PASTOREX STAPH-PLUS 5 x x Οκιμη Συγκολλησησ Λατεξ για Την Ταυτοποιηση Του Staphylococcus Aureus

Transcript

1 PASTOREX STAPH-PLUS 5 x x Οκιμη Συγκολλησησ Λατεξ για Την Ταυτοποιηση Του Staphylococcus Aureus /01 1- ΠΡΟΒΛΕΠΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Το PASTOREX STAPH-PLUS συνιστά µία δοκιµή ταχεία συγκόλλησης για την ταυτόχρονη ανίχνευση της συγγένειας ινωδογόνων (παράγοντας συγκόλλησης), πρωτεϊνης A και καψικών πολυσακχαριτών του Staphylococcus aureus. 2- ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΝΗΜΕΡΩΤΙΚΕΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ Το Staphylococcus aureus αποτελεί έναν από τους συχνότερα απαντώµενους σε κλινικά δείγµατα παθογόνους οργανισµούς. Η ταχεία διάκριση µεταξύ αυτών των ειδών και άλλων, λιγότερο λοιµογόνους, οι σταφυλόκοκκοι, έχουν ιδιαίτερη σηµασία για την κατάλληλη διαχείριση του ασθενούς. Η δοκιµή για την ανίχνευση παραγωγής ελεύθερων ενζύµων πήξης επιτρέπει την ταυτοποίηση του Staphylococcus aureus (11, 12). Παρ' όλα αυτά, η συγκεκριµένη δοκιµή διαρκεί 4 έως 24 ώρες και το πλάσµα ενδέχεται να ποικίλει από παρτίδα σε παρτίδα, γεγονός το οποίο µπορεί να επηρεάσει την αντίδραση (16). Τα αντιδραστήρια συγκόλλησης που έχουν αναπτυχθεί επιτρέπουν την ταχύτερη και πιο αξιόπιστη ανίχνευση του Staphylococcus aureus (3). Στις συγκεκριµένες δοκιµές συγκόλλησης χρησιµοποιείται λάτεξ ευαισθητοποιηµένο µε ινωδογόνο και IgG, προκειµένου να ανιχνεύσουν τον παράγοντα συγκόλλησης και την πρωτεΐνη A, τα οποία είναι βιοχηµικά χαρακτηριστικά του S. aureus. Ωστόσο, έχει παρατηρηθεί ότι συγκολλούνται µε αυτές τις δοκιµές συγκόλλησης ορισµένα στελέχη του Staphylococcus aureus (κυρίως τα ανθεκτικά στη µεθικιλλίνη στελέχη) δεν (15). Μία µελέτη αυτών των στελεχών έδειξε ότι όλα διαθέτουν καψικό πολυσακχαρίτη (4). Ως εκ τούτου, υπάρχει πιθανότητα η κάψα του πολυσακχαρίτη η οποία, υπό ορισµένες συνθήκες περικλείει όλα τα βακτήρια (άµεσα δείγµατα, καλλιέργεια αποµόνωσης και βακτηρικακοί κλώνοι), να καλύπτει την πρωτεΐνη A και τον παράγοντα συγκόλλησης, αποτρέποντας έτσι τη συγκόλληση των σωµατιδίων του λάτεξ που είναι ευαισθητοποιηµένα µε ινωδογόνο και IgG. 3- ΒΑΣΙΚΗ ΑΡΧΗ The PASTOREX STAPH-PLUS έχει σχεδιασθεί έτσι ώστε να επιτρέπει την ταυτόχρονη ανίχνευση των τριών ακόλουθων συνιστωσών: 1) του παράγοντα συγγένειας ινωδογόνων ο οποίος αποκαλείται και δεσµευµένο ένζυµο πήξης ή παράγοντας συγκόλλησης 2) της πρωτεΐνης A η οποία έχει συγγένεια προς το κρυσταλλώσιµο κλάσµα (Fc) των γ-ανοσοσφαιρινών (IgG) και 3) των καψικών πολυσακχαριτών του Staphylococcus aureus. Το αντιδραστήριο συνίσταται σε σωµατίδια λάτεξ ευαισθητοποιηµένα µε ινωδογόνο και IgG, καθώς και µε ειδικά µονοκλωνικά αντισώµατα (πατέντα Ινστιτούτου Pasteur ) που δηµιουργήθηκαν κατά των καψικών πολυσακχαρίτων του Staphylococcus aureus (1, 5, 6, 8, 10). Ο συνδυασµός του ινωδογόνου, του IgG και των αντι-καψικών µονοκλωνικών αντισωµάτων στο ίδιο αντιδραστήριο καθιστά εφικτή την αναγνώριση των άκρως ενσωµατωµένων στελεχών, καθώς και των ελαφρώς ενσωµατωµένων στελεχών. Στα άκρως ενσωµατωµένα στελέχη, τα αντι-καψικά αντισώµαταπολυσακχαρίτη συγκολλούνται µε τα βακτήρια. Τα στελέχη που έχουν χάσει την κάψα του πολυσακχαρίτη, τα βακτήρια συγκολλούνται µε το ινωδογόνο και τα IgG. Τα κλάσµατα καλλιέγειας του Staphylococcus aureus αναµιγνύονται µε το λάτεξ επάνω στην αντικειµενοφόρο πλάκα. Μετά από την πλήρη ανάµιξη, η αντικειµενοφόρος πλάκα αξιολογείται µε το µάτι για παρουσία συγκόλλησης, η οποία καταδεικνύει την παρουσία οργανισµών του Staphylococcus aureus. 4- ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΗ 1. PASTOREX STAPH-PLUS, κιτ 50 δοκιµών, κωδικός οκιµή λάτεξ: 1 σταγονομετρική φιάλη που περιέχει 1 ml ερυθρού λάτεξ ευαισθητοποιημένο με διάλυμα βόειος ορού IgG και μονοκλωνικά αντισώματα έναντι των καψικών πολυσακχαριτών του Staphylococcus aureus. Συντηρητικό : <1.5 % ProClin 300. Αρνητικός µάρτυρας: 1 σταγονομετρική φιάλη που περιέχει 1 ml αρνητικού μάρτυρα ερυθρού λάτεξ ευαισθητοποιημένο με διάλυμα βόειας αλβουμίνης..συντηρητικό : <1.5 % ProClin πλακίδια συγκόλλησης µίας χρήσης 150 ράβδους 2. PASTOREX STAPH-PLUS, κιτ 5 x 50 δοκιµών, κωδικός οκιµή λάτεξ: αντιδραστήριο δοκιµής, 5 σταγονοµετρικές φιάλες (1 ml). Αρνητικός µάρτυρας: αρνητικός µάρτυρας, 5 σταγονοµετρικές φιάλες (1 ml). Πλακίδια συγκόλλησης µίας χρήσης, 4 x 16 Ράβδους, 3 x 100 1

2 5- ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ Από τη στιγµή που ανοίγονται, όλα τα αντιδραστήρια παραµένουν σταθερά έως την ηµεροµηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα, εφόσον αποθηκεύονται στους 2 έως 8 C απουσία µικροβιακής µόλυνσης. Αποθηκεύστε τις φιάλες αντιδραστηρίων λάτεξ σε όρθια στάση. ΤΑ ΑΝΤΙ ΡΑΣΤΗΡΙΑ ΛΑΤΕΞ ΕΝ ΠΡΕΠΕΙ ΝΑ ΚΑΤΑΨΥΧΟΝΤΑΙ. 6- ΑΠΑΡΑΙΤΗΤΟ ΑΛΛΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΟ ΥΛΙΚΟ Ράβδος για συλλογή βακτηριακών αποικιών. οχείο απολύµανσης ή αυτόκλειστη σακούλα αποστείρωσης για την απόρριψη των χρησιµοποιηµένων πλακιδίων. 7- ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ To Pastorex Staph-plus προορίζεται αποκλειστικά για την επιβεβαίωση της καλλιέργειας και δεν πρέπει να χρησιµοποιείται σε άµεσα κλινικά δείγµατα. Η ποιότητα των αποτελεσµάτων εξαρτάται από την αυστηρή συµµόρφωση προς τις Ορθές Εργαστηριακές Πρακτικές. Όλα τα αντιδραστήρια και το δείγµα πρέπει να χρησιµοποιούνται σε θερµοκρασία µεταξύ 18 και 30 C. Μην αγγίζετε την επιφάνεια αντίδρασης των πλακιδίων συγκόλλησης. Αναδεύετε τις φιάλες του λάτεξ πριν από τη χρήση. Σκουπίζετε το επιστόµιο της σταγονοµετρικής φιάλης που περιέχει το αντιδραστήριο προκειµένου να λάβετε σωστά βαθµονοµηµένες σταγόνες. Κρατάτε τη φιάλη αντιδραστηρίου κατακόρυφα για να αποθέσετε τις σταγόνες. Χρησιµοποιείτε τις πλαστικές ράβδους ανάδευσης που παρέχονται στο κιτ για να αναµειγνύετε το αντιδραστήριο λάτεξ και τις βακτηριακές αποικίες. Μην χρησιµοποιείτε ξύλινες ράβδους. Σε κάθε αντίδραση αλλάζετε τον αναδευτήρα. Απορρίπτετε όλα τα υλικά µίας χρήσης που χρησιµοποιήσατε σε αυτόκλειστο κάδο απορριµµάτων ή σε λουτρό απολύµανσης. Ο ΗΓΙΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΥΓΙΕΙΝΗ ΚΑΙ ΤΗΝ ΑΣΦΑΛΕΙΑ Ακολουθείτε πάντα τις ισχύουσες τεχνικές και οδηγίες προφύλαξης σχετικά με την προστασία από μικροβιολογικούς κινδύνους. Προσοχή: Τα συγκεκριμένα αντιδραστήρια περιέχουν ProClin 300 < 1.5%. Για συστάσεις αναφορικά με τους κινδύνους και τις προφυλάξεις που σχετίζονται με κάποια χημικά συστατικά αυτού του κιτ εξέτασης, ανατρέξτε στα εικονογραφήματα που αναφέρονται στις ετικέτες και στις πληροφορίες που παρέχονται στο τέλος των οδηγιών χρήσης. Το Δελτίο Δεδομένων Ασφαλείας διατίθεται στη διεύθυνση 8- ΙΑ ΙΚΑΣΙΑ 1) ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑ ΕΙΓΜΑΤΩΝ Τα δείγµατα που χρησιµοποιούνται µε το κιτ αυτό πρέπει να είναι καθαρά και πρόσφατα. Τα µέσα αποµόνωσης ή ισοδύναµα µέσα που συνιστώνται είναι τα ακόλουθα: Μέσα άγαρ Trypto-casein-soy agar Columbia agar + αίµα προβάτου Columbia agar Blood agar Mannitol salt agar Μέσα Baird-Parker µε πρόσθετες ουσίες MRSASelect Υποβάλλετε τους οργανισµούς της καλλιέργειας, σε χρώση κατά Gram και σε δοκιµή καταλάσης. Οι αποικίες οι οποίες έχουν υποβληθεί σε δοκιµή µε το αντιδραστήριο PASTOREX STAPH-PLUS πρέπει να είναι κόκκοι θετικοί κατά Gram οι οποίοι είναι θετικοί στην καταλάση. 2) ΑΝΤΙ ΡΑΣΗ ΣΥΓΚΟΛΛΗΣΗΣ 1. Οµοιογενοποιήστε καλά τα αντιδραστήρια λάτεξ ανακινώντας τα. Εάν είναι απαραίτητο, χρησιµοποιήστε αναδευτήρα. 2. Αποθέστε µία σταγόνα του υπό δοκιµή αντιδραστηρίου λάτεξ σε έναν από τους κύκλους του πλακιδίου συγκόλλησης. 3. Αποθέστε µία σταγόνα αρνητικού µάρτυρα λάτεξ σε έναν άλλο κύκλο. 4. Πάρτε 1 έως 3 θετικές κατά Gram, θετικές στην καταλάση, αποικίες µε ράβδο ή πλαστικό αναδευτήρα και δηµιουργήστε γαλάκτωµα σε µία σταγόνα λάτεξ επί 10 δευτερόλεπτα. 5. Επαναλάβετε το βήµα 4 µε το αρνητικό αντιδραστήριο λάτεξ. 6. Οµοιογενοποιήστε περιστρέφοντας ελαφρά το πλακίδιο. Τα αποτελέσµατα πρέπει να αναγνωσθούν εντός 30 δευτερολέπτων από την έναρξη της περιστροφής του πλακιδίου. 7. Αξιολογήστε τα αποτελέσµατα σύµφωνα µε τα ακόλουθα κριτήρια και, στη συνέχεια, απορρίψτε το πλακίδιο σε δοχείο απολύµανσης. Μην χρησιµοποιείτε εκ νέου το πλακίδιο. 2

3 9- ΕΡΝΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Θετική αντίδραση Ένδειξη θετικής αντίδρασης αποτελεί ο σχηµατισµός συσσωµατωµάτων µόνο µε το υπό δοκιµή αντιδραστήριο, ορατών µε γυµνό µάτι υπό κανονικό φωτισµό εντός 30 δευτερολέπτων από την έναρξη της περιστροφής του πλακιδίου. Τα συσσωµατώµατα των σωµατιδίων του λάτεξ ενδέχεται να ποικίλουν σε µέγεθος σε και έχουν έντονο ή ασθενές ροζ φόντο. Αργή και ασθενής συγκόλληση µπορεί να αποτελεί ένδειξη µη ειδικής συγκόλλησης. Αρνητική αντίδραση Σε µία αρνητική αντίδραση, το εναιώρηµα δεν παράγει συσσωµατώµατα και διατηρεί την γαλακτώδη µορφή του. Μη ερµηνεύσιµα αποτελέσµατα Ένα µη ερµηνεύσιµο αποτέλεσµα αντιστοιχεί σε συγκόλληση του εναιωρήµατος µε τον αρνητικό µάρτυρα λάτεξ. Σε αυτή την περίπτωση, προσδιορίστε το αποτέλεσµα χρησιµοποιώντας άλλη µέθοδο όπως για παράδειγµα τη δοκιµή για τον έλεγχο της παρουσίας ελευθέρων ενζύµων πήξης και θερµοσταθερής DNAse. 10- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΤΗΣ ΟΚΙΜΗΣ Αξιολογήστε το αντιδραστήριο λάτεξ κάθε φορά που το χρησιµοποιείτε επαληθεύοντας την απουσία συγκόλλησης καθώς αποθέτετε το λάτεξ στο πλακίδιο. Το λάτεξ πρέπει να υποβάλλεται τακτικά σε δοκιµές µε ήδη ταυτοποιηµένα στελέχη του Staphylococcus aureus και του Staphylococcus epidermidis. Το αντιδραστήριο λάτεξ πρέπει να εµφανίζει συγκόλληση µε το Staphylococcus aureus και απουσία συγκόλλησης µε το Staphylococcus epidermidis. Ο αρνητικός µάρτυρας λάτεξ πρέπει να δεν εµφανίζει συγκόλληση µε αµφότερους τους µικροοργανισµούς. 11- ΕΛΕΓΧΟΣ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΤΟΥ ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗ Όλα τα αντιδραστήρια παρασκευάζονται σύµφωνα µε τις διαδικασίες του συστήµατος ελέγχου ποιότητας που εφαρµόζουµε, από την παραλαβή των πρώτων υλών έως την τελική εµπορευµατοποίηση του προϊόντος. Κάθε παρτίδα υπόκειται σε διαδικασίες ελέγχου ποιότητας και διατίθεται στην αγορά µόνο εφόσον ικανοποιεί τα προκαθορισµένα κριτήρια αποδοχής. Τα αρχεία που σχετίζονται µε την παραγωγή και τον έλεγχο κάθε παρτίδας τηρούνται εντός της εταιρίας Bio-Rad. 12- ΕΠΙ ΟΣΕΙΣ Οι επιδόσεις του PASTOREX STAPH-PLUS έχουν αξιολογηθεί σε αρκετά διαφορετικά εργαστήρια (2, 13, 14). Με το κιτ υποβλήθηκαν σε δοκιµή 440 στελέχη του S. aureus και 138 στελέχοι σταφυλόκοκκου διαφορετικά από αυτά του S. aureus. Η καλλιέργεια ταυτοποίησης διεξήχθη χρησιµοποιώντας χρώση κατά gram, δραστικότητα καταλάσης και δοκιµαστικό σωλήνα ενζύµων πήξης. Τα αποκλίνοντα δείγµατα υποβλήθηκαν ακολούθως σε δοκιµή µέσω βιοχηµικών αναλύσεων και σε εναλλακτική δοκιµή ταχείας συγκόλλησης του εµπορίου. Τα στελέχη του S. aureus ελέγχθηκαν επίσης για επιδεκτικότητα στη µεθικιλλίνη. Τα αποτελέσµατα της δοκιµής ευαισθησίας του ανθεκτικού στη µεθικιλλίνη S. aureus (MRSA) και του ευαίσθητου στη µεθικιλλίνη S. aureus (MSSA), καθώς και το σύνολο των αποτελεσµάτων για όλους τους Staphylococcus aureus, αναφέρονται στον Πίνακα 1. Τα αποτελέσµατα της ειδικότητας της δοκιµής των στελεχών του σταφυλόκοκκου, διαφορετικών από αυτά του S. aureus, αναφέρονται στον Πίνακα 2. Πίνακας 1 Επιδόσεις του Pastorex STAPH-PLUS σε κλάσµατα MRSA και MSSA MRSA MSSA Σύνολο S. aureus * αποκλείσθηκε ένα µη ερµηνεύσιµο αποτέλεσµα Σύνολο Θετικά Αρνητικά Σχετική ευαισθησία 217 * % % 439 * % S. aureus ανθεκτικό στην µεθικιλλίνη (MRSA) Όπως αναφέρεται στον Πίνακα 1, 217 από 217 σαφώς προσδιορισµένα κλάσµατα MRSA ταυτοποιήθηκαν µε το κιτ PASTOREX STAPH-PLUS δεόντως. Η ευαισθησία του PASTOREX STAPH-PLUS για MRSA εκτιµήθηκε στο 100%, αποκλείοντας τα µη ερµηνεύσιµα αποτελέσµατα τα οποία αντιπροσωπεύουν το 0,4% των στελεχών που αναλύθηκαν. S. aureus ευαίσθητο στην µεθικιλλίνη (MSSA) Το σύνολο των 222κλασµάτων MSSA από την καλλιέργεια έδωσαν θετικό αποτέλεσµα µε το PASTOREX STAPH-PLUS, όπως φαίνεται στον Πίνακα 1. Η ευαισθησία που προέκυψε από τον πληθυσµό αυτό των MSSA ήταν 100%. 3

4 Άλλοι σταφυλόκοκκοι Πίνακας 2: Επιδόσεις του Pastorex STAPH-PLUS µε άλλα στελέχη σταφυλόκκοκου Σύνολο Θετικά Αρνητικά Σχετική ειδικότητα Άλλα στελέχη σταφυλόκκοκου % 138 κλάσµατα σταφυλόκοκκου, διαφορετικών από αυτά του S. aureus, περιλαµβανοµένου του S. epidermidis, του S. haemolyticus, του S. hominis, του S. saprophyticus, του S. schleiferi, του S. lugdunensis, και άλλων ειδών, υποβλήθηκαν σε ανάλυση µε το PASTOREX STAPH-PLUS. Για 137 από τα 138 κλάσµατα, προέκυψε αρνητικό αποτέλεσµα, όπως φαίνεται στον Πίνακα 2. Το αποκλίνον αποτέλεσµα προσδιορίσθηκε όπως το S. lugdunensis και βρέθηκε επίσης θετικό µε µία εναλλακτική δοκιµή ταχείας συγκόλλησης. 13- ΟΡΙΑ ΤΗΣ ΙΑ ΙΚΑΣΙΑΣ Έχει αναφερθεί ότι ο Staphylococcus lugdunensis και ο Staphylococcus schleiferi διαθέτουν παράγοντα συγγένειας ινωδογόνων (7,9) και ενδέχεται να αντιδράσουν κατά τις δοκιµές ανίχνευσης του παράγοντα συγκόλλησης, ανάλογα µε τα στελέχη το µέσον από το οποίο λαµβάνονται. Καθώς ορισµένα στελέχη σταφυλόκοκκου είναι γνωστό ότι προκαλούν µη ειδική συσσωµάτωση των σωµατιδίων του λάτεξ, ιδιαίτερα στον Staphylococcus saprophyticus, ο µάρτυρας λάτεξ που παρέχεται µε το κιτ συνιστάται να χρησιµοποιείται µε κάθε οργανισµό που υποβάλλεται σε δοκιµή. Ο Staphylococcus intermedius και ο Staphylococcus hyicus που απαντά στα ζώα, αλλά πολύ σπάνια στον άνθρωπο, ενδέχεται να εµφανίσουν θετική αντίδραση µε τις συνήθεις δοκιµές συγκόλλησης ενζύµων πήξης και, θεωρητικά, ενδέχεται έτσι να αντιδράσουν µε δοκιµές ανίχνευσης του παράγοντα συγγένειας ινωδογόνου. Θα πρέπει να λαµβάνετε υπόψη την πιθανότητα διασταυρούµενων αντιδράσεων. Ορισµένοι στρεπτόκοκκοι διαθέτουν µία πρωτεΐνη µε συγγένεια προς τα Fc-τµήµατα των ανοσοσφαιρίνων και µπορούν ενδεχοµένως να αντιδράσουν µε το λάτεξ. Έχουν αναφερθεί επίσης µη ειδικές αντιδράσεις των τεχνικών µε λάτεξ για διάφορα είδη περιλαµβανοµένου του Escherichia coli και του Candida albicans (17). Η χρώση κατά Gram και η δοκιµή µε καταλάση συνιστάται να διεξάγονται σε προς δοκιµή αποικίες πριν από τη δοκιµή µε λάτεξ. Μπορεί να λάβουν χώρα πλασµατικές αρνητικές αντιδράσεις εάν ο Staphylococcus aureus που αποµονώθηκε δεν παράγει παράγοντα συγγένειας ινωδογόνου (παράγοντα συγκόλλησης), πρωτεΐνη A ή καψικούς πολυσακχαρίτες κατά των οποίων αναπτύχθηκαν τα ειδικά µονοκλωνικά αντισώµατα. Πλασµατικά αρνητικά αποτελέσµατα µπορεί να προκύψουν και από ανεπαρκή εµβολιασµό. 14- ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. Boutonnier A., Nato F., Bouvet A., Lebrun L., Audurier A., Mazie J.C., and Fournier J.M. Direct testing of blood cultures for detection of the serotype 5 and 8 capsular polysaccharides of Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol : Davies S. Detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus: the evaluation of rapid agglutination methods, Br. J. Biomed. Sci., 1997, 54: Esserts I., and Radebold K. Rapid and reliable identification of Staphylococcus aureus by a latex agglutination test. J. Clin. Microbiol Fournier J.M., Boutonnier A., and Bouvet A. Staphylococcus aureus strains which are not identified by rapid agglutination methods are of capsular serotype 5. J. Clin. Microbiol : Fournier J.M., Bouvet A., Boutonnier A., Audurier A., Goldstein F., Pierre J., Bure A., Lebrun L., and Hochkeppel H.K. Predominance of capsular polysaccharide type 5 among oxacillin-resistant Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol : Fournier J.M., Hannon K., Moreau M., Karakawa W.W., and Vann W.F. Isolation of type 5 capsular polysaccharide from Staphylococcus aureus. Ann. Inst. Pasteur/Microbiol : Freney J., Brun Y., Bes M., Meugnier H., Grimont F., Grimont P.A.D., Nervi C., and Fleurette J. Staphylococcus lugdunensis sp. No. and Staphylococcus schleifer sp. Nov., two species form human clinical specimen. J. Clin. Microbiol : Hochkeppel H.K., Braun D.G., Vischer W., Imm A., Sutter S., Staeubli U., Guggenheim R., Kaplan E.L., Boutonnier A., and Fournier J.M. Serotyping and electron microscopy studies of Staphylococcus aureus clinical isolates with monoclonal antibodies to capsular polysaccharide types 5 and 8. J. Clin. Microbiol : Jean Pierre H., Darbas H., Jean-Roussenq A., and Boyer G. Pathogenicity in T cases of Staphylococcus schleiferi, a recently described species. 10. Karakawa W.W., Fournier J.M., Vann W.F., Arbeit R., Schneerson, R.S. and Robbins. J.B. Method for the serological typing of the capsular polysaccharides of Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol., 1985, 22: Kloos W.E. and Lambe D.W. (1991). Staphylococcus Manual of Clinical Microbiology, 5th Ed. Edited by Balows A., Hausler W.J., Herrmann K.L., Isenberg H.D., and Shadomy J.J. American Society for Microbiology, Washington, D.C., Pages

5 12. Kloos W.E., and Scleifer K.H. Staphylococcus Bergeyís manual of systematic bacteriology. 1986, vol. 2, Luijendijk AD., Alex van Belkum, Verbrugh H., and Kluytmans J. Comparison of Five Tests for Identification of Staphylococcus aureus from Clinical Samples. J. Clin. Microbiol., 1996, 34: Neher C., Allerberger F., Prodinger W. Dierich M.P., Evaluation of commercially available agglutination tests for methicillinresistant. 8 th ECCMID Congress, Lausanne, Ruane P.J., Morgan M.A., Citron D.M., and Mulligan M.E. Failure of rapid agglutination methods to detect oxacillin-resistant Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol : Selepack S.T., and Witebsky F.G. Inoculum size and lot-to-lot variation as significant variables in the tube coagulase test for Staphylococcus aureus. J. Clin. Microbiol., 1985, 22: Kronvall G. A Surface Component in Group A, C, and G Streptococci with Non-Immune Reactivity for Immunoglobulin G. J. Immunology., 1973, vol.11,

6 6

7 Distributed in the USA by Bio-Rad Laboratories Diagnostics Group th Avenue N.E. Redmond, WA For Customer Orders Call : BIORAD For Technical Service Call : BIORAD ( ) Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincaré Marnes-la-Coquette France Tel. : +33 (0) /01 Fax : +33 (0)