ÊåöÜëáéï 5. Áñ Ýò ìýôñçóçò. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

Transcript

1 ÊåöÜëáéï 5 Áñ Ýò ìýôñçóçò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

2 5.1 Åðéóêüðçóç ÅéóáãùãÞ Ïé áñ Ýò ìýôñçóçò ðïõ ðáñý ïíôáé óôï êåöüëáéï áõôü ðåñéëáìâüíïõí ìéá åðéóêüðçóç ôùí äéáöïñåôéêþí ôýðùí âáèìïíüìçóçò êáé ôùí ôå íéêþí áíüëõóçò ðïõ ñçóéìïðïéïýíôáé óôïí áíáëõôþ. ÐáñÝ ïíôáé åðßóçò ðáñáðïìðýò óå óõìðëçñùìáôéêýò ðëçñïöïñßåò ó åôéêü ìå ôç âáèìïíüìçóç êáé ôïí õðïëïãéóìü ôùí áðïôåëåóìüôùí. ÃåíéêÜ áñáêôçñéóôéêü ôïõ öùôïìýôñïõ Óôçí ðáñáêüôù åéêüíá öáßíåôáé ìéá ôïìþ ôïõ öùôïìýôñïõ. Φωτόµετρο Παράθυρα λουτρού επώασης Εξωτερικό Φακός Εσωτερικό Πηγή φωτός ÔïìÞ ôïõ öùôïìýôñïõ Υδροθάλαµος 5-2 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

3 5.1 Åðéóêüðçóç Ôï öùò áðü ôç ëõ íßá ôïõ öùôïìýôñïõ äéýñ åôáé äéáäï éêü äéáìýóïõ ôùí ðáñáêüôù: 1.Öáêüò 5.Íåñü ëïõôñïý áíôßäñáóçò 2.Åóùôåñéêü ðáñüèõñï ëïõôñïý 6.Åîùôåñéêü ðáñüèõñï åðþáóçò ëïõôñïý åðþáóçò 3.Íåñü ëïõôñïý áíôßäñáóçò 7.Öùôüìåôñï 4.Êõøåëßäá áíôßäñáóçò êáé ôï ðåñéå üìåíü ôçò ¼ôáí ç áêôßíá öùôüò åéóýñ åôáé óôï öùôüìåôñï, ðñïóðßðôåé óå Ýíá öñüãìá ðåñßèëáóçò, ôï ïðïßï äéá ùñßæåé ôï öùò óôá ìþêç êýìáôïò áðü ôá ïðïßá áðïôåëåßôáé êáé ôï áíáêëü óå ìéá óôáèåñþ äéüôáîç 12 öùôïáíé íåõôþí. ÊÜèå öùôïäßïäïò åßíáé óôáèåñü ôïðïèåôçìýíç þóôå íá áíé íåýåé ôï öùò óå äéáöïñåôéêü ìþêïò êýìáôïò. Ôï öùôüìåôñï äåí ðåñéý åé êéíïýìåíá ìýñç. ÌåôñÞóåéò áðïññüöçóçò ëáìâüíïíôáé êüèå öïñü ðïõ ìéá êõøåëßäá áíôßäñáóçò ðåñéóôñýöåôáé ìðñïóôü áðü ôï öùôüìåôñï. ¼ôáí ç êõøåëßäá áíôßäñáóçò ðåñíü äéáìýóïõ ôçò äéáäñïìþò öùôüò ôïõ öùôïìýôñïõ, ìåôñüôáé ç áðïññüöçóç óôá äýï ðñïãñáììáôéóìýíá ìþêç êýìáôïò ãéá êüèå ìåìïíùìýíç áíüëõóç. Ïé åíäåßîåéò áðü ôïõò ðñïãñáììáôéóìýíïõò êýêëïõò ìýôñçóçò Þ ôá óçìåßá ìýôñçóçò äéáâéâüæïíôáé óôïí õðïëïãéóôþ ãéá ôïí õðïëïãéóìü ôùí ôåëéêþí áðïôåëåóìüôùí. ÌåôñÞóåéò ìðïñïýí åðßóçò íá ëçöèïýí óå Ýíá ìüíï ìþêïò êýìáôïò (ìïíï ñùìáôéêþ ìýôñçóç). Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

4 5.1 Åðéóêüðçóç Ïé çìéêýò áíáëýóåéò ôçò Roche Diagnostics ñçóéìïðïéïýí ìåôñþóåéò óå äýï ìþêç êýìáôïò (äé ñùìáôéêýò) ãéá íá õðïëïãßóïõí ôá áðïôåëýóìáôá. Ôï ôåëéêü ðñïúüí ìéáò çìéêþò áíôßäñáóçò áðïññïöü ôç ìåãáëýôåñç ðïóüôçôá öùôüò óå Ýíá ðñùôåýïí ìþêïò êýìáôïò. Ùóôüóï, ñçóéìïðïéþíôáò ôç äéáöïñü ìåôáîý ôùí ìåôñþóåùí óå äýï ìþêç êýìáôïò (äé ñùìáôéêü óýóôçìá) åîáëåßöåôáé ç åðßäñáóç ôõ üí ñùìáôïìåôñéêþí áëëçëåðéäñüóåùí ðïõ åìöáíßæïíôáé ìåñéêýò öïñýò üôáí ñçóéìïðïéåßôáé Ýíá êáé ìüíï ìþêïò êýìáôïò (ìïíï ñùìáôéêü óýóôçìá). Ç äé ñùìáôéêþ áíüëõóç ñçóéìïðïéåß äýï ìþêç êýìáôïò: ôï Ýíá ìþêïò êýìáôïò âñßóêåôáé êïíôü óôç ìýãéóôç áðïññüöçóç ôïõ ñùìïãüíïõ ðïõ ðáñüãåôáé áðü ôçí áíôßäñáóç, åíþ óôï äåýôåñï ìþêïò êýìáôïò åìöáíßæåôáé ìéêñþ Þ êáé êáèüëïõ áðïññüöçóç ôïõ åðéèõìçôïý ñùìïãüíïõ. Ôõ üí áðïññüöçóç (A 2 ) ðïõ åìöáíßæåôáé, ëüãù ôçò áëëçëåðßäñáóçò ìå Üëëåò ïõóßåò óôï äåßãìá, ìåôñüôáé óôï äåõôåñåýïí ìþêïò êýìáôïò. Ôï ðïóü áõôü óôç óõíý åéá áöáéñåßôáé áðü ôçí ïëéêþ áðïññüöçóç (A 1 ) ðïõ åìöáíßæåôáé óôï êýñéï ìþêïò êýìáôïò, ðñïêåéìýíïõ íá åîá èåß ç êáèáñþ áðïññüöçóç (A C ), ç ïðïßá êáé äßíåôáé ãñáöéêü óôçí ðáñáêüôù åéêüíá: Äé ñùìáôéêþ áðïññüöçóç Ôá âýëôéóôá óçìåßá ìýôñçóçò ãéá êüèå åîýôáóç áðïôåëïýí ìýñïò ôùí ðáñáìýôñùí çìéêþò áíüëõóçò. ¼ëá ôá óçìåßá ìýôñçóçò ãéá ôéò çìéêýò áíáëýóåéò ôçò Roche Diagnostics ðåñéëáìâüíïíôáé óôéò ðáñáìýôñïõò çìéêþò áíüëõóçò. Ï êùäéêüò áíüëõóçò êáé ç ìýèïäïò âáèìïíüìçóçò ðïõ Ý ïõí ðñïãñáììáôéóôåß óôéò ðáñáìýôñïõò çìéêþò áíüëõóçò êáèïñßæïõí ôïí ôñüðï õðïëïãéóìïý ôùí ôåëéêþí áðïôåëåóìüôùí ãéá êüèå åîýôáóç. Ïé êùäéêïß áíáëýóåùí êáé ïé ìýèïäïé âáèìïíüìçóçò ðåñéãñüöïíôáé óôéò åðüìåíåò åíüôçôåò. 5-4 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

5 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò ÅéóáãùãÞ Óå áõôüí ôïí áíáëõôþ åêôåëïýíôáé äýï âáóéêïß ôýðïé öùôïìåôñéêþí áíáëýóåùí: áíáëýóåéò ôåëéêïý óçìåßïõ áíáëýóåéò êéíçôéêþò áíôßäñáóçò Ïé ìåôñþóåéò ëáìâüíïíôáé áðü ôï öùôüìåôñï óå óõãêåêñéìýíá óçìåßá ìýôñçóçò. ÅÜí ïé ìåôñþóåéò ëçöèïýí áöïý óôáìáôþóïõí ïé áíôéäñüóåéò (üôáí ïëïêëçñùèïýí), ç Ýíôáóç ôïõ ñþìáôïò (Þ ôçò èïëåñüôçôáò) ôïõ ðñïúüíôïò áðïôåëåß Ýíäåéîç ôçò óõãêýíôñùóçò ôïõ óõóôáôéêïý óôï äåßãìá. Ïé áíáëýóåéò áõôýò ïíïìüæïíôáé áíáëýóåéò ôåëéêïý óçìåßïõ. ÅÜí ïé ìåôñþóåéò ëáìâüíïíôáé åíüóù åîåëßóóåôáé ç áíôßäñáóç, ï ñõèìüò ìåôáâïëþò ôçò áíôßäñáóçò åßíáé áíüëïãïò ôçò óõãêýíôñùóçò Þ ôçò äñáóôéêüôçôáò ôïõ óõóôáôéêïý ðïõ áíáëýåôáé óôï äåßãìá. Ïé áíáëýóåéò áõôýò ïíïìüæïíôáé áíáëýóåéò êéíçôéêþò áíôßäñáóçò. Ï áíáëõôþò áõôüò ìðïñåß íá åêôåëýóåé åðßóçò êáé äéüöïñåò ðáñáëëáãýò áõôþí ôùí äýï ôå íéêþí, êáèþò êáé óõíäõáóìü ôïõò. ÅðéëïãÞ ôýðïõ áíüëõóçò êáé óçìåßùí ìýôñçóçò Ç ïèüíç Test Parameters ðñïâüëëåé ôïí ôýðï ôçò áíüëõóçò êáé ôá óçìåßá ìýôñçóçò ðïõ Ý ïõí åéóá èåß ãéá ìéá óõãêåêñéìýíç åîýôáóç. Ãéá íá ðñïâüëëåôå ôïí ôýðï áíüëõóçò Þ ôï óçìåßï ìýôñçóçò ãéá ìéá óõãêåêñéìýíç åîýôáóç, áêïëïõèþóôå ôá ðáñáêüôù âþìáôá: 1.Áðü ôçí ïèüíç Home, áããßîôå ôï Param.. 2.Áããßîôå ôï Test Param.. 3.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü êáíáëéïý ôçò åîýôáóçò ðïõ èýëåôå íá ðñïâüëëåôå óôï ðåäßï Channel No. Áããßîôå ôï. 4.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü ðáñáìýôñïõ, <2>, óôï ðåäßï Parameter No.Áããßîôå ôï. Ï ôýðïò ôçò áíüëõóçò ðñïâüëëåôáé äåîéü áðü ôï åéêïíßäéï Select. ÕðÜñ ïõí åðôü äéáöïñåôéêïß ôýðïé áíüëõóçò, óôïõò ïðïßïõò ðåñéëáìâüíïíôáé: 1-Point (1 óçìåßïõ) 1-Point & Rate (1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ áíôßäñáóç) 2-Point Rate (ÊéíçôéêÞ áíôßäñáóç 2 óçìåßùí) Rate-A (ÊéíçôéêÞ A) 2-Point End (Ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí) Rate-B (ÊéíçôéêÞ B) 3-Point (3 óçìåßùí) Ïé êùäéêïß áíüëõóçò 1-Point, 2-Point End êáé 3-Point áíôéóôïé ïýí óå áíáëýóåéò ôåëéêïý óçìåßïõ. Ïé êùäéêïß áíüëõóçò 2-Point Rate, Rate-A êáé Rate-B áíôéóôïé ïýí óå áíáëýóåéò êéíçôéêþò áíôßäñáóçò. Ï êùäéêüò áíüëõóçò 1-Point & Rate åßíáé Ýíáò óõíäõáóìüò ôýðùí áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ êáé êéíçôéêþò áíôßäñáóçò. 5.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü ðáñáìýôñïõ, <5>, óôï ðåäßï Parameter No.Áããßîôå ôï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò 1 ðñïâüëëåôáé óôï ðåäßï Contents. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

6 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò 6.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü ðáñáìýôñïõ, <6>, óôï ðåäßï Parameter No.Áããßîôå ôï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò 2 ðñïâüëëåôáé óôï ðåäßï Contents. 7.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü ðáñáìýôñïõ, <7>, óôï ðåäßï Parameter No.Áããßîôå ôï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò 3 ðñïâüëëåôáé óôï ðåäßï Contents. 8.ÅéóáãÜãåôå ôïí áñéèìü ðáñáìýôñïõ, <8>, óôï ðåäßï Parameter No.Áããßîôå ôï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò 4 ðñïâüëëåôáé óôï ðåäßï Contents. Ôá ðåäßá ðáñáìýôñùí 5-8, óçìåßï áíüëõóçò 1-4, ðñïâüëëïõí ôá åðéëåãìýíá óçìåßá ìýôñçóçò. ÁíáôñÝîôå óôï ÊåöÜëáéï 6 ôïõ Ïäçãïý Ëïãéóìéêïý ãéá ðñüóèåôåò ðëçñïöïñßåò ó åôéêü ìå ôïõò êùäéêïýò áíüëõóçò Þ ôá óçìåßá áíüëõóçò. Ïé õðüëïéðåò åíüôçôåò ôïõ êåöáëáßïõ áõôïý åîçãïýí ëåðôïìåñþò üëïõò ôïõò ôýðïõò áíüëõóçò. ÐáñÜäåéãìá áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ ÊÜðïéá áíôéäñáóôþñéá ôçò Roche Diagnostics ñçóéìïðïéïýí ôçí ôå íéêþ áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ. Óôç óõíý åéá áêïëïõèåß Ýíá ðáñüäåéãìá åéóáãùãþò óôïé åßùí ãéá ìéá çìéêþ áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ: Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÐáñÜäåéãìá åéóáãùãþò óôïé åßùí 2. Assay Code (Mthd) 2-Point End 4. Reaction time 3 5. Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point 4 0 Ç áíüëõóç áõôþ âáóßæåôáé óå ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ï üñïò 2-Point End (ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí) óçìáßíåé üôé ï áíáëõôþò äéáâüæåé ôçí áðïññüöçóç ôïõ ìßãìáôïò áíôßäñáóçò óå äýï óçìåßá. Ôï 1ï óçìåßï ìýôñçóçò áöáéñåßôáé áðü ôï äåýôåñï óçìåßï ìýôñçóçò ùò ôõöëü äåßãìá. ÔõðéêÜ, ôï áíôéäñáóôþñéï R1 åßíáé áäñáíýò êáé ôï R2 ðåñéý åé ôçí áíôéäñþóá ïõóßá. Ï ñüíïò ôçò áíôßäñáóçò åßíáé ôñßá ëåðôü. Ç áðïññüöçóç ôïõ ôõöëïý äåßãìáôïò (äåßãìá óõí ôï ðñþôï áíôéäñáóôþñéï) êáèïñßæåôáé áðü ôç ìýôñçóç ðïõ ëáìâüíåôáé óôç äéüñêåéá ôçò 5çò ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ áíôßäñáóçò. (ÁíáôñÝîôå óôï ÊåöÜëáéï 4, Áñ Ýò ìç áíéêþò ôïõ óõóôþìáôïò, ôïõ ïäçãïý áõôïý ãéá ìéá ðëþñç ðåñéãñáöþ ôùí ðåñéóôñïöþí ôïõ äßóêïõ áíôßäñáóçò.) Ç áðïññüöçóç ôïõ äåßãìáôïò óõí ôï ðñþôï êáé ôï äåýôåñï áíôéäñáóôþñéï êáèïñßæåôáé áðü ôç ìýôñçóç ðïõ ëáìâüíåôáé óôç äéüñêåéá ôçò 11çò ðåñéóôñïöþò. Ï áíáëõôþò åêôåëåß ðüíôïôå ôïõò ðñïóäéïñéóìïýò áðïññüöçóçò ôùí áíáëýóåùí ôåëéêïý óçìåßïõ åéò äéðëïýí. Ôá óçìåßá ìýôñçóçò óôï ðáñüäåéãìá áõôü ïñßæïíôáé ùò ðåñéóôñïöýò äßóêïõ 5 êáé 11. Óå êüèå ðåñßðôùóç, ëáìâüíåôáé äéðëþ ìýôñçóç óôçí ðñïçãïýìåíç ðåñéóôñïöþ ôïõ äßóêïõ. Ïé ìåôñþóåéò ôõöëïý äåßãìáôïò åêôåëïýíôáé óôç äéüñêåéá ôùí ðåñéóôñïöþí 4 êáé 5 ôïõ äßóêïõ. Ïé ôåëéêýò ìåôñþóåéò áðïññüöçóçò åêôåëïýíôáé óôç äéüñêåéá ôùí ðåñéóôñïöþí 10 êáé Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

7 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò ¼ôáí Ýíá äåßãìá Ý åé áñáéùèåß ìå áíôéäñáóôþñéï R1 êáé Ý åé ìåôñçèåß ùò ôõöëü, äåí ìðïñåß íá áöáéñåèåß áðü ôç ìýôñçóç ðïõ ëþöèçêå ìåôü ôçí ðñïóèþêç ôïõ áíôéäñáóôçñßïõ R2 êáé/þ ôïõ áíôéäñáóôçñßïõ R3, åêôüò êáé áí ëçöèåß õðüøç ìéá äéüñèùóç ãéá ôçí áñáßùóç (áðü ôçí ðñïóèþêç ôùí R2, R3): óõíôåëåóôþò áñáßùóçò = üãêïò äåßãìáôïò + üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ R1 üãêïò äåßãìáôïò + üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ R1 + üãêïò (R2, R3) Ïé ôéìýò áðïññüöçóçò ðïõ ñçóéìïðïéïýíôáé ãéá ôïõò õðïëïãéóìïýò óôï ðñïçãïýìåíï ðáñüäåéãìá ðïëëáðëáóéüæïíôáé ìå ôï óõíôåëåóôþ áñáßùóçò (d). ôóé: A 4 + A d ( 2 5) d = óõíôåëåóôþò áñáßùóçò A 4 = áðïññüöçóç óôçí ðåñéóôñïöþ 4 ôïõ äßóêïõ áíôßäñáóçò A 5 = áðïññüöçóç óôçí ðåñéóôñïöþ 5 ôïõ äßóêïõ áíôßäñáóçò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

8 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò ÁíáöïñÜ ìýôñçóçò ôõöëïý êõøåëßäáò (Cell Blank) Ç áðïññüöçóç áíôßäñáóçò óå ìéá êõøåëßäá ìåôñüôáé Ýíáíôé ôçò ôéìþò ôõöëïý ìå íåñü ôçò ßäéáò êõøåëßäáò. Ç ôéìþ ôõöëïý ìå íåñü åßíáé ç ìýóç áðïññüöçóç ôùí ôåóóüñùí ðåñéóôñïöþí ôçò êõøåëßäáò ìðñïóôü áðü ôï öùôüìåôñï, ðñïôïý ðñïóôåèåß äåßãìá óôçí êõøåëßäá. Ïé åêôõðùìýíåò ôéìýò ìýôñçóçò ôõöëïý êõøåëßäáò ãéá ôéò êõøåëßäåò 2 Ýùò 48 åßíáé ïé äéáöïñýò áðü ôçí ôéìþ ôçò êõøåëßäáò 1 êáé, áí ðñïóôåèïýí óôçí ôéìþ ôçò êõøåëßäáò 1, ïé ðñáãìáôéêýò ôïõò ôéìýò ìðïñïýí íá ðñïóäéïñéóôïýí óå ïðïéïäþðïôå ìþêïò êýìáôïò. ÁíáôñÝîôå óôçí åíüôçôá 7.10 ÌÝôñçóç ôõöëïý êõøåëßäáò ôïõ Ïäçãïý Ëïãéóìéêïý ãéá ëåðôïìåñåßò ðëçñïöïñßåò ó åôéêü ìå ôçí áíáöïñü Cell Blank (ÌÝôñçóç ôõöëïý êõøåëßäáò). Cell Blank Check 02/13/97 10:56 No NM SUB MAIN Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

9 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò Ðëçñïöïñßåò áíáöïñüò Ï ðáñáêüôù ðßíáêáò ðáñáèýôåé ôïõò ïñéóìïýò ãéá ôá óýìâïëá ðïõ ñçóéìïðïéïýíôáé óôéò åîéóþóåéò ãéá ôïí õðïëïãéóìü ôùí áðïôåëåóìüôùí. Äßíïíôáé ðáñáäåßãìáôá êáìðýëçò áíôßäñáóçò ãéá êüèå ôýðï áíüëõóçò. Ðåñéóóüôåñåò ëåðôïìýñåéåò ôüóï ãéá ôéò åîéóþóåéò õðïëïãéóìïý áðïôåëåóìüôùí üóï êáé ãéá ôéò êáìðýëåò áíôßäñáóçò ðáñáôßèåíôáé óôéò åíüôçôåò ðïõ åîçãïýí ùñéóôü êüèå ôýðï áíüëõóçò. Óõíôïìïãñáößåò, óýìâïëá êáé êùäéêïß ðïõ ñçóéìïðïéïýíôáé óôéò åîéóþóåéò A = áðïññüöçóç (åðßóçò Abs. Þ abs.) A b = áðïññüöçóç ôõöëïý A c = áðïññüöçóç ðñüôõðïõ A x = áðïññüöçóç áãíþóôïõ C1-C4 = ìåôñþóåéò ôõöëïý êõøåëßäùí 1, 2, 3 êáé 4 = ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ( A)/ëåðôü e = ìïñéáêþ áðïññïöçôéêüôçôá TV = ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò óå µl SV = üãêïò äåßãìáôïò óå µl Ê = ÓõíôåëåóôÞò (ÓõíôåëåóôÞò K) ðñïåðéëåãìýíïò Þ êáèïñéóìýíïò óôç âáèìïíüìçóç d = óõíôåëåóôþò áñáßùóçò C b = óõãêýíôñùóç Þ äñáóôéêüôçôá ôïõ ôõöëïý C c = óõãêýíôñùóç Þ äñáóôéêüôçôá ôïõ ðñüôõðïõ = óõãêýíôñùóç Þ äñáóôéêüôçôá ôïõ áãíþóôïõ mp = ðñïãñáììáôéóìýíï óçìåßï ìýôñçóçò áðïññüöçóçò áíôßäñáóç ôåëéêïý óçìåßïõ: mp 1 (ðñþôï óçìåßï), mp 2 (äåýôåñï óçìåßï) êéíçôéêþ áíôßäñáóç: mp áñ éêü Ýùò mp ôåëéêü R = áíôéäñáóôþñéï (R1: áíôéäñáóôþñéï Ýíá, R2: áíôéäñáóôþñéï äýï) S = áíüäåõóç b = äéáäñïìþ öùôüò óå cm. (óôïí 902 åßíáé 0,6, äéïñèùìýíç óå 1,0) IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ ãéá ôçí êëßóç (1,0) êáé ôçí ôåôáãìýíç (0) Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

10 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò Ïèüíç Calibration (Âáèìïíüìçóç) Ç ïèüíç Calibration ðñïâüëëåé ôéò ôñý ïõóåò ôéìýò âáèìïíüìçóçò. Ïé ôéìýò óôï ðåäßï S1Abs. áíôéóôïé ïýí óôï ôõöëü ôçò áíôßäñáóçò. Ïé ôéìýò áõôýò åßíáé ôéìýò áðïññüöçóçò X 10 4 êáé óôéò áíáëýóåéò êéíçôéêþò áíôßäñáóçò åßíáé ç ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôçò áíôßäñáóçò áíü ëåðôü. Ç ôéìþ S1Abs. åíçìåñþíåôáé ìå êüèå âáèìïíüìçóç. Áöáéñåßôáé áðü ôçí áðïññüöçóç áíôßäñáóçò üëùí ôùí Üëëùí äåéãìüôùí, óõìðåñéëáìâáíïìýíùí ôùí ðñüôõðùí äéáëõìüôùí 2-6, ôùí äéáëõìüôùí åëýã ïõ, êáèþò êáé ôùí åðåéãüíôùí äåéãìüôùí êáé ôùí äåéãìüôùí ñïõôßíáò. ÌåñéêÝò åîåôüóåéò âáèìïíïìïýíôáé óõíþèùò ìüíï ìå ôï S1Abs. êáé ñçóéìïðïéïýí ôéò ôéìýò K Þ ôïõò óõíôåëåóôýò K ðïõ ðñïêáèïñßæïíôáé êáôü ôçí åãêáôüóôáóç ôïõ áíáëõôþ. Ï óõíôåëåóôþò K ãéá ôéò åîåôüóåéò ðïõ ñçóéìïðïéïýí ôá ðñüôõðá 2-6 õðïëïãßæåôáé óôç äéüñêåéá ôçò âáèìïíüìçóçò. Ïé õðïëïãéæüìåíïé óõíôåëåóôýò K óôñïããõëïðïéïýíôáé êáé ðñïâüëëïíôáé ùò áêýñáéïé áñéèìïß óôçí ïèüíç Calibration. Ç èýóç ôçò õðïäéáóôïëþò óôïí óõíôåëåóôþ Ê ìéáò åîýôáóçò êáèïñßæåôáé áðü ôç èýóç ôçò õðïäéáóôïëþò óôçí ðñïãñáììáôéóìýíç ôéìþ ôçò óõãêýíôñùóçò ôõöëïý ôçò åîýôáóçò áõôþò (Ðñüôõðï 1), ç ïðïßá ðñïãñáììáôßæåôáé óôçí ïèüíç Test Parameters. Áõôü åðßóçò êáèïñßæåé ôç èýóç ôçò õðïäéáóôïëþò óôá õðïëïãéæüìåíá áðïôåëýóìáôá, üðùò öáßíåôáé óôïí ðáñáêüôù ðßíáêá: Óõãê. STD 1 K (Êáôá ùñçìýíïò) K (Õðïëïãéóìïß) ÁðïôÝëåóìá , ,3 5,1 0, ,28 5,13 Ïé äýï êýñéïé ôýðïé áíáëýóåùí ñçóéìïðïéïýí ôéò áêüëïõèåò åîéóþóåéò: ÁíôéäñÜóåéò ôåëéêïý óçìåßïõ = {[K (A x - A b ] IF A } + IF B ÊéíçôéêÝò ÁíôéäñÜóåéò = K ( A x - A b ] IF A } + IF B Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò Þ ôçò äñáóôéêüôçôáò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ( ) ñçóéìïðïéåß: A x = ç áðïññüöçóç ôçò áíôßäñáóçò ôïõ áãíþóôïõ Ê = ï óõíôåëåóôþò Ê ðïõ Ý åé ðñïêáèïñéóôåß Þ õðïëïãéóôåß A b = óõãêýíôñùóç ôõöëïý (Ðñüôõðï 1) C b = óõãêýíôñùóç Þ äñáóôéêüôçôá ôïõ ôõöëïý (Ðñüôõðï 1) A x = ìåôáâïëþ áíü ëåðôü óôçí áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ A b = ìåôáâïëþ áíü ëåðôü óôçí áðïññüöçóç ôïõ ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ ðïõ áíôéðñïóùðåýïõí ôçí êëßóç êáé ôçí ôåôáãìýíç 5-10 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

11 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò Ðñïãñáììáôéóìüò äåßãìáôïò ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ ùñßò ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò Ãéá ôï ðáñüäåéãìá áõôü ñçóéìïðïéïýíôáé ôá åîþò äåäïìýíá áðü ôçí ïèüíç Test Parameter: Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÐáñÜäåéãìá åéóáãùãþò óôïé åßùí 2. Assay code (Mthd) 1-Point End 5. Assay Point Wave Length (SUB) Wave Length (MAIN) Calib. Conc. 1 0 Ãéá ôï ðáñüäåéãìá áõôü ñçóéìïðïéïýíôáé ôá åîþò äåäïìýíá áðü ôçí ïèüíç Calibration: S1Abs = 386 Þ 0,0386 x 10 4 ÓõíôåëåóôÞò K = 792 Ïé áíáëýóåéò ôåëéêïý óçìåßïõ ðïõ äåí áðáéôïýí ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò ðñïãñáììáôßæïíôáé ãéá Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò (Amp 1 ). Ç áðïññüöçóç áíôßäñáóçò ðïõ ñçóéìïðïéåßôáé ãéá ôïí õðïëïãéóìü ôçò óõãêýíôñùóçò Þ ôçò äñáóôéêüôçôáò âáóßæåôáé óôç ìýóç ôéìþ ôçò áðïññüöçóçò óôï Ýíá ðñïãñáììáôéóìýíï óçìåßï ìýôñçóçò (Amp 1 ) êáé ôçò áðïññüöçóçò ðïõ ìåôñþèçêå óôç äéüñêåéá ôïõ áìýóùò ðñïçãïýìåíïõ êýêëïõ óôï ðñïãñáììáôéóìýíï óçìåßï ìýôñçóçò (Amp 1-1 ). (Amp 1 + Amp 1-1 ) 2 Áõôü ôï ðáñüäåéãìá åîýôáóçò åßíáé ìéá áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ åíüò óçìåßïõ, ðñïãñáììáôéóìýíç íá ëáìâüíåé åíäåßîåéò óôïí êýêëï 34. Ç ôåëéêþ áðïññüöçóç åßíáé ç ìýóç ôéìþ ôçò áðïññüöçóçò óôïí êýêëï 34 (2440) êáé ôçò áðïññüöçóçò óôïí êýêëï 33 (2438). ÅðïìÝíùò: (Amp 34 + Amp 34-1 ) = = Ç áðïññüöçóç ðïõ èá ñçóéìïðïéçèåß óôïõò õðïëïãéóìïýò (A x ) èá åßíáé: 0,2439 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

12 5.2 Ôå íéêýò áíüëõóçò Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ñçóéìïðïéþíôáò ôçí åîßóùóç ôçò áíôßäñáóçò ôåëéêïý óçìåßïõ: = {[K (A x - A b ] IF A } + IF B êáé ïé ðëçñïöïñßåò áðü ôçí ðñïçãïýìåíç óåëßäá: Ê = 792 A x = 0,2439 A b (Áðïññ. ôõöëïý) = 386 (0,0386 ãéá ôïõò õðïëïãéóìïýò) C b (ÓõãêÝíôñùóç ôõöëïý) = 0 IF A êáé IF B = 1 êáé 0 = {[792 (0,2439 0,0386) + 0] 1} + 0 = 162,6 Ôï áðïôýëåóìá óôñïããõëïðïéåßôáé óå 163 óôçí áíáöïñü, åðåéäþ ç óõãêýíôñùóç ôïõ ôõöëïý äåí ðåñéëáìâüíåé äåêáäéêü øçößá Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

13 5.3 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ íá áíôéäñáóôþñéï áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Mthd) 1-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point Assay Point Assay Point mp 1 35 Ç áíüëõóç êáëåßôáé åíüò óçìåßïõ (1-Point) äéüôé ëáìâüíåôáé ìüíï Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò (Þ åðáíáëçðôéêþ ìýôñçóç óôï mp 1 ) (êáé ìüíï Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò Ý åé êáèïñéóôåß óôéò ðáñáìýôñïõò åîýôáóçò, üðùò åîçãåßôáé ðáñáðüíù). Äåí áðáéôåßôáé ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, ìåôáîý 1çò êáé 35çò, åöüóïí Ý åé ðñïóôåèåß Ýíá áíôéäñáóôþñéï. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

14 5.3 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ íá áíôéäñáóôþñéï ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ñüíïò R1 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ñçóéìïðïéþíôáò áíôéäñáóôþñéï ðïõ ðñïóôýèçêå óôï ñüíï R1 öáßíåôáé óôçí åðüìåíç óåëßäá. Ç ðáñáêüôù åéêüíá äåß íåé ìéá áýîçóç óôçí áðïññüöçóç êáèþò ç áíôßäñáóç ðñï ùñü, ìå óõíåðáãüìåíç åìöüíéóç ôåëéêïý óçìåßïõ Þ êïñõöáßáò ôéìþò. Åßíáé åðßóçò ðéèáíüí íá åìöáíéóôåß ìåßùóç ôçò áðïññüöçóçò êáèþò ç áíôßäñáóç ðñï ùñü. Ç áíüðôõîç ñþìáôïò åßíáé áíüëïãç ðñïò ôç óõãêýíôñùóç ôçò áíáëõüìåíçò ïõóßáò, åüí ç ìýèïäïò âáèìïíüìçóçò åßíáé ãñáììéêþ. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ÁíôéäñáóôÞñéï óôï ñüíï R Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

15 5.3 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ íá áíôéäñáóôþñéï Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A x = Amp 1 + Amp A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 1-1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ ðñïçãïýìåíïõ êýêëïõ áðü ôï óçìåßï ìýôñçóçò 1 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1) C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1) IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

16 5.4 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ Äýï áíôéäñáóôþñéá áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Mthd) 1-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point Assay Point Assay Point mp 1 35 Ç áíüëõóç êáëåßôáé åíüò óçìåßïõ (1-Point) äéüôé ëáìâüíåôáé ìüíï Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò (Þ åðáíáëçðôéêþ ìýôñçóç óôï mp 1 ) (êáé ìüíï Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò Ý åé êáèïñéóôåß óôéò ðáñáìýôñïõò åîýôáóçò). Äåí áðáéôåßôáé ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, ìåôáîý 1çò êáé 35çò, åöüóïí Ý åé ðñïóôåèåß Ýíá áíôéäñáóôþñéï. Ç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, åöüóïí Ý åé ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï, üôáí ðñïóôßèåíôáé ðåñéóóüôåñá áðü Ýíá áíôéäñáóôþñéá. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

17 5.4 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ Äýï áíôéäñáóôþñéá ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ñüíïò R1 êáé R3 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R3 öáßíåôáé ðáñáêüôù. Ç åéêüíá äåß íåé ìéá áýîçóç óôçí áðïññüöçóç êáèþò ç áíôßäñáóç ðñï ùñü, ìå óõíåðáãüìåíç åìöüíéóç ôåëéêïý óçìåßïõ Þ êïñõöáßáò ôéìþò. Åßíáé åðßóçò ðéèáíüí íá åìöáíéóôåß ìåßùóç ôçò áðïññüöçóçò êáèþò ç áíôßäñáóç ðñï ùñü. Ç áíüðôõîç ñþìáôïò åßíáé áíüëïãç ôçò óõãêýíôñùóçò ôçò áíáëõüìåíçò ïõóßáò. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ÁíôéäñáóôÞñéï óôï ñüíï R1 êáé R3 Ðñïãñáììáôéóìüò äåßãìáôïò êáé õðïëïãéóìïß Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: Amp 1 + Amp 1-1 A x = 2 A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 1-1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ ðñïçãïýìåíïõ êýêëïõ áðü ôï óçìåßï ìýôñçóçò 1 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

18 5.4 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ Äýï áíôéäñáóôþñéá Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ðïõ áíôéðñïóùðåýïõí ôçí êëßóç (1) êáé ôçí ôåôáãìýíç (0) 5-18 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

19 5.5 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 1-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point Prz. Limit ôéìþ ïñßïõ ðñïæþíçò 52. Prz. Limit (U/D) üñéï ðñïæþíçò - áíþôåñï Þ êáôþôåñï 1 mp 1 35 Ç ðáñüìåôñïò 51 ðñïâüëëåé ôï üñéï ðñïæþíçò áðü Ýùò Ç ðáñüìåôñïò 52 ðñïâüëëåé ôï áðïôýëåóìá ôçò óýãêñéóçò ôçò ôéìþò ðñïæþíçò, áíþôåñï Þ êáôþôåñï. Ôï óçìåßï öùôïìåôñéêþò ìýôñçóçò ôçò ðñïæþíçò åßíáé ôï óçìåßï mp 2. Ç áíüëõóç êáëåßôáé åíüò óçìåßïõ (1-Point) äéüôé ëáìâüíåôáé ìüíï Ýíá óçìåßï ìýôñçóçò (Þ åðáíáëçðôéêþ ìýôñçóç óôï óçìåßï mp 1 ). Äåí áðáéôåßôáé ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, ìåôáîý 1çò êáé 35çò, åöüóïí Ý åé ðñïóôåèåß Ýíá áíôéäñáóôþñéï. Ç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, åöüóïí Ý åé ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï, üôáí ðñïóôßèåíôáé ðåñéóóüôåñá áðü Ýíá áíôéäñáóôþñéá. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

20 5.5 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò ÐáñáêÜôù äßíåôáé ç ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò. Ç åéêüíá ðáñïõóéüæåé ìéá áýîçóç óôçí áðïññüöçóç êáèþò ðñï ùñü ç áíôßäñáóç. Åßíáé åðßóçò ðéèáíüí íá åìöáíéóôåß ìåßùóç ôçò áðïññüöçóçò êáèþò ç áíôßäñáóç ðñï ùñü. Ôï áíôéäñáóôþñéï R3 ìðïñåß íá åßíáé áíôéãüíï Þ áíôßóùìá óå ìéá áíïóïëïãéêþ áíüëõóç. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Ðñïãñáììáôéóìüò äåßãìáôïò êáé õðïëïãéóìïß áðïôåëåóìüôùí Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: Amp 1 + Amp A x = A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 1-1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ ðñïçãïýìåíïõ êýêëïõ áðü ôï óçìåßï ìýôñçóçò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

21 5.5 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ðñïãñáììáôéóìüò äåßãìáôïò êáé õðïëïãéóìïß ôéìþò åëýã ïõ ðñïæþíçò Ï õðïëïãéóìüò ôçò ôéìþò åëýã ïõ ðñïæþíçò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: PC = (Amp 2 + Amp 2-1 ) - d (Amp 1 + Amp 1-1 ) 2 2 d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 PC = ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 2 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

22 5.5 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò ÅéóáãùãÞ ïñßïõ Óýãêñéóç ÕðïëïãéóìÝíç ÁðïôÝëåóìá åðéóþìáíóçò ðñïæþíçò ðñïæþíçò ôéìþ ðñïæþíçò äåäïìýíùí X Êáôþôåñï Ìéêñüôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò äåí ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé åìöáíßæåôáé ï óõíáãåñìüò äåäïìýíùí ðñïæþíçò (Prozone). Ç ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò åêôõðþíåôáé óôçí áíáöïñü áðïôåëåóìüôùí ôïõ áóèåíïýò ìáæß ìå ôçí åðéóþìáíóç äåäïìýíùí. X Êáôþôåñï Ìåãáëýôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé äåí åêôõðþíåôáé ôéìþ åëýã ïõ Þ óõíáãåñìüò. X Áíþôåñï Ìåãáëýôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò äåí ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé åìöáíßæåôáé ï óõíáãåñìüò äåäïìýíùí ðñïæþíçò (Prozone). Ç ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò åêôõðþíåôáé óôçí áíáöïñü áðïôåëåóìüôùí ôïõ áóèåíïýò ìáæß ìå ôçí åðéóþìáíóç äåäïìýíùí. X Áíþôåñï Ìéêñüôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé äåí åêôõðþíåôáé ôéìþ åëýã ïõ Þ óõíáãåñìüò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

23 5.6 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 2-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point mp 1 35 Ç áíüëõóç êáëåßôáé 2 óçìåßùí (2-Point) åðåéäþ ëáìâüíïíôáé ìåôñþóåéò óå äýï óçìåßá ìýôñçóçò, mp 1 êáé mp 2 (ôõöëü êáé ôåëéêü), ôá ïðïßá êáèïñßæïíôáé óôéò ðáñáìýôñïõò åîýôáóçò. ÅðéôñÝðåé ôçí ðñïóèþêç äýï Þ ðåñéóóïôýñùí áíôéäñáóôçñßùí. Ìðïñåß íá ãßíåé ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ç ðñþôç ìýôñçóç áðïññüöçóçò (mp 1 ) ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, ðñïôïý ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò (mp 2 ) âñßóêåôáé óôï ôåëéêü óçìåßï ôçò áíôßäñáóçò ìåôü ôçí ðñïóèþêç ôïõ ôåëéêïý áíôéäñáóôçñßïõ. Ç äåýôåñç ìýôñçóç áðïññüöçóçò (mp 2 ) ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, áöïý ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

24 5.6 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ñüíïò R1 êáé R2 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R2 öáßíåôáé ðáñáêüôù. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R2 Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A x = ( ) ( ) Amp 2 + Amp 2-1 d Amp 1 + Amp d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 2 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

25 5.6 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò A b = áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

26 5.7 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 2-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point 3 mp 3 8. Assay Point 4 mp Prz. Limit ôéìþ ïñßïõ ðñïæþíçò 52. Prz. Limit (U/D) üñéï ðñïæþíçò - áíþôåñï Þ êáôþôåñï 53. Prz. (End Point) öùôïìåôñéêü óçìåßï ìýôñçóçò ðñïæþíçò, mp 2 1 mp 1 < mp 3 < mp 4 35, mp 4 ' 35 Ç ðáñüìåôñïò 51 ðñïâüëëåé ôï üñéï ðñïæþíçò áðü Ýùò Ç ðáñüìåôñïò 52 ðñïâüëëåé ôï áðïôýëåóìá ôçò óýãêñéóçò ôçò ôéìþò ðñïæþíçò, áíþôåñï Þ êáôþôåñï. Ç ðáñüìåôñïò 53 ðñïâüëëåé ôï óçìåßï öùôïìåôñéêþò ìýôñçóçò ðñïæþíçò. Áõôü ìðïñåß íá åßíáé ôï ßäéï ìå ôï óçìåßï mp 2. H áíüëõóç êáëåßôáé 2 óçìåßùí (2-Point) åðåéäþ ëáìâüíïíôáé ìåôñþóåéò óå äýï óçìåßá ìýôñçóçò, mp 1 êáé mp 2 (ôõöëü êáé ôåëéêü). ÅðéôñÝðåé ôçí ðñïóèþêç äýï Þ ðåñéóóïôýñùí áíôéäñáóôçñßùí. Ìðïñåß íá ãßíåé ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ç ðñþôç ìýôñçóç áðïññüöçóçò (mp 1 ) ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, ðñïôïý ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï. Ôï óçìåßï ìýôñçóçò (mp 2 ) âñßóêåôáé óôï ôåëéêü óçìåßï ôçò áíôßäñáóçò ìåôü ôçí ðñïóèþêç ôïõ ôåëéêïý áíôéäñáóôçñßïõ. Ç äåýôåñç ìýôñçóç áðïññüöçóçò (mp 2 ) ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, áöïý ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

27 5.7 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò äßíåôáé óôç óõíý åéá. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

28 5.7 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A x = (Amp 2 + Amp 2-1 ) - d (Amp 1 + Amp 1-1 ) 2 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 1 Amp 2 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 2 d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò A b = áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

29 5.7 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò Ðñïãñáììáôéóìüò äåßãìáôïò êáé õðïëïãéóìïß ôéìþò åëýã ïõ ðñïæþíçò Ï õðïëïãéóìüò ôçò ôéìþò åëýã ïõ ðñïæþíçò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: PC = Amp 2 mp 3 x 100 Amp 4 mp 3 Amp 2' mp 3 = Amp 2' - Amp 3 mp 2' - mp 3 Amp 4' mp 3 = Amp 4 - Amp 3 mp 4 - mp 3 PC = ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò Amp 2' mp 3 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò, ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 2' êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 3 Amp 4' mp 3 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò, ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 4 êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 3 mp 2' = Óçìåßï ìýôñçóçò åëýã ïõ ðñïæþíçò. ÅÜí åéóá èåß ôï 0, ôüôå ôï mp 2 ñçóéìïðïéåßôáé óôïí õðïëïãéóìü Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

30 5.7 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ìå Ýëåã ï ðñïæþíçò ÅéóáãùãÞ ïñßïõ Óýãêñéóç ÕðïëïãéóìÝíç ÁðïôÝëåóìá åðéóþìáíóçò ðñïæþíçò ðñïæþíçò ôéìþ ðñïæþíçò äåäïìýíùí X Êáôþôåñï Ìéêñüôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò äåí ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé åìöáíßæåôáé ï óõíáãåñìüò äåäïìýíùí ðñïæþíçò (Prozone). Ç ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò åêôõðþíåôáé óôçí áíáöïñü áðïôåëåóìüôùí ôïõ áóèåíïýò ìáæß ìå ôçí åðéóþìáíóç äåäïìýíùí. X Êáôþôåñï Ìåãáëýôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé äåí åêôõðþíåôáé ôéìþ åëýã ïõ Þ óõíáãåñìüò. X Áíþôåñï Ìåãáëýôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò äåí ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé åìöáíßæåôáé ï óõíáãåñìüò äåäïìýíùí ðñïæþíçò (Prozone). Ç ôéìþ åëýã ïõ ðñïæþíçò åêôõðþíåôáé óôçí áíáöïñü áðïôåëåóìüôùí ôïõ áóèåíïýò ìáæß ìå ôçí åðéóþìáíóç äåäïìýíùí. X Áíþôåñï Ìéêñüôåñç ôïõ X Ï Ýëåã ïò ðñïæþíçò ãßíåôáé áðïäåêôüò êáé äåí åêôõðþíåôáé ôéìþ åëýã ïõ Þ óõíáãåñìüò Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

31 5.8 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Ç áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí ñçóéìïðïéåßôáé ãéá ôçí åêôýëåóç äýï äéáöïñåôéêþí åîåôüóåùí, ìéáò 1 óçìåßïõ (åîýôáóç 1) êáé ìéáò 2 óçìåßùí (åîýôáóç 2) óå ìßá êõøåëßäá áíôßäñáóçò. mp 1 = ôï ìüíï óçìåßï ìýôñçóçò ãéá ôçí åîýôáóç 1 (áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ åíüò óçìåßïõ) mp 3 - mp 2 = áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 2 óçìåßùí ãéá ôçí åîýôáóç 2 ìå ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò (ôåëéêü) - (ôõöëü) ÅîÝôáóç 1: Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 3-Point 3. Assay Code (Test) åéóáãüãåôå ôïí áñéèìü êáíáëéïý ôçò åîýôáóçò B 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point Assay Point Assay Point 4 0 ÅîÝôáóç 2: Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 3-Point 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point mp 1 mp 2 mp 3 35 Ôï ðñþôï áíôéäñáóôþñéï ìðïñåß íá óõììåôý åé Þ íá ìç óõììåôý åé óôç äåýôåñç áíôßäñáóç. (Ôï ðñþôï áíôéäñáóôþñéï ìðïñåß íá äñá ìüíïí ùò áñáéùôéêü äéüëõìá ãéá ôç äåýôåñç áíôßäñáóç ôåëéêïý óçìåßïõ). Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

32 5.8 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R3 öáßíåôáé ðáñáêüôù. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R3 Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôçò ìýóçò ôéìþò áðïññüöçóçò äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: ÅîÝôáóç 1: A XA = Amp 1 + Amp A XA = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 1 Amp 1 = áðïññüöçóç óôï óçìåßï mp 1 Amp 1-1 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ ðñïçãïýìåíïõ êýêëïõ áðü ôï óçìåßï mp Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

33 5.8 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 3 óçìåßùí Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A XA - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò (åîýôáóç 1) A XA = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ï õðïëïãéóìüò ôçò áðïññüöçóçò óôï ðáñüäåéãìá ôçò åîýôáóçò 2 ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A XB = ( Amp 3 + Amp 3-1 ) d ( Amp 2 + Amp 2-1 ) 2 2 d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 A XB = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 2 Amp 2 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 2 Amp 3 = áðïññüöçóç óôç ìýôñçóç ôïõ óçìåßïõ 3 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A XB - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò (åîýôáóç 2) A XB = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

34 5.9 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Ç áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ ñçóéìïðïéåßôáé ãéá ôçí åêôýëåóç äýï äéáöïñåôéêþí åîåôüóåùí êáé äýï äéáöïñåôéêþí ôýðùí åîåôüóåùí óå ìßá êõøåëßäá áíôßäñáóçò. Ç ðñþôç åîýôáóç åßíáé ìéá áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ, åíþ ç äåýôåñç åîýôáóç åßíáé ìéá êéíçôéêþ áíüëõóç ìå ôõöëü äåßãìáôïò. Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 1-Point & rate 3. Assay Code (Test) åéóáãüãåôå ôïí áñéèìü êáíáëéïý ôçò åîýôáóçò B 4. Assay Point ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 3 6. Assay Point Assay Point Assay Point 4 0 ÅîÝôáóç 2: Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 1-Point & rate 4. Assay Point ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point 3 mp 4 8. Assay Point 4 mp 5 1 mp 1 mp 3 < mp 4 < mp 5 35 mp 2+2 < mp 3, mp 4+2 < mp 5 Ôõöëü êéíçôéêþò áíüëõóçò = Abs (mp 1, mp 2 ) ÔåëéêÞ áíôßäñáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò (A) = Abs (mp 4, mp 5 ) Ðáñáêïëïõèïýíôáé ç ãñáììéêüôçôá êáé ç åîüíôëçóç õðïóôñþìáôïò ôçò êéíçôéêþò áíüëõóçò Á. Óçìåßï ìýôñçóçò ôåëéêïý óçìåßïõ = mp 3 = ÁðïôÝëåóìá åîýôáóçò 1 = Amp 3 + Amp 3-1 mp 3 = ôï ìüíï óçìåßï ìýôñçóçò ãéá ôçí åîýôáóç 1 (áíüëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ) Abs mp 5, mp 4 - Abs mp 2, mp 1 = ÊéíçôéêÞ áíüëõóç ìå ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò ãéá (ôåëéêþ) (ôõöëü) ôçí åîýôáóç Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

35 5.9 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ ñüíïò R1 êáé R3 Ìéá ãñáöéêþ áíáðáñüóôáóç ìéáò áíüëõóçò ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R3 öáßíåôáé ðáñáêüôù. ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ ÁíôéäñáóôÞñéá óå ñüíï R1 êáé R3 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K (A XA - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò (åîýôáóç 1) A XA = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò A b = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

36 5.9 ÁíÜëõóç ôåëéêïý óçìåßïõ 1 óçìåßïõ êáé êéíçôéêþ Ï õðïëïãéóìüò ôçò áðïññüöçóçò óôçí åîýôáóç 2 ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A XB = Amp 4 mp 5 - d( Amp 1 mp 2 ) d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 A XB = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 2 Amp 1 mp 2 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò, ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 1 êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 2 Amp 4 mp 5 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò, ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 4 êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 5 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ï õðïëïãéóìüò ôïõ ãéá ôçí åîýôáóç 2 ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K ( A XB - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò (åîýôáóç 2) A XB = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò óôï Amp 4 mp 5 - d( Amp 1 mp 2 ) A b = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ ôõöëïý óôï Amp 1 mp 2 C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

37 5.10 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) 2-Point Rate 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point mp 1 35 Ìéá êéíçôéêþ áíüëõóç ìåôñü ôçí áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò. Ç áíüëõóç êáëåßôáé 2 óçìåßùí (2-Point) åðåéäþ ëáìâüíïíôáé ìåôñþóåéò óå äýï óçìåßá ìýôñçóçò (Þ åðáíáëçðôéêýò ìåôñþóåéò óôá óçìåßá mp 1 êáé mp 2 ), ôá ïðïßá ðñïãñáììáôßæïíôáé óôçí ïèüíç Application, üðùò åîçãåßôáé ðáñáðüíù. Ç ðñþôç ìýôñçóç áðïññüöçóçò ãéá áõôüí ôïí ôýðï áíüëõóçò ìðïñåß íá ëçöèåß êáôü ôç äéüñêåéá ïðïéáóäþðïôå ðåñéóôñïöþò ôïõ äßóêïõ, áöïý ðñïóôåèåß ôï ôåëéêü áíôéäñáóôþñéï. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Abs/ëåðôü áðü ôï óçìåßï mp 1 Ýùò ôï óçìåßï mp 2. Ðáñáêïëïõèåßôáé ç åîüíôëçóç õðïóôñþìáôïò áëëü ü é êáé ç ãñáììéêüôçôá. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

38 5.10 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò 2 óçìåßùí ñüíïò R1 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò 2 óçìåßùí ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéï ðïõ ðñïóôýèçêå óôï ñüíï R1 äßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Όριο απορρόφησης Τυφλό Χρόνος ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí ÁíôéäñáóôÞñéï óôï ñüíï R Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

39 5.10 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò 2 óçìåßùí ñüíïò R1 êáé R2 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò 2 óçìåßùí ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R2 öáßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Τυφλό Χρόνος ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R2 Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôïõ A x ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: A x = Amp ( 2 + Amp 2-1 Amp ) ( 1 + Amp 1-1 ) 2 2. t A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò Amp 1 = áðïññüöçóç óôï óçìåßï mp 1 Amp 2 = áðïññüöçóç óôï óçìåßï mp 2 t = ñüíïò óå ëåðôü ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 1 êáé mp 2 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

40 5.10 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç 2 óçìåßùí Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K ( A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò, ùò áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò A b = ìýóç áðïññüöçóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý, ùò áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

41 5.11 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç A áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) Rate A 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point mp 1 35, mp Ìðïñåß íá ãßíåé ðñïóèþêç åíüò Þ ðåñéóóïôýñùí áíôéäñáóôçñßùí. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ðáñáêïëïõèåßôáé ç åîüíôëçóç õðïóôñþìáôïò êáé ç ãñáììéêüôçôá (äåßôå ôï ÊåöÜëáéï 8 ôïõ ïäçãïý áõôïý). ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò A ñüíïò R1 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò Á ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéï ðïõ ðñïóôýèçêå óôï ñüíï R1 äßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Όριο απορρόφησης Τυφλό ÊéíçôéêÞ áíüëõóç Á - ÁíôéäñáóôÞñéï óôï ñüíï R1 Χρόνος Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

42 5.11 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç A ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò Á ñüíïò R1 êáé R2 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò Á ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí ñüíï R1 êáé R2 äßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Όριο απορρόφησης Τυφλό Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Χρόνος ÊéíçôéêÞ áíüëõóç Á ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò ìåôáâïëþò óôçí áðïññüöçóç áíü ëåðôü ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç áíôßäñáóç: A X = Amp 1 mp 2 A X = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ Amp 1 mp 2 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 1 êáé mp 2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K ( A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìåôñçèåßóá áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò A b = ìåôñçèåßóá áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ ðñïôýðïõ 1/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

43 5.12 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç A ìå ôõöëü äåßãìáôïò áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò ìå ôõöëü äåßãìáôïò Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) Rate A 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point 3 mp 3 8. Assay Point 4 mp 4 1 mp 3 < mp 4 < mp 1 35, mp < mp 4 Ìðïñåß íá ãßíåé ðñïóèþêç åíüò Þ ðåñéóóïôýñùí áíôéäñáóôçñßùí. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Ï ñõèìüò ìåôáâïëþò ôçò áðïññüöçóçò áíü ëåðôü õðïëïãßæåôáé ìå ôç ìýèïäï ôùí åëá ßóôùí ôåôñáãþíùí. Ðáñáêïëïõèåßôáé ç åîüíôëçóç õðïóôñþìáôïò êáé ç ãñáììéêüôçôá (äåßôå ôï ÊåöÜëáéï 8 ôïõ ïäçãïý áõôïý). ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò Á ìå ôõöëü äåßãìáôïò ñüíïò R1 êáé R2 Þ R3 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò Á ðïõ ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R3 äßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Τυφλό Όριο απορρόφησης Χρόνος ÊéíçôéêÞ áíüëõóç Á ìå ôõöëü äåßãìáôïò ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R3 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

44 5.12 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç A ìå ôõöëü äåßãìáôïò Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò Ï õðïëïãéóìüò ôçò ìåôáâïëþò óôçí áðïññüöçóç áíü ëåðôü ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç áíôßäñáóç: A X = Amp 1 mp 2 - d Amp 3 mp 4 d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 A X = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Amp 3 mp 4 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 3 êáé mp 4 Amp 1 mp 2 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 1 êáé mp 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò åíüò áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç: = [{K ( A x - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò A x = ìåôñçèåßóá áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò A b = ìåôñçèåßóá áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ ðñïôýðïõ 1/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

45 5.13 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç  Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1 áñáêôçñéóôéêü áíüëõóçò Ôáõôü ñïíç áíüëõóç äýï åîåôüóåùí ìå êéíçôéêþ áíüëõóç. ñçóéìïðïéåßôáé ãéá ôçí åêôýëåóç äýï äéáöïñåôéêþí êéíçôéêþí áíôéäñüóåùí óôçí ßäéá êõøåëßäá áíôßäñáóçò. Åßíáé äéáèýóéìç áíôéóôüèìéóç ôõöëïý äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 2. Ç åîýôáóç 1 êáé ç åîýôáóç 2 Ý ïõí ðáíïìïéüôõðá ìþêç êýìáôïò. Ç áíôéóôüèìéóç ôõöëïý äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 2 óôïí ôñüðï ëåéôïõñãßáò 1 (Mode 1) óõìâáßíåé ìüíïí üôáí ôá ìþêç êýìáôïò åßíáé ðáíïìïéüôõðá ãéá ôéò äýï åîåôüóåéò. ÅîÝôáóç 1: Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) Rate-B 3. Assay Code (Test) áñéèìüò êáíáëéïý ôçò åîýôáóçò B 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 1 6. Assay Point 2 mp 2 7. Assay Point Assay Point mp 1 < mp 3 < mp 4 35 mp 1+2, mp 3+2 < mp 4 ÅîÝôáóç 2: Óôïé åßá ðïõ åéóüãïíôáé óôçí ïèüíç Test Parameters Áñéèìüò ðáñáìýôñïõ ÅéóáãùãÞ óôïé åßùí ðáñáìýôñùí 2. Assay Code (Ìthd) Rate-B 4. Reaction time ñüíïò áíôßäñáóçò óå ëåðôü 5. Assay Point 1 mp 3 6. Assay Point 2 mp 4 7. Assay Point Assay Point mp 1 < mp 3 < mp 4 35 mp 1 + 2, mp < mp 4 Óôç äéüñêåéá ôïõ ðñþôïõ ìéóïý ôçò åðþáóçò, ìåôñüôáé ç åîýôáóç 1. Óôç äéüñêåéá ôïõ ôåëåõôáßïõ ìéóïý ôçò åðþáóçò, ìåôñüôáé ç åîýôáóç 2. Ðáñáêïëïõèïýíôáé ç ãñáììéêüôçôá êáé ç åîüíôëçóç õðïóôñþìáôïò. Ï ñõèìüò ìåôáâïëþò ôçò áðïññüöçóçò õðïëïãßæåôáé ìå ôç ìýèïäï ôùí åëá ßóôùí ôåôñáãþíùí. Ï ïëéêüò üãêïò áíôßäñáóçò ðñýðåé íá âñßóêåôáé ìåôáîý 250 êáé 500 µl. Abs mp 3, mp 4 - d Abs mp 1, mp 2 ãéá ìýôñçóç ôõöëïý äåßãìáôïò. Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç

46 5.13 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç  Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1 ÃñáöéêÞ ðáñüóôáóç êéíçôéêþò áíüëõóçò  Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1 ñüíïò R1 êáé R3 Ìéá ãñáöéêþ ðáñüóôáóç ìéáò êéíçôéêþò áíüëõóçò Â-Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1, ç ïðïßá ñçóéìïðïéåß áíôéäñáóôþñéá ðïõ ðñïóôýèçêáí óôï ñüíï R1 êáé R3 öáßíåôáé ðáñáêüôù. Απορρόφηση Τυφλό Εξέταση Α Εξέταση Β Όριο απορρόφησης Εξέτ. Α Όριο απορρόφησης Εξέτ. Β Χρόνος ÊéíçôéêÞ áíüëõóç  Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1 ÁíôéäñáóôÞñéá óôï ñüíï R1 êáé R3 Õðïëïãéóìïß äåßãìáôïò ÅîÝôáóç 1: A XA = Amp 1 mp 2 A XA = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 1 Amp 1 mp 2 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 1 êáé mp 2 Ï õðïëïãéóìüò ôçò áíü ëåðôü ìåôáâïëþò ôçò áðïññüöçóçò üôáí ïé åîåôüóåéò 1 êáé 2 ìåôñþíôáé óå äéáöïñåôéêü ìþêç êýìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôéò áêüëïõèåò åîéóþóåéò: 5-46 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç 1.1

47 5.13 ÊéíçôéêÞ áíüëõóç  Ôñüðïò ëåéôïõñãßáò 1 ÅîÝôáóç 2: A XB = Amp 3 mp 4 A XB = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãéá ôçí åîýôáóç 2 Amp 3 mp 4 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôùí óçìåßùí mp 3 êáé mp 4 Ï õðïëïãéóìüò ôçò óõãêýíôñùóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò ãßíåôáé ìå âüóç ôçí áêüëïõèç åîßóùóç, áíåîáñôþôùò åüí ïé åîåôüóåéò 1 êáé 2 ñçóéìïðïéïýí ôï ßäéï Þ äéáöïñåôéêü ìþêç êýìáôïò: = [{K ( A XA - A b = óõãêýíôñùóç ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò Ê = óõíôåëåóôþò âáèìïíüìçóçò (åîýôáóç 1) A XA = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò A b = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ ðñïôýðïõ 1/ôõöëïý C b = óõãêýíôñùóç ôïõ ðñïôýðïõ 1 (STD1)/ôõöëïý IF A, IF B = óôáèåñýò ôïõ áíáëõôþ, ãéá êëßóç ßóç ìå 1 êáé ôåôáãìýíç ßóç ìå 0 Ï õðïëïãéóìüò ôçò áðïññüöçóçò óôï ðáñüäåéãìá ôçò åîýôáóçò 2, üôáí ôá ìþêç êýìáôïò åßíáé ðáíïìïéüôõðá ìå åêåßíá ôçò åîýôáóçò 1, ãßíåôáé ìå âüóç ôéò áêüëïõèåò åîéóþóåéò: ÅîÝôáóç 2: A XB = Amp 3 mp 4 - d ( Amp 1 mp 2 ) d = SV + RV 1 SV + RV 1 + RV 2 A XB = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ôïõ áãíþóôïõ äåßãìáôïò áóèåíïýò ãéá ôçí åîýôáóç 2 Amp 3 mp 4 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 3 êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 4 Amp 1 mp 2 = áíü ëåðôü ìåôáâïëþ ôçò áðïññüöçóçò ìåôáîý ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 1 êáé ôïõ óçìåßïõ ìýôñçóçò 2 d = óõíôåëåóôþò äéüñèùóçò üãêïõ õãñïý (óõíôåëåóôþò áñáßùóçò) SV = üãêïò äåßãìáôïò RV 1 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 1 RV 2 = üãêïò áíôéäñáóôçñßïõ 2 Ïäçãüò áíáöïñüò ôïõ áíáëõôþ Hitachi 902 ôçò Roche Diagnostics, êäïóç