Παράγοντας von Willebrand και φλεγμονή

Transcript

1 10o ΠΑΝΕΛΛΗΝΙΟ ΣΥΝΕΔΡΙΟ ΙΑΤΡΙΚΗΣ ΒΙΟΠΑΘΟΛΟΓΙΑΣ Μέγαρο Συνεδριακό Κέντρο Αθηνών, Απριλίου 2018 Παράγοντας von Willebrand και φλεγμονή Δρ Αθανασία Ν. Αγοράστη Ιατρός Βιοπαθολόγος Επιστημονικά Υπεύθυνη Διευθύντρια Αιματολογικού Τμήματος Γενικού Νοσοκομείου Ξάνθης

2 Φλεγμονή & θρόμβωση Η φλεγμονώδης απάντηση και η ενεργοποίηση της πήξης είναι δύο σημαντικές αποκρίσεις της άμυνας του ξενιστή έναντι των λοιμώξεων. J Thromb Haemost 2018 J Thromb Haemost 2017 J Thromb Haemost 2014 Iba & Levy, J Thromb Haemost 2018; 16: / Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15:

3 Ανοσοθρόμβωση Immunothrombosis Οι δύο μηχανισμοί συνεργάζονται με έναν σύνθετο και συγχρονισμένο τρόπο. PAMPs, pathogenassociated molecular pattern / PRP, pattern recognition receptor / HMGB1, high mobility group box 1 Iba & Levy, J Thromb Haemost 2018; 16: , τροποποιημένο Βλάβη του ενδοθηλίου

4 Ανοσοθρόμβωση Immunothrombosis Έτσι, φλεγμονώδη κύτταρα, (όπως μονοκύτταρα, ουδετερόφιλα) μετέχουν στη διαδικασία της θρόμβωσης και αντίστροφα, πρωτεΐνες της αιμόστασης (όπως η θρομβίνη) ή κύτταρα (όπως τα αιμοπετάλια) εμπλέκονται στη φλεγμονώδη απάντηση,. PAMPs, pathogenassociated molecular pattern / PRP, pattern recognition receptor / HMGB1, high mobility group box 1 Iba & Levy, J Thromb Haemost 2018; 16: , τροποποιημένο Βλάβη του ενδοθηλίου

5 Ανοσοθρόμβωση Immunothrombosis. υπογραμμίζοντας την περίπλοκη σύνδεση ανάμεσα στην αιμόσταση και στη φλεγμονή. Έτσι, αναδύθηκε ο όρος «ανοσοθρόμβωση». PAMPs, pathogenassociated molecular pattern / PRP, pattern recognition receptor / HMGB1, high mobility group box 1 Iba & Levy, J Thromb Haemost 2018; 16: , τροποποιημένο Βλάβη του ενδοθηλίου

6 Ο παράγοντας von Willebrand είναι μια γλυκοπρωτεΐνη με σημαντικό, διττό ρόλο στην αιμόσταση. Ο VWF είναι σημαντικός στην πρόσληψη αιμοπεταλίων σε συνθήκες υψηλής διατμητικής τάσης Ο VWF συνεισφέρει στις επιπλοκές της αθηροθρόμβωσης Ο VWF δρα ως μοριακό μέσο μεταφοράς του παράγοντα VIII και ποικίλων άλλων πρωτεϊνών στην κυκλοφορία Ο VWF συνεισφέρει στη θρομβοεμβολική νόσο Ο VWF παρουσιάζει μιτογόνο δραστηριότητα στις λείες μυϊκές ίνες VWF Ο VWF παρουσιάζει προφλεγμονώδη δραστηριότητα στην αποπληξία, στην αθηροσκλήρωση και σε άλλες φλεγμονώδεις καταστάσεις Ο VWF επάγει την απόπτωση των αιμοπεταλίων και των κυττάρων των όγκων VWF: παράγοντας von Willebrand Ο VWF είναι αρνητικός ρυθμιστής της αγγειογένεσης Lenting et al., J Thromb Haemost 2012; 10: , τροποποιημένο

7 Βάσει της πρόσφατης έρευνας, είναι σαφές ότι ο VWF έχει έναν σφαιρικό ρόλο ως πρωτεΐνη και εμπλέκεται σε διάφορες παθολογικές διαδικασίες πέραν της αιμόστασης. Ο VWF συνεισφέρει στις επιπλοκές της αθηροθρόμβωσης Ο VWF είναι σημαντικός στην πρόσληψη αιμοπεταλίων σε συνθήκες υψηλής διατμητικής τάσης Ο VWF δρα ως μοριακό μέσο μεταφοράς του παράγοντα VIII και ποικίλων άλλων πρωτεϊνών στην κυκλοφορία Ο VWF συνεισφέρει στη θρομβοεμβολική νόσο Ο VWF παρουσιάζει μιτογόνο δραστηριότητα στις λείες μυϊκές ίνες VWF Ο VWF παρουσιάζει προφλεγμονώδη δραστηριότητα στην αποπληξία, στην αθηροσκλήρωση και σε άλλες φλεγμονώδεις καταστάσεις Ο VWF επάγει την απόπτωση των αιμοπεταλίων και των κυττάρων των όγκων VWF: παράγοντας von Willebrand Ο VWF είναι αρνητικός ρυθμιστής της αγγειογένεσης Lenting et al., J Thromb Haemost 2012; 10: , τροποποιημένο

8 Σχηματισμός των σωματίων Weibel-Palade (WPBs) Ο σχηματισμός των WPBs εξαρτάται αποκλειστικά από την παρουσία του VWF Η σωληνοειδής δομή των WBPs αντανακλά τον τρόπο με τον οποίο ο VWF είναι διπλωμένος μέσα σε αυτά τα οργανίδια VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Lenting et al, Blood 2015; 125(13): , τροποποιημένο / Springer TA. Blood 2014; 124: , τροποποιημένο

9 Σχηματισμός των σωματίων Weibel-Palade (WPBs) Στα ενδοθηλιακά κύτταρα η βιοσύνθεση του VWF διακρίνεται από μια σειρά διαδοχικών βημάτων που οδηγούν τελικά στην ενσωμάτωσή του στα αποθηκευτικά οργανίδια WBPs. Η σωληνοειδής δομή των WBPs αντανακλά τον τρόπο με τον οποίο ο VWF είναι διπλωμένος μέσα σε αυτά τα οργανίδια Ώριμο WPB εντός ενδοθηλιακού κυττάρου Cryoelectron tomograms & σχηματική παράσταση VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Lenting et al, Blood 2015; 125(13): , τροποποιημένο / Springer TA. Blood 2014; 124: , τροποποιημένο

10 Οι «συγκάτοικοι» του παράγοντα von Willebrand στα σωμάτια Weibel-Palade P-selectin interleukin-8 galectin-1 & galectin-3 (ρυθμιστές της οξείας & χρόνιας φλεγμονής) osteoprotegerin (οστικός μεταβολισμός) IGFBP7 (insulin-like growth factor-binding protein 7) angiopoietin-2 (αγγειογένεση) CCL2/MCP-1 (chemokine C-C motif ligand 2 / monocyte chemoattractant protein 1 VWF, παράγοντας von Willebrand / FVIII, παράγοντας VIII / OPG, osteoprotegerin / IGFBP7, Insulin like Growth Factor Binding Protein 7 / CCL2/MCP-1, chemokine C-C motif Ligand 2 monocyte chemoattractant protein 1 / Ang-2, angiopoietin-2 Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

11 Έκκριση του παράγοντα von Willebrand Τα ενδοθηλιακά κύτταρα απελευθερώνουν το περιεχόμενο των WPBs με έναν συνδυασμό βασικής (κατά κύριο λόγο) και ρυθμιζόμενης έκκρισης. VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Lenting et al, Blood 2015; 125(13): , τροποποιημένο

12 Έκκριση του παράγοντα von Willebrand Ο κυκλοφορούν VWF προέρχεται κυρίως από τυχαίο μηχανισμό συγχώνευσης των WPBs με την πλασματική μεμβράνη (βασική έκκριση) VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Lenting et al, Blood 2015; 125(13): , τροποποιημένο

13 Έκκριση του παράγοντα von Willebrand Μαζική απελευθέρωση των WPBs (ρυθμιζόμενη έκκριση) VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Παράγονται μακρές νηματοειδείς μορφές του VWF που παραμένουν αγκυρωμένες στα ενδοθηλιακά κύτταρα και προσλαμβάνουν αιμοπετάλια. Lenting et al, Blood 2015; 125(13): , τροποποιημένο

14 Το μέγεθος των πολυμερών του VWF ρυθμίζεται από τη μεταλλοπρωτεάση ADAMTS-13 A Disintegrin And Metalloprotease with ThromboSpondin type 1 repeats, 13 Η δομή του VWF ULVWF, ultra large von Willebrand πολυμερή / VWF, παράγοντας von Willebrand Stockschlaeder et al. Blood Coagul Fibrinolysis 2014; 25: , τροποποιημένο

15 Ο παράγοντας von Willebrand ως δείκτης φλεγμονής Τα ενδοθηλιακά κύτταρα, ως αντίδραση στο φλεγμονώδες ερέθισμα, απελευθερώνουν το περιεχόμενο των WPBs Βασική κατάσταση (ηρεμία) Φυσιολογικά επίπεδα των: VWF VWF προπεπτίδιο ADAMTS-13 Μη ανιχνεύσιμη παρουσία ενεργού VWF Ενεργοποίηση του ενδοθηλίου (φλεγμονή) επίπεδα VWF VWF προπεπτίδιο (VWFpp) επίπεδα ADAMTS-13 Παρουσία «ενεργού» VWF WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) / VWF: παράγοντας von Willebrand / VWFpp, VWF προπεπτίδιο Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

16 Είναι κλινικά σημαντική η μέτρηση των επιπέδων του VWF στις φλεγμονώδεις καταστάσεις; Τα επίπεδα του VWF είναι αυξημένα σε αμφότερες την οξεία και τη χρόνια φλεγμονή. Η μέτρηση των επιπέδων του VWF δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως δείκτης διάγνωσης και πρόγνωσης της σοβαρότητας της φλεγμονώδους νόσου λόγω χαμηλής ειδικότητας και προγνωστικής αξίας. WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) / VWF: παράγοντας von Willebrand / VWFpp, VWF προπεπτίδιο Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

17 Είναι κλινικά σημαντική η μέτρηση των επιπέδων του VWF στις φλεγμονώδεις καταστάσεις; Ο προσδιορισμός του «ενεργού» VWF φαίνεται να έχει προγνωστική αξία, χωρίς όμως αυτό να έχει τεκμηριωθεί επαρκώς. WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) / VWF: παράγοντας von Willebrand / VWFpp, VWF προπεπτίδιο Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

18 Είναι κλινικά σημαντική η μέτρηση των επιπέδων του VWF στις φλεγμονώδεις καταστάσεις; Η ανισορροπία ανάμεσα στην ADAMTS-13 και τον VWF θεωρείται προγνωστικός δείκτης της σοβαρότητας της φλεγμονώδους απάντησης. WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) / VWF: παράγοντας von Willebrand / VWFpp, VWF προπεπτίδιο Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

19 Ο έμμεσος ρόλος του παράγοντα von Willebrand στη φλεγμονή Ο VWF διαδραματίζει κρίσιμο ρόλο στον σχηματισμό των WPBs Παρουσία VWF Τα WPBs εκκρίνονται και απελευθερώνουν το περιεχόμενό τους περιλαμβανομένων προ- & αντί-φλεγμονωδών μεσολαβητών Η P-selectin εκτίθεται στην κυτταρική επιφάνεια Έλλειψη VWF Δεν σχηματίζονται WPBs Μειωμένη αποθήκευση και έκκριση της P-selectin Οι υπόλοιπες πρωτεΐνες που βρίσκονται στα WPBs (IL-8, Eotaxin-3, παράγοντας H (?) VWF, παράγοντας von Willebrand / WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) / IL-8, interleukin-8 / FH, παράγοντας Η του συμπληρώματος Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

20 Ο έμμεσος ρόλος του παράγοντα von Willebrand στη φλεγμονή Ο VWF παίζει σημαντικό ρόλο στη διατήρηση φυσιολογικών επιπέδων του FVIII Ο FVIII είναι ένας προπηκτικός συμπαράγοντας, ο οποίος αυξάνει τη γένεση θρομβίνης, μια διαδικασία που προάγει τη φλεγμονή. FVIII, παράγοντας VIII Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

21 Μετανάστευση PMNs [x10 5 ] Μετανάστευση PMNs [x10 5 ] Ο άμεσος ρόλος του παράγοντα von Willebrand στη φλεγμονή In vivo μελέτες Ο VWF μεσολαβεί στην πρόσληψη ουδετερόφιλων πολυμορφοπύρηνων στο φλεγμονώδες περιτόναιο Περιτονίτιδα προκαλούμενη από θειογλυκολικό (thioglycolate-induced peritonitis) Ισχυρή μείωση της πρόσληψης των λευκοκυττάρων σε παρουσία πολυκλωνικών anti-vwf αντισωμάτων PMNs, ουδετερόφιλα πολυμορφοπύρηνα / Co-IgG, control rabbit IgG / α-vwf, anti-vwf αντισώματα Petri et al. Blood 2010; 116: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

22 MPO δραστικότητα (%) Αύξηση του βάρους της βιοψίας (%) MPO δραστικότητα (%) Αύξηση του βάρους της βιοψίας (%) Ο άμεσος ρόλος του παράγοντα von Willebrand στη φλεγμονή In vivo μελέτες Μείωση της δερματικής φλεγμονής σε VWF -/- ποντικό Αγγειίτιδα σχετιζόμενη με ανοσοσυμπλέγματα (immune complex-mediated vasculitis) Ερεθιστική εξ επαφής δερματίτιδα (irritative contact dermatitis) Wild type VWF -/- Wild type VWF -/- Διήθηση λευκοκυττάρων Σχηματισμός οιδήματος Διήθηση λευκοκυττάρων Σχηματισμός οιδήματος Hillgruber et al. J Invest Dermatol 2014; 134: 77-86, τροποποιημένο MPO, myeloperoxidase Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017

23 Ο άμεσος ρόλος του παράγοντα von Willebrand στη φλεγμονή In vivo μελέτες Μείωση της δερματικής φλεγμονής με τη χρήση anti-vwf αντισωμάτων Αγγειίτιδα σχετιζόμενη με ανοσοσυμπλέγματα (immune complex-mediated vasculitis) Άμεση εμπλοκή του VWF Ερεθιστική εξ επαφής δερματίτιδα (irritative contact dermatitis) IgG control anti-vwf αντισώματα IgG control anti-vwf αντισώματα IgG control anti-vwf αντισώματα IgG control anti-vwf αντισώματα προσκολλημένα λευκοκύτταρα Hillgruber et al. J Invest Dermatol 2014; 134: 77-86, τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

24 Ο παράγοντας von Willebrand λειτουργεί ως μια επιφάνεια προσκόλλησης των λευκοκυττάρων In vitro μελέτη Ο VWF προσφέρει θέσεις σύνδεσης με υποδοχείς των λευκοκυττάρων που εμπλέκονται στην κύλιση (P-selectin Glycoprotein Ligand-1, PSGL-1) και στη σταθερή προσκόλληση (διάφορες β 2 -integrins: αmβ2, αlβ2, αxβ2). Η θέση σύνδεσης της PSGL-1 βρίσκεται στον Α1 τομέα του VWF. Συνεπώς, προκειμένου να αλληλεπιδράσει ο VWF με τα λευκοκύτταρα μέσω της PSGL-1 απαιτείται να βρίσκεται στην ενεργό μορφή του. Ο VWF αλληλεπιδρά με τους υποδοχείς των λευκοκυττάρων PSGL-1 & β2-integrins PSGL-1 pos CHO κύτταρα προσκολλώνται στον VWF β 2 -integrins, αmβ2 pos L-κύτταρα προσκολλώνται στον VWF VWF, παράγοντας von Willebrand / PSGL-1, P-selectin Glycoprotein Ligand-1 / CHO, Chinese hamster ovary Pendu et al, Blood 2006; 108: , τροποποιημένο

25 Σχετική διαπερατότητα (%) συγκριτικά με PBS Ο παράγοντας von Willebrand μεσολαβεί σε μεταβολές στη διαπερατότητα των αγγείων In vivo μελέτες Ερεθιστική εξ επαφής δερματίτιδα (irritative contact dermatitis) Ενδοεγκεφαλική αιμορραγία (intracerebral hemorrhage) Έλλειψη VWF ή anti-vwf αντισώματα: αγγειακή διαπερατότητα Προσθήκη επιπλέον VWF: αγγειακή διαπερατότητα VWF, παράγοντας von Willebrand / α-vwf, anti-von Willebrand factor / PBS, phosphate -buffered saline / VEGF, vascular endothelial growth factor Hillgruber et al. J Invest Dermatol 2014; 134: 77-86, τροποποιημένο Zhu et al. Sci Rep 2016; 6: 35901, τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

26 Ο παράγοντας Von Willebrand συσσωρεύεται στους ιστούς που φλεγμαίνουν Βιοψία δέρματος ασθενούς με λευκοκυτταροκλαστική αγγειίτιδα (leukocytoclastic vasculitis) LcV VWF Βιοψία δέρματος (ανοσοφθορισμός) Εξωαγγειακή συσσώρευση VWF, ωσάν ο VWF να διεισδύει στις φλεγμονώδεις περιοχές LcV, λευκοκυτταροκλαστική αγγειίτιδα / VWF, παράγοντας von Willebrand Hillgruber et al. J Invest Dermatol 2014; 134: 77-86, τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

27 . Ο παράγοντας von Willebrand λειτουργεί ως μια επιφάνεια προσκόλλησης των λευκοκυττάρων (μονοκύτταρα, ουδετερόφιλα πολυμορφοπύρηνα) Δομή του VWF Ο VWF μεσολαβεί στην κύλιση των λευκοκυττάρων ως συνδέτης του υποδοχέα PSGL-1 (P-selectin Glycoprotein Ligand-1) Ο VWF μεσολαβεί στη σταθερή προσκόλληση των λευκοκυττάρων ως συνδέτης διαφόρων β2-integrins (αmβ2, αlβ2, αxβ2) VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

28 . Ο παράγοντας von Willebrand μεσολαβεί σε μεταβολές στη διαπερατότητα των αγγείων Αυξάνοντας την αγγειακή διαπερατότητα και αποσταθεροποιώντας τον ενδοθηλιακό φραγμό, ο VWF μπορεί να διευκολύνει τη διαπίδυση των λευκοκυττάρων. Ο VWF προάγει την αγγειακή διαπερατότητα συμβάλλοντας έτσι περαιτέρω στην εξαγγείωση λευκοκυττάρων και υγρών. Ρύθμιση της έκφρασης της ενδοθηλιακής tight-junction protein claudin-5 Αλληλεπίδραση με τους υποδοχείς: α v β 3 -integrin (υποδοχέας της vitronectin) & LRP1 (receptor-related protein 1) VWF, παράγοντας von Willebrand Komarova et al. Circ Res 2017; 120: / Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

29 . Ο παράγοντας von Willebrand μεσολαβεί σε μεταβολές στη διαπερατότητα των αγγείων Αυξάνοντας την αγγειακή διαπερατότητα και αποσταθεροποιώντας τον ενδοθηλιακό φραγμό, ο VWF μπορεί να διευκολύνει τη διαπίδυση των λευκοκυττάρων. Ο VWF συσσωρεύεται στον εξωαγγειακό χώρο και πιθανά να αυξάνει την προσκόλληση των λευκοκυττάρων. Η εξωαγγειακή συσσώρευση περιέχει VWF που προέρχεται από το πλάσμα που εξαγγειώθηκε, VWF που απελευθερώθηκε άμεσα από τα ενδοθηλιακά κύτταρα προς τη βασική υπενδοθήλια θεμέλια ουσία, ή αμφότερα. VWF, παράγοντας von Willebrand Komarova et al. Circ Res 2017; 120: / Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

30 Ο άξονας VWF αιμοπεταλιακή γλυκοπρωτεΐνη Ibα (GPIbα) στη μεσολαβούμενη από τον VWF φλεγμονή Μεγάλου μήκους νηματοειδείς VWF σχηματισμοί (UL-VWF) απελευθερώνονται με την έκκριση των WPBs Τα αιμοπετάλια προσκολλώνται επί των νηματοειδών UL-VWF μέσω της GpIbα VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο / Bernardo et al. J Thromb Haemost 2005; 3: , τροποποιημένο Petri et al. Blood 2010; 116: Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

31 Ο άξονας VWF αιμοπεταλιακή γλυκοπρωτεΐνη Ibα (GPIbα) στη μεσολαβούμενη από τον VWF φλεγμονή Τα αιμοπετάλια βοηθούν στην κύλιση και προσκόλληση των λευκοκυττάρων καθώς τμήμα των αιμοπεταλίων είναι ενεργοποιημένο και εκφράζει P-selectin. Τα προσκολλημένα αιμοπετάλια επί των UL-VWF επηρεάζουν την ακεραιότητα του ενδοθηλιακού φραγμού και προάγουν της εξαγγείωση των λευκοκυττάρων. VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο / Bernardo et al. J Thromb Haemost 2005; 3: , τροποποιημένο Petri et al. Blood 2010; 116: Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

32 Μετανάστευση PMNs [x10 5 ] Μετανάστευση PMNs [x10 5 ] Ο άξονας VWF αιμοπεταλιακή γλυκοπρωτεΐνη Ibα (GPIbα) στη μεσολαβούμενη από τον VWF φλεγμονή In vivo μελέτη Περιτονίτιδα προκαλούμενη από θειογλυκολικό (thioglycolate-induced peritonitis) Για τη μεσολαβούμενη από τον VWF πρόσληψη των PMNs απαιτούνται αιμοπετάλια Για τη μεσολαβούμενη από τον VWF πρόσληψη των PMNs απαιτείται η GPIbα VWF, παράγοντας von Willebrand / PMNs, ουδετερόφιλα πολυμορφοπύρηνα / α-gpibα, anti-gpibα / α-vwf, anti-vwf αντισώματα / Co-IgG, control rabbit IgG / depl, εξάλειψη αιμοπεταλίων Petri et al. Blood 2010; 116: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

33 Η ADAMTS-13 ως ρυθμιστής της φλεγμονώδους δραστικότητας του παράγοντα von Willebrand Η μεταλλοπρωτεάση ADAMTS-13 (διασπά τον VWF στον τομέα Α2) είναι ο νέος σύνδεσμος ανάμεσα στη θρόμβωση και τη φλεγμονή. Δομή του VWF VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al, J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

34 # προσκολλημένων λευκοκυττάρων / 250μm Η ADAMTS-13 ως ρυθμιστής της φλεγμονώδους δραστικότητας του παράγοντα von Willebrand Αυξημένη προσκόλληση λευκοκυττάρων σε φλεγμονή μεσεντέριων φλεβιδίων ADAMTS13 -/- ποντικού Οι ultra-large VWF νηματοειδείς σχηματισμοί ενεργούν ως επιφάνειες προσκόλλησης λευκοκυττάρων. Δηλαδή, η παρουσία του VWF στην ενεργή διαμόρφωση φαίνεται ότι προάγει τη φλεγμονώδη απόκριση. Chauhan et al, J Exp Med 2008; 205: , τροποποιημένο VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

35 # προσκολλημένων λευκοκυττάρων / 250μm Η ADAMTS-13 ως ρυθμιστής της φλεγμονώδους δραστικότητας του VWF Αυξημένη προσκόλληση λευκοκυττάρων σε φλεγμονή μεσεντέριων φλεβιδίων ADAMTS13 -/- ποντικού Η ADAMTS-13 ασκεί αντιφλεγμονώδη δράση, καθώς προλαμβάνει την παραμονή των ultra-large VWF πολυμερών στην κυκλοφορία. Την αντιφλεγμονώδη δράση της ADAMTS-13 ανταγωνίζονται μικρά πεπτίδια που απελευθερώνονται από τα ουδετερόφιλα (Human Neutrophils Peptides - HNPs ή α-defencins), ενώ η interleukin-6 περιορίζει τη λειτουργικότητά της. Chauhan et al, J Exp Med 2008; 205: , τροποποιημένο VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

36 Η ADAMTS-13 ως ρυθμιστής της φλεγμονώδους δραστικότητας του VWF Ο ρόλος της ADAMTS-13 στην εξασθένηση του προφλεγμονώδους δυναμικού του VWF επιβεβαιώνεται σε πειραματικά μοντέλα αρτηριοσκλήρωσης και εστιακής εγκεφαλικής ισχαιμίας. VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

37 Η ADAMTS-13 ως ρυθμιστής της φλεγμονώδους δραστικότητας του VWF Σε πολλές φλεγμονώδεις καταστάσεις παρατηρείται αντίστροφη συσχέτιση ανάμεσα στα επίπεδα του VWF (που είναι αυξημένα) και της ADAMTS-13 στο πλάσμα. Η ανισορροπία ανάμεσα στα επίπεδα VWF και ADAMTS-13 συμβάλλει στη σοβαρότητα της φλεγμονώδους απάντησης. VWF, παράγοντας von Willebrand Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

38 Μηχανισμοί της μεσολαβούμενης από τον παράγοντα von Willebrand φλεγμονής Άμεση αλληλεπίδραση μεταξύ VWF και λευκοκυττάρων (χαμηλή διατμητική τάση φλεβική ροή) Αύξηση της αγγειακής διαπερατότητας Εξωαγγειακή συσσώρευση VWF VWF, παράγοντας von Willebrand Οι UL-VWF νηματοειδείς σχηματισμοί προσλαμβάνουν αιμοπετάλια (υψηλή διατμητική τάση αρτηριακή ροή) Τα αιμοπετάλια βοηθούν στην προσκόλληση των λευκοκυττάρων Αύξηση της αγγειακής διαπερατότητας Εξωαγγειακή συσσώρευση του VWF Ρύθμιση από την ADAMTS-13 Denis C. Congress of the International Society of Thrombosis and Haemostasis, Berlin 2017, τροποποιημένο

39 Ο παράγοντας von Willebrand και τα Neutrophil Extracellular Traps Μία επιπλέον σύνδεση του VWF και της φλεγμονής Ένας νέος παίκτης της ανοσοθρόμβωσης είναι τα Neutrophil Extracellular Traps. Κατά τη φλεγμονώδη απόκριση, τα ουδετερόφιλα απελευθερώνουν το πυρηνικό υλικό (DNA & ιστόνες), σχηματίζουν τα Neutrophil Extracellular Traps (NETs) (NETosis) και πυροδοτούν την ενεργοποίηση της πήξης μέσω της ενδογενούς και της εξωγενούς οδού. VWF, παράγοντας von Willebrand / NE, neutrophil elastase / MPO, myeloperoxidase, TF, tissue factor / TFPI, tissue factor pathway inhibitor / XII, παράγοντας XII / FXIIa, ενεργοποιημένος παράγοντας XII / PSGL-1, P-selectin Glycoprotein Ligand-1 / HMGB1, high mobility group box 1 Pfeiler et al, Hematology Education 2015; 9: , τροποποιημένο

40 Ο παράγοντας von Willebrand και τα Neutrophil Extracellular Traps Μία επιπλέον σύνδεση του VWF και της φλεγμονής In vitro πείραμα: το DNA συνδέεται με τις νηματοειδείς μορφές του VWF Ο VWF συνδέεται στα DNA-συστατικά και στις ιστόνες των NETs μέσω του τομέα Α1 VWF, παράγοντας von Willebrand / NETs, neutrophil extracellular traps Grässle et al, Arterioscler Thromb Vasc Biol 2014; 34: , τροποποιημένο / Savchenko et al, Blood 2014; 123: Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

41 Ο παράγοντας von Willebrand & τα Neutrophil Extracellular Traps Μία επιπλέον σύνδεση του VWF και της φλεγμονής In vitro πείραμα: το DNA συνδέεται με τις νηματοειδείς μορφές του VWF Η αλληλεπίδραση VWF / NETs προάγει την αγγειακή φλεγμονή καθώς μπορεί να μεσολαβήσει στην πρόσληψη λευκοκυττάρων και αιμοπεταλίων σε συνθήκες υψηλής διατμητικής τάσης. VWF, παράγοντας von Willebrand / NETs, neutrophil extracellular traps Grässle et al, Arterioscler Thromb Vasc Biol 2014; 34: , τροποποιημένο / Savchenko et al, Blood 2014; 123: Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

42 Ο παράγοντας von Willebrand και τα Neutrophil Extracellular Traps Μία επιπλέον σύνδεση του VWF και της φλεγμονής In vitro πείραμα: το DNA συνδέεται με τις νηματοειδείς μορφές του VWF Έτσι, τα NETs ίσως συμβάλλουν έμμεσα στην υπερβολική φλεγμονώδη απάντηση που μπορεί να συμβεί κατά την ανεξέλεγκτη απελευθέρωσή τους. VWF, παράγοντας von Willebrand / NETs, neutrophil extracellular traps Grässle et al, Arterioscler Thromb Vasc Biol 2014; 34: , τροποποιημένο / Savchenko et al, Blood 2014; 123: Kawecki et al. J Thromb Haemost 2017; 15: , τροποποιημένο

43 Ο παράγοντας von Willebrand ως θεραπευτικός στόχος της αντιφλεγμονώδους αγωγής Η θεραπευτική στόχευση της οδού VWF / ADAMTS-13 στη θρόμβο-φλεγμονή αποτελεί συναρπαστικό πεδίο έρευνας VWF, παράγοντας von Willebrand

44 Ο παράγοντας von Willebrand ως θεραπευτικός στόχος της αντιφλεγμονώδους αγωγής Η θεραπευτική στόχευση της οδού VWF / ADAMTS-13 στη θρόμβο-φλεγμονή αποτελεί συναρπαστικό πεδίο έρευνας VWF, παράγοντας von Willebrand

45 Συμπεράσματα Ο παράγοντας von Willebrand είναι ένας βασικός μεσολαβητής της αγγειακής φλεγμονής Ο παράγοντας von Willebrand συνδέεται στενά με τη φλεγμονώδη απόκριση μέσω διαφόρων μηχανισμών: έχει άμεσο ρόλο στη βιογένεση των σωματίων Weibel-Palade, WPBs, σωμάτια Weibel-Palade (bodies) Ώριμο WPB εντός ενδοθηλιακού κυττάρου (cryoelectron tomograms και σχηματική παράσταση) Springer TA. Blood 2014; 124: , τροποποιημένο

46 Συμπεράσματα Ο παράγοντας von Willebrand είναι ένας βασικός μεσολαβητής της αγγειακής φλεγμονής 1. προσλαμβάνει λευκοκύτταρα με μηχανισμούς εξαρτώμενους και 2. μη εξαρτώμενους από τα αιμοπετάλια, 3. ρυθμίζει την εξαγγείωση των λευκοκυττάρων και τη διαπερατότητα των ενδοθηλιακών κυττάρων. Όπως στην αιμόσταση, έτσι και στη φλεγμονή, η πολυμερής δομή του VWF έχει μεγάλη σημασία καθόσον η ADAMTS-13 διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην εξασθένηση του προφλεγμονώδους δυναμικού του VWF. Drakeford C, O Donnell JS. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2017; 37: , τροποποιημένο VWF, παράγοντας von Willebrand / GpIbα, γλυκοπρωτεϊνη Ibα

47 Συμπεράσματα Ο παράγοντας von Willebrand είναι ένας βασικός μεσολαβητής της αγγειακής φλεγμονής H αποσαφήνιση των ρόλων του παράγοντα von Willebrand μπορεί να προσφέρει συναρπαστικές ευκαιρίες για την ανάπτυξη νέων θεραπειών για την αντιμετώπιση κρίσιμων κλινικών αναγκών. Drakeford C, O Donnell JS. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2017; 37: , τροποποιημένο VWF, παράγοντας von Willebrand / GpIbα, γλυκοπρωτεϊνη Ibα

48 Σας ευχαριστώ!