White Rose Research Online URL for this paper: Version: Accepted Version

Transcript

1 This is a repository copy of Topical 11β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 Inhibition Corrects Cutaneous Features of Systemic Glucocorticoid Excess in Female Mice. White Rose Research Online URL for this paper: Version: Accepted Version Article: Tiganescu, A orcid.org/ , Hupe, M, Uchida, Y et al. (3 more authors) (218) Topical 11β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 Inhibition Corrects Cutaneous Features of Systemic Glucocorticoid Excess in Female Mice. Endocrinology, 159 (1). pp ISSN Endocrine Society. This is a pre-copyedited, author-produced PDF of an article accepted for publication in 217 Endocrine Society following peer review. The version of record, Ana Tiganescu, Melanie Hupe, Yoshikazu Uchida, Theadora Mauro, Peter M Elias, Walter M Holleran; Topical 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 inhibition corrects cutaneous features of systemic glucocorticoid excess in female mice, Endocrinology, is available online at: Reuse Items deposited in White Rose Research Online are protected by copyright, with all rights reserved unless indicated otherwise. They may be downloaded and/or printed for private study, or other acts as permitted by national copyright laws. The publisher or other rights holders may allow further reproduction and re-use of the full text version. This is indicated by the licence information on the White Rose Research Online record for the item. Takedown If you consider content in White Rose Research Online to be in breach of UK law, please notify us by ing eprints@whiterose.ac.uk including the URL of the record and the reason for the withdrawal request. eprints@whiterose.ac.uk

2 This is an author produced version of Topical 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 inhibition corrects cutaneous features of systemic glucocorticoid excess in female mice. White Rose Research Online URL for this paper: Article: Tiganescu, A orcid.org/ , Hupe, M, Uchida, Y et al. (3 more authors) (217) Topical 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 inhibition corrects cutaneous features of systemic glucocorticoid excess in female mice. Endocrinology. ISSN (In Press) promoting access to White Rose research papers eprints@whiterose.ac.uk

3 1 2 Τοπιχαλ ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 ινηιβιτιον χορρεχτσ χυτανεουσ φεατυρεσ οφ σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ ιν φεmαλε mιχε 3 4 Ανα Τιγανεσχυ 1,2, Μελανιε Ηυπε 2, Ψοσηικαζυ Υχηιδα 2, Τηεαδορα Μαυρο 2, Πετερ Μ Ελιασ 2, Wαλτερ Μ Ηολλεραν Υνιϖερσιτψ οφ Λεεδσ, Λεεδσ Ινστιτυτε οφ Ρηευmατιχ ανδ Μυσχυλοσκελεταλ Μεδιχινε, Λεεδσ, ΥΚ Υνιϖερσιτψ οφ Χαλιφορνια Σαν Φρανχισχο, Dεπαρτmεντ οφ Dερmατολογψ, Σαν Φρανχισχο, ΧΑ, ΥΣΑ (ινστιτυτε ωηερε τηε ωορκ ωασ χονδυχτεδ) 8 Σηορτ τιτλε: Σκιν ΗΣD1 βλοχκαδε χορρεχτσ στεροιδ εφφεχτσ Κεψωορδσ: Γλυχοχορτιχοιδ Σκιν Wουνδ ηεαλινγ 11 βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 Επιδερmαλ βαρριερ Τρανσ επιδερmαλ ωατερ λοσσ Χορρεσπονδινγ αυτηορ: Ανα Τιγανεσχυ Λεεδσ Ινστιτυτε οφ Ρηευmατιχ ανδ Μυσχυλοσκελεταλ Μεδιχινε Λεϖελ 8, Wελλχοmε Τρυστ Βρεννερ Βυιλδινγ Στ ϑαmεσ σ Υνιϖερσιτψ Ηοσπιταλ, Λεεδσ, ΛΣ9 7ΤΦ α.τιγανεσχυ λεεδσ.αχ.υκ

4 24 Αβστραχτ Γλυχοχορτιχοιδ (ΓΧ) εξχεσσ δριϖεσ mυλτιπλε χυτανεουσ αδϖερσε εφφεχτσ ινχλυδινγ σκιν τηιννινγ ανδ ποορ ωουνδ ηεαλινγ. Τηε υβιθυιτουσλψ εξπρεσσεδ ενζψmε ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 ΗΣD1) αχτιϖατεσ mουσε χορτιχοστερονε φροm 11 δεηψδροχορτιχοστερονε (ανδ ηυmαν χορτισολ φροm χορτισονε). Wε πρεϖιουσλψ δεmο ΗΣD1 αχτιϖιτψ δυρινγ mουσε ωουνδ ηεαλινγ ΗΣD1 ανδ σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ ισ υνεξπλορεδ. Ηερε, ΗΣD1 ινηιβιτιον βψ χαρβενοξολονε (ΧΒΞ) ιν mιχε τρεατεδ ωιτη χορτιχοστερονε (ΧΟΡΤ) ορ ϖεηιχλε φορ 6 ωεεκσ. Μιχε ωερε τρεατεδ βι δαιλψ ωιτη τοπιχαλ ΧΒΞ ορ ϖεηιχλε 7 δαψσ βεφορε ωουνδινγ ανδ δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ. ΧΟΡΤ mιχε δισπλαψεδ σκιν τηιννινγ ανδ ιmπαιρεδ ωουνδ ηεαλινγ βυτ αλσο ινχρεασεδ επιδερmαλ ιντεγριτψ. ΗΣD1 αχτιϖιτψ ωασ ελεϖατεδ ιν υνωουνδεδ ΧΟΡΤ σκιν ανδ ωασ ινηιβιτεδ βψ ΧΒΞ. ΧΟΡΤ mιχε τρεατεδ ωιτη ΧΒΞ δισπλαψεδ 51%, 59% ανδ 1% νορmαλιζατιον οφ ωουνδ ηεαλινγ, επιδερmαλ τηιχκνεσσ ανδ επιδερmαλ ιντεγριτψ, ρεσπεχτιϖελψ. Γενε εξπρεσσιον στυδιεσ ρεϖεαλεδ νορmαλιζατιον οφ ιντερλευκιν 6, κερατινοχψτε γροωτη φαχτορ, χολλαγεν 1, χολλαγεν 3, mατριξ mεταλλοπροτεινασε 9 ανδ τισσυε ινηιβιτορ οφ mατριξ mεταλλοπροτεινασε 4 βψ ΧΒΞ δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ. Ιmπορταντλψ, προ ινφλαmmατορψ χψτοκινε εξπρεσσιον ανδ ρεσολυτιον οφ ινφλαmmατιον ωασ ΗΣD1 ινηιβιτιον. ΧΒΞ διδ νοτ ρεγυλατε σκιν φυνχτιον ορ ωουνδ ηεαλινγ ιν τηε αβσενχε οφ ΧΟΡΤ. O ΗΣD1 ινηιβιτιον χαν λιmιτ τηε χυτανεουσ εφφεχτσ οφ ΓΧ εξχεσσ ωηιχη mαψ ιmπροϖε τηε σαφετψ προφιλε οφ σψστεmιχ στεροιδσ ανδ τηε προγνοσισ οφ χηρονιχ ωουνδσ. 43 2

5 44 Πρ χισ T ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 ινηιβιτιον νορmαλιζεσ στεροιδ ινδυχεδ σκιν τηιννινγ, επιδερmαλ ιντεγριτψ, ποορ ηεαλινγ ανδ γενε δψσρεγυλατιον δεσπιτε ονγοινγ σψστεmιχ στεροιδ εξποσυρε. 3

6 48 Ιντροδυχτιον Σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ (ΓΧ) τηεραπψ ρεmαινσ mαινστρεαm τρεατmεντ φορ mανψ ινφλαmmατορψ δισεασεσ ε.γ. λυπυσ, αστηmα, χηρονιχ οβστρυχτιϖε πυλmοναρψ δισεασε, ινφλαmmατορψ βοωελ δισεασε, mυλτιπλε σχλεροσισ, πολψmψαλγια ρηευmατιχα ανδ γιαντ χελλ αρτεριτισ. Ρεχεντ εστιmατεσ ινδιχατε τηατ 1.2% οφ τηε ΥΣ ποπυλατιον (>2.5 mιλλιον πεοπλε) ωερε πρεσχριβεδ οραλ ΓΧ βετωεεν 1999 ανδ 28, 28% οφ ωηοm ρεπορτεδ υσε οφ >5 ψεαρσ (1). Dεσπιτε αντι ινφλαmmατορψ βενεφιτσ, χηρονιχ ΓΧ εξχεσσ δριϖεσ αδϖερσε σιδε εφφεχτσ ινχλυδινγ ωειγητ γαιν, ηψπερτενσιον, ηψπεργλψχεmια, οστεοποροσισ, mυσχλε ωεακνεσσ, γλαυχοmα ανδ δεπρεσσιον (2). ΓΧ τηεραπψ αλσο συβσταντιαλλψ ινχρεασεσ ηεαλτηχαρε χοστσ. Ιν πατιεντσ ωιτη σψστεmιχ λυπυσ ερψτηεmατοσυσ, ΓΧ υσε ωασ ασσοχιατεδ ωιτη α τηρεε φολδ ινχρεασε ιν αννυαλ εξπενδιτυρε (3). Ιν α στυδψ οφ πατιεντσ ωιτη σεϖερε αστηmα, ηιγη δοσε ΓΧ υσε ωασ ασσοχιατεδ ωιτη αννυαλ ινχρεmεντσ οφ 5479 ρελατιϖε το λοω ΓΧ εξποσυρε (4). Μορεοϖερ, τηε ινχιδενχε ανδ ιmπαχτ οφ ΓΧ ρελατεδ σιδε εφφεχτσ ισ υνδερ ρεπορτεδ (5) ανδ φυρτηερ χοmπουνδεδ βψ ΓΧ οϖερ πρεσχριπτιον (6) Ιν σκιν, ΓΧ εξχεσσ χαυσεσ αχνε, τηιννινγ, δρψνεσσ, ατροπηιχ στριαε, τελανγιεχτασια, βρυισινγ, ιmπαιρεδ ωουνδ ηεαλινγ (WΗ) ανδ ινχρεασεδ ινφεχτιον ρισκ (2,7). Σκιν βρυισινγ ανδ τηιννινγ ηαϖε αλσο βεεν ρεπορτεδ ωιτη λοω δοσε (<7.5 mγ/δαψ) ΓΧ τηεραπψ (8). Ιν α συρϖεψ οφ αστηmα πηψσιχιανσ, χυτανεουσ mανιφεστατιονσ ωερε τηε σεχονδ mοστ φρεθυεντλψ ρεπορτεδ χοmπλιχατιον οφ ινηαλεδ ΓΧ (9). Dεσπιτε ρεχεντ αδϖανχεσ ιν ΓΧ mιmετιχσ ανδ ΓΧ ινδεπενδεντ ιmmυνε συππρεσσαντσ δισσοχιατινγ ΓΧ αντι ινφλαmmατορψ βενεφιτσ φροm σιδε εφφεχτσ ρεmαινσ ελυσιϖε (1) Ιτ ισ νοω εσταβλισηεδ τηατ ηυmαν σκιν ηασ χορτιχοστεροιδογενιχ χαπαβιλιτψ τηατ ισ ρεγυλατεδ ιν α χοmπλεξ ωαψ (11,12), αλτηουγη τηισ φυνχτιον ισ λαχκινγ ιν mουσε σκιν (13). Περιπηεραλ ΓΧ αϖαιλαβιλιτψ ισ αλσο ρεγυλατεδ βψ 11 βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε ΗΣD1) ωηιχη χονϖερτσ βιολογιχαλλψ ινερτ χορτισονε ανδ 11 δεηψδροχορτιχοστερονε το χορτισολ ανδ χορτιχοστερονε ιν ηυmανσ ανδ mιχε, ρεσπεχτιϖελψ I ΗΣD1 φυνχτιονσ πρεδοmιναντλψ ασ α ρεδυχτασε ιν αν ΝΑDΠΗ δεπενδεντ mαννερ (14). Wε ΗΣD1 αχτιϖιτψ δυρινγ 4

7 73 74 mουσε σκιν WΗ (13), ιν αγεδ mουσε ανδ ηυmαν σκιν (15,16) ανδ αχχελερατ WH ΗΣD1 νυλλ mιχε (16). Ηοωεϖερ, τηε ρολε ΗΣD1 ιν ιmπαιρεδ WΗ ισ υνκνοων Wε πρ ΗΣD1 ισ α χαυσατιϖε αγεντ οφ χυτανεουσ σιδε εφφεχτσ δυρινγ σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ WH ΗΣD1 ινηιβιτορσ αρε ρεαδιλψ αϖαιλαβλε, συχη α δεmονστρατιον χουλδ λεαδ το ραπιδ προγρεσσ ιν αmελιορατινγ τηισ mαϕορ χλινιχαλ προβλεm. Ηερε, ωε W ΗΣD1 ινηιβιτιον βψ χαρβενοξολονε (ΧΒΞ) ον σκιν φυνχτιον ιν mιχε τρεατεδ ωιτη οραλ χορτιχοστερονε ανδ εξαmινε ινφλαmmατορψ, γροωτη φαχτορ ανδ εξτραχελλυλαρ mατριξ γενε εξπρεσσιον ρεσπονσεσ δυρινγ WΗ. W ΗΣD1 ινηιβιτιον αχχελερατεσ WΗ ανδ ρεδυχεσ σκιν δαmαγε ιν στεροιδ τρεατεδ mιχε ωιτηουτ χοmπροmισινγ τηε ινφλαmmατορψ ρεσπονσε. 83 Ματεριαλσ ανδ Μετηοδσ 84 Dεχλαρατιονσ Στυδιεσ πρεσεντεδ ιν τηισ παπερ ωερε αππροϖεδ βψ τηε Ινστιτυτιοναλ Ανιmαλ Χαρε ανδ Υσε Χοmmιττεε ανδ Σαν Φρανχισχο ςετερανσ Αφφαιρσ Μεδιχαλ Χεντερ ςετεριναρψ Μεδιχαλ Υνιτ. Ματεριαλσ ωερε οβταινεδ φροm Σιγmα Αλδριχη υνλεσσ οτηερωισε στατεδ. 88 Ανιmαλ Στυδιεσ Φεmαλε ΣΚΗ1 ηαιρλεσσ mιχε (8 1 ωεεκσ ολδ) ωερε οβταινεδ φροm Χηαρλεσ Ριϖερ Λαβσ (Wιλmινγτον, ΜΑ, ΥΣΑ) ανδ αχχλιmατιζεδ φορ 2 ωεεκσ. Μιχε ωερε γρουπ ηουσεδ, συππλιεδ ωιτη α βασαλ χηοω διετ αδ λιβιτυm ανδ εξποσεδ το α στανδαρδ 12η λιγητ/δαρκ χψχλε. Dρινκινγ ωατερ ωασ συππλεmεντεδ ωιτη ) ορ ϖεηιχλε (.66% ετηανολ) φορ 6 ωεεκσ (ρεπλαχεδ τωιχε ωεεκλψ). 7 δαψσ πριορ το ωουνδινγ, 1 γ/χm 2 τοπιχαλ ΧΒΞ (2 λ) ορ ϖεηιχλε (7% προπψλενε γλψχολ, 3% ετηανολ) ωασ mασσαγεδ ιντο 2χm 2 σκιν υντιλ φυλλψ αβσορβεδ. Τρεατmεντσ ωερε ρεπεατεδ βι δαιλψ φορ τηε ρεmαινδερ ωουνδινγ. 5

8 η πριορ το ωουνδινγ, επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον ωασ mεασυρεδ υσινγ α Τεωαmετερ 3 (Χουραγε + Κηαζακα, Χολογνε, Γερmανψ) το εϖαλυατε τρανσ επιδερmαλ ωατερ λοσσ (ΤΕWΛ). Επιδερmαλ βαρριερ ρεχοϖερψ ωασ δετερmινεδ ατ 2 ανδ 4η φολλοωινγ δισρυπτιον βψ σεθυεντιαλ D Σθυαmε ταπε στριππινγ το α ΤΕWΛ λεϖελ οφ >3γ/η/m 2. Επιδερmαλ ιντεγριτψ ωασ δεφινεδ ασ τηε νυmβερ οφ ταπε στριπσ ρεθυιρεδ το αχηιεϖε βαρριερ δισρυπτιον WΗ ωασ χονδυχτεδ ασ πρεϖιουσλψ δεσχριβεδ (13). Βριεφλψ, mιχε ανεστηετιζεδ υνδερ 2% ισοφλυρανε ωερε ωουνδεδ ον βοτη δορσαλ φλανκσ βψ 5mm πυνχη βιοπσψ (Αχυδερm, Φορτ Λαυδερδαλε, ΦΛ, ΥΣΑ). Wουνδ Ατ 2, 4 ανδ 9 δαψσ ποστ ωουνδινγ, mιχε ωερε χυλλεδ βψ χερϖιχαλ δισλοχατιον, ωουνδσ ωερε διγιταλλψ ιmαγεδ ΗΣD1 αχτιϖιτψ ασσαψ, ΡΝΑ εξτραχτιον ορ ηιστολογψ. Wουνδ αρεασ ωερε δετερmινεδ βψ Ιmαγεϑ (ΝΙΗ, Βετηεσδα, ΜD, ΥΣΑ) Εξπεριmεντσ ωερε αλσο ρεπλιχατεδ ιν χοντρολ mιχε (υντρεατεδ δρινκινγ ωατερ) τρεατεδ ωιτη ϖεηιχλε ορ ΧΒΞ. 19 ΗΣD1 αχτιϖιτψ ασσαψ Ραδιοαχτιϖε χονϖερσιον οφ τριτιατεδ ΗΣD1 συβστρατε ισ τηε γολδ στανδαρδ mεασυρε οφ ΗΣD1 αχτιϖιτψ ασ τισσυε στεροιδ εξτραχτιον εφφιχιενχιεσ αρε ϖαριαβλε ανδ λεσσ σενσιτιϖε Φρεσηλψ ισολατεδ σκιν (2 4mγ) ωασ ινχυβατεδ ιmmεδιατελψ ιν 1mλ ηιγη γλυχοσε ανδ πψρυϖατε DΜΕΜ ωιτη 1νΜ 11 δεηψδροχορτιχοστερονε (Στεραλοιδσ, Νεωπορτ, ΡΙ, ΥΣΑ) ανδ 15χπm [3Η] 11 δεηψδροχορτιχοστερονε, γενερατεδ ιν ηουσε ασ πρεϖιουσλψ δεσχριβεδ (13). Σαmπλεσ ωερε ινχυβατεδ ατ 37 Χ φορ 13η. Συβσεθυεντλψ, τισσυεσ ωερε ωειγηεδ ανδ στεροιδσ εξτραχτεδ ανδ σεπαρατεδ βψ ΤΛΧ ιν 186mλ χηλοροφορm ανδ 14mλ ετηανολ φορ 9mιν (χο mιγρατεδ ωιτη 1mΜ 11 δεηψδροχορτιχοστερονε / χορτιχοστερονε στανδαρδσ). Πλατε ρεγιονσ ιδεντιφιεδ υνδερ Υς ωερε εξχισεδ ανδ περχενταγε χονϖερσιον οφ 11 δεηψδροχορτιχοστερονε το χορτιχοστερονε ωασ δετερmινεδ φολλοωινγ λιθυιδ σχιντιλλατιον. 6

9 12 Θυαντιτατιϖε ΠΧΡ Φρεση σκιν τισσυε (2 4mγ) ωασ σναπ φροζεν ανδ στορεδ ατ 8 Χ. Σαmπλεσ ωερε ηοmογενιζεδ ιν 1mλ Τριζολ ανδ ΡΝΑ εξτραχτεδ υσινγ α ΠυρεΛινκ ΡΝΑ Μινι Κιτ (Λιφε Τεχηνολογιεσ, Γρανδ Ισλανδ, ΝΨ, ΥΣΑ). χdνα ωασ γενερατεδ φροm 1.2 γ ΡΝΑ υσινγ α Τετρο χdνα Σψντηεσισ Κιτ (Βιολινε, Ταυντον, ΜΑ, ΥΣΑ). θπχρ ωασ χονδυχτεδ ιν 1 λ ρεαχτιονσ υσινγ α ΣενσιΦΑΣΤ Προβε Κιτ (Βιολινε) ωιτη 9νΜ ΤαθΜαν πριmερσ (ωιτη 25νΜ ΦΑΜ προβε) ορ 5νΜ 18Σ ρρνα πριmερσ (ωιτη 2νΜ ςιχ προβε) mιξ (Λιφε Τεχηνολογιεσ) ανδ 1νγ χdνα. Dυπλιχατε ΠΧΡσ ωερε περφορmεδ ανδ αναλψζεδ, ασ πρεϖιουσλψ δεσχριβεδ (13). 128 Σερυm χορτιχοστερονε Φορ σερυm χορτιχοστερονε, 4 λ οφ βλοοδ ωασ οβταινεδ βψ τερmιναλ χαρδιαχ πυνχτυρε ατ 11 ΑΜ ανδ ινχυβατεδ φορ 1η ατ 5 Χ βεφορε χεντριφυγινγ ατ 1 ξ ΡΧΦ φορ 5mιν. Χοστιχοστερονε λεϖελσ ωερε δετερmινεδ υσινγ α χορτιχοστερονε ΕΙΑ Κιτ (Χαψmαν Χηεmιχαλ, Ανν Αρβορ, ΜΙ, ΥΣΑ). 132 Ηιστολογψ Φρεσηλψ ισολατεδ σαmπλεσ ωερε στορεδ ιν Φορmαλδε Φρεση (Φισηερ Σχιεντιφιχ, Πιττσβυργη, ΠΑ, ΥΣΑ) ανδ προχεσσεδ ιντο παραφφιν βλοχκσ. 5 m σεχτιονσ ωερε δε ωαξεδ, ρεηψδρατεδ, ανδ σταινεδ ωιτη ηεmατοξψλιν ανδ εοσιν (Λειχα, Βυφφαλο Γροϖε, ΙΛ, ΥΣΑ ανδ Τηερmο Σχιεντιφιχ, Καλαmαζοο, ΜΙ, ΥΣΑ). Σεχτιονσ ωερε εξαmινεδ ωιτη α Ζεισσ mιχροσχοπε (ϑενα, Γερmανψ) ανδ διγιταλ ιmαγεσ χαπτυρεδ ωιτη Αξιοςισιον σοφτωαρε (Χαρλ Ζεισσ ςισιον, Μυνιχη, Γερmανψ) Φορ επιδερmαλ τηιχκνεσσ, τηε αϖεραγε οφ 4 mεασυρεmεντσ ωασ τακεν περ ιmαγε ανδ δερmαλ αρεα ωασ θυαντιφιεδ υσινγ Ιmαγεϑ. Φορ θυαντιφιχατιον οφ επιδερmαλ χελλυλαριτψ (>9% οφ ωηιχη ισ χοmποσεδ οφ κερατινοχψτεσ), τηε τοταλ νυmβερ οφ επιδερmαλ νυχλει ωερε χουντεδ περ φιελδ οφ ϖιεω ανδ νορmαλιζεδ το επιδερmαλ λενγτη (το αχχουντ φορ ρετε ριδγε υνδυλατιον). 7

10 Προλιφερατιον ωασ εϖαλυατεδ βψ ινχυβατινγ ρεηψδρατεδ σεχτιονσ ωιτη βιοτινψλατεδ πριmαρψ αντιβοδψ αγαινστ Προλιφερατινγ χελλ νυχλεαρ αντιγεν (ΠΧΝΑ), ΧαλΤαγ Λαβορατοριεσ, Βυρλινγαmε, ΧΑ, ΥΣΑ) οϖερνιγητ ατ 4 Χ. Αφτερ 3 ξ ΤΒΣ ωασηεσ, σταινινγ ωασ δετεχτεδ ωιτη ΑΒΧ περοξιδασε Κιτ (ςεχτορ Λαβ, Βυρλινγαmε, ΧΑ, ΥΣΑ) ανδ θυαντιφιεδ υσινγ Ιmαγεϑ. 146 Στατιστιχαλ Αναλψσισ Φολλοωινγ χονφιρmατιον οφ δατα δισπλαψινγ α νορmαλ διστριβυτιον, σιγνιφιχανχε λεϖελσ ωερε δετερmινεδ βψ τεστ, ονε ωαψ ορ τωο ωαψ ΑΝΟςΑ υσινγ ΓραπηΠαδ Πρισm (Λα ϑολλα, ΧΑ, ΥΣΑ) ον υντρανσφορmεδ δατα. Φορ τωο ωαψ ΑΝΟςΑ, ποστ ηοχ τεστινγ ινχλυδεδ αναλψσισ οφ διφφερενχεσ βετωεεν τιmε ποιντσ ιν εαχη τρεατmεντ γρουπ ανδ διφφερενχεσ βετωεεν τρεατmεντ γρουπσ ατ εαχη τιmε ποιντ ωιτη π ϖαλυεσ αδϕυστεδ φορ mυλτιπλε τεστινγ ασ δεταιλεδ ιν Φιγυρε λεγενδσ. ςαριατιον ισ δισπλαψεδ ασ στανδαρδ ερρορ βασεδ ον ατ λεαστ τηρεε βιολογιχαλ ρεπλιχατεσ. 8

11 153 Ρεσυλτσ Cutaneous ΗΣD1 εξπρεσσιον ανδ αχτιϖιτψ ινχρεασε δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ ανδ σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ Ιν αγρεεmεντ ωιτη κνοων συππρεσσιϖε εφφεχτσ οφ ΓΧ τρεατmεντ ον ηψποτηαλαmιχ πιτυιταρψ αδρεναλ αξισ σιγναλινγ, σψστεmιχ ΓΧ τρεατmεντ (ΧΟΡΤ) ρεδυχεδ χιρχυλατινγ χορτιχοστερονε λεϖελσ βψ 7% χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε (Φιγ. 1Α) ωιτη βοδψ ωειγητ υναφφεχτεδ βετωεεν γρουπσ (δατα νοτ σηοων) Τηε εφφεχτ οφ GC ΗΣD1 εξπρεσσιον ανδ αχτιϖιτψ δυρινγ mουσε σκιν WΗ ωερε πρεϖιουσλψ υνεξπλορεδ. Ατ βασελινε, ΗΣD1 mρνα ωασ 1 φολδ ηιγηερ ιν ΧΟΡΤ σκιν χοmπαρεδ το ϖεηιχλε (Φιγ. 1Β). Ηεξοσε 6 πηοσπηατε δεηψδρογενασε (Η6ΠDΗ), ωηιχη συππλιεσ ΗΣD1 χο φαχτορ, σηοωεδ α σιmιλαρ ινχρεασε ιν εξπρεσσιον ατ βασελινε (Φιγ. 1Χ). Χορρεσπονδινγλψ, ΗΣD1 αχτιϖιτψ ωασ αλσο 42% γρεατερ ιν υνωουνδεδ ΧΟΡΤ σκιν χοmπαρεδ το ϖεηιχλε (Φιγ. 1D) Ιν ϖεηιχλε τρεατεδ mιχε, ΗΣD1 mρνα ανδ αχτιϖιτψ ινχρεασεδ βψ 43 φολδ ανδ 2.6 φολδ ατ δαψ 2 ανδ βψ 17 φολδ ανδ 1.7 φολδ ατ δαψ 4 ποστ ωουνδινγ, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 1Β, 1D). Η6ΠDΗ mρνα ωασ αλσο ινχρεασεδ βψ 7 φολδ ατ δαψσ 2 ανδ 4 ποστ ωουνδινγ (Φιγ. 1Χ CORT ΗΣD1 mρνα βψ 11 φολδ ανδ 2 φολδ (ινδεπενδεντλψ οφ ΧΒΞ) ατ δαψσ 4 ανδ 9 ποστ ωουνδινγ, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 1Β). Η6ΠDΗ mρνα ωασ αλσο φυρτηερ υπρεγυλατεδ βψ 5 φολδ ατ δαψ 4 ανδ 9 φολδ (ινδεπενδεντλψ οφ ΧΒΞ) ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ ιν ΧΟΡΤ mιχε (Φιγ. 1Χ H ΗΣD1 αχτιϖιτψ ωασ νοτ αφφεχτεδ βψ ΧΟΡΤ τρεατmεντ δυρινγ WΗ (Φιγ. 1D) Ιν ΧΟΡΤ mιχε, ΧΒΞ τρεατ ΗΣD1 αχτιϖιτψ βψ 61% ιν υνωουνδεδ σκιν ανδ βψ 91% ανδ 55% ατ δαψσ 2 ανδ 4 ποστ ωουνδινγ, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 1D). Ιν χοντρολ mιχε (υντρεατεδ δρινκινγ ωατερ), CBX ΗΣD1 αχτιϖιτψ βψ 3% ιν υνωουνδεδ σκιν ανδ βψ 93%, 94% ανδ 73% ατ δαψσ 2, 4 ανδ 9 ποστ ωουνδινγ (Συππλεmενταλ Φιγ. 1) T GC ΗΣD1 εξπρεσσιον ανδ αχτιϖιτψ ιν υνωουνδεδ σκιν ωηιχη ισ ινηιβιτεδ εφφεχτιϖελψ βψ ΧΒΞ τρεατmεντ. 9

12 177 ΗΣD1 ινηιβιτιον λιmιτσ γλυχοχορτιχοιδ mεδιατεδ σκιν τηιννινγ ΓΧ χαυσε σκιν τηιννινγ ανδ H ΗΣD1 ινηιβιτιον ον επιδερmαλ τηιννινγ ανδ προλιφερατιον φολλοωινγ ΓΧ εξποσυρε ωασ πρεϖιουσλψ υνρεπορτεδ. Επιδερmαλ τηιχκνεσσ ωασ ρεδυχεδ βψ 36% ιν ΧΟΡΤ mιχε χοmπαρεδ το ϖεηιχλε ανδ ωασ ρεστορεδ βψ 59% ωιτη ΧΒΞ (Φιγ. 2Α, 2Β). Α 27% ΧΟΡΤ mεδιατεδ ρεδυχτιον ιν επιδερmαλ χελλυλαριτψ ωασ αλσο πρεϖεντεδ βψ ΧΒΞ (Φιγ. 2Α, 2Χ) ωιτη α σιmιλαρ τρενδ ιν ΠΧΝΑ σταινινγ (Συππλεmενταλ Φιγ. 2). Dερmαλ αρεα δεχρεασεδ βψ 21% ωιτη ΧΟΡΤ τρεατmεντ χοmπαρεδ το ϖεηιχλε ανδ τηισ ωασ αλσο πρεϖεντεδ βψ ΧΒΞ (Φιγ. 2D). Νο διφφερενχε ιν επιδερmαλ τηιχκνεσσ ορ επιδερmαλ χελλυλαριτψ ωασ οβσερϖεδ ιν χοντρολ mιχε τρεατεδ ωιτη ΧΒΞ (Συππλεmενταλ Φιγ. 3) T ΗΣD1 ινηιβιτιον χαν λιmιτ ΓΧ mεδιατεδ σκιν τηιννινγ δεσπιτε συσταινεδ εξποσυρε το σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ. 188 Impact of glucocorticoid excess and ΗΣD1 ινηιβιτιον ον επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον Α φυνχτιοναλ επιδερmαλ βαρριερ ισ ινδισπενσαβλε φορ προτεχτιον αγαινστ δεηψδρατιον, εξποσυρε το ιρριταντσ ανδ ινϖασιον βψ mιχροοργανισmσ. Τηε ρεγυλατιον οφ επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον, ιντεγριτψ ανδ ρεχοϖερψ βψ χορτιχοστερονε εξχεσσ ορ ΗΣD1 ινηιβιτιον ηασ νοτ βεεν ινϖεστιγατεδ Τρανσ επιδερmαλ ωατερ λοσσ (ΤΕWΛ) ισ τηε γολδ στανδαρδ mεασυρε οφ επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον. Βασελινε ΤΕWΛ ωασ λαργελψ υναφφεχτεδ βψ ΧΟΡΤ ορ ΧΒΞ (Φιγ. 3Α). Ιντερεστινγλψ, τηε νυmβερ οφ ταπε στριπσ ρεθυιρεδ το δισρυπτ τηε βαρριερ (ινδιχατιϖε οφ βαρριερ ιντεγριτψ) ωασ 5% γρεατερ ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ τηισ ωασ πρεϖεντεδ βψ ΧΒΞ τρεατmεντ (Φιγ. 3Β). Wε οβσερϖεδ α mοδεστ ινχρεασε ιν βαρριερ ρεχοϖερψ ιν τηε ΧΟΡΤ/ΧΒΞ γρουπ 2 ηουρσ αφτερ βαρριερ δισρυπτιον βυτ νο διφφερενχε ωασ οβσερϖεδ βετωεεν ΧΟΡΤ ανδ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ ορ βετωεεν ανψ οφ τηε γρουπσ 4 ηουρσ αφτερ δισρυπτιον (Φιγ. 3Χ). Νο στατιστιχαλλψ σιγνιφιχαντ εφφεχτ οφ ΧΒΞ ον βαρριερ φυνχτιον (βασελινε ΤΕWΛ), βαρριερ ιντεγριτψ ορ βαρριερ ρεχοϖερψ ωασ οβσερϖεδ ιν χοντρολ mιχε (Συππλεmενταλ Φιγ. 4). 1

13 2 21 Τηεσε φινδινγσ συγγεστ τηατ ΗΣD1 mεδιατεσ ινχρεασεδ επιδερmαλ ιντεγριτψ δυρινγ σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ. 22 ΗΣD1 ινηιβιτιον ιmπροϖεσ σκιν ωουνδ ηεαλινγ δυρινγ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ ΓΧ εξχεσσ δριϖεσ ιmπαιρεδ WΗ ανδ χηρονιχ ωουνδ mαναγεmεντ ρεmαινσ αν υνmετ χλινιχαλ νεεδ ιν διαβετιχ ανδ ελδερλψ πατιεντσ. Ηοωεϖερ, τηε ρεγυλατιον οφ ιmπαιρεδ WΗ δυρινγ ΓΧ εξχεσσ βψ ΗΣD1 ισ υνκνοων. Σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ ινδυχεδ α στρικινγ WΗ δελαψ ωηιχη ωασ ιmπροϖεδ βψ ΧΒΞ τρεατmεντ (Φιγ. 4Α) Ινιτιαλλψ, WΗ προγρεσσεδ ατ σιmιλαρ ρατεσ βετωεεν αλλ γρουπσ ωιτη α 36%, 39% ανδ 33% ρεδυχτιον ιν ωουνδ αρεα ατ δαψ 4 χοmπαρεδ το δαψ 2 ιν ϖεηιχλε, ΧΟΡΤ ανδ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ mιχε, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 4Β). Νο χηανγε ιν ωουνδ αρεα ωασ οβσερϖεδ βετωεεν δαψσ 4 ανδ 6 φορ ειτηερ γρουπ. Αλτηουγη ηεαλινγ χοντινυεδ φροm δαψ 6 φορ ϖεηιχλε ανδ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ mιχε, νο φυρτηερ ηεαλινγ ωασ οβσερϖεδ φορ ΧΟΡΤ/ςΕΗ mιχε. Βψ δαψ 9, ωουνδ αρεασ ωερε 94% ανδ 48% ηεαλεδ χοmπαρεδ το δαψ 4 ιν ϖεηιχλε ανδ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ mιχε, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 4Β) Η+Ε σταινινγ οφ δαψ 9 ωουνδσ ρεϖεαλεδ mορε αδϖανχεδ γρανυλατιον τισσυε φορmατιον, ιmπροϖεδ στρυχτυραλ οργανιζατιον ανδ εξτραχελλυλαρ mατριξ δεποσιτιον ιν ΧΟΡΤ/ΧΒΞ χοmπαρεδ το ΧΟΡΤ mιχε (Φιγ. 4Χ). ΧΒΞ τρεατmεντ διδ νοτ αφφεχτ WΗ ιν χοντρολ mιχε (Συππλεmενταλ Φιγ. 5). 216 Ιν συmmαρψ, ΗΣD1 ινηιβιτιον ιmπροϖεδ mουσε σκιν WΗ δεσπιτε συσταινεδ σψστεmιχ ΓΧ εξποσυρε Εφφεχτ οφ σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ ανδ ΗΣD1 ινηιβιτιον ον χψτοκινε, εξτραχελλυλαρ mατριξ ανδ γροωτη φαχτορ γενε εξπρεσσιον δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ Το φυρτηερ ινϖεστιγατε τηε mεχηανισmσ υνδερλψινγ WH ΗΣD1 ινηιβιτιον, ωε αναλψζεδ χηανγεσ ιν χψτοκινε, εξτραχελλυλαρ mατριξ ανδ γροωτη φαχτορ γενε εξπρεσσιον. 11

14 Προ ινφλαmmατορψ χψτοκινε ιντερλευκιν (ΙΛ) mρνα ινχρεασεδ ατ δαψσ 2, 4 ανδ 9 ποστ ωουνδινγ βψ 75 φολδ, 587 φολδ ανδ 9 φολδ ρεσπεχτιϖελψ, ινδεπενδεντλψ οφ ΧΟΡΤ ορ ΧΒΞ τρεατmεντ (Φιγ. 5Α). Α σιmιλαρ εξπρεσσιον προφιλε ωασ σεεν φορ τυmορ νεχροσισ φαχτορ αλπηα (ΤΝΦ mρνα (Φιγ. 5Β) Τηε ιmmυνοmοδυλατορψ χψτοκινε ΙΛ 6 ρεγυλατεσ α βροαδ ρανγε οφ βιολογιχαλ φυνχτιονσ ινχλυδινγ αντιβοδψ σεχρετινγ Β χελλ διφφερεντιατιον ανδ γενερατιον οφ Τη17 χελλσ. ΙΛ 6 mρνα εξπρεσσιον ωασ υνδετεχταβλε ιν τηε mαϕοριτψ οφ υνωουνδεδ σκιν σαmπλεσ βυτ ινχρεασεδ ατ δαψ 2 ανδ δαψ 4 βεφορε δεχλινινγ ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ ιν ϖεηιχλε mιχε (Φιγ. 5Χ). ΙΛ 6 δισπλαψεδ α τρενδ τοωαρδσ ηιγηερ εξπρεσσιον ατ δαψ 2 ποστ ωουνδινγ ιν ΧΟΡΤ χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε ωηιχη ωασ πρεϖεντεδ βψ ΧΒΞ (Φιγ. 5Χ). ΙΛ 6 mρνα ωασ αλσο 14 φολδ γρεατερ ιν ΧΟΡΤ mιχε ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε (Φιγ. 5Χ) Κερατινοχψτε γροωτη φαχτορ (ΚΓΦ) ισ προδυχεδ δυρινγ WΗ ανδ στιmυλατεσ ωουνδ ρε επιτηελιαλιζατιον. ΚΓΦ mρνα εξπρεσσιον πεακεδ ατ δαψ 4 ωιτη α 9.9 φολδ ανδ α 3.5 φολδ ινδυχτιον ιν ϖεηιχλε ανδ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ mιχε χοmπαρεδ το υνωουνδεδ σκιν, ρεσπεχτιϖελψ (Φιγ. 5D). Νο ινδυχτιον ιν ΚΓΦ ωασ σεεν ατ δαψ 4 ιν ΧΟΡΤ mιχε. Ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ, ΚΓΦ ωασ 17 φολδ ηιγηερ ιν ΧΟΡΤ χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε ανδ τηισ ωασ ρεϖερσεδ βψ ΧΒΞ (Φιγ. 5D) Τψπε Ι ανδ ΙΙΙ χολλαγεν χονστιτυτε >7% οφ τηε δερmισ βψ δρψ ωειγητ. Χολλαγεν τψπε Ι αλπηα 1 (ΧΟΛ ) ανδ χολλαγεν τψπε ΙΙΙ αλπηα 1 (ΧΟΛ ) mρνα εξπρεσσιον ινχρεασεδ 15 φολδ ατ δαψ 4 ποστ ωουνδινγ ιν ϖεηιχλε mιχε χοmπαρεδ το υνωουνδεδ σκιν (Φιγ. 5Ε, 5Φ). Τηισ ωασ δελαψεδ ιν ΧΟΡΤ mιχε, ωηιχη δισπλαψεδ α 3.5 φολδ ανδ 14 φολδ ινδυχτιον οφ ΧΟΛ COL ωουνδινγ χοmπαρεδ το ϖεηιχλε χοντρολσ βοτη ρεϖερσεδ βψ ΧΒΞ (Φιγ. 5Ε, 5Φ) Εξτραχελλυλαρ mατριξ τυρνοϖερ ισ ρεγυλατεδ βψ χολλαγεν δεγραδινγ mατριξ mεταλλοπροτεινασεσ (ΜΜΠ) ανδ τηειρ ινηιβιτορσ, τισσυε ινηιβιτορ οφ mατριξ mεταλλοπροτεινασεσ (ΤΙΜΠ). ΜΜΠ 9 mρνα ιν ϖεηιχλε mιχε ινχρεασεδ 7.7 φολδ ανδ 9.5 φολδ ατ δαψ 2 ανδ δαψ 4 ποστ ωουνδινγ, ρεσπεχτιϖελψ, βεφορε ρετυρνινγ το βασελινε λεϖελσ βψ δαψ 9 (Φιγ. 5Γ). Ηοωεϖερ, ιν ΧΟΡΤ (βυτ νοτ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ) mιχε, ΜΜΠ 9 12

15 εξπρεσσιον ατ δαψ 9 ρεmαινεδ ελεϖατεδ ατ 7.2 φολδ ηιγηερ τηαν ϖεηιχλε mιχε (Φιγ. 5Γ). ΤΙΜΠ 1 δισπλαψεδ α σιmιλαρ mρνα προφιλε, ωιτη 2 φολδ ανδ 33 φολδ ηιγηερ εξπρεσσιον ατ δαψ 2 ανδ δαψ 4 ποστ ωουνδινγ ρεσπεχτιϖελψ, ιν ϖεηιχλε mιχε χοmπαρεδ το υνωουνδεδ σκιν (Φιγ. 5Η). Ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ, ΜΜΠ 9 mρνα ωασ αλσο 1 φολδ γρεατερ ιν ΧΟΡΤ (βυτ νοτ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ) χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε (Φιγ. 5Η) Τηεσε φινδινγσ οπποσε ρεπορτσ οφ ινχρεασεδ ινφλαmmατορψ χψτοκινε εξπρεσσιον φολλοωινγ ΗΣD1 βλοχκαδε ιν οτηερ mοδελσ. Ιmπροϖεδ WΗ αππεαρσ το βε mεδιατεδ, ιν παρτ, βψ ρεστορατιον οφ ΚΓΦ σιγναλινγ ανδ αππροπριατε χολλαγεν, ΜΜΠ ανδ ΤΙΜΠ εξπρεσσιον. 253 Dισχυσσιον Αλτηουγη ΓΧ ηαϖε βεεν υσεδ φορ οϖερ 65 ψεαρσ φορ τηειρ αντι ινφλαmmατορψ προπερτιεσ (17), αδϖερσε σιδε εφφεχτσ λιmιτ τηειρ υσε το λοω δοσε, σηορτ τερm ιντερϖεντιον (2). ΓΧ mεδιατεδ σκιν ατροπηψ, βρυισινγ, ιmπαιρεδ WΗ ανδ ινχρεασεδ ινφεχτιον ρισκ αρε οφ χονχερν το βοτη πατιεντσ ανδ πηψσιχιανσ αλικε (18). Ιν α συρϖεψ οφ πατιεντσ τακινγ ΓΧ φορ >6 δαψσ, σκιν βρυισινγ ορ τηιννινγ ωασ τηε σεχονδ mοστ πρεϖαλεντ σελφ ρεπορτεδ σιδε εφφεχτ (8). Wε ηαϖε δεmονστρατεδ φορ τηε φιρστ τιmε τηατ τοπιχαλ ΗΣD1 ινηιβιτιον χαν λιmιτ τηεσε χυτανεουσ σιδε εφφεχτσ. Τηισ κεψ ινσιγητ οπενσ α ωιδε ρανγε οφ ΗΣD1 ινηιβιτορσ ασ αδϕυνχτ τηεραπιεσ το σαφελψ ινχρεασε στεροιδ δοσεσ ορ τρεατmεντ δυρατιον Μοργαν ετ αλ. ρεχεντλψ δεmονστρατεδ τηατ γλοβαλ ΗΣD1 νυλλ mιχε ωερε προτεχτεδ φροm τηε σψστεmιχ σιδε εφφεχτσ οφ οραλ χορτιχοστερονε (19). Ηοωεϖερ, τηισ στυδψ διδ νοτ εϖαλυατε ινφλαmmατιον, ωηιχη οτηερσ ρεπορτ το βε εξαχερβατεδ βψ ΗΣD1 ινηιβιτιον (2). Ηερε, ωε εϖαλυατεδ τηε αβιλιτψ οφ ΗΣD1 ινηιβιτιον το ρεϖερσε χυτανεουσ εφφεχτσ οφ ΓΧ εξχεσσ Ρεδυχεδ mορνινγ σερυm χορτιχοστερονε λεϖελσ ιν ΧΟΡΤ mιχε αρε χονσιστεντ ωιτη τηε ρεπορτεδ αδρεναλ συππρεσσιον ατ τηισ σαmπλινγ τιmε (21) ανδ τοταλ βοδψ ωειγητ ωασ υναφφεχτεδ βψ ΓΧ τρεατmεντ ασ πρεϖιουσλψ δεσχριβεδ (19). Τηε φορωαρδ ΗΣD1 mρνα ανδ αχτιϖιτψ βψ ΓΧ ιν 13

16 υνωουνδεδ σκιν ισ αλσο ιν αγρεεmεντ ωιτη ουρ πρεϖιουσ οβσερϖατιονσ ιν ηυmαν σκιν (15) ανδ mαψ ΗΣD1 mεδιατεδ εφφεχτσ οβσερϖεδ ιν υνωουνδεδ ΧΟΡΤ mουσε σκιν Ουρ ρεσυλτσ ΗΣD1 ινηιβιτιον πρεϖεντσ ΓΧ mεδιατεδ ρεδυχτιονσ ιν επιδερmαλ χελλυλαριτψ ανδ δερmαλ αρεα, δεσπιτε συσταινεδ εξποσυρε το σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ. Ιντερεστινγλψ, ωε οβσερϖεδ τηατ ΧΒΞ αλσο ρεϖερσεδ α ΓΧ mεδιατεδ ινδυχτιον ιν επιδερmαλ ιντεγριτψ. Τηισ ισ συππορτεδ βψ στυδιεσ δεmονστρατινγ τηατ εξογενουσ ΓΧ τρεατmεντ προmοτε επιδερmαλ κερατινοχψτε διφφερεντιατιον ανδ ινχρεασε χορνεοχψτε νυmβερσ (22), ρεφλεχτινγ α γρεατερ δεγρεε οφ δισρυπτιον ρεθυιρεδ φορ επιδερmαλ βαρριερ περτυρβατιον. Χονϖερσελψ, ενδογενουσ ΓΧ εξχεσσ ορ τοπιχαλ ΓΧ τρεατmεντ χαυσε ΓΧ mεδιατεδ δεχρεασεσ ιν επιδερmαλ ιντεγριτψ ινδιχατινγ τηατ mοδελ σπεχιφιχ διφφερενχεσ σηουλδ αλσο βε τακεν ιντο χονσιδερατιον (23 26) Βασελινε ΤΕWΛ (επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον) ωασ υναφφεχτεδ βψ ΧΟΡΤ τρεατmεντ ιν αγρεεmεντ ωιτη πρεϖιουσ ρεπορτσ (23 26). Ιν χοντραστ το ουρ φινδινγσ, οτηερ στυδιεσ ρεπορτεδ ιmπαιρεδ βαρριερ ρεχοϖερψ φολλοωινγ ενδογενουσ ΓΧ εξχεσσ ανδ ΓΧ τρεατmεντ, αλτηουγη τηισ ωασ ασσοχιατεδ ωιτη ιmπαιρεδ βαρριερ ιντεγριτψ (23,25,26). Ιν ουρ mοδελ, ιντεγριτψ ανδ βαρριερ ρεχοϖερψ ωερε βοτη στιmυλατεδ βψ σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ. Τηισ mαψ βε δυε το διφφερενχεσ ιν ΓΧ ποτενχψ, φορmυλατιον, τρεατmεντ δυρατιον, αδmινιστρατιον, στραιν, γενδερ, αγε, διετ ορ ενϖιρονmεντ. Wηιλστ ιντεγριτψ ΗΣD1 mεδιατεδ, τηε mοδεστ ινδυχτιον ιν βαρριερ ρεχοϖερψ ωασ νοτ ρεϖερσεδ βψ ΧΒΞ. Τηισ mαψ βε δυε το ρεγυλατιον βψ οτηερ ηψποτηαλαmιχ πιτυιταρψ αδρεναλ αξισ πατηωαψσ συχη ασ αδρενεργιχ ρεχεπτορ σιγναλινγ (27) Βετωεεν δαψσ το 4, ωουνδ χλοσυρε ωασ σιmιλαρ βετωεεν αλλ γρουπσ, συγγεστινγ τηατ τηε ινιτιαλ χοντραχτιλε πηασε οφ WΗ (28) ωασ υναφφεχτεδ. Wε οβσερϖεδ τερmινατιον οφ WΗ κινετιχσ φροm δαψ 4 ποστ ωουνδινγ ιν ΧΟΡΤ mιχε, συππορτεδ βψ πρεϖιουσ ρεπορτσ οφ ΓΧ mεδιατεδ ιmπαιρmεντ οφ κερατινοχψτε προλιφερατιον, mιγρατιον ανδ ινχρεασεδ επιδερmαλ διφφερεντιατιον (29,3). Στρικινγλψ, ουρ ρεσυλτσ δεmονστρατε τηατ ΧΒΞ τρεατmεντ ιmπροϖεδ WΗ ιν ΧΟΡΤ mιχε. Τηε λαχκ οφ χοmπλετε WΗ ρεσχυε βψ ΧΒΞ mαψ βε δυε το εξποσυρε το σερυm χορτιχοστερονε βεφορε χελλυλαρ 14

17 χοmπαρτmενταλιζατιον ισ φυλλψ ρεστορεδ. O ΗΣD1 βλοχκαδε ον χυτανεουσ WΗ ιν ανιmαλ mοδελσ οφ mεταβολιχ δισεασε ανδ ενδογενουσ ΓΧ εξχεσσ (31,32), ηοωεϖερ, ΗΣD1 ινηιβιτιον, ινφλαmmατορψ εφφεχτσ ανδ mεχηανιστιχ ινσιγητσ ωερε λαχκινγ ιν τηεσε στυδιεσ Ουρ φινδινγσ ινδιχατε τηατ τηε χυτανεουσ σιδε εφφεχτσ οφ ΓΧ εξχεσσ αρε mεδιατεδ τηρουγη ινχρεασεδ ΗΣD1 ΗΣD1 αχτιϖιτψ ωασ νοτ φυρτηερ ινχρεασεδ βψ ΧΟΡΤ τρεατmεντ ανδ ΧΒΞ τρεατmεντ διδ νοτ αφφεχτ σκιν τηιχκνεσσ, επιδερmαλ ιντεγριτψ ορ WΗ ιν χοντρολ mιχε νοτ εξποσεδ το σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ. Τηισ συγγεστσ τηατ 11 δεηψδροχορτιχοστερονε αϖαιλαβιλιτψ ισ ινσυφφιχιεντ ιν ψουνγ, ηεαλτηψ mιχε το ρεγυλατε σκιν φυνχτιον Ρεχεντ ρεπορτσ ηαϖε ραισεδ χονχερνσ οϖερ ινχρεασεδ ινφλαmmατιον ασ χονσεθυενχε οφ ΗΣD1 βλοχκαδε (33 36). Wε φουνδ νο εϖιδενχε οφ τηισ ουρ mοδελ; τηερε ωασ νο εξαχερβατιον οφ ΙΛ TNF IL 6 mρνα εξπρεσσιον δυρινγ εαρλψ WΗ ανδ νο δελαψ ιν ρεσολυτιον οφ τηεσε προ ινφλαmmατορψ χψτοκινεσ ιν ΧΒΞ mιχε. Ον τηε χοντραρψ, ΙΛ 6 εξπρεσσιον ινχρεασεδ δυρινγ ΧΟΡΤ mουσε WΗ. Τηισ ισ συππορτεδ βψ ρεπορτσ οφ προ ινφλαmmατορψ ΓΧ αχτιονσ (37,38), ινδιχατινγ γρεατερ ρεγυλατορψ χοmπλεξιτψ τηαν πρεϖιουσλψ τηουγητ (39 41) ΚΓΦ ισ α κεψ φαχτορ τηατ προmοτεσ ωουνδ ρε επιτηελιαλιζατιον ανδ ισ ινδισπενσαβλε το τηε WΗ προχεσσ (3,42,43). Wε φουνδ α λαχκ οφ ινδυχτιον οφ ΚΓΦ ατ δαψ 4 ποστ ωουνδινγ ιν ΧΟΡΤ mιχε (χοινχιδινγ ωιτη τηε χεσσατιον οφ ωουνδ χλοσυρε) ωηιχη ωασ ρεστορεδ βψ ΧΒΞ. Τηε ινδυχτιον οφ χολλαγεν τψπε Ι ανδ ΙΙΙ mρνα δυρινγ τηε γρανυλατιον πηασε οφ WΗ ωερε αττενυατεδ ιν ΧΟΡΤ mιχε, χονσιστεντ ωιτη πρεϖιουσ ρεπορτσ (3,44) ανδ ωερε αλσο νορmαλιζεδ βψ ΧΒΞ, φυρτηερ συππορτεδ βψ ουρ ηιστολογιχαλ φινδινγσ ΜΜΠ 9 ανδ ΤΙΜΠ 1 mρνα εξπρεσσιον ωερε ελεϖατεδ ατ δαψ 9 ποστ ωουνδινγ ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ ωερε νορmαλιζεδ βψ ΧΒΞ τρεατmεντ. Αλτηουγη τηε υνδερλψινγ mεχηανισmσ ρεmαιν ποορλψ υνδερστοοδ, 15

18 ελεϖατεδ ΜΜΠ 9 ανδ ΤΙΜΠ 1 mρνα αρε ασσοχιατεδ ωιτη σλοωερ ηεαλινγ ιν mουσε ωουνδσ (45) ανδ ΜΜΠ 9 ισ ελεϖατεδ ιν διαβετιχ φοοτ υλχερσ (46) ΓΧ αρε αβλε το αχτιϖατε τηε mινεραλοχορτιχοιδ ρεχεπτορ (ΜΡ) ωιτη στρονγ αφφινιτψ ανδ ρεχεντ ωορκ βψ Βοιξ ετ αλ. ελεγαντλψ δεmονστρατεδ τηατ ΜΡ επιδερmαλ κνοχκουτ mιχε ωερε ρεσισταντ το ΓΧ ινδυχεδ επιδερmαλ τηιννινγ (47). Dιφφερεντιατινγ βετωεεν γλυχοχορτιχοιδ ρεχεπτορ ανδ ΜΡ mεδιατεδ εφφεχτσ ωασ βεψονδ τηε σχοπε οφ τηε χυρρεντ στυδψ, βυτ ισ αν αρεα οφ ονγοινγ ιντερεστ ΧΒΞ ηασ βεεν υσεδ εξτενσιϖελψ ιν ηυmαν ανδ mαmmαλιαν mοδελσ. Αδmινιστερεδ σψστεmιχαλλψ, ιτ αλσο ΗΣD2 ΗΣD1) ρεσυλτινγ ιν ρεναλ mινεραλοχορτιχοιδ εξχεσσ δυε το ΓΧ mεδιατεδ ΜΡ αχτιϖατιον (48). Ηοωεϖερ, ΗΣD2 ισ νοτ εξπρεσσεδ ιν υνωουνδεδ mουσε σκιν ορ δυρινγ WΗ (13) ανδ τοπιχαλ αδmινιστρατιον λιmιτσ τηε ρισκ οφ σψστεmιχ εξποσυρε. ΧΒΞ ισ αλσο αβλε το βλοχκ γαπ ϕυνχτιονσ βυτ ατ σεϖεραλ ορδερσ οφ mαγνιτυδε λεσσ ποτεντλψ τηαν ΗΣD1 (48). Φυρτηερ, ωε οβσερϖεδ νο διφφερενχε βετωεεν ΧΒΞ ανδ ϖεηιχλε mιχε νοτ εξποσεδ το ΧΟΡΤ, συγγεστινγ ουρ φινδινγσ αρε mοστ λικελψ δυε το χυτανεουσ ΗΣD1 ινηιβιτιον I ΗΣD1 ινηιβιτιον το λιmιτ χυτανεουσ σιδε εφφεχτσ οφ σψστεmιχ ΓΧ εξχεσσ ινχλυδινγ σκιν τηιννινγ ανδ δελαψεδ WΗ. Ουρ φινδινγσ mαψ ιmπροϖε τηε σαφετψ προφιλε οφ σψστεmιχ στεροιδσ ανδ τηε προγνοσισ οφ χηρονιχ ωουνδσ, παρτιχυλαρλψ τηοσε ασσοχιατεδ ωιτη ελεϖατεδ χιρχυλατινγ ΓΧ λεϖελσ (49). 16

19 334 Αχκνοωλεδγεmεντσ Αυτηορ χοντριβυτιονσ αρε ασ φολλοωσ; ΑΤ, ΨΥ ανδ WΜΗ δεσιγνεδ τηε ρεσεαρχη στυδψ. ΑΤ περφορmεδ τηε εξπεριmεντσ, αναλψζεδ τηε δατα ανδ πρεπαρεδ τηε mανυσχριπτ. ΜΗ πρεπαρεδ τισσυε σεχτιονσ φορ ηιστολογψ. ΤΜ ανδ ΠΜΕ χοντριβυτεδ εσσεντιαλ εθυιπmεντ. Αλλ αυτηορσ εϖαλυατεδ ανδ αππροϖεδ τηε φιναλ mανυσχριπτ. 17

20 339 Ρεφερενχεσ Οϖερmαν ΡΑ, Ψεη ϑψ, Dεαλ ΧΛ. Πρεϖαλενχε οφ οραλ γλυχοχορτιχοιδ υσαγε ιν τηε Υνιτεδ Στατεσ: α γενεραλ ποπυλατιον περσπεχτιϖε. Αρτηριτισ χαρε & ρεσεαρχη. 213;65(2): Ηαρρισ Ε, Τιγανεσχυ Α, Τυβευφ Σ, Μαχκιε ΣΛ. Τηε πρεδιχτιον ανδ mονιτορινγ οφ τοξιχιτψ ασσοχιατεδ ωιτη λονγ τερm σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ τηεραπψ. Χυρρεντ ρηευmατολογψ ρεπορτσ. 215;17(6): Χηεν ΣΨ, Χηοι ΧΒ, Λι Θ, Ψεη WΣ, Λεε ΨΧ, Καο ΑΗ, Λιανγ ΜΗ. Γλυχοχορτιχοιδ Υσε ιν Πατιεντσ Wιτη Σψστεmιχ Λυπυσ Ερψτηεmατοσυσ: Ασσοχιατιον Βετωεεν Dοσε ανδ Ηεαλτη Χαρε Υτιλιζατιον ανδ Χοστσ. Αρτηριτισ χαρε & ρεσεαρχη. 215;67(8): Λεφεβϖρε Π, Dυη ΜΣ, Λαφευιλλε ΜΗ, Γοζαλο Λ, Dεσαι Υ, Ροβιταιλλε ΜΝ, Αλβερσ Φ, Ψανχεψ Σ, Ορτεγα Η, Φορσηαγ Μ, Λιν Ξ, Dαλαλ ΑΑ. Αχυτε ανδ χηρονιχ σψστεmιχ χορτιχοστεροιδ ρελατεδ χοmπλιχατιονσ ιν πατιεντσ ωιτη σεϖερε αστηmα. Τηε ϑουρναλ οφ αλλεργψ ανδ χλινιχαλ ιmmυνολογψ. 215;136(6): Ηψλανδ ΜΕ, Wηαλλεψ Β, ϑονεσ ΡΧ, Μασολι Μ. Α θυαλιτατιϖε στυδψ οφ τηε ιmπαχτ οφ σεϖερε αστηmα ανδ ιτσ τρεατmεντ σηοωινγ τηατ τρεατmεντ βυρδεν ισ νεγλεχτεδ ιν εξιστινγ αστηmα ασσεσσmεντ σχαλεσ. Θυαλιτψ οφ λιφε ρεσεαρχη : αν ιντερνατιοναλ ϕουρναλ οφ θυαλιτψ οφ λιφε ασπεχτσ οφ τρεατmεντ, χαρε ανδ ρεηαβιλιτατιον. 215;24(3): Wηιτε Π, Τηορντον Η, Πιννοχκ Η, Γεοργοπουλου Σ, Βοοτη ΗΠ. Οϖερτρεατmεντ οφ ΧΟΠD ωιτη ινηαλεδ χορτιχοστεροιδσ ιmπλιχατιονσ φορ σαφετψ ανδ χοστσ: χροσσ σεχτιοναλ οβσερϖατιοναλ στυδψ. ΠλοΣ ονε. 213;8(1):ε Σχηοεπε Σ, Σχηαχκε Η, Μαψ Ε, Ασαδυλλαη Κ. Γλυχοχορτιχοιδ τηεραπψ ινδυχεδ σκιν ατροπηψ. Εξπεριmενταλ δερmατολογψ. 26;15(6): Χυρτισ ϑρ, Wεστφαλλ ΑΟ, Αλλισον ϑ, Βιϕλσmα ϑw, Φρεεmαν Α, Γεοργε ς, Κοϖαχ ΣΗ, Σπεττελλ ΧΜ, Σααγ ΚΓ. Ποπυλατιον βασεδ ασσεσσmεντ οφ αδϖερσε εϖεντσ ασσοχιατεδ ωιτη λονγ τερm γλυχοχορτιχοιδ υσε. Αρτηριτισ ανδ ρηευmατισm. 26;55(3): Στορmσ WW, Τηεεν Χ. Χλινιχαλ αδϖερσε εφφεχτσ οφ ινηαλεδ χορτιχοστεροιδσ: ρεσυλτσ οφ α θυεστιονναιρε συρϖεψ οφ αστηmα σπεχιαλιστσ. Ανναλσ οφ αλλεργψ, αστηmα & ιmmυνολογψ : οφφιχιαλ πυβλιχατιον οφ τηε Αmεριχαν Χολλεγε οφ Αλλεργψ, Αστηmα, & Ιmmυνολογψ. 1998;8(5): ϑονεσ ΣΑ, Μορανδ ΕΦ. Γλυχοχορτιχοιδσ ιν 215: Νεω ανσωερσ το ολδ προβλεmσ. Νατυρε ρεϖιεωσ Ρηευmατολογψ. 216;12(2): Σλοmινσκι Α, Ζβψτεκ Β, Νικολακισ Γ, Μαννα ΠΡ, Σκοβοωιατ Χ, Ζmιϕεωσκι Μ, Λι W, ϑανϕετοϖιχ Ζ, Ποστλετηωαιτε Α, Ζουβουλισ ΧΧ, Τυχκεψ ΡΧ. Στεροιδογενεσισ ιν τηε σκιν: ιmπλιχατιονσ φορ λοχαλ ιmmυνε φυνχτιονσ. Τηε ϑουρναλ οφ στεροιδ βιοχηεmιστρψ ανδ mολεχυλαρ βιολογψ. 213;137: Σλοmινσκι ΑΤ, Μαννα ΠΡ, Τυχκεψ ΡΧ. Ον τηε ρολε οφ σκιν ιν τηε ρεγυλατιον οφ λοχαλ ανδ σψστεmιχ στεροιδογενιχ αχτιϖιτιεσ. Στεροιδσ. 215;13: Τιγανεσχυ Α, Ηυπε Μ, Υχηιδα Ψ, Μαυρο Τ, Ελιασ ΠΜ, Ηολλεραν WΜ. Ινχρεασεδ γλυχοχορτιχοιδ αχτιϖατιον δυρινγ mουσε σκιν ωουνδ ηεαλινγ. Τηε ϑουρναλ οφ ενδοχρινολογψ. 214;221(1): Βυϕαλσκα Ιϑ, Dραπερ Ν, Μιχηαιλιδου Ζ, Τοmλινσον ϑw, Wηιτε ΠΧ, Χηαπmαν ΚΕ, Wαλκερ ΕΑ, Στεωαρτ ΠΜ. Ηεξοσε 6 πηοσπηατε δεηψδρογενασε χονφερσ οξο ρεδυχτασε αχτιϖιτψ υπον 11 βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1. ϑουρναλ οφ mολεχυλαρ ενδοχρινολογψ. 25;34(3): Τιγανεσχυ Α, Wαλκερ ΕΑ, Ηαρδψ ΡΣ, Μαψεσ ΑΕ, Στεωαρτ ΠΜ. Λοχαλιζατιον, αγε ανδ σιτε δεπενδεντ εξπρεσσιον, ανδ ρεγυλατιον οφ 11βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 ιν σκιν. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 211;131(1): Τιγανεσχυ Α, Ταηρανι ΑΑ, Μοργαν ΣΑ, Οτραντο Μ, Dεσmουλιερε Α, Αβραηαmσ Λ, Ηασσαν Σmιτη Ζ, Wαλκερ ΕΑ, Ραββιττ ΕΗ, Χοοπερ ΜΣ, Αmρειν Κ, Λαϖερψ ΓΓ, Στεωαρτ ΠΜ. 11βετα 18

21 Ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε βλοχκαδε πρεϖεντσ αγε ινδυχεδ σκιν στρυχτυρε ανδ φυνχτιον δεφεχτσ. Τηε ϑουρναλ οφ χλινιχαλ ινϖεστιγατιον. 213;123(7): Βενεδεκ ΤΓ. Ηιστορψ οφ τηε δεϖελοπmεντ οφ χορτιχοστεροιδ τηεραπψ. Χλινιχαλ ανδ εξπεριmενταλ ρηευmατολογψ. 211;29(5 Συππλ 68):Σ ϖαν δερ Γοεσ ΜΧ, ϑαχοβσ ϑw, Βοερσ Μ, Ανδρεωσ Τ, Βλοm Βακκερσ ΜΑ, Βυττγερειτ Φ, Χαεψερσ Ν, Χηοψ ΕΗ, Χυτολο Μ, Dα Σιλϖα ϑα, Γυιλλεϖιν Λ, Ηολλανδ Μ, Κιρωαν ϑρ, Ροϖενσκψ ϑ, Σααγ ΚΓ, Σεϖεριϕνσ Γ, Wεββερ Σ, Wεστηοϖενσ Ρ, Βιϕλσmα ϑw. Πατιεντ ανδ ρηευmατολογιστ περσπεχτιϖεσ ον γλυχοχορτιχοιδσ: αν εξερχισε το ιmπροϖε τηε ιmπλεmεντατιον οφ τηε Ευροπεαν Λεαγυε Αγαινστ Ρηευmατισm (ΕΥΛΑΡ) ρεχοmmενδατιονσ ον τηε mαναγεmεντ οφ σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ τηεραπψ ιν ρηευmατιχ δισεασεσ. Ανναλσ οφ τηε ρηευmατιχ δισεασεσ. 21;69(6): Μοργαν ΣΑ, ΜχΧαβε ΕΛ, Γατηερχολε ΛΛ, Ηασσαν Σmιτη ΖΚ, Λαρνερ DΠ, Βυϕαλσκα Ιϑ, Στεωαρτ ΠΜ, Τοmλινσον ϑw, Λαϖερψ ΓΓ. 11βετα ΗΣD1 ισ τηε mαϕορ ρεγυλατορ οφ τηε τισσυε σπεχιφιχ εφφεχτσ οφ χιρχυλατινγ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ. Προχεεδινγσ οφ τηε Νατιοναλ Αχαδεmψ οφ Σχιενχεσ οφ τηε Υνιτεδ Στατεσ οφ Αmεριχα. 214;111(24):Ε Χηαπmαν ΚΕ, Χουτινηο ΑΕ, Ζηανγ Ζ, Κιπαρι Τ, Σαϖιλλ ϑσ, Σεχκλ ϑρ. Χηανγινγ γλυχοχορτιχοιδ αχτιον: 11βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1 ιν αχυτε ανδ χηρονιχ ινφλαmmατιον. Τηε ϑουρναλ οφ στεροιδ βιοχηεmιστρψ ανδ mολεχυλαρ βιολογψ. 213;137: Καρατσορεοσ ΙΝ, Βηαγατ ΣΜ, Βοωλεσ ΝΠ, Wειλ ΖΜ, Πφαφφ DW, ΜχΕωεν ΒΣ. Ενδοχρινε ανδ πηψσιολογιχαλ χηανγεσ ιν ρεσπονσε το χηρονιχ χορτιχοστερονε: α ποτεντιαλ mοδελ οφ τηε mεταβολιχ σψνδροmε ιν mουσε. Ενδοχρινολογψ. 21;151(5): Λαυρενχε ΕΒ, Χηριστοπηερσ Ε. Σελεχτιϖε αχτιον οφ ηψδροχορτισονε ον ποστmιτοτιχ επιδερmαλ χελλσ ιν ϖιϖο. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 1976;66(4): Χηοι ΕΗ, Βροων ΒΕ, Χρυmρινε D, Χηανγ Σ, Μαν ΜΘ, Ελιασ ΠΜ, Φεινγολδ ΚΡ. Μεχηανισmσ βψ ωηιχη πσψχηολογιχ στρεσσ αλτερσ χυτανεουσ περmεαβιλιτψ βαρριερ ηοmεοστασισ ανδ στρατυm χορνευm ιντεγριτψ. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 25;124(3): Κιm Ηϑ, Παρκ Ηϑ, Ψυν ϑν, ϑεονγ ΣΚ, Αην ΣΚ, Λεε ΣΗ. Πσευδοχεραmιδε χονταινινγ πηψσιολογιχαλ λιπιδ mιξτυρε ρεδυχεσ αδϖερσε εφφεχτσ οφ τοπιχαλ στεροιδσ. Αλλεργψ, αστηmα & ιmmυνολογψ ρεσεαρχη. 211;3(2): Χηοι ΕΗ, Dεmερϕιαν Μ, Χρυmρινε D, Βροων ΒΕ, Μαυρο Τ, Ελιασ ΠΜ, Φεινγολδ ΚΡ. Γλυχοχορτιχοιδ βλοχκαδε ρεϖερσεσ πσψχηολογιχαλ στρεσσ ινδυχεδ αβνορmαλιτιεσ ιν επιδερmαλ στρυχτυρε ανδ φυνχτιον. Αmεριχαν ϕουρναλ οφ πηψσιολογψ Ρεγυλατορψ, ιντεγρατιϖε ανδ χοmπαρατιϖε πηψσιολογψ. 26;291(6):Ρ Καο ϑσ, Φλυηρ ϑw, Μαν ΜΘ, Φοωλερ Αϑ, Ηαχηεm ϑπ, Χρυmρινε D, Αην ΣΚ, Βροων ΒΕ, Ελιασ ΠΜ, Φεινγολδ ΚΡ. Σηορτ τερm γλυχοχορτιχοιδ τρεατmεντ χοmπροmισεσ βοτη περmεαβιλιτψ βαρριερ ηοmεοστασισ ανδ στρατυm χορνευm ιντεγριτψ: ινηιβιτιον οφ επιδερmαλ λιπιδ σψντηεσισ αχχουντσ φορ φυνχτιοναλ αβνορmαλιτιεσ. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 23;12(3): Dενδα Μ, Φυζιωαρα Σ, Ινουε Κ. Βετα2 αδρενεργιχ ρεχεπτορ ανταγονιστ αχχελερατεσ σκιν βαρριερ ρεχοϖερψ ανδ ρεδυχεσ επιδερmαλ ηψπερπλασια ινδυχεδ βψ βαρριερ δισρυπτιον. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 23;121(1): Dαϖιδσον ϑμ. Ανιmαλ mοδελσ φορ ωουνδ ρεπαιρ. Αρχηιϖεσ οφ δερmατολογιχαλ ρεσεαρχη. 1998;29 Συππλ:Σ Λεε Β, ςουτηουνισ Χ, Στοϕαδινοϖιχ Ο, Βρεm Η, Ιm Μ, Τοmιχ Χανιχ Μ. Φροm αν ενηανχεοσοmε το α ρεπρεσσοσοmε: mολεχυλαρ ανταγονισm βετωεεν γλυχοχορτιχοιδσ ανδ ΕΓΦ λεαδσ το ινηιβιτιον οφ ωουνδ ηεαλινγ. ϑουρναλ οφ mολεχυλαρ βιολογψ. 25;345(5): Σανχηισ Α, Αλβα Λ, Λατορρε ς, Σεϖιλλα ΛΜ, Περεζ Π. Κερατινοχψτε ταργετεδ οϖερεξπρεσσιον οφ τηε γλυχοχορτιχοιδ ρεχεπτορ δελαψσ χυτανεουσ ωουνδ ηεαλινγ. ΠλοΣ ονε. 212;7(1):ε Τεραο Μ, Μυροτα Η, Κιmυρα Α, Κατο Α, Ισηικαωα Α, Ιγαωα Κ, Μιψοσηι Ε, Καταψαmα Ι. 11βετα Ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε 1 ισ α νοϖελ ρεγυλατορ οφ σκιν ηοmεοστασισ ανδ α χανδιδατε ταργετ φορ προmοτινγ τισσυε ρεπαιρ. ΠλοΣ ονε. 211;6(9):ε

22 Ψουm ϑκ, Παρκ Κ, Υχηιδα Ψ, Χηαν Α, Μαυρο ΤΜ, Ηολλεραν WΜ, Ελιασ ΠΜ. Λοχαλ βλοχκαδε οφ γλυχοχορτιχοιδ αχτιϖατιον ρεϖερσεσ στρεσσ ανδ γλυχοχορτιχοιδ ινδυχεδ δελαψσ ιν χυτανεουσ ωουνδ ηεαλινγ. Wουνδ ρεπαιρ ανδ ρεγενερατιον : οφφιχιαλ πυβλιχατιον οφ τηε Wουνδ Ηεαλινγ Σοχιετψ [ανδ] τηε Ευροπεαν Τισσυε Ρεπαιρ Σοχιετψ. 213;21(5): Χουτινηο ΑΕ, Κιπαρι ΤΜ, Ζηανγ Ζ, Εστεϖεσ ΧΛ, Λυχασ ΧD, Γιλmουρ ϑσ, Wεβστερ ΣΠ, Wαλκερ ΒΡ, Ηυγηεσ ϑ, Σαϖιλλ ϑσ, Σεχκλ ϑρ, Ροσσι ΑΓ, Χηαπmαν ΚΕ. 11βετα Ηψδροξψστεροιδ Dεηψδρογενασε Τψπε 1 Ισ Εξπρεσσεδ ιν Νευτροπηιλσ ανδ Ρεστραινσ αν Ινφλαmmατορψ Ρεσπονσε ιν Μαλε Μιχε. Ενδοχρινολογψ. 216;157(7): Χουτινηο ΑΕ, Γραψ Μ, Βροωνστειν DΓ, Σαλτερ DΜ, Σαωατζκψ DΑ, Χλαψ Σ, Γιλmουρ ϑσ, Σεχκλ ϑρ, Σαϖιλλ ϑσ, Χηαπmαν ΚΕ. 11βετα Ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε τψπε 1, βυτ νοτ τψπε 2, δεφιχιενχψ ωορσενσ αχυτε ινφλαmmατιον ανδ εξπεριmενταλ αρτηριτισ ιν mιχε. Ενδοχρινολογψ. 212;153(1): ΜχΣωεενεψ Σϑ, Ηαδοκε ΠW, Κοζακ ΑΜ, Σmαλλ ΓΡ, Κηαλεδ Η, Wαλκερ ΒΡ, Γραψ ΓΑ. Ιmπροϖεδ ηεαρτ φυνχτιον φολλοωσ ενηανχεδ ινφλαmmατορψ χελλ ρεχρυιτmεντ ανδ ανγιογενεσισ ιν 11βεταΗΣD1 δεφιχιεντ mιχε ποστ ΜΙ. Χαρδιοϖασχυλαρ ρεσεαρχη. 21;88(1): Χηαπmαν Κ, Ηολmεσ Μ, Σεχκλ ϑ. 11βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασεσ: ιντραχελλυλαρ γατε κεεπερσ οφ τισσυε γλυχοχορτιχοιδ αχτιον. Πηψσιολογιχαλ ρεϖιεωσ. 213;93(3): Χρυζ Τοπετε D, Χιδλοωσκι ϑα. Ονε ηορmονε, τωο αχτιονσ: αντι ανδ προ ινφλαmmατορψ εφφεχτσ οφ γλυχοχορτιχοιδσ. Νευροιmmυνοmοδυλατιον. 215;22(1 2): Βυσιλλο ϑμ, Χιδλοωσκι ϑα. Τηε φιϖε Ρσ οφ γλυχοχορτιχοιδ αχτιον δυρινγ ινφλαmmατιον: ρεαδψ, ρεινφορχε, ρεπρεσσ, ρεσολϖε, ανδ ρεστορε. Τρενδσ ιν ενδοχρινολογψ ανδ mεταβολισm: ΤΕΜ. 213;24(3): Ηοmmα Τ, Κατο Α, Ηασηιmοτο Ν, Βατχηελορ ϑ, Ψοσηικαωα Μ, Ιmαι Σ, Wακιγυχηι Η, Σαιτο Η, Ματσυmοτο Κ. Χορτιχοστεροιδ ανδ χψτοκινεσ σψνεργιστιχαλλψ ενηανχε τολλ λικε ρεχεπτορ 2 εξπρεσσιον ιν ρεσπιρατορψ επιτηελιαλ χελλσ. Αmεριχαν ϕουρναλ οφ ρεσπιρατορψ χελλ ανδ mολεχυλαρ βιολογψ. 24;31(4): Βυσιλλο ϑμ, Αζζαm ΚΜ, Χιδλοωσκι ϑα. Γλυχοχορτιχοιδσ σενσιτιζε τηε ιννατε ιmmυνε σψστεm τηρουγη ρεγυλατιον οφ τηε ΝΛΡΠ3 ινφλαmmασοmε. Τηε ϑουρναλ οφ βιολογιχαλ χηεmιστρψ. 211;286(44): Dινγ Ψ, Γαο ΖΓ, ϑαχοβσον ΚΑ, Συφφρεδινι ΑΦ. Dεξαmετηασονε ενηανχεσ ΑΤΠ ινδυχεδ ινφλαmmατορψ ρεσπονσεσ ιν ενδοτηελιαλ χελλσ. ϑ Πηαρmαχολ Εξπ Τηερ. 21;335(3): Πψτερ ΛΜ, Ψανγ Λ, δα Ροχηα ϑμ, Ενγελανδ ΧΓ. Τηε εφφεχτσ οφ σοχιαλ ισολατιον ον ωουνδ ηεαλινγ mεχηανισmσ ιν φεmαλε mιχε. Πηψσιολογψ & βεηαϖιορ. 214;127: Βραυχηλε Μ, Φασσλερ Ρ, Wερνερ Σ. Συππρεσσιον οφ κερατινοχψτε γροωτη φαχτορ εξπρεσσιον βψ γλυχοχορτιχοιδσ ιν ϖιτρο ανδ δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 1995;15(4): Γαλλυχχι ΡΜ, Συγαωαρα Τ, Ψυχεσοψ Β, Βερρψανν Κ, Σιmεονοϖα ΠΠ, Ματηεσον ϑμ, Λυστερ ΜΙ. Ιντερλευκιν 6 τρεατmεντ αυγmεντσ χυτανεουσ ωουνδ ηεαλινγ ιν ιmmυνοσυππρεσσεδ mιχε. ϑουρναλ οφ ιντερφερον & χψτοκινε ρεσεαρχη : τηε οφφιχιαλ ϕουρναλ οφ τηε Ιντερνατιοναλ Σοχιετψ φορ Ιντερφερον ανδ Χψτοκινε Ρεσεαρχη. 21;21(8): Ελ Ηαmολψ Τ, Ηεγεδυσ Χ, Λακατοσ Π, Κοϖαχσ Κ, Βαι Π, Ελ Γηαζαλψ ΜΑ, Ελ Dενσηαρψ ΕΣ, Σζαβο Ε, ςιραγ Λ. Αχτιϖατιον οφ πολψ(αdπ ριβοσε) πολψmερασε 1 δελαψσ ωουνδ ηεαλινγ βψ ρεγυλατινγ κερατινοχψτε mιγρατιον ανδ προδυχτιον οφ ινφλαmmατορψ mεδιατορσ. Μολεχυλαρ mεδιχινε. 214;2: Λιυ Ψ, Μιν D, Βολτον Τ, Νυβε ς, Τωιγγ ΣΜ, Ψυε DΚ, ΜχΛενναν Σς. Ινχρεασεδ mατριξ mεταλλοπροτεινασε 9 πρεδιχτσ ποορ ωουνδ ηεαλινγ ιν διαβετιχ φοοτ υλχερσ. Dιαβετεσ χαρε. 29;32(1): Βοιξ ϑ, Σεϖιλλα ΛΜ, Σαεζ Ζ, Χαρχελλερ Ε, Περεζ Π. Επιδερmαλ Μινεραλοχορτιχοιδ Ρεχεπτορ Πλαψσ Βενεφιχιαλ ανδ Αδϖερσε Εφφεχτσ ιν Σκιν ανδ Μεδιατεσ Γλυχοχορτιχοιδ Ρεσπονσεσ. Τηε ϑουρναλ οφ ινϖεστιγατιϖε δερmατολογψ. 216;136(12):

23 Σανδεεπ ΤΧ, Ψαυ ϑλ, ΜαχΛυλλιχη ΑΜ, Νοβλε ϑ, Dεαρψ Ιϑ, Wαλκερ ΒΡ, Σεχκλ ϑρ. 11Βετα ηψδροξψστεροιδ δεηψδρογενασε ινηιβιτιον ιmπροϖεσ χογνιτιϖε φυνχτιον ιν ηεαλτηψ ελδερλψ mεν ανδ τψπε 2 διαβετιχσ. Προχεεδινγσ οφ τηε Νατιοναλ Αχαδεmψ οφ Σχιενχεσ οφ τηε Υνιτεδ Στατεσ οφ Αmεριχα. 24;11(17): Βιταρ ΜΣ. Γλυχοχορτιχοιδ δψναmιχσ ανδ ιmπαιρεδ ωουνδ ηεαλινγ ιν διαβετεσ mελλιτυσ. Τηε Αmεριχαν ϕουρναλ οφ πατηολογψ. 1998;152(2): Φιγυρε Λεγενδσ Φιγυρε 1 Cutaneous ΗΣD1 εξπρεσσιον ανδ αχτιϖιτψ ινχρεασε δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ ανδ σψστεmιχ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ Α) Σερυm χορτιχοστερονε λεϖελσ ωερε δοωνρεγυλατεδ ιν mιχε τρεατεδ ωιτη οραλ χορτιχοστερονε (ΧΟΡΤ) χοmπαρεδ το ϖεηιχλε (ςεη, ν=3 6 τ τεστ B ΗΣD1 ανδ Χ) Η6ΠD mρνα εξπρεσσιον ωερε υπρεγυλατεδ βψ ΧΟΡΤ ιν υνωουνδεδ σκιν χοmπαρεδ το ϖεηιχλε mιχε (ςεη). Ινχρεασεδ εξπρεσσιον ποστ ωουνδινγ ωασ εξαχε CORT ΗΣD1 ινηιβιτορ (ΧΒΞ) τρεατmεντ (ν=3 6, τωο ωαψ ΑΝΟςΑ D ΗΣD1 ενζψmε αχτιϖιτψ ωασ ελεϖατεδ βψ ΧΟΡΤ ιν υνωουνδεδ σκιν ανδ ινχρεασεδ δυρινγ ηεαλινγ ινδεπενδεντλψ οφ ΧΟΡΤ. Αχτιϖιτψ ωασ ινηιβιτεδ βψ ΧΒΞ ιν υνωουνδεδ σκιν ανδ δυρινγ ηεαλινγ (ν=3 5, τωο ωαψ ΑΝΟςΑ). Μυλτιπλε χοmπαρισονσ φορ 1Β 1D: = ϖσ. βασελινε (δαψ ) ιν εαχη τρεατmεντ γρουπ D, # = ϖσ. ςεη/ςεη ατ εαχη τιmε ποιντ ανδ = ϖσ. ςεη/χορτ ατ εαχη τιmε ποιντ T. Σιγνιφιχανχε: = π<.5, = π<.1, = π<.1 56 Φιγυρε 2 ΗΣD1 ινηιβιτιον λιmιτσ γλυχοχορτιχοιδ mεδιατεδ σκιν τηιννινγ Α) Ρεπρεσεντατιϖε Η+Ε σταινινγ σηοωινγ δεχρεασεδ επιδερmαλ τηιχκνεσσ ανδ επιδερmαλ χελλυλαριτψ ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ ιmπροϖεmεντ φολλοωινγ 7 δαψσ ΧΒΞ τρεατmεντ (ν=4, ονε ωαψ ΑΝΟςΑ), Β) Θυαντιφιχατιον οφ επιδερmαλ τηιχκνεσσ (ν=4), Χ) Θυαντιφιχατιον οφ επιδερmαλ χελλυλαριτψ (ν=4, ονε ωαψ ΑΝΟςΑ) ανδ D) Θυαντιφιχατιον οφ δερmαλ αρεα (ν=4, ονε ωαψ ΑΝΟςΑ). Σχαλε βαρ 5 m. Μυλτιπλε χοmπαρισονσ φορ 2Β 2D: # = ϖσ. ςεη/ςεη ανδ = ϖσ. ςεη/χορτ T. Σιγνιφιχανχε: = π<.5, = π<.1, = π<.1 21

24 Φιγυρε 3 Impact of glucocorticoid excess and ΗΣD1 ινηιβιτιον ον επιδερmαλ βαρριερ φυνχτιον Α) Βασελινε τρανσ επιδερmαλ ωατερ λοσσ (ΤΕWΛ) ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ φολλοωινγ 7 δαψσ ΧΒΞ τρεατmεντ (ν=8 1, ονε ωαψ ΑΝΟςΑ), Β) Ινχρεασεδ βαρριερ ιντεγριτψ (νυmβερ οφ ταπε στριπσ ρεθυιρεδ το δισρυπτ βαρριερ) ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ ρεϖερσαλ βψ ΧΒΞ χο τρεατmεντ (ν=8 1, ονε ωαψ ΑΝΟςΑ) ανδ Χ) Βαρριερ ρεχοϖερψ ρελατιϖε το βασελινε ΤΕWΛ (ν=7 8, τωο ωαψ ΑΝΟςΑ). Μυλτιπλε χοmπαρισονσ φορ 3Α ανδ 3Β: # = ϖσ. ςεη/ςεη ανδ = ϖσ. ςεη/χορτ T τεστ) ανδ φορ 3Χ: = ϖσ. 2 ηουρ τιmε ποιντ ιν εαχη τρεατmεντ γρουπ # = ϖσ. ςεη/ςεη ατ εαχη τιmε ποιντ. Σιγνιφιχανχε: = π<.5, = π< Φιγυρε 4 ΗΣD1 ινηιβιτιον ιmπροϖεσ σκιν ωουνδ ηεαλινγ δυρινγ γλυχοχορτιχοιδ εξχεσσ Α) Ρεπρεσεντατιϖε ωουνδ αππεαρανχε ατ δαψ 9 (ν=8), Β) Θυαντιφιχατιον οφ ωουνδ αρεασ σηοωινγ χεσσατιον οφ ηεαλινγ φροm δαψ 4 ιν ΧΟΡΤ mιχε ανδ ιmπροϖεmεντ οφ ηεαλινγ βψ ΧΒΞ τρεατmεντ (ν=8 24, τωο ωαψ ΑΝΟςΑ), Χ) Ρεπρεσεντατιϖε δαψ 9 Η+Ε σταινινγ σηοωινγ αδϖανχεδ γρανυλατιον τισσυε (αρροωσ) φορmατιον ιν mιχε χο τρεατεδ ωιτη ΧΒΞ χοmπαρεδ το ΧΟΡΤ αλονε (ν=3). Σχαλε βαρ Α) 13mm, Χ) 5 m. =ϖσ. δαψ 4. Μυλτιπλε χοmπαρισονσ φορ 4Β: = ϖσ. δαψ 4 ιν εαχη τρεατmεντ γρουπ D, # = ϖσ. ςεη/ςεη ατ εαχη τιmε ποιντ T. Σιγνιφιχανχε: = π<.5, = π<.1, = π< Φιγυρε 5 Εφφεχτ οφ systemic glucocorticoid excess and ΗΣD1 ινηιβιτιον ον χψτοκινε, εξτραχελλυλαρ mατριξ ανδ γροωτη φαχτορ γενε εξπρεσσιον δυρινγ ωουνδ ηεαλινγ Α) ΙΛ B TNF RNA WH ινδεπενδεντλψ οφ ΧΟΡΤ ορ ΧΒΞ, Χ) ΙΛ 6 mρνα σηοωεδ α τρενδ τοωαρδσ ινδυχτιον βψ ΧΟΡΤ ατ δαψ 2 ωηιχη ωασ συππρεσσεδ βψ ΧΒΞ, D) ΚΓΦ mρνα ινδυχτιον ατ δαψ 4 ωασ συππρεσσεδ βψ ΧΟΡΤ βυτ νοτ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ ανδ ινδυχεδ βψ ΧΟΡΤ βυτ νοτ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ ατ δαψ 9. Ε) ΧΟΛ F) ΧΟΛ RNA ωασ ινδυχεδ βψ ΧΟΡΤ βυτ νοτ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ ατ δαψ 9. Γ) ΜΜΠ 9 mρνα ινδυχτιον βψ ΧΟΡΤ ατ δαψ 9 ανδ ωασ ρεϖερσεδ βψ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ. Η) ΤΙΜΠ 1 mρνα ινδυχτιον ατ δαψ 4 ωασ συππρεσσεδ βψ ΧΟΡΤ ανδ ρεϖερσεδ βψ ΧΟΡΤ/ΧΒΞ. (ν=3 6, τωο ωαψ 22

25 ΑΝΟςΑ). Μυλτιπλε χοmπαρισονσ φορ 1Β 1D: = ϖσ. βασελινε (δαψ ) ιν εαχη τρεατmεντ γρουπ D τεστ), # = ϖσ. ςεη/ςεη ατ εαχη τιmε ποιντ ανδ = ϖσ. ςεη/χορτ ατ εαχη τιmε ποιντ T. Σιγνιφιχανχε: = π<.5, = π<.1, = π<.1 23

26 Figure 1 Click here to download Figure Figure 1.pdf A 25 B VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX Corticosterone 11AM (ng/ml) VEH CORT 11 -HSD1 mrna (A.U) # Day # ## ## C VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX D VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX H6PDH mrna (A.U) # # Day # ## ## 11 -HSD1 activity (pmol/h) ## ## ### ### 2 4 Day Φιγυρε 1

27 Figure 2 Click here to download Figure Figure 2.pdf A επιδερmισ δερmισ VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX B Epidermal thickness (µm) VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX C Keratinocytes / 5µm VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX D Dermal area (A.U) VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX Φιγυρε 2

28 Figure 3 A B Click here to download Figure Figure 3.pdf Baseline TEWL (g/h/m 2 ) Integrity (number of tapes) ### VEH/VEH VEH/CORT CBX/CORT VEH/VEH VEH/CORT CBX/CORT C % barrier recovery VEH/VEH CORT/CBX CORT/CBX # 2 4 Time after barrier disruption (hours) Φιγυρε 3

29 Figure 4 A Click here to download Figure Figure 4.pdf B CORT/VEH CORT/CBX Wound area (A.U) VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX # ### ## Day C επιδερmισ VEH/VEH VEH/VEH ## # CORT/VEH CORT/CBX Φιγυρε

30 Figure 5 A IL-1 mrna (A.U) C IL-6 mrna (A.U) E COL-1 1 mrna (A.U) # # π=.1 VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX ## Day B TNF mrna (A.U) D KGF mrna (A.U) F COL-3 1 mrna (A.U) Φιγυρε ## VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX # Click here to download Figure Figure 5.pdf ### ## Day

31 G MMP-9 mrna (A.U) VEH/VEH CORT/VEH CORT/CBX ## H TIMP-1 mrna (A.U) # Day Day Φιγυρε 5