Growth Hormone (hgh) (Recombinant 98/574) For use on IMMULITE 2000 systems

Growth Hormone (hgh) (Recombinant 98/574) For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of human growth hormone in serum, as an aid in patient management. Catalog Number: L2KGRH2 (200 tests) Test Code: GRH Color: Red Summary and Explanation Human growth hormone (hgh, somatotropin) is a polypeptide originating in the anterior pituitary. It is 191 amino acids in length and has a molecular mass of approximately 22,000 daltons. Its metabolic effects are primarily anabolic. It promotes protein conservation and engages a wide range of mechanisms for protein synthesis. It also enhances glucose transport and facilitates the buildup of glycogen stores. Another family of peptide hormones, the somatomedins, mediates its cascade of growth-promoting actions. 1 Measurement of hgh is primarily of interest in the diagnosis and treatment of various forms of inappropriate growth hormone secretion. Clinical disorders of hyposecretion include dwarfism and unattained growth potential. Hypersecretion is associated with gigantism and acromegaly. Caution must be exercised in the clinical interpretation of growth hormone levels. These vary throughout the day, making it difficult to define a reference range or to judge an individual's status based on single determinations. Many factors are known to influence the rate of growth hormone secretion, including periods of sleep and wakefulness, exercise, stress, hypoglycemia, estrogens, corticosteroids, L-dopa, and others. 1 Because of its similarity to prolactin and placental lactogen, earlier growth hormone immunoassays were often plagued with falsely high values in pregnant and lactating women. Because not all acromegalic individuals have elevated baseline levels, suppression tests based on glucose loading are of value in this context. In spite of the induced hyperglycemia, there is rarely a decrease from baseline levels in acromegaly. 2 Growth hormone-deficient individuals have fasting/resting levels similar to those found in healthy individuals. Various challenge tests have therefore been devised to differentiate these groups. Thus, with the onset of deep sleep or after 15 to 20 minutes of vigorous exercise, growth hormone levels normally show a rise. Other tests of growth hormone responsiveness are based on the administration of L-dopa, arginine and insulin. Propanolol or estrogen are sometimes given in conjunction with the primary stimulus to accentuate the response. 4,5 A small number of cases of dwarfism have been documented in which both the basal level and the response to challenge testing were normal. Such cases may involve tissue insensitivity to either growth hormone or the somatomedins, or the presence of antibodies or immunoreactive but biologically inactive growth hormone. 4 Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Growth Hormone is a solid-phase, two-site chemiluminescent immunometric assay. The solid phase (bead) is coated with murine monoclonal anti-hgh antibody. The reagent contains alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to a rabbit anti-hgh polyclonal antibody. The reagent and hgh in the sample are incubated together with a bead coated with a murine anti-hgh monoclonal antibody to form an antibody-sandwich complex. Unbound enzyme conjugate is then removed by a centrifugal wash. Finally, chemiluminescent substrate is added to 2 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

the reaction tube and signal is generated in proportion to the bound enzyme. Incubation Cycles: 1 30 minutes Time to First Result: 35 minutes Specimen Collection Patient must be fasting and at complete rest 30 minutes before blood collection. 6,7 The use of an ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Growth Hormone has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 25 µl serum Storage: Refrigerate immediately. Stable at 2 8 C for 8 hours, 6,7 or for 2 months (aliquotted) at 20 C. Avoid repeated thawing and freezing. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. GH Bead Pack (L2GRH12) With barcode. 200 beads, coated with murine monoclonal anti-hgh antibody. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KGRH2: 1 pack GH Reagent Wedge (L2GRHA2) With barcode. 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to rabbit polyclonal anti-hgh antibody in buffer. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KGRH2: 1 wedge Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. GH Adjustors (LGHL, LGHH) Two vials (Low and High) containing lyophilized hgh in nonhuman serum, with preservative. Reconstitute each vial with 3.0 ml distilled or deionized water. Mix by gentle swirling or inversion until the lyophilized material is fully dissolved. Stable at 2 8 C for 30 days after reconstitution, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KGRH2: 1 set Before making an adjustment, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes so that the barcodes can be read by the on-board reader. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 3

Kit Components Supplied Separately Multi-Diluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) For the on-board dilution of high samples. One vial of concentrated (ready-to-use), nonhuman protein/buffer matrix, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2M2Z: 25 ml. L2M2Z4: 55 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 100 mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2M2Z: 3 labels L2M2Z4: 5 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of human growth hormone. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values A study performed on 67 healthy adult males and 149 healthy adult females yielded the following reference intervals: Males: Up to 3 ng/ml Females: Up to 8 ng/ml Secretion of growth hormone by the pituitary gland is episodic and pulsatile, and transient levels up to 40 ng/ml have been observed in healthy subjects. Because serum levels are rather low between pulses in healthy individuals, immunoassays with sufficient sensitivity are necessary to distinguish patients with abnormally low values from healthy subjects who have values that happen to fall in the low-normal range. Thus, basal or random levels of hgh provide little diagnostic information. In some individuals, spontaneous growth hormone secretion is better monitored by using a continuous withdrawal pump, or by drawing specimens for hgh assay every 20 to 30 minutes over a 12-to-24-hour period. A number of provocative tests designed to stimulate or suppress release are also used to assess growth hormone secretion; the definition of abnormal responses varies with the laboratory. 1 Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Patients on hgh therapy may develop human antibodies to hgh that will interfere in the assay and cause falsely low values. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test 4 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in ng/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: ng/ml 3.0 miu/l WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Reportable Range: 0.05 to 40 ng/ml (0.15 120 miu/l) WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Analytical Sensitivity: 0.01 ng/ml High Dose Hook Effect: None up to 17,000 ng/ml Precision: Five samples were processed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three hgh solutions (120, 240 and 480 ng/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antibody is highly specific for human growth hormone. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of conjugated and unconjugated bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of hemoglobin in concentrations up to 512 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl has no effect on results, within the precision of the assay. Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 20 volunteers into plain, heparinized, EDTA and Becton Dickinson SST vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of hgh, to obtain values throughout the reportable range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 Growth Hormone procedure. (Heparin) = 0.99 (Serum) + 0.07 ng/ml r = 0.997 (EDTA) = 1.0 (Serum) 0.01 ng/ml r = 0.997 (SST) = 0.98 (Plain Tubes) + 0.02 ng/ml r = 0.999 Means: 4.15 ng/ml (Heparin) 4.12 ng/ml (EDTA) 4.14 ng/ml (Serum) 4.09 ng/ml (SST) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Growth Hormone (LKGRH, WHO NIBSC 2 nd IS 98/574) on 72 samples. (Concentration range: approximately 0.1 to 28 ng/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 1.03 (IML) + 0.06 ng/ml r = 0.997 Means: 6.75 ng/ml (IMMULITE 2000) 6.48 ng/ml (IMMULITE) References 1) Whitley RJ, Meikle AW, Watts NB. Endocrinology. Part 2: Protein hormones. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 2nd ed. Philadelphia: Saunders, 1994: 1665-70. 2) Daughaday WM, Cryer PE. Growth hormone hypersecretion and acromegaly. Hospital Practice. no. 8 August 1978;13:75-80. 3) Raite S. The standards for human growth hormone assays. In: Laron Z, Butenandt O, editors. Evaluation of Growth Hormone Secretion. Basel: Karger, 1983: 162-9. 4) Van Wyk JJ. Diagnosis of growth hormone deficiency and other causes of growth failure. The Endocrine Society: Syllabus for the 35th Annual Postgraduate Assembly October 1983: 90-106. 5) Van Wyk JJ, Underwood L. Growth hormone, somatomedins and growth failure. Hospital Practice no. 8 August 1978;13:57-67. 6) Tietz NW, editor. Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1995: 300. 7) Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 2nd ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1994: 1670. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 5

Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. Tables and Graphs Precision (ng/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 2.6 0.09 3.5% 0.17 6.5% 2 3.7 0.17 4.6% 0.21 5.7% 3 5.3 0.18 3.4% 0.29 5.5% 4 7.9 0.23 2.9% 0.33 4.2% 5 17 0.72 4.2% 1.13 6.6% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 W serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Specificity Compound 1 ng/ml Added 2 % Cross reactivity 3 FSH 10,000 0.001% Free Beta HCG 280 ND HPL 100 0.03% LH 3663 0.5% Prolactin 40,000 ND TSH 11,125 0.01% ND: nondetectable 4 Linearity (ng/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 8 in 8 5 0.95 4 in 8 0.48 0.47 102% 2 in 8 0.25 0.24 104% 1 in 8 0.12 0.12 100% 2 8 in 8 2.09 4 in 8 1.06 1.04 102% 2 in 8 0.55 0.52 106% 1 in 8 0.27 0.26 104% 3 8 in 8 3.53 4 in 8 1.83 1.76 104% 2 in 8 0.86 0.88 98% 1 in 8 0.43 0.44 98% 4 8 in 8 6.07 4 in 8 2.81 3.04 92% 2 in 8 1.39 1.52 91% 1 in 8 0.72 0.76 95% 5 8 in 8 30.1 4 in 8 14.6 15.1 97% 2 in 8 7.17 7.53 95% 1 in 8 3.78 3.76 101% 6 8 in 8 36.9 4 in 8 16.3 18.4 89% 2 in 8 8.02 9.22 87% 1 in 8 4.15 4.61 90% Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 ND: Nieoznaczlne. 6 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Recovery (ng/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 0.00 A 6.41 6.00 107% B 11.3 12.0 94% C 23.8 24.0 99% 2 0.00 A 5.97 6.00 100% B 10.9 12.0 91% C 23.7 24.0 99% 3 0.12 A 6.87 6.11 112% B 12.2 12.1 101% C 24.2 24.1 100% 4 0.20 A 5.99 6.19 97% B 11.0 12.2 90% C 21.8 24.2 90% 5 0.26 A 6.24 6.24 100% B 11.2 12.2 92% C 22.8 24.2 94% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Method Comparison IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) 30 20 10 0 0 10 20 30 IMMULITE/IMMULITE 1000 Growth Hormone (hgh), ng/ml (IML 2000) = 1.03 (IML) + 0.06 ng/ml r = 0.997 English. Growth Hormone Česky. Růstový hormon. Ελληνικά. Αυξητική Ορμόνη. Polski. Hormon Wzrostu. Česky IMMULITE 2000 Růstový hormone (hgh) Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke stanovení koncentrace lidského růstového hormonu v séru, jakožto pomůcky při péči o pacienta. Katalogové číslo : L2KGRH2 (200 stanovení) Kód metody : GRH Barva : červená Shrnutí a vysvětlení Lidský růstový hormon (hgh, somatotropin) je polypeptid vznikající v adenohypofýze. Skládá se z 191 aminokyselin a jeho molekulová hmotnost je přibližně 22 000 daltonů. Jeho metabolické účinky jsou v první řadě anabolické. Podporuje zachování bílkovin a spouští celou řadu mechanizmů proteosyntézy. Rovněž zvyšuje transport glukózy a napomáhá tvorbě zásob glykogenu. Další skupina peptidických hormonů, somatomediny, jsou prostředníkem rozsáhlého působení hgh při stimulaci růstu. 1 Stanovení hgh je důležité především při diagnostice a léčbě různých forem nesprávné sekrece růstového hormonu. Klinické poruchy hyposekrece zahrnují trpasličí vzrůst a nedosáhnutý potenciál růstu. Hypersekrece se pojí s gigantizmem a akromegalií. Při klinické interpretaci koncentrace růstového hormonu je třeba dbát opatrnosti. Koncentrace se v průběhu dne mění, proto je nesnadné určit referenční rozmezí nebo posoudit stav jednotlivce na základě jediného stanovení. Existuje mnoho faktorů, které mají vliv na míru sekrece růstového hormonu, včetně období spánku a bdělosti, cvičení, stresu, hypoglykémie, estrogenů, kortikosteroidů, L-DOPA a další. 1 Protože hgh je podobný prolaktinu a laktogenu placenty, často bývalo stanovení růstového hormonu poznamenáno falešně vysokými hodnotami u těhotných a kojících žen. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 7

Protože ne všichni jedinci s akromegalií se vyznačují zvýšeným výchozím množstvím hgh, jsou v tomto ohledu užitečné supresní testy založené na zavádění glukózy. Navzdory indukované hyperglykémií jen málokdy u akromegalie dojde k poklesu vůči výchozím hodnotám. 2 Jedinci s deficitem růstového hormonu mají hodnoty nalačno/při odpočinku podobné jako zdravé osoby. Proto byly k rozlišení těchto skupin sestaveny různé provokační testy. Při nástupu hlubokého spánku nebo po 15 až 20 minutách intenzivního cvičení se hladina růstového hormonu normálně zvyšuje. Jiné testy schopnosti růstového hormonu odpovídat na podněty jsou založené na podávání L-DOPA, argininu a inzulínu. Ke zvýraznění odezvy jsou někdy spolu s primárním podnětem podány i propanolol nebo. 4,5 Je zaznamenáno několik málo případů trpasličího růstu, kdy jak bazální úroveň, tak i odezva na provokační test byly normální. Tyto případy můžou znamenat necitlivost tkání buď na růstový hormon nebo somatomediny nebo přítomnost protilátek nebo imunoreaktivního, leč biologicky neaktivního, růstového hormonu. 4 Princip Stanovení Stanovení Růstový hormon na analyzátorech IMMULITE 2000 je oboustranná chemiluminiscenční imunometrická metoda v pevné fázi. Pevná fáze (kulička) je potažena myší monoklonální protilátkou proti hgh. Reagencie obsahuje alkalickou fosfatázu (z telecího střeva) konjugovanou s polyklonální králičí protilátkou proti hgh. Reagencie spolu s hgh obsaženým ve vzorku jsou společně inkubovány s kuličkou potaženou myší monoklonální protilátkou proti hgh za vzniku sendvičového komplexu. Nenavázaný enzymový konjugát je poté odstraněn centrifugačním mytím. Nakonec se do testovací jednotky přidá chemiluminiscenční substrát a generovaný signál je přímo úměrný množství navázaného enzymu. Inkubační cykly : 1 30 minut Čas do prvního výsledku : 35 minut Odebírání vzorků Pacient musí být nalačno a musí být 30 minut před odběrem krve v naprostém klidu. 6,7 K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře ; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. U některých vzorků, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může přinášet rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů sraženin a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Růstový hormon na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými variantami jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 25 μl séra Skladování : Okamžitě uložte do chladu. Stabilní 8 hodin při teplotě 2 8 C 6,7 nebo rozdělené na alikvotní části 2 měsíce při teplotě 20 C. Vyvarujte se opětovného rozmrazování a zmrazování. Upozornění a bezpečnostní opatření Určeno pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfylis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg) a na protilátky proti hepatitidě typu C. 8 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, by se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminiscenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. GH Zásobník s kuličkami (L2GRH12) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených monoklonální myší protilátkou proti hgh. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KGRH2 : 1 balení GH Reagencie (L2GRHA2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s polyklonální králičí protilátkou proti hgh, v pufru. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KGRH2 : 1 nádobka Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. GH Kalibrátory (LGHL, LGHH) Dvě ampulky s vysokou a nízkou koncentrací lyofilizovaného hgh v nehumánním séru, s konzervačním prostředkem. Rekonstituujte každou ampulku přidáním 3,0 ml destilované nebo deionizované vody. Míchejte jemným kroužením nebo překlápěním až do úplného rozpuštění lyofilizovaného materiálu. Stabilní při 2 8 C 30 dní po rozpuštění, nebo 6 měsíců při 20 C rozdělené na alikvotní části. L2KGRH2 : 1 sada Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Multidiluent 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. Jedna ampulka koncentrované (připravené k použití) nehumánní bílkovinové/pufrované matrice, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2M2Z : 25 ml L2M2Z4 : 55 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku 16 100 mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2M2Z : 3 štítky L2M2Z4 : 5 štítků L2SUBM : Chemiluminiscenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 Testovací zkumavky na diluent vzorků (16 100 mm) L2ZC : 250 Uzávěru na testovací zkumavky na diluent vzorků Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu ; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy : přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 9

Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěma koncentracemi (vysokou a nízkou) lidského růstového hormonu. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Ve studii provedené u 67 zdravých dospělých mužů a 149 zdravých dospělých žen byly zjištěny tyto referenční intervaly : Muži : Do 3 ng/ml Ženy : Do 8 ng/ml Sekrece růstového hormonu hypofýzou je epizodická a pulzační a u zdravých jedinců se vyskytuje přechodné zvýšení hladiny hgh na 40 ng/ml. Protože sérové množství hormonu mezi jednotlivými impulsy je u zdravých osob poměrně nízké, k odlišení pacientů s abnormálně nízkou hladinou hgh od jedinců, u kterých naměřené hodnoty právě spadly do spodní části normálního rozmezí, je nezbytný dostatečně citlivý imunologický test. Bazální a náhodné hodnoty hgh tak poskytují málo diagnostických informací. U některých osob se dá spontánní sekrece růstového hormonu nejlépe monitorovat pomocí nepřetržité odběrové pumpy nebo odebíráním vzorků ke stanovení hgh každých 20 až 30 minut během 12 až 24-hodinového období. Ke zhodnocení sekrece růstového hormonu se rovněž používají četné provokační testy navržené tak, aby stimulovaly nebo potlačovaly uvolňování hormonu. Definice abnormální odezvy je v jednotlivých laboratořích odlišná. 1 Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení U pacientů podstupujících léčbu lidským růstovým hormonem se můžou vyvinout lidské protilátky vůči hgh, které budou interferovat se stanovením a způsobí falešně nízké hodnoty. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v ng/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : ng/ml 3.0 miu/l WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Rozsah měření : 0,05 40 ng/ml (0,15 120 miu/l) WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Analytická citlivost : 0,01 ng/ml High-dose Hook Effect : Do 17 000 ng/ml žádný Přesnost : Pět vzorků bylo zpracováno dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Precision".) Linearita: Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearity".) Zpětná Výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků hgh (120, 240 a 480 ng/ml) v poměru 1 : 19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Recovery".) 10 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Specificita : Protilátka je silně specifická vůči lidskému růstovému hormonu. (Viz tabulka "Specificity".) Bilirubin : Přítomnost konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost hemoglobinu v koncentracích do 512 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Alternativní typ vzorku : K ohodnocení vlivu použití alternativních typů vzorků byla odebrána krev 20 dobrovolníkům do obyčejných, heparinizovaných, EDTA a Becton Dickinson SST vacutainer zkumavek. Do stejných objemů odpovídajících vzorků byly přidány roztoky různých koncentrací hgh a výsledkem byly hodnoty přes celé kalibrační rozpětí stanovení. Všechny vzorky byly následně stanoveny pomocí testu Růstový hormon na analyzátorech IMMULITE 2000. (Heparin) = 0,99 (Sérum) + 0,07 ng/ml r = 0,997 (EDTA) = 1,0 (Sérum) 0,01 ng/ml r = 0,997 (SST) = 0,98 (Prázdné zkumavky) + 0,02 ng/ml r = 0,999 Střední hodnoty : 4,15 ng/ml (Heparin) 4,12 ng/ml (EDTA) 4,14 ng/ml (Sérum) 4,09 ng/ml (SST) Srovnání metody : Metoda byla porovnána s metodou IMMULITE Growth Hormone (LKGRH, WHO NIBSC 2 nd IS 98/574) na 72 vzorcích. (Koncentrační rozsah : přibližně 0,1 až 28 ng/ml. Viz graf.) Lineární regresí : (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,06 ng/ml r = 0,997 Střední hodnoty : 6,75 ng/ml (IMMULITE 2000) 6,48 ng/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Αυξητική Ορμόνη (hgh) Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της ανθρώπινης αυξητικής ορμόνης στον ορό, ως βοήθημα στη θεραπευτική αντιμετώπιση των ασθενών. Αριθμός Καταλόγου: L2KGRH2 (200 εξετάσεις) Κωδικός ανάλυσης: GRH Χρώμα: Κόκκινο Περίληψη και Επεξήγηση Η ανθρώπινη αυξητική ορμόνη (ggh, σωματοτροπίνη) είναι ένα πολυπεπτίδιο προερχόμενο από το πρόσθιο τμήμα της υπόφυσης. Έχει μήκος 191 αμινοξέα και μοριακή μάζα περίπου 22 000 dalton. Η μεταβολική της δράση είναι κατά κύριο λόγο αναβολική. Συμβάλλει στην διατήρηση των πρωτεϊνών και χρησιμοποιεί ένα ευρύ φάσμα μηχανισμών πρωτεϊνοσύνθεσης. Επίσης, δρα ενισχυτικά στη μεταφορά της γλυκόζης και διευκολύνει την ανάπτυξη αποθηκών γλυκογόνων. Μια άλλη οικογένεια πεπτιδικών ορμονών, οι σωματομεδίνες, μεσολαβεί στην εξέλιξη δράσεων που προάγουν την ανάπτυξη. 1 Η μέτρηση της hgh ενδιαφέρει ιδιαίτερα σε περιπτώσεις διάγνωσης και θεραπείας της μη φυσιολογικής έκκρισης αυξητικής ορμόνης. Οι κλινικές διαταραχές υποέκκρισης περιλαμβάνουν το νανισμό και την ανεπαρκή ανάπτυξη. Η υπερέκκριση συνδέεται με το γιγαντισμό και την ακρομεγαλία. Η κλινική ερμηνεία των επιπέδων αυξητικής ορμόνης πρέπει να γίνεται με προσοχή. Τα επίπεδα της ορμόνης αυξομειώνονται κατά τη διάρκεια της ημέρας και καθιστούν δύσκολο τον καθορισμό ενός εύρους αναφοράς ή την αξιολόγηση της κατάστασης του ασθενούς με βάση τον απλό καθορισμό των τιμών. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 11

Πολλοί γνωστοί παράγοντες επηρεάζουν το ρυθμό έκκρισης της αυξητικής ορμόνης, συμπεριλαμβανομένων των περιόδων ύπνου και εγρήγορσης, της άσκησης, του άγχους, της υπογλυκαιμίας, των οιστρογόνων, των κορτικοστεροειδών, του L-dopa και άλλων. 1 Λόγω της ομοιότητάς της με την προλακτίνη και το λακτογόνο του πλακούντα, οι παλαιότερες ανοσοαναλύσεις αντιμετώπιζαν προβλήματα με λανθασμένα υψηλές τιμές σε έγκυες και θηλάζουσες γυναίκες. Επειδή όλα τα άτομα με ακρομεγαλία δεν εμφανίζουν αυξημένες τιμές βάσης, στο πλαίσιο αυτό χρήσιμες μπορεί να αποδειχθούν οι εξετάσεις καταστολής με βάση το φορτίο γλυκόζης. Παρά την τεχνητή υπεργλυκαιμία, στην ακρομεγαλία δεν παρατηρείται συνήθως μείωση από τα επίπεδα βάσης. 2 Τα άτομα με έλλειψη αυξητικής ορμόνης έχουν επίπεδα νηστείας/ανάπαυσης παρόμοια με εκείνα των υγιών ατόμων. Για τη διαφοροποίηση αυτών των ομάδων από τα υγιή άτομα έχουν επινοηθεί διάφορες δοκιμασίες πρόκλησης. Έτσι, κατά την έναρξη του βαθέος ύπνου ή έπειτα από 15 έως 20 λεπτά δραστήριας άσκησης, τα επίπεδα της αυξητικής ορμόνης θα πρέπει να κανονικά να παρουσιάσουν αύξηση. Άλλες δοκιμασίες ανταπόκρισης της αυξητικής ορμόνης στηρίζονται στη χορήγηση L-dopa, αργινίνης και ινσουλίνης. Ορισμένες φορές χορηγούνται προπανολόνη ή οιστρογόνα σε συνδυασμό με το πρωτογενές ερέθισμα, ώστε να ενισχυθεί περισσότερο η αντίδραση. 4,5 Έχει καταγραφεί ένας μικρός αριθμός περιπτώσεων νανισμού, όπου τόσο τα επίπεδα βάσης όσο και η ανταπόκριση στις δοκιμασίες πρόκλησης υπήρξαν φυσιολογικά. Σε αυτές τις περιπτώσεις ενδέχεται να υφίσταται αναισθησία των ιστών είτε στην αυξητική ορμόνη είτε στις σωματομεδίνες, ή παρουσία αντισωμάτων ή ανοσοαντιδραστική αλλά βιολογικά ανενεργή αυξητική ορμόνη. 4 Αρχή της Διαδικασίας Η IMMULITE 2000 Αυξητική ορμόνη είναι μια ξηρής φάσης, δύο σημείων, χημειοφωταυγής ανοσομετρική ανάλυση. Η ξηρή φάση (σφαιρίδιο) είναι επικαλυμμένη με μονοκλωνικό αντίσωμα αντί-hgh ποντικού. Το αντιδραστήριο περιέχει αλκαλική φωσφατάση (από βόειο έντερο), συζευγμένη με πολυκλωνικό αντίσωμα αντί-hgh κουνελιού. Το αντιδραστήριο και η hgh του δείγματος επωάζονται μαζί με ένα σφαιρίδιο με επικάλυψη μονοκλωνικού αντισώματος αντί-hgh ποντικού και σχηματίζουν ένα σύμπλεγμα sandwich αντισωμάτων. Το ελεύθερο από χημικό δεσμό ενζυμικό παράγωγο απομακρύνεται με φυγόκεντρη πλύση. Τελικά, το χημειοφωταυγές υπόστρωμα προστίθεται στο σωλήνα αντίδρασης και το σήμα παράγεται σε αναλογία με το προσδεδεμένο ένζυμο. Κύκλοι επώασης: 1 30 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 35 λεπτά Συλλογή Δείγματος Ο ασθενής θα πρέπει να νηστέψει και να χαλαρώσει απόλυτα 30 λεπτά πριν την αιμοληψία. 6,7 Συνίσταται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Αυξητική Ορμόνη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευθείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος Όγκος: 25 µl ορού 12 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Φύλαξη: Τοποθετήστε αμέσως στο ψυγείο. Σταθερά στους 2 8 C για 8 ώρες 6,7 ή για 2 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. Αποφύγετε την επανειλημμένη κατάψυξη/απόψυξη. Προειδοποιήσεις και Προφυλάξεις Για διαγνωστική in vitro χρήση Αντιδραστήρια : Αποθηκεύετε στους 2 8 C. Καταστρέψτε σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. Ακολουθείτε τις κοινές οδηγίες και μεταχειρίζεστε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς λοιμωδών ασθενειών. Τα ανθρώπινου αίματος προέλευσης υλικά που χρησιμοποιούνται στην παρασκευή αυτού του κιτ εξετάστηκαν για σύφιλη, για αντισώματα έναντι Human Immunodeficiency Virus (HIV) 1 και 2, για ηπατίτιδας B αντιγόνο επιφανείας, και για αντισώματα ηπατίτιδας C και βρέθηκαν αρνητικά. Αζιδιο του Νατρίου έχει προστεθεί σε συγκέντρωση μικρότερη του 0,1 g/dl,σαν συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Αποφύγετε τη μόλυνση και την έκθεση στο άμεσο ηλιακό φως. (Bλ. Ένθετο.) Νερό: Χρησιμοποιείτε δισαπεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα συστατικά αποτελούν ολοκληρωμένο σετ. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Συσκευασία σφαιριδίων GH (L2GRH12) Με ραβδοκώδικα. 200 σφαιρίδια επικαλυμμένα με μονοκλωνικό αντίσωμα αντί-hgh ποντικού. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία. L2KGRH2: 1 συσκευασία Δοχείο Αντιδραστηρίων GH (L2GRHA2) Με ραβδοκώδικα. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συζευγμένης με πολυκλωνικό αντίσωμα αντί-hgh κουνελιού σε ρυθμιστικό διάλυμα. Σταθερό στους 2 8 C έως την ημερομηνία λήξεως. L2KGRH2: 1 δοχείο Πριν τη χρήση, σχίστε την πάνω ετικέτα, χωρίς να καταστρέψετε το barcode. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές GH (LGHL, LGHH) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό) λυοφιλοποιημένης hgh σε μήτρα μη ανθρώπινου ορού με συντηρητικό. Κάντε ανασύσταση κάθε φιαλίδιου με 3,0 ml απεσταγμένου ή απιονισμένου νερού. Αναδεύστε με ελαφρά περιστροφή ή αναστροφή μέχρι το λυοφιλιμένο υλικό διαλυθεί πλήρως. Είναι σταθεροί στους 2 8 C για 30 μέρες μετά την ανασύσταση ή για 6 μήνες (διαχωρισμένοι) στους 20 C. L2KGRH2: 1 σετ Πριν κάνετε τη ρύθμιση, τοποθετείστε τις κατάλληλες ετικέτες (παρέχονται με το kit) σε δοκιμαστικούς σωλήνες, έτσι, ώστε τα barcodes να μπορούν να διαβαστούν από το κατάλληλο σύστημα. Συστατικά του Kit που παρέχονται ξεχωριστά Πολύ-αραιωτικό 2 (L2M2Z, L2M2Z4) Για την αραίωση στο μηχάνημα των υψηλών δειγμάτων. Ένα φιαλίδιο που περιέχει συμπυκνωμένη (έτοιμη για χρήση), μήτρα μη ανθρώπινης πρωτεΐνης/ρυθμιστικού, με συντηρητικό. Αποθήκευση: 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή 6 μήνες (διαχωρισμένα) στους 20 C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Ετικέτες με ραβδοκώδικες παρέχονται για χρήση με το αραιωτικό. Πριν από τη χρήση, τοποθετείστε μια κατάλληλη ετικέτα σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα 16 100 mm, έτσι ώστε οι ραβδοκώδικες να μπορούν να διαβαστούν από το σύστημα του αναλυτή. L2M2Z: 3 ετικέτες L2M2Z4: 5 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Έμπλυμα του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16 100 mm) IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 13

L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης του δείγματος Χρειάζονται επίσης Δισαπεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ποιότητας, γυάλινα σωληνάρια Διαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Χρονικό διάστημα επαναρύθμισης της καμπύλης: 2 εβδομάδες Δείγματα Ελέγχου Ποιότητας: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιήστε δείγματα ελέγχου ή διαθέσιμα δείγματα ορού τουλάχιστον δύο επιπέδων (χαμηλό και υψηλό) ανθρώπινης αυξητικής ορμόνης. Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Μια μελέτη που πραγματοποιήθηκε σε 67 υγιείς άνδρες ενήλικες και 149 υγιείς γυναίκες ενήλικες καθόρισε τα εξής μεσοδιαστήματα αναφοράς: Άντρες: Έως 3 ng/ml Γυναίκες: Έως 8 ng/ml Η έκκριση αυξητικής ορμόνης από την υπόφυση είναι περιστασιακή και παλμική, ενώ τα υγιή άτομα έχουν παρατηρηθεί μεταβατικά επίπεδα έως 40 ng/ml. Επειδή στα υγιή άτομα τα επίπεδα στον ορό είναι μάλλον χαμηλά μεταξύ των παλμών, απαιτούνται ανοσοαναλύσεις με επαρκή ευαισθησία, ώστε να διακρίνονται οι ασθενείς με μη φυσιολογικά χαμηλές τιμές από τα υγιή άτομα, των οποίων οι τιμές τυχαίνει να παρουσιάζουν πτώση στα κατώτερα φυσιολογικά επίπεδα. Συνεπώς, τα τυχαία ή βασικά επίπεδα της hgh παρέχουν περιορισμένες διαγνωστικές πληροφορίες. Σε ορισμένα άτομα, η αυτόματη έκκριση αυξητικής ορμόνης παρακολουθείται ευκολότερα με χρήση μιας μόνιμης αντλίας ή με συλλογή δειγμάτων για ανάλυση hgh ανά 20 έως 30 λεπτά για διάστημα 12 έως 24 ώρες. Επιπλέον, για την εκτίμηση της έκκρισης αυξητικής ορμόνης χρησιμοποιούνται ορισμένες δοκιμασίες πρόκλησης, οι οποίες ενισχύουν ή μειώνουν την έκλυση. Ο ορισμός των μη φυσιολογικών αντιδράσεων διαφέρει ανάλογα με το εργαστήριο. 1 Θεωρήστε αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς. Περιορισμοί Οι ασθενείς υπό θεραπεία με hgh ενδέχεται να αναπτύξουν ανθρώπινα αντισώματα κατά της hgh, τα οποία επηρεάζουν την ανάλυση και δίνουν παραπλανητικά χαμηλές τιμές. Ετεροφυλικά αντισώματα στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται στα συστατικά της μεθόδου προκαλώντας δυσκολίες σε μεθόδους in vitro ανοσοανίχνευσης. [Bλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Δείγματα ασθενών που εκτίθενται συστηματικά σε ζώα ή προϊόντα ζωικού ορού μπορούν να παρουσιάσουν αυτού του τύπου την αλληλεπίδραση που προκαλεί δυνητικά ένα ανώμαλο αποτέλεσμα. Αυτά τα αντιδραστήρια έχουν μορφοποιηθεί έτσι, ώστε να ελαχιστοποιούν τον κίνδυνο της αλληλεπίδρασης. Παρόλ αυτά, μπορεί να εμφανιστούν πιθανές αλληλεπιδράσεις μεταξύ σπάνιων ορών και των συστατικών της μεθόδου. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα που λαμβάνονται από αυτή τη μέθοδο θα πρέπει πάντα να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με τις κλινικές εξετάσεις, το ιατρικό ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. 14 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Απόδοση Δείτε παρακάτω τους πίνακες και τα γραφικά που αναπαριστούν την απόδοση της εξέτασης. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε ng/ml. (Εκτός αν κάτι σημειώνεται διαφορετικά, όλα πραγματοποιήθηκαν σε δείγματα ορών που συλλέχθηκαν σε σωλήνες χωρίς παρεμποδιστές πηκτών ή προσθετικών που προκαλούν θρόμβους.) Παράγοντας μετατροπής: ng/ml 3,0 miu/l WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Εύρος μέτρησης: 0,05 40 ng/ml (0,15 120 miu/l) WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Αναλυτική ευαισθησία: 0,01 ng/ml Επίδραση Φαινομένου Hook: Δεν εμφανίζεται μέχρι τις 17 000 ng/ml Ακρίβεια: Πέντε δείγματα υφίσταντο αναλύσεις εις διπλούν σε διάστημα 20 ημερών, δύο τρεξίματα την ημέρα, σε σύνολο 40 τρεξιμάτων και 80 επαναλήψεων. (Βλ. πίνακα "Precision".) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα "Linearity".) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα (1 με 19) εμπλουτίστηκαν με τρία διαλύματα hgh (120, 240 και 480 ng/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα "Recovery" για τα αντιπροσωπευτικά δείγματα.) Ειδικότητα: Το αντίσωμα έχει υψηλή εξειδίκευση στην ανθρώπινη αυξητική ορμόνη. (Βλ. πίνακα "Specificity".) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία αιμοσφαιρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 512 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Εναλλακτικοί Τύποι Δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 20 εθελοντές σε απλούς, ηπαρινισμένους, EDTA και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Ίσοι όγκοι από τα αντίστοιχα δείγματα προστέθηκαν σε διάφορες συγκεντρώσεις hgh, ώστε να επιτευχθούν τιμές μέσα σε ολόκληρο το εύρος καμπύλης της ανάλυσης και στη συνέχεια αναλύθηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία IMMULITE 2000 Αυξητική Ορμόνη. (Ηπαρίνη) = 0,99 (Ορός) + 0,07 ng/ml r = 0,997 (EDTA) = 1,0 (Ορός) 0,01 ng/ml r = 0,997 (SST) = 0,98 (Απλοί σωλήνες) + 0,02 ng/ml r = 0,999 Μέσοι όροι: 4,15 ng/ml (Ηπαρίνη) 4,12 ng/ml (EDTA) 4,14 ng/ml (Ορός) 4,09 ng/ml (SST) Σύγκριση μεθόδου: Η εξέταση συγκρίθηκε με την IMMULITE Αυξητική Ορμόνη (LKGRH, WHO NIBSC 2 nd IS 98/574) σε 72 δείγματα. (Εύρος συγκέντρωσης: περίπου 0,1 έως 28 ng/ml. Βλ. γράφημα.) Με γραμμική παλινδρόμηση: (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,06 ng/ml r = 0,997 Μέσοι όροι: 6,75 ng/ml (IMMULITE 2000) 6,48 ng/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Hormon wzrostu (hgh) Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczenia poziomu hormonu wzrostu (hgh) w surowicy, przydatny przy postępowaniu z chorymi. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 15

Numery katalogowe: L2KGRH2 (200 testów) Kod Testu: GRH Kolor: Czerwony Wprowadzenie Ludzki hormon wzrostu (hgh, somatotropina) jest polipeptydem wydzielanym przez płat przedni przysadki mózgowej. Składa się ze 191 reszt aminokwasowych, a jego ciężar wynosi ok. 22 kd. Hormon wzrostu pełni funkcje anaboliczne - przyczynia się do podtrzymania istniejących białek oraz uczestniczy w licznych procesach ich syntezy. Wzmaga transport glukozy i ułatwia odbudowywanie zapasów glikogenu. Kaskadowe, pobudzające wzrost działanie somatotropiny podlega wpływowi rodziny peptydowych hormonów zwanych somatomedynami 1 Oznaczanie poziomu hormonu wzrostu istotne jest głównie w przypadku diagnozowania i leczenia nieprawidłowości jego wydzielania. Stany patologiczne związane ze zmniejszonym wydzielaniem hormonu obejmują karłowatość i upośledzenie wzrostu. Nadmierne wydzielanie wiąże się z gigantyzmem i akromegalią. Kliniczna interpretacja wyników oznaczania hormonu wzrostu wymaga ostrożności. Poziom hormonu wykazuje wahania dobowe, co utrudnia zarówno opracowanie zakresów referencyjnych, jak i zdiagnozowanie przypadku na podstawie pojedynczego oznaczenia. Wydzielanie hormonu wzrostu zależne jest od wielu czynników: okresu snu i czuwania, ćwiczeń fizycznych, stresu, hipoglikemii, estrogenów, kortykosterydów, L-DOPA i innych. 1 Ze względu na podobieństwo hormonu wzrostu do prolaktyny i laktogenu łożyskowego wcześniejsze testy immunoenzymatyczne często zawyżały wyniki u kobiet w ciąży i w okresie laktacji. U osób z akromegalią przydatna jest metoda oparta na hamowaniu wydzielania hormonu przez obciążenie glukozą, jako że nie we wszystkich przypadkach akromegalii stwierdzany jest wzrost podstawowego poziomu hgh. Pomimo wywołanej hiperglikemii u osób z akromegalią rzadko dochodzi do obniżenia się wartości wyjściowej hgh. 2 Osoby z niedoborem hormonu wzrostu charakteryzują się podstawowym poziomem hormonu analogicznym do stwierdzanego u osób zdrowych (poziom w spoczynku/na czczo). Różnicowanie stanów patologicznych staje się jednakże możliwe po zastosowaniu testów prowokacyjnych. Poziom hormonu wzrostu wzrasta normalnie w początku fazy głębokiego snu lub w 15 20 minut po intensywnych ćwiczeniach fizycznych. W oznaczaniu hormonu stosuje się ponadto testy określające efekt podanej L-DOPA, argininy i insuliny. Wzmożenie działania stymulującego pierwotnych bodźców uzyskuje się przez równoczesne stosowanie propanololu lub estrogenu. 4,5 Opisano niewielką ilość przypadków karłowatości, w których zarówno poziom podstawowy hormonu wzrostu jak i odpowiedź na prowokację pozostawały w normie. Przypadki takie mogą wiązać się z niewrażliwością tkanki na hormon wzrostu lub somatomedyn, obecnością przeciwciał lub brakiem biologicznej aktywności hormonu. 4 Zasada testu IMMULITE 2000 Hormon Wzrostu jest immunoenzymatycznym, chemiluminescencyjnym testem fazy stałej. Faza stała (kulka) opłaszczona jest mysimi przeciwciałami monoklonalnymi anty-hgh. Odczynnik zawiera fosfatazę alkaliczną (izolowaną z jelita cieląt) sprzężoną z króliczym przeciwciałem poliklonalnym anty-hgh. Odczynnik wraz z hgh z próbki inkubowane są razem z kulką opłaszczoną mysimi monoklonalnymi przeciwciałami anty-hgh tworząc kompleks przeciwciał. Kolejno następuje przepłukanie i odwirowanie niezwiązanego koniugatu. Ostatecznie do kuwety reakcyjnej dodawany jest substrat chemiluminescencyjny, a generowany sygnał jest proporcjonalny do ilości związanego enzymu. Czas inkubacji: 1 30 minut Czas do pierwszego wyniku: 35 minut Preparatyka próbek Badany musi być na czczo i w całkowitym spoczynku 30 minut przed pobraniem krwi. 6,7 16 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Hormon wzrostu nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki: 25 µl surowicy Przechowywanie materiału: Jak najszybciej schłodzić surowicę. Stabilne w 2 8 C przez 8 godzin 6,7 lub 2 miesiące (rozpipetować) w 20 C. Unikać rozmrażania i ponownego zamrażania. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać jako konserwant azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu stanowią komplet. Zestaw działa w oparciu o kod kreskowy. GH Pojemnik z kulkami (L2GRH12) Oznakowany kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-hgh. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KGRH2: 1 opakowanie GH Klin odczynnikowy (L2GRHA2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z króliczym przeciwciałem poliklonalnym anty-hgh w buforowanym roztworze. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KGRH2: 1 klin Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. GH Kalibratory (LGHL, LGHH) Dwie fiolki (niski i wysoki), zawierające liofilizowany hgh w zwierzęcej surowicy z konserwantem. Zawartość każdej fiolki rekonstytuować w 3,0 ml wody destylowanej lub dejonizowanej. Mieszać delikatnie przez toczenie lub odwracanie aż do całkowitego rozpuszczenia. Po rekonstutucji stabilne w 2 8 C przez 30 dni lub przez 6 miesięcy (rozpipetowane ) w 20 C. L2KGRH2: 1 zestaw Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 17

Materiały dostarczane oddzielnie Multi-rozcieńczalnik MD2 (L2M2Z, L2M2Z4) Do automatycznego rozcieńczania wysokich próbek. Jedna fiolka skoncentrowanej (gotowej do użycia), buforowanej zwierzęcej matrycy białkowej, z konserwantem. Po otwarciu stabilny 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2M2Z: 3 nalepki L2M2Z4: 5 nalepek L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący igłę pipetora LRXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek 16 100 mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany odstęp pomiędzy Rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki Kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie hormonu wzrostu. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Badanie przeprowadzone na 67 zdrowych mężczyznach and 149 zdrowych kobietach wykazało następujące przedziały referencyjne: Mężczyźni: Do 3 ng/ml Kobiety: Do 8 ng/ml Wydzielanie hormonu wzrostu przez przysadkę ma charakter epizodyczny i pulsacyjny, u zdrowych osób stwierdzono przejściowe poziomy hgh sięgające nawet do wartości 40 ng/ml. Ze względu na dość niskie stężenia hormonu w surowicy osób zdrowych pomiędzy jego wyrzutami, niezbędne są testy immunoenzymatyczne z dostateczną czułością do odróżnienia chorych z nieprawidłowo niskimi poziomami hgh od osób zdrowych z prawidłowo niskim stężeniem hormonu. W związku z tym podstawowe lub wyrywkowe oznaczenia poziomu hgh dostarczają niewielkiej informacji diagnostycznej. U niektórych osób samorzutne wydzielanie hormonu wzrostu jest lepiej monitorowane za pomocą systemu ciągłego pobierania próbek lub pobierania materiału dla pomiarów hgh co 20 30 minut przez 12 24 godzin. Do oceny wydzielania hgh stosuje się także liczne testy prowokacyjne polegające na pobudzeniu lub hamowaniu wydzielania hormonu (definicja odpowiedzi nieprawidłowej różni się w zależności od laboratorium). 1 Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Chorzy będący na terapii hgh mogą posiadać ludzkie przeciwciała anty-hgh, które interferują z oznaczeniem dając fałszywie niskie wyniki. 18 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach. Wyniki podano w ng/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: ng/ml 3.0 miu/l WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Zakres raportowania: 0,05 40 ng/ml (0,15 120 miu/l) WHO NIBSC 2nd IS 98/574 Czułość analityczna: 0,01 ng/ml Efekt wysokiej dawki Hook Effect: Nie występuje do stężenia 17 000 ng/ml Precyzja: Pięć próbek testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (patrz: tabela Precyzja). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (patrz: tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami hormonu wzrostu o stężeniach kolejno: 120, 240 i 480 ng/ml (patrz: tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało jest wysoce specyficzne w stosunku do hormonu wzrostu (patrz: tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny wolnej i związanej w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność hemoglobiny w ilości do 512 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w stężeniu do 3000 mg/dl nie ma znaczącego wpływu na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano w próbkach krwi pobieranych od 20 wolontariuszy do probówek zwykłych, heparynowych, EDTA oraz probówek z barierą żelową SST, systemu próżniowego Becton Dickinson. Równe objętości porównywanych próbek wzbogacano różnymi stężeniami hgh dla uzyskania wartości w całym zakresie raportowalności testu i oznaczano testem IMMULITE 2000 Hormon wzrostu. (Heparyna) = 0,99 (Surowica) + 0,07 ng/ml r = 0,997 (EDTA) = 1,0 (Surowica) 0,01 ng/ml r = 0,997 (SST) = 0,98 (Zwykła probówka) + 0,02 ng/ml r = 0,999 Średnie: 4,15 ng/ml (Heparyna) 4,12 ng/ml (EDTA) 4,14 ng/ml (Surowica) 4,09 ng/ml (SST) Porównanie metod: Zestaw porównywano z IMMULITE Hormon wzrostu (LKGRH, WHO NIBSC 2 nd IS 98/574) w grupie 72 próbek. (Zakres stężeń: około 0,1 do 28 ng/ml. Patrz wykres.) Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 1,03 (IML) + 0,06 ng/ml r = 0,997 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 19

Średnie: 6,75 ng/ml (IMMULITE 2000) 6,48 ng/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. 2013 Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom 2013-10-08 PIEL2KGRH 4 {9} Changes in this Edition: cc#eu21838: Removed Siemens control (CON6) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne 20 IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08)

Symbol Definition En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie BEAD PACK Symbol Definition En: Use by Cz: Spotřebujte do El: Ημερομηνία λήξης Pl: Wykorzystać do En: Harmful Cz: Škodlivé El: Επιβλαβές Pl: Szkodliwy lub drażniący En: Corrosive Cz: Korozivní El: Διαβρωτικό Pl: Żrący En: Toxic Cz: Toxické El: Τοξικό Pl: Toksyczny En: Dangerous for the environment Cz: Nebezpečné pro životní prostředí El: Επικίνδυνο για το περιβάλλον Pl: Niebezpieczny dla środowiska En: Bead Pack Cz: Zásobník s kuličkami El: Συσκευασία σφαιριδίων Pl: Pojemnik z kulkami LOT En: Keep away from sunlight Cz: Chraňte před slunečním světlem El: Διατηρείτε μακριά από το ηλιακό φως Pl: Chronić przed światłem słonecznym En: Batch code Cz: Šarže El: Κωδικός παρτίδας Pl: Kod serii En: Contains sufficient for (n) tests Cz: Dostatečné množství pro (n) testů El: Περιεχόμενο επαρκές για (n) εξετάσεις Pl: Zawartość wystarczająca na (n) testów 2008-01 En: Date format (year-month) Cz: Formát data (rok-měsíc) El: Μορφή ημερομηνίας (έτος-μήνας) Pl: Zapis daty (rok-miesiąc) TEST UNIT REAG WEDGE REAG WEDGE A REAG WEDGE B REAG WEDGE D ADJUSTOR ADJUSTOR L ADJUSTOR H En: Test Unit Cz: Testovací Jednotky El: Μονάδες ανάλυσης Pl: Jednostki testowe En: Reagent Wedge Cz: Reagencie El: Δοχείο Αντιδραστηρίων Pl: Klin odczynnikowy En: Adjustor Cz: Kalibrátor El: Ρυθμιστής Pl: Kalibrator En: Adjustor, low Cz: Kalibrátor, nízký El: Ρυθμιστής, χαμηλό Pl: Kalibrator, niski En: Adjustor, high Cz: Kalibrátor, vysoký El: Ρυθμιστής, υψηλό Pl: Kalibrator, wysoki IMMULITE 2000 Growth Hormone (hgh) (PIEL2KGRH-4 {9}, 2013-10-08) 21