Κατάλληλη επεξεργασία FNA μαστού σε υγρή μορφή προς μικροσκόπιση

Transcript

1 ΤΕΙ ΑΘΗΝΑΣ ΣΧΟΛΗ ΕΠΑΓΓΕΛΜΑΤΩΝ ΥΓΕΙΑΣ ΚΑΙ ΠΡΟΝΟΙΑΣ ΤΜΗΜΑ ΙΑΤΡΙΚΩΝ ΕΡΓΑΣΗΡΙΩΝ Κατάλληλη επεξεργασία FNA μαστού σε υγρή μορφή προς μικροσκόπιση Εργαστήριο κυτταρολογικό στο ΓΝΑ ΛΑΙΚΟ Ιωάννα Χαραλάμπους Α.Μ Εξάμηνο: Πτυχίο Αθήνα 2014

2 Εισαγωγή Στο κυτταρολογικό εργαστήριο γίνεται η κατάλληλη επεξεργασία των παρακάτω κυρίως δειγμάτων ώστε να είναι κατάλληλα για μικροσκόπιση ώστε να γίνει η διάγνωση. Δείγματα Σε υγρή μορφή Επίχρισμα Ούρα FNA θυρεοειδούς Πτύελα FNA μαστού μαστού Κολποτραχηλικό θυρεοειδούς Βρογχικό έκπλυμα Βρογχοκυψελιδικό έκπλυμα Ασκιτικό υγρό Πλευριτικό υγρό Περιτοναικό υγρό

3 Η συγκεκριμένη εργασία έχει ως στόχο την παρουσίαση της κατάλληλης προετοιμασίας δείγματος υγρό κύστης μαστού με σκοπό την μικροσκόπιση και διάγνωσή του. Η επεξεργασία του δείγματος γίνεται με βαση τα παρακάτω στάδια: 1. Παραλαβή δείγματος Γίνεται η παραλαβή του δείγματος και αναγράφεται ο αριθμός πρωτοκόλλου. Στη συνέχεια γίνεται η μακροσκοπική εξέτση του υγρού (πχ χρώμα, παρουσία ιζήματος, θολερότητα) και η ποσοτικοποίηση Εικόνα 1: Υγρό κύστης μαστού, χρώμα καφέ, περίπου 20ml

4 2. Προετοιμασία δείγματος για φυγοκέντρηση Εικόνα 2: Σωληνάρια στα οποία αναγράφεται ο αριθμός πρωτοκόλλου και τοποθετείται το δείγμα με τη βοήθεια του πουάρ Εικόνα 3: το υγρό κύστης μαστού μέσα στα σωληνάρια, έτοιμα για φυγοκέντρηση

5 Εικόνα 4: φυγόκεντρος για 10 λεπτά στις 1750 στροφές 3. Προετοιμασία πλακιδίων για επίστρωση του υλικού Για το συγκεκριμένο υλικό απαιτούνται 4 πλακίδια τα οποία φτιάχνονται ανά 2 ζεύγη όμοια και από το καθέ ένα ζεύγος κρατάμε ένα για αρχείο σε περίπτωση που απαιτείται επανάλληψη. Στο 1 ζεύγος γίνεται μονιμοποίηση για να βαφτεί με την χρώση παπανικολάου και το άλλο στεγνώνει για να βαφτεί με χρώση Giemsa. Το ζεύγος πλακιδίων που πρόκειται να μονιμοποιηθεί απαιτείται η προσθήκη λευκώματος και η μονιμοποίηση γίνεται σε αιθανόλη 96 ο. Γίνεται η χάραξη των πλακιδίων και η αναγραφή με μούβι τον αριθμό πρωτοκόλλου και ποια προσδιορίζονται για μονιμοποίηση (ΜΟΝ) και ποια όχι (ΑΜΟ)

6 Εικόνα 5: Χάραξη των πλακιδίων με τον αριθμό πρωτοκόλλου με την βοήθεια του υαλογράφου και αναγραφή με μολύβι. Αναγραφή ποια πλακίδια θα χρησιμοποιηθούν για μονιμοποίηση και ποια όχι Εικόνα 6: Υαλογράφος

7 Εικόνα 7: Λεύκωμα Εικόνα 8: Προσθήκη μία σταγόνας λευκώματος στο ένα πλακίδιο για την δημιουργία του ενός ζεύγους πλακιδίων

8 Εικόνα 9: επίστρωση του λευκώματος πλάτη με πλάτη Εικόνα 10: έτοιμα πλακίδια με επιστρωμένο το λεύκωμα τα οποία θα χρησιμοποιηθούν για την χρώση παπανικολάου

9 4. Επίστρωση του δείγματος στα πλακίδια Εικόνα 11: Προσθήκη από μία σταγόνα δείγματος σε ένα πλακάκι από κάθε ζεύγος και επίστρωση πλάτη με πλάτη

10 Εικόνα 12: Τα πλακίδια που προορίζονται για την χρώση giemsa αφήνονται να ξεγνώσουν Εικόνα 13: τα πλακίδια που προορόζονται για χρώση παπανικολάου μονιμοποιούνται σε αιθανόλη 96 ο για 25 λεπτά

11 5. Χρώση παπανικολάου Η χρώση παπανικολάου γίνεται με τη βοήθεια του παρακάτω μηχανήματος ακολουθώντας τα παρακάτω βήματα: Εικόνα 14: Μηχάνημα που κάνει χρώση παπανικολάου Στάδια χρώσης i. 80 ο οινόπνευμα ii. 70 ο οινόπνευμα iii. 50 ο οινόπνευμα iv. Απεσταμένο νερό v. Αιματοξυλίνη vi. Νερό βρύσης vii. Απεσταγμενο νερό viii. Οξυνισμένο νερό ix. Απεσταγμενο νερό x. 50 ο οινόπνευμα xi. 70 ο οινόπνευμα xii. 70 ο οινόπνευμα xiii. 80 ο οινόπνευμα xiv. 90 ο οινόπνευμα xv. Χρωστική Orange

12 xvi. xvii. xviii. xix. xx. xxi. xxii. xxiii. xxiv. xxv. xxvi. 96 ο οινόπνευμα 96 ο οινόπνευμα Χρωστική ΕΑ50 96 ο οινόπνευμα 96 ο οινόπνευμα Απόλυτο οινόπνευμα Ξυλόλη και ασετόν Ξυλόλη Ξυλόλη Στέγνωμα Κάληψη 6. Χρώση Giemsa Η χρώση giemsa γίνεται στα αμονομοποίητα πλακίδια και απαιτείται η προετοιμασία της χρωστικής. Παρασκευή χρωστικής giemsa: Απαιτείται αραίωση της χρωστικής από το εμπόριο. Για 50ml χρωστικής που χρειαζόμαστε απαιτούνται 45ml απεσταγμένο νερό και 5ml χρωστική εμπορίου. i. Μεθανόλη 20 λεπτά ii. Ξέπλυμα με απεσταγμένο νερό iii. Χρωστική giemsa 3 λεπτά iv. Ξέπλυμα με απεσταγμένο νερό v. Στέγνωμα vi. Κάλυψη Στάδια Χρώσης

13 Εικόνα 15: Χρωστική giemsa 7. Κάλυψη πλακιδίων με καλυπτρίδα Εικόνα 16: Τοποθέτηση ξυλόλης

14 Εικόνα 17: Τοποθέτηση καλυπτρίδας