ΔΙΣΚΟΙ ΓΙΑ ΑΝΤΙΒΙΟΓΡΑΜΜΑ ΦΥΣΙΓΓΙΟ ΤΩΝ 50 ΔΙΣΚΩΝ

ΔΙΣΚΟΙ ΓΙΑ ΑΝΤΙΒΙΟΓΡΑΜΜΑ ΦΥΣΙΓΓΙΟ ΤΩΝ 50 ΔΙΣΚΩΝ Μελετη ευαισθησιας στους αντιμικροβιακους παραγοντες 2016/11 1 - ΚΛΙΝΙΚΗ ΑΞΙΑ Η χρήση των εν λόγω δίσκων συνίσταται στην ημιποσοτική, τρόπον τινά, αξιολόγηση in vitro της ευαισθησίας στους αντιμικροβιακούς παράγοντες βακτηριδίων ταχείας ανάπτυξης και ορισμένων απαιτητικών ειδών, μέσω μιας μεθόδου διάχυσης σε περιβάλλον γέλης. Η μέθοδος αυτή είναι σύμφωνη με την πρότυπη (τυποποιημένη) διαδικασία που δημοσιεύθηκε από την WHO (1) και υιοθετήθηκε ως συναινετικό πρότυπο από τις επιτροπές CLSI (2, 3) CA-SFM (4) και EUCAST (5) (υπόκειται σε τακτική επικαιροποίηση). Για τις συστάσεις σχετικά με τη διεξαγωγή του αντιβιογράμματος και την ερμηνεία του, πρέπει να ληφθούν υπόψη τα πιο πρόσφατα έγγραφα της CLSI (2,3), CA-SFM (4), EUCAST (5). 2- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗ Οι εμποτισμένοι με συγκεκριμένη συγκέντρωση αντιμικροβιακού παράγοντα χάρτινοι δίσκοι τοποθετούνται στην επιφάνεια κατάλληλου μέσου (A) στο οποίο προηγουμένως προσετέθη βαθμονομημένο ενοφθαλμίσιμο υλικό (A) για την καλλιέργεια του καθαρού και φρέσκου, προς δοκιμή βακτηριδίου. Μετά από επώαση του (A), τα τρυβλία Petri εξετάζονται και μετριούνται οι περιοχές αναστολής που περιβάλλουν τους δίσκους για να συγκριθούν με τις κρίσιμες τιμές (A) των διάφορων αντιμικροβιακών παραγόντων που υποβλήθηκαν σε δοκιμή, με απώτερο σκοπό τον προσδιορισμό της κλινικής κατηγοριοποίησης (ανθεκτικό, μέσης ευαισθησίας, ευαίσθητο). Η διάμετρος της περιοχής αναστολής είναι ανάλογη της ευαισθησίας του υπό δοκιμή βακτηριδίου. (A) σύμφωνα προς τις ισχύουσες συστάσεις (CLSI (2,3), CA-SFM (4), EUCAST (5) ). 3- ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΗ Οι δίσκοι έχουν διάσταση 6,5 mm και είναι από απορροφητικό χαρτί ανώτερης ποιότητας, εμποτισμένοι με αντιμικροβιακούς παράγοντες συγκεκριμένης συγκέντρωσης. Οι δίσκοι αναγνωρίζονται με σαφήνεια μέσω ενός συμβόλου, με 1 έως 3 γράμματα, εκτυπωμένο σε αμφότερες τις πλευρές του δίσκου (πίνακας 1). Οι δίσκοι της Bio-Rad διατίθενται σε φυσίγγια των 50 δίσκων συσκευασμένα σε στεγανοποιημένο περιέκτη με ξηραντικό. Πίνακας 1: Δίσκοι για αντιβιόγραμμα ΦΟΡΤΙΟ ΔΙΣΚΟΥ ΣΥΜΒΟΛΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ ΚΩΔΙΚΟΣ ΠΡΟΪΟΝΤΟΣ Amikacin AKN30 66148 Amoxicillin 25 µg AMX25 66138 Amoxicillin + Clavulanic Acid 2/1 µg 20/10 µg AUG3 AMC30 66680 66178 Ampicillin 2 µg 10 µg API2 AMP10 67288 66128 Ampicillin + Sulbactam 10/10 µg SAM20 67018 Azithromycin 15 µg AZM15 67008 Aztreonam ATM30 66928 Bacitracin 10 IU (1) BCT130 66158 1

ΦΟΡΤΙΟ ΔΙΣΚΟΥ ΣΥΜΒΟΛΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ ΚΩΔΙΚΟΣ ΠΡΟΪΟΝΤΟΣ Carbenicillin 100 µg CRB100 66198 Cefaclor CEC30 67498 Cefalexin CXN30 66208 Cefamandole FAM30 66238 Cefazolin CZN30 66258 Cefepime FEP30 66098 Cefixime 5 µg 10 µg FIX5 CFM10 67588 66418 Cefoperazone 75 µg CFP75 CPZ30 67618 66298 Cefoperazone + Sulbactam 75/ SCF105 66734 Cefotaxime 5 µg COX5 CTX30 67718 66368 Cefotetan CTT30 66428 Cefoxitin FOX30 66228 Cefpirome CPO30 66468 Cefpodoxime 10 µg CPD10 66918 Cefprozil CPR30 66488 Cefsulodin CFS30 66938 Ceftaroline 5 µg CPN5 68658 Ceftazidime 10 µg CZD10 CAZ30 67298 66308 Ceftibuten CTB30 67638 Ceftriaxone CRO30 66188 Cefuroxime CXM30 66358 Cephalothin CEF30 66218 Chloramphenicol CHL30 66278 Ciprofloxacin 5 µg CIP5 68648 Clarithromycin 15 µg CLR15 67058 Clindamycin 2 µg CMN2 66328 Colistin 10 µg 50 µg COL10 CST50 67268 66348 Doripenem 10 µg DOR10 67348 Doxycycline DOX30 66388 Ertapenem 10 µg ETP10 67518 Erythromycine 15 µg ERY15 66448 Flumequine UBN30 68918 Fosfomycin 50 µg 200 µg FSF50 FOS200 66458 67658 Fusidic Acid 10 µg FAD10 66518 Gentamicin 10 µg 10 IU (15 µg) GMN10 GMI15 GME30 66608 66548 67318 Gentamicin (high load) 120 µg 500 µg HLG120 GEN500 67598 66578 Imipenem 10 µg IPM10 66568 Isepamicin ISP30 66838 Kanamycin KMN30 66618 Kanamycin (high load) 1 mg KAN1 66628 Levofloxacin 5 µg LVX5 66858 Lincomycin 15 µg LCN15 66678 Linezolid 10 µg LIN10 67878 Linezolid LZD30 67388 Mecillinam 10 µg MEC10 66768 Meropenem 10 µg MEM10 67048 Metronidazole 4 µg MTR4 68908 Mezlocillin 75 µg MZN75 66708 Minocycline MNO30 66728 Moxalactam MOX30 66698 Moxifloxacin 5 µg MXF5 67098 Mupirocin 5 µg MUP5 67088 200 µg PUM200 67078 Nalidixic Acid NAL30 68618 Neomycin 30 IU NEO30 66748 Netilmicin 10 µg NTM10 NET30 67798 66758 2

ΦΟΡΤΙΟ ΔΙΣΚΟΥ ΣΥΜΒΟΛΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑ ΚΩΔΙΚΟΣ ΠΡΟΪΟΝΤΟΣ Nitrofurantoin 100 µg NFE100 67328 Nitrofurantoin 300 µg FTN300 68678 Nitroxolin 20 µg NIT20 68778 Norfloxacin 10 µg 5 µg NXN10 NOR5 66338 68238 Ofloxacin 5 µg OFX5 68938 Oleandomycin 15 µg OLE 66818 Oxacillin 1 µg 5 µg OXC1 OXA5 66888 66848 Oxolinic Acid 10 µg OAD10 68628 Pefloxacin 5 µg PEF5 68228 Penicillin 1 IU 6 µg (10 IU) PNG1 PEN10 67788 67218 Pipemidic Acid 20 µg PIM20 68638 Piperacillin 75 µg 100 µg PIL30 PIP75 PIR100 68478 67258 67228 Piperacillin + Tazobactam 30/6 µg 75/10 µg 100/10 µg PTZ36 PPT85 TZP110 67338 66498 67238 Polymixin 300 IU (50 µg) PXB300 67248 Pristinamycin 15 µg PTN15 67278 Quinupristin-Dalfopristin 15 µg QDF15 67528 Rifampicin 5 µg RIF5 RAM30 66648 67308 Sparfloxacin 5 µg SPX5 66538 Spectinomycin 100 µg SPT100 68798 Spiramycin 100 µg SPN100 67378 Streptomycin 10 µg SMN10 67418 Streptomycin (high load) 300 µg 500 µg HLS300 STR500 67608 67428 Sulphonamides 300 µg 200 µg SSS300 SUL200 67578 68408 Teicoplanin TEC30 68948 Telithromycin 15 µg TEL15 67538 Temocillin TEM30 66068 Tetracycline TET30 67448 Ticarcillin 75 µg TIC75 67458 Ticarcillin + Clavulanic Acid 75/10 µg TCC85 67468 Tigecycline 15 µg TGC15 67398 Tobramycin 10 µg TMN10 TOB30 67488 67358 Trimethoprim + Sulfamethoxazole 1.25/23.75 µg SXT25 68898 Trimethoprim 5 µg TMP5 68888 Vancomycin 5 µg VNC5 VAN30 67828 68928 4- ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ Η ημερομηνία λήξης αφορά μόνο τους δίσκους που περιέχονται σε άθικτα φυσίγγια και τα οποία αποθηκεύονται σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Η ημερομηνία λήξης και ο αριθμός παρτίδας αναγράφονται σε κάθε συσκευασία (φυσίγγιο και περιέκτη). Τα φυσίγγια των δίσκων πρέπει να φυλάσσονται μέσα στον περιέκτη τους, σε ξηρό χώρο και σε θερμοκρασία μεταξύ + 2 και + 8 C. Πριν τα ανοίξετε, αφήστε τους περιέκτες να σταθεροποιηθούν στην θερμοκρασία περιβάλλοντος (18-30 C) και, αφού ολοκληρωθεί η απόθεση των δίσκων, τοποθετήστε πάλι τα μη χρησιμοποιημένα φυσίγγια σε χώρο με θερμοκρασία μεταξύ + 2 και + 8 C. Μη χρησιμοποιείτε δίσκους των οποίων η ημερομηνία λήξης έχει παρέλθει. Μη χρησιμοποιείται φυσίγγιο δίσκων που αφέθηκε σε θερμοκρασία περιβάλλοντος (18-30 C) για περισσότερο από 8 ώρες, διαφορετικά ελέγξτε το επίπεδο αποδεκτότητας των επιδόσεών τους πριν συνεχίσετε τη χρήση τους (6). Εάν, μετά από την απόθεση, τα φυσίγγια διατηρήθηκαν εντός του διανεμητήρα (κατανομέα), τότε είναι απαραίτητο ο τελευταίος να διατηρηθεί σε θερμοκρασία + 2 έως +8 C, σε ξηρό χώρο μαζί με τα ξηραντικά στο εσωτερικό του. Η σταθερότητα των δίσκων των ανοικτών φυσιγγίων, που είναι τοποθετημένα στους διανεμητήρες (αποθηκευμένα σύμφωνα με τις συστάσεις και με τα ξηραντικά), επικυρώθηκε υπό συνθήκες ρουτίνας όπου παρέμειναν επί 6 εβδομάδες, εκτώς από τις περιπτώσεις αντιβιοτικών με το ειδικό σύμβολο μέσα στο οποίο υπάρχει η σταθερότητα του προιόντος σε εβδομάδες. 3

5 - ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΟ ΑΛΛΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ διανεμητήρας δίσκων : 6-7 δίσκοι αρ. αναφ. # 50294 12-16 δίσκοι αρ. αναφ. # 50295 μέσο καλλιέργειας (σύμφωνα προς τις ισχύουσες συστάσεις (CLSI (2,3), CA-SFM (4), EUCAST (5) ). αντιδραστήρια βακτηριακά στελέχη για τον έλεγχο ποιότητας Μάρτυρας θολότητας ισοδύναμος του προτύπου Mac Farland 0,5 αναγκαίο εργαστηριακό υλικό για τη διεξαγωγή αντιβιογραμμάτων δια της μεθόδου διάχυσης σε γελώδες περιβάλλον. 6- ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ ΚΑΤΑ ΤΗ ΧΡΗΣΗ Ακολουθήστε τις οδηγίες χρήσης σύμφωνα με τις ισχύουσες συστάσεις (CLSI (2,3), CA-SFM (4), EUCAST (5) ). Παρατηρείτε πάντα τις τεχνικές και λαμβάνετε τις προφυλάξεις σχετικά με τους μικροβιολογικούς κινδύνους. Μετά από τη χρήση, αποστειρώστε τις καλλιέργειες και όλα τα μολυσμένα υλικά. 7 - ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΔΟΚΙΜΗΣ Δείγματα : οι δίσκοι δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται για δοκιμή απευθείας στο βιολογικό δείγμα. Ανατρέξτε στις ισχύουσες συστάσεις (CLSI (2,3), CA-SFM (4), EUCAST (5) ) στις οποίες διευκρινίζεται ο τρόπος προετοιμασίας του ενοφθαλμίσιμου υλικού μιας πρόσφατης και καθαρής καλλιέργειας. Για όλα τα βήματα που απαιτούνται για τη διεξαγωγή του αντιβιογράμματος και τη λήψη αποτελεσμάτων, ανατρέξτε στις οδηγίες που συνιστούν οι επιτροπές CLSI (2,3), CA-SFM (4) και EUCAST (5) : Για την προετοιμασία του ενοφθαλμίσιμου υλικού, τη σπορά στα τρυβλία Petri, την επιλογή και τη διάταξη των προς δοκιμή δίσκων, τη θερμοκρασία και τη διάρκεια επώασης, οι επιτροπές CLSI (2,3), CA-SFM (4) και EUCAST (5) πρότειναν μια διαδικασία τυποποίησης. Ταυτόχρονα, συνιστάται η εφαρμογή των ορθών εργαστηριακών πρακτικών. 8- ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Μετρήστε με ακρίβεια τις διαμέτρους των περιοχών αναστολής που παρατηρούνται και συγκρίνατέ τις με τις κρίσιμες διαμέτρους που δίδονται από τους αρμόδιους φορείς (CLSI (2,3), CA-SFM (4) και EUCAST (5) ) Σε έναν δεδομένο μικροοργανισμό, ανάλογα με την παρατηρηθείσα διάμετρο και τις κρίσιμες διαμέτρους του αντιβιοτικού που υπεβλήθη σε δοκιμή, αποδίδεται μια κλινική κατηγορία (ανθεκτικό, μέσης ευαισθησίας, ευαίσθητο, ή μη ευαίσθητο. Αυτά τα κριτήρια κλινικής κατηγοριοποίησης βάσει των κρίσιμων διαμέτρων, τυγχάνουν επικαιροποίησης κατά τακτά χρονικά διαστήματα από την (CLSI (2,3), CA-SFM (4) και EUCAST (5) ). 9- ΕΠΙΔΟΣΕΙΣ / ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Οι επιδόσεις των αντιβιοτικών δίσκων ελέγχονται βάσει του τύπου του μορίου του αντιβιοτικού που χρησιμοποιήθηκε, μέσω των ακόλουθων στελεχών : - Escherichia coli ATCC 25922 - Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 - Staphylococcus aureus ATCC 25923 - Enterococcus faecadis ATCC 33186 - Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 - Enterococcus faecadis ATCC 29212 - Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 - Clostridium perfringens ATCC 13124 - Haemophilus influenzae ATCC 49247 - Clostridium sporogenes ATCC 19404 Στον πίνακα 2 δίνονται τα αποδεκτά όρια των διαμέτρων αναστολής, οι οποίες προέκυψαν με διάχυση σε γελώδες περιβάλλον, για τα στελέχη αναφοράς που απαριθμούνται ακολούθως. Πίνακας 2: ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Φορτίο δίσκου Αποδεκτά όρια διαμέτρων αναστολής (mm) S. aureus P. aeruginosa S. pneumoniae ATCC 25923 ATCC 27853 ATCC 49619 Πρότυπο E. coli ATCC 25922 Amikacin CLSI 19-26 20-26 18-26 Amoxicillin 25 µg Εσωτερικό 19-25 Amoxicillin + Clavulanic CLSI 20/10 µg 18-24 28-36 Acid Ampicillin 10 µg CLSI 16-22 27-35 Ampicillin + Sulbactam 10/10 µg CLSI 19-24 29-37 Azithromycin 15 µg CLSI 21-26 Aztreonam CLSI 28-36 23-29 Bacitracin 10 UI Εσωτερικό 17-22 Carbenicilin 100 µg CLSI 23-29 18-24 Cefaclor CLSI 23-27 27-31 Cefalexin Εσωτερικό 15-21 22-28 Cefamandole CLSI 26-32 26-34 Cefazolin CLSI 21-27 29-35 Cefepime CLSI 31-37 23-29 24-30 Cefixime 10 µg Εσωτερικό 26-30 H. influenzae ATCC 49247 4

Πίνακας 2: ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Φορτίο δίσκου Αποδεκτά όρια διαμέτρων αναστολής (mm) S. aureus P. aeruginosa S. pneumoniae ATCC 25923 ATCC 27853 ATCC 49619 Πρότυπο E. coli ATCC 25922 Cefixime 5 µg CLSI 23-27 Cefoperazone Εσωτερικό 26-30 23-28 21-25 Cefoperazone 75 µg CLSI 28-34 24-33 23-29 Cefoperazone + Εσωτερικό 75/ 27-33 23-30 Sulbactam Cefotaxime CLSI 29-35 25-31 18-22 Cefotetan CLSI 28-34 17-23 Cefpirome Εσωτερικό 29-35 26-32 23-29 Cefpodoxime 10 µg CLSI 23-28 19-25 Cefprozil CLSI 21-27 27-33 Cefsulodin Εσωτερικό 20-28 25-32 Ceftazidime CLSI 25-32 16-20 22-29 Ceftibuten CLSI 27-35 Ceftriaxone CLSI 29-35 22-28 17-23 Cefuroxime CLSI 20-26 27-35 Cephalothin CLSI 15-21 29-37 Chloramphenicol CLSI 21-27 19-26 Ciprofloxacin 5 µg CLSI 30-40 22-30 25-33 Clarithromycin 15 µg CLSI 26-32 Clindamycin 2 µg CLSI 24-30 Colistin 10 µg CLSI 11-17 11-17 Colistin 50 µg CA-SFM 17-22 Doxycycline CLSI 18-24 23-29 Ertapenem 10 µg CLSI 29-36 13-21 Erythromycine 15 µg CLSI 22-30 Flumequine Εσωτερικό 25-31 Fosfomycin 50 µg CA-SFM 24-35 Fosfomycin 200 µg CLSI 22-30 25-33 Fusidic acid 10 µg CA-SFM 29-34 Gentamicin 10 µg CLSI 19-26 19-27 17-23 Gentamicin 10 UI CA-SFM 22-26 24-28 16-22 Imipenem 10 µg CLSI 26-32 20-28 Isepamicin Εσωτερικό 21-26 17-23 16-23 Kanamycin CLSI 17-25 19-26 Levofloxacin 5 µg CLSI 29-37 25-30 19-26 Lincomycin 15 µg CA-SFM 25-29 Linezolid CLSI 25-32 Mecillinam 10 µg CLSI 24-30 Meropenem 10 µg CLSI 28-34 29-37 27-33 Mezlocillin 75 µg CLSI 23-29 19-25 Minocycline CLSI 19-25 25-30 Moxalactam CLSI 28-35 18-24 17-25 Moxifloxacin 5 µg CLSI 28-35 28-35 17-25 Mupirocin 5 µg Εσωτερικό 18-26 Mupirocin 200 µg CLSI 29-38 Nalidixic Acid CLSI 22-28 Neomycin 30 UI Εσωτερικό 17-23 18-27 Netilmicin CLSI 22-30 22-31 17-23 Nitrofurantoin 300 µg CLSI 20-25 18-22 Nitroxolin 20 µg Εσωτερικό 15-22 Norfloxacin 5 µg Εσωτερικό 26-33 13-23 20-27 Norfloxacin 10 µg CLSI 28-35 17-28 22-29 Ofloxacin 5 µg Εσωτερικό 25-32 21-28 14-20 Oleandomycin 15 µg Εσωτερικό 19-28 Oxacillin 5 µg CA-SFM 27-34 Oxacillin 1 µg CLSI 18-24 H. influenzae ATCC 49247 5

Πίνακας 2: ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Φορτίο δίσκου Αποδεκτά όρια διαμέτρων αναστολής (mm) S. aureus P. aeruginosa S. pneumoniae ATCC 25923 ATCC 27853 ATCC 49619 Πρότυπο E. coli ATCC 25922 Oxolinic Acid 10 µg Εσωτερικό 22-30 Pefloxacin 5 µg CA-SFM 29-35 26-29 Penicillin 6 µg CLSI 26-37 Pipemidic Acid 20 µg Εσωτερικό 22-30 Piperacillin 100 µg CLSI 24-30 25-33 Piperacillin 75 µg Εσωτερικό 24-33 Piperacillin + Tazobactam 75/10 µg Εσωτερικό 22-29 24-31 24-33 Piperacillin + Tazobactam 100/10 µg CLSI 24-30 27-36 25-33 Polymixin 300 UI CLSI 13-19 Pristinamycin 15 µg CA-SFM 27-32 Quinupristin-Dalfopristin 15 µg CLSI 21-28 19-24 15-21 Rifampicin 5 µg CLSI 26-34 Rifampicin CA-SFM 34-39 Sparfloxacin 5 µg CLSI 30-38 27-33 21-29 Spectinomycin 100 µg Εσωτερικό 19-25 Spiramycin 100 µg Εσωτερικό 18-26 Streptomycin 10 µg CLSI 12-20 14-22 Sulfonamides 300 µg CLSI 24-34 Sulfonamides 200 µg Εσωτερικό 17-27 Teicoplanin CLSI 15-21 Telithromycin 15 µg CLSI 27-33 17-23 Temocillin Εσωτερικό 17-23 Tetracycline CLSI 18-25 24-30 Ticarcillin 75 µg CLSI 24-30 21-27 Ticarcillin + Clavulanic CLSI 75/10 µg Acid 24-30 29-37 20-28 Tigecycline 15 µg CLSI 20-27 20-25 23-29 Tobramycin 10 µg CLSI 18-26 19-29 20-26 Trimethoprim 5 µg CLSI 21-28 19-26 Trimethoprim + 1,25/23,75 CLSI Sulfamethoxazole µg 23-29 24-32 Vancomycin CLSI 17-21 Για τον έλεγχο ποιότητας (εσωτερικά πρότυπα) : Gentamicin 120 µg : E. faecalis ATCC 29212 (16-23 mm) Streptomycin 300 µg : E. faecalis ATCC 29212 (14-20 mm) Gentamicin 500 µg : S. aureus ATCC 25923 (30-34 mm), E. faecalis ATCC 29212 (18-28 mm) Kanamycin 1 mg : S. aureus ATCC 25923 ( 1 E. faecalis 4 m m ), ATCC 29212 (> 14 mm). Streptomycin 500 µg : S. aureus ATCC 25923 (24-28 mm), E. faecalis ATCC 29212 (14-25 mm). Metronidazole 4µg : Clostridium perfringens ATCC 13124, Clostridium sporogenes ATCC 19404 15 mm Cefoperazone + Sulbactam 75/30µg : E. coli ATCC 35218 (24-30 mm) Mupirocin 200 µg : S. aureus ATCC BAA-1708 (6 mm) Temocillin : E. coli ATCC 35218 (22-28 mm) H. influenzae ATCC 49247 Το Haemophilus influenzae ATCC 10211 συνιστάται ως πρόσθετο στέλεχος ελέγχου ποιότητας, χρήσιμο για τον έλεγχο των διατροφικών ιδιοτήτων σε περιβάλλον HTM. Παρά την έλλειψη αξιόπιστων κριτηρίων ερμηνείας για το S. pneumoniae με ορισμένες ß-λακταμίνες, το Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 είναι το στέλεχος που χρησιμοποιείται για τον έλεγχο ποιότητας όλων των δοκιμών αντιβιογραμμάτων για το Streptococcus spp. Το Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 συνιστάται για τη δοκιμή των δίσκων σπεκτινομυκίνης (spectinomycine) με αποδεκτή διάμετρο των 23 έως 29 mm (CLSI). Η υποβάθμιση του φορτίου του δίσκου οξακιλλίνης (oxacilline) προσδιορίζεται καλύτερα από ότι αυτό των άλλων δίσκων με το Staphylococcus aureus ATCC 25923 με διάμετρο των 18 έως 24 mm. Following the EUCAST guidelines (version V3.1, 2013), the performances of antibiotic disks are systematically controlled by using the following strains: - Escherichia coli ATCC 25922 - Staphylococcus aureus ATCC 29213 - Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 - Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 - Enterococcus faecalis ATCC 29212 - Haemophilus influenzae NCTC 8468 6

Στον πίνακα 3 δίνονται τα αποδεκτά όρια των διαμέτρων αναστολής, οι οποίες προέκυψαν με διάχυση σε γελώδες περιβάλλον, για τα στελέχη αναφοράς που απαριθμούνται ακολούθως. Πίνακας 3: ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ Φορτίο δίσκου E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 29213 Αποδεκτά όρια διαμέτρων αναστολής (mm) P. aeruginosa ATCC 27853 S. pneumoniae ATCC 49619 H. influenzae NCTC 8468 E. faecalis ATCC 29212 Amoxicillin + Clavulanic Acid 2/1 µg 17-23 Ampicillin 2 µg 19-25 15-21 Cefotaxime 5 µg 25-31 29-35 Cefoxitin 23-29 24-30 Ceftaroline 5 µg 24-30 24-30 Ceftazidime 10 µg 23-29 21-27 Doripenem 10 µg 27-35 28-35 31-37 Gentamicin 12-18 Linezolid 10 µg 21-27 23-29 19-25 Netilmicin 10 µg 18-24 20-26 15-21 Nitrofurantoin 100 µg 17-23 18-24 Penicillin 1 IU 12-18 Piperacillin 21-27 Piperacillin + Tazobactam 30/6 µg 23-29 20-26 Tobramycin 12-18 Vancomycin 5 µg 17-23 10-16 10-ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΑΠΟ ΤΟΝ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ Όλα τα προϊόντα που κατασκευάζονται και διατίθενται στο εμπόριο από την εταιρία Bio-Rad υποβάλλονται σε όλες τις διεργασίες του συστήματος διασφάλισης ποιότητας, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την εμπορευματοποίηση των τελικών προϊόντων. Κάθε παρτίδα τελικού προϊόντος υποβάλλεται σε έλεγχο ποιότητας και διατίθεται στο εμπόριο μόνον όταν συμμορφώνεται με τα κριτήρια αποδοχής. Η τεκμηρίωση σχετικά με την παραγωγή και τον έλεγχο της κάθε παρτίδας τηρείται εντός της εταιρίας. 11- ΟΡΙΑ ΧΡΗΣΗΣ Οι κλινικές κατηγοριοποιήσεις (ανθεκτικό, μέσης ευαισθησίας, ευαίσθητο και μη ευαίσθητο) ενδέχεται να ποικίλουν μόνο κατά ένα χιλιοστό, κάτι που αντιστοιχεί σε σύνηθες περιθώριο εργαστηριακού σφάλματος. Πέραν των αντιμικροβιακών παραγόντων που απαριθμούνται στον πίνακα 2, μπορούν να χρησιμοποιηθούν και άλλο παράγοντες. Οι δοκιμές ευαισθησίας στους παράγοντες αυτούς πρέπει να ερμηνεύονται βάσει της σαφούς παρουσίας ή απουσίας μιας περιοχής αναστολής και πρέπει να θεωρούνται αποκλειστικά ποιοτικές έως ότου ολοκληρωθούν οι ζώνες ερμηνείας. Πρέπει να καταγράφονται όλες οι διάμετροι των ζωνών. Η τελική ερμηνεία, όπως και για κάθε βιολογική ερμηνεία, δεν μπορεί να στηρίζεται στο αποτέλεσμα μιας δοκιμής αλλά σε ένα σύνολο κλινικών δεδομένων καθώς και σε βιοχημικά, κυτταρολογικά και ανοσολογικά αποτελέσματα. Οι επιδόσεις της δοκιμής δεν εξαρτώνται μόνο από την ενεργότητα του δίσκου αλλά και από παράγοντες όπως, η χρήση ενοφθαλμίσιμου υλικού, τα κατάλληλα στελέχη μάρτυρες, το κατάλληλο και προελεγμένο μέσο καλλιέργειας και η κατάλληλη θερμοκρασία αποθήκευσης. 7

12 ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. World Heath Organization Expert Committee on Biological Standardization. 1992. Technical report series 822. W.H.O., Geneva. 2. CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute. 2012. Approved standard M2-A11. Performance standards for antimicrobial susceptibility tests, 10th ed. CLSI, Wayne, Pa. 3. CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute. 2013. CLSI document M100-S23. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing, 21th informational supplement, Wayne, Pa. 4. CA-SFM: Comité de l antibiogramme. 2013. French Society of Microbiology. 5. EUCAST: European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. EUCAST QC Tables V3.1, 2013. 6. V. Loncle-Provot, E. Keller, M.O. Gourdin, M.L. Garrigues. Etude de la stabilité des δίσκοι antibiotiques dans les conditions d'utilisation en routine, 18th inter disciplinary meeting on anti-infectious chemotherapy, Paris, Dec.3/4 1998. Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette France Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 2016/11 www.bio-rad.com 8