Τα αυξηµένα επίπεδα του microrna-146a υποστηρίζουν το σηµαντικό ρόλο του οξειδωτικού στρες κατά την αρχική φάση του εµφράγµατος του µυοκαρδίου

Transcript

1 Τα αυξηµένα επίπεδα του microrna-146a υποστηρίζουν το σηµαντικό ρόλο του οξειδωτικού στρες κατά την αρχική φάση του εµφράγµατος του µυοκαρδίου Μέτρηση του microrna - 208α για τη διάγνωση του εµφράγµατος του µυοκαρδίου σε ασθενείς που παρουσιάζουν πόνο στο στήθος Γ. Ζακυνθινός, Ε. Οικονό>ου, Κ. Μουρούζης, Σ. Τσουρούλας, Γ. Σιάσος, Μ. Γαζούλη, Γ. Βογιατζή, Σ. Τσαλα>ανδρής, Σ. Μάζαρης, Α. ΠαIα>ικρούλης, Σ. ΠαIαϊωάννου, Μ. Βαβουρανάκης,. Τούσουλης ΕΘΝΙΚΟ ΚΑΙ ΚΑΠΟ ΙΣΤΡΙΑΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝ/Ν ΙΑΤΡΙΚΗ ΣΧΟΛΗ Α ΚΑΡ ΙΟΛΟΓΙΚΗ ΚΛΙΝΙΚΗ ΚΑΙ ΟΜ/ΝΥΜΟ (Α' ΚΑΡ ΙΟΛΟΓΙΚΟ ΑΙΜΟ ΥΝΑΜΙΚΟ) ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΙΕΥΘΥΝΤΗΣ: Καθηγητής ΗΜΗΤΡΙΟΣ ΤΟΥΣΟΥΛΗΣ

2 ΕΙΣΑΓUΓΗ Το οξύ στεφανιαίο σύνδρο>ο (ΟΣΣ) είναι η κύρια αιτία νοσηρότητας και θνησι>ότητας Iαγκοσ>ίως. Η γρήγορη και σίγουρη διάγνωσή του είναι ουσιώδης λόγω της καλύτερης Iρόγνωσης Iου έχουν οι ασθενείς >ετά την εφαρ>ογή Iαρε>βατικών τεχνικών. Αυτή τη στιγ>ή η διάγνωση του ΟΣΣ βασίζεται στην αύξηση των (υψηλής ευαισθησίας) καρδιακών τροiονινών I ή T (ctni ή ctnt) σε συνδυασ>ό >ε κλινικά, ηλεκτροκαρδιογραφικά και αiεικονιστικά ευρή>ατα. Ο διαχωρισ>ός >εταξύ των κλινικών >ορφών του οξέος στεφανιαίου συνδρό>ου έχει ά>εση ση>ασία στην Iρόγνωση του ασθενούς εiειδή αφενός η έκταση της βλάβης είναι διαφορετική και αφετέρου είναι διαφορετική η θεραiευτική στρατηγική Iου IρέIει να ακολουθηθεί

3 Τα mirna είναι >ικρά (κατά >έσο όρο 22 νουκλεοτίδια) >η κωδικοiοιού>ενα ριβονουκλεινικά οξέα τα οiοία βρίσκονται στα ευκαρυωτικά κύτταρα η>ιουργούν δεσ>ούς >ε συ>iληρω>ατικές αλληλουχίες στα αγγελιαφόρα RNA (mrna) στόχους, ενθαρρύνοντας την ολική αiοδό>ησή τους ή αναστέλλοντας τη >ετάφραση των συγκεκρι>ένων τ>η>άτων τους ΥIολογίζεται εiίσης ότι το ανθρώiινο γονιδίω>α κωδικοiοιεί IερίIου 1000 mirna εκ των οiοίων τα 721 αiό αυτά έχουν ήδη αναγνωριστεί στο ανθρώiινο αί>α. Τα micro RNA (mirna) τα τελευταία χρόνια έχει αiοδειχτεί ότι είναι αiό τους κύριους βιολογικούς ρυθ>ιστές της έκφρασης των Iρωτεϊνών οiοιουδήiοτε κυττάρου.

4

5 Πολλές έρευνες έχουν δείξει τις αλλαγές του φάσ>ατος των κυκλοφορούντων mirna σε διάφορες Iαθολογικές καταστάσεις ή ασθένειες. Συγκεκρι>ένα έχουν δείξει την >εταβολή των mirna στον διαβήτη, σε διάφορα είδη καρκίνου, στην καρδιακή ανάiτυξη και ο>οιόσταση, αλλά και ειδικότερα σε κλασσικές καρδιολογικές ασθένειες όiως η στεφανιαία νόσος και τα ΟΣΣ η κοιλιακή υiερτροφία,η καρδιακή ανεiάρκεια και η οξεία ιογενής >υοκαρδίτιδα

6 Θεραπευτικές δυνατότητες µέσω της ρύθµισης των microrna σε διάφορες παθήσεις Mir-494,mir-210, mir-133,mir-24(+/-), mir21(+/-) Myocardial Infarction Heart Failure Mir-1,mir-320, mir-92a, mir24(+/-),mir-21(+/-) mir-1, mir-29b Stroke mir-208a, mir-199b, mir-195, mir-21(+/-) mir-200a, mir-200b, mir-429 T h e r a p y b y i n h i b it i o n ( e g. a n t a g r e g u l a ti o n ( e g. mir-27b m i c Diabetes Arrhytmias r o - R N A mir-497, mir-298, mir-292, mir-15a? m i m i c s ) mir-320, mir-96, mir-9, mir-34a, mir-375?

7 Τα mirna 208a και 146a είναι δυο αiό τα mirnas Iου Iροέρχονται αiοκλειστικά αiό τα κύτταρα του >υοκαρδίου Gilad.S. et al 2008 Hsu, S. D. et al 2008

8 ΣΚΟΠΟΣ Μελέτη της Iαθοφυσιολογικής και διαγνωστικής ση>ασίας των κυκλοφορούντων mirna 208a και 146a στα οξέα στεφανιαία σύνδρο>α (ΟΣΣ)

9 ΜΕΘΟΔΟΙ Μελετήθηκαν ασθενείς Iου Iροσήλθαν διαδοχικά στο Τ>ή>α ΕIειγόντων Περιστατικών λόγω θωρακικού άλγους διάρκειας >ικρότερης των 10 ωρών. ΑIό αυτούς 10 είχαν οξύ έ>φραγ>α του >υοκαρδίου >ε ανάσiαση του ST(STEMI), 10 ασθενείς είχαν οξύ έ>φραγ>α του >υοκαρδίου χωρίς ανάσiαση του ST(NSTEMI), 10 ασθενείς είχαν ασταθή στηθάγχη(ua) και 14 είχαν θωρακικό άλγος άλλης αιτιολογίας. Κριτήρια Α(οκλεισ.ού Ασθενείς >ε οξείες ή χρόνιες φλεγ>ονώδεις νόσους. Ασθενείς >ε νεοiλασ>ατικές νόσους. Ασθενείς >ε νεφρική ή ηiατική ανεiάρκεια. Ασθενείς Iου Iροσήλθαν >ετά αiό την Iάροδο 10 ωρών αiό την έναρξη συ>iτω>άτων υiόiτων για οξύ στεφανιαίο σύνδρο>ο.

10 Πραγ>ατοIοιήθηκε αι>οληψία για τον Iροσδιορισ>ό των κυκλοφορούντων mirna 208a και 146a καθώς και των εiιiέδων της υψηλής ευαισθησίας τροiονίνης Ι (hstni): 1)Κατά την εισαγωγή 2) 12 ώρες >ετά

11 Τα δείγ>ατα αiό τις αι>οληψίες φυγοκεντρήθηκαν σε λιγότερο αiό 30 λεiτά αiό την λήψη της αι>οληψίας και το υiερκεί>ενο αiοθηκεύτηκε σε θερ>οκρασία -80C σε >ικρά κρυοφυαλίδια. O Iροσδιορισ>ός των εiιiέδων των >ελετώ>ενων mirna 208a και 146a στη συνέχεια Iραγ>ατοIοιήθηκε >ε τη χρήση Real Time- PCR (RT-PCR). Χρησι>οIοιήθηκαν >η Iαρα>ετρικές >έθοδοι σύγκρισης των αiοτελεσ>άτων. Για τη σύγκριση δυο ανεξάρτητων ο>άδων χρησι>οiοιήθηκε το Mann-Whitney test, ενώ για τη σύγκριση >εταβλητών δυο εξαρτη>ένων ο>άδων χρησι>οiοιήθηκε το Wilcoxon test.τα αiοτελέσ>ατα Iαρουσιάζονται σαν median (25% - 75%).

12 ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ mirna 146a

13 mirna 208a

14 Ενώ 3 αiό τους 10 ασθενείς (30%) >ε STEMI είχαν κατά την Iρώτη >έτρηση τι>ές hstni εντός των φυσιολογικών ορίων, οι ασθενείς αυτοί είχαν ση>αντικά αυξη>ένη την τι>ή του mirna 208a κατά 4,6 (3,2-5,6) φορές.

15 ΣΥΖΗΤΗΣΗ-ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ (I) ΕIειδή το mirna 146a είναι αυξη>ένο σε όλα τα ΟΣΣ, φαίνεται ότι είναι δείκτης ισχαι>ίας και οξειδωτικού στρές. Παρουσιάζει >άλιστα και Iοσοτική διαβάθ>ιση αφού είναι υψηλότερο στο STEMI Iου ανα>ένεται να έχει Iερισσότερη ισχαι>ία και οξειδωτικό στρές σχετικά >ε τις άλλες δυο καταστάσεις των ΟΣΣ. εν φαίνεται να είναι δείκτης >υοκαρδιακής νέκρωσης εiειδή οι τι>ές του στην Iρώτη >έτρηση είναι Iαρό>οιες στο NSTEMI και στη UA.

16 ΣΥΖΗΤΗΣΗ-ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ (II) ΕIειδή το mirna 208a είναι αυξη>ένο στο STEMI ενώ δεν είναι στην UA, φαίνεται να είναι δείκτης >υοκαρδιακής νέκρωσης. Το γεγονός ότι το mirna 208a ήταν αυξη>ένο στο 30% των ασθενών >ας >ε STEMI Iου είχαν τι>ές hstni εντός των φυσιολογικών ορίων κατά την εισαγωγή στο νοσοκο>είο ση>αίνει ότι αiοτελεί Iιθανό βιοδείκτη καρδιακής νέκρωσης Iρωι>ότερο της hstni.