση. Παρατηρήστε το µίγµα διά γυµνού οφθαλµού πάνω από µια σκοτεινή επιφάνεια ή πάνω από κοίλο κάτοπτρο. 2) Οροι για αναστροφη των φασεων Προσθέστε στο ρευστοποιηµένο άγαρ Sven Gard µια σταγόνα ορού SG που περιέχει τη συγκολλητίνη της ήδη προσδιορισθείσας φάσης και θερµάνετε στους 45 C περίπου. Αναδεύστε το µέσον διαγράφοντας µια περιστροφική κίνηση έτσι ώστε ο περιεχόµενος ορός να αναµιχθεί οµοιογενώς και, εν συνεχεία, χύστε στο τρυβλίο Petri. Μετά από τη στερεοποίηση, εάν στην επιφάνεια παραµένουν σταγονίδια νερού από συµπύκνωση, στεγνώστε το άγαρ αφήνοντας το καπάκι ηµιανοικτό. Προβείτε σε πλούσια σπορά 3 ή 4 αποικιών της καθαρής και πρόσφατης καλλιέργειας σαλµονέλλας που λαµβάνετε από το άγαρ 4

. Τοποθετήστε σε κλίβανο, στους 37 C επί 18 ώρες (το καπάκι του τρυβλίου προς τα πάνω). ιερευνήστε για συγκόλληση µε τους ορούς anti-h στην περιφέρεια της περιοχής διείσδυσης στο άγαρ (ακολουθώντας τη διαδικασία που περιγράφεται παραπάνω). Παράδειγµα: τα αντιγόνα O : 4,5 και H : 1,2 προσδιορίστηκαν σε µια Salmonella που είναι υπό µελέτη. Για την αντιστροφή της φάσης χρησιµοποιείται ο ορός SG 6 (1,2 +1,5 + 1,7 + z6). Την εποµένη, θα διαπιστωθεί συγκόλληση µε : - τον ορό anti H : πρόκειται για µια Salmonella Typhimurium (O : 1, 4, [5], 12 H : i :1,2) - τον ορό anti H : πρόκειται για µια Salmonella Paratyphi B (O : 1, 4, [5], 12 H : b :1,2) 9- ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Η θετική αντίδραση αποδεικνύεται από την εµφάνιση συγκόλλησης το αργότερο εντός 1 λεπτού. Η συγκόλληση Ο χαρακτηρίζεται από την λεπτότητα και κανονικότητά της και ξεχωρίζει σαφώς από ενδεχόµενα τµήµατα βακτηριακών αποικιών που δεν αναµίχθηκαν δεόντως. Σηµειώσεις : Οποιαδήποτε καλλιέργεια συγκολλούµενης Salmonella O θα συγκολληθεί αµέσως παρουσία ενός εκ των πολυδύναµων ορών. Μια καθυστερηµένη και µειωµένης έντασης συγκόλληση µπορεί να λάβει χώρα µέσα σε έναν ή περισσότερους εκ των άλλων ορών. Όταν ένα βακτήριο δεν εµφανίζει συγκόλληση ούτε στο "µίγµα" OMA ούτε στο "µίγµα" OMB, τότε συνιστάται η δοκιµή αυτού του βακτηρίου µε τον ορό Vi. (Βλέπε Ορός anti-vi) Το S. typhi σχήµατος Vi είναι O µη συγκολλούµενο ζωντανό στέλεχος. Καθίσταται Ο συγκολλούµενο µόνο µετά από θέρµανση του εναιωρήµατος. Οι οροί HMA, HMB, HMC και HMD δεν περιέχουν συγκολλητίνες O. Αντιθέτως, συγκολλητίνες Ο υπάρχουν στον ορό HM III. Εάν µια καλλιέργεια εµφανίζει συγκόλληση µε αυτόν τον ορό, µπορεί να επιβεβαιωθεί ότι πρόκειται για συγκόλληση Η προσθέτοντας σε 1 ml βακτηριακού εναιωρήµατος µια σταγόνα ορού HM III. Μετά από 2 ώρες στο υδατόλουτρο θερµοκρασίας 37 C, εάν το στέλεχος περιέχει αντιγόνο που αντιστοιχεί στα αντισώµατα του συγκεκριµένου ορού, τότε εµφανίζεται µια κροκυδωτή συγκόλληση. Ένα στέλεχος που φέρει τον παράγοντα H:g προκαλεί συγκόλληση και µε τους δύο ορούς H:g, m και H:g, p. Ο ορός H1 επιτρέπει την ανίχνευση ενός στελέχους του οποίου το αντιγόνο H θα µπορούσε να ήταν σε φάση 2 "µη ειδική" (1, 2 ή 1, 5 ή 1, 7). 10- ΕΠΙ ΟΣΕΙΣ / ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΤΗΣ ΟΚΙΜΗΣ Η δραστικότητα των πολυδύναµων και µονοδύναµων ορών anti-salmonella ελέγχεται µε τη βοήθεια των ακόλουθων θετικών στελεχών : ΟΡΟΙ O Οροί Στελέχη Αντιγονική δοµή OMA Paratyphi A (O:1,2,12 H:a : [1,5]) OMB Newport (O:6,8,20 H:e,h : 1,2 [z67]) OMC Tel Aviv (O:28 H:y : e,n,z15) OMD Champaign (O:39 H:k :1,5) OME Bergen (O: 47, H: i : e,n,z15) OMF Uccle (O: 3,54 H: g,s,t : -) OMG IIIa (Arizona) (O:63 H: g, z51 : -) O:1, 2 Paratyphi A (O:1,2,12 H:a : [1,5]) O:4, 5 Typhimurium (O:1,4,[5],12 H:i :1,2) O:6, 7, 8 Newport (O:6,8,20 H:e,h :1,2 [z67]) O:7 Braenderup (O:6,7,14 H:e,h : e,n,z15) O:8 Blockley (O:6,8 H:k : 1,5) O:9 Enteritidis (O:1,9,12 H: g,m : -) O:3, 10, 15 London (O:3,10 [15] H:l,v : 1,6) O:15 Strasbourg (O:9,46 H:d : 1,7) O:1, 3, 19 Senftenberg (0:1,3,19 H:g,[s],t : -) O:11 Aberdeen (O:11 H: i : 1,2) O:13, 22, 23 Grumpensis (O:1,13,23 H:d :1,7) O:6, 14, 24 Carrau (O:6,14,[24] H:y :1,7) 5

ΟΡΟΙ Vi Οροί Στελέχη Αντιγονική δοµή Vi Typhi (0:9,12,[Vi] H:d : -) ΟΡΟΙ ΓΙΑ ΑΝΑΣΤΡΟΦΗ ΦΑΣΗΣ Οροί Στελέχη Αντιγονική δοµή SG 1 Paratyphi A (O:1,2,12 H: a : [1,5]) SG 2 Newport (O:6,8,20 H:e,h :1,2 [z67]) SG 3 Thompson (O:6,7,14 H:k :1,5) SG 4 Heidelberg (O:1,4,[5],12 H: r : 1,2) SG 5 Abortusequi (O:4,12 H: - : e,n,x) SG 6 Typhimurium (O:1,4,[5],12 H: i :1,2) ÏÑÏÉ H Οροί Στελέχη Αντιγονική δοµή HMA Paratyphi A (O:1,2,12H: a : [1,5]) HMB Enteritidis (O:1,9,12 H: g,m : -) HMC Blockley (O:6,8 H: k : 1,5) HMD Fresno (O:9,46H: z38 : -) HM III IIIb (Arizona) (O:65 H: c: z53) H1 Bovismorbificans (O:6,8,20 H: r,[i] : 1,5) HL Livingstone (O:6,7,14 H: d : l,w) HE Newport (O:6,8,20 H: e,h : 1,2) HZ4 Dusseldorf (O:6,8 H: z4, z24 : -) HG Dublin (O:1,9,12 [Vi] H: g,p : -) a Paratyphi A (O:1,2,12 H: a : [1,5]) b Paratyphi B (O:1,4,[5],12 H: b : 1,2) c Paratyphi C (O:6,7,[Vi] H: c: 1,5) d Livingstone (O:6,7,14 H: d : l,w) g, m Enteritidis (O:1,9,12 H: g,m : -) g, p Dublin (O:1,9,12 [Vi] H: g,p : -) h Newport (O:6,8,20 H: e,h : 1,2 [z67]) i Typhimurium (O:1,4,[5],12 H: i : 1,2) k Blockley (O:6,8 H: k : 1,5) m Enteritidis (O:1,9,12 H: g,m : -) p Dublin (O:1,9,12 [Vi] H: g,p : -) r Infantis (O:6,7,14 H: r : 1,5) v London (O:3,10 [15] H: l,v : 1,6) w Meleagridis (O:3,10 [15][15, 34] H: e,h : l,w) x Abony (O:1,4,[5],12,27 H: b : e,n,x) y Carrau (O:6,14,[24] H: y :1,7) z Worthington (O:1,13,23 H: z :l,w) z10 Lexington (O:3,10,[15] [15,34]H: z10 :1,5) z15 Brandenburg (O:1,4,[5],12,27 H:l,v:e,n,z15) 2 Newport (O:6,8,20 H: e,h : 1,2 [z67]) 5 Infantis (O:6,7,14 H: r : 1,5) 6 London (O:3,10 [15] H: l,v : 1,6) 7 Carrau (O:6,14,[24] H: y :1,7) 6

11- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΑΠΟ ΤΟΝ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ Όλα τα προϊόντα που κατασκευάζονται και διατίθενται στο εµπόριο από την εταιρία Bio-Rad υποβάλλονται σε όλες τις διαδικασίες του συστήµατος διασφάλισης ποιότητας, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την εµπορευµατοποίηση των τελικών προϊόντων. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος υποβάλλεται σε έλεγχο ποιότητας και διατίθεται στο εµπόριο µόνον όταν συµµορφώνεται µε τα κριτήρια αποδοχής. Η τεκµηρίωση σχετικά µε την παραγωγή και τον έλεγχο της κάθε παρτίδας τηρείται εντός της εταιρίας. 12- ΟΡΙΑ ΧΡΗΣΗΣ Η ταυτοποίηση του βακτηριακού είδους πρέπει να διεξάγεται πριν από τον προσδιορισµό του τύπου του ορού. Μόνο ένας πλήρης προσδιορισµός του οροτύπου του αντιγόνου O και H µπορεί να επιτρέψει την οριστική ορολογική ταυτοποίηση. 13- ΟΙ ΣΥΧΝΟΤΕΡΟΙ ΟΡΟΤΥΠΟΙ Οι τύποι Salmonella που αποµονώνονται συχνότερα είναι ο Salmonella enteritidis και ο Salmonella typhimurium. Οµάδα B (O: 4) O H Abony 1,4,[5],12,27 b e,n,x Agona 1,4,12,27 f,g,s [1,2] Brandenburg 1,4,[5],12,27 l,v e,n,z15 Bredeney 1,4,12,27 l,v 1,7 Coeln 1,4,[5],12 y 1,2 Derby 1,4,[5],12 f,g [1,2] Heidelberg 1,4,[5],12 r 1,2 Indiana 1,4,12 z 1,7 Paratyphi B 1,4,[5],12 b 1,2 Saintpaul 1,4,[5],12 e,h 1,2 Schwarzengrund 1,4,12,27 d 1,7 Stanley 1,4,[5],12,27 d 1,2 Typhimurium 1,4,[5],12 i 1,2 Οµάδα E1 - E2 (O: 3, 10-3, 15) Anatum 3,10 [15][15, 34] e,h 1,6 London 3,10 [15] l,v 1,6 Meleagridis 3,10 [15][15, 34] e,h l,w Muenster 3,10 [15][15, 34] e,h 1,5 Groupe E4 (O: 1, 3, 19) Senftenberg 1,3,19 g,[s],t - Οµάδα A (O: 1, 2) Paratyphi A 1,2,12 a [1,5] 7

Οµάδα D1 (O: 9) O H Dublin 1,9,12 [Vi] g,p Enteritidis 1,9,12 g,m - Napoli 1,9,12 l,z13 e,n,x Panama 1,9,12 l,v 1,5 Typhi 9,12,[Vi] d - Οµάδα C1 (O: 6, 7) Braenderup 6,7,14 e,h e,n,z15 Infantis 6,7,14 r 1,5 Livingstone 6,7,14 d l,w Mbandaka 6,7,14 z10 e,n,z15 Montevideo 6,7,14 g,m,[p],s [1,2,7] Ohio 6,7,14 b l,w Thompson 6,7,14 k 1,5 Virchow 6,7 r 1,2 Οµάδα C2 - C3 (O: 6, 8) Blockley 6,8 k 1,5 Bovismorbificans 6,8,20 r,[i] 1,5 Goldcoast 6,8 r l,w Hadar 6,8 z10 e,n,x Kottbus 6,8 e,h 1,5 Litchfield 6,8 l,v 1,2 Muenchen 6,8 d 1,2 [z67] Newport 6,8,20 e,h 1,2 [z67] Παράγοντες O υπογραµµισµένοι (παράδειγµα 1, 4, 12): παράγοντες των οποίων η παρουσία σχετίζεται µε την βακτηριοφαγική µετατροπή. Είναι παρόντες µόνο όταν η καλλιέργεια υφίσταται λυσιγονοποίηση από τον αντίστοιχο µετατρέποντα φάγο. Παράγοντες µεταξύ αγκυλών (παράδειγµα 9, 12, [Vi]): παράγοντας χρωµοσωµικού προσδιορισµού ο οποίος µπορεί να είναι παρών ή απών χωρίς να αλλάζει τα αποτέλεσµα της διάγνωσης του οροτύπου. 14- ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. POPOFF M. Y., LE MINOR L., 1997, Antigenic formulas of the Salmonella serovars, 7 th revision. WHO collaborating Centre for Reference and Research on Salmonella. Institut Pasteur, Paris, France. Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette France Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 2011/08 www.bio-rad.com 8