QUANTA Flash DGP Screen Για In Vitro διαγνωστική χρήση

Transcript

1 QUANTA Flash DGP Screen Για In Vitro διαγνωστική χρήση Σκοπός χρήσης Το QUANTA Flash DGP Screen αποτελεί μια ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) για τον ημιποσοτικό εντοπισμό αντι-απαμιδωμένων αντισωμάτων IgG και IgA πεπτιδίων γλιαδίνης (DGP) σε ανθρώπινο ορό στη συσκευή BIO-FLASH. Αποτελεί βοήθημα στη διάγνωση της κοιλιακής νόσου και της ερπητοειδούς δερματίτιδας, σε συνδυασμό με κλινικά ευρήματα και άλλες εργαστηριακές δοκιμές. Περίληψη και επεξήγηση της δοκιμασίας Η κοιλιακή νόσος είναι μια εντεροπάθεια με ευαισθησία στη γλουτένη, της οποίας τα κύρια χαρακτηριστικά περιλαμβάνουν φλεγμονή και χαρακτηριστική ισοπέδωση του εντερικού βλεννογόνου, με αποτέλεσμα ένα σύνδρομο δυσαπορρόφησης. Η ακριβής αιτιολογία της νόσου παραμένει άγνωστη, αλλά η γλιαδίνη, το διαλυτό στην αλκοόλη κλάσμα της γλουτένης σίτου, αποτελεί σαφώς τον τοξικό παράγοντα. 1,2 Μελέτες κατέδειξαν επιπολασμό 0,7-1,0% της κοιλιακής νόσου (CD) στον γενικό πληθυσμό, με αυξανόμενο επιπολασμό έως και 20% σε ορισμένες ομάδες κινδύνου. 3,4 Αρχικά, η διάγνωση της κοιλιακής νόσου και των σχετιζόμενων διαταραχών γινόταν μέσω μιας σειράς πολλαπλών εντερικών βιοψιών. Πιο πρόσφατα, η Ευρωπαϊκή Εταιρία Παιδιατρικής Γαστρεντερολογίας και Διατροφής (European Society of Pediatric Gastroenterology and Nutrition - ESPGAN) 5 καθώς και άλλες δημοσιευμένες μελέτες 6-8 πρότειναν τη χρήση ορολογικών δεικτών όπως τα αντισώματα αντιγλιαδίνης, αντι-dgp, αντι-ttg και ενδομυΐου με σκοπό τη μείωση του αριθμού των εντερικών βιοψιών για την πραγματοποίηση διάγνωσης. Πρόσφατες έρευνες αποκάλυψαν ότι αντισώματα από ασθενείς με κοιλιακή νόσο δεσμεύουν έναν πολύ περιορισμένο αριθμό ειδικών επιτόπων στο μόριο γλιδίνης, τα οποία είναι επιλεκτικά απαμιδωμένα Πιστεύεται ότι η απαμίδωση προκαλείται από το κοιλιακό σχετιζόμενο ένζυμο, την τρανσαγλουταμινάση ιστού. 12 Με βάση τις παραπάνω παρατηρήσεις, πραγματοποιήθηκαν αναλύσεις με χρήση ορισμένων απαμιδιωμένων πεπτιδίων γλιαδίνης. Αυτές διαθέτουν μεγαλύτερη διαγνωστική ακρίβεια για την κοιλιακή νόσο από τις τυπικές αναλύσεις αντι-γλιαδίνης. 7,13-16 Μια στρατηγική ευαίσθητων δοκιμασιών διαλογής για τον εντοπισμό ατόμων με κοιλιακή νόσο σε ομάδες κινδύνου περιλαμβάνει δοκιμασίες για αντισώματα IgG και IgA σε απαμιδιωμένα πεπτίδια γλιαδίνης, επειδή ένα σημαντικό ποσοστό των ασθενών με κοιλιακή νόσο έχουν ανεπαρκές IgA. 14 Πολλές μελέτες έχουν δείξει την υψηλή κλινική χρησιμότητα αυτής της στρατηγικής δοκιμασιών. 17,13-16 Η ερπητοειδής δερματίτιδα (DH) είναι μια δερματική νόσος η οποία, όπως συμβαίνει και με την κοιλιακή νόσο, προκαλείται από την πέψη πρωτεϊνών σίτου. Η πλειοψηφία των ασθενών με DH παρουσιάζουν νηστιδική ατροφία των λαχνών, όμοια με εκείνη που απαντάται στην κοιλιακή νόσο και η αυστηρή διατροφή χωρίς γλουτένη βελτιώνει τόσο τις εντερικές όσο και τις δερματικές βλάβες. 18,19 Οι τρέχουσες οροδιαγνωστικές μέθοδοι, όπως οι αναλύσεις ΕΜΑ και ttg παρουσιάζουν απογοητευτική απόδοση στην περίπτωση των δοκιμών για τη νόσο DH, με ποσοστά ευαισθησίας που κυμαίνονται σε εύρος μόλις 45-75% 18-20, σε σύγκριση με τα ποσοστά ευαισθησίας που υπερβαίνουν το 95% για την κοιλιακή νόσο. Μία μελέτη ανακάλυψε ότι τα αντισώματα αντι-dgp είναι πιο κοινά από τα αντισώματα αντι-ttg σε ασθενείς με DH. 20 Το QUANTA Flash DGP Screen είναι μια βελτιωμένη δοκιμή απόδοσης για τον εντοπισμό αντισωμάτων IgG και IgA σε ένα επιλεκτικά απαμιδωμένο, συνθετικό πεπτίδιο που παράγεται από την πρωτεΐνη σίτου γλιαδίνη και ως εκ τούτου επιτρέπει τον εντοπισμό της κοιλιακής νόσου ακόμη και με συνυπάρχουσα ανεπάρκεια IgA 1

2 Αρχές της διαδικασίας Το συνθετικό απαμιδωμένο πεπτίδιο γλιαδίνης επικαλύπτει παραμαγνητικούς κόμβους από φυσικό καουτσούκ, οι οποίοι αποθηκεύονται στο φυσίγγιο του αντιδραστηρίου υπό συνθήκες οι οποίες συντηρούν το αντιγόνο στην αντιδραστική του κατάσταση. Όταν το φυσίγγιο της ανάλυσης είναι έτοιμο να χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά, ολόκληρο το φυσίγγιο αναποδογυρίζεται πολλές φορές για να αναμειχθούν σωστά τα αντιδραστήρια. Στη συνέχεια, το φυσίγγιο του αντιδραστηρίου τοποθετείται στη συσκευή BIO-FLASH. Ένα δείγμα ορού ασθενούς προαραιώνεται από τη συσκευή με χρήση της πλύσης συστήματος που προστίθεται σε μια πλαστική κυψελίδα μίας χρήσης. Μικρές ποσότητες από τον αραιωμένο ορό ασθενούς, οι κόμβοι με DGP καθώς και το ρυθμιστικό διάλυμα της ανάλυσης τοποθετούνται μαζί σε μια δεύτερη κυψελίδα και αναμιγνύονται. Αυτή η κυψελίδα επωάζεται στους 37 C. Στη συνέχεια, οι κόμβοι υπόκεινται σε μαγνητισμό και πλύσεις αρκετές φορές. Κατόπιν, στην κυψελίδα προστίθεται αντίσωμα συζευγμένο με ισολουμινόλη και επωάζεται στους 37 C. Οι κόμβοι υπόκεινται ξανά σε μαγνητισμό και πλύσεις αρκετές φορές. Το σύζευγμα ισολουμινόλης προκαλεί μια φωταυγή αντίδραση, όταν τα αντιδραστήρια ( Ενεργοποιητές ) προστίθενται στην κυψελίδα. Το φως που παράγεται από αυτήν την αντίδραση μετράται ως Σχετικές μονάδες φωτός (RLU) από το οπτικό σύστημα BIO-FLASH. Οι μονάδες RLU είναι ανάλογες με την ποσότητα του δεσμευμένου συζεύγματος ισολουμινόλης, η οποία, με τη σειρά της, είναι ανάλογη με την ποσότητα των αντισωμάτων αντι-dgp που δεσμεύονται στους κόμβους με DGP. Η ανάλυση QUANTA Flash DGP Screen χρησιμοποιεί μια προκαθορισμένη Κύρια καμπύλη ειδική για την παρτίδα, η οποία αποστέλλεται στη συσκευή μέσω του γραμμικού κώδικα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Με βάση τα αποτελέσματα που προκύπτουν από τη χρήση δύο ορών βαθμονόμησης, δημιουργείται μια ειδική Καμπύλη εργασίας για τη συσκευή, η οποία χρησιμοποιείται για τον υπολογισμό των μονάδων χημιφωταύγειας (CU) που προκύπτουν από τις μονάδες RLU που λαμβάνονται για κάθε ασθενή. Αντιδραστήρια Το φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash DGP Screen περιέχει τα παρακάτω αντιδραστήρια που επαρκούν για 50 δοκιμασίες: 1. Παραμαγνητικοί κόμβοι επικαλυμμένοι με DGP, σε ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικό. 2. Ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης χρώματος ροζ, που περιέχει ρυθμιστικό αλατούχο διάλυμα Tris, Tween 20, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά. 3. Ανιχνευτής IgA/IgG αντισώματα αντι-ανθρώπινης IgG και IgA σημασμένο με ισολουμινόλη, που περιέχει ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικό. Προειδοποιήσεις 1. Το ρυθμιστικό διάλυμα ανάλυσης περιέχει μια χημική ουσία (0,02% χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, με άφθονο νερό, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 4. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων 2

3 Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Αυτή η ανάλυση προορίζεται για χρήση μόνο με τη συσκευή BIO-FLASH. 3. Αυτό το φυσίγγιο αντιδραστηρίου πρέπει να φυλάσσεται, μετά από το άνοιγμά του, στην περιστρεφόμενη θήκη αντιδραστηρίων της συσκευής. Πρέπει να ληφθεί μέριμνα, ώστε να μη χυθούν τα αντιδραστήρια, όταν το φυσίγγιο αντιδραστηρίου τοποθετηθεί για πρώτη φορά στη συσκευή. 4. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χειριστή του BIO-FLASH. Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τα φυσίγγια αντιδραστηρίου που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Είναι σταθεροί για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τους αποθηκεύετε και τους χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Τα ανοιγμένα φυσίγγια αντιδραστηρίων πρέπει να αποθηκεύονται επάνω στη συσκευή και είναι σταθερά για 63 ημέρες. Μετά από αυτό το χρονικό διάστημα πρέπει να απορρίπτονται. Το λογισμικό του BIO-FLASH παρακολουθεί τις ημερομηνίες λήξης των τοποθετημένων φυσιγγίων καθώς και των παρτίδων των φυσιγγίων αντιδραστηρίων. Συλλογή δείγματος Η διαδικασία πρέπει να πραγματοποιηθεί με δείγματα ορού. Δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται δείγματα που έχουν επιμολυνθεί με μικρόβια, έχουν υποστεί θερμική επεξεργασία ή περιέχουν ορατά σωματίδια. Δεν πρέπει να χρησιμοποιείται έντονα αιμολυμένος ή λιπαιμικός ορός ή δείγματα. Δείγματα που περιείχαν έως 10 mg/dl χολερυθρίνη, 200 mg/dl αιμοσφαιρίνη, 1000/224 mg/dl of τριγλυκερίδια/χοληστερόλη ή 500 IU/mL IgM ρευματοειδούς παράγοντα δεν εμφάνισαν παρεμβολές στο QUANTA Flash DGP Screen. Μετά από τη συλλογή του δείγματος ο ορός θα πρέπει να διαχωρίζεται άμεσα από το ολικό αίμα. Το Έγγραφο CLSI H18-A3 προτείνει τις παρακάτω συνθήκες συντήρησης και αποθήκευσης των δειγμάτων: 1) Τα δείγματα πρέπει να διατηρούνται σε θερμοκρασία δωματίου όχι περισσότερο από 8 ώρες. 2) Εάν η ανάλυση δεν ολοκληρωθεί μέσα σε 8 ώρες, καταψύξτε το δείγμα στους 2-8 C. 3) Εάν η ανάλυση δεν ολοκληρωθεί μέσα σε 48 ώρες ή απαιτείται η αποστολή του δείγματος, καταψύξτε στους -20 C η λιγότερο. Τα κατεψυγμένα δείγματα πρέπει να αναμιχθούν καλά μετά την απόψυξη και πριν από τη δοκιμασία. Διαδικασία Υλικά που παρέχονται 1 Φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash DGP Screen Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται Συσκευή BIO-FLASH συνδεδεμένη με υπολογιστή Δοχείο πλύσης συστήματος BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: ) Ενεργοποιητές BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: ) Κυψελίδες BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: ) Διάλυμα καθαρισμού BIO-FLASH (Αρ. προϊόντος: ) Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash DGP Screen (Αρ. προϊόντος: ) Οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen (Αρ. προϊόντος: ) 3

4 Χρήση του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH 1. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χειριστή που παρέχεται με το σύστημα BIO-FLASH. Για περαιτέρω πληροφορίες και για αντιμετώπιση των προβλημάτων που προκύπτουν από τη χρήση αυτής της ανάλυσης, επικοινωνήστε με το τμήμα τεχνικής υποστήριξης της INOVA Diagnostics, Inc. στη διεύθυνση ή τον αριθμό τηλεφώνου που αναγράφεται στο τέλος του παρόντος Ένθετου φύλλου οδηγιών. 2. Για να εκκενώσετε το δοχείο στερεών αποβλήτων, ανοίξτε το συρτάρι αποβλήτων. Εξαγάγετε το δοχείο στερεών αποβλήτων και απορρίψτε κατάλληλα τις χρησιμοποιημένες κυψελίδες. Τοποθετήστε ξανά το δοχείο στερεών αποβλήτων στη θέση του, κλείστε το συρτάρι αποβλήτων και κάντε κλικ στην επιλογή Ναι στο παράθυρο Εκκένωση συρταριού αποβλήτων. 3. Για να αντικαταστήσετε τους ενεργοποιητές, κάντε κλικ στο κουμπί Απόθεμα υλικών F9 (επάνω δεξιά). α. Στην οθόνη Απόθεμα Υλικά κάντε κλικ στο κουμπί Ενεργοποιητές που βρίσκεται στα αριστερά. Θα αναδυθεί ένα νέο παράθυρο με τον τίτλο Προσθήκη ενεργοποιητών Εξαγωγή παλιών φιαλών. β. Ανοίξτε και αφαιρέστε το συρτάρι αποβλήτων της συσκευής BIO-FLASH. Απορρίψτε τυχόν κυψελίδες που βρίσκονται στο συρτάρι ξηρών αποβλήτων. Κάντε κλικ στο κουμπί Ναι στο παράθυρο Εκκένωση συρταριού αποβλήτων. Αφαιρέστε τις φιάλες ενεργοποιητών από τις βάσεις τους και κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. Ξεβιδώστε τις παλιές φιάλες ενεργοποιητών από τα πώματά τους και αντικαταστήστε τις με νέους ενεργοποιητές. Φροντίστε να ξεβιδώνετε μία φιάλη κάθε φορά και να τις αντιστοιχείτε με τα πώματα ακολουθώντας τη χρωματική κωδικοποίησή τους (τη λευκή φιάλη στο λευκό πώμα και την κόκκινη φιάλη στο κόκκινη πώμα). γ. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο νέο παράθυρο Προσθήκη ενεργοποιητών Προσθήκη φιάλης Ενεργοποιητή 2. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, τοποθετήστε τον Ενεργοποιητή 2 στη λευκή βάση. Κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. δ. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο παράθυρο Προσθήκη ενεργοποιητών Προσθήκη φιάλης Ενεργοποιητή 1. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, τοποθετήστε τον Ενεργοποιητή 1 στην κόκκινη βάση. Κάντε κλικ στο κουμπί Τέλος. Τοποθετήστε το συρτάρι αποβλήτων στη θέση του και κλείστε το. 4. Για να αντικαταστήσετε το Δοχείο πλύσης συστήματος, κάντε κλικ στο κουμπί Απόθεμα υλικών F9 (στην επάνω δεξιά γωνία). Στην οθόνη Απόθεμα Υλικά κάντε κλικ στο κουμπί Πλύση συστήματος. Στο νέο παράθυρο Προσθήκη πλύσης συστήματος Εξαγωγή φιαλών, κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. Ακολουθήστε τις οδηγίες που εμφανίζονται στο νέο παράθυρο Προσθήκη πλύσης συστήματος Προσθήκη φιάλης. Μόλις γίνει αποδοχή του γραμμικού κώδικα, κάντε κλικ στο κουμπί Τέλος, εφόσον χρειάζεται. 5. Για να εκκενώσετε το Δοχείο υγρών αποβλήτων, από την οθόνη Απόθεμα Υλικά κάντε κλικ στο κουμπί Υγρά απόβλητα. Εξαγάγετε και απορρίψτε τα υγρά απόβλητα. Κάντε κλικ στο κουμπί Επόμενο. Όταν αντικαταστήσετε την κενή φιάλη, κάντε κλικ στο κουμπί Τέλος. 4

5 Μέθοδος Προετοιμασία φυσιγγίου αντιδραστηρίου Την πρώτη φορά που πρόκειται να χρησιμοποιηθεί το φυσίγγιο αντιδραστηρίου, πρέπει να ακολουθήσετε τα παρακάτω βήματα για να εγκαταστήσετε το φυσίγγιο με ακρίβεια στη συσκευή BIO-FLASH. Σημείωση: Μην χρησιμοποιείτε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου στην περίπτωση που παρατηρήσετε ίχνη φθοράς ή ζημιάς Φυσίγγιο αντιδραστηρίου QUANTA Flash DGP Screen: Τα μικροσωματίδια κατακάθονται κατά την αποστολή και αποθήκευση και απαιτούν ανάμειξη για την επαναιώρησή τους 1. Την πρώτη φορά που θα χρησιμοποιηθεί το φυσίγγιο, αναποδογυρίστε απαλά το φυσίγγιο 30 φορές, αποφεύγοντας τη δημιουργία αφρού. Ελέγξτε για την πλήρη επαναιώρηση των μικροσωματιδίων. Εάν η επαναιώρηση των μικροσωματιδίων δεν είναι πλήρης συνεχίστε να αναποδογυρίζετε το φυσίγγιο μέχρι την πλήρη επαναιώρηση των μικροσωματιδίων. Εάν τα μικροσωματίδια δεν επαναιωρηθούν, ΜΗ ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΕΤΕ ΤΟ ΦΥΣΙΓΓΙΟ. 2. Όταν επαναιωρηθούν τα μικροσωματίδια, τοποθετήστε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σε μια σταθερή επιφάνεια για να αφαιρέσετε το κόκκινο καπάκι. Κρατήστε το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σταθερά με το ένα χέρι. Με το άλλο χέρι, πιάστε σταθερά την κόκκινη σχιζόμενη γλωττίδα στο πίσω μέρος του φυσιγγίου αντιδραστηρίου και αφαιρέστε την τελείως. 3. Πιέστε τις δύο γλωττίδες στα πλευρά του καπακιού (γκρι μέρος) και εφαρμόστε πίεση στο επάνω τμήμα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου μέχρι να κλειδώσει στη θέση του. Οι γλωττίδες δεν πρέπει να είναι ορατές πλέον. ΜΗΝ ΑΝΑΠΟΔΟΓΥΡΙΖΕΤΕ ΤΟ ΑΝΟΙΧΤΟ ΦΥΣΙΓΓΙΟ. 4. Τοποθετήστε προσεκτικά το φυσίγγιο αντιδραστηρίου σε οποιαδήποτε ανοιχτή υποδοχή της περιστρεφόμενης θήκης αντιδραστηρίων της συσκευής BIO-FLASH. Μόλις το φυσίγγιο τοποθετηθεί στην περιστρεφόμενη θήκη αντιδραστηρίων, η συσκευή εκτελεί πρόσθετη περιοδική ανάμειξη των κόμβων. Βαθμονόμηση ανάλυσης 1. Κάθε νέα παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου πρέπει να βαθμονομείται προτού χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά. Το λογισμικό δεν θα επιτρέψει τη χρήση μιας νέας παρτίδας μέχρι να βαθμονομηθεί. 2. Για αναλυτικές οδηγίες σχετικά με τη βαθμονόμηση του φυσιγγίου αντιδραστηρίου ανατρέξτε στην ενότητα με τίτλο QUANTA Flash Οροί βαθμονόμησης DGP Screen στο παρόν Ένθετο φύλλο οδηγιών. 3. Μόλις επικυρωθεί η βαθμονόμηση, η παρτίδα φυσιγγίου αντιδραστηρίου στην οποία πραγματοποιήθηκε η βαθμονόμηση είναι έτοιμη προς χρήση. 5

6 Προγραμματισμός και εξέταση δειγμάτων 1. Πιέστε το κουμπί Λίστα εργασιών που βρίσκεται στο επάνω μέρος της οθόνης και επιλέξτε την καρτέλα Ράβδοι στο κάτω μέρος. 2. Επιλέξτε τη ράβδο δειγμάτων που θέλετε να χρησιμοποιήσετε επισημαίνοντας τη ράβδο στην οθόνη ή σαρώνοντας το γραμμικό κώδικά της με τη φορητή συσκευή ανάγνωσης γραμμικού κώδικα. Σαρώστε ή πληκτρολογήστε το όνομα του δείγματος, επιλέξτε τον τύπο του δείγματος, τον τύπο του δοχείου (σωληνάριο/κύπελλο) και επιλέξτε την ανάλυση DGP Screen από το πλαίσιο αναλύσεων. Επαναλάβετε αυτά τα βήματα για όλα τα δείγματα. 3. Φορτώστε τα δείγματα στις επιλεγμένες θέσεις της ράβδου δειγμάτων και φορτώστε τη ράβδο στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής. 4. Εάν έχουν τοποθετηθεί όλα τα απαιτούμενα υλικά στη συσκευή, στο επάνω μέρος της οθόνης θα εμφανιστεί το εικονίδιο έναρξης με πράσινο χρώμα. Πιέστε το εικονίδιο έναρξης, για να ξεκινήσετε την εξέταση. Έλεγχος ποιότητας Οι οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen (πωλούνται χωριστά - Αρ. προϊόντος INOVA ) περιέχουν τόσο τους Θετικούς όσο και τους Αρνητικούς ορούς ελέγχου DGP Screen. Για αναλυτικές οδηγίες σχετικά με τον τρόπο εισαγωγής της τιμής μονάδας και της τυπικής απόκλισης κάθε ορού ελέγχου στο λογισμικό καθώς και σχετικά με τον τρόπο χρήσης των ορών ελέγχου, ανατρέξτε στην ενότητα με τίτλο QUANT A Flash Οροί ελέγχου DGP Screen Οι οροί ελέγχου συνιστάται να εξετάζονται μία φορά κάθε ημέρα χρήσης της ανάλυσης. Υπολογισμός των αποτελεσμάτων Για κάθε νέα παρτίδα QUANTA Flash DGP Screen δημιουργείται στην INOVA μια Κύρια καμπύλη έξι σημείων. Αυτή η λογιστική καμπύλη τεσσάρων παραμέτρων κωδικοποιείται στο γραμμικό κώδικα κάθε φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Μετά από τη βαθμονόμηση ενός φυσιγγίου αντιδραστηρίου, θα χρησιμοποιηθεί μια ειδική καμπύλη εργασίας για τη συσκευή, η οποία θα μετατρέψει τις μονάδες RLU σε CU. Η αντιδραστικότητα του αντισώματος για DGP μπορεί, στη συνέχεια, να ταξινομηθεί σύμφωνα με τον παρακάτω πίνακα. Αντιδραστικότητα Μονάδες CU Αρνητική <20 Ασθενώς θετική Θετική >30 Η αντιδραστικότητα σε μονάδες CU σχετίζεται άμεσα με τον τίτλο του αυτοαντισώματος στο δείγμα του ασθενή. Οι αυξήσεις και οι μειώσεις στις συγκεντρώσεις των αντισωμάτων του ασθενή θα αντικατοπτρίζονται σε μια αντίστοιχη άνοδο ή πτώση στις μονάδες CU, η οποία είναι ανάλογη με την ποσότητα των αντισωμάτων. Οι τιμές της ανάλυσης είναι άξιες αναφοράς, όταν κυμαίνονται μεταξύ 0,5 CU και 1461,8 CU. Εάν το αποτέλεσμα ενός δείγματος ασθενούς είναι μικρότερο από 0,5 CU, τότε το σύστημα BIO-FLASH θα το αναφέρει ως <0,5 CU. Σε περίπτωση που το αποτέλεσμα είναι μικρότερο από 20 CU, θεωρείται αρνητικό αποτέλεσμα. Εάν το αποτέλεσμα ενός δείγματος ασθενούς είναι μεγαλύτερο από 1461,8 CU, τότε το σύστημα BIO-FLASH θα το αναφέρει ως >1461,8 CU. Αυτό θεωρείται θετικό αποτέλεσμα. Το λογισμικό BIO-FLASH διαθέτει την επιλογή Αυτόματη επανεξέταση. Εάν επιλεγεί αυτή η ρύθμιση, η συσκευή θα επανεξετάσει αυτόματα τα δείγματα που φέρουν αποτέλεσμα >1461,8 CU με περαιτέρω αραίωση με παράγοντα του 10 και θα υπολογίσει τις τρέχουσες μονάδες CU χρησιμοποιώντας αυτόν τον πρόσθετο παράγοντα αραίωσης. 6

7 Ερμηνεία των αποτελεσμάτων Η ανάλυση QUANTA Flash είναι ικανή να ανιχνεύσει μικρές διαφορές σε πληθυσμούς ασθενών. Κάθε εργαστήριο θα πρέπει να καθορίσει το δικό του φυσιολογικό εύρος τιμών βασισμένο πάνω στους δικούς του ελέγχους και στον πληθυσμό ασθενών σύμφωνα με τις δικές του καθορισμένες διαδικασίες. Συνιστάται η συμπερίληψη της παρακάτω δήλωσης στα αποτελέσματα που καταγράφονται από το εργαστήριο: Τα παρακάτω αποτελέσματα λήφθηκαν με την ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας QUANTA Flash DGP Screen της INOVA. Τα αποτελέσματα αυτά δεν πρέπει να χρησιμοποιούνται εναλλάξ με τιμές που λήφθηκαν με μεθόδους ανάλυσης άλλων κατασκευαστών. Το μέγεθος των αναφερόμενων επιπέδων αντισωμάτων δεν είναι δυνατόν να συσχετίζεται πάντα με ένα τίτλο τελικού σημείου. εριορισμοί της διαδικασίας 1. Δεν είναι όλοι οι ασθενείς με κοιλιακή νόσο ή ερπητοειδή δερματίτιδα θετικοί στα αντισώματα IgG ή IgA DGP. 2. Τα αποτελέσματα αυτής της ανάλυσης θα πρέπει να χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με κλινικά ευρήματα και άλλες ορολογικές εξετάσεις. 3. Η αποτυχία της επαρκούς ανάμειξης των αντιδραστηρίων πριν από την πρώτη χρήση ενδέχεται να προκαλέσει εσφαλμένα αποτελέσματα. 4. Τα χαρακτηριστικά επιδόσεων αυτής της ανάλυσης δεν έχουν διαπιστωθεί για μεσοκυττάριες ουσίες εκτός του ορού. Αναμενόμενες Τιμές Οι οριακές τιμές της ανάλυσης καθορίστηκαν μετά από εξέταση 446 κλινικά προσδιορισμένων δειγμάτων μεμονωμένα δείγματα αίματος ασθενών οι οποίοι ήταν σαφώς θετικοί ή αρνητικοί για κοιλιακή νόσο (και δεν ακολουθούσαν διατροφή ελεύθερη γλουτένης). Αυτά τα δείγματα 117 κλινικά θετικά και 329 κλινικά αρνητικά χρησιμοποιήθηκαν για τη ρύθμιση της οριακής τιμής στις 20 CU με σκοπό τη βελτιστοποίηση της ευαισθησίας και της ειδικότητας σε ποσοστό 86,3% και 96,0%, αντίστοιχα, σε αυτό το εκπαιδευτικό πρόγραμμα. Εύρος αναφοράς Τα επίπεδα των αντισωμάτων IgA και IgG αντι-dgp εξετάστηκαν χρησιμοποιώντας το QUANTA Flash DGP Screen, σε ένα σύνολο 351 εμφανώς υγιών ατόμων και φυσιολογικών αιμοδοτών (172 γυναίκες και 179 άνδρες, ηλικίας από 6 μηνών έως 82 ετών, με μέση ηλικία 32 έτη και διάμεση ηλικία 33 έτη). Με αποκοπή της τάξης των 20 CU, 7 (2,0 %) από τα δείγματα ήταν θετικά στο QUANTA Flash DGP Screen. Η μέση συγκέντρωση ήταν 3,8 CU και οι τιμές κυμαίνονταν από <0,5 έως 358,8 CU. Κλινική Ευαισθησία και Ειδικότητα Η κλινική μελέτη αξιοπιστίας περιλάμβανε 30 δείγματα με κοιλιακή νόσο από τη βιβλιοθήκη ορών της IINOVA (συμπεριλαμβανομένων 7 με επιλεκτική έλλειψη IgA), 71 μάρτυρες στους οποίους δεν είχε διαγνωσθεί κοιλιακή νόσος και 68 δείγματα από ένα εργαστήριο ttg (που αποτελείτο από 18 ασθενείς με κοιλιακή νόσο και 50 μάρτυρες χωρίς κοιλιακή νόσο). Μια ανεξάρτητη εξωτερική μελέτη περιλάμβανε 93 δείγματα ασθενών με κοιλιακή νόσο και 98 άτομα ελέγχου. Αυτά τα δείγματα εξετάστηκαν με το QUANTA Flash DGP Screen CIA. Τα αποτελέσματα εξετάστηκαν ως προς τον υπολογισμό της ευαισθησίας και της ειδικότητας για την κοιλιακή νόσο (CD) (n=141) και την ερπητοειδή δερματίτιδα (DH) (n=25) ξεχωριστά, χρησιμοποιώντας τον ίδιο πληθυσμό ελέγχου (n=219). 7

8 Κλινική ευαισθησία και ειδικότητα της ανάλυσης QUANTA Flash DGP Screen για την κοιλιακή νόσο (CD): N=360 QUANTA Flash DGP Screen Διάγνωση Ανάλυση Χωρίς Με CD Σύνολο (95% διάστημα εμπιστοσύνης) CD Θετικά Ευαισθησία 85,8% (78,9-91,1%) Αρνητικά Ειδικότητα 98,2% (95,4-99,5%) Σύνολο Κλινική ευαισθησία και ειδικότητα της ανάλυσης QUANTA Flash DGP Screen για την ερπητοειδή δερματίτιδα (DH): N=244 QUANTA Flash DGP Screen Διάγνωση Ανάλυση Χωρίς Με DH Σύνολο (95% διάστημα εμπιστοσύνης) DH Θετικά Ευαισθησία 68,0% (46,5-85,1%) Αρνητικά Ειδικότητα 98,2% (95,4-99,5%) Σύνολο Κατανομή των πληθυσμών υγιών ατόμων ελέγχου και ατόμων ελέγχου με νόσο που χρησιμοποιήθηκε στη μελέτη αξιοπιστίας και το εύρος αναφοράς: Ομάδα ασθενών N Θετικά Ποσοστό θετικών Ελκώδης κολίτιδα 9 0 0% Νόσος του Crohn % Φλεγμονώδης νόσος των εντέρων (ακαθόριστη) 5 0 0% Μόλυνση H. pylori ,4% Άλλες γαστρεντερικές νόσοι % Τροφική αλλεργία 9 0 0% Διαβήτης τύπου % Συστηματικές ρευματικές νόσοι (διάφορες) % Αυτοάνοση νόσος του θυρεοειδούς % Ιογενής ηπατίτιδα % Αυτοάνοση ιπατική νόσος 5 0 0% Οροί ελέγχου χωρίς κοιλιακή νόσο (ακαθόριστη) ,0% Total ,8% 8

9 Σύγκριση μεθόδων με επιβεβαιωτική ανάλυση Τα δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν για την ανάλυση σύγκρισης των μεθόδων περιλάμβαναν τα δείγματα από τις κλινικές μελέτες αξιοπιστίας (ασθενών με κοιλιακή νόσο και ερπητοειδή δερματίτιδα, άτομα ελέγχου με άλλη νόσο και τυπικοί αιμοδότες), τα οποία βρίσκονταν εντός του εύρους των αξιοαναφερθέντων αποτελεσμάτων της ανάλυσης. Αυτά τα δείγματα υποβλήθηκαν στη δοκιμασία τόσο της ανάλυσης QUANTA Flash DGP Screen όσο και της επιβεβαιωτικής ανάλυσης ELISA. Σύγκριση μεθόδων (N=228) DGP Screen ELISA Ποσοστό συμφωνίας (Αξιοπιστία 95%) Θετικά Αρνητικά Σύνολο QUANTA Flash DGP Screen CIA Θετικά 30 6* 36 Αρνητικά 5** Σύνολο Συμφωνία θετικών = 85,7% (69,7-95,2%) Συμφωνία αρνητικών = 96,9% (93,4-98,9%) Συμφωνία συνόλου = 95,2% (91,5-97,6%) * Ένας ασθενής διαγνώστηκε με CD, ένας άλλος (αρνητικός ορός ελέγχου εργαστηρίου ttg) είναι επίσης θετικός σε h-ttg IgA CIA και ένας ήταν με υποψία κοιλιακής νόσου χωρίς διάγνωση. Τα υπόλοιπα τρία δείγματα είναι από τυπικούς αιμοδότες. ** Τρία δείγματα είναι από τυπικούς αιμοδότες, ενώ τα υπόλοιπα δύο είναι από αρνητικούς ορούς ελέγχου εργαστηρίου ttg Ακρίβεια και επαναληψιμότητα Η ακρίβεια της ανάλυσης QUANTA Flash DGP Screen αξιολογήθηκε με εξέταση 7 ασθενών σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP5-A2 και παρακάτω παρουσιάζονται τα δεδομένα που προέκυψαν: Εντός της εξέτασης Μεταξύ των εξετάσεων Κατά τη διάρκεια της ημέρας Σύνολο Δείγμα Αρ. Μέση τιμή TA % ΣΜ TA % ΣΜ TA % ΣΜ TA % ,7 57,7 4,3% 29,0 2,1% 29,4 2,2% 70,9 5,2% ,5 3,2 3,7% 2,1 2,5% 0,0 0,0% 3,5 4,1% ,7 1,8 3,9% 1,1 2,4% 0,2 0,4% 2,1 4,6% ,4 0,4 3,0% 0,2 1,9% 0,1 0,9% 0,5 3,6% ,7 0,8 3,8% 0,6 2,7% 0,1 0,5% 1,0 4,7% ,1 1,0 4,3% 0,8 3,3% 0,0 0,0% 1,2 5,0% ,9 1,0 3,9% 0,6 2,1% 0,0 0,0% 1,0 3,9% 9

10 Οριακές τιμές ανίχνευσης. Γραμμικό εύρος και εύρος άξιων αναφοράς τιμών Η χαμηλότερη τιμή ανίχνευσης αυτής της ανάλυσης σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP17-A είναι περίπου 570 RLU, τιμή η οποία είναι ισοδύναμη με 0,04 CU και είναι αρκετά χαμηλότερη από τη μικρότερη τιμή των άξιων αναφοράς τιμών. Η μέγιστη τιμή ανίχνευσης είναι περίπου RLU, η οποία είναι περίπου 71% μεγαλύτερη από τη μεγαλύτερη τιμή των άξιων αναφοράς τιμών. Το συνολικό εύρος των άξιων αναφοράς τιμών, δηλαδή από 0,5 CU έως 1461,8 CU, είναι γραμμικό. Σύμφωνα με το πρότυπο CLSI EP6-A πραγματοποιήθηκε μελέτη γραμμικότητας, της οποίας τα δεδομένα συνοψίζονται παρακάτω: Δείγμα Εύρος δοκιμασίας (CU) Κλίση (95% CI (διάστημα εμπιστοσύνης)) Σημείο τομής άξονα Y (95% CI) 1 1,6 έως 31,7 0,96 (0,92 έως 1,00) 0,08 (-0,65 έως 0,81) 1,00 2 1,4 έως 67,7 0,86 (0,84 έως 0,89) 1,26 (0,40 έως 2,12) 1,00 3 4,9 έως 292,8 0,96 (0,92 έως 1,00) 1,68 (-4,49 έως 7,86) 1, ,4 έως 561,0 0,86 (0,83 έως 0,89) -0,37 (-9,71 έως 8,97) 1, ,4 έως 1271,2 0,92 (0,90 έως 0,94) -3,11 (-16,59 έως 10,37) 1, ,8 έως 1470,7 1,04 (0,97 έως 1,10) -6,39 (-67,03 έως 54,25) 1,00 R² 10

11 QUANTA Flash DGP Screen Οροί βαθμονόμησης Για In Vitro διαγνωστική χρήση Σκοπός χρήσης Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash DGP Screen προορίζονται για χρήση με την ανάλυση ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) QUANTA Flash DGP Screen στη συσκευή BIO-FLASH. Κάθε ορός βαθμονόμησης ορίζει ένα σημείο αναφοράς για την καμπύλη εργασίας, η οποία χρησιμοποιείται για τον καθορισμό των Μονάδων χημιφωταύγειας (CU) κατά τη μέτρηση των αντισωμάτων IgG και IgA αντι-dgp στον ορό. Περίληψη και βασικές αρχές της διαδικασίας Η ανάλυση QUANTA Flash DGP Screen CIA χρησιμοποιεί μια προκαθορισμένη Κύρια καμπύλη ειδική για την παρτίδα, η οποία αποθηκεύεται στο γραμμικό κώδικα του φυσιγγίου αντιδραστηρίου. Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash DGP Screen έχουν σχεδιαστεί για να παράγουν μια ειδική Καμπύλη εργασίας για τη συσκευή από τις παραμέτρους της Κύριας καμπύλης, με κριτήριο τα χαρακτηριστικά της απόδοσης και την κλινική αξιολόγηση της ανάλυσης QUANTA Flash DGP Screen CIA. Οι οροί βαθμονόμησης ελέγχονται σε πολλές συσκευές με πολλές παρτίδες αντιδραστηρίων πριν από την αξιολόγησή τους. Αντιδραστήρια 1. Ορός βαθμονόμησης 1 QUANTA Flash DGP Screen: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού DGP, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,3mL (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). 2. Ορός βαθμονόμησης 2 QUANTA Flash DGP Screen: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού DGP, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,3mL (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). Προειδοποιήσεις 1. Οι οροί βαθμονόμησης περιέχουν μια χημική ουσία (0,02% χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, με άφθονο νερό, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Όλα τα ανθρώπινα υλικά που χρησιμοποιήθηκαν στην προετοιμασία των πρότυπων ορών για αυτό το προϊόν έχουν εξεταστεί και βρέθηκαν αρνητικά για αντισώματα HIV, HBsAg και HCV από εγκεκριμένες μεθόδους FDA. Ωστόσο, καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να προσφέρει πλήρη διασφάλιση για την απουσία των HIV, HBV, HCV ή άλλων μολυσματικών παραγόντων. Για αυτόν το λόγο, οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash DGP Screen πρέπει να τυγχάνουν της ίδιας μεταχείρισης με ένα πιθανώς μολυσματικό προϊόν Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό, όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 11

12 5. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων. Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Οι Οροί βαθμονόμησης QUANTA Flash DGP Screen προορίζονται για χρήση με την ανάλυση QUANTA Flash DGP Screen. 3. Μην μεταφέρετε τα αντιδραστήρια των ορών βαθμονόμησης σε άλλα σωληνάρια. Οι γραμμικοί κώδικες που υπάρχουν στα σωληνάρια χρησιμοποιούνται από τη συσκευή για την αντιστοίχιση των ορών βαθμονόμησης με τον κατάλληλο τύπο ανάλυσης. 4. Μετά από το άνοιγμά του, το σωληνάριο του ορού βαθμονόμησης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για 8 ώρες ή για 4 βαθμονομήσεις το μέγιστο και μετά από αυτό το χρονικό διάστημα το αντιδραστήριο πρέπει να απορρίπτεται. 5. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χειριστή του BIO-FLASH. Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τους ορούς βαθμονόμησης που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Είναι σταθεροί για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τους αποθηκεύετε και τους χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Οι οροί βαθμονόμησης που έχουν ανοιχθεί πρέπει να απορρίπτονται μετά από 8 ώρες. Διαδικασία 1. Κάθε νέα παρτίδα φυσιγγίων αντιδραστηρίου πρέπει να βαθμονομείται προτού χρησιμοποιηθεί για πρώτη φορά. Το λογισμικό δεν θα επιτρέψει τη χρήση μιας νέας παρτίδας μέχρι να βαθμονομηθεί. 2. Κάθε ορός βαθμονόμησης πρέπει να αναμιγνύεται ελαφρώς πριν από τη χρήση του, προκειμένου να διασφαλιστεί η ομοιογένειά του. Αποφεύγετε το σχηματισμό αφρού, καθώς οι φυσαλίδες ενδέχεται να παρεμποδίσουν τη λειτουργία ανίχνευσης της στάθμης υγρού της συσκευής. Αφαιρέστε το πώμα από κάθε σωληνάριο ορού βαθμονόμησης και τοποθετήστε και τα δύο σωληνάρια σε μια ράβδο δειγμάτων με τους γραμμικούς κώδικες στραμμένους προς τα κενά της ράβδου. Τοποθετήστε τη ράβδο δειγμάτων στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής BIO-FLASH και κλείστε τη θύρα. Η συσκευή θα πραγματοποιήσει ανάγνωση των γραμμικών κωδίκων που βρίσκονται στα σωληνάρια ορού βαθμονόμησης και θα προσδιορίσει το απαιτούμενο φυσίγγιο αντιδραστηρίου. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χειριστή που παρέχεται με το σύστημα BIO-FLASH. 3. Η συσκευή θα εξετάσει κάθε ορό βαθμονόμησης τρεις φορές. Μετά από τη εξέταση των ορών βαθμονόμησης, το λογισμικό θα ζητήσει την επικύρωση της βαθμονόμησης. Από την οθόνη Συνοπτική παρουσίαση συσκευής, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Επιλογή περισσότερων ρυθμίσεων Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο Βαθμονόμηση Ctrl-F3. Στο παράθυρο Βαθμονόμηση, επισημάνετε την επιθυμητή ανάλυση και κάντε κλικ στο στοιχείο Λεπτομέρειες. 4. Στο νέο παράθυρο Λεπτομέρειες βαθμονόμησης επιλέξτε τη βαθμονόμηση που πραγματοποιήσατε. Η Κύρια καμπύλη εμφανίζεται ως διακεκομμένη γραμμή, ενώ η νέα Καμπύλη εργασίας εμφανίζεται ως συμπαγής γραμμή. Εάν τα αποτελέσματα της βαθμονόμησης είναι έγκυρα, θα εμφανιστεί ένα κουμπί επικύρωσης στο κάτω αριστερό τμήμα της οθόνης. Κάντε κλικ στο κουμπί Επικύρωση βαθμονόμησης. 12

13 5. Μόλις επικυρωθεί η βαθμονόμηση, η παρτίδα φυσιγγίου αντιδραστηρίου στην οποία πραγματοποιήθηκε η βαθμονόμηση είναι έτοιμη προς χρήση. Μετά από τη βαθμονόμηση μιας παρτίδας φυσιγγίων αντιδραστηρίων συνιστάται η χρήση των Ορών ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen (πωλούνται χωριστά - Αρ. προϊόντος ). Ανιχνευσιμότητα Προς το παρόν δεν υπάρχει αναγνωρισμένο διεθνές πρότυπο για τη μέτρηση των αντισωμάτων IgC ή IgA αντι-απαμιδιωμένων πεπτιδίων γλιαδίνης. Περιορισμοί Αυτοί οι οροί βαθμονόμησης έχουν σχεδιαστεί για 4 βαθμονομήσεις. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού βαθμονόμησης μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 8 ώρες. Εάν οι οροί βαθμονόμησης παραμείνουν ανοιχτοί πάνω στη συσκευή για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα, πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση των ίδιων σωληναρίων ορού βαθμονόμησης για περισσότερες από 4 βαθμονομήσεις ή/και για περισσότερες από 8 ώρες μπορεί να προκαλέσει λανθασμένη βαθμονόμηση της ανάλυσης, η οποία ενδέχεται, με τη σειρά της, να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 13

14 QUANTA Flash DGP Screen Οροί ελέγχου Για in vitro διαγνωστική χρήση Σκοπός χρήσης Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen προορίζονται για τον έλεγχο ποιότητας του κιτ ανάλυσης ανοσοπροσδιορισμού χημιφωταύγειας (CIA) QUANTA Flash DGP Screen σε μια συσκευή BIO-FLASH. Περίληψη και βασικές αρχές της διαδικασίας Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen αποτελούνται από έναν Αρνητικό και ένα Θετικό ορό ελέγχου. Κάθε ορός περιέχει μια διαφορετική ποσότητα αντισωμάτων αντι-dgp. Ο Αρνητικός ορός ελέγχου έχει σχεδιαστεί για την αξιολόγηση της ακρίβειας και της ορθότητας της ανάλυσης σε πολύ χαμηλά επίπεδα αντισωμάτων. Ο Θετικός ορός ελέγχου έχει σχεδιαστεί για την αξιολόγηση της ακρίβειας και της ορθότητας της ανάλυσης σε μεσαία έως υψηλά επίπεδα αντισωμάτων. Αντιδραστήρια 1. Αρνητικός ορός ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού DGP, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,5mL (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). 2. Θετικός ορός ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen: Δύο (2) σωληνάρια ρυθμιστικού διαλύματος, σημασμένα με γραμμικό κώδικα, τα οποία περιέχουν αντισώματα ανθρώπινου ορού DGP, προαραιωμένου και έτοιμου προς χρήση, 0,5mL (που περιέχουν ρυθμιστικό διάλυμα, σταθεροποιητές πρωτεΐνης και συντηρητικά). Προειδοποιήσεις 1. Οι οροί ελέγχου περιέχουν μια χημική ουσία (0,02% χλωραμφαινικόλης), η οποία είναι γνωστή στην Πολιτεία της Καλιφόρνιας ότι προκαλεί καρκίνο. 2. Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των ματιών. Το αζίδιο του νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Ξεπλύνετε τις λεκάνες απόπλυσης, εφόσον τις χρησιμοποιείτε για την απόρριψη του αντιδραστηρίου, με άφθονο νερό, ώστε να αποφευχθεί η συγκέντρωση των αζιδίων. 3. Όλα τα ανθρώπινα υλικά που χρησιμοποιήθηκαν στην προετοιμασία των πρότυπων ορών για αυτό το προϊόν έχουν εξεταστεί και βρέθηκαν αρνητικά για αντισώματα HIV, HBsAg και HCV από εγκεκριμένες μεθόδους FDA. Ωστόσο, καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να προσφέρει πλήρη διασφάλιση για την απουσία των HIV, HBV, HCV ή άλλων μολυσματικών παραγόντων. Για αυτόν το λόγο, οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen πρέπει να τυγχάνουν της ίδιας μεταχείρισης με ένα πιθανώς μολυσματικό προϊόν Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό, όταν εργάζεστε με τα αντιδραστήρια που παρέχονται. 5. Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη αποβλήτων. 14

15 Προφυλάξεις 1. Αυτό το προϊόν προορίζεται για In Vitro διαγνωστική χρήση. 2. Οι Οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen προορίζονται για χρήση με την ανάλυση QUANTA Flash DGP Screen. 3. Μην μεταφέρετε τα αντιδραστήρια των ορών ελέγχου σε άλλα σωληνάρια. Οι γραμμικοί κώδικες που υπάρχουν στα σωληνάρια χρησιμοποιούνται από τη συσκευή για τον προσδιορισμό του ορού ελέγχου. 4. Μετά το άνοιγμά του, κάθε σωληνάριο ορού ελέγχου μπορεί να χρησιμοποιηθεί 15 φορές το μέγιστο και μπορεί να παραμείνει πάνω στη συσκευή για μέγιστο χρονικό διάστημα 10 λεπτών ανά χρήση. 5. Ο ανεπαρκής καθαρισμός ή η ανεπαρκής πλύση της συσκευής μπορεί να προκαλέσει χημική μόλυνση των αντιδραστηρίων. Κατάλοιπα από κοινά εργαστηριακά χημικά, όπως η φορμαλίνη, η χλωρίνη, η αιθανόλη ή τα απορρυπαντικά ενδέχεται να προκαλέσουν παρεμβολή στην ανάλυση. Φροντίστε να τηρήσετε τη συνιστώμενη διαδικασία καθαρισμού της συσκευής που περιγράφεται στο εγχειρίδιο χειριστή του BIO-FLASH. Συνθήκες αποθήκευσης 1. Φυλάξτε τους ορούς ελέγχου που δεν έχουν ανοιχθεί στους 2-8 C. Να μην καταψύχονται. Είναι σταθεροί για χρήση μέχρι τη λήξη τους, εάν τους αποθηκεύετε και τους χειρίζεστε σύμφωνα με τις οδηγίες. 2. Μετά από το άνοιγμά τους, οι οροί ελέγχου μπορούν να χρησιμοποιηθούν 15 φορές το μέγιστο και μπορούν να παραμείνουν πάνω στη συσκευή για μέγιστο χρονικό διάστημα 10 λεπτών ανά χρήση. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού ελέγχου μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 2 ½ ώρες ή 10 λεπτά ανά χρήση. Εάν οι οροί ελέγχου παραμείνουν χωρίς καπάκι επάνω στη συσκευή για περισσότερο από 2 ½ ώρες, οι οροί ελέγχου πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση των ίδιων σωληναρίων ορού ελέγχου για περισσότερες από 15 χρήσεις ή/και για περισσότερες από 2 ½ ώρες συνολικά μπορεί να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 3. Για βέλτιστη σταθερότητα, αφαιρέστε τους ορούς ελέγχου από το σύστημα αμέσως μετά τη δειγματοληψία του ορού και αποθηκεύστε τους σε θερμοκρασία 2-8 C με κλειστό το αρχικό φιαλίδιο. Διαδικασία Για να δημιουργήσετε νέα υλικά ποιοτικού ελέγχου για την ανάλυση DGP Screen: 1. Πριν από την πρώτη χρήση μιας νέας παρτίδας Ορών ελέγχου QUANTA DGP Screen στη συσκευή, καταχωρήστε στο λογισμικό το όνομα, την παρτίδα, τα δείγματα, τα αντίγραφα, την ημερομηνία λήξης, την τιμή (ή τη δόση) και τα στοιχεία τυπικής απόκλισης προορισμού. 2. Από την οθόνη Συνοπτική παρουσίαση συσκευής, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Επιλογή περισσότερων ρυθμίσεων Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο QC Ctrl-F2. Επισημάνετε την ανάλυση DGP Screen στη στήλη που βρίσκεται στα αριστερά. Κάντε κλικ στο κουμπί Νέο υλικό QC. 3. Κάθε σετ Ορών ελέγχου συνοδεύεται από ένα ειδικό φύλλο δεδομένων για την παρτίδα. Καταχωρήστε το όνομα, τον αριθμό παρτίδας και τη λήξη από αυτό το φύλλο δεδομένων στο λογισμικό. Στη συνέχεια, κάντε κλικ στο κουμπί Προσθήκη ανάλυσης. Στο νέο παράθυρο, βεβαιωθείτε ότι είναι επιλεγμένο το πλαίσιο Εμφάνιση όλων των αναλύσεων. Επιλέξτε την ανάλυση DGP Screen από τη λίστα και κάντε κλικ στην επιλογή Προσθήκη. Τέλος, καταχωρήστε την προοριζόμενη δόση και την τυπική απόκλιση προορισμού. Κάντε κλικ στο κουμπί Δημιουργία. Εκτελέστε αυτήν τη διαδικασία και για τους δύο ορούς ελέγχου. 15

16 Για να δημιουργήσετε μια νέα παρτίδα για υπάρχον υλικό ποιοτικού ελέγχου: 1. Πριν από την πρώτη χρήση μιας νέας παρτίδας Ορών ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen, πρέπει να καταχωρήσετε στο λογισμικό το όνομα, την παρτίδα, τηn ημερομηνία λήξης, την τιμή (ή τη δόση) και τα στοιχεία τυπικής απόκλισης προορισμού. 2. Από την οθόνη Συνοπτική παρουσίαση συσκευής, κάντε κλικ στο κουμπί βέλους Επιλογή περισσότερων ρυθμίσεων Ctrl-M ( ). Επιλέξτε το στοιχείο QC Ctrl-F2. Επισημάνετε την ανάλυση DGP Screen στη στήλη που βρίσκεται στα αριστερά. Στη συνέχεια, επισημάνετε το κατάλληλο υλικό ορού ελέγχου στα δεξιά ( DGPSN για τον Αρνητικό ορό ελέγχου ή DGPSP για το Θετικό ορό ελέγχου). Κάντε κλικ στο κουμπί Νέα παρτίδα QC. 3. Κάθε σετ Ορών ελέγχου συνοδεύεται από ένα ειδικό φύλλο δεδομένων για την παρτίδα. Καταχωρήστε τις πληροφορίες αυτού του φύλλου δεδομένων στο λογισμικό. Οι πληροφορίες αυτές πρέπει να περιλαμβάνουν το όνομα, τον αριθμό παρτίδας, την ημερομηνία λήξης, την προοριζόμενη δόση και τα δεδομένα τυπικής απόκλισης προορισμού. Κάντε κλικ στο κουμπί Αποθήκευση. Εκτελέστε αυτήν τη διαδικασία και για τους δύο ορούς ελέγχου. Συνιστάται οι οροί ελέγχου QUANTA Flash DGP Screen να χρησιμοποιούνται μία φορά την ημέρα για κάθε ημέρα χρήσης της ανάλυσης.κάθε ορός ελέγχου πρέπει να αναμιγνύεται με προσοχή για να εξασφαλιστεί η ομοιογένειά του. Αποφεύγετε το σχηματισμό αφρού, καθώς οι φυσαλίδες ενδέχεται να παρεμποδίσουν τη λειτουργία ανίχνευσης της στάθμης υγρού της συσκευής. Αφαιρέστε το πώμα από κάθε σωληνάριο ορού ελέγχου και τοποθετήστε και τα δύο σωληνάρια σε μια ράβδο δειγμάτων με τους γραμμικούς κώδικες στραμμένους προς τα κενά της ράβδου. Τοποθετήστε τη ράβδο δειγμάτων στην περιστρεφόμενη θήκη δειγμάτων της συσκευής BIO-FLASH και κλείστε τη θύρα. Η συσκευή θα πραγματοποιήσει ανάγνωση των γραμμικών κωδίκων που βρίσκονται στα σωληνάρια των ορών ελέγχου και θα προσδιορίσει το απαιτούμενο φυσίγγιο αντιδραστηρίου. Για λεπτομερείς οδηγίες χειρισμού του αναλυτή χημιφωταύγειας BIO-FLASH και του λογισμικού BIO-FLASH, ανατρέξτε στο εγχειρίδιο χειριστή που παρέχεται με το σύστημα BIO-FLASH. Ανιχνευσιμότητα Προς το παρόν δεν υπάρχει αναγνωρισμένο διεθνές πρότυπο για τη μέτρηση των αντισωμάτων IgC ή IgA αντι-απαμιδιωμένων πεπτιδίων γλιαδίνης. Περιορισμοί Αυτοί οι οροί ελέγχου έχουν σχεδιαστεί για 15 χρήσεις. Η ετικέτα κάθε σωληναρίου ορού ελέγχου διαθέτει μια σειρά 15 πλαισίων, τα οποία μπορείτε να σημειώνετε για να παρακολουθείτε τον αριθμό χρήσεων. Ο συνολικός χρόνος κατά τον οποίο τα σωληνάρια ορού ελέγχου μπορούν να παραμείνουν ανοιχτά πάνω στη συσκευή είναι 2 ½ ώρες ή 10 λεπτά ανά χρήση. Εάν οι οροί ελέγχου παραμείνουν ανοιχτοί πάνω στη συσκευή για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα από 2 ½ ώρες, πρέπει να απορριφθούν. Η χρήση των ίδιων σωληναρίων ορού ελέγχου για περισσότερες από 15 χρήσεις ή/και για περισσότερες από 2 ½ ώρες συνολικά μπορεί να οδηγήσει σε λανθασμένα αποτελέσματα. 16

17 Παραπομπές 1. Trier JS: Celiac Sprue. New England Journal of Medicine 325: , Troncone R and Ferguson A: Antigliadin antibodies. J Pediatr Gastroenterol Nutr 12: , Fasano A, Berti I, Gerarduzzi T, Not T, Colletti RB, Drago S, Elitsur Y, Green PH, Guandalini S, Hill ID, Pietzak M, Ventura A, Thorpe M, Kryszak D, Fornaroli F, Wasserman SS, Murray JA, Horvath K: Prevalence of celiac disease in at-risk and not-at-risk groups in the United States: a large multicenter study. Arch Intern Med. 163(3): , Dubé C, Rostom A, Sy R, Cranney A, Saloojee N, Garritty C, Sampson M, Zhang L, Yazdi F, Mamaladze V, Pan I, Macneil J, Mack D, Patel D, Moher D.: The prevalence of celiac disease in average-risk and at-risk Western European populations: a systematic review. Gastroenterology 128(4 Suppl 1): S57-67, Working Group of European Society of Paediatric Gastroenterology and Nutrition. Revised criteria for diagnosis of coeliac disease. Arch Dis Child 65: , McMillan SA, Haughton DJ, et al.: Predictive value for coeliac disease of antibodies to gliadin, endomysium and jejunum in patients attending for jejunal biopsy. BMJ 303: , Sugai E, Moreno ML et al: Celiac disease serology in patients with different pre-test probabilities: Is biopsy avoidable? World J Gastroenterol 16: , Burgin-Wolff A, Gaze H, et al.: Antigliadin and antiendomysium antibody determination for coeliac disease. Arch Dis Child 66: , Osman AA, et al.: B-Cell epitopes of gliadin. Clin Exp Immunol 121: , Aleanzi M, et al.: Celiac disease: Antibody recognition against native and selectively deamidaion gliadin peptides. Clinical Chemistry 47: , Schwertz E, et al.: Serologic assay based on gliadin-related nonapeptides as a highly sensitive and specific diagnostic aid in celiac disease. Clinical Chemistry 50: , Fleckenstein B, Qiao S-W, et al: Molecular characterization of covalent complexes between tissue transglutaminase and gliadin peptides. J Biol Chem 279: , Prince HE: Evaluations of the INOVA Diagnostics Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Kits for Measuring Serum Immunoglobulins G (IgG) and IgA to Deamidated Gliadin Peptides. Clinical and Vaccine Immunology 13: , Sugai E, et al.: Accuracy of Testing Antibodies to Synthetic Gliadin-Related Peptides in Celiac Disease. Clinical Gastroenterology and Hepatology 4: , Kurppa K, Lindfors K, et al: Antibodies against deamidated gliadin peptides in early stage celiac disease. J Clin Gastroenterol 2010 (epub ahead of print). 16. Volta U, Granito A, et al: Deamidated gliadin peptide antibodies as a routine test for celiac disease. J Clin Gastroenterol 44: (2010). 17. Collin P, et al.: Selective IgA deficiency and coeliac disease. Scand Journal Gastroenterology 27: , Smecuol E, et al.: Permeability, Zonulin Production, and Enteropathy in Dermatitis Herpetiformis. Clinical Gastroenterlogy and Hepatology 3: , Beutner EH, et al.: Sensitivity and Specificity of IgA-class antiendomysial antibodies for dermatitis herpetiformis and findings relevant to their pathogenic significance. Journal of the American Academy of Dermatology 15: , Jaskowski TD, Donaldson MR et al: Novel screening assay performance in pediatric celiac disease and adult dermatitis herpetiformis. JPGN 51: 19-23, Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health, Fifth Edition,

18 Σύμβολα που χρησιμοποιούνται In vitro διαγνωστική ιατρική συσκευή Ανατρέξτε στις οδηγίες χρήσης Περιορισμοί θερμοκρασίας Προϊόν μίας χρήσης Βιολογικοί κίνδυνοι Κωδικός παρτίδας Αριθμός καταλόγου Ανάλωση κατά προτίμηση έως Κατασκευαστής Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος Περιέχει επαρκές υλικό για < n > δοκιμασίες Θετικός ορός ελέγχου Αρνητικός ορός ελέγχου Ορός βαθμονόμησης 1 Ορός βαθμονόμησης 2 Ανακυκλώσιμη χάρτινη συσκευασία Αυτή η πλευρά πρέπει να βρίσκεται προς τα πάνω Η επωνυμία QUANTA Flash είναι εμπορικό σήμα της INOVA Diagnostics Inc. Η επωνυμία BIO- FLASH είναι καταχωρημένο εμπορικό σήμα της Biokit S.A

19 Κατασκευαστής: INOVA Diagnostics, Inc Old Grove Road San Diego, CA United States of America Τεχνική υποστήριξη (Εγχώρια) : Τεχνική υποστήριξη (Διεθνής) : support@inovadx.com Εξουσιοδοτημένος αντιπρόσωπος στην Ε.Ε.: Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstrasse 80 D St. Ingbert, Germany Τηλ.: Φαξ: GRC Δεκέμβριος 2011 Έκδοση αναθεώρησης 2 19