CMV IgG Avidity. Αντισώματα IgG έναντι του κυτταρομεγαλοϊού. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

REF SYSTEM 05909708 190 100 αναλύσεις, που αντιστοιχούν σε 50 προσδιορισμούς της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 Ελληνικά Προοριζόμενη χρήση Ανοσολογική μέθοδος για τον in vitro ποιοτικό προσδιορισμό της ισχύος του δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του κυτταρομεγαλοϊού, σε ορό και πλάσμα ανθρώπου. Η ανοσολογική μέθοδος ηλεκτροχημειοφωταύγειας ECLIA προορίζεται για χρήση στους ανοσολογικούς αναλυτές Elecsys και cobas e. Περίληψη Ο κυτταρομεγαλοϊός, μέλος της οικογένειας των ερπητοϊών, είναι ευρέως διαδεδομένος σε όλους τους ανθρώπινους πληθυσμούς, προκαλώντας λοιμώξεις που ακολουθούνται από μακροχρόνια λανθάνουσα περίοδο με περιστασιακές επανενεργοποιήσεις στον ξενιστή, καθώς και υποτροπιάζουσες λοιμώξεις. Οι λοιμώξεις από ιό CMV είναι συνήθως ήπιες και ασυμπτωματικές. Ωστόσο, η πρωτοπαθής λοίμωξη της μητέρας από τον ιό CMV κατά τη διάρκεια της κύησης ενέχει κίνδυνο ενδομήτριας μετάδοσης, η οποία ενδέχεται να προκαλέσει σοβαρή βλάβη στο έμβρυο, όπως καθυστέρηση της ανάπτυξης, νοητική υστέρηση, ίκτερο και ανωμαλίες του ΚΝΣ. Τα νεογνά εκείνα που είναι ασυμπτωματικά κατά τη γέννηση ενδέχεται να αναπτύξουν ελλείμματα ακοής ή μαθησιακές δυσκολίες στη μετέπειτα ζωή. Προγεννητική λοίμωξη από ιό CMV παρατηρείται σε ποσοστό περίπου 0.2 2.5 όλων των γεννήσεων ζωντανών νεογνών. Διαφορετικές μελέτες έδειξαν ότι ο κίνδυνος εμφάνισης συμπτωματικής συγγενούς νόσου στο έμβρυο ή το νεογέννητο βρέφος είναι μεγάλος, όταν η πρωτοπαθής λοίμωξη της μητέρας συμβαίνει στα πρώτα στάδια της εγκυμοσύνης, πριν από την 20ή εβδομάδα κύησης, καθώς και λίγο αργότερα. Η συγγενής λοίμωξη από τον ιό CMV που προκαλείται από μη πρωτοπαθή λοίμωξη σπάνια οδηγεί σε συγγενή νόσο στο έμβρυο. 1,2,3,4,5 Απουσία οξείας κλινικής εκδήλωσης, η διάγνωση της λοίμωξης από τον ιό CMV συνήθως πραγματοποιείται οροδιαγνωστικά. Το πρώτο βήμα στη διάγνωση της οξείας λοίμωξης από τον ιό CMV γίνεται συνήθως μέσω της ανίχνευσης ειδικών αντισωμάτων IgG και IgM έναντι του ιού CMV. Τα δείγματα που είναι θετικά για αντισώματα IgM έναντι του ιού CMV υποδεικνύουν οξεία, πρόσφατη ή επανενεργοποιημένη λοίμωξη. Καθώς η συμπτωματική συγγενής λοίμωξη του εμβρύου οφείλεται κυρίως στην ενδομήτρια μετάδοση της πρωτοπαθούς λοίμωξης της μητέρας, η διαφορική διάγνωση της πρωτοπαθούς έναντι της υποτροπιάζουσας λοίμωξης, της πολυκλωνικής διέγερσης ή της επιμονής των αντισωμάτων IgM που είναι ειδικά για τον ιό CMV είναι ζωτικής σημασίας για τη σωστή παροχή συμβουλών και τη διαχείριση της εγκυμοσύνης. Η εξέταση της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV είναι, επί του παρόντος, η πλέον αξιόπιστη διαδικασία για τον εντοπισμό πρωτοπαθούς λοίμωξης σε εγκύους. Η ανάλυση της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV μετρά τη λειτουργική συγγένεια δέσμευσης των αντισωμάτων IgG έναντι του ιού CMV κατά την απόκριση σε λοίμωξη. Τα αντισώματα που παράγονται κατά τη διάρκεια της αρχικής απόκρισης έχουν μικρότερη ισχύ δεσμού με αντιγόνα από ό,τι τα αντισώματα που παράγονται κατά τη διάρκεια της μη αρχικής απόκρισης ή σε απομακρυσμένη φάση της λοίμωξης. Χαμηλή ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος παρατηρείται περίπου 18 20 εβδομάδες μετά την εκδήλωση των συμπτωμάτων σε ανοσοεπαρκείς ασθενείς. Ωστόσο, στο ρυθμό της ωρίμανσης της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος υπάρχουν διακυμάνσεις ανάλογα με τα άτομα. Σε σπάνιες περιπτώσεις, μπορούν να παρατηρηθούν αποτελέσματα χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος έως και 6 μήνες ή για ακόμη μεγαλύτερο χρονικό διάστημα μετά την εκδήλωση της λοίμωξης. Η εξέταση ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος θα πρέπει να πραγματοποιείται κατά τα πρώτα στάδια της κύησης. Η ανίχνευση αντισωμάτων IgG έναντι του ιού CMV με χαμηλή ισχύ δεσμού αντιγόνου-αντισώματος πριν από την 16 η 18 η εβδομάδα κύησης, σε συνδυασμό με θετικό αποτέλεσμα IgM έναντι του ιού CMV, αποτελεί ισχυρή ένδειξη πρόσφατης πρωτοπαθούς λοίμωξης. Εάν βρεθεί κάποιο αποτέλεσμα υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος σε επόμενο στάδιο της κύησης (μετά την 20ή εβδομάδα κύησης), δεν μπορεί να αποκλειστεί η περίπτωση πρωτοπαθούς λοίμωξης σε προηγούμενο στάδιο της κύησης, στο οποίο ενδέχεται να υπήρχαν αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος. Ένας δείκτης υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος κατά τη διάρκεια των πρώτων 12 16 εβδομάδων κύησης μπορεί να θεωρηθεί ως ένας καλός δείκτης για προηγούμενη λοίμωξη. 6,7,8,9 Αρχή της μεθόδου Η αρχή της μεθόδου βασίζεται σε δύο παράλληλες μετρήσεις με την ανάλυση Elecsys. Η πρώτη μέτρηση είναι μια μέτρηση αναφοράς των δειγμάτων με την ανάλυση Elecsys. Η δεύτερη μέτρηση είναι μια μέτρηση των δειγμάτων μετά από επεξεργασία με DilCMVAv, στην οποία εφαρμόζεται η λειτουργία αυτοματοποιημένης αραίωσης ειδικής για το δείγμα στον αναλυτή, με χρήση του διαλύματος αραίωσης ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (DilCMVAv), ακολουθούμενη από την ανάλυση Elecsys. Το διάλυμα αραίωσης ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος περιέχει συστατικά που παρεμβάλλονται στη δέσμευση των αντισωμάτων IgG έναντι του ιού CMV χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος. Η ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος () εκτιμάται από τον προσδιορισμό του λόγου μεταξύ της μέτρησης αναφοράς και της μέτρησης μετά από επεξεργασία με DilCMVAv. Η ανάλυση Elecsys χρησιμοποιεί την αρχή της διπλής ανοσοσήμανσης («σάντουιτς»). Η συνολική διάρκεια της ανάλυσης είναι 18 λεπτά τόσο για τη μέτρηση αναφοράς όσο και για τη μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv. 1η επώαση: 20 μl δείγματος (δείγμα αυτόματα αραιωμένο με DilCMVAv ή μη αραιωμένο δείγμα αναφοράς), βιοτινυλιωμένων ανασυνδυασμένων αντιγόνων ειδικών για τον ιό CMV και ανασυνδυασμένων αντιγόνων ειδικών για τον ιό CMV, σημασμένων με σύμπλεγμα ρουθηνίου a) σχηματίζουν σύμπλοκο «σάντουιτς». Στην περίπτωση της μέτρησης μετά από επεξεργασία με DilCMVAv, μόνο τα αντισώματα έναντι του ιού CMV υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος μπορούν να σχηματίσουν το σύμπλοκο σάντουιτς, ενώ το σύμπλοκο των αντισωμάτων έναντι του ιού CMV χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος διαλύεται. 2η επώαση: Μετά την προσθήκη μικροσφαιριδίων επικαλυμμένων με στρεπταβιδίνη, το σύμπλοκο δεσμεύεται στη στερεά φάση μέσω της αλληλεπίδρασης της βιοτίνης με τη στρεπταβιδίνη. Το μίγμα αντίδρασης εισάγεται με αναρρόφηση στο θάλαμο μέτρησης, όπου τα μικροσφαιρίδια δεσμεύονται μαγνητικά στην επιφάνεια του ηλεκτροδίου. Οι μη δεσμευμένες ουσίες απομακρύνονται, κατόπιν, με ProCell/ProCell M. Η εφαρμογή τάσης στο ηλεκτρόδιο προκαλεί κατόπιν την εκπομπή χημειοφωταύγειας, η οποία μετράται με φωτοπολλαπλασιαστή. Τα αποτελέσματα προσδιορίζονται από μια καμπύλη βαθμονόμησης, η οποία παράγεται ειδικά για κάθε αναλυτή, μέσω μιας διαδικασίας βαθμονόμησης 2 σημείων και μιας πρότυπης καμπύλης που λαμβάνεται μέσω του γραμμικού κώδικα των αντιδραστηρίων. a) Σύμπλοκο τρις(2,2'-διπυριδυλο)ρουθηνίου(ii) (Ru(bpy) ) Αντιδραστήρια - διαλύματα εργασίας Το σετ φορέων αντιδραστηρίων (M, R1, R2) έχει σημανθεί ως CMV AV. M R1 Μικροσφαιρίδια επικαλυμμένα με στρεπταβιδίνη (διαφανές πώμα), 1 φιαλίδιο, 6.5 ml: Μικροσφαιρίδια επικαλυμμένα με στρεπταβιδίνη 0.72 mg/ml, συντηρητικό. CMV-Ag~βιοτίνη (γκρι πώμα), 1 φιαλίδιο, 9 ml: Βιοτινυλιωμένο αντιγόνο ειδικό για τον ιό CMV (ανασυνδυασμένο, E. coli), > 400 µg/l, ρυθμιστικό διάλυμα MES 50 mmol/l, ph 6.5, συντηρητικό. 1 / 7

R2 CMV-Ag~Ru(bpy) (μαύρο πώμα), 1 φιαλίδιο, 9 ml: Ειδικό αντιγόνο για τον ιό CMV (ανασυνδυασμένο, E. coli) σημασμένο με σύμπλοκο ρουθηνίου > 400 µg/l, ρυθμιστικό διάλυμα MES 50 mmol/l, ph 6.5, συντηρητικό. CMV AV Cal1 Αρνητικός βαθμονομητής 1 (λευκό πώμα), 2 φιαλίδια του 1.0 ml: Ορός ανθρώπου, αρνητικός για αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV, συντηρητικό. CMV AV Cal2 Θετικός βαθμονομητής 2 (μαύρο πώμα), 2 φιαλίδια του 1.0 ml: Ορός ανθρώπου, θετικός για αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV (περίπου 40 U/mL), ρυθμιστικό διάλυμα, συντηρητικό. DilCMVAv Διάλυμα αραίωσης ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (λευκό πώμα), 1 φιαλίδιο, 2.5 ml: Χλωριούχος γουανιδίνη 0.8 M, αντιγόνο ειδικό για τον ιό CMV (ανασυνδυασμένο, E. coli), ρυθμιστικό διάλυμα MES 50 mmol/l, ph 6.5, συντηρητικό. Προφυλάξεις και προειδοποιήσεις Για in vitro διαγνωστική χρήση. Να τηρούνται οι συνήθεις προφυλάξεις οι οποίες απαιτούνται κατά το χειρισμό όλων των εργαστηριακών αντιδραστηρίων. Η απόρριψη όλων των αποβλήτων θα πρέπει να πραγματοποιείται σύμφωνα με τις τοπικές κατευθυντήριες οδηγίες. Διατίθεται, κατόπιν αιτήσεως, φύλλο δεδομένων ασφάλειας για επαγγελματίες χειριστές. Όλα τα υλικά ανθρώπινης προέλευσης θα πρέπει να θεωρούνται δυνητικώς μολυσματικά. Οι βαθμονομητές (CMV AV Cal1, CMV AV Cal2) έχουν παρασκευαστεί αποκλειστικά από αίμα δοτών που έχουν ελεγχθεί χωριστά και έχουν βρεθεί αρνητικοί για αντιγόνο HΒsAg και για αντισώματα έναντι των ιών H και HIV. Ο ορός που περιέχει αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV (CMV AV Cal2) διηθήθηκε υπό στείρες συνθήκες. Οι μέθοδοι εξέτασης που εφαρμόστηκαν ήταν εγκεκριμένες από τον FDA ή σε συμφωνία με την Ευρωπαϊκή Οδηγία 98/79/ΕΚ, Παράρτημα II, Κατάλογος A. Ωστόσο, καθώς καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να αποκλείσει το δυνητικό κίνδυνο μόλυνσης με απόλυτη βεβαιότητα, ο χειρισμός των υλικών θα πρέπει να γίνεται με την ίδια προσοχή που δίνεται κατά το χειρισμό των δειγμάτων ασθενών. Σε περίπτωση έκθεσης, θα πρέπει να ακολουθούνται οι οδηγίες της αρμόδιας υγειονομικής αρχής. 10,11 Αποφύγετε το σχηματισμό αφρού σε όλα τα αντιδραστήρια και τους τύπους δειγμάτων (δείγματα, βαθμονομητές και διαλύματα ελέγχου). Χειρισμός των αντιδραστηρίων Τα αντιδραστήρια του κιτ είναι έτοιμα προς χρήση και παρέχονται σε φιαλίδια συμβατά με το σύστημα. Αναλυτές Elecsys 2010 και cobas e 411: Οι βαθμονομητές θα πρέπει να παραμένουν επάνω στον αναλυτή μόνο κατά τη διάρκεια της βαθμονόμησης, σε θερμοκρασία 20-25 C. Μετά τη χρήση, τα φιαλίδια θα πρέπει να κλείνονται όσο το δυνατόν ταχύτερα και να φυλάσσονται σε θερμοκρασία 2-8 C. Λόγω πιθανής εξάτμισης, δεν θα πρέπει να εκτελούνται περισσότερες από 5 διαδικασίες βαθμονόμησης ανά σετ φιαλιδίων. Αναλυτές MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 και cobas e 602: Εάν δεν απαιτείται ολόκληρη η ποσότητα για τη βαθμονόμηση στον αναλυτή, τότε μεταφέρετε μερίδες από τους έτοιμους προς χρήση βαθμονομητές σε κενά φιαλίδια με πώμα (CalSet Vials). Επικολλήστε τις παρεχόμενες ετικέτες σε αυτά τα πρόσθετα φιαλίδια. Φυλάξτε τις μερίδες σε θερμοκρασία 2 8 C για μελλοντική χρήση. Κάθε μερίδα θα πρέπει να χρησιμοποιείται για μία μόνο διαδικασία βαθμονόμησης. Όλες οι πληροφορίες που απαιτούνται για τη σωστή χρήση καταχωρούνται μέσω του αντίστοιχου γραμμικού κώδικα των αντιδραστηρίων. Φύλαξη και σταθερότητα Φυλάσσονται σε θερμοκρασία 2 8 C. Να μην καταψύχεται. Το κιτ αντιδραστηρίων Elecsys και το DilCMVAv πρέπει να φυλάσσονται σε όρθια θέση, ώστε να διασφαλίζεται η πλήρης διαθεσιμότητα των μικροσφαιριδίων κατά την αυτόματη ανάμιξη πριν από τη χρήση. Σταθερότητα του σετ φορέων αντιδραστηρίων και του DilCMVAv κλειστό, σε θερμοκρασία 2 8 C μετά το άνοιγμα, σε θερμοκρασία 2 8 C στους αναλυτές Σταθερότητα των βαθμονομητών κλειστό, σε θερμοκρασία 2 8 C μετά το άνοιγμα, σε θερμοκρασία 2 8 C στους αναλυτές Elecsys 2010 και cobas e 411 σε θερμοκρασία 20 25 C στους αναλυτές MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 και cobas e 602 έως την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης 12 εβδομάδες 3 εβδομάδες ή 8 εβδομάδες εάν φυλάσσονται εναλλάξ στο ψυγείο και στους αναλυτές (έως και 8 ώρες σε θερμοκρασία 20 25 C) έως την αναγραφόμενη ημερομηνία λήξης 8 εβδομάδες έως 5 ώρες μία μόνο χρήση Φυλάξτε τους βαθμονομητές σε όρθια θέση, προκειμένου να αποφευχθεί η προσκόλληση του βαθμονομητή στο πώμα. Συλλογή δείγματος και προετοιμασία Μόνο τα παρακάτω δείγματα αναλύθηκαν, σε επαρκή αριθμό, και βρέθηκαν αποδεκτά. Ορός που συλλέγεται σε τυπικά σωληνάρια δειγματοληψίας ή σε σωληνάρια που περιέχουν γέλη διαχωρισμού. Πλάσμα με Li ηπαρίνη, K 2 EDTA και K 3 EDTA. Κριτήριο: ανάκτηση θετικών δειγμάτων εντός 80 120 της ς του ορού. Σταθερό επί 4 εβδομάδες σε θερμοκρασία 2 8 C, επί 7 ημέρες στους 25 C και επί 6 μήνες στους 20 C. Τα δείγματα μπορούν να καταψυχθούν έως και 5 φορές. Οι αναφερόμενοι τύποι δειγμάτων αναλύθηκαν με χρήση των σωληναρίων δειγματοληψίας που ήταν διαθέσιμα στο εμπόριο τη στιγμή της ανάλυσης, δηλαδή δεν εξετάστηκαν όλα τα διαθέσιμα σωληνάρια όλων των κατασκευαστών. Τα συστήματα δειγματοληψίας των διαφόρων κατασκευαστών ενδέχεται να περιέχουν διαφορετικά υλικά που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τα αποτελέσματα της ανάλυσης σε κάποιες περιπτώσεις. Όταν αναλύετε δείγματα σε πρωτογενή σωληνάρια (συστήματα δειγματοληψίας), να ακολουθείτε τις οδηγίες του κατασκευαστή των σωληναρίων. Τα δείγματα δεν θα πρέπει στη συνέχεια να τροποποιούνται με χρήση πρόσθετων (βιοκτόνα, αντιοξειδωτικά ή ουσίες που ενδέχεται να μεταβάλουν το ph του δείγματος), προκειμένου να αποφεύγεται η λήψη εσφαλμένων αποτελεσμάτων. Δεξαμενές δειγμάτων και άλλα συνθετικά υλικά ενδέχεται να επιδράσουν διαφορετικά σε διαφορετικές αναλύσεις και ως εκ τούτου να οδηγήσουν σε ασύμφωνα ευρήματα. Τα δείγματα που περιέχουν ίζημα και τα κατεψυγμένα δείγματα πρέπει να φυγοκεντρούνται πριν από την ανάλυση. Μπορούν να χρησιμοποιηθούν λυοφιλοποιημένα δείγματα και δείγματα αδρανοποιημένα μέσω θέρμανσης. Βεβαιωθείτε ότι τα δείγματα, οι βαθμονομητές και τα διαλύματα ελέγχου βρίσκονται σε θερμοκρασία 20 25 C πριν από τη μέτρηση. Λόγω πιθανής εξάτμισης, τα δείγματα και οι βαθμονομητές που βρίσκονται στους αναλυτές πρέπει να αναλύονται/μετρώνται εντός 2 ωρών. Παρεχόμενα υλικά Για τα αντιδραστήρια, δείτε την ενότητα Αντιδραστήρια - διαλύματα εργασίας. 2 / 7

Απαιτούμενα υλικά που δεν παρέχονται REF 05942322190, PreciControl, 3 x 1.0 ml για καθένα από τα PreciControl 1 και 2 REF 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 ml διάλυμα αραίωσης δειγμάτων ή REF 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 ml διάλυμα αραίωσης δειγμάτων REF 11776576322, CalSet Vials, 2 x 56 κενά φιαλίδια με πώμα Συνήθης εργαστηριακός εξοπλισμός Αναλυτής Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 ή cobas e Παρελκόμενα αναλυτών Elecsys 2010 και cobas e 411: REF 11662988122, ProCell, 6 x 380 ml ρυθμιστικό διάλυμα συστήματος REF 11662970122, CleanCell, 6 x 380 ml διάλυμα καθαρισμού θαλάμου μέτρησης REF 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 ml πρόσθετο νερού REF 11933159001, Adapter for SysClean REF 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 κυβέττες αντίδρασης REF 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 ρύγχη δειγματοληψίας Παρελκόμενα αναλυτών MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 και cobas e 602: REF 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L ρυθμιστικό διάλυμα συστήματος REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L διάλυμα καθαρισμού θαλάμου μέτρησης REF 03023141001, PC/CC Cups, 12 υποδοχείς για την προθέρμανση των ProCell M και CleanCell M πριν από τη χρήση REF 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 ml διάλυμα καθαρισμού για το τελικό στάδιο λειτουργίας και την έκπλυση κατά την αλλαγή αντιδραστηρίου REF 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 θήκες x 84 κυβέττες αντίδρασης ή ρύγχη δειγματοληψίας, σάκοι αποβλήτων REF 03023150001, WasteLiner, σάκοι αποβλήτων REF 03027651001, SysClean Adapter M Παρελκόμενα για όλους τους αναλυτές: REF 11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 ml διάλυμα καθαρισμού συστήματος Ανάλυση Για την καλύτερη δυνατή απόδοση της ανάλυσης, ακολουθήστε τις οδηγίες που παρέχονται σε αυτό το έντυπο και αφορούν τον αναλυτή που χρησιμοποιείτε. Ανατρέξτε στο αντίστοιχο εγχειρίδιο χρήσης για οδηγίες ανάλυσης ειδικές για τον συγκεκριμένο αναλυτή. Η ομογενοποίηση του εναιωρήματος των μικροσφαιριδίων εκτελείται αυτόματα πριν από τη χρήση. Καταχωρήστε τις ειδικές παραμέτρους της ανάλυσης μέσω του γραμμικού κώδικα των αντιδραστηρίων. Στη σπάνια περίπτωση κατά την οποία η ανάγνωση του γραμμικού κώδικα είναι αδύνατη, πληκτρολογήστε το 15ψήφιο αριθμό. Αφήστε τα ψυχρά αντιδραστήρια να φθάσουν σε θερμοκρασία 20 C περίπου και τοποθετήστε τα στο δίσκο αντιδραστηρίων (20 C) του αναλυτή. Αποφύγετε το σχηματισμό αφρού. Το σύστημα ρυθμίζει αυτομάτως τη θερμοκρασία των αντιδραστηρίων και το άνοιγμα ή το κλείσιμο των φιαλιδίων. Τοποθετήστε τους βαθμονομητές στη ζώνη δειγματοληψίας. Όλα τα απαιτούμενα δεδομένα για τη βαθμονόμηση της ανάλυσης καταχωρούνται αυτόματα στον αναλυτή. Μετά τη βαθμονόμηση, οι βαθμονομητές φυλάσσονται σε θερμοκρασία 2 8 C ή απορρίπτονται (αναλυτές MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 και cobas e 602). Για τον υπολογισμό της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (), θα πρέπει να δοθεί δύο φορές εντολή ανάλυσης για κάθε δείγμα και για τα διαλύματα ελέγχου (μέτρηση αναφοράς και μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv). Χειρισμός δειγμάτων για την ανάλυση Elecsys Δείγμα για τον προσδιορισμό της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος () Αποτέλεσμα Elecsys CMV IgG: 1 500 U/mL Αποτέλεσμα Elecsys CMV IgG: > 500 U/mL προαραιώστε μη αυτόματα δείγματα σε αναλογία 1:20 με Diluent Universal χωρίστε το δείγμα σε δύο μερίδες, ελάχιστου όγκου 300 µl ΜΕΤΡΗΣΗ ΑΝΑΦΟΡΑΣ τοποθετήστε την 1η μερίδα στον αναλυτή στη θέση n ζητήστε προσδιορισμό ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV ο αναλυτής αναφέρει το αποτέλεσμα της μέτρησης αναφοράς (U/mL) ΜΕΤΡΗΣΗ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΙΑ ΜΕ DilCMVAv τοποθετήστε τη 2η μερίδα στον αναλυτή στη θέση n+1 επιλέξτε «S.Vol./Dil. Ratio» και ζητήστε προσδιορισμό ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV με αναλογία αραίωσης 1:2 εκτελέστε την ανάλυση ο αναλυτής αναφέρει το αποτέλεσμα της μέτρησης μετά από επεξεργασία με DilCMVAv (U/mL) μη αυτόματος υπολογισμός της ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος IgG έναντι του ιού CMV (), δείτε την ενότητα «Υπολογισμός» για λεπτομέρειες Τα δείγματα που έχουν βρεθεί θετικά στην ανάλυση Elecsys CMV IgG με συγκεντρώσεις μεταξύ 1 500 U/mL χωρίζονται σε δύο μερίδες. Εάν ένα δείγμα βρεθεί θετικό στην ανάλυση Elecsys CMV IgG με συγκέντρωση > 500 U/mL, αραιώστε το δείγμα μη αυτόματα σε αναλογία 1:20 με το Diluent Universal (ανατρέξτε στην ενότητα «Αραίωση») και στη συνέχεια χωρίστε σε δύο μερίδες. Μέτρηση αναφοράς: Τοποθετήστε την πρώτη μερίδα ενός συγκεκριμένου δείγματος στον αναλυτή στη θέση n και ζητήστε μια μέτρηση ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος IgG έναντι του ιού CMV. Μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv: Τοποθετήστε τη δεύτερη μερίδα του προαναφερθέντος δείγματος στον αναλυτή στη θέση n+1 και ζητήστε μια μέτρηση ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV με μια «αραίωση ειδική για το δείγμα» σε αναλογία 1:2. Για περισσότερες λεπτομέρειες, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χρήσης του αναλυτή. Μέσω αυτής της εντολής, ο αναλυτής θα αναμίξει 50 µl DilCMVAv με 50 µl δείγματος πριν από τη μέτρηση ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV. 3 / 7

Ο χειριστής πρέπει να διασφαλίσει ότι και οι δύο μετρήσεις εκτελούνται διαδοχικά με την ίδια παρτίδα αντιδραστηρίων, στον ίδιο αναλυτή και με την ίδια βαθμονόμηση. Σημείωση: Εάν ο διαχωρισμός του δείγματος σε μερίδες δεν είναι δυνατός, οι δύο μετρήσεις θα πρέπει να προγραμματιστούν και να εκτελεστούν διαδοχικά. Δεν είναι δυνατή η παράλληλη και αυτοματοποιημένη εκτέλεση της μέτρησης αναφοράς και της μέτρησης μετά από επεξεργασία με DilCMVAv από μία μερίδα. Βαθμονόμηση Ιχνηλασιμότητα: Η μέθοδος αυτή έχει τυποποιηθεί έναντι του εσωτερικού προτύπου της Roche για την ανάλυση CMV IgG. Δεν διατίθεται διεθνές πρότυπο για τον ιό CMV. Κάθε σετ αντιδραστηρίων Elecsys διαθέτει μια ετικέτα με γραμμικό κώδικα, η οποία περιέχει τα ειδικά στοιχεία βαθμονόμησης για τη συγκεκριμένη παρτίδα αντιδραστηρίων. Η προκαθορισμένη πρότυπη καμπύλη προσαρμόζεται στον αναλυτή με χρήση των CMV AV Cal1 και CMV AV Cal2. Συχνότητα βαθμονόμησης: Η βαθμονόμηση πρέπει να εκτελείται μία φορά για κάθε παρτίδα αντιδραστηρίων, με χρήση των CMV AV Cal1 και CMV AV Cal2 και νέου αντιδραστηρίου (δηλαδή προτού παρέλθουν 24 ώρες από την καταχώρηση του κιτ αντιδραστηρίων στον αναλυτή). Η ανανέωση της βαθμονόμησης συνιστάται να γίνεται ως εξής: μετά από 1 μήνα (28 ημέρες) εφόσον χρησιμοποιείται η ίδια παρτίδα αντιδραστηρίων μετά από 7 ημέρες (εφόσον χρησιμοποιείται το ίδιο κιτ αντιδραστηρίων στον αναλυτή) όπως απαιτείται, εάν π.χ. τα ευρήματα του ελέγχου ποιότητας με το PreciControl βρίσκονται εκτός των καθορισμένων ορίων συχνότερα, εάν αυτό απαιτείται από τους σχετικούς κανονισμούς Έλεγχος ποιότητας Για έλεγχο ποιότητας, χρησιμοποιήστε το PreciControl. Συνιστάται να αναλύετε τα PreciControl 1 και 2 στην αρχή κάθε εργάσιμης ημέρας και μετά από κάθε βαθμονόμηση. Παρασκευάστε δύο μερίδες από κάθε επίπεδο διαλύματος ελέγχου. Τοποθετήστε και τις δύο μερίδες κάθε επιπέδου διαλύματος ελέγχου τη μία μετά την άλλη σε ένα φορέα δειγμάτων. Θα πρέπει να αναλύονται παράλληλα και τα δύο επίπεδα διαλυμάτων ελέγχου στη μέτρηση αναφοράς και στη μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv, ως έλεγχο απόδοσης. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθιερώσει τα διορθωτικά μέτρα που θα πρέπει να ληφθούν εάν οι τιμές βρεθούν εκτός των καθορισμένων ορίων. Εάν είναι απαραίτητο, επαναλάβετε τη μέτρηση των συγκεκριμένων δειγμάτων. Ακολουθήστε τους ισχύοντες κρατικούς κανονισμούς και τις τοπικές κατευθυντήριες οδηγίες για τον έλεγχο ποιότητας. Επιβεβαίωση βαθμονόμησης: Οι αναμενόμενες τιμές και τα εύρη (U/mL) της μέτρησης αναφοράς προσδιορίστηκαν και αξιολογήθηκαν από τη Roche. Οι τιμές αυτές ελήφθησαν με χρήση των αντιδραστηρίων της εξέτασης Elecsys και των αναλυτών που υπήρχαν διαθέσιμοι τη στιγμή της εξέτασης. Οι μετρήσεις αναφοράς των διαλυμάτων ελέγχου θα πρέπει να παρουσιάσουν ανάκτηση εντός του εύρους τιμών των διαλυμάτων ελέγχου (U/mL), όπως αναφέρεται στο φύλλο τιμών. Οι τιμές των διαλυμάτων ελέγχου θα πρέπει να συγκριθούν από τον χειριστή με τα εύρη των αντισωμάτων IgG έναντι του ιού CMV (U/mL) που αναγράφονται στο φύλλο τιμών. Οι ακριβείς, ειδικές για κάθε παρτίδα, αναμενόμενες τιμές και τα εύρη τιμών βρίσκονται τυπωμένα στο εσωκλειόμενο (ή ηλεκτρονικά διαθέσιμο) φύλλο τιμών. Επαλήθευση της λειτουργικότητας της ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος του διαλύματος αραίωσης (DilCMVAv): Η ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος () υπολογίζεται από τη μέτρηση αναφοράς και τη μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv, σύμφωνα με την ενότητα «Υπολογισμός». Το αναμενόμενο εύρος τιμών για το αποτέλεσμα ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (), που υπολογίζεται από τον χειριστή, του PreciControl CMV IgG Avidity 1 είναι < 45.0 ενώ το αντίστοιχο εύρος τιμών για το PreciControl 2 είναι 55.0. Σημείωση: Τα διαλύματα ελέγχου δεν φέρουν ετικέτα με γραμμικό κώδικα και θα πρέπει να τα χειριστείτε ως δείγματα ασθενών. Τα διαλύματα ελέγχου δεν θα πρέπει να οριστούν ως εξωτερικά διαλύματα ελέγχου, καθώς δεν είναι δυνατή η αραίωση των διαλυμάτων ελέγχου στον αναλυτή. Υπολογισμός Ο αναλυτής υπολογίζει αυτόματα τη συγκέντρωση της αναλυόμενης ουσίας κάθε δείγματος, σε U/mL, και για τις δύο μετρήσεις (μέτρηση αναφοράς και μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv). Η ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος () πρέπει να υπολογιστεί μη αυτόματα: = αποτέλεσμα της μέτρησης μετά από επεξεργασία με DilCMVAv αποτέλεσμα της μέτρησης αναφοράς x 100 Για τον προσδιορισμό της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (), μπορούν να χρησιμοποιηθούν μόνο δείγματα που βρέθηκαν θετικά στη μέτρηση αναφοράς ( 1.0 U/mL). Εάν η μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv δώσει αποτελέσματα < 0.3 U/mL, υπολογίστε την ισχύ δεσμού αντιγόνου-αντισώματος () με συγκέντρωση ίση με 0.3 U/mL. Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται με την ανάλυση Elecsys CMV IgG Avidity ερμηνεύονται ως εξής: Ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος Ερμηνεία < 45.0 χαμηλή ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος 45.0-54.9 γκρίζα ζώνη 55.0 υψηλή ισχύς δεσμού αντιγόνου-αντισώματος Δεν μπορεί να εξαχθεί ερμηνεία από ένα αποτέλεσμα που εμπίπτει στην γκρίζα ζώνη. Συνιστάται να λάβετε ένα δείγμα παρακολούθησης εντός μιας κατάλληλης χρονικής περιόδου (π.χ. 2-4 εβδομάδες) και να επαναλάβετε την εξέταση. Τα αποτελέσματα της ανάλυσης Elecsys θα πρέπει να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς, τα κλινικά συμπτώματα και άλλες εργαστηριακές εξετάσεις, π.χ. τα αποτελέσματα του προσδιορισμού της ειδικής ανοσοσφαιρίνης IgG και IgM έναντι του ιού CMV. Σε περίπτωση που κάποιο αποτέλεσμα ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος IgG έναντι του ιού CMV βρεθεί ασύμφωνο με το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς, τα κλινικά συμπτώματα και άλλες εργαστηριακές εξετάσεις, π.χ. τα αποτελέσματα του προσδιορισμού της ειδικής ανοσοσφαιρίνης IgG και IgM έναντι του ιού CMV, θα πρέπει θα εκτελεστούν περαιτέρω εξετάσεις προκειμένου να επαληθευτεί το αποτέλεσμα και συνιστάται επίσης η ανάλυση ενός δείγματος μετέπειτα παρακολούθησης. Τα αποτελέσματα ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV σε ένα συγκεκριμένο δείγμα, όπως προσδιορίζονται μέσω αναλύσεων από διαφορετικούς κατασκευαστές, μπορούν να ποικίλλουν λόγω των διαφορών μεταξύ των μεθόδων και των αντιδραστηρίων ανάλυσης που χρησιμοποιούνται. Κατά συνέπεια, τα αποτελέσματα που αναφέρονται από το εργαστήριο στον ιατρό θα πρέπει να περιλαμβάνουν την εξής προειδοποίηση: «Τα παρακάτω αποτελέσματα έχουν ληφθεί με την ανάλυση Elecsys. Δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν εναλλακτικά αποτελέσματα αναλύσεων από άλλους κατασκευαστές». Μπορεί να προκύψουν αποτελέσματα ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος έως και 110 λόγω εγγενούς διακύμανσης της ανάλυσης, τα οποία ερμηνεύονται ως αποτελέσματα υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος. Για αποτελέσματα ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος > 110, συνιστάται η προαραίωση του δείγματος (σύμφωνα με την ενότητα «Αραίωση») και η επανάληψη και των δύο μετρήσεων προκειμένου να υπολογιστεί μια νέα ισχύς δεσμού αντιγόνουαντισώματος (). 4 / 7

Περιορισμοί - αλληλεπιδράσεις Τα αποτελέσματα ασθενών που έχουν προσβληθεί από τον ιό HIV, ασθενών που υποβάλλονται σε ανοσοκατασταλτική θεραπεία ή ασθενών που πάσχουν από άλλες διαταραχές οι οποίες οδηγούν σε ανοσοκαταστολή, θα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Δεν έχουν εξεταστεί δείγματα από νεογνά, από αίμα ομφάλιου λώρου, από ασθενείς που πρόκειται να υποβληθούν σε μεταμόσχευση ή από σωματικά υγρά εκτός ορού και πλάσματος, όπως π.χ. ούρα, σίελος ή αμνιακό υγρό. Δεν παρατηρήθηκε hook effect υψηλής δόσης σε μια ομάδα 142 θετικών δειγμάτων εντός του εύρους μέτρησης (δεν παρατηρήθηκε αύξηση των σημάτων μετά από αραίωση). Ωστόσο, δεν μπορεί να αποκλειστεί η εμφάνιση hook effect υψηλής δόσης σε άλλες ομάδες. Η ανάλυση δεν επηρεάζεται από την ύπαρξη ίκτερου (χολερυθρίνη < 1129 µmol/l ή < 66 mg/dl), αιμόλυσης (Hb < 0.310 mmol/l ή < 0.500 g/dl) ή λιπαιμίας (Intralipid < 2000 mg/dl) και από την παρουσία βιοτίνης (< 246 nmol/l ή < 60 ng/ml). Κριτήριο: ανάκτηση θετικών δειγμάτων εντός ± 20 της ς του ορού. Δεν θα πρέπει να λαμβάνονται δείγματα από ασθενείς που ακολουθούν θεραπεία με υψηλές δόσεις βιοτίνης (δηλαδή > 5 mg/ημέρα) προτού παρέλθουν τουλάχιστον 8 ώρες από την τελευταία χορήγηση βιοτίνης. Δεν παρατηρήθηκε αλληλεπίδραση με ρευματοειδείς παράγοντες, σε συγκέντρωση έως και 1500 IU/mL. Πραγματοποιήθηκαν in vitro αναλύσεις σε 18 κοινά φαρμακευτικά προϊόντα και επιπλέον σε γανκυκλοβίρη και βαλγανκυκλοβίρη. Δεν διαπιστώθηκε αλληλεπίδραση με την ανάλυση. Σε σπάνιες περιπτώσεις, ενδέχεται να εμφανιστούν αλληλεπιδράσεις λόγω εξαιρετικά υψηλών τίτλων αντισωμάτων έναντι της στρεπταβιδίνης ή του ρουθηνίου. Οι επιδράσεις αυτές έχουν ελαχιστοποιηθεί μέσω κατάλληλου σχεδιασμού της εξέτασης. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα θα πρέπει πάντοτε να αξιολογούνται σε συνδυασμό με το ιατρικό ιστορικό, την κλινική εξέταση και άλλα ευρήματα του ασθενούς. Όρια και εύρη Εύρος μέτρησης Μέτρηση αναφοράς: 0.25 500 U/mL (οριζόμενο από το όριο ανίχνευσης και το ανώτατο σημείο της πρότυπης καμπύλης). Οι τιμές που είναι χαμηλότερες από το όριο τυφλού δίδονται ως < 0.15 U/mL. Οι τιμές που είναι υψηλότερες από το όριο τυφλού αλλά χαμηλότερες από το όριο ανίχνευσης δεν θα επισημανθούν από τον αναλυτή. Οι τιμές που είναι υψηλότερες από το εύρος μέτρησης δίδονται ως > 500 U/mL. Όριο τυφλού (LoB) και όριο ανίχνευσης (LoD) Όριο τυφλού = 0.15 U/mL Όριο ανίχνευσης = 0.25 U/mL Το όριο τυφλού και το όριο ανίχνευσης προσδιορίστηκαν σύμφωνα με τις απαιτήσεις EP17 A του CLSI (Ινστιτούτο Κλινικών και Εργαστηριακών Προτύπων). Το όριο τυφλού είναι η του 95ου εκατοστημορίου που ελήφθη από n 60 μετρήσεις δειγμάτων χωρίς αναλυόμενη ουσία τα οποία προέρχονταν από αρκετές ανεξάρτητες σειρές. Το όριο τυφλού αντιστοιχεί στη συγκέντρωση κάτω από την οποία βρίσκονται τα δείγματα χωρίς αναλυόμενη ουσία με πιθανότητα 95. Το όριο ανίχνευσης καθορίζεται με βάση το όριο τυφλού και την τυπική απόκλιση των δειγμάτων χαμηλής συγκέντρωσης. Το όριο ανίχνευσης αντιστοιχεί στην ελάχιστη συγκέντρωση αναλυόμενης ουσίας που μπορεί να ανιχνευθεί ( υψηλότερη από το όριο τυφλού με πιθανότητα 95 ). Μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv: Λόγω της αραίωσης σε αναλογία 1:2, το εύρος μέτρησης είναι 0.50 1000 U/mL. Οι τιμές που είναι χαμηλότερες από το όριο τυφλού δίδονται ως < 0.30 U/mL. Οι τιμές που είναι υψηλότερες από το όριο τυφλού αλλά χαμηλότερες από το όριο ανίχνευσης δεν θα επισημανθούν από τον αναλυτή. Οι τιμές που είναι υψηλότερες από το εύρος μέτρησης δίδονται ως > 1000 U/mL. Αραίωση Δείγματα με συγκεντρώσεις IgG έναντι του ιού CMV που υπερβαίνουν το εύρος μέτρησης πρέπει να προαραιωθούν με το Diluent Universal προτού ελεγχθούν με την ανάλυση Elecsys. Η συνιστώμενη προαραίωση είναι 1:2 (από τον χειριστή). Η συγκέντρωση του προαραιωμένου δείγματος πρέπει να είναι 15 U/mL. Αυτή η μη αυτόματη προαραίωση δεν θα πρέπει να ληφθεί υπ' όψιν για τον υπολογισμό της ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος (), καθώς το μη αυτόματα προαραιωμένο δείγμα χρησιμοποιείται και για τις δύο μετρήσεις (τη μέτρηση αναφοράς και τη μέτρηση μετά από επεξεργασία με DilCMVAv). Σημείωση: Τα αντισώματα έναντι του ιού CMV είναι ετερογενή. Αυτό ενδέχεται να οδηγήσει σε μη γραμμική συμπεριφορά κατά την αραίωση. Ειδικά στοιχεία απόδοσης Παρακάτω δίνονται αντιπροσωπευτικά στοιχεία απόδοσης για τους αναλυτές. Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται στα διάφορα εργαστήρια ενδέχεται να διαφέρουν. Επαναληψιμότητα Η επαναληψιμότητα προσδιορίστηκε με χρήση αντιδραστηρίων Elecsys, ορών ανθρώπου και διαλυμάτων ελέγχου, σύμφωνα με ένα πρωτόκολλο (EP5 A2) του CLSI (Ινστιτούτο Κλινικών και Εργαστηριακών Προτύπων): 2 σειρές αναλύσεων ημερησίως, η καθεμία εις διπλούν, επί 21 ημέρες (n = 84), αναπαραγωγιμότητα n = 21. Ελήφθησαν τα παρακάτω αποτελέσματα: Δείγμα Αναλυτές Elecsys 2010 και cobas e 411 Αναπαραγωγιμότητα Ενδιάμεση επαναληψιμότητα Ορός ανθρώπου 1 9.8 0.1 1.0 9.8 0.2 2.3 Ορός ανθρώπου 2 50.0 0.8 1.5 50.0 1.0 2.0 Ορός ανθρώπου 3 81.1 1.4 1.7 81.1 1.8 2.2 PC b) 1 28.5 0.6 1.9 28.5 0.9 3.1 PC 2 78.1 1.0 1.3 78.1 1.7 2.2 b) PC = PreciControl Αναλυτές MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 και cobas e 602 Δείγμα Αναπαραγωγιμότητα Ενδιάμεση επαναληψιμότητα Ορός ανθρώπου 1 9.4 0.1 1.2 9.4 0.3 3.4 Ορός ανθρώπου 2 53.1 0.8 1.5 53.1 0.9 1.6 Ορός ανθρώπου 3 85.0 1.1 1.3 85.0 1.5 1.7 PC 1 29.6 1.0 3.4 29.6 1.1 3.8 PC 2 79.5 1.1 1.4 79.5 1.2 1.5 Αναλυτική ειδικότητα 439 δείγματα με δυνητικά διασταυρούμενη αντιδραστικότητα εξετάστηκαν με την ανάλυση Elecsys CMV IgG (η οποία ισοδυναμεί με τη μέτρηση αναφοράς Elecsys ) και με μια συγκριτική ανάλυση CMV IgG που περιλάμβανε τα ακόλουθα δείγματα: δείγματα με αντισώματα έναντι των HBV**, HAV, H*, HIV, HTLV, EBV**, HSV*, VZV**, Parvo B19***, Rubella, Treponema pallidum**, Toxoplasma gondii** δείγματα με αυτοαντισώματα*** (ΑΝΑ, έναντι ιστών, RF) Σε αυτά τα δείγματα βρέθηκε συνολική συμφωνία 96.6 (422/437) με χρήση της μέτρησης αναφοράς Elecsys και της συγκριτικής μεθόδου. 110 δείγματα βρέθηκαν αντίστοιχα αρνητικά και 312 δείγματα βρέθηκαν θετικά. 2 δείγματα βρέθηκαν απροσδιόριστα τόσο με την ανάλυση Elecsys CMV IgG όσο και με τη συγκριτική εξέταση. * HSV, H: βρέθηκαν 2 ασύμφωνα δείγματα σε κάθε ομάδα. ** HBV, EBV, VZV, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii: Βρέθηκε 1 ασύμφωνο δείγμα σε κάθε ομάδα. *** Parvo B19, αυτοαντισώματα: βρέθηκαν 3 ασύμφωνα δείγματα σε κάθε ομάδα. 5 / 7

Ευαισθησία Ευαισθησία (αντιστοιχία αποτελεσμάτων χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος με πρωτοπαθείς λοιμώξεις): Η ευαισθησία της ανάλυσης CMV IgG Αvidity ορίζεται ως το ποσοστό δειγμάτων με πρωτοπαθείς λοιμώξεις από τον ιό CMV (χαρακτηρισμένων από εργαστήρια αναφοράς) στα οποία ανιχνεύτηκαν αντισώματα με χαμηλή ισχύ δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV. Εξετάστηκαν συνολικά 183 μεμονωμένα και διαδοχικά δείγματα που συλλέχθηκαν από εργαστήρια αναφοράς και τα οποία χαρακτηρίστηκαν (με βάση διαγνωστικούς ελέγχους και, όπου ήταν διαθέσιμες, κλινικές ενδείξεις) ότι προέρχονταν από πρωτοπαθείς λοιμώξεις από τον ιό CMV. 31 δείγματα έδωσαν αποτέλεσμα εντός της γκρίζας ζώνης και αποκλείστηκαν από τον υπολογισμό. Τύπος δείγματος Ευαισθησία () Διαγνωστικά 96.1 (74/77) Έγκυοι 93.4 (99/106) Σύνολο 94.5 (173/183) Κατώτατο όριο Ανώτατο όριο 89.0 99.2 86.9 97.3 90.2 97.4 Σχετική ευαισθησία (αντιστοιχία αποτελεσμάτων χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος με δύο αναλύσεις ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV που ήταν διαθέσιμες στο εμπόριο): Εξετάστηκαν μεμονωμένα δείγματα από τυχαία επιλεγμένα δείγματα αιμοδοτών με ορομετατροπή των αντισωμάτων IgG έναντι του ιού CMV από την προηγούμενη έως την παρούσα αιμοδοσία, τα οποία είχαν χαρακτηριστεί ότι περιείχαν αντισώματα χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος IgG έναντι του ιού CMV με χρήση δύο αναλύσεων ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV που ήταν διαθέσιμες στο εμπόριο. Στα 22 από τα 24 δείγματα ανιχνεύτηκαν αντισώματα χαμηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV. 1 δείγμα έδωσε αποτέλεσμα εντός της γκρίζας ζώνης. Ειδικότητα Ειδικότητα (αντιστοιχία αποτελεσμάτων υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνουαντισώματος με όψιμες λοιμώξεις): Η ειδικότητα της ανάλυσης CMV IgG Αvidity ορίζεται ως το ποσοστό δειγμάτων με όψιμες λοιμώξεις από τον ιό CMV (χαρακτηρισμένων από εργαστήρια αναφοράς), στα οποία ανιχνεύτηκαν αντισώματα με υψηλή ισχύ δεσμού αντιγόνου-αντισώματος IgG έναντι του ιού CMV. Εξετάστηκαν συνολικά 95 μεμονωμένα δείγματα που συλλέχθηκαν σε ένα εργαστήριο αναφοράς και τα οποία χαρακτηρίστηκαν (με βάση διαγνωστικούς ελέγχους) ότι προέρχονταν από όψιμες λοιμώξεις από τον ιό CMV. 12 δείγματα έδωσαν αποτέλεσμα εντός της γκρίζας ζώνης και αποκλείστηκαν από τον υπολογισμό. Τύπος δείγματος Ειδικότητα () Διαγνωστικά 90.9 (40/44) Έγκυοι 100 (51/51) Σύνολο 95.8 (91/95) Κατώτατο όριο Ανώτατο όριο 78.3 97.5 93.0 100 89.6 98.8 Σχετική ειδικότητα (αντιστοιχία αποτελεσμάτων υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος σε δείγματα θετικά για τα αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV και αρνητικά για τα αντισώματα IgM έναντι του ιού CMV τα οποία υποδεικνύουν απουσία πρωτοπαθούς λοίμωξης): Εξετάστηκαν συνολικά 365 δείγματα από ελέγχους αιμοδοτών και διαγνωστικούς ελέγχους εγκυμοσύνης (τα οποία υπολογίστηκαν από δείγματα θετικά για τα αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV και αρνητικά για τα αντισώματα IgM έναντι του ιού CMV με αντίστοιχα αποτελέσματα υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος σε δύο συγκριτικές μεθόδους, τα οποία υποδείκνυαν απουσία πρωτοπαθούς λοίμωξης). 20 δείγματα έδωσαν αποτέλεσμα εντός της γκρίζας ζώνης και αποκλείστηκαν από τον υπολογισμό. Τύπος δείγματος Σχετική ειδικότητα () Αιμοδότες 98.5 (130/132) Έγκυοι 100 (233/233) Σύνολο 99.5 (363/365) Κατώτατο όριο Ανώτατο όριο 94.6 99.8 98.4 100 98.0 99.9 Κατανομή ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος Η δυνατότητα διάκρισης μεταξύ οξείας και όψιμης λοίμωξης από τον ιό CMV αποδείχτηκε με 422 μεμονωμένα και διαδοχικά δείγματα τα οποία συλλέχθηκαν από εργαστήρια αναφοράς και ταξινομήθηκαν σε μία από τις παρακάτω κατηγορίες: Κατηγορία A: < 90 ημέρες μετά την υποτιθέμενη εκδήλωση της λοίμωξης ή την ημερομηνία πρώτης αιμορραγίας (μεμονωμένα και διαδοχικά δείγματα ασθενών οι οποίοι έπασχαν αρχικά από πρωτοπαθή λοίμωξη με αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV), n = 225 δείγματα Κατηγορία B: 90 180 ημέρες μετά την υποτιθέμενη εκδήλωση της λοίμωξης ή ημερομηνία πρώτης αιμορραγίας (μεμονωμένα και διαδοχικά δείγματα ασθενών οι οποίοι έπασχαν αρχικά από πρωτοπαθή λοίμωξη έναντι του ιού CMV), n = 66 δείγματα Κατηγορία Γ: > 180 ημέρες μετά την υποτιθέμενη εκδήλωση της λοίμωξης ή την ημερομηνία πρώτης αιμορραγίας (μεμονωμένα και διαδοχικά δείγματα ασθενών οι οποίοι έπασχαν αρχικά από πρωτοπαθή λοίμωξη με αντισώματα IgG έναντι του ιού CMV), n = 131 δείγματα Η ακριβής κατανομή των αποτελεσμάτων εντός της γκρίζας ζώνης, χαμηλής και υψηλής ισχύος δεσμού αντιγόνου-αντισώματος δίνεται στο παρακάτω διάγραμμα: Βιβλιογραφία 1 Boppana SB, Pass RF, Britt WS, et al. Symptomatic congenital cytomegalovirus infection: neonatal morbidity and mortality. Pediatr Infect Dis J 1992;11:93-99. 2 Alford CA, Stagno S, Pass RF, et al. Congenital and perinatal cytomegalovirus infections. Rev Infect Dis 1990;12:745-753. 3 Peckham CS. Cytomegalovirus infection: congenital and neonatal disease. Scand J Infect Dis Suppl 1991;80:82-87. 4 Fowler KB, Stagno S, Pass RF, et al. The outcome of congenital cytomegalovirus infection in relation to maternal antibody status. N Eng J Med 1992;326:663-667. 6 / 7

5 Pass RF, Fowler KB, Boppana SB, et al. Congenital cytomegalovirus infection following first trimester maternal infection: symptoms at birth and outcome. J Clin Virol 2006;35:216-220. 6 Revello MG, Gerna G. Maternal, fetal and neonatal diagnosis of congenital human cytomegalovirus infection. Expert Opin Med Diagn 2008;2(5):547-563. 7 Grangeot-Keros L, Mayaux MJ, Lebon P, et al. Value of cytomegalovirus (CMV) IgG avidity index for the diagnosis of primary infection in pregnant women. J Infect Dis 1997;175:944-946. 8 Macé M, Sissoeff L, Rudent A, et al. A serological testing algorithm for the diagnosis of primary CMV infection in pregnant women. Prenat Diagn 2004;24:861-863. 9 Lazzarotto T, Guerra B, Lanari M, et al. New advances in the diagnosis of congenital cytomegalovirus infection. J Clin Virol 2008;41:192-197. 10 Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens. (29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register. 11 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. Για περισσότερες πληροφορίες, ανατρέξτε στο κατάλληλο εγχειρίδιο χρήσης του συγκεκριμένου αναλυτή, στα αντίστοιχα φύλλα εφαρμογής, στις πληροφορίες προϊόντος και στα φύλλα μεθόδου όλων των απαραίτητων συστατικών (εάν είναι διαθέσιμα για τη χώρα σας). Σε αυτό το φύλλο μεθόδου χρησιμοποιείται πάντοτε μια τελεία (στιγμή) ως υποδιαστολή, προκειμένου να σηματοδοτεί το όριο μεταξύ του ακέραιου και του κλασματικού μέρους ενός δεκαδικού αριθμού. Δεν χρησιμοποιούνται τελείες ως διαχωριστικά στις χιλιάδες. Σύμβολα Η Roche Diagnostics χρησιμοποιεί τα ακόλουθα σύμβολα και σήματα πέραν αυτών που παρατίθενται στο πρότυπο ISO 15223 1. CONTENT SYSTEM Περιεχόμενα συσκευασίας Αναλυτές στους οποίους μπορούν να χρησιμοποιηθούν τα αντιδραστήρια Αντιδραστήριο Βαθμονομητής Όγκος μετά την ανασύσταση ή την ανάμιξη Οι σημαντικές προσθήκες ή αλλαγές υποδεικνύονται από μια λωρίδα υπόδειξης αλλαγής στο περιθώριο. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com 7 / 7