FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Progesterone Receptor Ready-to-Use (Dako Autostainer/Autostainer Plus) Κωδικός IS068 Προβλεπόµενη χρήση Για in vitro διαγνωστική χρήση. To FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Progesterone Receptor,, Ready-to-Use, (Dako Autostainer/Autostainer Plus), προορίζεται για ανοσοϊστοχηµική χρήση σε συνδυασµό µε το κιτ οπτικοποίησης EnVision FLEX+, High ph και τα όργανα Autostainer/Autostainer Plus για τον ηµιποσοτικό εντοπισµό του ανθρώπινου υποδοχέα προγεστερόνης σε ανθρώπινο καρκίνωµα µαστού µονιµοποιηµένο µε φορµαλίνη και εγκλεισµένο σε παραφίνη. Αυτό το αντίσωµα επισηµαίνει κύτταρα θετικά στον υποδοχέα της προγεστερόνης και είναι χρήσιµο στην αξιολόγηση της κατάστασης του υποδοχέα προγεστερόνης σε ανθρώπινα καρκινώµατα µαστού. Η κλινική ερµηνεία της χρώσης ή της απουσίας χρώσης πρέπει να συµπληρώνεται µε µορφολογικές µελέτες που χρησιµοποιούν κατάλληλους µάρτυρες και πρέπει να αξιολογούνται στο πλαίσιο του κλινικού ιστορικού του ασθενούς και άλλων διαγνωστικών εξετάσεων από ειδικό παθολόγο. Συνώνυµo για το αντιγόνο Περίληψη και επεξήγηση Αντιδραστήριο που παρέχεται PR Ο ρόλος των υποδοχέων των στεροειδών ορµονών στον καρκίνο του µαστού είναι ευρέως γνωστός (1,2). Η απουσία των υποδοχέων οιστρογόνου (ER) και των υποδοχέων προγεστερόνης (PR) αποτελεί προγνωστικό δείκτη για την πρώιµη υποτροπή και τα µειωµένα ποσοστά επιβίωσης ασθενών µε καρκίνο του µαστού (3-6). Επίσης, η παρουσία των ER και PR στους όγκους προβλέπει την πιθανότητα ωφέλειας από τη θεραπεία µε tamoxifen και άλλες θεραπείες που σχετίζονται µε το ενδοκρινικό σύστηµα. Η µέτρηση των ER και PR µπορεί να πραγµατοποιηθεί είτε ηµιποσοτικά χρησιµοποιώντας τη µέθοδο IHC, είτε ποσοτικά χρησιµοποιώντας τις µεθόδους DCC ή EIA. Ο συσχετισµός µεταξύ του ηµιποσοτικού και του ποσοτικού προσδιορισµού του PR κυµαίνεται από 73 έως 91%, ανάλογα µε το εργαστήριο και το χρησιµοποιούµενο αντίσωµα (7-9). Ανατρέξτε στο εγχειρίδιο General Instructions for Immunohistochemical Staining (Γενικές οδηγίες για την ανοσοϊστοχηµική χρώση) της Dako ή στις οδηγίες του συστήµατος ανίχνευσης των διαδικασιών IHC για:1) την Αρχή της διαδικασίας, 2) τα Υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται, 3) την Αποθήκευση, 4) την Προετοιµασία δειγµάτων, 5) τη ιαδικασία χρώσης, 6) τον Ποιοτικό έλεγχο, 7) την Αντιµετώπιση προβληµάτων, 8) την Ερµηνεία της χρώσης, 9) τους Γενικούς περιορισµούς. Έτοιµο προς χρήση µονοκλωνικό αντίσωµα ποντικού που παρέχεται σε υγρή µορφή, σε ρυθµιστικό διάλυµα που περιέχει σταθεροποιητική πρωτεΐνη και 0,015 mol/l NaN 3. Κλώνος: PgR 636 (10) Ισότυπος: IgG1, κ Ανοσογόνο Πλήρους µήκους ανθρώπινος υποδοχέας προγεστερόνης, Α-τύπου, ανασυνδυασµένος και µονιµοποιηµένος σε φορµαλίνη (10) Ειδικότητα Το Anti-PR, PgR 636 έχει διαπιστωθεί (µε στυπώµατα Western σε ολικά κυτταρικά εκχυλίσµατα) ότι αντιδρά και µε τους δύο τύπους PR-A και PR-B, καθώς και µε τον PR είτε αυτός είναι ελεύθερος είτε προσδεδεµένος στην ορµόνη (10). Ο επίτοπος έχει χαρτογραφηθεί στην αµινοτελική περιοχή που είναι κοινή µεταξύ των PR-A και PR-B. Προφυλάξεις 1. Για in vitro διαγνωστική χρήση. 2. Για επαγγελµατίες χρήστες. 3. Το προϊόν αυτό περιέχει νατραζίδιο (NaN 3), µια χηµική ουσία που είναι ιδιαίτερα τοξική σε καθαρή µορφή. Στις συγκεντρώσεις του προϊόντος, παρόλο που δεν έχει ταξινοµηθεί ως επικίνδυνο, το νατραζίδιο ενδέχεται να αντιδράσει µε τις µολύβδινες ή χάλκινες υδραυλικές σωληνώσεις και να δηµιουργήσει ιδιαίτερα εκρηκτικές εναποθέσεις µεταλλικών αζιδίων. Κατά την απόρριψη, ξεπλύνετε µε άφθονο νερό, για να αποτρέψετε τη συσσώρευση µεταλλικών αζιδίων στις σωληνώσεις. 4. Όπως ισχύει για κάθε προϊόν βιολογικής προέλευσης, πρέπει να εφαρµόζονται οι δέουσες διαδικασίες χειρισµού. 5. Πρέπει να φοράτε κατάλληλα Μέσα ατοµικής προστασίας για να αποφύγετε την επαφή µε τα µάτια και το δέρµα. 6. Το αχρησιµοποίητο διάλυµα πρέπει να απορρίπτεται σύµφωνα µε τους τοπικούς, κρατικούς και οµοσπονδιακούς κανονισµούς. Απόθεµα, φύλαξη Φυλάσσετε σε θερµοκρασία 2-8 C. Μην το χρησιµοποιείτε µετά την ηµεροµηνία λήξης που αναγράφεται στο φιαλίδιο. Αν τα αντιδραστήρια φυλάσσονται σε διαφορετικές συνθήκες από εκείνες που προδιαγράφονται, ο χρήστης πρέπει να επαληθεύσει τις συνθήκες. εν υπάρχουν εµφανείς ενδείξεις που να υποδεικνύουν την αστάθεια του προϊόντος αυτού. Για το λόγο αυτό, οι θετικοί και αρνητικοί µάρτυρες πρέπει να εξετάζονται ταυτόχρονα µε τα δείγµατα ασθενών. Αν παρατηρηθεί µη αναµενόµενη χρώση, που δεν µπορεί να ερµηνευτεί από τις διακυµάνσεις των εργαστηριακών διαδικασιών και υπάρχουν υποψίες για πρόβληµα στο αντίσωµα, επικοινωνήστε µε το Τµήµα τεχνικής υποστήριξης της Dako. (117239-004) 307142GR_004 σελ. 1/5
Προετοιµασία δείγµατος που συµπεριλαµβάνει υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται ιαδικασία χρώσης που συµπεριλαµβάνει υλικά που απαιτούνται, αλλά δεν παρέχονται Ερµηνεία χρώσης Ειδικοί περιορισµοί προϊόντος Χαρακτηριστικά απόδοσης Τοµές παραφίνης: Το αντίσωµα µπορεί να χρησιµοποιηθεί για τη σήµανση τοµών ιστού µονιµοποιηµένων µε φορµαλίνη και εγκλεισµένων σε παραφίνη. Τα δείγµατα ιστού πρέπει να κόβονται σε τοµές πάχους περίπου 4 µm. Προεπεξεργασία: Απαιτείται προεπεξεργασία τοµών ιστών µονιµοποιηµένων µε φορµαλίνη και εγκλεισµένων σε παραφίνη. Η λήψη βέλτιστων αποτελεσµάτων επιτυγχάνεται µε την προεπεξεργασία των ιστών µε HIER χρησιµοποιώντας αραιωµένο EnVision FLEX Target Retrieval Solution, High ph (50x) (Κωδικοί K8012/K8004). Η αποπαραφίνωση, η επανυδάτωση και η ανάκτηση επιτόπου είναι δυνατόν να πραγµατοποιηθούν στο Dako PT Link (Κωδικός PT100/PT101/PT200). Ανατρέξτε στον οδηγό χρήσης του PT Link για λεπτοµέρειες. Οι παρακάτω παράµετροι θα πρέπει να χρησιµοποιηθούν για το PT Link: Θερµοκρασία προθέρµανσης: 65 C, θερµική ανάκτηση επιτόπου και χρόνοι: 97 C για 20 (±1) λεπτά, ψύξη σε θερµοκρασία 65 C. Αφαιρέστε τη σχάρα των αντικειµενοφόρων από το δοχείο PT και αµέσως εµβαπτίστε τις αντικειµενοφόρους σε δοχείο (π.χ. PT Link Rinse Station, Κωδικός PT109) που περιέχει αραιωµένο ρυθµιστικό διάλυµα πλύσης EnVision FLEX Wash Buffer (20X) (Κωδικός K8007) σε θερµοκρασία δωµατίου. Αφήστε τις αντικειµενοφόρους πλάκες στο Wash Buffer για 1-5 λεπτά. Οι τοµές ιστού δεν πρέπει να στεγνώνουν κατά την προεπεξεργασία ή κατά τη διάρκεια της παρακάτω ανοσοϊστοχηµικής διαδικασίας χρώσης. Για καλύτερη προσκόλληση των τοµών ιστού στις γυάλινες αντικειµενοφόρους πλάκες, συνιστάται η χρήση των FLEX IHC Microscope Slides (Κωδικός K8020). Μετά τη χρώση, οι τοµές πρέπει να αφυδατωθούν, να υποστούν διαύγαση και να επικαλυφθούν χρησιµοποιώντας µέσα µόνιµης επικάλυψης. Το συνιστώµενο σύστηµα οπτικοποίησης είναι το EnVision FLEX+, Mouse, High ph, (Link) (Κωδικός K8012). Τα βήµατα χρώσης και οι χρόνοι επώασης είναι προγραµµατισµένα εκ των προτέρων στο λογισµικό των οργάνων Dako Autostainer/Autostainer Plus, χρησιµοποιώντας τα εξής πρωτόκολλα: Φόρµα πρωτοκόλλου: FLEXRTU2 (όγκος διανοµής 200 µl) ή FLEXRTU3 (όγκος διανοµής 300 µl) Αυτόµατο πρόγραµµα: PR (χωρίς αντίχρωση) ή Αυτόµατο πρόγραµµα: PRH (µε αντίχρωση) Το βήµα Auxiliary (Βοηθητικό) πρέπει να ρυθµιστεί σε "rinse buffer" (ρυθµιστικό διάλυµα πλύσης) σε κύκλους χρώσης µε 10 αντικειµενοφόρους. Για κύκλους χρώσης µε περισσότερες από 10 αντικειµενοφόρους, το βήµα Auxiliary θα πρέπει να ρυθµιστεί σε "none" (κανένα). Αυτό εξασφαλίζει συγκρίσιµους χρόνους πλύσης. Όλα τα βήµατα επώασης πρέπει να πραγµατοποιούνται σε θερµοκρασία δωµατίου. Για λεπτοµέρειες, ανατρέξτε στο Εγχειρίδιο χρήσης για το συγκεκριµένο όργανο. Εάν τα πρωτόκολλα δεν είναι διαθέσιµα στο όργανο Dako Autostainer που χρησιµοποιείτε, επικοινωνήστε µε την τεχνική υπηρεσία της Dako. Συνιστάται αντίχρωση µε αιµατοξυλίνη, χρησιµοποιώντας το EnVision FLEX Hematoxylin, (Dako Autostainer/Autostainer Plus) (κωδικός K8018). Συνιστάται η χρήση µη υδατικού µέσου µόνιµης στερέωσης. Αρνητικοί και θετικοί µάρτυρες πρέπει να αναλύονται ταυτόχρονα µε τα δείγµατα ασθενών χρησιµοποιώντας το ίδιο πρωτόκολλο. Ο ιστός θετικού µάρτυρα πρέπει να περιλαµβάνει κυλινδρικά επιθηλιακά κύτταρα, τα πλακώδη επιθηλιακά κύτταρα βάσης και τα κύτταρα στρώµατος, και οι δοµές/κύτταρα πρέπει να παρουσιάζουν τα πρότυπα αντίδρασης όπως περιγράφονται για αυτόν τον ιστό σε όλα τα θετικά δείγµατα του "Χαρακτηριστικά απόδοσης". Το προτεινόµενο αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα είναι το FLEX Negative Control, Mouse (Dako Autostainer/Autostainer Plus) (κωδικός IS750). Το πρότυπο της κυτταρικής χρώσης είναι πυρηνικό. Εάν παρατηρηθεί κυτταροπλασµατική επισήµανση, θα πρέπει να θεωρηθεί µη ειδική. Ως θετικό αποτέλεσµα ορίζεται η πυρηνική χρώση σε 1% των κυττάρων του όγκου σε οποιαδήποτε ένταση χρώσης. Αυτό είναι συνεπές µε τη συνιστώµενη τιµή αποκλεισµού 1% θετικών κυττάρων όγκου του ASCO/CAP για θετική αξιολόγηση (11). 1. Ψευδώς αρνητικά αποτελέσµατα είναι δυνατό να οφείλονται στην αποδόµηση του αντιγόνου στους ιστούς µε την πάροδο του χρόνου. Τα δείγµατα πρέπει να χρωµατίζονται εντός 2 µηνών από την τοποθέτηση των ιστών στις αντικειµενοφόρους και εφόσον φυλάσσονται σε θερµοκρασία δωµατίου (12). 2. Τα λεµφοκύτταρα και τα στρωµατικά κύτταρα µπορούν να εµφανίσουν θετική χρώση µε το αντίσωµα FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human PR clone PgR 636 και δεν πρέπει να ερµηνεύονται ή να καταµετρούνται ως κύτταρα όγκου χρώσης για το PR. 3. Για βέλτιστα και επαναλήψιµα αποτελέσµατα, η πρωτεΐνη PR απαιτεί ανάκτηση στόχου όταν οι ιστοί µονιµοποιούνται µε το συνήθη τρόπο (ουδέτερο ρυθµιστικό διάλυµα φορµαλίνης) και εγκλείονται σε παραφίνη. 4. Η χρήση του Dako Anti-PR, σε ιστούς µε µονιµοποιητικά διαφορετικά της φορµαλίνης δεν έχει επικυρωθεί. Πιστότητα: Για την εξέταση συλλέχθηκαν σειρές τοµών από κάθε ένα από τα 12 διαφορετικά τεµάχια καρκινώµατος µαστού, µονιµοποιηµένα σε φορµαλίνη και εγκλεισµένα σε παραφίνη, τα οποία αντιπροσωπεύουν ένα δυναµικό εύρος έκφρασης του PR. Η εξέταση πραγµατοποιήθηκε ως εξής: Πιστότητα εντός κύκλων: Ακολουθώντας το τυπικό πρωτόκολλο του EnVision FLEX+, High ph, τρεις τοµές από κάθε τεµάχιο ιστού χρωµατίστηκαν µε Anti-PR,. Ταυτόχρονα, µία τοµή από κάθε τεµάχιο ιστού χρωµατίστηκε µε ένα αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα. Πιστότητα µεταξύ κύκλων: Η παραπάνω διαδικασία χρώσης µίας τοµής από κάθε τεµάχιο ιστού επαναλήφθηκε επί πέντε µη διαδοχικές ηµέρες. Ταυτόχρονα, µία τοµή από κάθε τεµάχιο ιστού χρωµατίστηκε µε ένα αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα. Πιστότητα µεταξύ οργάνων: Η παραπάνω διαδικασία χρώσης συνολικά τριών τοµών από κάθε τεµάχιο ιστού πραγµατοποιήθηκε σε τρία διαφορετικά όργανα Autostainer από τρεις διαφορετικούς χειριστές. Ταυτόχρονα, µία αντικειµενοφόρος από κάθε τεµάχιο ιστού χρωµατίστηκε µε ένα αντιδραστήριο αρνητικού µάρτυρα. Τα πειράµατα πιστότητας µε το Anti-PR, έδωσαν συνεπή αποτελέσµατα για τις εξετάσεις χρώσης εντός κύκλων, µεταξύ κύκλων και µεταξύ οργάνων. ιατηρήθηκαν σταθερά οι ίδιες συνθήκες εξέτασης καθ' όλη τη διάρκεια της µελέτης, ενώ τα αντιδραστήρια µεταξύ των κύκλων παρέµειναν αποθηκευµένα στους 2-8 ºC. Φυσιολογικοί ιστοί: Στον Πίνακα 1 συνοψίζεται η ανοσοαντιδραστικότητα του Anti-PR, στην προτεινόµενη σειρά φυσιολογικών ιστών. Όλοι οι ιστοί είχαν µονιµοποιηθεί σε φορµαλίνη και εγκλειστεί σε παραφίνη και κατόπιν χρωµατίστηκαν µε το Anti- PR,, σύµφωνα µε τις οδηγίες του ένθετου της συσκευασίας. Παρατηρήθηκε κυτταροπλασµατική χρώση µε το Anti-PR, σε αρκετά διαφορετικά στοιχεία ιστού, συµπεριλαµβανοµένων των εξής: επιθήλιο, στρώµα, ενδιάµεσα κύτταρα και φλεγµονώδη κύτταρα. Ενώ παρατηρήθηκε κυτταροπλασµατική χρώση, δεν θεωρείται διαγνωστική σύµφωνα µε την προοριζόµενη χρήση αυτού του αντισώµατος. (117239-004) 307142GR_004 σελ. 2/5
Πίνακας 1: Σύνοψη της δραστικότητας φυσιολογικών ιστών του Anti-PR, Τύπος ιστού (πλήθος που εξετάστηκε) Επινεφρίδιο (3) Θετικά στοιχεία ιστού Τύπος ιστού Θετικά στοιχεία ιστού (πλήθος που εξετάστηκε) Νεύρο, περιφερικό (3) 0/3 1/3 κύτταρα στη σπειροειδή περιοχή (50%), 1/3 κύτταρα στη σπειροειδή Ωοθήκη (3) 3/3 Στρωµατικά κύτταρα (50-70%), περιοχή (50%), Μυελός των οστών (3) 0/3 Πάγκρεας (3) 2/3 Νησίδες του Langerhans (50-90%), Μαστός (3) 2/3 Αδενικά επιθηλιακά κύτταρα Παραθυρεοειδής (3) 3/3 Αδενικά επιθηλιακά κύτταρα (50-90%), (1-10%), Παρεγκεφαλίδα (3) 0/3 Υπόφυση (3) 3/3 Κύτταρα της υπόφυσης (1-40%), Κυρίως εγκέφαλος (3) 1/3 Μηνιγγικά κύτταρα (100%), Προστάτης (3) 3/3 Στρωµατικά κύτταρα (30-80%), Τράχηλος (3) 3/3 Επιθηλιακά κύτταρα (50-90%), Σιελογόνος αδένας (3) 3/3 Αδενικά επιθηλιακά κύτταρα (<1%-60%), 3/3 Στρώµα, έρµα (3) 0/3 συµπεριλαµβανοµένων των φλεγµονωδών κυττάρων (50%), Παχύ έντερο (3) 1/3 Λεµφοειδή/φλεγµονώδη κύτταρα (10%), Λεπτό έντερο (3) 3/3 Στρωµατικά και φλεγµονώδη κύτταρα (30-50%), 1/3 Λεµφοειδή/φλεγµονώδη Σπλήνας (3) 0/3 κύτταρα (10%), Οισοφάγος (3) 1/3 Στρωµατικά κύτταρα (50%), Στόµαχος (3) 1/3 Ενδιάµεσα κύτταρα (20%), Νεφρός (3) 3/3 Ενδιάµεσα κύτταρα (1-5%), Όρχις (3) 3/3 Ενδιάµεσα κύτταρα (5-80%), Ήπαρ (3) 0/3 Θύµος (3) 0/3 Πνεύµονας (3) 2/3 Ενδιάµεσα κύτταρα (1-10%), Θυρεοειδής (3) 0/3 2/3 Φλεγµονώδη κύτταρα (1-10%), Αµυγδαλή (3) 0/3 Μεσοθηλιακά κύτταρα 0/2 Μήτρα (2) 2/2 Αδενικά επιθηλιακά κύτταρα (2) (100%), Μυς, καρδιακός (3) 3/3 Μυοκύτταρα (30%), περιπυρηνικά 2/2 Στρωµατικά κύτταρα του µυοµητρίου (100%), Μυς, σκελετικός (3) 0/3 Σύγκριση µεθόδων: Η εξέταση του Monoclonal Mouse Anti-Human PR, πραγµατοποιήθηκε µε το EnVision FLEX+ και βαθµολογήθηκε σύµφωνα µε τις κατευθυντήριες οδηγίες του ASCO/CAP (τιµή αποκλεισµού 1%) (11). Η εξέταση του Anti-PR (Clone 1294) πραγµατοποιήθηκε µε το κιτ Dako ER/PR pharmdx και βαθµολογήθηκε χρησιµοποιώντας την οδηγία βαθµολόγησης Allred που περιγράφεται στο ένθετο της συσκευασίας. Τα δεδοµένα σύγκρισης µεθόδων παρουσιάζονται στον Πίνακα 2. Χρησιµοποιώντας αυτές τις αντίστοιχες κατευθυντήριες οδηγίες βαθµολόγησης, το Monoclonal Mouse Anti-Human PR, παρουσίασε συµφωνία µε το στοιχείο αντισώµατος PR του κιτ Dako ER/PR pharmdx, εµφανίζοντας τιµές για συνολική, θετική και αρνητική συµφωνία 94,5%, 95,8% και 93,1%, αντίστοιχα. Στον Πίνακα 3 παρουσιάζεται η σύγκριση και των δύο δοκιµασιών κατά τη βαθµολόγηση µε χρήση των κατευθυντήριων οδηγιών του ASCO/CAP. Πίνακας 2: Συµφωνία µεταξύ του αντι-pr, (ASCO/CAP) και του στοιχείου αντι-pr του κιτ ER/PR pharmdx (Allred) Στοιχείο αντι-pr του κιτ ER/PR pharmdx Monoclonal Mouse Anti- Human PR, Θετικό 115 8 123 Αρνητικό 5 108 113 Σύνολο 120 116 236 Επί τοις εκατό θετική συµφωνία = 95,8% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 91,1-96,8) Επί τοις εκατό αρνητική συµφωνία = 93,1% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 90,5-96,7) Επί τοις εκατό συνολική συµφωνία = 94,5% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 90,8-96,8) (117239-004) 307142GR_004 σελ. 3/5
Πίνακας 3: Συµφωνία µεταξύ του Anti-PR, (ASCO/CAP) και του στοιχείου αντι-pr του κιτ ER/PR pharmdx (ASCO/CAP) Στοιχείο αντι-pr του κιτ ER/PR pharmdx Monoclonal Mouse Anti- Human PR, Θετικό 115 8 123 Αρνητικό 1 112 113 Σύνολο 116 120 236 Επί τοις εκατό θετική συµφωνία = 99,1% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 93,0-98,0) Επί τοις εκατό αρνητική συµφωνία = 93,3% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 92,8-98,0) Επί τοις εκατό συνολική συµφωνία = 96,2% ( ιάστηµα εµπιστοσύνης 95%: 93,0-98,0) Αναπαραγωγιµότητα χρώσης µεταξύ διαφορετικών εργαστηρίων: Η εξέταση αναπαραγωγιµότητας του Anti-PR, πραγµατοποιήθηκε σε τρία εργαστήρια ελέγχου επί πέντε µη διαδοχικές ηµέρες σε 21 µοναδικά δείγµατα καρκίνου του µαστού και βαθµολογήθηκε σύµφωνα µε τις κατευθυντήριες οδηγίες του ASCO/CAP (τιµή αποκλεισµού 1%) για σύνολο 315 αξιολογήσεων. Στους Πίνακες 4, 5 και 6 αναφέρεται λεπτοµερώς η αναπαραγωγιµότητα της δοκιµασίας µεταξύ κέντρων. Οι υπολογισµοί της επί τοις εκατό µέσης θετικής, µέσης αρνητικής και συνολικής συµφωνίας υποστηρίζουν τα εξαιρετικά αναπαραγώγιµα αποτελέσµατα της δοκιµασίας του PR (PgR 636), κατά τη χρήση για τον προσδιορισµό της κατάστασης του PR σε κλινικό περιβάλλον. Πίνακας 4: Αναπαραγωγιµότητα χρώσης µεταξύ διαφορετικών εργαστηρίων Κέντρου 1 έναντι Κέντρου 2, για το Anti-PR, Κέντρο 2 Κέντρο 1 Θετικό 55 0 55 Αρνητικό 4 46 50 Σύνολο 59 46 105 Επί τοις εκατό µέση θετική συµφωνία = 96,5% Επί τοις εκατό µέση αρνητική συµφωνία = 95,8% Πίνακας 5: Αναπαραγωγιµότητα χρώσης µεταξύ διαφορετικών εργαστηρίων Κέντρου 1 έναντι Κέντρου 3, για το Anti-PR, Κέντρο 3 Κέντρο 1 Θετικό 59 1 60 Αρνητικό 0 45 45 Σύνολο 59 46 105 Επί τοις εκατό µέση θετική συµφωνία = 99,2% Επί τοις εκατό µέση αρνητική συµφωνία = 98,9% Πίνακας 6: Αναπαραγωγιµότητα χρώσης µεταξύ διαφορετικών εργαστηρίων Κέντρου 2 έναντι Κέντρου 3, για το Anti-PR, Κέντρο 3 Κέντρο 2 Θετικό 55 5 60 Αρνητικό 0 45 45 Σύνολο 55 50 105 Επί τοις εκατό µέση θετική συµφωνία = 95,7% Επί τοις εκατό µέση αρνητική συµφωνία = 94,7% (117239-004) 307142GR_004 σελ. 4/5
Βιβλιογραφικές αναφορές 1. Henderson C.Breast cancer. In: Harrison s principles of internal medicine, 12th edition, Wilson JD, Braunwald E, Isselbacher KJ, Petersdorf RG, Martin JB, Fauci AS, Root RK (eds). McGraw-Hill, Inc. New York, 1991 2. Fuqua SAW. Estrogen and progesterone receptors and breast cancer. Diseases of the Breast, Harris et al, eds. Lippincott-Raven, 1996. p. 261. 3. McGuire WL, Clark GM. The prognostic role of progesterone receptors in human breast cancer. Sem Oncol 1983;10:2. 4. Clark GM, McGuire WL, Hubay CA, Pearson OH, Marshall JS. Progesterone receptors as prognostic factor in stage II breast cancer. N Engl J Med 1983;39:1343. 5. Ravdin PM, Green S, Dorr TM, McGuire WL, Fabian C, Puch RP, et al. Prognostic significance of progesterone receptor levels in estrogen receptor-positive patients with metastatic breast cancer treated with tamoxifen: Results of a prospective southwest oncology group study. JCO 1992;10:1284. 6. Chevallier B, Heintzmann F, Mosseri V, Dauce JP, Bastit P, Graic Y, Brunelle P, Basuyay JP, Comoz M, Asselain B. Prognostic value of estrogen and progesterone receptors in operable breast cancer: Results of a univariate and multivariate analysis. Cancer 1988; 62:2517 7. Page DL, Jensen RA, Simpson JF. Routinely available indicators of prognosis in breast cancer. Breast Can Res Treat 1998;51:195. 8. Allred DC, Harvey JM, Berardo M, Clark GM. Prognostic and predictive factors in breast cancer by immunohistochemical analysis. Mod Pathol 1998;11:155. 9. Fitzgibbons PL, Page DL, Weaver D, Thor AD, Allred DC, Clark GM, et al. Prognostic factors in breast cancer. College of American Pathologists consensus statement. Arch Pathol Lab Med 2000;124:966. 10. Press M, Spaulding B, Groshen S, Kaminsky D, Hagerty M, Sherman L, et al. Comparison of different antibodies for detection of progesterone receptor in breast cancer. Steroids 2002; 67:799. 11. Hammond MEH, Hayes DF, Dowsett M, Allred C, Hagerty KL, Badve S, et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists Guideline Recommendations for Immunohistochemical Testing of Estrogen and Progesterone Receptors in Breast Cancer. Arch Pathol Lab Med 2010;134:907 22. 12. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Quality assurance for immunocytochemistry; Approved guideline. CLSI document MM4-A (1-56238-396-5)- CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400. Wayne, PA 19087-1898 USA 1999. Έκδοση 11/15 (117239-004) 307142GR_004 σελ. 5/5