ΠΔΡΙΒΑΛΛΟΝΣΙΚΗ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ

Transcript

1 ΤΙΤΛΟΣ ΜΑΘΗΜΑΤΟΣ: ΠΔΡΙΒΑΛΛΟΝΣΙΚΗ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ ΔΝΟΤΗΤΑ: 8 ο Δργαζηήριο ΟΝΟΜΑ ΚΑΘΗΓΗΤΗ: ΣΙΑΜΗ ΓΙΩΡΓΟ ΤΜΗΜΑ: Σμήμα Γιατείριζης Περιβάλλονηος & Φσζικών Πόρων ΑΓΡΙΝΙΟ

2 Άδεηεο Χξήζεο Τν παξόλ εθπαηδεπηηθό πιηθό ππόθεηηαη ζε άδεηεο ρξήζεο Creative Commons. Γηα εθπαηδεπηηθό πιηθό, όπσο εηθόλεο, πνπ ππόθεηηαη ζε άιινπ ηύπνπ άδεηαο ρξήζεο, ε άδεηα ρξήζεο αλαθέξεηαη ξεηώο. 2

3 Χξεκαηνδόηεζε Τν παξόλ εθπαηδεπηηθό πιηθό έρεη αλαπηπρζεί ζηα πιαίζηα ηνπ εθπαηδεπηηθνύ έξγνπ ηνπ δηδάζθνληα. Τν έξγν «Ανοικηά Ακαδημαϊκά Μαθήμαηα ζηο Πανεπιζηήμιο Παηρών» έρεη ρξεκαηνδνηήζεη κόλν ηε αλαδηακόξθσζε ηνπ εθπαηδεπηηθνύ πιηθνύ. Τν έξγν πινπνηείηαη ζην πιαίζην ηνπ Δπηρεηξεζηαθνύ Πξνγξάκκαηνο «Δθπαίδεπζε θαη Γηα Βίνπ Μάζεζε» θαη ζπγρξεκαηνδνηείηαη από ηελ Δπξσπατθή Έλσζε (Δπξσπατθό Κνηλσληθό Τακείν) θαη από εζληθνύο πόξνπο. 3

4 ΠΔΡΙΒΑΛΛΟΝΣΙΚΗ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ Γιώργος Σζιάμης Δπίκοσρος Καθηγηηής Περιβαλλονηικής Μικροβιολογίας Ιζηόηοπος:

5 ΘΔΜΑΣΙΚΗ ΔΝΟΣΗΣΑ 8: ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΚΗ ΔΞΔΣΑΗ ΓΑΛΑΚΣΟ Σθνπόο απηνύ ηνπ εξγαζηεξηαθνύ καζήκαηνο είλαη ν κηθξνβηαθόο έιεγρνο γάιαθηνο.

6 Περιετόμενα Δνόηηηας Δηζαγσγή Γηαδνρηθέο αξαηώζεηο

7 Περιετόμενα Δνόηηηας Τν γάια είλαη έλα βαζηθό ζπζηαηηθό ηεο δηαηξνθήο καο θαη σο εθ ηνύηνπ δελ ζα πξέπεη λα πεξηέρεη κηθξννξγαληζκνύο. Η παζηεξίσζε ηνπ γάιαθηνο ζπκβάιιεη ζεκαληηθά ζηελ απνκάθξπλζε ησλ κηθξννξγαληζκώλ θαη πξαγκαηνπνηείηαη κε ηηο αθόινπζεο δύν κεζόδνπο: ρακειή ζεξκνθξαζία κεγάιε δηάξθεηα θαη πςειή ζεξκνθξαζία κηθξή δηάξθεηα. Τα βαθηήξηα πνπ επηδνύλ κεηά ηελ παζηεξίσζε δελ είλαη αλαγθαζηηθά παζνγόλα, αιιά ζα πξέπεη ν αξηζκόο ηνπο λα είλαη κηθξόο δηαθνξεηηθά ζα αιινησζεί ε πνηόηεηα ηνπ γάιαθηνο. Η κηθξνβηαθή ζύζηαζε ηνπ παζηεξησκέλνπ γάιαθηνο ζπλήζσο εθηηκάηαη κε ηε κέζνδν ησλ αξαηώζεσλ θαη ηεο δηαζπνξάο ζε ηξπβιία.

8 Γιαδοτικές αραιώζεις Ι 1. Δηνηκάδνπκε έμη δηαδνρηθέο αξαηώζεηο ηνπ ππό εμέηαζε δείγκαηνο σο εμήο: ζε 6 δνθηκαζηηθνύο ζσιήλεο πξνζζέηνπκε από 9 ml απνζηεηξσκέλνπ λεξνύ. 2. Αλαηαξάζζνπκε δπλαηά ην δείγκα ηνπ γάιαθηνο θαη κε ηε ρξήζε απνζηεηξσκέλεο πηπέηαο παίξλνπκε 1ml γάιαθηνο θαη ην πξνζζέηνπκε ζηνλ πξώην δνθηκαζηηθό ζσιήλα. Έηζη πεηπραίλνπκε αξαίσζε ηνπ γάιαθηνο θαηά Πξνζέρνπκε ε πηπέηα λα κελ αθνπκπήζεη κε ην λεξό. Αλαηαξάζζνπκε ην δηάιπκα θαιά κε ηε ρξήζε κεραληθνύ αλαδεπηήξα (Vortex). 3. Καηόπηλ κε ηε ρξήζε κηαο λέαο απνζηεηξσκέλεο πηπέηαο παίξλνπκε 1ml από ηελ πξώηε αξαίσζε θαη ην πξνζζέηνπκε ζην δεύηεξν δνθηκαζηηθό ζσιήλα. Αλαηαξάζζνπκε ην δεύηεξν δηάιπκα θαιά θαη έηζη πεηπραίλνπκε αξαίσζε ηνπ γάιαθηνο θαηά 10-2.

9 Γιαδοτικές αραιώζεις ΙΙ 4. Σπλερίδνπκε παίξλνληαο κε ηξίηε απνζηεηξσκέλε πηπέηα 1ml από ηελ πξνεγνύκελε αξαίσζε (10-2 ) θαη ην πξνζζέηνπκε ζε ηξίην δνθηκαζηηθό ζσιήλα. Αλαηαξάζζνπκε πάιη θαη έηζη έρνπκε ηώξα αξαίσζε ηνπ γάιαθηνο Σπλερίδνπκε παίξλνληαο ηώξα από ην ηξίην δνθηκαζηηθό ζσιήλα κε άιιε απνζηεηξσκέλε πηπέηα 1ml δηαιύκαηνο ην νπνίν κεηαθέξεηαη ζηνλ ηέηαξην δνθηκαζηηθό ζσιήλα. Αλαηαξάζζνπκε θαη έηζη έρνπκε ηώξα πξαγκαηνπνηήζεη αξαίσζε ηνπ γάιαθηνο Σπλερίδνπκε ηελ παξαπάλσ δηαδηθαζία ηόζεο θνξέο αθόκα κέρξη λα θζάζνπκε ζηελ 10-6 αξαίσζε ηνπ γάιαθηνο.

10 Γιαδοτικές αραιώζεις ΙΙI 7. Αθνύ έρνπκε πξαγκαηνπνηήζεη όιεο ηηο αξαηώζεηο, κεηαθέξνπκε δείγκα από θάζε αξαίσζε ζε δύν ηξπβιία. Ξεθηλάκε πάληα από ηελ πην ππθλή αξαίσζε ρξεζηκνπνηώληαο ηελ ίδηα απνζηεηξσκέλε, αξρηθά, πηπέηα όγθνπ 0,1 ml. Σπγθεθξηκέλα, κεηαθέξνπκε ζε ηξπβιία petri κε ζξεπηηθό ππόζηξσκα PCA (ηξππηόλεο γιπθόδεο yeast agar) 0,1ml δηαιύκαηνο από θάζε αξαίσζε εηο δηπινύλ. Τν δείγκα δηαλέκεηαη νκνηόκνξθα ζηελ επηθάλεηα ηνπ ζξεπηηθνύ κε γπάιηλν δηαλνκέα, ηνλ νπνίν ηνλ έρνπκε απνζηεηξώζεη ζε ιύρλν Bunsen. 8. Τα ηξπβιία επσάδνληαη ζηνπο 37 0 C γηα 48 ώξεο θαη αθνινπζεί θαηακέηξεζε ησλ απνηθηώλ από θάζε ηξπβιίν θαη από θάζε αξαίσζε.

11 Γιαδοτικές αραιώζεις ΙV 9. Τα απνηειέζκαηα θαηαγξάθνληαη ζε θαηάιιειν πίλαθα θαη εθθξάδνληαη σο αθνινύζσο: α) ππνινγίδνπκε ην κέζν όξν απνηθηώλ θαη από ηα δύν ηξπβιία ηεο θάζε αξαίσζεο, β) νη πην αμηόπηζηεο εθηηκήζεηο πξνέξρνληαη από ηα ηξπβιία πνπ αξηζκνύλ απνηθίεο, γ) αλ κόλνλ έλα ηξπβιίν από κία ζπγθεθξηκέλε αξαίσζε καο έδσζε απνηθίεο, ηόηε ν αξηζκόο απηόο επί ηνλ ζπληειεζηή αξαίσζεο καο δίλεη ηελ ΟΜΧ αλά ml δείγκαηνο ελώ δ) αλ θαη ηα δύν ηξπβιία κηαο αξαίσζεο καο έδσζαλ απνηθίεο, παίξλνπκε ην κέζν όξν, εθηόο εαλ ν Αξηζ. Μεγ. Αξαίσζ. / Αξηζκ. Μηθξ. Αξ. > 2, νπόηε παίξλνπκε ηνλ αξηζκό ηεο κηθξόηεξεο αξαίσζεο.

12 ημείωμα Ιζηορικού Δκδόζεων Έργοσ Τν παξόλ έξγν απνηειεί ηελ 1 η έθδνζε. ημείωμα Αναθοράς Copyright Παλεπηζηήκην Παηξώλ, Γηώξγνο Τζηάκεο, Γηώξγνο Τζηάκεο. «ΠΔΡΙΒΑΛΛΟΝΣΙΚΗ ΜΙΚΡΟΒΙΟΛΟΓΙΑ - Δργαζηήριο». Έθδνζε: 1.0. Αγξίλην Γηαζέζηκν από ηε δηθηπαθή δηεύζπλζε: ημείωμα Αδειοδόηηζης Τν παξόλ πιηθό δηαηίζεηαη κε ηνπο όξνπο ηεο άδεηαο ρξήζεο Creative Commons Αλαθνξά Γεκηνπξγνύ, Απαγόξεπζε Δκπνξηθήο Χξήζεο θαη Όρη Παξάγσγα Έξγα. Δμαηξνύληαη ηα απηνηειή έξγα ηξίησλ π.ρ. θσηνγξαθίεο, δηαγξάκκαηα θ.ι.π., ηα νπνία εκπεξηέρνληαη ζε απηό θαη ηα νπνία αλαθέξνληαη καδί κε ηνπο όξνπο ρξήζεο ηνπο ζην «Σεκείσκα Χξήζεο Έξγσλ Τξίησλ». Σο Έργο ασηό κάνει τρήζη ηων ακόλοσθων έργων: 1. Αξζέλε, Α. (1982). Μηθξνβηνινγία: ζεσξία πξάμε. Αζήλα. 2. Τκήκα Χεκείαο, Παλεπηζηήκην Ισαλλίλσλ (1999). Αζθήζεηο πξνρσξεκέλνπ εξγαζηεξίνπ ηξνθίκσλ, Ισάλληλα. «Σο σλικό ηης παροσζίαζης προέρτεηαι από ηις πανεπιζηημιακές παραδόζεις ηοσ καθηγηηή Γ. Σζιάμη.»