Estradiol. For use on IMMULITE 2000 systems

Estradiol For use on IMMULITE 2000 systems

IMMULITE 2000 Estradiol English Intended Use: For in vitro diagnostic use with the IMMULITE 2000 Systems Analyzers for the quantitative measurement of estradiol (estradiol-17β, E2) in serum, as an aid in the differential diagnosis of amenorrhea, and monitoring of ovulation induction with and without stimulation in assisted reproductive technology (ART). Catalog Number: L2KE22 (200 tests), L2KE26 (600 tests) Test Code: E2 Color: Dark Pink Summary and Explanation Estradiol is a steroid hormone with a molecular mass of 272.3 daltons which circulates predominantly protein-bound. In addition to estradiol, other natural steroidal estrogens include estrone, estriol and their conjugates. Estrogens are hormones secreted principally by the ovarian follicles and also by the adrenals, corpus luteum, placenta and, in males, by the testes. Estrogenic hormones are secreted at varying rates during the menstrual cycle throughout the period of ovarian activity. The gonadotropins of the anterior pituitary regulate secretion of the ovarian hormones, estradiol and progesterone; hypothalamic control of pituitary gonadotropin production is in turn regulated by plasma concentrations of the estrogens and progesterone. This complex feedback system results in the cyclic phenomenon of ovulation and menstruation. During pregnancy, the placenta becomes the main source of estrogens. At the menopause, ovarian secretion of estrogens declines at varying rates. Principle of the Procedure IMMULITE 2000 Estradiol is a solid-phase, enzyme-labeled chemiluminescent competitive immunoassay. The solid phase (bead) is coated with polyclonal rabbit anti-estradiol antibody. The liquid phase consists of alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to estradiol. The patient sample and the reagent are incubated together with the coated bead for 60 minutes. During this time, estradiol in the sample competes with enzyme conjugated estradiol in the reagent for a limited number of antibody binding sites on the bead. Unbound patient sample and enzyme conjugate are then removed by centrifugal washes. Finally, chemiluminescent substrate is added to the reaction tube containing the bead and the signal is generated in proportion to the bound enzyme. Incubation Cycles: 1 60 minutes Time to First Result: 65 minutes Specimen Collection Lipemia may interfere with the assay. An ultracentrifuge is recommended to clear lipemic samples. Hemolyzed samples may indicate mistreatment of a specimen before receipt by the laboratory; hence the results should be interpreted with caution. Centrifuging serum samples before a complete clot forms may result in the presence of fibrin. To prevent erroneous results due to the presence of fibrin, ensure that complete clot formation has taken place prior to centrifugation of samples. Some samples, particularly those from patients receiving anticoagulant therapy, may require increased clotting time. Blood collection tubes from different manufacturers may yield differing values, depending on materials and additives, including gel or physical barriers, clot activators and/or anticoagulants. IMMULITE 2000 Estradiol has not been tested with all possible variations of tube types. Consult the section on Alternate Sample Types for details on tubes that have been tested. Volume Required: 25 µl serum Storage: 2 days at 2 8 C, or 2 months at 20 C. 18 2 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Dilution: It is recommended that patient samples yielding results greater than 1200 pg/ml be diluted and reassayed. A clinically relevant result is obtained without dilution but the most accurate value is obtained when tested on the sensitive portion of the curve. Warnings and Precautions For in vitro diagnostic use. Reagents: Store at 2 8 C. Dispose of in accordance with applicable laws. Follow universal precautions, and handle all components as if capable of transmitting infectious agents. Source materials derived from human blood were tested and found nonreactive for syphilis; for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitis B surface antigen; and for antibodies to hepatitis C. Sodium azide, at concentrations less than 0.1 g/dl, has been added as a preservative. On disposal, flush with large volumes of water to prevent the buildup of potentially explosive metal azides in lead and copper plumbing. Chemiluminescent Substrate: Avoid contamination and exposure to direct sunlight. (See insert.) Water: Use distilled or deionized water. Materials Supplied Components are a matched set. Labels on the inside box are needed for the assay. Estradiol Bead Pack (L2E212) With barcode. 200 beads, coated with polyclonal rabbit anti-estradiol. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KE22: 1 pack L2KE26: 3 packs Estradiol Reagent Wedge (L2E2A2) With barcode. 11.5 ml alkaline phosphatase (bovine calf intestine) conjugated to estradiol, in buffer with preservative. Stable at 2 8 C until expiration date. L2KE22: 1 wedge L2KE26: 3 wedges Before use, tear off the top of the label at the perforations, without damaging the barcode. Remove the foil seal from the top of wedge; snap the sliding cover down into the ramps on the reagent lid. Estradiol Adjustors (LE2L, LE2H) Two vials (Low and High), 2 ml each, of estradiol in processed human serum, with preservative. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2KE22: 1 set L2KE26: 2 sets Before running adjustors, place the appropriate Aliquot Labels (supplied with the kit) on test tubes, so that the barcodes can be read by the on-board reader. Kit Components Supplied Separately Estradiol Sample Diluent (L2E2Z) For the on-board dilution of patient samples. One vial containing 25 ml of concentrated (ready-to-use) processed human serum (with preservative) containing undetectable to low levels of estradiol. Stable at 2 8 C for 30 days after opening, or for 6 months (aliquotted) at 20 C. L2E2Z: 25 ml Barcode labels are provided for use with the diluent. Before use, place an appropriate label on a 16 100 mm test tube, so that the barcodes can be read by the on-board reader. L2E2Z: 3 labels L2SUBM: Chemiluminescent Substrate L2PWSM: Probe Wash L2KPM: Probe Cleaning Kit LRXT: Reaction Tubes (disposable) L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes (16 100 mm) L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps E2TC: Estradiol Control (single level) Also Required Distilled or deionized water; test tubes; controls Assay Procedure Note that for optimal performance, it is important to perform all routine maintenance procedures as defined in the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual. See the IMMULITE 2000 Systems Operator's Manual for preparation, setup, dilutions, adjustment, assay and quality control procedures. IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 3

Recommended Adjustment Interval: 2 weeks Quality Control Samples: Follow government regulations or accreditation requirements for quality control frequency. Use controls or serum pools with at least two levels (low and high) of estradiol. Siemens Healthcare Diagnostics recommends the use of commercially available quality control materials with at least 2 levels (low and high). A satisfactory level of performance is achieved when the analyte values obtained are within the Acceptable Control Range for the system, or within an established range determined by an appropriate internal laboratory quality control scheme. Expected Values Based on its relationship to IMMULITE Estradiol (see Method Comparison), the assay can be expected to have essentially the same reference ranges. Reference ranges were generated using IMMULITE Estradiol in a multi-national study involving women in apparent good health (age: 16 44 years), who volunteered to have blood samples drawn, on a daily basis, throughout one complete ovulatory cycle. (See Menstrual Cycle Graph. ) Estradiol, pg/ml Ovulatory Cycles n* Median Central 95% Follicular Phase 54 (708) 42 ND 160 Follicular Phase, 54 (108) 31 ND 84 Days 2 to 3 Periovulatory, 54 (378) 133 34 400 3 days Luteal Phase 54 (604) 93 27 246 *Number of subjects (total number of results) Estradiol, pmol/l Ovulatory Cycles n* Median Central 95% Follicular Phase 54 (708) 154 ND 587 Follicular Phase, 54 (108) 114 ND 308 Days 2 to 3 Periovulatory, 54 (378) 489 124 1468 3 days Luteal Phase 54 (604) 343 101 905 *Number of subjects (total number of results) Another study performed with IMMULITE Estradiol yielded the following results. Estradiol, pg/ml Group n 90% Mean Median Range Adult males 50 30.5 29.7 ND 56 Adult females: Untreated 27 ND ND ND 30 Postmenopausal Treated 27 ND ND ND 93 Postmenopausal Oral Contraceptives 61 35.2 24.5 ND 102 ND: not detectable Estradiol, pmol/l Group n 90% Mean Median Range Adult males 50 112 109 ND 206 Adult females: Untreated 27 ND ND ND 110 Postmenopausal Treated 27 ND ND ND 341 Postmenopausal Oral Contraceptives 61 129 90 ND 374 ND: not detectable Consider these limits as guidelines only. Each laboratory should establish its own reference ranges. Limitations Pregnancy Samples: Exercise caution when assaying pregnancy samples, since estriol levels may be high enough to interfere. Neonatal Samples: The assay has not been validated for use on neonatal samples. Crossreacting steroids, including estriol, circulating at high concentrations during this period may cause spuriously elevated results. Heterophilic antibodies in human serum can react with the immunoglobulins included in the assay components causing interference with in vitro immunoassays. [See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Samples from patients routinely exposed to animals or animal serum products can demonstrate this type of 4 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

interference potentially causing an anomalous result. These reagents have been formulated to minimize the risk of interference; however, potential interactions between rare sera and test components can occur. For diagnostic purposes, the results obtained from this assay should always be used in combination with the clinical examination, patient medical history, and other findings. Performance Data See Tables and Graphs for data representative of the assay's performance. Results are expressed in pg/ml. (Unless otherwise noted, all were generated on serum samples collected in tubes without gel barriers or clot-promoting additives.) Conversion Factor: pg/ml 3.671 pmol/l Reportable Range: 20 to 2000 pg/ml (73 7342 pmol/l) The assay is traceable to an internal standard manufactured using qualified materials and measurement procedures. Analytical Sensitivity: 15 pg/ml (55 pmol/l) Precision: Samples were assayed in duplicate over the course of 20 days, two runs per day, for a total of 40 runs and 80 replicates. (See "Precision" table.) Precision Profile: In a series of studies involving 10 kit lots, samples spanning the working range were assayed in 10 or 20 replicates per run. (See "Precision Profile" graph.) Linearity: Samples were assayed under various dilutions. (See "Linearity" table for representative data.) Recovery: Samples spiked 1 to 19 with three estradiol solutions (800, 1440 and 4020 pg/ml) were assayed. (See "Recovery" table for representative data.) Specificity: The antiserum was generated with estradiol derivative at 6- position, and is highly specific for estradiol. (See "Specificity" table.) Bilirubin: Presence of bilirubin in concentrations up to 200 mg/l has no effect on results, within the precision of the assay. Hemolysis: Presence of packed red blood cells in concentrations up to 30 µl/ml has no effect on results, within the precision of the assay. Lipemia: Presence of triglycerides in concentrations up to 3000 mg/dl may interfere with the assay. (See "Lipemia" table.) Alternate Sample Type: To assess the effect of alternate sample types, blood was collected from 33 volunteers into plain, heparinized, and Becton Dickinson SST Vacutainer tubes. Equal volumes of the matched samples were spiked with various concentrations of estradiol, to obtain values throughout the calibration range of the assay, and then assayed by the IMMULITE 2000 Estradiol procedure. (Heparin) = 0.98 (Serum) + 11 pg/ml r = 0.996 (SST) = 0.98 (Plain Tubes) + 15 pg/ml r = 0.994 Means: 476 pg/ml (Serum) 477 pg/ml (Heparin) 482 pg/ml (SST) Method Comparison: The assay was compared to IMMULITE Estradiol on 97 samples. (Concentration range: approximately 20 to 1800 pg/ml. See graph.) By linear regression: (IML 2000) = 0.90 (IML) + 18 pg/ml r = 0.990 Means: 337 pg/ml (IMMULITE 2000) 354 pg/ml (IMMULITE) References 1) Batzer F. Hormonal evaluation of early pregnancy. Fertil Steril 1980;34:1 13. 2) Bergquist C, Nillius SJ, Wide L. Human gonadotropin therapy: 1. Serum estradiol and progesterone patterns during conceptual cycles. Fertil Steril 1983;39:761 5. 3) Erickson GF. Normal ovarian function. Clin Obstet Gynecol 1978;21:31 52. 4) Garcia JE, Jones GS, Wright GL. Prediction of the time of ovulation. Fertil Steril 1981;36:308 15. 5) Gautray JP, et al. Clinical investigation of the menstrual cycle: 3. Clinical, endometrial, and endocrine aspects of luteal defect. Fertil Steril 1981;35:296 303. 6) Goebelsmann U, Mishell DR. The menstrual cycle. In: Mishell DR, Davajan V, editors. Reproductive endocrinology, infertility and contraception. Philadelphia: Davis FA, 1979: 67 89. 7) Goldstein D, et al. Correlation between estradiol and progesterone in cycles with luteal phase deficiency. Fertil Steril 1982;37:348 54. IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 5

8) Haning RV, et al. Plasma estradiol is superior to ultrasound and urinary estriol glucuronide as a predictor of ovarian hyperstimulation during induction of ovulation with menotropins. Fertil Steril 1983;40:31 6. 9) Judd HL, Korenman SG. Effects of aging on reproductive function in women. In: Korenman SG, editor. Endocrine aspects of aging. New York: Elsevier Biomedical, 1982:163 97. 10) Landgren BM, Aedo AR, Diczfalusy E. Hormonal changes associated with ovulation and luteal function. In: Flamigini C, Givens JR, editors. The gonadotropins: basic science and clinical aspects in females. London: Academic Press, 1982:187 201. 11) March CM, Goebelsmann U, Nakamura RM, Mishell DR. Roles of estradiol and progesterone in eliciting the midcycle luteinizing hormone and folliclestimulating hormone surges. J Clin Endocrinol Metab 1979;49:507 12. 12) Polan ML, et al. Abnormal ovarian cycles as diagnosed by ultrasound and serum estradiol levels. Fertil Steril 1982; 37:342 7. 13) Radwanska E, et al. Plasma progesterone and oestradiol estimation in the diagnosis and treatment of luteal insufficiency in menstruating infertile women. Acta Eur Fertil 1976;39 47. 14) Radwanska E, et al. Correlation between preovulatory serum estradiol and midluteal progesterone levels during induction of ovulation with clomid and HCG. J Reprod Med 1980; 24:79 82. 15) Rebar RW, Yen SSC. Endocrine rhythms in gonadotropins and ovarian steroids with reference to reproductive processes. In: Krieger, editor. Endocrine rhythms. New York: Raven Press, 1979: 259 98. 16) Robertson RD, et al. Assessment of ovulation by ultrasound and plasma estradiol determinations. Obstet Gynecol 1979; 54:686 90. 17) Siiteri PK, Febres F. Ovarian hormone synthesis, circulation, and mechanisms of action. In: DeGroot L, et al, editors. Endocrinology, vol 3. New York: Grune & Stratton, 1979:1401 17. 18) Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 2nd ed. Philadelphia: W.B. Saunders, 1994. 19) National Committee for Clinical Laboratory Standards. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. 4th ed. NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998. Technical Assistance Available outside the United States only. For technical assistance, contact your National Distributor. www.siemens.com/diagnostics Tables and Graphs Precision (pg/ml) Within-Run 1 Total 2 Mean 3 SD 4 CV 5 SD CV 1 89 8.8 9.9% 14 16% 2 180 14 7.8% 19 11% 3 461 20 4.3% 31 6.7% 4 1309 84 6.4% 102 7.8% 5 1800 89 4.9% 127 7.1% Česky. 1 V rámci stanovení, 2 Celkem, 3 Střední hodnota, 4 Směrodatná odchylka, 5 Variační koeficient. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο, 2 Συνολικά, 3 Μέσος όρος, 4 SD, 5 CV. Polski. 1 Wewnątrz serii, 2 Całość, 3 Średnie, 4 SD, 5 CV. Linearity (pg/ml) Dilution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 8 in 8 5 370 4 in 8 204 185 110% 2 in 8 92 93 99% 1 in 8 43 46 93% 2 8 in 8 756 4 in 8 394 378 104% 2 in 8 193 189 102% 1 in 8 97 95 102% 3 8 in 8 1849 4 in 8 975 925 105% 2 in 8 466 462 101% 1 in 8 220 231 95% Česky. 1 Ředění, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 % Naměřená / Očekávaná, 5 8 v 8. Ελληνικά. 1 Αραίωση, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E, 5 8 στα 8. Polski. 1 Rozcieńczenie, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O, 5 8 w 8. The Quality System of Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. is certified to ISO 13485:2003. 6 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Recovery (pg/ml) Solution 1 Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 208 A 221 238 93% B 254 270 94% C 407 399 102% 2 273 A 272 299 91% B 329 331 99% C 483 460 105% 3 614 A 612 623 98% B 645 655 98% C 819 784 104% Česky. 1 Roztok, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Διάλυμα, 2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Roztwór, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 % Z/O. Specificity Compound 1 ng/ml Added 2 % Crossreactivity 3 Androstenedione 100,000 0.0004% Cortisol 100,000 0.000026% DHEA 4000 0.0006% 17 -Estradiol 100 0.026% 17β-Estradiol-3-50 0.038% glucuronide-17-sulfate 17β-Estradiol-3-sulfate 50 0.15% β-estradiol-17-propionate 3.6 1.25% β-estradiol-3-sulfate-17-50 0.04% glucuronide β-estradiol-17-valerate 3.6 1.14% Estriol 20 0.81% Estriol-3-sulfate 10,000 0.00053% Estriol-3-glucuronide 1000 0.0018% Estrone 3.6 0.69% Estrone-β-D-glucuronide 3.6 0.19% Estrone-3-sulfate 3.6 ND Ethinyl estradiol 20 2.6% d-equilenin 3.6 3.3% Equilin 3.6 0.38% Progesterone 100,000 ND Testosterone 100,000 ND ND: not detectable. 4 Česky. 1 Sloučenina, 2 Přidané množství, 3 % Zkřížená reaktivita, 4 ND: nezjistitelné. Ελληνικά. 1 Μείγμα, 2 Προστέθηκαν, 3 % Διασταυρ.Αντίδραση, 4 ND: Μη ανιχνεύσιμη ποσότητα. Polski. 1 Składnik, 2 Ilość dodana, 3 % reaktywności Krzyżowej, 4 ND: Nieoznaczlne. Precision Profile Within-Run CV% 0 10 20 30 40 50 20 50 100 200 500 1000 2000 IMMULITE 2000 Estradiol, pg/ml English. Within-Run CV% 1, Estradiol 2. Česky. 1 V rámci stanovení CV%, 2 Estradiol. Ελληνικά. 1 Κατά την ίδια περίοδο CV%, 2 Οιστραδιόλη. Polski. 1 W serii CV%, 2 Estradiol. Lipemia Triglycerides Added 1 mg/dl Observed 2 Expected 3 %O/E 4 1 194 250 189 191 99% 500 178 189 94% 1000 192 184 104% 2000 153 175 87% 3000 156 165 95% 2 275 250 277 271 102% 500 288 268 107% 1000 237 261 91% 2000 216 248 87% 3000 201 234 86% 3 327 250 348 323 108% 500 312 319 98% 1000 355 311 114% 2000 371 294 126% 3000 277 278 100% Česky. 1 Přidané triglyceridy, 2 Naměřená, 3 Očekávaná, 4 Naměřená / Očekávaná. Ελληνικά. 1 Προστιθέμενα τριγλυκερίδια, IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 7

2 Παρατηρούμενη (O), 3 Αναμενόμενη (E), 4 % O/E. Polski. 1 Dodane trójglicerydy, 2 Zmierzone (Z), 3 Oczekiwane (O), 4 %Z/O. Česky Method Comparison IMMULITE 2000 Estradiol 2,000 1,600 1,200 800 400 0 0 400 800 1,200 1,600 2,000 IMMULITE Estradiol, pg/ml (IML 2000) = 0.90 (IML) + 18 pg/ml r = 0.990 English. Estradiol Česky. Estradiol. Ελληνικά. Οιστραδιόλη. Polski. Estradiol. Menstrual Cycle Graph English. Estradiol 1, Cycle Day: Normalized to LH Peak 2 Česky. 1 Estradiol, 2 Den cyklu: Normalizován k LH píku. Ελληνικά. 1 Οιστραδιόλη 2 Μέρα του Κύκλου: Ομαλοποιημένη στην κορυφή της καμπύλης του LH (Peak). Polski. 1 Estradiol, 2 Dzień cyklu: odniesiony do piku LH. IMMULITE 2000 Estradiol Použití : Pro in vitro diagnostické použití na analyzátorech IMMULITE 2000 ke kvantitativnímu stanovení koncentrace estradiolu (estradiol-17β, E2) v séru, jakožto pomůcky při diagnostice a léčbě různých hormonálních sexuálních poruch, monitoringu indukce ovulace se stimulací nebo bez stimulace během asistované reprodukční technologie (ART). Katalogové číslo : L2KE22 (200 stanovení), L2KE26 (600 stanovení) Kód metody : E2 Barva : tmavě růžová Shrnutí a vysvětlení Estradiol je steroidní hormon s molekulovou hmotností 272,3 daltonů, cirkuluje převážně vázaný na proteiny. Dalšími přirozenými steroidními estrogeny kromě estradiolu jsou estron, estriol a jejich konjugáty. Estrogeny jsou hormony, které jsou vylučovány hlavně vaječníkovými folikuly, dále se tvoří v nadledvinkách, žlutém tělísku, placentě a u mužů ve varlatech. Estrogenní hormony jsou vylučovány v různé míře během menstruačního cyklu po celou dobu trvání aktivity vaječníků. Sekreci vaječníkových hormonů, estradiolu a progesteronu, regulují gonadotropiny adenohypofýzy. Regulace tvorby gonadotropinu hypofýzy z hypotalamu je zase ovlivňována koncentrací estrogenů a progesteronu v plazmě. Tento komplexní systém zpětné vazby má za následek cyklicitu ovulace a menstruace. Hlavním zdrojem estrogenů v průběhu těhotenství se stává placenta. V postmenopauze dochází k poklesu tvorby estrogenů různou rychlostí. Princip stanovení Metoda IMMULITE 2000 Estradiol je chemiluminiscenční, imunologické a kompetitivní stanovení na pevné fázi s enzymem označeným materiálem. Pevná fáze (kulička) je potažena polyklonální králičí protilátkou proti estradiolu. Kapalná fáze obsahuje alkalickou fosfatázu (z telecího střeva) konjugovanou s estradiolem. 8 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Vzorek paciena je inkubován s reagencií a potaženou kuličkou po 60 minut. V této fázi estradiol ve vzorku soupeří s enzymem značeným estradiolem v reagencii o omezený počet vazebných míst na kuličce. Nenavázaný pacientský vzorek a enzymový konjugát se poté odstraní centrifugačním mytím. Nakonec se do reakèní zkumavky, která obsahuje kuličku, přidá substrát a je generován signál, jehož velikost je úměrná množství navázaného enzymu. Inkubační cykly : 1 60 minut Čas do prvního výsledku : 65 minut Odebírání vzorků Lipémie může s daným stanovením interferovat. K úpravě lipemických vzorků se doporučuje použití ultracentrifugy. Hemolyzované vzorky můžou být známkou nesprávného zacházení s preparátem ještě před přijetím do laboratoře; proto by výsledky měly být interpretovány s obezřetností. Centrifugace vzorků séra ještě před úplným vysrážením může mít za následek přítomnost fibrinu. Chybným výsledkům způsobeným přítomností fibrinu lze zamezit úplným vysrážením vzorků před jejich centrifugací. Některé vzorky, zejména od pacientů podstupujících antikoagulační léčbu, může srážlivost vyžadovat více času. Použití zkumavek pro odběr krve od různých výrobců může poskytovat rozličné hodnoty v závislosti na materiálech a přísadách, včetně gelových nebo fyzických bariér, aktivátorů srážení a/nebo antikoagulačních činidel. Stanovení Estradiol na analyzátorech IMMULITE 2000 nebylo testováno se všemi možnými varianty jednotlivých typů zkumavek. Informace o testovaných zkumavkách najdete v části o alternativních typech vzorků. Potřebný objem vzorku : 25 µl séra Skladování : 2 dny při teplotě 2 8 C nebo 2 měsíce při teplotě 20 C. 18 Ředění : Vzorky, u kterých výsledek překračuje koncentraci 1200 pg/ml je vhodné naředit a test zopakovat. Klinicky relevantní výsledek získáte i bez ředění, ale nejpřesnější hodnotu dostanete při stanovení v citlivé části křivky. Upozornění a bezpečnostní opatření Pro in vitro diagnostické použití. Reagencie : Skladujte při teplotě 2 8 C. Likvidujte v souladu s platnými předpisy. Řiďte se obecnými pravidly bezpečnosti práce a se všemi komponenty nakládejte, jako by byly potenciálně infekční. Zdrojové materiály získané z lidské krve byly testovány a shledány nereaktivní na syfylis, na protilátky proti HIV 1 a 2, na povrchový antigen hepatitidy typu B (HbsAg), a na protilátky proti hepatitidě typu C. Jako konzervační látka byl přidán azid sodný v koncentracích menších než 0,1 g/dl. Při likvidaci vypláchněte velkým množstvím vody, aby se zamezilo nahromadění potenciálně výbušných azidů kovů v olověném a měděném potrubí. Chemiluminescenční substrát : Vyvarujte se kontaminace a nevystavujte přímému slunečnímu světlu. (Viz připojený letáček.) Voda : Použijte destilovanou nebo deionizovanou vodu. Dodaný materiál Komponenty představují ucelenou sadu. Pro stanovení jsou zapotřebí štítky na vnitřní krabici. Estradiol zásobník s kuličkami (L2E212) Opatřeno čárovým kódem. 200 kuliček potažených polyklonálním králičí protilátkou proti estradiolu. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KE22 : 1 balení L2KE26 : 3 balení Estradiol reagencie (L2E2A2) Opatřeno čárovým kódem. 11,5 ml alkalické fosfatázy (z telecího střeva) konjugované s estradiolem, v pufru, s konzervačním prostředkem. Stabilní při teplotě 2 8 C do expirace. L2KE22 : 1 nádobka L2KE26 : 3 nádobky Před použitím utrhněte vršek štítku v perforovaném místě, ale nepoškoďte čárový kód. Z vrchu nádobky odstraňte uzavírací fólii ; posuvný uzávěr zaklapněte do ramp na víčku reagencie. IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 9

Estradiol kalibrátor (LE2L, LE2H) Dvě ampulky, po 2 ml, s vysokou a nízkou koncentrací estradiolu ve zpracovaném lidském séru, s konzervačním prostředkem. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2KE22 : 1 sada L2KE26 : 2 sady Před adjustací nalepte na testovací zkumavky příslušné alikvotní štítky (dodané se soupravou) tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. Materiál dodávaný zvlášť Estradiol diluent vzorků (L2E2Z) Pro automatické ředění koncentrovaných vzorků analyzátorem. Jedna ampulka obsahující 25 ml koncentrovaného (připraveného k použití) zpracovaného lidského séra (s konzervačním prostředkem) obsahujícího nezjistitelné až malé množství estradiolu. Stabilní 30 dní po otevření při teplotě 2 8 C nebo rozdělené na alikvotní části 6 měsíců při 20 C. L2E2Z : 25 ml Štítky s čárovými kódy jsou určeny pro diluent. Před použitím nalepte příslušný štítek na testovací zkumavku 16 100 mm tak, aby zabudovaný snímač mohl přečíst čárové kódy. L2E2Z : 3 štítky L2SUBM : Chemiluminescenční substrát L2PWSM : Promývací roztok L2KPM : Čistící roztok na jehly LRXT : Reakční zkumavky (na jedno použití) L2ZT : 250 testovacích zkumavek na diluent vzorků (16 100 mm) L2ZC : 250 uzávěrů na testovací zkumavky na diluent vzorků E2TC : Estradiol kontrola (jednoúrovňová) Dále potřebujete Destilovanou nebo deionizovanou vodu; testovací zkumavky, kontroly Postup stanovení K dosažení optimálního výkonu je důležité provádět veškerou pravidelnou údržbu stanovenou v manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000. V manuálu k analyzátorům IMMULITE 2000 najdete postupy: přípravy, nastavení, ředění, adjustace, stanovení vzorků a kontrol. Doporučený interval mezi adjustacemi : 2 týdny Vzorky ke kontrole kvality : Pokud jde o četnost kontroly kvality, je třeba řídit se platnými předpisy a akreditačními požadavky. Použijte kontroly nebo směsné vzorky s alespoň dvěmi koncentracemi (vysokou a nízkou) estradiolu. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat obchodně dostupné materiály kontroly kvality o přinejmenším dvou koncentracích vysoké a nízké. Vyhovující funkčnosti se dosahuje, pokud zjištěné hodnoty analytu leží uvnitř přijatelného kontrolního rozmezí analyzátoru nebo uvnitř rozmezí stanoveného příslušným interním systémem kontroly kvality dané laboratoře. Očekávané hodnoty Na základě příbuznosti s testem Estradiol na analyzátoru IMMULITE (viz Srovnání metody) je možné u tohoto stanovení očekávat v podstatě shodná referenční rozmezí. Referenční rozpětí bylo vytvořeno za pomoci metody Estradiol na analyzátoru IMMULITE výzkumem zahrnujícím ženy zjevně dobrého zdraví z různých národů (věk : 16 44 roků), které si nechaly denně během celého jednoho ovulačního cyklu odebrat vzorky krve. (Viz Menstrual Cycle Graph. ) Estradiol, pg/ml Středních Ovulační cykly n* Medián 95 % Folikulární fáze 54 (708) 42 ND 160 Folikulární fáze, 54 (108) 31 ND 84 den 2 až 3 Periovulační fáze, 3 dny 54 (378) 133 34 400 Luteální fáze 54 (604) 93 27 246 *Počet osob (celkový počet výsledků) 10 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Estradiol, pmol/l Středních Ovulační cykly n* Medián 95 % Folikulární fáze 54 (708) 154 ND 587 Folikulární fáze, 54 (108) 114 ND 308 den 2 až 3 Periovulační fáze, 3 dny 54 (378) 489 124 1468 Luteální fáze 54 (604) 343 101 905 * Počet osob (celkový počet výsledků) Další zkoumání pomocí testu Estradiol na analyzátoru mělo následující výsledky : Estradiol, pg/ml Skupina Střední n hodnota Medián 90 % rozmezí Dospělí muži 50 30,5 29,7 ND 56 Dospělé ženy : Neléčené, v 27 ND ND ND 30 postmenopauze Léčené, v 27 ND ND ND 93 postmenopauze Orální antikoncepce 61 35,2 24,5 ND 102 ND : nezjistitelné Estradiol, pmol/l Skupina Střední n hodnota Medián 90 % rozmezí Dospělí muži 50 112 109 ND 206 Dospělé ženy : Neléčené, v 27 ND ND ND 110 postmenopauze Léčené, v 27 ND ND ND 341 postmenopauze Orální antikoncepce 61 129 90 ND 374 ND : nezjistitelné Uvedené hranice považujte pouze za orientační. Každá laboratoř by si měla stanovit svoje vlastní referenční rozmezí. Omezení Vzorky od těhotných žen : Při vyšetření vzorků od těhotných žen buďte obezřetní, protože množství estriolu může být tak velké, že dojte k interferenci. Vzorky od novorozenců : Toto stanovení nebylo zkoušeno na vzorcích od novorozenců. Steroidy se zkříženou reaktivitou, včetně estriolu, které se v cirkulaci v tomto období nachází ve velkém množství, můžou způsobit falešně vysoké naměřené koncentrace. Heterofilní protilátky v lidském séru můžou reagovat s imunoglobuliny obsaženými v komponentech soupravy a způsobit interference s in vitro imunologickým stanovením. [Viz Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all imunologickým stanovením. Clin Chem 1988:34:27-33.] Vzorky pacientů rutinně vystavené kontaktu se zvířaty nebo produkty zvířecího séra můžou vykázat tento typ interference a potenciálně způsobit anomální výsledky. Tyto reagencie byly vyvinuty tak, aby bylo riziko interference minimalizováno ; nicméně případné interakce mezi ojedinělými séry a komponenty testu se můžou vyskytnout. Pro diagnostické účely by se výsledky tohoto stanovení měly vždy používat v kombinaci s klinickými zkouškami, zdravotní historií pacienta a ostatními nálezy. Znaky metody Reprezentativní výsledky stanovení najdete v části Tabulky a grafy. Výsledky se udávají v pg/ml. (Pokud není uvedeno jinak, všechny výsledky byly získány na vzorcích séra odebraných do zkumavek bez gelových bariér nebo přísad podporujících srážlivost.) Konverzní faktor : pg/ml 3,671 pmol/l Rozsah měření : 20 až 2000 pg/ml (73 7342 pmol/l) Souprava má návaznost na mezinárodní standard vyrobený s použitím schválených materiálů a měřících procesů. Analytická citlivost : 15 pg/ml (55 pmol/l) Přesnost : Vzorky byly stanovovány dvojmo v průběhu 20 dní, dva testy denně, celkem 40 testů a 80 replikátů. (Viz tabulka "Precision".) Profil přesnosti : V sérií výzkumů, který zahrnoval 10 skupin souprav byly stanovené vzorky napříč pracovního rozmezí, 10 nebo 20 replikátů v jednom testu. (Viz graf "Precision Profile".) IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 11

Linearita : Stanovení vzorků bylo provedeno při rozličném ředění. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Linearity".) Zpětná výtěžnost : Bylo provedeno stanovení vzorků séra s přídavkem tří roztoků estradiolu (800, 1440 a 4020 pg/ml) v poměru 1:19. (Reprezentativní hodnoty najdete v tabulce "Recovery".) Specificita : Antisérum bylo získáno použitím derivátu estradiolu na 6 pozici a je vůči estradiolu vysoce specifické. (Viz tabulka "Specificity".) Bilirubin : Přítomnost bilirubinu v koncentracích do 200 mg/l nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Hemolýza : Přítomnost červených krvinek oddělených od plazmy v koncentracích do 30 µl/ml nemá v rámci přesnosti stanovení žádný vliv na výsledky. Lipémie : Přítomnost triglyceridů v koncentracích do 3000 mg/dl může se stanovením interferovat. (Viz tabulka "Lipemia".) Alternativní typ vzorku : K určení vlivu alternativních typů vzorků byly na analyzátorech IMMULITE 2000 metodou Estradiol stanoveny vzorky krve odebrané 33 dobrovolníkům do obyčejných, heparinizovaných a Becton Dickinson SST Vacutainer zkumavek. Do úměrných objemů odpovídajících vzorků jsme přidali roztoky s různou koncentrací estradiolu, abychom dostali hodnoty napříč celého koncentračního rozsahu tohoto testu. Vzorky jsme následně stanovili metodou Estradiol na analyzátorech IMMULITE 2000. (Heparin) = 0,98 (Sérum) + 11 pg/ml r = 0,996 (SST) = 0,98 (Obyčejné Zkumavky) + 15 pg/ml r = 0,994 Střední hodnoty : 476 pg/ml (Sérum) 477 pg/ml (Heparin) 482 pg/ml (SST) Srovnání metody : Stanovení bylo porovnáno s kvantitativním testem Estradiol na analyzátoru IMMULITE na 97 vzorcích. (Koncentrační rozsah: přibližně 20 až 1800 pg/ml. Viz graf.) Podle lineární regrese : (IML 2000) = 0,90 (IML) + 18 pg/ml r = 0,990 Střední hodnoty : 337 pg/ml (IMMULITE 2000) 354 pg/ml (IMMULITE) Technická Podpora Pro technickou podporu kontaktujte vašeho národního distributora. www.siemens.com/diagnostics Systém kontroly jakosti společnosti Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. je certifikovaný podle ISO 13485:2003. Ελληνικά IMMULITE 2000 Οιστραδιόλη Ενδεδειγμένη χρήση: Για in vitro διαγνωστική χρήση με τα συστήματα αναλυτών IMMULITE 2000 για τον ποσοτικό προσδιορισμό της οιστραδιόλης (Οιστραδιόλη-17β, E2) στον ορό, ως βοήθημα στην διαφορική διάγνωση της αμηνόρροιας και στην παρακολούθηση της ωορρηξίας με και χωρίς διέγερση στην τεχνολογία της υποβοηθούμενης αναπαραγωγής (ART). Αριθμοί Καταλόγου: L2KE22 (200 τεστ), L2KE26 (600 τεστ) Κωδικός: E2 Χρώμα: Σκούρο Ροζ Περίληψη και εξήγηση Η οιστραδιόλη είναι μία στεροειδής ορμόνη με μοριακή μάζα 272,3 daltons που κυκλοφορεί κυρίως πρωτεϊνικάδεσμευμένη. Εκτός της οιστραδιόλης άλλα φυσικά στεροειδή οιστρογόνα είναι η οιστρόνη, η οιστριόλη και τα παράγωγα τους. Τα οιστρογόνα εκκρίνονται πρωταρχικά από τα ωοθυλάκια και επίσης από τα επινεφρίδια, από το ωχρό σωμάτιο, από τον πλακούντα και στους άνδρες από τους όρχεις. 12 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Οι οιστρογόνες ορμόνες εκκρίνονται σε διαφορετικό βαθμό κατά την διάρκεια του εμμηνορρυσιακού κύκλου, καθ όλην την περίοδο της ωοθηκικής δραστηριότητας. Οι γοναδοτρόποι ορμόνες του πρόσθιου λοβού της υπόφυσης ρυθμίζουν την έκκριση των ωοθηκικών ορμονών, της οιστραδιόλης και της προγεστερόνης; Ο υποθαλαμικός έλεγχος της παραγωγής γοναδοτροπίνης από την υπόφυση ρυθμίζεται από τις συγκεντρώσεις οιστρογόνων και προγεστερόνης στο πλάσμα. Αυτό το περίπλοκο σύστημα ανάδρασης έχει ως αποτέλεσμα το περιοδικό φαινόμενο της ωορρηξίας και της εμμηνόρροιας. Κατά την διάρκεια της εγκυμοσύνης, ο πλακούντας είναι η βασική πηγή οιστρογόνων. Κατά την εμμηνόπαυση, η έκκριση οιστρογόνων μειώνεται σε διαφορετικό- ανάλογα με την περίπτώσηβαθμό. Αρχή της διαδικασίας Ο IMMULITE 2000 Estradiol είναι ένας στερεάς φάσης, ενζυμικά σημασμένος ανταγωνιστικός χημειοφωταυγής ανοσολογικός προσδιορισμός. Η στερεά φάση (σφαιρίδιο) είναι επικαλυμμένη με πολυκλωνικό αντίσωμα κουνελιού αντίοιστραδιόλης. Η υγρή φάση αποτελείται από αλκαλική φωσφατάση (από βόειο έντερο) συνδεδεμένη σε οιστραδιόλη. Το δείγμα ασθενούς και το αντιδραστήριο επωάζονται μαζί με το επικαλυμμένο σφαιρίδιο για 60 λεπτά. Σε αυτό το διάστημα, η οιστραδιόλη στο δείγμα ανταγωνίζεται με τη συνδεδεμένη με το ένζυμο οιστραδιόλη στο αντιδραστήριο για ένα περιορισμένο αριθμό θέσεων πρόσδεσης του αντισώματος στο σφαιρίδιο. Το μη προσδεδεμένο δείγμα του ασθενούς και το συζευγμένο ένζυμο απομακρύνονται στη συνέχεια με φυγοκεντρικές πλύσεις. Τελικά, το χημειοφωταυγές υπόστρωμα προστίθεται στο σωληνάριο αντίδρασης που περιέχει το σφαιρίδιο και το σήμα παράγεται σε αναλογία με το προσδεδεμένο ένζυμο. Κύκλοι επώασης: 1 60 λεπτά Χρόνος για το πρώτο αποτέλεσμα: 65 λεπτά Συλλογή δείγματος Η Λιπιδαιμία μπορεί να επηρεάσει την εξέταση. Συνιστάται η χρήση της υπερφυγοκέντρου για να καθαριστούν λιπιδαιμικά δείγματα. Αιμολυμένα δείγματα μπορεί να υποδηλώνουν κακή μεταχείριση του δείγματος πριν την παραλαβή του από το εργαστήριο και τα αποτελέσματα πρέπει να ερμηνεύονται με προσοχή. Η φυγοκέντρηση των δειγμάτων πριν την πλήρη πήξη μπορεί να έχει ως αποτέλεσμα την παρουσία θρόμβων. Για να αποφευχθούν λανθασμένα αποτελέσματα εξαιτίας της παρουσίας θρόμβων, βεβαιωθείτε ότι πριν την φυγοκέντρηση το αίμα έπηξε πλήρως. Κάποια δείγματα, ιδιαιτέρως αυτά των ασθενών που λαμβάνουν αντιπηκτική θεραπεία, ίσως χρειάζονται εκτεταμένο χρόνο πήξης. Οι σωλήνες συγκέντρωσης αίματος από διαφορετικές εταιρείες μπορεί να φέρουν διάφορες τιμές, ανάλογα με τα υλικά και τα συμπληρώματα, συμπεριλαμβανομένων των με τζελ ή φυσικών σωληναρίων, των ενεργοποιητών πήξεως και/ή των αντιπηκτικών. Η IMMULITE 2000 Οιστραδιόλη δεν έχει δοκιμαστεί με όλους τους τύπους σωληναρίων. Συμβουλευτείτε την παράγραφο για τους εναλλακτικούς τύπους δειγμάτων για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα σωληνάρια που έχουν δοκιμαστεί. Απαιτούμενος όγκος ανά τεστ: 25 µl ορού Αποθήκευση: 2 μέρες στους 2 8 C, ή 2 μήνες στους 20 C. 18 Αραίωση: Σε περιπτώσεις όπου τα δείγματα των ασθενών δώσουν αποτελέσματα μεγαλύτερα των 1200 pg/ml συνιστάται η αραίωση τους και η ξανά-ανάλυση τους. Ένα κλινικά συναφές αποτέλεσμα αποκτάται χωρίς αραίωση αλλά μία περισσότερο ακριβής τιμή αποκτάται όταν η εξέταση γίνεται στο ευαίσθητο μέρος της καμπύλης. Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις Για διαγνωστική in vitro χρήση Αντιδραστήρια : Αποθηκεύετε στους 2 8 C. Καταστρέψτε σύμφωνα με την τοπική νομοθεσία. IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 13

Ακολουθείτε τις κοινές οδηγίες και μεταχειρίζεστε όλα τα συστατικά σαν να ήταν φορείς λοιμωδών ασθενειών. Τα ανθρώπινου αίματος προέλευσης υλικά που χρησιμοποιούνται στην παρασκευή αυτού του κιτ εξετάστηκαν για σύφιλη, για αντισώματα έναντι Human Immunodeficiency Virus (HIV) 1 και 2, για ηπατίτιδας B αντιγόνο επιφανείας, και για αντισώματα ηπατίτιδας C και βρέθηκαν αρνητικά. Αζίδιο του Νατρίου έχει προστεθεί σε συγκέντρωση μικρότερη του 0,1 g/dl, σαν συντηρητικό. Κατά την απόθεση, ξεπλύνετε με πολύ νερό προκειμένου να εμποδίσετε την δημιουργία εκρηκτικών αζιδίων στους χάλκινους ή μολύβδινους σωλήνες αποχέτευσης. Υπόστρωμα χημειοφωταύγειας: Δεν πρέπει να μολυνθεί και δεν πρέπει να εκτίθεται σε απευθείας ηλιακό φως. Προσφύγετε στο ένθετο για λεπτομέρειες Νερό: Χρησιμοποιείτε απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό. Υλικά που διατίθενται Τα υλικά είναι μια ολοκληρωμένη ενότητα. Οι ετικέτες στο εσωτερικό του κουτιού είναι απαραίτητες για την ανάλυση. Οιστραδιόλη σε Συσκευασία σφαιριδίων (L2Ε212) Με γραμμογράφηση. 200 σφαιρίδια καλυμμένα με μονοκλωνικά αντί-οιστραδιόλης αντισώματα κουνελιού. Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία. L2KE22: 1 συσκευασία L2KE26: 3 συσκευασίες Δοχείο Αντιδραστηρίων Οιστραδιόλης (L2Ε2A2) Με γραμμογράφηση. 11,5 ml αλκαλικής φωσφατάσης (από βόειο έντερο) συνδεδεμένη σε οιστραδιόλη, σε ρυθμιστικό διάλυμα (με συντηρητικό). Φυλάσσεται στους 2 8 C μέχρι την ημερομηνία λήξεως που αναγράφεται στην συσκευασία L2KE22: 1 δοχείο L2KE26: 3 δοχεία Πριν την χρήση, αφαιρέστε την διαφανή ταινία προσέχοντας να μην καταστραφεί το πλαστικό κάλυμμα ή η γραμμογράφηση. Αφαιρέστε (ξεκολλήστε) προσεκτικά το κάλυμμα από την επάνω επιφάνεια του δοχείου, και πιέστε το κάλυμμα κάτω προς τους κεκλιμένους οδηγούς-ράγες. Ρυθμιστές Οιστραδιόλης (LE2L, LE2H) Δύο φιαλίδια (χαμηλό και υψηλό)- 2 ml το καθένα- οιστραδιόλης σε επεξεργασμένο ανθρώπινο ορό, με συντηρητικό. Φυλάσσεται στους 2 8 C για 30 μέρες μετά το άνοιγμα. Για μακροβιότερη αποθήκευση, διαχωρίστε και καταψύξτε: σταθερά στους 20 C για 6 μήνες. L2KE22: 1 σετ L2KE26: 2 σετ Χωριστές γραμμογραφημένες ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με τους Ρυθμιστές. Πριν την χρήση, κολλήστε τις κατάλληλες ετικέτες στα δοκιμαστικά σωληνάρια έτσι ώστε η γραμμογράφηση να μπορεί να αναγνωστεί. Συστατικά του Kit που προμηθεύονται ξεχωριστά Αραιωτικό Οιστραδιόλης (L2Ε2Z) Για την αραίωση των δειγμάτων των ασθενών. 25 ml συμπυκνωμένου (έτοιμου για χρήση) ανθρωπίνου ορού (με συντηρητικό) που περιέχει μη ανιχνεύσιμο σε χαμηλές δόσεις οιστραδιόλης. Διατηρείται για 30 μέρες (μετά το άνοιγμα) στους 2 8 C ή για 6 μήνες (διαχωρισμένο) στους 20 C. L2E2Z: 25 ml Χωριστές γραμμογραφημένες ετικέτες προμηθεύονται με το κιτ, για χρήση με το Αραιωτικό. Πριν την χρήση τοποθετείστε την κατάλληλη ετικέτα σε ένα σωληνάριο 16 100 mm, ούτως ώστε η ετικέτα να μπορεί να διαβαστεί. L2Ε2Ζ: 3 ετικέτες L2SUBM: Χημειοφωταυγές υπόστρωμα L2PWSM: Πλυστικό του ανιχνευτή L2KPM: Kit καθαρισμού του ανιχνευτή LRXT: Σωλήνες εξέτασης μιας χρήσης L2ZT: 250 δοκιμαστικοί σωλήνες για αραίωση του δείγματος (16 100 mm) L2ZC: 250 καπάκια για σωλήνες αραίωσης του δείγματος E2TC: Ορός ελέγχου Οιστραδιόλης (ενός επιπέδου) Χρειάζονται επίσης Απεσταγμένο ή απιονισμένο νερό, δείγματα ελέγχου ποιότητας, γυάλινα σωληνάρια 14 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Διαδικασία της Ανάλυσης Σημειώστε ότι για το βέλτιστο αποτέλεσμα, είναι σημαντικό να ακολουθηθούν όλες οι τυπικές διαδικασίες όπως ορίζονται στο εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000. Βλέπε το εγχειρίδιο χρήστη συστημάτων IMMULITE 2000 για προετοιμασία, στήσιμο, αραιώσεις, ρυθμίσεις, ανάλυση και διαδικασίες ποιοτικού έλέγχου. Συνιστώμενος χρόνος μεταξύ των ρυθμίσεων: 2 εβδομάδες Δείγματα ελέγχου ποιότητας: Εφαρμόστε τους κρατικούς κανονισμούς ή τις απαιτήσεις πιστοποίησης για τη συχνότητα του ποιοτικού ελέγχου. Χρησιμοποιείτε δείγματα ελέγχου ποιότητας σε δύο τουλάχιστον επίπεδα (χαμηλό και υψηλό) συγκέντρωσης της οιστραδιόλης Η Siemens Healthcare Diagnostics συνιστά τη χρήση εμπορικά διαθέσιμων υλικών ελέγχου ποιότητας με τουλάχιστον 2 επίπεδα (χαμηλό και υψηλό). Ένα ικανοποιητικό επίπεδο απόδοσης επιτυγχάνεται όταν οι τιμές που προκύπτουν βρίσκονται εντός του αποδεκτού εύρους των υλικών ελέγχου για τον αναλυτή ή εντός ενός καθορισμένου εύρους που καθορίστηκε με βάση ένα κατάλληλο πλαίσιο εσωτερικού εργαστηριακού ποιοτικού ελέγχου. Αναμενόμενες τιμές Βασιζόμενη στην σχέση με την IMMULITE Οιστραδιόλη (βλ. Σύγκριση Μεθόδων), η εξέταση αναμένεται να έχει τις ίδιες τιμές αναφοράς. Οι τιμές αναφοράς διαμορφώθηκαν μετά από μια μελέτη σε γυναίκες με καλή υγεία (ηλικία 16 44 χρονών) από διαφορετικές εθνικότητες χρησιμοποιώντας την IMMULITE Οιστραδιόλη. Οι γυναίκες προσφέρθηκαν να δίνουν αίμα σε καθημερινή βάση, ακολουθώντας έναν πλήρη κύκλο ωορρηξίας. (Δες Menstrual Cycle Graph.) Κύκλοι ωορρηξίας n* Ωοθυλακική φάση Ωοθυλακική φάση, Μέρες 2 με 3 Πριν την ωορρηξία, 3 μέρες Οιστραδιόλη, pg/ml Ενδιάμεση τιμή Κεντρική τιμή 95% 54 (708) 42 ND 160 54 (108) 31 ND 84 54 (378) 133 34 400 Ωχρινική φάση e 54 (604) 93 27 246 *Αριθμός υποκειμένων (ολικός αριθμός των αποτελεσμάτων) Κύκλοι ωορρηξίας n* Ωοθυλακική φάση Ωοθυλακική φάση, Μέρες 2 με 3 Πριν την ωορρηξία, 3 μέρες Οιστραδιόλη, pmol/l Ενδιάμεση τιμή Κεντρική τιμή 95% 54 (708) 154 ND 587 54 (108) 114 ND 308 54 (378) 489 124 1468 Ωχρινική φάση 54 (604) 343 101 905 *Αριθμός υποκειμένων (ολικός αριθμός των αποτελεσμάτων) Μια άλλη μελέτη που εκτελέστηκε με IMMULITE Οιστραδιόλη έδωσε τα παρακάτω αποτελέσματα. Οιστραδιόλη, pg/ml Ομάδα n Μέσος Ενδιάμεση τιμή όρος 90% Εύρος Ενήλικοι άντρες 50 30,5 29,7 ND 56 Ενήλικες γυναίκες: Εμμηνόπαυση- 27 ND ND ND 30 χωρίς θεραπεία Εμμηνόπαυσηυπό 27 ND ND ND 93 θεραπεία Αντισυλληπτικά 61 35,2 24,5 ND 102 ND: Μη ανιχνεύσιμη IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 15

Οιστραδιόλη, pmol/l Μέσος Ενδιάμε 90% Ομάδα n όρος ση τιμή Εύρος Ενήλικοι άντρες 50 112 109 ND 206 Ενήλικες γυναίκες: Εμμηνόπαυση- 27 ND ND ND 110 χωρίς θεραπεία Εμμηνόπαυση- 27 ND ND ND 341 υπό θεραπείαν Αντισυλληπτικά 61 129 90 ND 374 ND: Μη ανιχνεύσιμη Τα εργαστήρια πρέπει να θεωρούν αυτά τα όρια μόνο ως κατευθυντήριες γραμμές. Συνιστάται κάθε εργαστήριο να έχει τις δικές του τιμές αναφοράς για την διαγνωστική εκτίμηση των αποτελεσμάτων των ασθενών. Περιορισμοί Δείγματα εγκύων: Επιδείξτε προσοχή όταν εξετάζετε δείγματα εγκύων, γιατί τα επίπεδα της οιστριόλης μπορεί να είναι ανεβασμένα και να επηρεάζουν το αποτέλεσμα. Δείγματα νεογνών: Η εξέταση δεν συνίσταται για χρήση σε δείγματα νεογνών. Στεροειδή, συμπεριλαμβανομένης της οιστριόλης, κυκλοφορούν σε μεγάλες συγκεντρώσεις αυτή την περίοδο και μπορεί να εμφανιστούν ψευδώς ανεβασμένα αποτελέσματα. Τα ετεροφιλικά αντισώματα που περιέχονται στον ανθρώπινο ορό μπορεί να αντιδράσουν με τις ανοσοσφαιρίνες που περιλαμβάνονται στα συστατικά της εξέτασης έχοντας ως αποτέλεσμα την παρεμβολή τους στις ανοσομετρικές εξετάσεις in vitro. [Βλ. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988:34: 27-33.] Δείγματα από ανθρώπους που εκτίθενται συχνά σε ζώα ή σε προϊόντα ορού ζώων μπορεί να έχουν τέτοια παρεμβολή και ως εκ τούτου λανθασμένο αποτέλεσμα. Τα αντιδραστήρια σχεδιάστηκαν έτσι ώστε να ελαχιστοποιείται αυτός ο κίνδυνος; παρόλα αυτά ενδεχόμενες αλληλεπιδράσεις μεταξύ κάποιων σπάνιων ορών και των συστατικών της εξέτασης μπορεί να συμβούν. Για διαγνωστικούς σκοπούς, τα αποτελέσματα αυτής της εξέτασης πρέπει πάντοτε να συνδυάζονται με την κλινική εξέταση, το ιστορικό του ασθενούς και άλλα ευρήματα. Απόδοση Δείτε παρακάτω τους πίνακες και τα γραφικά που αναπαριστούν την απόδοση της εξέτασης. Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε pg/ml. (Εκτός της περίπτωσης που αυτό αναφέρεται, όλα τα αποτελέσματα προέρχονται από δείγματα που συλλέχθηκαν σε σωληνάρια δίχως gel ή συμπληρώματα επιτάχυνσης της πήξης.) Παράγοντας μετατροπής: pg/ml 3,671 pmol/l Εύρος μέτρησης: 20 με 2000 pg/ml (73 7342 pmol/l) Η εξέταση είναι ιχνηλάσιμη σε ένα εσωτερικό πρότυπο που κατασκευάστηκε χρησιμοποιώντας κατάλληλα υλικά και μετρήσιμες διαδικασίες. Ευαισθησία: 15 pg/ml (55 pmol/l) Ακρίβεια: Για 20 μέρες κάποια δείγματα εξετάστηκαν εις διπλούν, δις ημερησίως, συνολικά 40 φορές ή 80 επαναλήψεις. (Βλ. Πίνακα Precision.) Προφίλ ακρίβειας: Σε μία σειρά μελετών με 10 kit lots, τα δείγματα που διανέμονταν στο ερευνώμενο εύρος εξετάστηκαν σε 10 ή 20 αντίτυπα την φορά. (Βλ. Διάγραμμα Precision Profile.) Γραμμικότητα: Ελέγχθηκαν δείγματα με διάφορες αραιώσεις. (Βλ. Πίνακα Linearity.) Ανάκτηση: Κάποια δείγματα εμπλουτίστηκαν(1 με 19) με τρία διαλύματα οιστραδιόλης (800, 1440 και 4020 pg/ml) και αναλύθηκαν. (Βλ. Πίνακα Recovery για τα αντιπροσωπευτικά δεδομένα.) Ειδικότητα: Ο αντιορός παράχθηκε με παράγωγο οιστραδιόλης στη θέση 6 και παρουσιάζει υψηλή ειδικότητα για την οιστραδιόλη. (Βλ. Πίνακα Specificity.) Χολερυθρίνη: Παρουσία χολερυθρίνης σε συγκεντρώσεις μέχρι 200 mg/l δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. Αιμόλυση: Παρουσία ερυθρών αιμοσφαιρίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 30 μl/ml δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης, μέσα στα όρια ακρίβειας της ανάλυσης. 16 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Λιπιδαιμία: Παρουσία τριγλυκεριδίων σε συγκεντρώσεις μέχρι 3000 mg/dl δεν επιδρά στα αποτελέσματα της εξέτασης. (Δες Πίνακα Lipemia.) Εναλλακτικοί Τύποι Δείγματος: Για να εκτιμηθεί το αποτέλεσμα των εναλλακτικών τύπων δείγματος, συλλέχθηκε αίμα από 33 εθελοντές σε απλούς ηπαρινισμένους και Becton Dickinson SST δοκιμαστικούς (vacutainer) σωλήνες. Ίσες ποσότητες των αντίστοιχων δειγμάτων εμπλουτίστηκαν με διάφορες ποσότητες οιστραδιόλης, ώστε να ληφθούν τιμές καθόλο το εύρος καμπύλης της εξέτασης, και μετά εξετάστηκαν σύμφωνα με τη διαδικασία της IMMULITE 2000 Οιστραδιόλης. (Ηπαρίνη) = 0,98 (Ορός) + 11 pg/ml r = 0,996 (SST) = 0,98 (Απλοί σωλήνες) + 15 pg/ml r = 0,994 Μέσοι όροι: 476 pg/ml (Ορός) 477 pg/ml (Ηπαρίνη) 482 pg/ml (SST) Σύγκριση μεθόδων: Η εξέταση συγκρίθηκε με την Οιστραδιόλη IMMULITE σε 97 δείγματα. (Εύρος συγκεντρώσεων: περίπου 20 ως 1800 pg/ml. Βλ. Σχετικά γραφικά.) Η εξίσωση γραμμικής παλινδρόμησης είναι: (IML 2000) = 0,90 (IML) + 18 pg/ml r = 0,990 Μέσοι όροι: 337 pg/ml (IMMULITE 2000) 354 pg/ml (IMMULITE) Τεχνική Υποστήριξη Για τεχνική υποστήριξη αποταθείτε στον αντιπρόσωπο της χώρας σας. www.siemens.com/diagnostics Το Σύστημα Ποιότητας της Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. είναι επικυρωμένο με ISO 13485:2003. Polski IMMULITE 2000 Estradiol Przeznaczenie: Test diagnostyczny in vitro dla analizatorów systemów IMMULITE 2000 do ilościowego oznaczania w surowicy poziomu estradiolu (17β-estradiol, E2). Test jest przydatny w różnicowej diagnostyce zahamowania miesiączki oraz monitorowaniu owulacji naturalnej i indukowanej w technologii wspomaganego rozrodu (ART). Numery katalogowe: L2KE22 (200 testów), L2KE26 (600 teststów) Kod testu: E2 Kolor: Ciemno różowy Wprowadzenie Estradiol jest hormonem steroidowym o masie molekularnej 272,3 daltonów krążącym w przeważającej części w formie związanej z białkami. Oprócz estradiolu do naturalnych hormonów steroidowych zaliczamy także estron, estriol oraz ich koniugaty. Naturalne estrogeny są hormonami wydzielanymi głównie przez pęcherzyk jajnikowy, ale także przez nadnercza, ciałko żółte, łożysko, a u mężczyzn przez jądra. Egzogenne estrogeny (naturalne i syntetyczne) posiadają w różnym nasileniu działanie farmakologiczne charakterystyczne dla estrogenow naturalnych. Hormony estrogenowe są wydzielane z różną intensywnością podczas cyklu menstruacyjnego w okresie aktywności jajników. Gonadotropiny przedniego płata przysadki regulują wydzielanie hormonów jajnika, estradiolu i progesteronu; podwzgórzowa kontrola produkcji gonadotropin przez przysadkę jest z kolei regulowana przez stężenie estradiolu i progesteronu w osoczu. Złożony system sprzężeń zwrotnych prowadzi do cyklicznego występowania zjawiska owulacji i miesiączkowania. W czasie ciąży jedynym źródłem estrogenów staje się łożysko. W czasie menopauzy jajnikowa sekrecja estrogenów obniża się w różnym zakresie. IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 17

Zasada testu IMMULITE 2000 Estradiol jest chemiluminescencyjnym, kompetycyjnym, immunoenzymatycznym testem fazy stałej. Faza stała (kulka) opłaszczona jest poliklonalnym króliczym przeciwciałem specyficznym dla estradiolu. Faza płynna składa się z fosfatazy alkalicznej (z jelita cielęcego) sprzężonej z estradiolem. Próbka i odczynnik są poddawane inkubacji z opłaszczoną kulką przez 60 minut. W czasie inkubacji estradiol z próbki badanej współzawodniczy z koniugatem estradiolu i enzymu z odczynnika o ograniczoną liczbę miejsc wiążących przeciwciała na kulce. Niezwiązana próbka badana i koniugat enzymu usuwane są przez wirowanie połączone z płukaniem. Na koniec do kuwety reakcyjnej z kulką dodawany jest substrat chemiluminescencyjny, a generowany sygnał jest proporcjonalny do ilości związanego enzymu. Czas inkubacji : 1 60 minut Czas do pierwszego wyniku: 65 minut Preparatyka próbek Lipemia może wpływać na wynik oznaczenia. Zalecane jest klarowanie próbek lipemicznych przez ultrawirowanie. Hemoliza próbki może świadczyć o nieprawidłowym postępowaniu z próbką na etapie przedlaboratoryjnym. Fakt ten należy brać pod uwagę przy interpretacji wyników. Odwirowanie próbki krwi przed zakończeniem wykrzepiania może spowodować, że w supernatancie pozostanie fibryna stanowiąca przyczynę fałszywych wyników. Przed przystąpieniem do wirowania należy mieć pewność, że skrzep jest ostatecznie uformowany. Niektóre próbki, a zwłaszcza pochodzące od osób poddanych leczeniu antykoagulantami, wymagają dłuższego czasu na wytworzenie skrzepu. W zależności od producenta probówki do pobierania krwi mogą różnie wpływać na uzyskiwane wyniki. Istotne jest tworzywo i czynniki dodatkowe jak żel lub bariery oddzielające skrzep, aktywatory krzepnięcia oraz antykoagulanty. Wpływ wszystkich możliwych wariantów probówek na test IMMULITE 2000 Estradiol nie został określony. Informacje o przetestowanych wariantach podano w akapicie Wpływ materiału na oznaczenie. Wymagana objętość próbki : 25 µl surowicy Przechowywanie: 2 dni w 2 8 C lub 2 miesiące w 20 C. 18 Rozcieńczenie: Zalecane jest, aby próbki w których wynik przekraczał 1200 pg/ml były rozcieńczane i mierzone powtórnie. Wartość o znaczeniu klinicznym może być uzyskana bez rozcieńczenia, lecz wynik jest dokładniejszy, gdy wartość plasuje się w czulszym zakresie testu. Ostrzeżenia i warunki wstępne Test diagnostyczny in vitro. Odczynniki: Przechowywać w 2 8 C. Usuwać zgodnie z instrukcją. Zachowywać środki ostrożności konieczne przy pracy z materiałem potencjalnie zakaźnym. W materiałach pochodzących z krwi ludzkiej wykluczono reaktywność w kierunku syfilisu, obecność przeciwciał anty-hiv1/2, HBsAg i przeciwciał anty-hcv. Niektóre składniki zestawu mogą zawierać azydek sodu w stężeniu mniejszym niż 0,1 g/dl, użyty jako konserwant. Wykorzystane odczynniki usuwać w dużej ilości wody, by zapobiec osadzaniu azydku sodu w rurach miedzianych lub ołowianych, co może doprowadzić do wytworzenia potencjalnie wybuchowych azydków tych metali. Substrat chemiluminescencyjny: Unikać zanieczyszczenia i chronić przed bezpośrednim światłem słonecznym (patrz ulotka). Woda: Dejonizowana lub destylowana. Elementy zestawu Elementy zestawu tworzą całość. Kody na wewnętrznych pokrywach pudełka są niezbędne do wykonania oznaczenia. Estradiol Pojemnik z Kulkami (L2E212) Z kodem kreskowym. 200 kulek opłaszczonych króliczym przeciwciałem poliklonalnym anty-estradiol. Stabilne w 2 8 C do daty ważności. L2KE22: 1 opakowanie L2KE26: 3 opakowania 18 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Estradiol Klin z Odczynnikiem (L2E2A2) Z kodem kreskowym. 11,5 ml alkalicznej fosfatazy (izolowanej z jelita cieląt) sprzęgniętej z estradiolem w buforze z konserwantem. Stabilny w 2 8 C do daty ważności. L2KE22: 1 klin L2KE26: 3 kliny Przed użyciem zerwać taśmę zabezpieczającą nie uszkadzając kodu kreskowego. Usunąć foliową uszczelką komór odczynnikowych. Wsunąć przesuwne zamknięcie komór w prowadnice w pokrywie klina. Estradiol Kalibratory Zestawu (LE2L, LE2H) Dwie fiolki (niski i wysoki) zawierające po 2,0 ml estradiolu w matrycy preparowanej surowicy ludzkiej z konserwantem. Po otwarciu stabilne przez 30 dni w 2 8 C lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2KE22: 1 zestaw L2KE26: 2 zestawy Przed wykonaniem kalibracji umocować na probówkach odpowiednie nalepki z kodem kreskowym (dostarczane z zestawem) rozpoznawane przez czytnik kodów kreskowych aparatu. Materiały dostarczane oddzielnie Rozcieńczalnik próbek Estradiol (L2E2Z) Do automatycznego rozcieńczania próbek. Jedna fiolka koncentrowanej, gotowej do użycia, preparowanej surowicy ludzkiej (z konserwantem) zawierającej nieoznaczalne lub niskie stężenia estradiolu. Po otwarciu stabilny w 2 8 C przez 30 dni lub 6 miesięcy w 20 C (rozpipetować). L2E2Z: 25 ml Wraz z rozcieńczalnikiem dostarczane są nalepki z kodami kreskowymi. Nalepkę umieścić na probówce (16 100 mm), by umożliwić jej rozpoznanie przez czytnik kodów aparatu. L2E2Z: 3 labels L2SUBM: Substrat chemiluminescencyjny L2PWSM: Roztwór płuczący L2KPM: Roztwór czyszczący L2RXT: Probówki reakcyjne (jednorazowe) L2ZT: 250 probówek do rozcieńczania próbek 16 100 mm L2ZC: 250 korków do probówek na rozcieńczalnik E2TC: Kontrola estradiolu (jeden poziom) Ponadto niezbędne woda destylowana lub dejonizowana, probówki, kontrole Procedura oznaczenia Przestrzeganie procedur dotyczących utrzymania aparatu, zawartych w Podręczniku operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000 poprawia charakterystykę uzyskiwanych wyników. Procedury: przygotowania aparatu, ustawień aparatu, przygotowania i rozcieńczania próbek, rekalibracji, oznaczenia i kontroli jakości zgodnie z Podręcznikiem operatora do obsługi systemów IMMULITE 2000. Zalecany odstęp pomiędzy rekalibracjami: 2 tygodnie Próbki kontrolne: Przestrzegać przepisów państwowych i wymogów kontrolnych w zakresie częstotliwości kontroli jakości. Stosować kontrole lub pule surowic co najmniej o niskim i wysokim poziomie estradiolu. Siemens Healthcare Diagnostics zaleca stosowanie dostępnych w handlu próbek kontroli jakości o co najmniej 2 poziomach (niskim i wysokim). Uznaje się, że test przebiega prawidłowo, gdy uzyskane wartości analitu plasują się w przyjętym dla Kontroli zakresie dla danego analizatora lub w zakresie opracowanym w ramach wewnątrzlaboratoryjnego systemu zapewnienia jakości. Oczekiwane wartości Opierając się na podobieństwie z testem IMMULITE Estradiol (patrz: Porównanie metod) można oczekiwać, że zakresy wartości referencyjnych dla obu testów będą identyczne. Wartości referencyjne opracowano przy użyciu testu IMMULITE Estradiol w oparciu o badania międzynarodowe. Badaniami objęto zdrowe kobiety w wieku 16 44 lat, którym pobierano krew codziennie w czasie jednego pełnego cyklu owulacyjnego (patrz: Wykres cyklu). IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 19

Fazy cyklu owulacyjnego n* Mediana Folikularna 54 (708) Folikularna dzień 2-3 Owulacja ±3 dni 54 (108) 54 (378) Lutealna 54 (604) Estradiol, pg/ml Środkowe 95% 42 No 160 31 No 84 133 34 400 93 27 246 * liczba obiektów (całkowita liczba wyników) Fazy cyklu owulacyjnego n* Mediana Folikularna Folikularna dzień 2-3 Owulacja ±3 dni Lutealna 54 (708) 54 (108) 54 (378) 54 (604) Estradiol, pmol/l Środkowe 95% 154 No 587 114 No 308 489 124 1468 343 101 905 * liczba obiektów (całkowita liczba wyników) Inne badania przy użyciu testu IMMULITE Estradiol dały następujące wyniki. Grupa Dorośli n Średnia Mediana Estradiol, pg/ml Środkowe 90% Mężczyźni 50 30,5 29,7 No 56 Kobiety Pomenopauzie bez HTZ Pomenopauzie - HTZ Doustna antykoncep. No - nieoznaczalny 27 No No No 30 27 No No No 93 61 53,2 24,5 No 102 Grupa Dorośli n Średnia Mediana Estradiol, pmol/ml Środkowe 90% Mężczyźni 50 112 109 No 206 Kobiety Pomenopauzie bez HTZ Pomenopauzie - HTZ Doustna antykoncep. No - nieoznaczalny 27 No No No 110 27 No No No 341 61 129 90 No 374 Powyższe wartości należy traktować jako orientacyjne. Każde laboratorium powinno wyznaczyć własne zakresy referencyjne. Ograniczenia Kobiety w ciąży: Należy zachować uwagę przy pomiarze estradiolu u kobiet w ciąży ponieważ odpowiednio wysoki poziom estriolu może zafałszowywać wynik testu. Próbki od noworodków: Test nie został zwalidowany dla tego rodzaju oznaczeń. Reagujące krzyżowo steroidy, w tym estriol, krążące w wysokich stężeniach u noworodków mogą powodować fałszywy wzrost wyników. Przeciwciała heterofilne obecne w surowicy ludzkiej mogą wchodzić w reakcję z immunoglobulinami będącymi reagentami testu immunologicznego, wpływając na przebieg oznaczenia in vitro. [Porównaj: Boscato L.M., Stuart M.C.: Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays Przeciwciała heterofilne - problem wszystkich testów immunologicznych. Clin Chem 1988:34: 27-33]. Wpływ przeciwciał heterofilnych może ujawnić się w oznaczeniach wykonywanych w surowicy osób mających ciągły kontakt ze zwierzętami lub zwierzęcymi produktami krwiopochodnymi, stanowiąc potencjalną przyczynę błędnych wyników. W teście ryzyko interferencji przeciwciał heterofilnych zostało zminimalizowane przez odpowiedni dobór proporcji odczynników, tym niemniej interferencja taka może potencjalnie nastąpić w rzadkich przypadkach. W postępowaniu diagnostycznym wyniki uzyskane tą metodą powinny być z zasady interpretowane w połączeniu z badaniem klinicznym pacjenta, jego historią choroby oraz innymi okolicznościami. 20 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)

Parametry testu Dane charakteryzujące test przedstawiono w tabelach i na wykresach Wyniki podano w pg/ml. (O ile nie podano inaczej, wszystkie wyniki dotyczą próbek surowicy pobranych bez bariery żelowej i substancji przyspieszających krzepnięcie.) Przelicznik: pg/ml 3,671 pmol/l Zakres raportowania: 20 do 2000 pg/ml (73 7342 pmol/l) Test wykazuje zgodność pomiarową z wewnętrznymi standardami wytwarzania dzięki zastosowaniu kwalifikowanych materiałów i metod pomiaru. Czułość analityczna: 15 pg/ml (55 pmol/l) Precyzja: Próbki testowano przez okres 20 dni w duplikatach, dwa razy dziennie, co dało w sumie 40 serii i 80 powtórzeń (Tabela Precyzja). Profil precyzji: W serii badań, które objęły 10 zestawów odczynników o różnych lotach mierzono próbki w całym zakresie pracy testu w 10 lub 20 powtórzeniach w serii (Profil precyzji). Liniowość: Oznaczano próbki poddane kolejnym rozcieńczeniom (Tabela Liniowość). Odzysk: Oznaczano próbki wzbogacane w stosunku objętościowym 1 do 19 roztworami estradiolu o stężeniach, kolejno: 800, 1440 i 4020 pg/ml (Tabela Odzysk). Specyficzność: Przeciwciało stworzone dla pochodnej 6 estradiolu jest wysoce specyficzne w stosunku do estradiolu (Tabela Specyficzność). Bilirubina: Obecność bilirubiny w stężeniu do 200 mg/l nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Hemoliza: Obecność krwinek czerwonych w stężeniu do 30 μl/ml nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Lipemia: Obecność trójglicerydów w ilości do 3000 mg/dl nie wpływa na wynik w charakterystycznym dla testu zakresie precyzji. Wpływ materiału na oznaczenie: Wpływ rodzaju próbki na oznaczenie określano u 33 wolontariuszy w próbkach krwi pobranych do robówek zwykłych, z heparyną oraz z barierą żelową SST próżniowego systemu Becton-Dickinson. Próbki wzbogacono estradiolem tak, aby pokryć cały zakres kalibracji i zmierzono stężenie estradiolu przy użyciu testu IMMULITE 2000 Estradiol. Uzyskano następujące równania regresji liniowej: (Heparyna) = 0,98 (Surowica) + 11 pg/ml r = 0,996 (SST) = 0,98 (Zwykła probówka) + 15 pg/ml r = 0,994 Średnie: 476 pg/ml surowica 477 pg/ml heparyna 482 pg/ml SST Porównanie metod: Test pownywano z wynikami uzyskanymi przy zastosowaniu testu IMMULITE Estradiol w grupie 97 próbek (od około 20 do 1800 pg/ml). Otrzymano następujące równanie regresji liniowej: (IML 2000) = 0,90 (IML) + 18 pg/ml r = 0,990 Średnie: 337 pg/ml (IMMULITE 2000) 354 pg/ml (IMMULITE) Pomoc techniczna i konsultacje Krajowy Dystrybutor udziela wszechstronnej pomocy technicznej. www.siemens.com/diagnostics System Kontroli Jakości Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. posiada Certyfikat Jakości ISO 13485:2003. IMMULITE is a trademark of Siemens Healthcare Diagnostics. 2013 Siemens Healthcare Diagnostics. All rights reserved. Origin: UK Siemens Healthcare Diagnostics Products Ltd. Llanberis, Gwynedd LL55 4EL United Kingdom 2013-07-15 PIEL2KE2 6 {25} IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15) 21

Changes in this Edition: cc#eu21838: Removed Siemens control (CON6) from the Kit Components Supplied Separately section. Under Quality Control Samples, added information for quality control frequency, materials, and performance. Understanding the Symbols Understanding the Symbols En English Vysvětlivky symbolů Επεξήγηση των συμβόλων Znaczenie symboli Cz Česky El Ελληνικά Pl Polski The following symbols may appear on the product labeling: / Na štítku výrobku mohou být uvedeny následující symboly: / Τα ακόλουθα σύμβολα ενδέχεται να εμφανίζονται στην επισήμανση του προϊόντος: / Na etykietach produktu mogą pojawiać się poniższe symbole: Symbol Definition En: In vitro diagnostic medical device Cz: Zdravotnický prostředek pro in vitro diagnostiku El: In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Pl: Sprzęt do medycznej diagnostyki in vitro En: Catalog Number Cz: Katalogové číslo El: Αριθμός καταλόγου Pl: Numer katalogowy En: Manufacturer Cz: Výrobce El: Κατασκευαστής Pl: Producent En: Authorized Representative in the European Community Cz: Autorizované zastoupení v Evropské unii El: Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ευρωπαϊκή Κοινότητα Pl: Autoryzowany przedstawiciel w Unii Europejskiej En: CE Mark Cz: CE značka El: Σήμανση CE Pl: Znak CE Symbol Definition En: CE Mark with identification number of notified body Cz: CE značka s identifikačním číslem notifikovaného orgánu El: Σήμανση CE με αριθμό αναγνώρισης του φορέα πιστοποίησης Pl: Znak CE z numerem identyfikacyjnym jednostki notyfikowanej En: Consult instructions for use Cz: Postupujte podle návodu k použití El: Συμβουλευτείτε τις οδηγίες λειτουργίας Pl: Zapoznać się z instrukcją użycia En: Caution! Potential Biohazard Cz: Pozor! Potenciální biohazard El: Πρoσοχή! Δυνητικός βιολογικός κίνδυνος Pl: Uwaga! Potencjalne zagrożenie biologiczne En: Temperature limitation (2 8 C) Cz: Teplotní rozsah (2 8 C) El: Περιορισμός θερμοκρασίας (2 8 C) Pl: Zakres temperatury (2 8 C) En: Upper limit of temperature ( -20 C) Cz: Horní teplotní limit ( -20 C) El: Ανώτερο όριο θερμοκρασίας ( -20 C) Pl: Górny zakres temperatury ( -20 C) En: Lower limit of temperature ( 2 C) Cz: Spodní teplotní limit ( 2 C) El: Κατώτερο όριο θερμοκρασίας ( 2 C) Pl: Dolny zakres temperatury ( 2 C) En: Do not freeze (> 0 C) Cz: Nezmrazovat (> 0 C) El: Μην καταψυχετε (> 0 C) Pl: Nie zamrażać (> 0 C) En: Do not reuse Cz: Pro jednorázové použití El: Μην κάνετε επαναληπτική χρήση Pl: Nie używać powtórnie 22 IMMULITE 2000 Estradiol (PIEL2KE2-6 {25}, 2013-07-15)