GE Healthcare Life Sciences. Έναρξη. ÄKTA avant. Μετάφραση από τα Αγγλικά

Transcript

1 GE Healthcare Life Sciences Έναρξη ÄKTA avant Μετάφραση από τα Αγγλικά

2

3 Πίνακας περιεχομένων Πίνακας περιεχομένων 1 Εισαγωγή Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς... 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια Προφυλάξεις ασφαλείας Ετικέτες Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης Πληροφορίες σχετικά με την ανακύκλωση... 3 Έναρξη... 4 Το όργανο και το λογισμικό Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant Επισκόπηση λογισμικού UNICORN Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Method Editor Μονάδα System Control Μονάδα Evaluation... 5 Δημιουργία μεθόδου Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Προκαθορισμένες μέθοδοι Προκαθορισμένες φάσεις Εκτύπωση μεθόδου... 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση Πριν από την προετοιμασία του συστήματος Προετοιμασία της διαδρομής ροής Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Σύνδεση στήλης Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Προετοιμαστείτε για μια ανάλυση σε ψυκτικό θάλαμο... 7 Εκτέλεση μεθόδου Πριν από την έναρξη Εφαρμογή δείγματος Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Παρακολούθηση ανάλυσης Διαδικασίες μετά την ανάλυση Έναρξη ÄKTA avant AA 3

4 Πίνακας περιεχομένων 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων Προβολή αποτελεσμάτων Ολοκλήρωση κορυφών Εκτύπωση αποτελεσμάτων... 9 Συντήρηση Έναρξη ÄKTA avant AA

5 1 Εισαγωγή 1 Εισαγωγή Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Το παρόν κεφάλαιο περιλαμβάνει σημαντικές πληροφορίες για το χρήστη, περιγραφή των σημειώσεων που αφορούν την ασφάλεια, πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς καθώς και μια γενική περιγραφή της προβλεπόμενης χρήσης του ÄKTA avant. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς Βλ. σελίδα 6 10 Έναρξη ÄKTA avant AA 5

6 1 Εισαγωγή 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη Διαβάστε τα παρακάτω πριν από τη χρήση του συστήματος ÄKTA avant Όλοι οι χρήστες πρέπει να διαβάσουν ολόκληρο το Οδηγός εγκατάστασης ÄKTA avant και το Ξεκινώντας με το ÄKTA avant πριν από την εγκατάσταση, τη χρήση ή τη συντήρηση του οργάνου. Μη χρησιμοποιείτε το σύστημα ÄKTA avant με διαφορετικό τρόπο από αυτόν που περιγράφεται στην τεκμηρίωση χρήστη. Σε αντίθετη περίπτωση, υπάρχει κίνδυνος τραυματισμού και πρόκλησης ζημιάς στον εξοπλισμό. Σκοπός των Τα πρώτα βήματα Ο σκοπός αυτού του οδηγού είναι να παρουσιάσει ένα σύντομο και εύκολο οδηγό για το σύστημα, για ένα χρήστη με περιορισμένη ή καμία εμπειρία στο λογισμικό UNICORN και το όργανο ÄKTA avant. Η ροή εργασιών παρουσιάζεται ως πρακτικές οδηγίες σχετικά με τον τρόπο χρήσης του λογισμικού και του οργάνου. Οι οδηγίες αποτελούν ένα βασικό πλαίσιο, το οποίο μπορείτε να διευρύνετε διαβάζοντας επιλεγμένα τμήματα στα άλλα εγχειρίδια. Αυτός ο οδηγός Τα πρώτα βήματα περιλαμβάνει τα παρακάτω θέματα: Βασικές λειτουργίες του ÄKTA avant και του UNICORN Δημιουργία μεθόδων Προετοιμασία του συστήματος για αναλύσεις Εκτέλεση αναλύσεων Διεξαγωγή απλών αξιολογήσεων Εκτύπωση αναφορών Για βέλτιστα αποτελέσματα, ακολουθήστε τον οδηγό κατά τη διάρκεια της χρήσης του συστήματος. 6 Έναρξη ÄKTA avant AA

7 1 Εισαγωγή 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη Προϋποθέσεις Για να ακολουθήσετε τον παρόντα οδηγό και να χρησιμοποιήσετε το όργανο με τον τρόπο για τον οποίο προορίζεται: Πρέπει να έχετε γενικές γνώσεις σχετικά με τη λειτουργία των ηλεκτρονικών υπολογιστών και των Windows. Πρέπει να κατανοείτε τις έννοιες της υγρής χρωματογραφίας. Πρέπει να έχετε διαβάσει και κατανοήσει το κεφάλαιο "Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια" στην τεκμηρίωση χρήστη. Το όργανο και το λογισμικό πρέπει να εγκατασταθούν, να διαμορφωθούν και να βαθμονομηθούν σύμφωνα με το Οδηγός εγκατάστασης ÄKTA avant, Πρέπει να έχει δημιουργηθεί ένας λογαριασμός χρήστη σύμφωνα με το UNICORN 6 Administration and Technical Manual. Πέρα από τις Τα πρώτα βήματα Οι χρήστες που είναι εξοικειωμένοι με το όργανο και το λογισμικό και θέλουν να μάθουν περισσότερα σχετικά με τις προηγμένες λειτουργίες του συστήματος, πρέπει να ανατρέξουν στην παρακάτω λίστα. Για να μάθετε περισσότερα για... Την εγκατάσταση Τη διαχείριση βάσεων δεδομένων Τις μονάδες και τις λειτουργίες του οργάνου Τη βαθμονόμηση Τις προκαθορισμένες μεθόδους Το χειρισμό των στηλών Τη χειροκίνητη επεξεργασία μεθόδων Την αυτόματη προετοιμασία ρυθμιστικών διαλυμάτων BufferPro Ανατρέξτε στο.. Οδηγός εγκατάστασης ÄKTA avant UNICORN 6 Administration and Technical Manual ÄKTA avant User Manual ÄKTA avant User Manual UNICORN 6 Method Manual UNICORN 6 Method Manual UNICORN 6 Method Manual UNICORN 6 Method Manual Έναρξη ÄKTA avant AA 7

8 1 Εισαγωγή 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη Για να μάθετε περισσότερα για... Τη διαδικασία αναζήτησης Το σχεδιασμό πειραμάτων Την αξιολόγηση Την ολοκλήρωση κορυφών Την προσαρμοσμένη μορφή εκτύπωσης Ανατρέξτε στο.. UNICORN 6 Method Manual UNICORN 6 Method Manual UNICORN 6 Evaluation Manual UNICORN 6 Evaluation Manual UNICORN 6 Evaluation Manual Προβλεπόμενη χρήση Το ÄKTA avant είναι ένα σύστημα υγρής χρωματογραφίας που προορίζεται για ανάπτυξη διαδικασιών. Το σύστημα μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη βέλτιστη επιλογή στηλών, μέσων και παραμέτρων ανάλυσης για τον καθαρισμό επιλεγμένων πρωτεϊνών. Το σύστημα ÄKTA avant προορίζεται μόνο για ερευνητική χρήση και δεν πρέπει να χρησιμοποιείται σε κλινικές διαδικασίες ή για διαγνωστικούς σκοπούς. Σημειώσεις που αφορούν την ασφάλεια Η παρούσα τεκμηρίωση χρήση περιλαμβάνει ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ, ΕΠΙΣΗΜΑΝΣΕΙΣ ΠΡΟ- ΣΟΧΗΣ ΚΑΙ ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ σχετικά με την ασφαλή χρήση του προϊόντος. Ανατρέξτε στους παρακάτω ορισμούς. Προειδοποιήσεις ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Ο όρος ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ υποδεικνύει μια επικίνδυνη κατάσταση, η οποία, εάν δεν αποφευχθεί, μπορεί να προκαλέσει θάνατο ή σοβαρό τραυματισμό. Πρέπει να διακόψετε την εργασία σας, εάν οι προϋποθέσεις που αναφέρονται δεν ικανοποιούνται και δεν έχουν γίνει πλήρως κατανοητές. 8 Έναρξη ÄKTA avant AA

9 1 Εισαγωγή 1.1 Σημαντικές πληροφορίες για τον χρήστη Προφυλάξεις ΠΡΟΣΟΧΗ Ο όρος ΠΡΟΣΟΧΗ υποδεικνύει μια επικίνδυνη κατάσταση, η οποία, εάν δεν αποφευχθεί, μπορεί να προκαλέσει μικρό ή μέτριο τραυματισμό. Πρέπει να διακόψετε την εργασία σας, εάν οι προϋποθέσεις που αναφέρονται δεν ικανοποιούνται και δεν έχουν γίνει πλήρως κατανοητές. Σημειώσεις ΣΗΜΕΙΩΣΗ Ο όρος ΣΗΜΕΙΩΣΗ υποδεικνύει οδηγίες που πρέπει να τηρήσετε, ώστε να αποφευχθεί η πρόκληση ζημιάς στο προϊόν ή σε άλλο εξοπλισμό. Σημειώσεις και συμβουλές Σημείωση: ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Οι σημειώσεις χρησιμοποιούνται για την επισήμανση σημαντικών πληροφορίες που συμβάλλουν στη βέλτιστη χρήση του προϊόντος χωρίς προβλήματα. Οι συμβουλές περιλαμβάνουν χρήσιμες πληροφορίες για τη βελτίωση ή τη βελτιστοποίηση των διαδικασιών. Τυπογραφικές συμβάσεις Τα στοιχεία λογισμικού επισημαίνονται στο κείμενο με έντονους πλάγιους χαρακτήρες. Τα διάφορα επίπεδα μενού διαχωρίζονται από άνω και κάτω τελεία, έτσι το στοιχείο File:Open αναφέρεται στην εντολή Open του μενού File. Τα χειριστήρια, οι ενδεικτικές λυχνίες και οι συνδέσεις εξοπλισμού επισημαίνονται στο κείμενο με έντονους χαρακτήρες (π.χ. διακόπτης Power). Οι καταχωρίσεις κειμένου που δημιουργούνται από το UNICORN ή που πρέπει να πληκτρολογήσει ο χρήστης εμφανίζονται σε γραμματοσειρά monotype (π.χ. \Program Files\GE Healthcare\UNICORN\bin\UNICORN Instrument Server.exe.config). Έναρξη ÄKTA avant AA 9

10 1 Εισαγωγή 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς Εισαγωγή Στην ενότητα αυτή αναφέρονται οι οδηγίες και τα πρότυπα με τα οποία συμμορφώνεται το όργανο ÄKTA avant. Πληροφορίες σχετικά με την κατασκευή Στον παρακάτω πίνακα συνοψίζονται οι απαιτούμενες πληροφορίες κατασκευής. Για περισσότερες πληροφορίες, ανατρέξτε στο έγγραφο Δήλωσης Συμμόρφωσης ΕΚ. Απαιτήσεις Όνομα και διεύθυνση κατασκευαστή Περιεχόμενο GE Healthcare Bio-Sciences AB, Björkgatan 30, SE Uppsala, Σουηδία Συμμόρφωση CE Το προϊόν αυτό συμμορφώνεται με τις Ευρωπαϊκές οδηγίες που αναφέρονται στον παρακάτω πίνακα, ικανοποιώντας τα σχετικά εναρμονισμένα πρότυπα. Για περισσότερες πληροφορίες, ανατρέξτε στο έγγραφο Δήλωσης Συμμόρφωσης ΕΚ. Οδηγία 2006/42/ΕΚ 2006/95/ΕΚ 2004/108/ΕΚ 1999/5/ΕΚ Τίτλος Οδηγία για τα μηχανήματα (MD) Οδηγία για τη χαμηλή τάση (LVD) Οδηγία για την ηλεκτρομαγνητική συμβατότητα (ΗΜΣ) Οδηγία για ραδιοφωνικό και τηλεπικοινωνιακό τερματικό εξοπλισμό (R&TTE) Σήμανση CE Η σήμανση CE και η σχετική δήλωση συμμόρφωσης ΕΚ ισχύουν όταν το όργανο: Χρησιμοποιείται ως αυτόνομη μονάδα ή 10 Έναρξη ÄKTA avant AA

11 1 Εισαγωγή 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς Συνδέεται σε άλλα όργανα της GE Healthcare ή Συνδέεται σε άλλα προϊόντα που συνιστώνται ή αναφέρονται στην τεκμηρίωση χρήστη και χρησιμοποιείται στην κατάσταση στην οποία παραδόθηκε από την GE Healthcare, εξαιρουμένων τυχόν τροποποιήσεων που περιγράφονται στην τεκμηρίωση χρήστη. Διεθνή πρότυπα Το προϊόν αυτό πληροί τις απαιτήσεις των παρακάτω προτύπων: Πρότυπο EN ISO EN , IEC , UL , CAN/CSA C22.2 Αρ EN , IEC (Εκπομπές κατά το πρότυπο CISPR 11, ομάδα 1, κατηγορία A) EN , EN EN Περιγραφή Ασφάλεια μηχανικού εξοπλισμού. Γενικές αρχές σχεδιασμού. Αξιολόγηση κινδύνων και μείωση κινδύνων. Απαιτήσεις ασφαλείας ηλεκτρικού εξοπλισμού για μετρήσεις, έλεγχο και εργαστηριακή χρήση. Ηλεκτρικός εξοπλισμός για μετρήσεις, έλεγχο και εργαστηριακή χρήση - Απαιτήσεις ΗΜΣ Ζητήματα ηλεκτρομαγνητικής συμβατότητας και ραδιοφάσματος (ERM), πρότυπο ηλεκτρομαγνητικής συμβατότητας (ΗΜΣ) για ραδιοφωνικό εξοπλισμό και υπηρεσίες. Ζητήματα ηλεκτρομαγνητικής συμβατότητας και ραδιοφάσματος (ERM), συσκευές μικρής εμβελείας (SRD), ραδιοφωνικός εξοπλισμός στο εύρος συχνοτήτων 9 khz έως 25 MHz και συστήματα επαγωγικού βρόχου στο εύρος συχνοτήτων 9 khz έως 30 MHz. Σημειώσεις Το πρότυπο EN ISO είναι εναρμονισμένο με την Οδηγία 2006/42/ΕΚ Το πρότυπο EN είναι εναρμονισμένο με την Οδηγία 2006/95/ΕΚ Το πρότυπο EN είναι εναρμονισμένο με την Οδηγία 2004/108/ΕΚ Το πρότυπο EN είναι εναρμονισμένο με τις Ευρωπαϊκές Οδηγίες 1999/5/ΕΚ και 2004/108/ΕΚ. Το πρότυπο EN είναι εναρμονισμένο με την Ευρωπαϊκή Οδηγία 1999/5/ΕΚ. Έναρξη ÄKTA avant AA 11

12 1 Εισαγωγή 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς Δήλωση FCC Το όργανο ÄKTA avant, εξαιρούμενης της μεταδιδόμενης ενέργειας ραδιοσυχνοτήτων από το μείκτη M9 και τον ανιχνευτή UV U9-D, συμμορφώνεται με τον κανονισμό FCC 47 CFR Μέρος 15b (Ομοσπονδιακή Υπηρεσία Επικοινωνιών (FCC), τίτλος 47 του Κώδικα Ομοσπονδιακών Κανονισμών (CFR), Μέρος 15, Συσκευές ραδιοσυχνοτήτων). Σημείωση: Αυτός ο εξοπλισμός έχει ελεγχθεί και έχει διαπιστωθεί ότι συμμορφώνεται με τα όρια για ψηφιακές συσκευές κατηγορίας A, σύμφωνα με το μέρος 15 των κανονισμών FCC. Τα όρια αυτά έχουν ως σκοπό να παρέχουν εύλογη προστασία από επιβλαβή παρεμβολή, όταν ο εξοπλισμός λειτουργεί σε εμπορικά περιβάλλοντα. Αυτός ο εξοπλισμός παράγει, χρησιμοποιεί και μπορεί να εκπέμπει ενέργεια ραδιοσυχνοτήτων και, αν δεν εγκατασταθεί και δεν χρησιμοποιείται σύμφωνα με το εγχειρίδιο οδηγιών, ενδέχεται να προκαλέσει επιβλαβή παρεμβολή στις ραδιοεπικοινωνίες. Η λειτουργία αυτού του εξοπλισμού σε κατοικημένες περιοχές είναι πιθανό να προκαλέσει επιβλαβή παρεμβολή. Σε αυτή την περίπτωση, ο χρήστης θα κληθεί να διορθώσει την παρεμβολή με δικά του έξοδα. Οι μονάδες μείκτη M9 και ανιχνευτή UV U9-D συμμορφώνονται με τους κανονισμούς FCC 47 CFR Μέρος 15c. Σημείωση: Αυτή η συσκευή συμμορφώνεται με το Μέρος 15c των κανονισμών. Η λειτουργία υπόκειται στις εξής δύο προϋποθέσεις: Η συσκευή δεν πρέπει να προκαλεί επιβλαβείς παρεμβολές και Η συσκευή πρέπει να δέχεται κάθε ληφθείσα παρεμβολή, συμπεριλαμβανομένων των παρεμβολών που ενδέχεται να προκαλέσουν ανεπιθύμητη λειτουργία. Ο χρήστης προειδοποιείται ότι οποιεσδήποτε αλλαγές ή τροποποιήσεις δεν έχουν εγκριθεί ρητά από τον κατασκευαστή μπορούν να καταστήσουν άκυρη την εξουσιοδότηση του χρήστη να χειρίζεται τον εξοπλισμό. Δήλωση συμμόρφωσης για το λογισμικό Το UNICORN 6 είναι τεχνικά συμβατό με όλες τις σχετικές ενότητες των κανονισμών 21 CFR, Μέρος 11, του FDA. Μια λίστα ελέγχου αξιολόγησης του συστήματος σύμφωνα με το μέρος 11 των παραπάνω κανονισμών διατίθεται μέσω του τοπικού αντιπροσώπου της GEHC. 12 Έναρξη ÄKTA avant AA

13 1 Εισαγωγή 1.2 Πληροφορίες σχετικά με τους κανονισμούς Συμμόρφωση συνδεδεμένου εξοπλισμού με τους κανονισμούς Κάθε εξοπλισμός που συνδέεται στο ÄKTA avant θα πρέπει να πληροί τις απαιτήσεις ασφαλείας του προτύπου EN /IEC ή άλλων σχετικών εναρμονισμένων προτύπων. Εντός της Ε.Ε., ο συνδεδεμένος εξοπλισμός πρέπει να φέρει σήμανση CE. Περιβαλλοντική συμμόρφωση Ρύθμιση 2011/65/EΕ 2002/96/ΕΚ Κανονισμός (ΕΚ) αριθ. 1907/2006 ACPEIP Τίτλος Οδηγία σχετικά με τον περιορισμό της χρήσης ορισμένων επικίνδυνων ουσιών σε είδη ηλεκτρικού και ηλεκτρονικού εξοπλισμού (Οδηγία RoHS) Οδηγία σχετικά με τα απόβλητα ειδών ηλεκτρικού και ηλεκτρονικού εξοπλισμού (ΑΗΗΕ) για την καταχώριση, την αξιολόγηση, την αδειοδότηση και τους περιορισμούς των χημικών προϊόντων (REACH) Διοίκηση για τον έλεγχο της μόλυνσης που προκαλείται από προϊόντα ηλεκτρονικής πληροφόρησης, κινεζικός νόμος για τον περιορισμό των επικίνδυνων ουσιών Έναρξη ÄKTA avant AA 13

14 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει οδηγίες σχετικά με τον τρόπο χειρισμού του οργάνου ÄKTA avant με ασφάλεια. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας 2.2 Ετικέτες 2.3 Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης 2.4 Πληροφορίες σχετικά με την ανακύκλωση Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA

15 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Εισαγωγή Το όργανο ÄKTA avant τροφοδοτείται με την τάση του κεντρικού δικτύου και χρησιμοποιεί υγρά υπό πίεση που μπορεί να είναι επικίνδυνα. Πριν από την εγκατάσταση, τη λειτουργία ή τη συντήρηση του συστήματος, πρέπει να γνωρίζετε τους κινδύνους που περιγράφονται στο παρόν εγχειρίδιο. Τηρείτε τις παρεχόμενες οδηγίες, για να αποφευχθούν τραυματισμοί και πρόκληση ζημιάς στον εξοπλισμό. Οι προφυλάξεις ασφαλείας της παρούσας ενότητας χωρίζονται στις παρακάτω κατηγορίες: Γενικές προφυλάξεις Εύφλεκτα υγρά Ατομική προστασία Εγκατάσταση και μετακίνηση του οργάνου Λειτουργία συστήματος Συντήρηση Έναρξη ÄKTA avant AA 15

16 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Γενικές προφυλάξεις ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Ακολουθείτε πάντα αυτές τις γενικές προφυλάξεις, ώστε να αποφευχθούν τραυματισμοί κατά τη χρήση του οργάνου ÄKTA avant. Μην χρησιμοποιείτε το όργανο ÄKTA avant με διαφορετικό τρόπο από αυτόν που περιγράφεται στα εγχειρίδια του ÄKTA avant και του UNICORN. Ο χειρισμός και η συντήρηση του οργάνου ÄKTA avant πρέπει να εκτελούνται μόνο από κατάλληλα εκπαιδευμένο προσωπικό. Για να αποφευχθεί η έκθεση της στήλης σε υπερβολική πίεση, βεβαιωθείτε ότι το όριο πίεσης έχει ρυθμιστεί στην προδιαγραφόμενη μέγιστη πίεση της στήλης. Πριν από τη σύνδεση μιας στήλης στο όργανο ÄKTA avant, διαβάστε τις οδηγίες χρήσης της στήλης. Μη χρησιμοποιείτε εξαρτήματα που δεν παρέχονται ή δεν συνιστώνται από την GE Healthcare. Μη χρησιμοποιείτε το όργανο ÄKTA avant, εάν δεν λειτουργεί σωστά ή εάν έχει υποστεί ζημιά, όπως για παράδειγμα: - Ζημιά στο καλώδιο τροφοδοσίας ή στο βύσμα του - Ζημιά λόγω πτώσης του εξοπλισμού - Ζημιά λόγω διαρροής υγρών στον εξοπλισμό ΣΗΜΕΙΩΣΗ Περιμένετε μέχρι το όργανο να αποκτήσει θερμοκρασία περιβάλλοντος, ώστε να αποφευχθεί η δημιουργία συμπύκνωσης. 16 Έναρξη ÄKTA avant AA

17 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Χρήση εύφλεκτων υγρών ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Κατά τη χρήση εύφλεκτων υγρών με το όργανο ÄKTA avant, λαμβάνετε τις παρακάτω προφυλάξεις, ώστε να αποφευχθεί ο κίνδυνος πυρκαγιάς ή έκρηξης. Κίνδυνος πυρκαγιάς. Πριν από την εκκίνηση του συστήματος, βεβαιωθείτε ότι δεν υπάρχει τυχαία διαρροή στο όργανο ή στους σωλήνες. Κίνδυνος έκρηξης. Για να αποφευχθεί η δημιουργία εκρηκτικής ατμόσφαιρας κατά τη χρήση εύφλεκτων υγρών, βεβαιωθείτε ότι ο εξαερισμός του χώρου πληροί τις τοπικές απαιτήσεις. Κλασματικός συλλέκτης. Μην υποβάλλετε εύφλεκτα υγρά σε κλασματοποίηση. Κατά την εκτέλεση μεθόδων RPC ή άλλων διαδικασιών με χρήση οργανικών διαλυτών, συλλέγετε τα κλάσματα μέσω της βαλβίδας εξαγωγής. Το RPC λειτουργεί με 100% ακετονιτρίλιο σε ÄKTA avant 25. Αντικαθιστάτε πάντα τον πράσινο σωλήνα PEEK μεταξύ της αντλίας συστήματος που χρησιμοποιείται και το μόνιτορ παρακολούθησης της αντλίας πίεσης με τον πορτοκαλί σωλήνα PEEK, εσωτ. διαμ. 0,5 mm, πριν εκτελέσετε το RPC με 100% ακετονιτρίλιο. Ρυθμίστε το συναγερμό πίεσης του συστήματος σε 10 MPa. Το RPC λειτουργεί με 100% ακετονιτρίλιο σε ÄKTA avant 150. Αντικαθιστάτε πάντα τον μπεζ σωλήνα PEEK μεταξύ της αντλίας συστήματος που χρησιμοποιείται και το μόνιτορ παρακολούθησης της αντλίας πίεσης με τον πορτοκαλί σωλήνα PEEK, εσωτ. διαμ. 0,5 mm, πριν εκτελέσετε το RPC με 100% ακετονιτρίλιο. Έναρξη ÄKTA avant AA 17

18 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Ατομική προστασία ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Για την αποφυγή επικίνδυνων καταστάσεων κατά τη χρήση του συστήματος ÄKTA avant, λαμβάνετε τα παρακάτω μέτρα ατομικής προστασίας. Χρησιμοποιείτε πάντα κατάλληλο εξοπλισμό ατομικής προστασίας κατά τη λειτουργία και τη συντήρηση του συστήματος ÄKTA avant. Επικίνδυνες ουσίες. Κατά τη χρήση επικίνδυνων χημικών και βιολογικών παραγόντων, λαμβάνετε όλα τα κατάλληλα προστατευτικά μέτρα, όπως είναι η χρήση προστατευτικών γυαλιών και γαντιών ανθεκτικών στις ουσίες που χρησιμοποιούνται. Τηρείτε τους τοπικούς ή/και εθνικούς κανονισμούς σχετικά με την ασφαλή λειτουργία και συντήρηση του συστήματος. Διάχυση βιολογικών παραγόντων. Ο χειριστής πρέπει να λαμβάνει όλα τα απαιτούμενα μέτρα, ώστε να αποφεύγεται η διάχυση βιολογικών παραγόντων κοντά στο όργανο. Η εγκατάσταση πρέπει να τηρεί τον εθνικό κώδικα πρακτικής για τη βιοασφάλεια. Υψηλή πίεση. Το όργανο ÄKTA avant λειτουργεί υπό υψηλή πίεση. Φοράτε πάντα προστατευτικά γυαλιά. ΠΡΟΣΟΧΗ Για την αποφυγή επικίνδυνων καταστάσεων κατά τη χρήση του συστήματος ÄKTA avant, λαμβάνετε τα παρακάτω μέτρα ατομικής προστασίας. Χρησιμοποιείτε πάντα κατάλληλο εξοπλισμό ατομικής προστασίας, κατά την απόσυρση του εξοπλισμού. Κλείνετε τις θύρες. Για να ελαχιστοποιηθεί ο κίνδυνος έκθεσης σε επικίνδυνα χημικά και υγρά υπό πίεση, κλείνετε πάντα την πτυσσόμενη θύρα και το κάλυμμα της αντλίας πριν από την έναρξη της λειτουργίας. Τραυματισμοί λόγω κοπής. Ο κόφτης σωλήνων είναι εξαιρετικά αιχμηρός και ο χειρισμός του πρέπει να γίνεται με προσοχή, για την αποφυγή τραυματισμού. 18 Έναρξη ÄKTA avant AA

19 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Εγκατάσταση και μετακίνηση του οργάνου ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Για την αποφυγή τραυματισμών κατά την εγκατάσταση ή τη μετακίνηση του οργάνου ÄKTA avant, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Βαρύ αντικείμενο. Το όργανο ÄKTA avant ζυγίζει περίπου 116 kg. Να μετακινείτε το όργανο χρησιμοποιώντας κατάλληλο ανυψωτικό εξοπλισμό ή με τη βοήθεια τεσσάρων ή περισσότερων ατόμων. Οι εργασίες ανύψωσης και μετακίνησης πρέπει να εκτελούνται σύμφωνα με τους τοπικούς κανονισμούς. Οριζόντια μετακίνηση του οργάνου. Για την οριζόντια μετακίνηση του οργάνου απαιτούνται τρία άτομα. Τάση παροχής. Βεβαιωθείτε ότι η τάση παροχής στην επιτοίχια πρίζα είναι ίδια με την τάση που αναγράφεται στο όργανο, πριν συνδέσετε το καλώδιο τροφοδοσίας. Προστατευτική γείωση. Το όργανο ÄKTA avant πρέπει να είναι πάντα συνδεδεμένο σε γειωμένη πρίζα. Καλώδιο τροφοδοσίας. Χρησιμοποιείτε μόνο καλώδια τροφοδοσίας που παρέχονται ή έχουν εγκριθεί από την GE Healthcare. Πρόσβαση στο διακόπτη λειτουργίας και στο καλώδιο τροφοδοσίας. Μη φράζετε τον πίσω και τον πλαϊνό πίνακα του οργάνου. Η πρόσβαση στο διακόπτη λειτουργίας πρέπει να είναι πάντα απρόσκοπτη. Το καλώδιο τροφοδοσίας πρέπει να αποσυνδέεται πάντα εύκολα. Εγκατάσταση του υπολογιστή. Ο υπολογιστής πρέπει να εγκαθίσταται και να χρησιμοποιείται σύμφωνα με τις οδηγίες που παρέχονται από τον κατασκευαστή του υπολογιστή. ΠΡΟΣΟΧΗ Βεβαιωθείτε ότι τα δοχεία αποβλήτων έχουν επαρκή χωρητικότητα για το συνολικό όγκο αποβλήτων που θα δημιουργηθεί κατά την ανάλυση. Για το ÄKTA avant 25, ένα κατάλληλο δοχείο αποβλήτων έχει συνήθως χωρητικότητα 2 έως 10 λίτρων. Για το ÄKTA avant 150, ένα κατάλληλο δοχείο αποβλήτων θα πρέπει να έχει χωρητικότητα 40 λίτρων. Έναρξη ÄKTA avant AA 19

20 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας ΣΗΜΕΙΩΣΗ Για την αποφυγή πρόκλησης ζημιάς στο ÄKTA avant ή σε άλλο εξοπλισμό κατά την εγκατάσταση ή τη μετακίνηση του οργάνου, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Η μέγιστη στάθμη του δοχείου αποβλήτων για το σωλήνα αποβλήτων από τις βαλβίδες πρέπει να είναι λιγότερο από 30 cm πάνω από τον πάγκο εργαστηρίου. Η μέγιστη στάθμη του δοχείου αποβλήτων για το σωλήνα αποβλήτων από τον κλασματικό συλλέκτη και το δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος πρέπει να είναι μικρότερη από το ύψος του πάγκου. Οπές εξαερισμού στο όργανο ÄKTA avant. Για να διασφαλιστεί ο επαρκής εξαερισμός, φυλάσσετε χαρτιά και άλλα αντικείμενα μακριά από τις οπές εξαερισμού του οργάνου. Αποσυνδέετε το όργανο από το ηλεκτρικό δίκτυο. Για να αποφευχθεί η πρόκληση ζημιάς στον εξοπλισμό, να απενεργοποιείτε πάντα το όργανο ÄKTA avant πριν από την αφαίρεση ή την εγκατάσταση μιας μονάδας του οργάνου ή πριν από τη σύνδεση ή την αποσύνδεση ενός καλωδίου. Εσφαλμένη χρήση συνδετήρων UniNet-9. Μη συγχέετε τους συνδετήρες UniNet-9 στον πίσω πίνακα με τους συνδετήρες Firewire. Μη συνδέετε εξωτερικό εξοπλισμό στους συνδετήρες UniNet-9. Μην αποσυνδέετε και μη μετακινείτε το καλώδιο διαύλου UniNet Έναρξη ÄKTA avant AA

21 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Λειτουργία συστήματος ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Για την αποφυγή τραυματισμών κατά τη λειτουργία του συστήματος ÄKTA avant, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Περιστροφή του οργάνου. Βεβαιωθείτε ότι υπάρχει πάντα ελεύθερος χώρος τουλάχιστον 20 cm γύρω από το όργανο ÄKTA avant, ώστε να υπάρχει δυνατότητα επαρκούς εξαερισμού και περιστροφής του στην περιστρεφόμενη βάση του. Κατά την περιστροφή του οργάνου, φροντίστε να μην τεντωθούν και να μην συμπιεστούν οι σωλήνες ή τα καλώδια. Εάν αποσυνδεθεί κάποιο καλώδιο, μπορεί να προκληθεί διακοπή στην τροφοδοσία ή στη λειτουργία του δικτύου. Εάν τεντωθούν οι σωλήνες, οι φιάλες μπορεί να πέσουν, με αποτέλεσμα να προκληθούν διαρροές υγρών και θραύσματα γυαλιών. Η συμπίεση των σωλήνων μπορεί να οδηγήσει σε αύξηση της πίεσης ή έμφραξη της ροής υγρών. Για να αποφευχθεί ο κίνδυνος ανατροπής των φιαλών, να τοποθετείτε πάντα τις φιάλες στο δίσκο ρυθμιστικών διαλυμάτων και να κλείνετε τις θύρες πριν από την περιστροφή του οργάνου. Στερέωση φιαλών δειγμάτων. Στερεώνετε πάντα τις φιάλες και τις κασέτες στους οδηγούς του δίσκου δειγμάτων. Χρησιμοποιείτε κατάλληλους συγκρατητήρες για τις φιάλες. Από τα θραύσματα γυαλιών λόγω πτώσης των φιαλών μπορεί να προκληθεί τραυματισμός. Η διαρροή υγρών ενέχει κίνδυνο πυρκαγιάς και τραυματισμού. Έναρξη ÄKTA avant AA 21

22 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Κίνδυνος ηλεκτροπληξίας μετά από διαρροή. Εάν, σε περίπτωση διαρροής, υπάρχει κίνδυνος εισχώρησης μεγάλου όγκου υγρών στο περίβλημα του οργάνου ÄKTA avant, απενεργοποιήστε αμέσως το όργανο, αποσυνδέστε το καλώδιο τροφοδοσίας και επικοινωνήστε με έναν εξουσιοδοτημένο μηχανικό συντήρησης. Κινούμενα εξαρτήματα κλασματικού συλλέκτη. Μην ανοίγετε το συρτάρι του κλασματικού συλλέκτη, όταν ο κλασματικός συλλέκτης είναι ενεργοποιημένος. Εάν απαιτείται πρόσβαση στον κλασματικό συλλέκτη, πατήστε το Pause και βεβαιωθείτε ότι η κίνηση έχει διακοπεί πριν ανοίξετε το συρτάρι. Χρήση του εξαρτήματος Superloop. Μετά την τοποθέτηση του Superloop, κλείνετε πάντα τη θύρα Syr στη βαλβίδα έγχυσης με ένα πώμα. Εάν στη βαλβίδα έχει συνδεθεί το εξάρτημα Superloop, μπορεί να δημιουργηθεί υπερπίεση κατά την έγχυση. Επικίνδυνες χημικές ουσίες κατά την ανάλυση. Όταν χρησιμοποιείτε επικίνδυνες χημικές ουσίες, εκτελείτε τις διαδικασίες System CIP και Column CIP για έκπλυση όλων των σωλήνων του συστήματος με αποσταγμένο νερό πριν από την επισκευή και τη συντήρηση. Επικίνδυνοι βιολογικοί παράγοντες κατά την ανάλυση. Όταν χρησιμοποιείτε επικίνδυνους βιολογικούς παράγοντες, εκτελέστε τις διαδικασίες System CIP και Column CIP για έκπλυση όλων των σωλήνων του συστήματος με βακτηριοστατικό διάλυμα (π.χ. NaOH), στη συνέχεια με ουδέτερο ρυθμιστικό διάλυμα και τέλος με αποσταγμένο νερό πριν από την επισκευή και τη συντήρηση. 22 Έναρξη ÄKTA avant AA

23 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας ΠΡΟΣΟΧΗ Για την αποφυγή επικίνδυνων καταστάσεων κατά τη λειτουργία του συστήματος ÄKTA avant, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Κίνδυνος έκρηξης. Μην χρησιμοποιείτε θάλαμο ανάμειξης 15 ml στο ÄKTA avant 25. Η μέγιστη πίεση για το θάλαμο ανάμειξης 15 ml είναι 5 MPa. Κίνδυνος θραύσης δοκιμαστικών φιαλιδίων. Μη χρησιμοποιείτε υπερβολική δύναμη κατά την τοποθέτηση φιαλιδίων εσφαλμένων διαστάσεων στις κασέτες του κλασματικού συλλέκτη. Τα γυάλινα φιαλίδια μπορεί να σπάσουν και να προκληθούν τραυματισμοί. Επικίνδυνες χημικές ουσίες ή βιολογικοί παράγοντες στην κυψελίδα ροής UV. Βεβαιωθείτε ότι έχει πραγματοποιηθεί σχολαστική έκπλυση ολόκληρης της κυψελίδας ροής με βακτηριοστατικό διάλυμα (π.χ. NaOH) και αποσταγμένο νερό πριν από την επισκευή και τη συντήρηση. Ηλεκτρόδιο ph Ο χειρισμός του ηλεκτροδίου ph πρέπει να γίνεται με προσοχή. Το γυάλινο άκρο μπορεί να σπάσει και να προκληθεί τραυματισμός. Μέγ. βάρος στο δίσκο ρυθμιστικών διαλυμάτων. Μην τοποθετείτε δοχεία με όγκο άνω των 10 λίτρων το καθένα στο δίσκο ρυθμιστικών διαλυμάτων. Το συνολικό επιτρεπόμενο βάρος πάνω στο δίσκο ρυθμιστικών διαλυμάτων είναι 40 kg. Μέγ. μέγεθος φιαλών στον μπροστινό πίνακα. Μη στερεώνετε φιάλες με όγκο άνω του 1 λίτρου στους οδηγούς του μπροστινού πίνακα. Κίνδυνος έκρηξης. Μην χρησιμοποιείτε θάλαμο ανάμειξης 15 ml στο ÄKTA avant 25. Η μέγιστη πίεση για το θάλαμο ανάμειξης 15 ml είναι 5 MPa. Έναρξη ÄKTA avant AA 23

24 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας ΣΗΜΕΙΩΣΗ Για την αποφυγή πρόκλησης ζημιάς στο ÄKTA avant ή σε άλλο εξοπλισμό κατά τη λειτουργία του οργάνου, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Διατηρείτε την κυψελίδα ροής UV καθαρή. Μην αφήνετε διαλύματα που περιέχουν διαλυμένα άλατα, πρωτεΐνες ή στερεές διαλυτές ουσίες να ξηρανθούν στην κυψελίδα ροής. Προστατεύετε την κυψελίδα ροής από την εισχώρηση σωματιδίων, καθώς μπορεί να προκληθεί ζημιά στην κυψελίδα ροής. Μηχανισμός ακινητοποίησης γυάλινου σωλήνα. Βεβαιωθείτε ότι έχετε ρυθμίσει την πίεση δείγματος σε τιμή μικρότερη της μέγιστης πίεσης του Superloop πριν από την εκτέλεση ροής στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions όταν είναι συνδεδεμένο το Superloop. Αποφεύγετε τη συμπύκνωση υδρατμών. Εάν το ÄKTA avant φυλάσσεται σε ψυκτικό θάλαμο ή άλλο παρόμοιο χώρο, πρέπει να παραμένει ενεργοποιημένο, προκειμένου να αποφευχθεί η συμπύκνωση υδρατμών. Αποφεύγετε την υπερθέρμανση. Εάν το ÄKTA avant φυλάσσεται σε ψυκτικό θάλαμο, ο οποίος είναι απενεργοποιημένος, φροντίστε να απενεργοποιήστε το ÄKTA avant και αφήστε τον ψυκτικό θάλαμο ανοικτό, ώστε να αποφευχθεί η υπερθέρμανση. Τοποθετήστε τον υπολογιστή σε ένα χώρο με θερμοκρασία δωματίου. Αν το όργανο ÄKTA avant τοποθετηθεί σε έναν ψυκτικό θάλαμο, χρησιμοποιήστε έναν υπολογιστή που είναι συμβατός με ψυκτικούς θαλάμους ή τοποθετήστε τον υπολογιστή έξω από τον ψυκτικό θάλαμο και χρησιμοποιήστε το καλώδιο Ethernet που παρέχεται με το όργανο για σύνδεση στον υπολογιστή. 24 Έναρξη ÄKTA avant AA

25 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.1 Προφυλάξεις ασφαλείας Συντήρηση ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Για την αποφυγή τραυματισμών κατά τη συντήρηση του οργάνου ÄKTA avant, τηρείτε τις παρακάτω οδηγίες. Κίνδυνος ηλεκτροπληξίας. Όλες οι επισκευές πρέπει να εκτελούνται από προσωπικό συντήρησης εξουσιοδοτημένο από την GE Healthcare. Μην ανοίγετε καλύμματα και μην αντικαθιστάτε εξαρτήματα, εκτός εάν αναφέρεται διαφορετικά στην τεκμηρίωση χρήστη. Αποσύνδεση ηλεκτρικής τροφοδοσίας. Απενεργοποιείτε πάντα το όργανο πριν από την αντικατάσταση εξαρτημάτων του οργάνου, εκτός εάν αναφέρεται διαφορετικά στην τεκμηρίωση χρήστη. Επικίνδυνες χημικές ουσίες κατά τη συντήρηση. Κατά τη χρήση επικίνδυνων χημικών ουσιών για τον καθαρισμό του συστήματος ή της στήλης, απαιτείται πλύση του συστήματος ή των στηλών με ουδέτερο διάλυμα κατά την τελευταία φάση ή βήμα. ΣΗΜΕΙΩΣΗ Για την αποφυγή πρόκλησης ζημιάς στο ÄKTA avant ή σε άλλο εξοπλισμό κατά τη συντήρηση του οργάνου ÄKTA avant, ακολουθείτε τις παρακάτω οδηγίες. Καθαρισμός. Διατηρείτε το όργανο ÄKTA avant στεγνό και καθαρό. Σκουπίζετε τακτικά με ένα μαλακό, υγρό πανί και ήπιο καθαριστικό, εάν απαιτείται. Αφήνετε το όργανο ÄKTA avant να στεγνώσει πλήρως πριν από τη χρήση. Συντήρηση για προχωρημένους. Διαβάστε τις οδηγίες προσεκτικά πριν από την αποσυναρμολόγηση της κεφαλής αντλίας. Έναρξη ÄKTA avant AA 25

26 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.2 Ετικέτες 2.2 Ετικέτες Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τις ετικέτες ασφαλείας και τις ετικέτες για επικίνδυνες ουσίες που είναι τοποθετημένες στο όργανο ÄKTA avant. Για πληροφορίες σχετικά με τη σήμανση του εξοπλισμού του υπολογιστή, ανατρέξτε στις οδηγίες του κατασκευαστή. Ετικέτες στο όργανο ÄKTA avant Στις παρακάτω εικόνες παρουσιάζονται οι ετικέτες που είναι τοποθετημένες στο όργανο ÄKTA avant. 26 Έναρξη ÄKTA avant AA

27 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.2 Ετικέτες Σύμβολα ασφαλείας Στις ετικέτες χρησιμοποιούνται τα παρακάτω σύμβολα ασφαλείας: Ετικέτα Σημασία Προειδοποίηση! Κίνδυνος ηλεκτροπληξίας. Όλες οι επισκευές πρέπει να εκτελούνται από προσωπικό συντήρησης εξουσιοδοτημένο από την GE Healthcare. Μην ανοίγετε καλύμματα και μην αντικαθιστάτε εξαρτήματα, εκτός εάν αναφέρεται διαφορετικά στην τεκμηρίωση χρήστη. Τάση παροχής. Βεβαιωθείτε ότι η τάση παροχής στην επιτοίχια πρίζα είναι ίδια με την τάση που αναγράφεται στο όργανο, πριν συνδέσετε το καλώδιο τροφοδοσίας. Do NOT fractionate flammable liquids. Προειδοποίηση! Κλασματικός συλλέκτης. Μην υποβάλλετε εύφλεκτα υγρά σε κλασματοποίηση. Κατά την εκτέλεση μεθόδων RPC ή άλλων διαδικασιών με χρήση οργανικών διαλυτών, συλλέγετε τα κλάσματα μέσω της βαλβίδας εξαγωγής. Το σύστημα συμμορφώνεται με τις απαιτήσεις για την ηλεκτρομαγνητική συμβατότητα (ΗΜΣ) στην Αυστραλία και τη Νέα Ζηλανδία. Το σύστημα συμμορφώνεται με τις ισχύουσες ευρωπαϊκές οδηγίες. Αυτό το σύμβολο υποδεικνύει ότι το σύστημα έχει πιστοποιηθεί από ένα Εθνικά Αναγνωρισμένο Εργαστήριο Δοκιμών (NRTL). NRTL είναι ένας οργανισμός που έχει αναγνωριστεί από τη Διεύθυνση Ασφάλειας και Υγιεινής στην Εργασία (OSHA) ότι πληροί τις νομικές απαιτήσεις βάσει του τίτλου 29 του Κώδικα Ομοσπονδιακών Κανονισμών των ΗΠΑ [(29 CFR) Μέρος ]. Έναρξη ÄKTA avant AA 27

28 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.2 Ετικέτες Ετικέτες για επικίνδυνες ουσίες Τα παρακάτω σύμβολα στις ετικέτες αφορούν επικίνδυνες ουσίες: Ετικέτα Σημασία Το σύμβολο αυτό υποδεικνύει ότι ο ηλεκτρικός και ηλεκτρονικός εξοπλισμός δεν πρέπει να απορρίπτεται όπως τα αστικά απόβλητα χωρίς διαλογή. Αντιθέτως, πρέπει να συλλέγεται ξεχωριστά. Επικοινωνήστε με έναν εξουσιοδοτημένο αντιπρόσωπο του κατασκευαστή για πληροφορίες σχετικά με την απόσυρση του εξοπλισμού. Το σύμβολο αυτό υποδεικνύει ότι το προϊόν ενδέχεται να περιέχει επικίνδυνα υλικά άνω των ορίων που έχουν καθοριστεί στο κινεζικό πρότυπο SJ/T , «Απαιτήσεις για όρια συγκέντρωσης συγκεκριμένων επικίνδυνων ουσιών σε ηλεκτρονικά προϊόντα πληροφορικής». 28 Έναρξη ÄKTA avant AA

29 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.3 Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης 2.3 Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο εκτέλεσης ενός τερματισμού λειτουργίας έκτακτης ανάγκης του συστήματος ÄKTA avant. Επίσης, η ενότητα αυτή περιγράφει τις επιπτώσεις μιας διακοπής ρεύματος ή μιας αποσύνδεσης από το δίκτυο. Τερματισμός λειτουργίας σε έκτακτη ανάγκη Σε περίπτωση έκτακτης ανάγκης, ακολουθήστε τα παρακάτω βήματα για τη διακοπή της ανάλυσης: Βήμα 1 Ενέργεια Πιέστε το κουμπί Pause στην οθόνη του οργάνου. Με την ενέργεια αυτή, θα διακοπεί η λειτουργία όλων των αντλιών στο όργανο. Για παύση της ανάλυσης από το UNICORN, κάντε κλικ στο εικονίδιο Pause: Έναρξη ÄKTA avant AA 29

30 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.3 Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης Βήμα 2 Ενέργεια Εάν απαιτείται, απενεργοποιήστε το όργανο μετακινώντας το διακόπτη Power στη θέση O. Η ανάλυση διακόπτεται αμέσως. Διακοπή ρεύματος Οι επιπτώσεις μιας διακοπής ρεύματος εξαρτώνται από τη μονάδα που επηρεάζεται από τη διακοπή. Διακοπή ρεύματος... ÄKTA avant οργάνου Επιπτώσεις... Η ανάλυση διακόπτεται αμέσως Τα δεδομένα που έχουν συγκεντρωθεί έως τη στιγμή της διακοπής ρεύματος διατίθενται στο UNICORN. 30 Έναρξη ÄKTA avant AA

31 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.3 Διαδικασίες έκτακτης ανάγκης Διακοπή ρεύματος... Υπολογιστής Επιπτώσεις... Τερματίζεται η λειτουργία του υπολογιστή UNICORN Στην οθόνη του οργάνου εμφανίζεται η κατάσταση Not connected Η ανάλυση διακόπτεται αμέσως Είναι δυνατή η ανάκτηση των δεδομένων που δημιουργήθηκαν έως 10 δευτερόλεπτα πριν από τη διακοπή ρεύματος Σημείωση: Ενδέχεται να διακοπεί η λειτουργία του προγράμματος-πελάτη UNICORN κατά τη διάρκεια προσωρινής υπερφόρτωσης του επεξεργαστή. Το γεγονός αυτό μπορεί να εμφανιστεί ως βλάβη του υπολογιστή. Η ανάλυση συνεχίζεται και μπορείτε να εκτελέσετε επανεκκίνηση του προγράμματος-πελάτη UNICORN για ανακτήσετε πάλι τον έλεγχο. Αδιάλειπτη παροχή ισχύος (UPS) Μια υπομονάδα UPS μπορεί να αποτρέψει την απώλεια δεδομένων κατά τη διάρκεια διακοπής ρεύματος και να παρέχει χρόνο για ελεγχόμενο τερματισμό λειτουργίας του ÄKTA avant. Για τις απαιτήσεις ισχύος της μονάδας UPS, ανατρέξτε στις προδιαγραφές συστήματος στο ÄKTA avant User Manual. Θυμηθείτε επίσης να λάβετε υπόψη τις προδιαγραφές για τον υπολογιστή και την οθόνη. Ανατρέξτε στην τεκμηρίωση του κατασκευαστή. Έναρξη ÄKTA avant AA 31

32 2 Οδηγίες σχετικά με την ασφάλεια 2.4 Πληροφορίες σχετικά με την ανακύκλωση 2.4 Πληροφορίες σχετικά με την ανακύκλωση Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τις διαδικασίες απόρριψης και ανακύκλωσης του ÄKTA avant Απόσυρση και απόρριψη του εξοπλισμού Όταν αποσύρετε το ÄKTA avant 25 και 150: Ο εξοπλισμός πρέπει να έχει απολυμανθεί (πραγματοποιείται από διαχειριστή). Τα εξαρτήματα πρέπει να διαχωρίζονται και να ανακυκλώνονται σύμφωνα με τους εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς ΠΡΟΣΟΧΗ Χρησιμοποιείτε πάντα κατάλληλο εξοπλισμό ατομικής προστασίας, κατά την απόσυρση του εξοπλισμού. Απόρριψη ηλεκτρικών εξαρτημάτων Τα απόβλητα που αποτελούνται από ηλεκτρικό και ηλεκτρονικό εξοπλισμό δεν πρέπει να απορρίπτονται όπως τα αστικά απόβλητα χωρίς διαλογή. Αντιθέτως, πρέπει να συλλέγονται ξεχωριστά. Επικοινωνήστε με έναν εξουσιοδοτημένο αντιπρόσωπο του κατασκευαστή για πληροφορίες σχετικά με την απόσυρση του εξοπλισμού. 32 Έναρξη ÄKTA avant AA

33 3 Έναρξη 3 Έναρξη Εισαγωγή Το κεφάλαιο αυτό περιγράφει τον τρόπο έναρξης του συστήματος, τόσο του λογισμικού όσο και του οργάνου. Απαραίτητη προϋπόθεση είναι να έχετε δημιουργήσει ήδη ένα προφίλ χρήστη. Για πληροφορίες σχετικά με τον τρόπο ρύθμισης και ορισμού χρηστών, ομάδων χρηστών και δικαιωμάτων πρόσβασης, ανατρέξτε στο UNICORN 6 Administration and Technical Manual. Έναρξη του οργάνου και του υπολογιστή Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για έναρξη του οργάνου και του υπολογιστή. Βήμα 1 Ενέργεια Ενεργοποιήστε το όργανο μετακινώντας το διακόπτη Power στη θέση I. Αποτέλεσμα: Το όργανο ξεκινά και στην οθόνη του οργάνου εμφανίζεται το μήνυμα Not connected. 2 Ενεργοποιήστε τον υπολογιστή και την οθόνη σύμφωνα με τις οδηγίες του κατασκευαστή. Έναρξη ÄKTA avant AA 33

34 3 Έναρξη Έναρξη του UNICORN και σύνδεση Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για έναρξη του UNICORN και σύνδεση στο πρόγραμμα. Βήμα 1 Ενέργεια Κάντε διπλό κλικ στο εικονίδιο UNICORN στην επιφάνεια εργασίας. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Log On. Σημείωση: Εάν δεν υπάρχει σύνδεση με τη βάση δεδομένων, είναι ακόμα πιθανό να συνδεθείτε στο UNICORN και να ελέγξετε ένα σύστημα που εκτελείται. Στο πλαίσιο διαλόγου Log On υπάρχει η επιλογή να ξεκινήσετε το System Control χωρίς κάποια βάση δεδομένων. Κάντε κλικ στην επιλογή Start System Control, για να προχωρήσετε στο επόμενο πλαίσιο διαλόγου Log On. 34 Έναρξη ÄKTA avant AA

35 3 Έναρξη Βήμα 2 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Log On: επιλέξτε User Name. και καταχωρίστε το Password. Σημείωση: Μπορείτε επίσης να επιλέξετε το πλαίσιο ελέγχου Use Windows Authentication και να καταχωρίσετε ένα αναγνωριστικό δικτύου στο πεδίο User Name. κάντε κλικ στο κουμπί Options και επιλέξτε τις υπομονάδες UNICORN που θα εκκινηθούν. κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Ανοίγουν οι επιλεγμένες μονάδες UNICORN. Σύνδεση στο σύστημα Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για σύνδεση του οργάνου στο UNICORN. Έναρξη ÄKTA avant AA 35

36 3 Έναρξη Βήμα 1 Ενέργεια Στη μονάδα System Control, κάντε κλικ στο εικονίδιο Connect to Systems. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Connect to Systems. 2 Στο παράθυρο διαλόγου Connect to Systems: Επιλέξτε ένα σύστημα. Επιλέξτε τη λειτουργία Control. Κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Το επιλεγμένο όργανο μπορεί πλέον να ελέγχεται από το λογισμικό. 36 Έναρξη ÄKTA avant AA

37 4 Το όργανο και το λογισμικό 4 Το όργανο και το λογισμικό Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Αυτό το κεφάλαιο παρέχει μια επισκόπηση του ÄKTA avant: όργανο, λογισμικό και εξαρτήματα. Εικόνα συστήματος Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται το όργανο ÄKTA avant με το λογισμικό UNICORN που είναι εγκατεστημένο σε υπολογιστή. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA 37

38 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant Εισαγωγή Αυτή η ενότητα δείχνει μια επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant. Τεχνικές λεπτομέρειες σχετικά με το όργανο και τις μεμονωμένες μονάδες υπάρχουν στο ÄKTA avant User Manual. Εξωτερικός σχεδιασμός Το όργανο ÄKTA avant έχει αρθρωτό σχεδιασμό, ενώ όλες οι μονάδες χειρισμού υγρών τοποθετούνται στο εξωτερικό μέρος του οργάνου. Τα δοχεία ρυθμιστικού διαλύματος τοποθετούνται στο δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος επάνω από το όργανο. Η οθόνη του οργάνου τοποθετείται στην μπροστινή πλευρά. Η πλευρά αυτή χρησιμοποιείται για το χειρισμό του ενσωματωμένου κλασματικού συλλέκτη, καθώς και του δείγματος. Οι υπόλοιπες μονάδες τοποθετούνται στη δεξιά πλευρά του οργάνου. Η πλευρά αυτή μπορεί να καλυφθεί με μια πτυσσόμενη θύρα και ένα κάλυμμα αντλίας. Περιστρέφοντας το όργανο με την περιστρεφόμενη βάση, μπορείτε να αποκτήσετε εύκολα πρόσβαση σε οποιαδήποτε πλευρά. Εύρος λειτουργίας Ο παρακάτω πίνακας περιλαμβάνει ορισμένα από τα όρια λειτουργίας των οργάνων. ÄKTA avant 25 Παράμετρος Ρυθμός ροής Μέγ. πίεση λειτουργίας Μήκος κύματος Όρια Έως 25 ml/min Σημείωση! Όταν εκτελείτε την οδηγία Column packing flow, ο μέγιστος ρυθμός ροής για το ÄKTA avant 25 είναι 50 ml/min. 20 MPa nm 38 Έναρξη ÄKTA avant AA

39 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant ÄKTA avant 150 Παράμετρος Ρυθμός ροής Μέγ. πίεση λειτουργίας Μήκος κύματος Όρια Έως 150 ml/min Σημείωση! Όταν εκτελείτε την οδηγία Column packing flow, ο μέγιστος ρυθμός ροής για το ÄKTA avant 150 είναι 300 ml/min. 5 MPa nm Έναρξη ÄKTA avant AA 39

40 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant Εικόνα βασικών εξαρτημάτων του οργάνου Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται η θέση των κύριων εξαρτημάτων του οργάνου. Εξάρτημα Εξάρτημα Λειτουργία Λειτουργία 1 Κλασματικός συλλέκτης 7 Οδηγοί συγκρατητήρα 2 Δίσκος ρυθμιστικών διαλυμάτων 8 Διακόπτης Lock/Unlock για περιστρεφόμενη βάση 3 Οθόνη οργάνου 9 Περιστρεφόμενη βάση 4 Πλευρά υγρού 10 Αφαιρούμενη εργαλειοθήκη 5 Πτυσσόμενη θύρα 11 Διακόπτης Power 6 Κάλυμμα αντλίας 40 Έναρξη ÄKTA avant AA

41 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.1 Επισκόπηση του οργάνου ÄKTA avant Εικόνα μονάδων πλευράς υγρού του οργάνου Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζονται οι μονάδες της πλευράς υγρού του οργάνου. Εξάρτημα Εξάρτημα Λειτουργία Λειτουργία 1 Βαλβίδα έγχυσης 11 Βαλβίδα εισαγωγής A 2 Περιοριστής ροής 12 Αντλία συστήματος A 3 Βαλβίδα ph 13 Μείκτης 4 Βαλβίδα στήλης 14 Συσκευή παρακολούθησης πίεσης αντλίας δείγματος 5 Συσκευή παρακολούθησης UV 15 Αντλία δείγματος 6 Συσκευή παρακολούθησης αγωγιμότητας 16 Σωλήνες συστήματος έκπλυσης εμβόλου αντλίας 7 Βαλβίδα εισαγωγής B 17 Βαλβίδα εισαγωγής δείγματος 8 Τετράοδος βαλβίδα 18 Βαλβίδα εξαγωγής 9 Αντλία συστήματος B 19 Οδηγοί συγκρατητήρα 10 Συσκευή παρακολούθησης πίεσης αντλιών συστήματος Έναρξη ÄKTA avant AA 41

42 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN Εισαγωγή Η ενότητα αυτή παρέχει μια σύντομη επισκόπηση του λογισμικού UNICORN: ένα πλήρες πακέτο λογισμικού για τον έλεγχο, την επίβλεψη και την αξιολόγηση οργάνων χρωματογραφίας και αναλύσεων καθαρισμού. Επίσης, περιγράφει τον τρόπο προσπέλασης του προγράμματος βοήθειας που περιλαμβάνεται στο UNICORN. Επισκόπηση των μονάδων του UNICORN Το UNICORN αποτελείται από τέσσερις υπομονάδες: Administration, Method Editor, System Control και Evaluation. Οι κύριες λειτουργίες της κάθε υπομονάδας περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Μονάδα Administration Method Editor System Control Evaluation Κύριες λειτουργίες Εκτέλεση ρύθμισης χρήστη και συστήματος, αρχείο ημερολογίου συστήματος και διαχείριση βάσης δεδομένων. Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων. Έναρξη, προβολή και έλεγχος αναλύσεων. Άνοιγμα αποτελεσμάτων, αξιολόγηση αναλύσεων και δημιουργία αναφορών. Είσοδος σε μονάδα του UNICORN. Για να κάνετε είσοδο σε μια μονάδα: Κάντε κλικ στο κουμπί Taskbar της μονάδας που σας ενδιαφέρει ή Επιλέξτε τη μονάδα ενδιαφέροντος από το μενού Tools σε μια από τις υπόλοιπες μονάδες λογισμικού. 42 Έναρξη ÄKTA avant AA

43 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται το μενού Tools της μονάδας Evaluation. Πρόσβαση στο βοηθητικό πρόγραμμα βοήθειας Το λογισμικό UNICORN περιλαμβάνει ένα περιεκτικό πρόγραμμα βοήθειας. Ο παρακάτω πίνακας περιγράφει τον τρόπο προσπέλασης των διαφορετικών τμημάτων του προγράμματος βοήθειας. Για... Εύρεση πληροφοριών σχετικά με μια μονάδα του UNICORN τότε... Επιλέξτε Help:Help for... στη μονάδα του UNICORN που σας ενδιαφέρει Εύρεση πληροφοριών σχετικά το στοιχείο που έχει επιλεγεί και επισημανθεί (π.χ. παράθυρο, παράθυρο διαλόγου ή φάση μεθόδου) Πιέστε το πλήκτρο F1 με το στοιχείο ενδιαφέροντος που έχει επιλεγεί και επισημανθεί ή Σημείωση: Για εύρεση πληροφοριών σχετικά με μια φάση, βεβαιωθείτε ότι έχει επιλεγεί η καρτέλα Phase Properties, προτού πιέσετε το πλήκτρο F1. Κάντε κλικ στο εικονίδιο Help στο ανοικτό παράθυρο διαλόγου Έναρξη ÄKTA avant AA 43

44 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN Για... Πλοήγησηστηνηλεκτρονική βοήθεια Αναζήτηση συγκεκριμένου όρου στην ηλεκτρονική βοήθεια τότε... Επιλέξτε Help:Help for... σε μια από τις μονάδες του UNICORN (βλ. παραπάνω εικόνα) στο παράθυρο TOC (Πίνακας περιεχομένων), εκπτύξτε τις επικεφαλίδες που σας ενδιαφέρουν για πλοήγηση στη δομή του περιεχομένου Κάντε κλικ στην επικεφαλίδα ενδιαφέροντος για να ανοίξετε μια ενότητα Επιλέξτε Help:Help for... σε μια από τις μονάδες του UNICORN (βλ. παραπάνω εικόνα) Στο παράθυρο Search, καταχωρίστε τον όρο ενδιαφέροντος στο πεδίο εισαγωγής Κάντε κλικ στο κουμπί Search Πρόσβαση στα εγχειρίδια σε μορφή PDF Επιλέξτε Help:Help for... σε μια από τις μονάδες του UNICORN (βλ. παραπάνω εικόνα) στο παράθυρο TOC, εκπτύξτε την επικεφαλίδα UNICORN 6 online documentation portal και επιλέξτε Documentation overview Στην ενότητα PDF manuals, κάντε κλικ σε έναν από τους συνδέσμους κειμένου Κάντε κλικ στην εικόνα ή στο σύνδεσμο κειμένου του εγχειριδίου ενδιαφέροντος 44 Έναρξη ÄKTA avant AA

45 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.2 Επισκόπηση λογισμικού UNICORN Για... Εύρεση πληροφοριών σχετικά με τις οδηγίες μιας μεθόδου τότε... Στη μονάδα Method Editor: Ανοίξτε μια μέθοδο Επιλέξτε τις οδηγίες ενδιαφέροντος στο Instruction box του παραθύρου Text instruction Πιέστε το πλήκτρο F1 Στη μονάδα System Control: Επιλέξτε Manual:Execute Manual Instructions Επεκτείνετε μια επικεφαλίδα και επιλέξτε τις οδηγίες ενδιαφέροντος Πιέστε το πλήκτρο F1 ή Κάντε κλικ στο εικονίδιο Help στο παράθυρο διαλόγου Έναρξη ÄKTA avant AA 45

46 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Πληροφορίες για την παρούσα ενότητα Τρεις από τις τέσσερις μονάδες UNICORN χρησιμοποιούνται στον παρόντα οδηγό έναρξης χρήσης και περιγράφονται στην ενότητα αυτή: Method Editor, System Control και Evaluation. Η μονάδα Administration και τα εικονίδιά της περιγράφονται στο UNICORN 6 Administration and Technical Manual. Στην παρούσα ενότητα Η ενότητα αυτή περιλαμβάνει τις παρακάτω υποενότητες: Ενότητα Μονάδα Method Editor Μονάδα System Control Μονάδα Evaluation Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA

47 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Method Editor Μονάδα Method Editor Εισαγωγή Στο λογισμικό UNICORN οι οδηγίες για τον έλεγχο μιας ανάλυσης χρωματογραφίας καθορίζονται σε μια μέθοδο. Η μονάδα Method Editor χρησιμοποιείται για τη δημιουργία ή την επεξεργασία αυτών των μεθόδων. Το γραφικό περιβάλλον χρήστη συνδυάζει τις προεπιλεγμένες ρυθμίσεις με τη δυνατότητα αλλαγής των ρυθμίσεων. Με τον τρόπο αυτό, απλοποιείται η διαδικασία δημιουργίας μεθόδων και αντικαθίσταται ο οδηγός μεθόδων σε παλαιότερες εκδόσεις του UNICORN. Προκαθορισμένες μέθοδοι και φάσεις Μια μέθοδος αποτελείται από διάφορες φάσεις. Κάθε φάση αντιπροσωπεύει ένα σημαντικό βήμα επεξεργασίας της μεθόδου, για παράδειγμα εξισορρόπηση ή έκλουση. Οι προκαθορισμένες μέθοδοι, οι οποίες περιλαμβάνουν όλες τις απαραίτητες φάσεις για τη λειτουργία του συστήματος, διατίθενται για διαφορετικές τεχνικές χρωματογραφίας, καθώς και για καθαρισμό του συστήματος. Για πληροφορίες σχετικά με τις προκαθορισμένες μεθόδους και τις φάσεις, καθώς και για τον τρόπο δημιουργίας μιας μεθόδου, ανατρέξτε στο UNICORN 6 Method Manual. Έναρξη ÄKTA avant AA 47

48 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Method Editor Παράθυρα του Method Editor Όπως παρουσιάζεται παρακάτω, στη μονάδα Method Editor εμφανίζονται από προεπιλογή τέσσερα παράθυρα. Οι διαθέσιμες φάσεις παρέχονται στο Phase Library (1), ενώ μια επισκόπηση των φάσεων της ενεργής μεθόδου εμφανίζεται στο Method Outline (2). Λεπτομερείς πληροφορίες σχετικά με τη μέθοδο παρουσιάζονται στο άνω δεξιό παράθυρο (3), το οποίο περιλαμβάνει τις δύο καρτέλες Phase Properties και Text Instructions. Η κλίση που χρησιμοποιείται στη μέθοδο εμφανίζεται στην εικόνα Gradient (4) Έναρξη ÄKTA avant AA

49 Εικονίδια της γραμμής εργαλείων της μονάδας Method Editor 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Method Editor Στον παρακάτω πίνακα παρουσιάζονται τα εικονίδια της γραμμής εργαλείων της μονάδας Method Editor που αναφέρονται στον παρόντα οδηγό έναρξης χρήσης. Εικονίδιο Λειτουργία Εικονίδιο Λειτουργία New Method: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου New Method, στο οποίο μπορούν να δημιουργηθούν μέθοδοι. Open Method Navigator: Ανοίγει το Method Navigator όπου εμφανίζονται οι διαθέσιμες μέθοδοι. Save: Αποθηκεύει την ενεργή μέθοδο. Print: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print από το οποίο μπορεί να εκτυπωθεί μια μέθοδος. Copy: Αντιγράφει την επιλεγμένη μέθοδο ή φάκελο. Paste: Εκτελεί επικόλληση σε μια νέα θέση μιας μεθόδου ή ενός φακέλου που έχει αντιγραφεί. Undo: Επαναφέρει τη μέθοδο στην κατάσταση που βρισκόταν πριν από την τελευταία αλλαγή. Redo: Επαναφέρει τη μέθοδο στην κατάσταση που βρισκόταν πριν από τη χρήση της εντολής Undo. Έναρξη ÄKTA avant AA 49

50 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα System Control Μονάδα System Control Εισαγωγή Η μονάδα System Control χρησιμοποιείται για την έναρξη, την προβολή και τον έλεγχο μιας ανάλυσης μεθόδου. Παράθυρα του System Control Όπως παρουσιάζεται παρακάτω, στη μονάδα System Control εμφανίζονται από προεπιλογή τέσσερα παράθυρα. Στο παράθυρο Run Data (1) παρουσιάζονται τα τρέχοντα δεδομένα σε αριθμητικές τιμές, ενώ στο παράθυρο Chromatogram (2) παρουσιάζονται τα δεδομένα με μορφή καμπυλών κατά τη διάρκεια ολόκληρης της ανάλυσης μεθόδου. Πληροφορίες σχετικά με την εξέλιξη της μεθόδου παρουσιάζονται στο Run Log (3) και η τρέχουσα διαδρομή ροής εμφανίζεται στο Flow Scheme (4) Έναρξη ÄKTA avant AA

51 Εικονίδια της γραμμής εργαλείων της μονάδας System Control 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα System Control Στον παρακάτω πίνακα εμφανίζονται τα εικονίδια της γραμμής εργαλείων ελέγχου συστήματος που αναφέρονται σε αυτό το Τα πρώτα βήματα. Εικονίδιο Λειτουργία Εικονίδιο Λειτουργία Open Method Navigator: Ανοίγει το Method Navigator όπου εμφανίζονται οι διαθέσιμες μέθοδοι. Run: Έναρξη ανάλυσης μεθόδου. Hold: Αναστολή της ανάλυσης μεθόδου, με διατήρηση του τρέχοντος ρυθμού ροής και των θέσεων των βαλβίδων. Pause: Αναστολή της ανάλυσης μεθόδου και διακοπή της λειτουργίας όλων των αντλιών. Continue: Συνέχιση, για παράδειγμα, μιας ανάλυσης μεθόδου σε αναμονή ή παύση. End: Οριστικός τερματισμός της ανάλυσης μεθόδου. Customize: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Customize όπου μπορούν να οριστούν οι ρυθμίσεις καμπύλης, οι ομάδες δεδομένων ανάλυσης και οι πληροφορίες του αρχείου ημερολογίου ανάλυσης. Connect to Systems: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Connect to Systems όπου μπορούν να συνδεθούν τα συστήματα και να εμφανιστούν οι χρήστες που είναι συνδεδεμένοι τη δεδομένη στιγμή. Έναρξη ÄKTA avant AA 51

52 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Evaluation Μονάδα Evaluation Εισαγωγή Η μονάδα Evaluation χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων των αναλύσεων χρωματογραφίας. Παράθυρα μονάδας Evaluation Όπως φαίνεται στην παρακάτω εικόνα, η μονάδα Evaluation περιέχει τρία παράθυρα. Όταν ανοίξετε ένα αποτέλεσμα από το Result Navigator (1) εμφανίζεται το παράθυρο Chromatogram (2). Μετά την ολοκλήρωση των κορυφών, λεπτομέρειες για τις κορυφές εμφανίζονται στο κάτω δεξιό παράθυρο (3), στις καρτέλες Peak data και Integration summary. Στη μονάδα Evaluation είναι επίσης δυνατή η προβολή της συνολικής τεκμηρίωσης σχετικά με τα αποτέλεσμα καθώς και η δημιουργία αναφορών Έναρξη ÄKTA avant AA

53 Εικονίδια γραμμής εργαλείων της μονάδας Evaluation 4 Το όργανο και το λογισμικό 4.3 Μονάδες λογισμικού UNICORN Μονάδα Evaluation Στον παρακάτω πίνακα εμφανίζονται τα εικονίδια της γραμμής εργαλείων του Evaluation που αναφέρονται σε αυτό το Τα πρώτα βήματα. Εικονίδιο Λειτουργία Εικονίδιο Λειτουργία Open Result Navigator: Ανοίγει το στοιχείο Result Navigator όπου εμφανίζονται τα διαθέσιμα αποτελέσματα. Save: Αποθηκεύει τις αλλαγές που πραγματοποιήθηκαν στο τρέχον αποτέλεσμα. Print: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print chromatograms από το οποίο μπορεί να εκτυπωθεί ένα χρωματογράφημα. Copy: Αντιγράφει το επιλεγμένο αποτέλεσμα ή φάκελο. Paste: Εκτελεί επικόλληση στον επιλεγμένο φάκελο ενός αποτελέσματος ή φακέλου που έχει αντιγραφεί. Undo: Επαναφέρει το αποτέλεσμα στην κατάσταση που ήταν πριν την τελευταία αλλαγή. Report: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Create report, στο οποίο μπορεί να δημιουργηθεί μια αναφορά για το αποτέλεσμα. View Documentation: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Documentation που περιλαμβάνει τη συνολική τεκμηρίωση για μια ανάλυση μεθόδου. Customize: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Customize όπου μπορούν να οριστούν οι ρυθμίσεις καμπύλης και οι πληροφορίες του πίνακα κορυφών και των επικεφαλίδων. Peak Integrate: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Peak Integrate, στο οποίο μπορεί να εκτελεστεί ολοκλήρωση των καμπυλών. Έναρξη ÄKTA avant AA 53

54 5 Δημιουργία μεθόδου 5 Δημιουργία μεθόδου Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Δημιουργείται μια μέθοδος στην μονάδα Method Editor. Αυτό το κεφάλαιο περιγράφει τον τρόπο δημιουργίας μεθόδου βάσει των προκαθορισμένων μεθόδων καθώς και τον τρόπο εκτύπωσης μιας μεθόδου. Για περισσότερες πληροφορίες ανατρέξτε στο UNICORN 6 Method Manual. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων 5.2 Εκτύπωση μεθόδου Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA

55 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Πληροφορίες για την παρούσα ενότητα Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο δημιουργίας μιας νέας μεθόδου βάσει μιας προκαθορισμένης μεθόδου, καθώς και τον τρόπο επεξεργασίας μιας μεθόδου. Επίσης, η ενότητα αυτή παρέχει μια επισκόπηση των προκαθορισμένων μεθόδων και φάσεων που διατίθενται. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τη δημιουργία μεθόδων, ανατρέξτε στο UNICORN 6 Method Manual. Στην παρούσα ενότητα Η ενότητα αυτή περιλαμβάνει τις παρακάτω υποενότητες: Ενότητα Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Προκαθορισμένες μέθοδοι Προκαθορισμένες φάσεις Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA 55

56 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Εισαγωγή Η δημιουργία μιας μεθόδου στο UNICORN 6 πραγματοποιείται στη μονάδα Method Editor. Διατίθενται προκαθορισμένες μέθοδοι για διάφορες τεχνικές χρωματογραφίας, για παράδειγμα, για χρωματογραφία συγγένειας και διήθηση γέλης. Επίσης, υπάρχουν προκαθορισμένες μέθοδοι για την προετοιμασία μιας στήλης και τον καθαρισμό του συστήματος. Μια μέθοδος αποτελείται από διάφορες φάσεις. Κάθε φάση αντιπροσωπεύει ένα σημαντικό βήμα επεξεργασίας της μεθόδου, για παράδειγμα εξισορρόπηση ή έκλουση. Εάν απαιτείται, μια προκαθορισμένη μέθοδος μπορεί να τροποποιηθεί με προσθήκη, διαγραφή ή/και αναδιάταξη των φάσεων, καθώς και με επεξεργασία των ρυθμίσεων κάθε φάσης που περιλαμβάνονται στη μέθοδο. Εικόνα του περιβάλλοντος χρήστη του Method Editor Οι εικόνες και ο πίνακας που ακολουθούν δείχνουν τη Method Editor μονάδα και τους πίνακές της Έναρξη ÄKTA avant AA

57 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Εμβαδόν Περιγραφή Phase Library: Εμφανίζει όλες τις διαθέσιμες φάσεις. Method Outline: Παρουσιάζει μια επισκόπηση των φάσεων που περιλαμβάνονται στην ενεργή μέθοδο. Phase Properties: Παρουσιάζει λεπτομερείς ρυθμίσεις για την επιλεγμένη φάση. Gradient: Παρουσιάζει την κλίση που χρησιμοποιείται στην ενεργή μέθοδο. Δημιουργία μεθόδου Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για τη δημιουργία και την επεξεργασία μιας χρωματογραφικής μεθόδου βάσει μιας προκαθορισμένης μεθόδου. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Method Editor και κάντε κλικ στο εικονίδιο New Method. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου New Method. 2 Επιλέξτε System και Predefined Method στο παράθυρο διαλόγου. Κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Οι φάσεις που περιλαμβάνονται στην επιλεγμένη μέθοδο εμφανίζονται στο παράθυρο Method Outline, ενώ οι προεπιλεγμένες ρυθμίσεις για καθεμία από τις φάσεις εμφανίζονται στο παράθυρο Phase Properties. Έναρξη ÄKTA avant AA 57

58 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Βήμα 3 Ενέργεια Στο παράθυρο Phase Properties της φάσης Method Settings, επεξεργαστείτε τις γενικές ρυθμίσεις, όπως Column type και Method Base Unit. Το UNICORN υπολογίζει αυτόματα τις σωστές ρυθμίσεις για τον όγκο, το ρυθμό ροής και τα όρια πίεσης βάσει του επιλεγμένου τύπου στήλης. Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται το παράθυρο Method Outline και το παράθυρο Phase Properties της φάσης Method Settings. 58 Έναρξη ÄKTA avant AA

59 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Βήμα 4 Ενέργεια Στο παράθυρο Phase Properties της φάσης Method Settings, κάντε κλικ στο κουμπί Result Name & Location για τον καθορισμό του ονόματος και της θέσης των αποτελεσμάτων των αναλύσεων μεθόδου. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Result Name & Location. Στο παράθυρο διαλόγου Result Name & Location: Ορίστε την επιλογή Result location κάνοντας κλικ στο κουμπί Browse και επιλέξτε ένα φάκελο στον οποίο θα αποθηκευτούν τα αποτελέσματα. Από προεπιλογή, τα αποτελέσματα θα αποθηκευτούν στον αρχικό φάκελο. Επιλέξτε Result name. Όταν χρησιμοποιείται η προεπιλογή Method name, το όνομα των αποτελεσμάτων περιλαμβάνει το όνομα της μεθόδου και έναν αριθμό σειράς. Κάντε κλικ στο OK για επιβεβαίωση και κλείσιμο του παραθύρου διαλόγου. Έναρξη ÄKTA avant AA 59

60 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Βήμα 5 Ενέργεια Στο παράθυρο Phase Properties της φάσης Method Settings, κάντε κλικ στο κουμπί Start Protocol, εάν θέλετε να συμπεριληφθεί ένα πρωτόκολλο έναρξης. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Start Protocol. Στο παράθυρο διαλόγου Start Protocol: Επιλέξτε τα στοιχεία για εμφάνιση κατά την έναρξη της μεθόδου. Το στοιχείο Result Name and Location είναι επιλεγμένο από προεπιλογή. Κάντε κλικ στο OK για επιβεβαίωση και κλείσιμο του παραθύρου διαλόγου. 6 7 Επιλέξτε την επόμενη φάση στο παράθυρο Method Outline κάνοντας κλικ στη φάση και επιλέξτε τις κατάλληλες τιμές παραμέτρων στο παράθυρο Phase Properties. Επαναλάβετε το βήμα 6 μέχρι να υποβληθούν σε επεξεργασία όλες οι φάσεις. ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Εάν το όργανο δεν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί για διάστημα μερικών ημερών ή περισσότερο, προσθέστε μία ή περισσότερες φάσεις System CIP στο τέλος της μεθόδου, όπως περιγράφεται παρακάτω. 60 Έναρξη ÄKTA avant AA

61 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Βήμα 8 Ενέργεια Κάντε κλικ στο εικονίδιο Save the method. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Save As. 9 In the Save As dialog: Επιλέξτε έναν φάκελο προορισμού για να ενεργοποιηθεί το κουμπί Save. Πληκτρολογήστε το στοιχείο Name για τη μέθοδο. Επιλέξτε το στοιχείο System από τη λίστα. Κάντε κλικ στο κουμπί Save. Αποτέλεσμα: Η μέθοδος που δημιουργήθηκε αποθηκεύεται στον επιλεγμένο φάκελο. Προσθήκη φάσεων σε μια μέθοδο Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προσθήκη φάσεων σε μια μέθοδο. Βήμα 1 Ενέργεια Επιλέξτε την επιθυμητή φάση στο παράθυρο Phase Library. Έναρξη ÄKTA avant AA 61

62 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Βήμα 2 Ενέργεια Μετακινήστε τη φάση στην απαιτούμενη θέση στο παράθυρο Method Outline. Η φάση μπορεί να τοποθετηθεί σε μια οποιαδήποτε θέση κάτω από τη φάση Method Settings. Αποτέλεσμα: Η φάση περιλαμβάνεται στη μέθοδο στην απαιτούμενη θέση. Διαγραφή φάσεων από μια μέθοδο Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για τη διαγραφή φάσεων από μια μέθοδο. Βήμα 1 Ενέργεια Επιλέξτε τη φάση για διαγραφή στο παράθυρο Method Outline. Σημείωση: Η φάση Method Settings δεν μπορεί να διαγραφεί. 2 Κάντε κλικ στο κουμπί Delete που βρίσκεται κάτω από το παράθυρο Method Outline. Αποτέλεσμα: Η επιλεγμένη φάση εξαιρείται από τη μέθοδο. Αναδιάταξη φάσεων μιας μεθόδου Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την αναδιάταξη των φάσεων μιας μεθόδου. Βήμα 1 Ενέργεια Επιλέξτε τη φάση για μετακίνηση στο παράθυρο Method Outline. Σημείωση: Η φάση Method Settings δεν μπορεί να μετακινηθεί. 2 Μετακινήστε τη φάση στην απαιτούμενη θέση στο παράθυρο Method Outline. Αποτέλεσμα: Η επιλεγμένη φάση μετακινείται στην απαιτούμενη θέση. 62 Έναρξη ÄKTA avant AA

63 Επιλογή μεθόδου συντήρησης 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Δημιουργία και επεξεργασία μεθόδων Διατίθενται διάφορες προκαθορισμένες μέθοδοι για προετοιμασία και καθαρισμό. Χρησιμοποιήστε αυτές τις μεθόδους συντήρησης για προετοιμασία και καθαρισμό του συστήματος και των στηλών, καθώς και για πλήρωση του συστήματος και των στηλών με διάλυμα αποθήκευσης. Ο παρακάτω πίνακας παρέχει συστάσεις για τις μεθόδους και τα διαλύματα που πρέπει να επιλεγούν για διαφορετικούς σκοπούς. Για... Προετοιμασία σωλήνων και μονάδων οργάνου πριν από μια ανάλυση Προετοιμασία της στήλης πριν από μια ανάλυση Καθαρισμό των σωλήνων και των μονάδων Καθαρισμός στήλης Διατήρηση του συστήματος σε διάλυμα αποθήκευσης Διατήρηση της στήλης σε διάλυμα αποθήκευσης Φάση/Μέθοδος Προετοιμασία συστήματος Προετοιμασία στήλης CIP συστήματος CIP στήλης CIP συστήματος CIP στήλης Διάλυμα Κατάλληλα ρυθμιστικά διαλύματα Κατάλληλα ρυθμιστικά διαλύματα NaOH 0,5-1 M NaOH 0,5-1 M Αιθανόλη 20% Αιθανόλη 20% ΣΥΜΒΟΥΛΗ: ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Σημείωση: Οι διαδικασίες CIP (Επιτόπιος καθαρισμός) και προετοιμασίας στηλών και συστήματος μπορούν να εκτελεστούν είτε ως ξεχωριστές, προκαθορισμένες μέθοδοι είτε ως φάσεις χρωματογραφικών μεθόδων. Οι φάσεις System CIP και System Preparation έχουν σχεδιαστεί για χρήση ενός διαλύματος καθαρισμού η καθεμία. Η μέθοδος System Preparation περιλαμβάνει δύο φάσεις System Preparation και η μέθοδος System CIP περιλαμβάνει τρεις φάσεις System CIP. Για να χρησιμοποιήσετε πρόσθετα διαλύματα διαδοχικά, προσθέστε φάσεις στη μέθοδο. Συνήθως χρησιμοποιείται NaOH 0,5-1 M για τον καθαρισμό του συστήματος και της στήλης. Ωστόσο, πριν από την επιλογή του καθαριστικού λαμβάνετε πάντα υπόψη τα μέσα και τα ρυθμιστικά διαλύματα που χρησιμοποιούνται, καθώς και τη χημική αντοχή της στήλης. Έναρξη ÄKTA avant AA 63

64 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Προκαθορισμένες μέθοδοι Προκαθορισμένες μέθοδοι Οι διαθέσιμες προκαθορισμένες μέθοδοι περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Μέθοδος Affinity Chromatography (AC) Anion Exchange Chromatography (AIEX) Cation Exchange Chromatography (CIEX) Chromatofocusing (CF) Column CIP Περιγραφή Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, η πρωτεΐνη ενδιαφέροντος προσροφάται στο συνδέτη της στήλης. Μετά τη διαδικασία πλύσης για απομάκρυνση του μη δεσμευμένου δείγματος, εκτελείται έκλουση είτε χρησιμοποιώντας ένα ρυθμιστικό διάλυμα που περιέχει έναν ανταγωνιστή για μετατόπιση της πρωτεΐνης ενδιαφέροντος είτε μεταβάλλοντας το ph ή την ιονική ισχύ. Τέλος, εκτελείται εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης με ρυθμιστικό διάλυμα εκκίνησης. Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, οι αρνητικά φορτισμένες πρωτεΐνες προσροφώνται στο συνδέτη της στήλης. Μετά τη διαδικασία πλύσης για την απομάκρυνση του μη δεσμευμένου δείγματος, εκτελείται έκλουση με κλίση αυξημένης συγκέντρωσης αλάτων (π.χ. NaCl). Τέλος, εκτελείται πλύση και εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης με ρυθμιστικό διάλυμα εκκίνησης. Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, οι θετικά φορτισμένες πρωτεΐνες προσροφώνται στο συνδέτη της στήλης. Μετά τη διαδικασία πλύσης για την απομάκρυνση του μη δεσμευμένου δείγματος, εκτελείται έκλουση με κλίση αυξημένης συγκέντρωσης αλάτων (π.χ. NaCl). Τέλος, εκτελείται πλύση και εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης με ρυθμιστικό διάλυμα εκκίνησης. Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, εκτελείται έκλουση με κλίση ph. Πραγματοποιείται διαχωρισμός και έκλουση των πρωτεϊνών ανάλογα με τα ισοηλεκτρικά τους σημεία. Τέλος, εκτελείται εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης. Διατίθεται μόνο για ÄKTA avant 25. Η στήλη γεμίζει με διάλυμα καθαρισμού. Επιλέξτε τις θέσεις εισαγωγής. Καταχωρίστε το αναγνωριστικό διαλύματος, τον όγκο, το ρυθμό ροής και το χρόνο επώασης. Προσθέτοντας βήματα, μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφορα διαλύματα καθαρισμού. Συστάσεις για τα βήματα καθαρισμού παρέχονται για διάφορους τύπους στηλών. 64 Έναρξη ÄKTA avant AA

65 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Προκαθορισμένες μέθοδοι Μέθοδος Column Performance Test Column Preparation Desalting (DS) Gel Filtration (GF) Hydrophobic Interaction Chromatography (HIC) Intelligent Packing Περιγραφή Μετά από την εξισορρόπηση της στήλης, εισάγεται δείγμα και πραγματοποιείται ισοκρατική έκλουση. Θα πρέπει να χρησιμοποιηθεί ένα μη απορροφητικό δείγμα, όπως η ακετόνη ή το αλάτι. Μετά την ανάλυση, υπολογίστε την απόδοση της στήλης στη μονάδα "Αξιολόγηση". Η αποτελεσματικότητα της στήλης καθορίζεται ως προς το ύψος, το οποίο αντιστοιχεί σε μία θεωρητική πινακίδα (HETP) και το συντελεστή μέγιστης ασυμμετρίας (A s ). Το αποτέλεσμα καταγράφεται στο αρχείο καταγραφής στήλης. Η στήλη γεμίζει με ρυθμιστικό διάλυμα. Επιλέξτε τις θέσεις εισαγωγής. Καταχωρίστε το αναγνωριστικό διαλύματος, τον όγκο, το ρυθμό ροής και το χρόνο επώασης. Προσθέτοντας βήματα, μπορούν να χρησιμοποιηθούν διάφορα διαλύματα προετοιμασίας. Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, εκτελείται ισοκρατική έκλουση των πρωτεϊνών. Η τεχνική αυτή χρησιμοποιείται συνήθως για την αντικατάσταση του ρυθμιστικού διαλύματος. Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, οι πρωτεΐνες διαχωρίζονται και πραγματοποιείται έκλουση ανάλογα με το μέγεθός τους (πρώτα οι μεγαλύτερες). Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος (χρησιμοποιήστε ένα ρυθμιστικό διάλυμα με περιέχει υψηλή συγκέντρωση αλάτων, για παράδειγμα, θειικό αμμώνιο 2 M), οι υδρόφοβες πρωτεΐνες προσροφώνται στο συνδέτη της στήλης. Μετά τη διαδικασία πλύσης για την απομάκρυνση του μη δεσμευμένου δείγματος, εκτελείται έκλουση με κλίση μειωμένης συγκέντρωσης αλάτων. Τέλος, εκτελείται πλύση και εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης με ρυθμιστικό διάλυμα εκκίνησης. Πλήρωση στηλών AxiChrom, με προκαθορισμένο τύπο στήλης, μέσω ροής υδραυλικού υγρού που πιέζει τον προσαρμογέα προς τα κάτω. Ο χρήστης ξεκινά τη συμπίεση όταν ο προσαρμογέας βρίσκεται σε επαφή με την ενιαία επιφάνεια της βάσης. Ο προσαρμογέας συμπιέζει τη βάση ανάλογα με το συντελεστή πλήρωσης ή το ύψος-στόχο της βάσης, όπως έχει επιλεγεί. Δύο Column Performance Test (ανοδική ροή/καθοδική ροή) φάσεις εκτελούνται αυτόματα μετά την AxiChrom πλήρωση της στήλης. Διατίθεται μόνο για ÄKTA avant 150. Έναρξη ÄKTA avant AA 65

66 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Προκαθορισμένες μέθοδοι Μέθοδος Reversed Phase Chromatography (RPC) System CIP System Preparation Περιγραφή Μετά την εξισορρόπηση και την εφαρμογή του δείγματος, οι υδρόφοβες πρωτεΐνες προσροφώνται στο συνδέτη της στήλης. Μετά τη διαδικασία πλύσης για την απομάκρυνση του μη δεσμευμένου δείγματος, εκτελείται έκλουση δημιουργώντας κλίση μη πολικού, οργανικού διαλύτη, όπως ακετονιτριλίου. Τέλος, εκτελείται πλύση και εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης. Το σύστημα πληρώνεται με διάλυμα καθαρισμού. Επιλέξτε, για παράδειγμα, τις εισόδους, τις εξόδους και τις θέσεις στήλης που θα καθαριστούν. Η μέθοδος περιλαμβάνει τρεις φάσεις System CIP για πιο εύκολη χρήση των τριών διαφορετικών διαλυμάτων καθαρισμού. Επιπλέον φάσεις System CIP μπορούν να προστεθούν από το Phase Library, εάν απαιτείται. Το σύστημα πληρώνεται με διάλυμα προετοιμασίας. Επιλέξτε, για παράδειγμα, τις εισόδους, τις εξόδους και τις θέσεις στήλης που θα προετοιμαστούν. Η μέθοδος περιλαμβάνει δύο φάσεις System Preparation. Επιπλέον φάσεις System Preparation μπορούν να προστεθούν από το Phase Library, εάν απαιτείται. 66 Έναρξη ÄKTA avant AA

67 5.1.3 Προκαθορισμένες φάσεις 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Προκαθορισμένες φάσεις Οι προκαθορισμένες φάσεις που είναι διαθέσιμες στις προκαθορισμένες μεθόδους και στο Phase Library περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Φάση Method Settings Equilibration Sample Application Column Wash Elution Column Preparation Column CIP System Preparation System CIP Column Performance Test Περιγραφή Η πρώτη και υποχρεωτική φάση μιας μεθόδου. Καθορίζει τις κοινές παραμέτρους που χρησιμοποιούνται στις επόμενες φάσεις. Εκτελεί εξισορρόπηση της στήλης πριν από τον καθαρισμό ή εκ νέου εξισορρόπηση της στήλης μετά τον καθαρισμό. Εκτελεί εφαρμογή του δείγματος στη στήλη. Καθορίζει την τεχνική εφαρμογής του δείγματος, τον όγκο του δείγματος και το χειρισμό της συνεχούς ροής. Απομακρύνει με πλύση το μη δεσμευμένο δείγμα μετά την εφαρμογή του δείγματος ή απομακρύνει τις ισχυρά δεσμευμένες πρωτεΐνες μετά την έκλουση. Εκτελεί έκλουση του δείγματος από τη στήλη. Καθορίζει τις παραμέτρους για τις ρυθμίσεις έκλουσης και κλασματοποίησης. Προετοιμάζει τη στήλη πριν από τη χρήση απομακρύνοντας το διάλυμα αποθήκευσης και εξισορροπώντας τη στήλη. Προσθέτοντας βήματα, μπορούν να χρησιμοποιηθούν διαδοχικά διάφορα διαλύματα προετοιμασίας. Καθαρίζει τη στήλη μετά τις αναλύσεις καθαρισμού με έκπλυση της στήλης χρησιμοποιώντας ένα διάλυμα καθαρισμού για την απομάκρυνση των μη ειδικά δεσμευμένων πρωτεϊνών. Προσθέτοντας βήματα, μπορούν να χρησιμοποιηθούν διαδοχικά διάφορα διαλύματα καθαρισμού. Προετοιμάζει το σύστημα πριν από μια ανάλυση απομακρύνοντας το διάλυμα αποθήκευσης και πληρώνοντας το σύστημα και τις εισόδους με ρυθμιστικό διάλυμα. Σε κάθε φάση χρησιμοποιείται ένα διάλυμα προετοιμασίας. Καθαρίζει το σύστημα μετά τις αναλύσεις καθαρισμού με έκπλυση του συστήματος χρησιμοποιώντας ένα διάλυμα καθαρισμού. Σε κάθε φάση χρησιμοποιείται ένα διάλυμα καθαρισμού. Ελέγχει την απόδοση μιας γεμάτης στήλης με βάση το ισοδύναμο ύψος με θεωρητικό δίσκο (HETP) και το συντελεστή ασυμμετρίας κορυφής (A s ). Έναρξη ÄKTA avant AA 67

68 5 Δημιουργία μεθόδου 5.1 Οδηγός δημιουργίας μεθόδων Προκαθορισμένες φάσεις Φάση Intelligent Packing Περιγραφή Η ροή υδραυλικού υγρού πιέζει τον προσαρμογέα προς τα κάτω. Ο χρήστης ξεκινά τη συμπίεση όταν ο προσαρμογέας βρίσκεται σε επαφή με την ενιαία επιφάνεια της βάσης. Ο προσαρμογέας συμπιέζει τη βάση ανάλογα με το συντελεστή πλήρωσης ή το ύψος-στόχο της βάσης, όπως έχει επιλεγεί. Διατίθεται μόνο για ÄKTA avant Έναρξη ÄKTA avant AA

69 5 Δημιουργία μεθόδου 5.2 Εκτύπωση μεθόδου 5.2 Εκτύπωση μεθόδου Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο εκτύπωσης των οδηγιών κειμένου και των μεταβλητών μιας μεθόδου. Το UNICORN χρησιμοποιεί τους εκτυπωτές και τις ρυθμίσεις εκτυπωτών που είναι εγκατεστημένοι στον υπολογιστή σας. Τρόπος εκτύπωσης μεθόδου Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την εκτύπωση μιας μεθόδου. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Method Editor και κάντε κλικ στο εικονίδιο Open Method Navigator στη γραμμή εργαλείων. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο Method Navigator. 2 Επιλέξτε τη μέθοδο για εκτύπωση και κάντε κλικ στο εικονίδιο Open a Method στη γραμμή εργαλείων Navigator. Αποτέλεσμα: Ανοίγει η επιλεγμένη μέθοδος. Έναρξη ÄKTA avant AA 69

70 5 Δημιουργία μεθόδου 5.2 Εκτύπωση μεθόδου Βήμα 3 Ενέργεια Κάντε κλικ στο εικονίδιο Print. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print. 4 Στο παράθυρο διαλόγου Print: Επιλέξτε Printer Κάντε κλικ στο OK Αποτέλεσμα: Η μέθοδος εκτυπώνεται. 70 Έναρξη ÄKTA avant AA

71 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Το κεφάλαιο αυτό περιγράφει τις απαραίτητες προετοιμασίες του συστήματος πριν από την έναρξη μιας ανάλυσης. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Χρησιμοποιείτε πάντα κατάλληλο εξοπλισμό ατομικής προστασίας κατά τη λειτουργία και τη συντήρηση του συστήματος ÄKTA avant. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 6.1 Πριν από την προετοιμασία του συστήματος 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος 6.4 Σύνδεση στήλης 6.5 Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη 6.7 Προετοιμαστείτε για μια ανάλυση σε ψυκτικό θάλαμο Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA 71

72 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.1 Πριν από την προετοιμασία του συστήματος 6.1 Πριν από την προετοιμασία του συστήματος Εισαγωγή Είναι σημαντικό να προετοιμάσετε το σύστημα σύμφωνα με τις ρυθμίσεις της μεθόδου που θα αναλυθεί. Πριν από την προετοιμασία του συστήματος, ελέγξτε τις ρυθμίσεις στην επιλογή Method Editor και βεβαιωθείτε ότι είναι διαθέσιμα όλα τα βοηθητικά εξαρτήματα που θα χρησιμοποιηθούν. Λίστα ελέγχου Βεβαιωθείτε ότι το σύστημα έχει προετοιμαστεί σύμφωνα με τις ρυθμίσεις της μεθόδου που θα εκτελεστεί. Μην παραλείψετε να ελέγξετε: Τις θύρες βαλβίδας που θα χρησιμοποιηθούν ως είσοδοι και έξοδοι Τον τύπο στήλης που θα χρησιμοποιηθεί Τη θέση στήλης που θα χρησιμοποιηθεί τα ρυθμιστικά διαλύματα και τα δείγματα που πρέπει να παρασκευαστούν Την τεχνική εφαρμογής δείγματος που θα χρησιμοποιηθεί Εάν το ηλεκτρόδιο ph είναι συνδεδεμένο, εφόσον υπάρχει Τις κασέτες με τις αντίστοιχες πλάκες βυθισμάτων μεγάλου βάθους ή/και τους σωλήνες που θα χρησιμοποιηθούν στον κλασματικό συλλέκτη, εάν υπάρχει Εάν πρόκειται για ανάλυση χρωματογραφίας αντίστροφης φάσης (RPC) ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Κλασματικός συλλέκτης. Μην υποβάλλετε εύφλεκτα υγρά σε κλασματοποίηση. Κατά την εκτέλεση μεθόδων RPC ή άλλων διαδικασιών με χρήση οργανικών διαλυτών, συλλέγετε τα κλάσματα μέσω της βαλβίδας εξαγωγής. 72 Έναρξη ÄKTA avant AA

73 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.1 Πριν από την προετοιμασία του συστήματος ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Το RPC λειτουργεί με 100% ακετονιτρίλιο σε ÄKTA avant 25. Αντικαθιστάτε πάντα τον πράσινο σωλήνα PEEK μεταξύ της αντλίας συστήματος που χρησιμοποιείται και το μόνιτορ παρακολούθησης της αντλίας πίεσης με τον πορτοκαλί σωλήνα PEEK, εσωτ. διαμ. 0,5 mm, πριν εκτελέσετε το RPC με 100% ακετονιτρίλιο. Ρυθμίστε το συναγερμό πίεσης του συστήματος σε 10 MPa. Το RPC λειτουργεί με 100% ακετονιτρίλιο σε ÄKTA avant 150. Αντικαθιστάτε πάντα τον μπεζ σωλήνα PEEK μεταξύ της αντλίας συστήματος που χρησιμοποιείται και το μόνιτορ παρακολούθησης της αντλίας πίεσης με τον πορτοκαλί σωλήνα PEEK, εσωτ. διαμ. 0,5 mm, πριν εκτελέσετε το RPC με 100% ακετονιτρίλιο. Έναρξη ÄKTA avant AA 73

74 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Εισαγωγή Η διαδρομή ροή περιλαμβάνει σωλήνες, βαλβίδες, αντλίες και συσκευές παρακολούθησης. Η ενότητα αυτή παρέχει μια επισκόπηση της διαδρομής ροής και περιγράφει τον τρόπο προετοιμασίας της διαδρομής ροής πριν από μια ανάλυση. Εικόνα της διαδρομής ροής Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται το διάγραμμα ροής όπως εμφανίζεται στη μονάδα System Control. Οι μεμονωμένες μονάδες του οργάνου αναφέρονται στον παρακάτω πίνακα Έναρξη ÄKTA avant AA

75 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Εξάρτημα Περιγραφή Βαλβίδα εισαγωγής δείγματος Αντλία δείγματος Βαλβίδα εισαγωγής A Αντλία συστήματος A Τετράοδος βαλβίδα Βαλβίδα εισαγωγής B Αντλία συστήματος B Βαλβίδα έγχυσης Τριχοειδής σωλήνας ή Superloop Βαλβίδα στήλης Στήλη Συσκευή παρακολούθησης UV Συσκευή παρακολούθησης αγωγιμότητας Βαλβίδα ph με συσκευή παρακολούθησης ph και περιοριστή ροής Βαλβίδα εξαγωγής Κλασματικός συλλέκτης Σωλήνες και σύνδεσμοι Ο παρακάτω πίνακας παρουσιάζει τους τύπους των σωλήνων και των συνδετήρων που χρησιμοποιούνται για διαφορετικούς σκοπούς. ÄKTA avant 25 Σκοπός χρήσης Σωλήνες Συνδετήρας Φωτογραφία Σωλήναςεισαγωγής FEP, εξωτερικής διαμέτρου 1/8", εσωτερικής διαμέτρου 1,6 mm Συνδετήρας σωλήνα, 5/16" + Δακτύλιος (κίτρινος), 1/8" Έναρξη ÄKTA avant AA 75

76 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Σκοπός χρήσης Σωλήνες Συνδετήρας Φωτογραφία Σωλήνας για σύνδεση στηλών PEEK, εξωτερικής διαμέτρου 1/16", εσωτερικής διαμέτρου 0,50 mm Συνδετήρας χειροκίνητης σύσφιξης, 1/16" Σωλήνας εξαγωγής και αποβλήτων ETFE, εξωτερικής διαμέτρου 1/16", εσωτερικής διαμέτρου 1,0 mm Συνδετήρας χειροκίνητης σύσφιξης, 1/16" ÄKTA avant 150 Σκοπός χρήσης Σωλήνες Συνδετήρας Φωτογραφία Σωλήναςεισαγωγής FEP, εξωτερικής διαμέτρου 3/16", εσωτερικής διαμέτρου 2,9 mm Συνδετήρας σωλήνα, 5/16" + Δακτύλιος (μπλε), 3/16" Σωλήνας για σύνδεση στηλών PEEK, εξωτ. διαμ. 1/16", εσωτ. διαμ. 1,0 mm Συνδετήρας χειροκίνητης σύσφιξης, 1/16" Σωλήνας εξαγωγής FEP, εξωτερικής διαμέτρου 1/8", εσωτερικής διαμέτρου 1,6 mm Συνδετήρας σωλήνα, 5/16" + Δακτύλιος (κίτρινος), 1/8" Σωλήνας αποβλήτων ETFE, εξωτερικής διαμέτρου 1/16", εσωτερικής διαμέτρου 1,0 mm Συνδετήρας χειροκίνητης σύσφιξης, 1/16" 76 Έναρξη ÄKTA avant AA

77 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Θύρες εισαγωγής Ο παρακάτω πίνακας παρουσιάζει τις θύρες εισαγωγής της βαλβίδας εισαγωγής Α, της βαλβίδας εισαγωγής Β και τη βαλβίδα εισαγωγής δείγματος. Βαλβίδες και θύρες Εικόνες Βαλβίδα εισαγωγής A Θύρες εισαγωγής: A1-A7 Βαλβίδα εισαγωγής B Θύρες εισαγωγής: B1-B7 Βαλβίδα εισαγωγής δείγματος Θύρες εισαγωγής: S1-S7, Buff Έναρξη ÄKTA avant AA 77

78 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Προετοιμασία σωλήνα εισαγωγής Συνδέστε το σωλήνα εισαγωγής στις θύρες εισαγωγής που πρόκειται να χρησιμοποιηθούν και εμβαπτίστε όλους τους σωλήνες εισαγωγής που θα χρησιμοποιηθούν κατά την ανάλυση της μεθόδου στα σωστά ρυθμιστικά διαλύματα. Προετοιμασία σωλήνα εξαγωγής Συνδέστε το σωλήνα εξαγωγής στις θύρες εξαγωγής της βαλβίδας εξαγωγής που θα χρησιμοποιηθεί κατά την ανάλυση. Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί κλασματικός συλλέκτης, βεβαιωθείτε ότι ο σωλήνας είναι συνδεδεμένος ανάμεσα στη θύρα Frac της βαλβίδας εξαγωγής και τον κλασματικό συλλέκτη και προετοιμάστε τον κλασματικό συλλέκτη. Διαφορετικά, εμβαπτίστε το σωλήνα εξαγωγής σε κατάλληλους σωλήνες ή φιάλες. Θύρες αποβλήτων Ο παρακάτω πίνακας παρουσιάζει τις θύρες αποβλήτων της βαλβίδας έγχυσης, της βαλβίδας ph και της βαλβίδας εξαγωγής. Βαλβίδες και θύρες Εικόνες Βαλβίδα έγχυσης Θύρες αποβλήτων: W1, W2 78 Έναρξη ÄKTA avant AA

79 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Βαλβίδες και θύρες Εικόνες Βαλβίδα ph Θύρα αποβλήτων: W3 Βαλβίδα εξαγωγής Θύρα αποβλήτων: W Έναρξη ÄKTA avant AA 79

80 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Θέση σωλήνα αποβλήτων Όλοι οι σωλήνες αποβλήτων βρίσκονται στο πίσω μέρος του οργάνου, βλ. παρακάτω εικόνα. 1 2 Εξάρτημα 1 2 Περιγραφή Σωλήνας αποβλήτων από τη βαλβίδα έγχυσης, τη βαλβίδα ph και τη βαλβίδα εξαγωγής (W, W1, W2 και W3). Σωλήνας αποβλήτων από τον κλασματικό συλλέκτη και το δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος. Προετοιμασία σωλήνα αποβλήτων Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προετοιμασία του σωλήνα αποβλήτων. 80 Έναρξη ÄKTA avant AA

81 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Βήμα 1 Ενέργεια Βεβαιωθείτε ότι τα τέσσερα τμήματα του σωλήνα αποβλήτων από τη βαλβίδα έγχυσης, τη βαλβίδα ph και τη βαλβίδα εξαγωγής (W, W1, W2 και W3) είναι τοποθετημένα σε ένα δοχείο αποβλήτων κάτω από τον πάγκο. ΣΗΜΕΙΩΣΗ Η μέγιστη στάθμη του δοχείου αποβλήτων για το σωλήνα αποβλήτων από τις βαλβίδες πρέπει να είναι λιγότερο από 30 cm πάνω από τον πάγκο εργαστηρίου. 2 Βεβαιωθείτε ότι τα τρία τμήματα του σωλήνα αποβλήτων από τον κλασματικό συλλέκτη και το δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος είναι τοποθετημένα σε ένα δοχείο αποβλήτων κάτω από τον πάγκο. ΣΗΜΕΙΩΣΗ Η μέγιστη στάθμη του δοχείου αποβλήτων για το σωλήνα αποβλήτων από τον κλασματικό συλλέκτη και το δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος πρέπει να είναι μικρότερη από το ύψος του πάγκου. Έναρξη ÄKTA avant AA 81

82 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.2 Προετοιμασία της διαδρομής ροής Βήμα 3 Ενέργεια Βεβαιωθείτε ότι ο σωλήνας αποβλήτων από τον κλασματικό συλλέκτη και το δίσκο ρυθμιστικού διαλύματος είναι κομμένος στο κατάλληλο μήκος. Ο σωλήνας δεν πρέπει να είναι λυγισμένος ή βυθισμένος στο υγρό κατά την ανάλυση. Σημείωση: Εάν ο σωλήνας έχει πολύ μικρό μήκος, αντικαταστήστε τον με νέο σωλήνα. Μην επεκτείνετε το μήκος του σωλήνα, καθώς μπορεί να προκληθεί έμφραξη του σωλήνα και υπερχείλιση στο θάλαμο του κλασματικού συλλέκτη. ΠΡΟΣΟΧΗ Βεβαιωθείτε ότι τα δοχεία αποβλήτων έχουν επαρκή χωρητικότητα για το συνολικό όγκο αποβλήτων που θα δημιουργηθεί κατά την ανάλυση. Για το ÄKTA avant 25, ένα κατάλληλο δοχείο αποβλήτων έχει συνήθως χωρητικότητα 2 έως 10 λίτρων. Για το ÄKTA avant 150, ένα κατάλληλο δοχείο αποβλήτων θα πρέπει να έχει χωρητικότητα 40 λίτρων. 82 Έναρξη ÄKTA avant AA

83 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Εισαγωγή Πριν από τη χρήση των αντλιών του συστήματος, είναι σημαντικό να: 1 Γεμίσετε τις εισόδους (πλήρωση των εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος με υγρό). 2 Να καθαρίσετε τις αντλίες συστήματος (αφαίρεση αέρα από τις κεφαλές των αντλιών). Επισκόπηση Η διαδικασία αποτελείται από τα παρακάτω στάδια: 1 Πλήρωση όλων των σωλήνων εισαγωγής Β που θα χρησιμοποιηθούν κατά την ανάλυση 2 Πλήρωση όλων των σωλήνων εισαγωγής Α που θα χρησιμοποιηθούν κατά την ανάλυση 3 Προετοιμάστε το σύστημα πριν τον καθαρισμό των αντλιών συστήματος 4 Καθαρισμός της αντλίας συστήματος Β 5 Καθαρισμός της αντλίας συστήματος Α 6 Τερματισμός ανάλυσης Πλήρωση σωλήνα εισαγωγής Β Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για να πληρώσετε ολόκληρο το σωλήνα εισαγωγής Β που θα χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση με κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα/διάλυμα. Βήμα 1 Ενέργεια Βεβαιωθείτε ότι όλοι οι σωλήνες εισαγωγής B που θα χρησιμοποιηθούν στην ανάλυση μεθόδου έχουν εμβαπτιστεί στα κατάλληλα ρυθμιστικά διαλύματα. Έναρξη ÄKTA avant AA 83

84 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα 2 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Flow path:inlet B. Επιλέξτε τη Position της εισαγωγής που θα γεμίσετε από την αναπτυσσόμενη λίστα. Αρχίστε στη θέση εισαγωγής με το μεγαλύτερο αριθμό και τελειώστε στη θέση εισαγωγής με το μικρότερο αριθμό. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα εισαγωγής Β μεταβαίνει στην επιλεγμένη θύρα. 3 Συνδέστε μια σύριγγα ml στη βαλβίδα καθαρισμού σε μία από τις κεφαλές αντλίας της αντλίας συστήματος Β. Βεβαιωθείτε ότι η σύριγγα εφαρμόζει απόλυτα στο συνδετήρα καθαρισμού. 84 Έναρξη ÄKTA avant AA

85 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα Ενέργεια Ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την αριστερόστροφα κατά 3/4 της στροφής. Αναρροφήστε αργά υγρό στη σύριγγα μέχρι το υγρό να φτάσει στην αντλία. Κλείστε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την δεξιόστροφα. Αποσυνδέστε τη σύριγγα και απορρίψτε το περιεχόμενό της. Επαναλάβετε τα βήματα 2-5 για κάθε σωλήνα εισαγωγής Β που θα χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση. Πλήρωση σωλήνα εισαγωγής Α Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την πλήρωση όλων των σωλήνων εισαγωγής Α που θα χρησιμοποιηθούν στην ανάλυση με κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα/διάλυμα. Βήμα 1 2 Ενέργεια Βεβαιωθείτε ότι όλοι οι σωλήνες εισαγωγής Α που θα χρησιμοποιηθούν στην ανάλυση μεθόδου έχουν εμβαπτιστεί στα κατάλληλα ρυθμιστικά διαλύματα. Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Flow path:inlet A. Επιλέξτε τη Position της εισαγωγής που θα γεμίσετε από την αναπτυσσόμενη λίστα. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα εισαγωγής Α μεταβαίνει στην επιλεγμένη θύρα Συνδέστε μία σύριγγα ml στη βαλβίδα καθαρισμού σε μία από τις κεφαλές αντλίας της αντλίας συστήματος Α. Βεβαιωθείτε ότι η σύριγγα εφαρμόζει απόλυτα στο συνδετήρα καθαρισμού. Ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την αριστερόστροφα κατά 3/4 της στροφής. Αναρροφήστε αργά υγρό στη σύριγγα μέχρι το υγρό να φτάσει στην αντλία. Κλείστε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την δεξιόστροφα. Αποσυνδέστε τη σύριγγα και απορρίψτε το περιεχόμενό της. Επαναλάβετε τα βήματα 2-5 για κάθε σωλήνα εισαγωγής Α που θα χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση. Έναρξη ÄKTA avant AA 85

86 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Προετοιμασία του συστήματος πριν από τον καθαρισμό των κεφαλών της αντλίας συστήματος Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προετοιμασία του συστήματος. Βήμα Ενέργεια Βεβαιωθείτε ότι το τμήμα του σωλήνα αποβλήτων που είναι συνδεδεμένο στη θύρα της βαλβίδας έγχυσης W1 έχει τοποθετηθεί σε δοχείο αποβλήτων. Ανοίξτε τη μονάδα System Control και επιλέξτε Manual:Execute Manual Instructions. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Manual instructions. Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Ορίστε Flow path:injection valve και επιλέξτε System pump waste από την Position αναπτυσσόμενη λίστα. Πατήστε. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα έγχυσης μεταβαίνει σε θέση αποβλήτων. Αυτό είναι απαραίτητο για να επιτευχθεί χαμηλή οπισθοπίεση κατά τη διαδικασία καθαρισμού. Επιλέξτε Pumps and pressures:system flow. Για το ÄKTA avant 25, ρυθμίστε το Flow rate σε 1,0 ml/min. Για το ÄKTA avant 150, ρυθμίστε το Flow rate σε 10,0 ml/min. Πατήστε. Αποτέλεσμα: Αρχίζει η ροή συστήματος. 86 Έναρξη ÄKTA avant AA

87 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Καθαρισμός της αντλίας συστήματος Β Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για τον καθαρισμό και των δύο κεφαλών αντλίας της αντλίας συστήματος B. Βήμα 1 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Pumps and pressures:gradient. Ρυθμίστε το Target σε 100% B και το Length σε 0 min. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Μόνο η αντλία συστήματος Β είναι ενεργή. Έναρξη ÄKTA avant AA 87

88 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα 2 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Flow path:inlet B. Επιλέξτε τη Position μιας από τις εισαγωγές που θα χρησιμοποιηθούν από την αναπτυσσόμενη λίστα. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα εισαγωγής Β μεταβαίνει στην επιλεγμένη θύρα. 3 Συνδέστε μια σύριγγα 25 έως 30 ml στη βαλβίδα καθαρισμού της αριστερής κεφαλής αντλίας της αντλίας συστήματος Β. Βεβαιωθείτε ότι η σύριγγα εφαρμόζει σφιχτά στο συνδετήρα καθαρισμού. 4 Ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την αριστερόστροφα κατά 3/4 της στροφής. Αναρροφήστε αργά μία μικρή ποσότητα υγρού στη σύριγγα (με ρυθμό περίπου 1 ml/second). 88 Έναρξη ÄKTA avant AA

89 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα 5 6 Ενέργεια Κλείστε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την δεξιόστροφα. Αποσυνδέστε τη σύριγγα και απορρίψτε το περιεχόμενό της. Συνδέστε τη σύριγγα στη βαλβίδα καθαρισμού που υπάρχει στη δεξιά κεφαλή αντλίας της αντλίας συστήματος Β και επαναλάβετε τα βήματα 4 και 5. Διατηρήστε το ρυθμό ροής του συστήματος. Καθαρισμός της αντλίας συστήματος Α Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για να καθαρίσετε και τις δύο κεφαλές αντλίας της αντλίας συστήματος A. Βήμα 1 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Pumps and pressures:gradient. Ρυθμίστε το Target σε 0% B και το Length σε 0 min. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Μόνο η αντλία συστήματος Α είναι ενεργή. Έναρξη ÄKTA avant AA 89

90 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα 2 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Flow path:inlet A. Επιλέξτε τη Position μιας από τις εισαγωγές που θα χρησιμοποιηθούν από την αναπτυσσόμενη λίστα. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα εισαγωγής Α μεταβαίνει στην επιλεγμένη θύρα. 3 Συνδέστε μία σύριγγα ml στη βαλβίδα καθαρισμού της αριστερής κεφαλής αντλίας του συστήματος αντλίας Α. Βεβαιωθείτε ότι η σύριγγα εφαρμόζει απόλυτα στο συνδετήρα καθαρισμού. 4 5 Ανοίξτε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την αριστερόστροφα κατά 3/4 της στροφής. Αναρροφήστε αργά μία μικρή ποσότητα υγρού στη σύριγγα (με ρυθμό περίπου 1 ml/second). Κλείστε τη βαλβίδα καθαρισμού περιστρέφοντάς την δεξιόστροφα. Αποσυνδέστε τη σύριγγα και απορρίψτε το περιεχόμενό της. 90 Έναρξη ÄKTA avant AA

91 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.3 Πλήρωση εισόδων ρυθμιστικού διαλύματος και καθαρισμός αντλιών συστήματος Βήμα 6 Ενέργεια Συνδέστε τη σύριγγα στη βαλβίδα καθαρισμού στη δεξιά κεφαλή αντλίας του συστήματος αντλίας Α και επαναλάβετε τα βήματα 5-6. Διατηρήστε τη ροή συστήματος. Τερματισμός ανάλυσης Κάντε κλικ στο εικονίδιο End στη γραμμή εργαλείων του System Control για τερματισμό της ανάλυσης. Έναρξη ÄKTA avant AA 91

92 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.4 Σύνδεση στήλης 6.4 Σύνδεση στήλης Εισαγωγή Στην ενότητα αυτή περιγράφεται ο τρόπος σύνδεσης μιας στήλης στο όργανο χρησιμοποιώντας ένα συγκρατητήρα στήλης, χωρίς να εισχωρήσει αέρας στη διαδρομή ροής. Διατίθενται διάφοροι τύποι συγκρατητήρων στήλης για το ÄKTA avant. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Για να αποφευχθεί η έκθεση της στήλης σε υπερβολική πίεση, βεβαιωθείτε ότι το όριο πίεσης έχει ρυθμιστεί στην προδιαγραφόμενη μέγιστη πίεση της στήλης. Πριν από τη σύνδεση μιας στήλης στο όργανο ÄKTA avant, διαβάστε τις οδηγίες χρήσης της στήλης. Οι μέθοδοι περιλαμβάνουν αυτομάτως έναν συναγερμό υψηλής πίεσης με βάση τις προδιαγραφές του επιλεγμένου τύπου στήλης. Ωστόσο, όταν εκτελείτε χειροκίνητες αναλύσεις θα πρέπει να ορίσετε οι ίδιοι τα όρια πίεσης. Σημείωση: Μη σφίγγετε υπερβολικά κατά τη σύνδεση των στηλών. Σε περίπτωση υπερβολικής σύσφιξης, μπορεί να προκληθεί θραύση των συνδετήρων ή συμπίεση των σωλήνων, με αποτέλεσμα να δημιουργηθεί υψηλή πίεση παλινδρόμησης. Προσάρτηση στηρίγματος στήλης και σύνδεση στήλης Για τη σύνδεση μιας στήλης στο όργανο, ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες. Χρησιμοποιείτε πάντα συγκρατητήρα στήλης. Η στήλη συνδέεται σε δύο αντικριστά τμήματα της βαλβίδας στήλης μέσω των κατάλληλων σωλήνων και συνδετήρων. Βήμα 1 Ενέργεια Επιλέξτε μια στήλη ανάλογα με τις επιλογές στηλών που έχουν πραγματοποιηθεί στη μέθοδο που θα εκτελεστεί. 92 Έναρξη ÄKTA avant AA

93 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.4 Σύνδεση στήλης Βήμα 2 Ενέργεια Στερεώστε έναν κατάλληλο συγκρατητήρα στήλης στον οδηγό του οργάνου. 3 Στερεώστε τη στήλη στο συγκρατητήρα στήλης. 4 Συνδέστε έναν κατάλληλο σωλήνα σε μια θύρα της βαλβίδας στήλης, για παράδειγμα, στη θύρα 2A, εάν είχε επιλεγεί η θέση στήλης 2 στη μέθοδο που θα εκτελεστεί. Έναρξη ÄKTA avant AA 93

94 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.4 Σύνδεση στήλης Βήμα 5 6 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα System Control και επιλέξτε Manual:Execute Manual Instructions. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Manual instructions. Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions : Επιλέξτε Flow path:column position. Επιλέξτε το στοιχείο Position που χρησιμοποιείται για τη σύνδεση της στήλης, στο παράδειγμα αυτό, το στοιχείο Position 2. Επιλέξτε "Down flow" στη ρύθμιση Flow Direction. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα στήλης μεταβαίνει στη θέση Έναρξη ÄKTA avant AA

95 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.4 Σύνδεση στήλης Βήμα 7 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Manual instructions: Επιλέξτε Pumps and pressure:system flow. Καταχωρίστε μια χαμηλή τιμή Flow rate (π.χ. 0,2 ml/min). Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Ξεκινά η ροή συστήματος με 0,2 ml/min. 8 Όταν το ρυθμιστικό διάλυμα εξέλθει από το σωλήνα στη θύρα 2A σε συνεχή λειτουργία και το άνω μέρος της στήλης γεμίσει με ρυθμιστικό διάλυμα, συνδέστε το σωλήνα στο άνω μέρος της στήλης. Έναρξη ÄKTA avant AA 95

96 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.4 Σύνδεση στήλης Βήμα 9 Ενέργεια Συνδέστε ένα τμήμα του σωλήνα στο κάτω μέρος της στήλης. 10 Όταν το ρυθμιστικό διάλυμα εξέλθει από το σωλήνα στο κάτω μέρος της στήλης σε συνεχή λειτουργία, συνδέστε αυτό το τμήμα του σωλήνα στη βαλβίδα στήλης. Χρησιμοποιήστε τη θύρα που βρίσκεται απέναντι από την ήδη συνδεδεμένη θύρα στη στήλη, στο παράδειγμα αυτό, τη θύρα 2B. 11 Κάντε κλικ στο εικονίδιο End στη γραμμή εργαλείων του System Control για τερματισμό της ανάλυσης. 96 Έναρξη ÄKTA avant AA

97 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.5 Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph 6.5 Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph Εισαγωγή Εάν πρόκειται να μετρηθεί το ph κατά τη διάρκεια της χρωματογραφικής ανάλυσης, η συσκευή παρακολούθησης ph πρέπει να βαθμονομηθεί πριν από την έναρξη της ανάλυσης. Χρησιμοποιήστε δύο ρυθμιστικά διαλύματα βαθμονόμησης ph με διαφορά τουλάχιστον μίας μονάδας ph. Συνιστάται η χρήση ενός τυπικού ρυθμιστικού διαλύματος ph 4 ή 7 ως πρώτο σημείο βαθμονόμησης και ενός τυπικού ρυθμιστικού διαλύματος ph κοντά στη χαμηλότερη ή υψηλότερη τιμή ph που πρέπει να μετρηθεί ως δεύτερο σημείο. Αφήστε τα ρυθμιστικά διαλύματα να αποκτήσουν θερμοκρασία λειτουργίας πριν από τη χρήση. Σημείωση: Κατά τη βαθμονόμηση ph δεν πρέπει υπάρχει ροή στο σύστημα. Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την εκτέλεση της βαθμονόμησης. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα System Control και επιλέξτε System:Calibrate. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Calibration. 2 3 Ρυθμίστε τη συσκευή παρακολούθησης ph ως Monitor to calibrate επιλέγοντας ph από τη λίστα. Κάντε κλικ στην επιλογή. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα ph μεταβαίνει στη θέση βαθμονόμησης. Έναρξη ÄKTA avant AA 97

98 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.5 Βαθμονόμηση συσκευής παρακολούθησης ph Βήμα Ενέργεια Καταχωρίστε το ph του πρώτου τυποποιημένου ρυθμιστικού διαλύματος ph στο πεδίο ph for buffer 1. Γεμίστε μια σύριγγα με περίπου 10 ml του πρώτου τυποποιημένου ρυθμιστικού διαλύματος ph. Συνδέστε τη σύριγγα στο σύνδεσμο Luer στη θύρα της βαλβίδας ph Cal και εκτελέστε έγχυση του ρυθμιστικού διαλύματος. Όταν η τιμή Current value είναι σταθερή, κάντε κλικ στην επιλογή Προχωρήστε στην πλύση της κυψελίδας ροής ph με έγχυση νερού στη θύρα της βαλβίδας ph Cal χρησιμοποιώντας μια νέα σύριγγα. Καταχωρίστε το ph του δεύτερου τυποποιημένου ρυθμιστικού διαλύματος ph στο πεδίο ph for buffer 2. Επαναλάβετε τα βήματα 5-6 χρησιμοποιώντας το δεύτερο τυποποιημένο ρυθμιστικό διάλυμα ph. Αποτέλεσμα: Στο παράθυρο διαλόγου εμφανίζεται η ημερομηνία και η ώρα βαθμονόμησης, καθώς και οι τιμές για τα στοιχεία Calibrated electrode slope και Asymmetry potential at ph 7. Η τιμή Calibrated electrode slope είναι 80% και η τιμή Asymmetry potential at ph 7 είναι εντός του διαστήματος ±60 mv; Εάν ναι: Κάντε κλικ στην επιλογή για επιστροφή της βαλβίδας ph στην προεπιλεγμένη θέση και κλείσιμο του παραθύρου διαλόγου Calibration. Εάν όχι: Καθαρίστε το ηλεκτρόδιο ph και επαναλάβετε τη διαδικασία βαθμονόμησης. Εάν το πρόβλημα παραμένει, αντικαταστήστε το ηλεκτρόδιο. Για πληροφορίες σχετικά με τον καθαρισμό και την αντικατάσταση του ηλεκτροδίου ph, ανατρέξτε στο Κεφάλαιο "Συντήρηση" του Εγχειρίδιο χρήστη. ΠΡΟΣΟΧΗ Ηλεκτρόδιο ph Ο χειρισμός του ηλεκτροδίου ph πρέπει να γίνεται με προσοχή. Το γυάλινο άκρο μπορεί να σπάσει και να προκληθεί τραυματισμός. 98 Έναρξη ÄKTA avant AA

99 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο προετοιμασίας του κλασματικού συλλέκτη. Για πληροφορίες σχετικά με τον τύπο των πλακών βυθισμάτων μεγάλου βάθους, των σωλήνων και των κασετών, ανατρέξτε στο ÄKTA avant User Manual. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Κλασματικός συλλέκτης. Μην υποβάλλετε εύφλεκτα υγρά σε κλασματοποίηση. Κατά την εκτέλεση μεθόδων RPC ή άλλων διαδικασιών με χρήση οργανικών διαλυτών, συλλέγετε τα κλάσματα μέσω της βαλβίδας εξαγωγής. Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προετοιμασία του κλασματικού συλλέκτη πριν από μια ανάλυση. Κασέτες και δίσκος κασέτας Βήμα 1 Ενέργεια Αν πρόκειται να χρησιμοποιήσετε κασέτες με τη λειτουργία QuickRelease, ανοίξτε τις κασέτες. Έναρξη ÄKTA avant AA 99

100 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Βήμα 2 Ενέργεια Τοποθετήστε τους σωλήνες και τις πλάκες βυθισμάτων μεγάλου βάθους μέσα στις κασέτες. Βεβαιωθείτε ότι οι πλάκες βυθισμάτων μεγάλου βάθους έχουν περιστραφεί έτσι ώστε το βύθισμα που σημειώνεται A1 να βρίσκεται πάνω από την A1 ένδειξη της κασέτας. 3 Κλείστε τις κασέτες που έχουν τη λειτουργία QuickRelease. 100 Έναρξη ÄKTA avant AA

101 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Βήμα 4 Ενέργεια Τοποθετήστε τις κασέτες στο δίσκο κασέτας. Βεβαιωθείτε ότι ο κωδικός τύπου κασέτας (ανατρέξτε στην παρακάτω εικόνα) κοιτάζει το μπροστινό μέρος του δίσκου που έχει το λογότυπο GE. 5 Ανοίξτε το συρτάρι κλασματικού συλλέκτη πιέζοντας τη λαβή προς τα επάνω και τραβώντας το συρτάρι προς τα έξω. Έναρξη ÄKTA avant AA 101

102 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Βήμα 6 Ενέργεια Τοποθετήστε το δίσκο κασέτας στο στήριγμα δίσκου του συρταριού κλασματικού συλλέκτη. Βεβαιωθείτε ότι η μπροστινή πλευρά του δίσκου (με το λογότυπο της GE) είναι στραμμένη προς την μπροστινή πλευρά του συρταριού και ότι είναι συνδεδεμένη στους δύο πείρους. 7 Κλείστε το συρτάρι κλασματικού συλλέκτη. Βεβαιωθείτε ότι έχει ασφαλίσει στην κλειστή θέση. 50 ml δίσκος σωλήνα Βήμα 1 2 Ενέργεια Τοποθετήστε τους σωλήνες 50 ml στο δίσκο σωλήνων 50 ml. Ανοίξτε το συρτάρι κλασματικού συλλέκτη πιέζοντας τη λαβή προς τα επάνω και τραβώντας το συρτάρι προς τα έξω. 102 Έναρξη ÄKTA avant AA

103 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Βήμα 3 Ενέργεια Τοποθετήστε το δίσκο σωλήνα 50 ml πάνω στο δίσκο στήριξης του συρταριού του κλασματικού συλλέκτη. Βεβαιωθείτε ότι το μπροστινό μέρος του δίσκου (που έχει το λογότυπο GE) κοιτάζει το μπροστινό μέρος του συρταριού και είναι στερεωμένο στους δύο πίρους. Σημείωση: Ο δίσκος κασέτας δεν πρέπει να χρησιμοποιείται, όταν ο δίσκος σωλήνων 50 ml ή ο δίσκος φιαλών 250 ml είναι τοποθετημένος στο συρτάρι κλασματικού συλλέκτη. 4 Κλείστε το συρτάρι κλασματικού συλλέκτη. Βεβαιωθείτε ότι έχει ασφαλίσει στην κλειστή θέση. Αναγνώριση κασέτας Αφού κλείσετε το συρτάρι του κλασματικού συλλέκτη, ο βραχίονας του κλασματικού συλλέκτη σαρώνει τον κωδικό τύπου κασέτας κάθε κασέτας για να αναγνωρίσει τους τύπους των κασετών. Αν χρησιμοποιούνται πλάκες βυθισμάτων μεγάλου βάθους, το όργανο αναγνωρίζει επίσης τους τύπους των πλακών βυθισμάτων μεγάλου βάθους. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Κινούμενα εξαρτήματα κλασματικού συλλέκτη. Μην ανοίγετε το συρτάρι του κλασματικού συλλέκτη, όταν ο κλασματικός συλλέκτης είναι ενεργοποιημένος. Εάν απαιτείται πρόσβαση στον κλασματικό συλλέκτη, πατήστε το Pause και βεβαιωθείτε ότι η κίνηση έχει διακοπεί πριν ανοίξετε το συρτάρι. Έναρξη ÄKTA avant AA 103

104 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.6 Προετοιμασία κλασματικού συλλέκτη Προβολή περιεχομένου κλασματικού συλλέκτη Για να προβάλετε το περιεχόμενο του κλασματικού συλλέκτη, ανοίξτε τη μονάδα System control και επιλέξτε View:Fraction Collector Content. 104 Έναρξη ÄKTA avant AA

105 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.7 Προετοιμαστείτε για μια ανάλυση σε ψυκτικό θάλαμο 6.7 Προετοιμαστείτε για μια ανάλυση σε ψυκτικό θάλαμο Εισαγωγή Για να τοποθετήσετε το όργανο ÄKTA avant σε ψυκτικό θάλαμο, μπορείτε να αφαιρέσετε την πτυσσόμενη θύρα και το κάλυμμα αντλίας. Για οδηγίες, ανατρέξτε στο ÄKTA avant User Manual. Όταν το όργανο χρησιμοποιείται σε ψυκτικό θάλαμο, λαμβάνετε τις προφυλάξεις που αναφέρονται παρακάτω. Προφυλάξεις αναφορικά με τις αναλύσεις σε ψυχρό θάλαμο ΣΗΜΕΙΩΣΗ Αποφεύγετε τη συμπύκνωση υδρατμών. Εάν το ÄKTA avant φυλάσσεται σε ψυκτικό θάλαμο ή άλλο παρόμοιο χώρο, πρέπει να παραμένει ενεργοποιημένο, προκειμένου να αποφευχθεί η συμπύκνωση υδρατμών. ΣΗΜΕΙΩΣΗ Αποφεύγετε την υπερθέρμανση. Εάν το ÄKTA avant φυλάσσεται σε ψυκτικό θάλαμο, ο οποίος είναι απενεργοποιημένος, φροντίστε να απενεργοποιήστε το ÄKTA avant και αφήστε τον ψυκτικό θάλαμο ανοικτό, ώστε να αποφευχθεί η υπερθέρμανση. ΣΗΜΕΙΩΣΗ Τοποθετήστε τον υπολογιστή σε ένα χώρο με θερμοκρασία δωματίου. Αν το όργανο ÄKTA avant τοποθετηθεί σε έναν ψυκτικό θάλαμο, χρησιμοποιήστε έναν υπολογιστή που είναι συμβατός με ψυκτικούς θαλάμους ή τοποθετήστε τον υπολογιστή έξω από τον ψυκτικό θάλαμο και χρησιμοποιήστε το καλώδιο Ethernet που παρέχεται με το όργανο για σύνδεση στον υπολογιστή. Σημείωση: Όταν το όργανο φυλάσσεται σε ψυχρό χώρο, συνίσταται να σφίγγετε όλοι οι συνδετήρες των σωλήνων και οι πολλαπλοί συνδετήρες εισαγωγής. Διαφορετικά, μπορεί να περάσει αέρας στη διαδρομή ροής. Έναρξη ÄKTA avant AA 105

106 6 Προετοιμασία του συστήματος για ανάλυση 6.7 Προετοιμαστείτε για μια ανάλυση σε ψυκτικό θάλαμο ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Κατά την εκτέλεση αναλύσεων σε ψυκτικό θάλαμο, βεβαιωθείτε ότι έχει ρυθμιστεί η θερμοκρασία-στόχος στη λειτουργία ελέγχου θερμοκρασίας του κλασματικού συλλέκτη. Η θερμοκρασία-στόχος είναι 20ºC βάσει προεπιλογής. Οι ρυθμίσεις για τη λειτουργία ελέγχου θερμοκρασίας μπορούν να τροποποιηθούν στο παράθυρο διαλόγου System Settings του System Control ή στο παράθυρο Text Instructions στο Method Editor. 106 Έναρξη ÄKTA avant AA

107 7 Εκτέλεση μεθόδου 7 Εκτέλεση μεθόδου Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Το κεφάλαιο αυτό περιγράφει τον τρόπο έναρξης και εκτέλεσης μιας μεθόδου, καθώς και τον τρόπο χειρισμού του συστήματος μετά την ανάλυση. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 7.1 Πριν από την έναρξη 7.2 Εφαρμογή δείγματος 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA 107

108 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.1 Πριν από την έναρξη 7.1 Πριν από την έναρξη Εισαγωγή Πριν από την έναρξη μιας ανάλυσης, πρέπει να διαβάσετε και να κατανοήσετε τις πληροφορίες της παρούσας ενότητας και να εκτελέσετε τους ελέγχους που αναφέρονται παρακάτω. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Χρησιμοποιείτε πάντα κατάλληλο εξοπλισμό ατομικής προστασίας κατά τη λειτουργία και τη συντήρηση του οργάνου ÄKTA avant. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Επικίνδυνες ουσίες. Κατά τη χρήση επικίνδυνων χημικών και βιολογικών παραγόντων, λαμβάνετε όλα τα κατάλληλα προστατευτικά μέτρα, όπως είναι η χρήση προστατευτικών γυαλιών και γαντιών ανθεκτικών στις ουσίες που χρησιμοποιούνται. Τηρείτε τους τοπικούς ή/και εθνικούς κανονισμούς σχετικά με την ασφαλή λειτουργία, τη συντήρηση και την απόσυρση του εξοπλισμού. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Υψηλή πίεση.το ÄKTA avant λειτουργεί υπό υψηλή πίεση. Φοράτε πάντα προστατευτικά γυαλιά. Λίστα ελέγχου Βεβαιωθείτε ότι το σύστημα είναι σωστά προετοιμασμένο. Ελέγξτε εάν: Ότι το σύστημα έχει προετοιμαστεί σύμφωνα με τις ρυθμίσεις στη μέθοδο που θα αναλυθεί. Ότι έχει επιλεγεί μια κατάλληλη στήλη για την εφαρμογή (λάβετε υπ' όψιν τη στοχευόμενο πρωτεΐνη και το εύρος τιμών πίεσης). Ότι ο σωλήνας εισαγωγής ρυθμιστικού διαλύματος έχει εμβυθιστεί στα σωστά δοχεία ρυθμιστικού διαλύματος (λάβετε υπ' όψιν το είδος και τον όγκο διαλύματος). Όλοι οι σωλήνες αποβλήτων είναι τοποθετημένοι μέσα στα ενδεδειγμένα δοχεία αποβλήτων (ελέγξτε το μέγεθος, την τοποθέτηση και το υλικό του δοχείου). 108 Έναρξη ÄKTA avant AA

109 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.1 Πριν από την έναρξη Δεν υπάρχει συστραμμένος σωλήνας και η διαδρομή ροής είναι ελεύθερη από διαρροές. Αναμονή, παύση ή διακοπή της ανάλυσης Μετά την ολοκλήρωση μιας μεθόδου, η ανάλυση τερματίζεται αυτόματα. Όλες οι αντλίες σταματούν και εκπέμπεται ένα ηχητικό σήμα ολοκλήρωσης, εμφανίζεται η ένδειξη End στο Run Log. Για τη διακοπή μιας μεθόδου κατά τη διάρκεια μιας ανάλυσης, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε τα εικονίδια Hold, Pause ή End στο System Control. Μια ανάλυση μεθόδου σε αναμονή ή παύση μπορεί να συνεχιστεί χρησιμοποιώντας το εικονίδιο Continue. Ανατρέξτε στις οδηγίες που αναφέρονται στον παρακάτω πίνακα. Για... Προσωρινή θέση της μεθόδου σε αναμονή, με διατήρηση του τρέχοντος ρυθμού ροής και των θέσεων βαλβίδας τότε... Κάντε κλικ στο εικονίδιο Hold. Προσωρινή παύση της μεθόδου και διακοπή της λειτουργίας όλων των αντλιών Κάντε κλικ στο εικονίδιο Pause. Συνέχιση, για παράδειγμα, μιας ανάλυσης μεθόδου σε αναμονή ή παύση. Κάντε κλικ στο εικονίδιο Continue. Σημείωση: Μια μέθοδος που έχει τερματιστεί δεν μπορεί να συνεχιστεί. Οριστικό τερματισμό της ανάλυσης Κάντε κλικ στο εικονίδιο End. Έναρξη ÄKTA avant AA 109

110 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.1 Πριν από την έναρξη Σημείωση: Όταν μια ανάλυση μεθόδου τερματιστεί πριν ολοκληρωθεί, μπορείτε να αποθηκεύσετε τα αποτελέσματα που έχουν προκύψει έως εκείνη τη στιγμή. Προειδοποιήσεις σχετικά με τη χρήση επικίνδυνων ουσιών ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Επικίνδυνες χημικές ουσίες κατά την ανάλυση. Όταν χρησιμοποιείτε επικίνδυνες χημικές ουσίες, εκτελείτε τις διαδικασίες System CIP και Column CIP για έκπλυση όλων των σωλήνων του συστήματος με αποσταγμένο νερό πριν από την επισκευή και τη συντήρηση. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Επικίνδυνοι βιολογικοί παράγοντες κατά την ανάλυση. Όταν χρησιμοποιείτε επικίνδυνους βιολογικούς παράγοντες, εκτελέστε τις διαδικασίες System CIP και Column CIP για έκπλυση όλων των σωλήνων του συστήματος με βακτηριοστατικό διάλυμα (π.χ. NaOH), στη συνέχεια με ουδέτερο ρυθμιστικό διάλυμα και τέλος με αποσταγμένο νερό πριν από την επισκευή και τη συντήρηση. 110 Έναρξη ÄKTA avant AA

111 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.2 Εφαρμογή δείγματος 7.2 Εφαρμογή δείγματος Εισαγωγή Διατίθενται διάφορες τεχνικές εφαρμογής για ένα δείγμα. Το δείγμα μπορεί να εφαρμοστεί είτε απευθείας στη στήλη χρησιμοποιώντας την αντλία δείγματος είτε μέσω σωλήνα. Η πλήρωση ενός σωλήνα μπορεί να εκτελεστεί είτε χειροκίνητα είτε χρησιμοποιώντας την αντλία δείγματος. Η ενότητα αυτή περιγράφει την εφαρμογή του δείγματος χρησιμοποιώντας μια σύριγγα για τη χειροκίνητη πλήρωση ενός τριχοειδούς σωλήνα. Τα δύο στάδια της εφαρμογής δείγματος περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Για λεπτομερείς οδηγίες και πληροφορίες σχετικά με τις διαφορετικές τεχνικές εφαρμογής δείγματος, ανατρέξτε στο Εγχειρίδιο χρήστη. Στάδιο Φόρτωση Έγχυση Περιγραφή Ο τριχοειδής σωλήνας γεμίζει με δείγμα. Εκτελείται έγχυση του δείγματος στη στήλη. Έναρξη ÄKTA avant AA 111

112 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.2 Εφαρμογή δείγματος Εφαρμογή δείγματος μέσω τριχοειδούς σωλήνα Ο τριχοειδής σωλήνας γεμίζει χειροκίνητα με δείγμα χρησιμοποιώντας μια σύριγγα που είναι συνδεδεμένη στη θύρα της βαλβίδας έγχυσης Syr. Κατά την ανάλυση της μεθόδου, εκτελείται αυτόματη έγχυση του δείγματος στη στήλη. Εκτελείται εκκένωση και πλύση του σωλήνα χρησιμοποιώντας ρυθμιστικό διάλυμα από τις αντλίες συστήματος. Ο συνολικός όγκος ρυθμιστικού διαλύματος που θα χρησιμοποιηθεί για την εκκένωση και την πλύση του τριχοειδούς σωλήνα καθορίζεται στην καρτέλα Phase Properties της φάσης Sample Application στο Empty loop with. ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Αδειάστε τον τριχοειδή σωλήνα με όγκο ρυθμιστικού διαλύματος που υπερβαίνει τον όγκο του σωλήνα. Με τον τρόπο αυτό, διασφαλίζεται η πλήρης εκκένωση του σωλήνα. 112 Έναρξη ÄKTA avant AA

113 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.2 Εφαρμογή δείγματος Διαδικασία πλήρωσης τριχοειδούς σωλήνα Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την πλήρωση του τριχοειδούς σωλήνα με δείγμα. Βήμα 1 Ενέργεια Συνδέστε έναν κατάλληλο τριχοειδή σωλήνα στις θύρες της βαλβίδας έγχυσης LoopF (πλήρωση) και LoopE (εκκένωση). 2 3 Γεμίστε μια σύριγγα με δείγμα. Συνδέστε τη σύριγγα στη θύρα της βαλβίδας έγχυσης Syr. Έναρξη ÄKTA avant AA 113

114 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.2 Εφαρμογή δείγματος Βήμα 4 Ενέργεια Διοχετεύστε το δείγμα στον τριχοειδή σωλήνα. Για να αποφευχθεί η απώλεια δείγματος λόγω αντίστροφης ροής, αφήστε τη σύριγγα στη θύρα μέχρι να ολοκληρωθεί η έγχυση του δείγματος στη στήλη κατά τη διάρκεια της ανάλυσης. ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Συνιστάται η υπερφόρτωση του σωλήνα, ώστε να διασφαλιστεί η πλήρης πλήρωσή του. Η περίσσεια δείγματος θα εξαχθεί από τη βαλβίδα μέσω της θύρας W Έναρξη ÄKTA avant AA

115 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Εισαγωγή Αυτή η ενότητα περιγράφει τον τρόπο έναρξης μιας ανάλυσης με τη χρήση μιας μεθόδου που είχε δημιουργηθεί προηγουμένως. Εάν έχει ενεργοποιηθεί το στοιχείο Column Logbook κατά τη διάρκεια της εγκατάστασης του λογισμικού, η καταχώριση και η επιλογή μεμονωμένων στηλών είναι δυνατή κατά την έναρξη της εκτέλεσης μεθόδου. Η λειτουργία Column Logbook περιλαμβάνει, για παρέδειγμα, την καταγραφή του ιστορικού της στήλης. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τη διαχείριση της στήλης, ανατρέξτε στην ενότητα UNICORN 6 Method Manual. Επιλογή και έναρξη μεθόδου Οι παρακάτω οδηγίες περιγράφουν τον τρόπο ανοίγματος μια μεθόδου και έναρξης μιας ανάλυσης. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα System Control και κάντε κλικ στο εικονίδιο Open Method Navigator. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο Method Navigator. 2 Επιλέξτε τη μέθοδο που θα εκτελεστεί και κάντε κλικ στο εικονίδιο Run. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Start Protocol. Έναρξη ÄKTA avant AA 115

116 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Βήμα 3 4 Ενέργεια Μετακινηθείτε στις σελίδες που εμφανίζονται στο Start Protocol, προσθέστε τα απαιτούμενα στοιχεία και πραγματοποιήστε τυχόν αλλαγές, εάν απαιτείται. Κάντε κλικ στην επιλογή Next. Κάντε κλικ στην επιλογή Finish στην τελευταία σελίδα του Start Protocol. Αποτέλεσμα: Εάν ενεργοποιήθηκε η λειτουργία καταγραφής στηλών κατά την εγκατάσταση του UNICORN και επιλέχθηκε ένας τύπος στήλης κατά τη δημιουργία μιας μεθόδου, ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Select Columns. Προχωρήστε στα βήματα 5-9. Εάν δεν ενεργοποιήθηκε η λειτουργία καταγραφής στηλών κατά την εγκατάσταση του UNICORN ή/και δεν επιλέχθηκε κανένας τύπος στήλης κατά τη δημιουργία μιας μεθόδου, η ανάλυση ξεκινά άμεσα. 5 Η στήλη που θα χρησιμοποιηθεί έχει ήδη καταγραφεί; Εάν όχι, προχωρήστε στο βήμα 6. Εάν ναι, προχωρήστε στο βήμα 9. 6 Στο παράθυρο διαλόγου Select Columns, κάντε κλικ στην επιλογή New. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το πρώτο παράθυρο διαλόγου New Column. 116 Έναρξη ÄKTA avant AA

117 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Βήμα 7 Ενέργεια Καταγράψτε τη στήλη χρησιμοποιώντας το σαρωτή γραμμωτού κώδικα 2D ως εξής: Βεβαιωθείτε ότι ο δείκτης βρίσκεται στην πρώτη θέση του πεδίου Code. Στρέψτε το σαρωτή γραμμωτού κώδικα 2D προς την πινακίδα μήτρας δεδομένων στη στήλη. Πιέστε παρατεταμένα τη σκανδάλη για τη δημιουργία μιας δέσμης. Όταν ο σαρωτής γραμμωτού κώδικα 2D εκπέμψει ένα ηχητικό σήμα, το αναγνωριστικό της στήλης καταγράφεται και εμφανίζεται στο παράθυρο διαλόγου. Εναλλακτικά, καταχωρίστε χειροκίνητα το αναγνωριστικό της στήλης που περιλαμβάνεται στην ετικέτα της στήλης, στο παράθυρο διαλόγου χρησιμοποιώντας το πληκτρολόγιο. Κάντε κλικ στην επιλογή Continue. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το διευρυμένο παράθυρο διαλόγου New Column. Έναρξη ÄKTA avant AA 117

118 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Βήμα Ενέργεια 8 Στο διευρυμένο παράθυρο διαλόγου New Column : Εισαγωγή Alias (προαιρετικά) Επιλέξτε Technique και Column type από τις αναπτυσσόμενες λίστες. Ορίστε το πλαίσιο επιλογής Set medium expiration date και επιλέξτε ημερομηνία από την αναπτυσσόμενη λίστα. Κάντε κλικ στο OK. ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Το Alias μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εύκολη αναγνώριση μιας στήλης. Αποτέλεσμα: Οι πληροφορίες που έχουν καταχωριστεί αποθηκεύονται και το παράθυρο διαλόγου κλείνει. 118 Έναρξη ÄKTA avant AA

119 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.3 Έναρξη ανάλυσης μεθόδου Βήμα 9 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Select Columns: Επιλέξτε Enter ID. Χρησιμοποιήστε το σαρωτή γραμμωτού κώδικα 2D (βλ. βήμα 7), για να καταχωρίσετε το αναγνωριστικό της στήλης. Εναλλακτικά, επιλέξτε Select ID και το αναγνωριστικό της στήλης που θα χρησιμοποιηθεί στην ανάλυση από την αναπτυσσόμενη λίστα. Κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Η ανάλυση ξεκινά. Όλες οι απαιτούμενες ενέργειες πραγματοποιούνται αυτόματα ανάλογα με τη μέθοδο, συμπεριλαμβανομένου του τερματισμού της ανάλυσης. Έναρξη ÄKTA avant AA 119

120 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Εισαγωγή Μπορείτε να παρακολουθήσετε μια ανάλυση μεθόδου που βρίσκεται σε εξέλιξη στη μονάδα System Control. Η τρέχουσα κατάσταση του συστήματος εμφανίζεται στο πλαίσιο System state του παραθύρου Run Data. Για παράδειγμα, μπορεί να εμφανίζεται η ένδειξη Run, Wash ή Hold. Οι ίδιες πληροφορίες εμφανίζονται επίσης στην οθόνη του οργάνου. Η ενότητα αυτή περιγράφει τα δεδομένα που εμφανίζονται στο System Control κατά τη διάρκεια μιας ανάλυσης, τη διάταξη της μονάδας και τη διαδικασία προσαρμογής των διαφορετικών παραθύρων προβολής. Εικόνα του περιβάλλοντος χρήστη του System Control Στη μονάδα System Control εμφανίζονται από προεπιλογή τέσσερα παράθυρα (βλ. εικόνα και πίνακα παρακάτω) Έναρξη ÄKTA avant AA

121 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Εξάρτημα Περιγραφή Run Data: Παρουσιάζει τις τρέχουσες τιμές δεδομένων ανάλυσης. Chromatogram: Παρουσιάζει τα δεδομένα με τη μορφή καμπυλών. Run Log: Παρουσιάζει όλες τις καταγεγραμμένες ενέργειες. Flow Scheme: Παρουσιάζει την τρέχουσα διαδρομή ροής. Προσαρμογή του Run Data Στο παράθυρο Run Data εμφανίζονται δεδομένα πραγματικού χρόνου από τις διαθέσιμες συσκευές παρακολούθησης κατά τη διάρκεια της ανάλυσης. Για να αλλάξετε τις παραμέτρους που θα εμφανίζονται στο παράθυρο: Κάντε κλικ στο εικονίδιο Customize, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Customize. Στην καρτέλα Run Data Groups, επιλέξτε τις παραμέτρους που θα εμφανίζονται. Κάντε κλικ στο OK, για να κλείσετε το παράθυρο διαλόγου. Προσαρμογή του Chromatogram Στο παράθυρο Chromatogram εμφανίζεται μια γραφική αναπαράσταση των δεδομένων που έχουν καταγραφεί από τις διαθέσιμες συσκευές παρακολούθησης κατά τη διάρκεια της ανάλυσης. Για να αλλάξετε τις ιδιότητες του χρωματογραφήματος: Έναρξη ÄKTA avant AA 121

122 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Κάντε κλικ στο εικονίδιο Customize, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Customize. Επιλέξτε τα απαιτούμενα στοιχεία από τις καρτέλες που περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Καρτέλα Curves Curve style and color X-axis Y-axis Προσαρμογή Επιλέξτε τις καμπύλες που θα εμφανίζονται. Προσαρμόστε τον τρόπο παρουσίασης των εμφανιζόμενων καμπυλών. Επιλέξτε τη μονάδα βάσης (χρόνος ή όγκος) και ρυθμίστε την κλίμακα του άξονα X. Επιλέξτε τους άξονες Y που θα εμφανίζονται και ρυθμίστε την κλίμακα του άξονα Y για τις διάφορες καμπύλες. Κάντε κλικ στο OK, για να κλείσετε το παράθυρο διαλόγου. Σημείωση: Με τη διαδικασία αυτή, καθορίζονται οι καμπύλες που θα εμφανίζονται και ο τρόπος παρουσίασης των καμπυλών στο παράθυρο Chromatogram και στις εκτυπώσεις. Οι καμπύλες αρχικών πρωτογενών δεδομένων δεν μπορούν να τροποποιηθούν ποτέ ούτε να καταργηθούν από το αποτέλεσμα. Προβολή λεπτομερειών στο Chromatogram Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προβολή επιλεγμένων τμημάτων του χρωματογραφήματος. Για... Προσδιορισμό μιας καμπύλης τότε... Τοποθετήστε το δείκτη του ποντικιού επάνω από την καμπύλη ενδιαφέροντος. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται το όνομα της καμπύλης. 122 Έναρξη ÄKTA avant AA

123 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Για... Επιλογή της καμπύλης στην οποία θα αναφέρεται η κλίμακα του άξονα Y Μεγέθυνση καμπυλών Εκ νέου σμίκρυνση τότε... Κάντε κλικ στην καμπύλη ενδιαφέροντος. Αποτέλεσμα: Η κλίμακα του άξονα Y μετατρέπεται στη μονάδα που ισχύει για την καμπύλη. Επιλέξτε την περιοχή ενδιαφέροντος μετακινώντας το δείκτη και κρατώντας πατημένο το αριστερό κουμπί του ποντικιού. Αποτέλεσμα: Η επιλεγμένη περιοχή μεγεθύνεται. Κάντε δεξιό κλικ με το ποντίκι και επιλέξτε Reset Zoom. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται ξανά η αρχική περιοχή. Προσαρμογή του Run Log Στο παράθυρο Run Log εμφανίζονται όλες οι ενέργειες που καταγράφηκαν κατά τη διάρκεια της ανάλυσης. Μετακινηθείτε προς τα επάνω για εμφάνιση ολόκληρου του αρχείου ημερολογίου. Για να αλλάξετε τα στοιχεία που θα εμφανίζονται στο παράθυρο: Κάντε κλικ στο εικονίδιο Customize, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Customize. Έναρξη ÄKTA avant AA 123

124 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Στην καρτέλα Run Log, επιλέξτε τα στοιχεία που θα εμφανίζονται. Κάντε κλικ στο OK, για να κλείσετε το παράθυρο διαλόγου. Σημείωση: Με τη διαδικασία αυτή, καθορίζονται τα δεδομένα που θα εμφανίζονται στο παράθυρο Run Log κατά τη διάρκεια μιας ανάλυσης. Όλα τα αρχικά πρωτογενή δεδομένα αποθηκεύονται και δεν μπορούν να τροποποιηθούν ποτέ ούτε να καταργηθούν από το αποτέλεσμα. Παράθυρο Flow scheme Στο παράθυρο Flow Scheme εμφανίζεται η τρέχουσα διαδρομή ροής κατά τη διάρκεια της ανάλυσης. Χρησιμοποιούνται χρωματικές ενδείξεις, οι οποίες περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Επίσης, στο παράθυρο flow scheme εμφανίζονται δεδομένα πραγματικού χρόνου από τις συσκευές παρακολούθησης. Δείτε την παρακάτω εικόνα. Χρώμα Πράσινο Γκρι Κόκκινο (δεν απεικονίζεται) Ένδειξη Ανοικτή διαδρομή ροής Κλειστή διαδρομή ροής Συναγερμός 124 Έναρξη ÄKTA avant AA

125 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.4 Παρακολούθηση ανάλυσης Έναρξη ÄKTA avant AA 125

126 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τη διαδικασία καθαρισμού του οργάνου και των στηλών μετά από μια ανάλυση χρωματογραφίας, καθώς και τη διαδικασία προετοιμασίας του συστήματος για αποθήκευση. Το όργανο και οι στήλες θα πρέπει να καθαρίζονται μεταξύ των αναλύσεων. Αυτό θα αποτρέψει, για παράδειγμα τη μόλυνση του δείγματος, την καθίζιση πρωτεϊνών και την έμφραξη της στήλης. Εάν το όργανο δεν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί επί δύο ημέρες ή και περισσότερο, το όργανο, οι στήλες και η κυψελίδα ροής ph θα πρέπει να πληρωθούν με διάλυμα αποθήκευσης. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τις διαδικασίες καθαρισμού και συντήρησης, ανατρέξτε στο Εγχειρίδιο χρήστη. ΣΥΜΒΟΥΛΗ: Για τον καθαρισμό και την πλήρωση του οργάνου και των στηλών με διάλυμα αποθήκευσης, χρησιμοποιήστε τις μεθόδους System CIP και Column CIP, είτε ως ξεχωριστές, προκαθορισμένες μεθόδους, είτε ως φάσεις μιας χρωματογραφικής μεθόδου. ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΗ Επικίνδυνες χημικές ουσίες κατά τη συντήρηση. Κατά τη χρήση επικίνδυνων χημικών ουσιών για τον καθαρισμό του συστήματος ή της στήλης, απαιτείται πλύση του συστήματος ή των στηλών με ουδέτερο διάλυμα κατά την τελευταία φάση ή βήμα. Καθαρισμός συστήματος Μετά την ολοκλήρωση μιας ανάλυσης μεθόδου, ακολουθήστε την παρακάτω διαδικασία: Εκτελέστε έκπλυση του οργάνου με ένα ή περισσότερα διαλύματα καθαρισμού (π.χ. NaOH, ρυθμιστικό διάλυμα ή αποσταγμένο νερό) χρησιμοποιώντας τη μέθοδο System CIP. Εκκενώστε τον κλασματικό συλλέκτη. Καθαρίστε όλες τις διαρροές στο όργανο και στον πάγκο χρησιμοποιώντας ένα υγρό πανί. Αδειάστε το δοχείο αποβλήτων. Βεβαιωθείτε ότι το ηλεκτρόδιο ph είναι τοποθετημένο στο κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα. 126 Έναρξη ÄKTA avant AA

127 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Αποθήκευση συστήματος Εάν το όργανο δεν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί για διάστημα μερικών ημερών ή περισσότερο, εκτελέστε επίσης την παρακάτω διαδικασία: Πληρώστε το σύστημα και τις εισόδους με διάλυμα αποθήκευσης (π.χ. αιθανόλη 20%) χρησιμοποιώντας τη μέθοδο System CIP. Καθαρισμός στήλης Μετά την ολοκλήρωση μιας ανάλυσης μεθόδου, ακολουθήστε την παρακάτω διαδικασία: Καθαρίστε τη στήλη με ένα ή περισσότερα διαλύματα καθαρισμού χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Column CIP. Αποθήκευση στήλης Εάν η στήλη δεν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί για διάστημα μερικών ημερών ή περισσότερο, εκτελέστε επίσης την παρακάτω διαδικασία: Πληρώστε τη στήλη με διάλυμα αποθήκευσης (π.χ. αιθανόλη 20%) χρησιμοποιώντας τη μέθοδο Column CIP. Αποθήκευση ηλεκτροδίου ph Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την πλήρωση της κυψελίδας ροής ph με διάλυμα αποθήκευσης. Η λειτουργία βαθμονόμησης χρησιμοποιείται για τη μετακίνηση της βαλβίδας ph. Ωστόσο, δεν εκτελείται βαθμονόμηση. Έναρξη ÄKTA avant AA 127

128 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα System Control και επιλέξτε System:Calibrate. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Calibration Στο παράθυρο διαλόγου Calibration, επιλέξτε ph από την αναπτυσσόμενη λίστα Monitor to calibrate. Πιέστε. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα ph μεταβαίνει στη θέση βαθμονόμησης. Παρασκευάστε τουλάχιστον 10 ml διαλύματος αποθήκευσης αναμειγνύοντας ίσους όγκους ενός τυπικού ρυθμιστικού διαλύματος με ph 4 και ενός διαλύματος νιτρικού καλίου 1 M (KNO 3 ). Γεμίστε μια σύριγγα με περίπου 10 ml διαλύματος αποθήκευσης. Συνδέστε τη σύριγγα στη θύρα της βαλβίδας ph Cal και εκτελέστε έγχυση του διαλύματος αποθήκευσης. 128 Έναρξη ÄKTA avant AA

129 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Βήμα 6 Ενέργεια Πιέστε. Αποτέλεσμα: Η βαλβίδα ph επιστρέφει στην προεπιλεγμένη θέση και το παράθυρο διαλόγου Calibration κλείνει. Δεν εκτελείται βαθμονόμηση. Αποσύνδεση ή έξοδος από το UNICORN Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την αποσύνδεση ή την έξοδο από το UNICORN. Η διαδικασία αυτή μπορεί να εκτελεστεί από οποιαδήποτε μονάδα UNICORN. Για... Αποσύνδεση από το UNICORN τότε... Επιλέξτε File:Log off. Αποτέλεσμα: Κλείνουν όλες οι ανοικτές μονάδες του UNICORN και ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Log On. Έξοδο από το UNICORN Επιλέξτε File:Exit UNICORN. Αποτέλεσμα: Κλείνουν όλες οι ανοικτές μονάδες του UNICORN. Σημείωση: Εάν είναι ανοικτή μια μέθοδος ή ένα αποτέλεσμα που έχει υποστεί επεξεργασία και δεν έχει γίνει αποθήκευση, όταν επιχειρήσετε να κλείσετε ή να αποσυνδεθείτε από το UNICORN, θα εμφανιστεί μια προειδοποίηση. Κάντε κλικ στο Yes για αποθήκευση, στο No για έξοδο χωρίς αποθήκευση ή στο Cancel για διατήρηση της σύνδεσης. Έναρξη ÄKTA avant AA 129

130 7 Εκτέλεση μεθόδου 7.5 Διαδικασίες μετά την ανάλυση Τερματισμός λειτουργίας οργάνου Απενεργοποιήστε το όργανο μετακινώντας το διακόπτη Power στη θέση O. 130 Έναρξη ÄKTA avant AA

131 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων Πληροφορίες για το κεφάλαιο αυτό Το κεφάλαιο αυτό περιγράφει τον τρόπο χρήσης της μονάδας Evaluation για την αξιολόγηση και την εκτύπωση των αποτελεσμάτων μιας ανάλυσης. Για περαιτέρω πληροφορίες, ανατρέξτε στο UNICORN 6 Evaluation Manual. Στο παρόν κεφάλαιο Το κεφάλαιο αυτό περιλαμβάνει τις παρακάτω ενότητες: Ενότητα 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Βλ. σελίδα Έναρξη ÄKTA avant AA 131

132 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων Εισαγωγή Ένα αποτέλεσμα περιλαμβάνει ένα πλήρες αρχείο της ανάλυσης, συμπεριλαμβανομένης της μεθόδου, των ρυθμίσεων συστήματος, του χρωματογραφήματος και του αρχείου ημερολογίου ανάλυσης. Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο προβολής ενός αποτελέσματος και τον τρόπο μεταβολής των ρυθμίσεων προβολής στη μονάδα Evaluation. Άνοιγμα αποτελέσματος Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για το άνοιγμα ενός αποτελέσματος. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Evaluation και κάντε κλικ στο εικονίδιο Open Result Navigator. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το Result Navigator. 2 3 Επιλέξτε την καρτέλα Results. Επιλέξτε το αποτέλεσμα για άνοιγμα και κάντε κλικ στο κουμπί Open a Result στη γραμμή εργαλείων Navigator. Αποτέλεσμα: Το αποτέλεσμα ανοίγει σε ένα παράθυρο Chromatogram. Εμφανίζονται τα διαθέσιμα χρωματογραφήματα και οι πίνακες κορυφών. 132 Έναρξη ÄKTA avant AA

133 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων Εικόνα του παραθύρου Chromatogram Στο παράθυρο Chromatogram εμφανίζονται οι καμπύλες από την ανάλυση μεθόδου. Προσαρμογή του Chromatogram Για να αλλάξετε τις ιδιότητες του χρωματογραφήματος: Κάντε κλικ στο εικονίδιο Customize, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Customize. Επιλέξτε τα απαιτούμενα στοιχεία από τις καρτέλες που περιγράφονται στον παρακάτω πίνακα. Έναρξη ÄKTA avant AA 133

134 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων Καρτέλα Curves Curve style and color X-axis Y-axis Header Προσαρμογή Επιλέξτε τις καμπύλες που θα εμφανίζονται. Προσαρμόστε τον τρόπο παρουσίασης των εμφανιζόμενων καμπυλών. Επιλέξτε τη μονάδα βάσης (χρόνος, CV ή όγκος) και ρυθμίστε την κλίμακα του άξονα X. Επιλέξτε τους άξονες y που θα εμφανίζονται και ρυθμίστε την κλίμακα του άξονα Y για τις διάφορες καμπύλες. Επιλέξτε τις παραμέτρους (μεταβλητές, ερωτήσεις ή/και σημειώσεις) που θα εμφανίζονται στις πληροφορίες επικεφαλίδας στο επάνω μέρος του χρωματογραφήματος. Κάντε κλικ στο OK, για να αποθηκεύσετε τις αλλαγές και να κλείσετε το παράθυρο διαλόγου. Σημείωση: Με τη διαδικασία αυτή, καθορίζονται οι καμπύλες που θα εμφανίζονται και ο τρόπος παρουσίασης των καμπυλών στο παράθυρο Chromatogram και στις εκτυπώσεις. Οι καμπύλες αρχικών πρωτογενών δεδομένων δεν μπορούν να τροποποιηθούν ποτέ ούτε να καταργηθούν από το αποτέλεσμα. Προβολή λεπτομερειών στο Chromatogram Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την προβολή επιλεγμένων τμημάτων του χρωματογραφήματος. Για... Προσδιορισμό μιας καμπύλης Επιλογή της καμπύλης στην οποία θα αναφέρεται η κλίμακα του άξονα Y τότε... Τοποθετήστε το δείκτη του ποντικιού επάνω από την καμπύλη ενδιαφέροντος. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται το όνομα της καμπύλης. Κάντε κλικ στην καμπύλη ενδιαφέροντος. Αποτέλεσμα: Η κλίμακα του άξονα Y μετατρέπεται στη μονάδα που ισχύει για την καμπύλη. 134 Έναρξη ÄKTA avant AA

135 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.1 Προβολή αποτελεσμάτων Για... μεγέθυνση καμπυλών Εκ νέου σμίκρυνση τότε... Επιλέξτε την περιοχή ενδιαφέροντος μετακινώντας το δείκτη και κρατώντας πατημένο το αριστερό κουμπί του ποντικιού. Αποτέλεσμα: Η επιλεγμένη περιοχή μεγεθύνεται. Κάντε δεξιό κλικ με το ποντίκι και επιλέξτε Reset Zoom. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται ξανά η αρχική περιοχή. Προβολή τεκμηρίωσης Για να προβάλετε την τεκμηρίωση της ανάλυσης: Κάντε κλικ στο εικονίδιο View Documentation, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Documentation. Επιλέξτε την καρτέλα ενδιαφέροντος. Το ποιες καρτέλες εμφανίζονται εξαρτάται από τις ρυθμίσεις της ενεργής μεθόδου. Κάντε κλικ στο OK, για να κλείσετε το παράθυρο διαλόγου. Έναρξη ÄKTA avant AA 135

136 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών Εισαγωγή Η λειτουργία ολοκλήρωσης κορυφών χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό και τη μέτρηση των χαρακτηριστικών της καμπύλης, συμπεριλαμβανομένου του εμβαδού κορυφής, του χρόνου διατήρησης και του πλάτους κορυφής. Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο εκτέλεσης της λειτουργίας ολοκλήρωσης κορυφών χρησιμοποιώντας το λογισμικό UNICORN. Για περαιτέρω πληροφορίες σχετικά με την ολοκλήρωση κορυφών, ανατρέξτε στο UNICORN 6 Evaluation Manual. Εκτέλεση ολοκλήρωσης κορυφών Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την ολοκλήρωση των καμπυλών σε ένα αποτέλεσμα. Βήμα 1 2 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Evaluation και ένα αποτέλεσμα από το Result Navigator. Κάντε κλικ στο εικονίδιο Peak Integrate. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Peak Integrate. 136 Έναρξη ÄKTA avant AA

137 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών Βήμα 3 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Peak Integrate: Επιλέξτε την καμπύλη για ολοκλήρωση (π.χ. UV1_280 για πρωτεΐνες). Επιλέξτε έναν πίνακα κορυφών στόχου για αποθήκευση του αποτελέσματος. Επιλέξτε Calculate baseline από τη λίστα Baseline. Κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Το Peak Table εμφανίζεται κάτω από το ενεργό χρωματογράφημα, ενώ τα σημεία έναρξης και τέλους κάθε κορυφής επισημαίνονται από κατακόρυφες ενδείξεις στο χρωματογράφημα. Έναρξη ÄKTA avant AA 137

138 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών Εικόνα παραθύρων Chromatogram και Peak Table Στην παρακάτω εικόνα παρουσιάζεται το παράθυρο Chromatogram, συμπεριλαμβανομένου του Peak Table. Προσαρμογή του Peak Table Από προεπιλογή, κάθε κορυφή εμφανίζεται στο Peak Table σε συνδυασμό με το χρόνο διατήρησης, το εμβαδόν και το ύψος. Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την εμφάνιση άλλων δεδομένων κορυφής. Κάντε κλικ στο εικονίδιο Customize, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Customize. Στην καρτέλα Peak Table: 138 Έναρξη ÄKTA avant AA

139 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών - Επιλέξτε τα δεδομένα που θα εμφανίζονται στους πίνακες κορυφών από τη λίστα Select peak table columns. - Κάντε κλικ στο OK, για εμφάνιση των ρυθμίσεων και κλείσιμο του παραθύρου διαλόγου. Μελέτη χαρακτηριστικών κορυφών Οι κορυφές στο ολοκληρωμένο χρωματογράφημα επισημαίνονται αυτόματα με τις τιμές διατήρησής τους. Το Peak Table υπολογίζεται χρησιμοποιώντας την ίδια μονάδα βάσης (ml, CV ή min) που έχει επιλεγεί στο χρωματογράφημα. Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για τον εντοπισμό της κορυφής ενδιαφέροντος. Βήμα Ενέργεια Εντοπίστε την τιμή διατήρησης επάνω από μια κορυφή στο Chromatogram. Αναζητήστε το Peak Table για την ίδια τιμή διατήρησης. Στην ίδια σειρά, εντοπίστε την ιδιότητα ενδιαφέροντος (π.χ. Area). Έναρξη ÄKTA avant AA 139

140 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.2 Ολοκλήρωση κορυφών Αποθήκευση αποτελεσμάτων Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την αποθήκευση των αλλαγών σας. Για... Αποθήκευση των αλλαγών στο αρχικό αποτέλεσμα τότε... Κάντε κλικ στο εικονίδιο Save στη γραμμή εργαλείων. Αποθήκευση του τροποποιημένου αποτελέσματος ως νέο αποτέλεσμα Επιλέξτε File:Save As, για να ανοίξετε το παράθυρο διαλόγου Save Result As. Στο παράθυρο διαλόγου Save Result As: - Επιλέξτε θέση για το νέο αποτέλεσμα - Καταχωρίστε ένα όνομα για το νέο αποτέλεσμα - Κάντε κλικ στην επιλογή Save. 140 Έναρξη ÄKTA avant AA

141 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Εισαγωγή Η ενότητα αυτή περιγράφει τον τρόπο εκτύπωσης ενός χρωματογραφήματος και μιας αναφοράς τυπικής μορφής. Το UNICORN χρησιμοποιεί τους εκτυπωτές και τις ρυθμίσεις εκτυπωτών που είναι εγκατεστημένοι στον υπολογιστή σας. Προσαρμογή της προβολής Πριν από την εκτύπωση, βεβαιωθείτε ότι η προβολή έχει προσαρμοστεί, ώστε να εμφανίζονται τα απαιτούμενα στοιχεία στην αναφορά/εκτύπωση. Προσαρμόστε το χρωματογράφημα ή/και τον πίνακα κορυφών και εμφανίστε λεπτομέρειες στο χρωματογράφημα ανάλογα με τις παραπάνω οδηγίες. Πριν από την εκτύπωση, ελέγξτε εάν: Εμφανίζονται οι σωστές καμπύλες Εμφανίζονται τα σωστά δεδομένα στον πίνακα κορυφών Έχει επιλεγεί κατάλληλη κλίμακα για τους άξονες Έχει επιλεγεί κατάλληλος συντελεστής ζουμ Εκτύπωση χρωματογραφήματος και πίνακα κορυφών Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την εκτύπωση ενός χρωματογραφήματος και του σχετικού πίνακα κορυφών, εάν έχει εκτελεστεί ολοκλήρωση των κορυφών. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Evaluation και ένα αποτέλεσμα. Έναρξη ÄKTA avant AA 141

142 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Βήμα 2 Ενέργεια Κάντε κλικ στο εικονίδιο Print. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print Chromatograms. 3 Στο παράθυρο διαλόγου Print Chromatograms: Επιλέξτε Printer και Print Format. Κάντε κλικ στο κουμπί Preview. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται μια προεπισκόπηση του χρωματογραφήματος στο παράθυρο Customize Report. 4 Είστε ικανοποιημένοι με τη διάταξη; Εάν ναι, προχωρήστε στο βήμα 5. Εάν όχι, επιλέξτε File:Exit για να επιστρέψετε στο παράθυρο διαλόγου Print Chromatograms και να επιλέξετε μια άλλη μορφή εκτύπωσης. 142 Έναρξη ÄKTA avant AA

143 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Βήμα 5 Ενέργεια Στο παράθυρο Customize Report, κάντε κλικ στο εικονίδιο Print. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print. 6 Στο παράθυρο Print, επιλέξτε Printer από τη λίστα και κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Το χρωματογράφημα εκτυπώνεται. Εκτύπωση αναφοράς Ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες για την εκτύπωση μιας αναφοράς τυπικής μορφής. Βήμα 1 Ενέργεια Ανοίξτε τη μονάδα Evaluation και ένα αποτέλεσμα. Έναρξη ÄKTA avant AA 143

144 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Βήμα 2 Ενέργεια Κάντε κλικ στο εικονίδιο Report. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Generate Report. 3 Στο παράθυρο διαλόγου Generate Report: Επιλέξτε μια από τις προκαθορισμένες μορφές από τη λίστα. Κάντε κλικ στο κουμπί Preview. Αποτέλεσμα: Εμφανίζεται μια προεπισκόπηση της αναφοράς στο παράθυρο Customize Report. 4 Είστε ικανοποιημένοι με τη διάταξη; Εάν ναι, προχωρήστε στο βήμα 5. Εάν όχι, επιλέξτε File:Exit για να επιστρέψετε στο παράθυρο διαλόγου Generate Report και να επιλέξετε μια άλλη μορφή. 144 Έναρξη ÄKTA avant AA

145 8 Αξιολόγηση και εκτύπωση αποτελεσμάτων 8.3 Εκτύπωση αποτελεσμάτων Βήμα 5 Ενέργεια Στο παράθυρο διαλόγου Customize Report, κάντε κλικ στο εικονίδιο Print. Αποτέλεσμα: Ανοίγει το παράθυρο διαλόγου Print. 6 Στο παράθυρο Print, επιλέξτε Printer από τη λίστα και κάντε κλικ στο OK. Αποτέλεσμα: Η αναφορά εκτυπώνεται. Έναρξη ÄKTA avant AA 145