KALPROTEKTÍN MARKER ZÁPALOVZ PALOVÉHO OCHORENIA ČREVA Ing.Elena Gaboňov ová Oddelenie Laboratórnej rnej Medicíny VšeobecnV eobecná Nemocnica Žiar nad Hronom Fakulta Zdravotníctva a sociálnej práce, Trnavská Univerzita Trnava 16.Jún 2012, 33. KONGRES SSVLD SLS ŽILINA Holiday Inn
KALPROTEKTÍN - charakteristika leukocytárny cytosolový proteín, z Leu sa uvoľnuje po ich lýze alebo aktivácii tvorí 30-60% cytosolového proteínu v granulocyte produkovaný - neutrofilnými granulocytmi - monocytmi, makrofágmi - niektorými epitelmi Voľný kalprotektín sa vyskytuje v plazme (< 2mg/l),moči, pote a ďalších exkrétoch, v črevnej tekutine a v stolici
KALPROTEKTÍN - vlastnosti antimikrobiálne lne, antifungálne a antiproliferačné účinky Viaže ( vplyv na angiogenézu, stimulácia migrácie neutrofilov do miesta zápalu a zvýšením fagocytárnej aktivity ) Ca 2+ pomáha odolávať degradácii spôsobenej leukocytárnymi a mikrobiálnymi enzýmami Zn 2+ inhibícia rastu baktérií-zn závislé enzýmy stabilný a rezistentný voči enzymatickej degradácii- v sekrétoch stanovenie: plazma telové tekutiny stolica tkanivá obsah v stolici koreluje s množstvom leukocytov vylúčených do črevného lumenu, umožňuje odhad leukocytárnej infiltrácie črevnej sliznice
patrí k proteínom skupiny S100 Zdroj: Thomas Vogl et al., Int. Jornal of Molecular Science. 2012, 13, 2893-2917
Zvýšen ená hladina v plazme KALPROTEKTÍN ukazovateľ zápalu, rôznych infekcií - aktívna reumatoidná artritída -včasný marker pľúcnych infekcií Zvýšen ená koncentrácia cia KALPROTEKTÍNU v stolici - IBD (inflammatory( bowel disease)(uc, CD) - infekcia v GIT = bakteriálna - tumor: kolorektálny adenóm, ca hrubého čreva,žalúdka, intestin.lymfóm - užívanie salicylátov a nesteroidných antiflogistík - neliečené potravinové alergie - iné ochorenia: celiakia (neliečená), gastroezofag.reflux.choroba, divertikulóza čreva, proteíny strácajúca a autoimunitná enteropatia
Význam stanovenia KALPROTEKTÍNU v stolici odlíšenie funkčných porúch (IBS) zažívacieho traktu od zápalu sprevádzajúceho organické poškodenie (IBD) predikcia relapsu nešpecifického črevného zápalu zisťovanie aktivity ochorenia
Ochorenia čreva IBS irritable bowel syndrome Funkčné poruchy Syndróm dráždivého čreva Chronické zápaly IBD inflammatory bowel disease Crohnova choroba Ulcerózna kolitída
KALPROTEKTÍN pretrvávajúca abdominálna bolesť je častou príčinou návštevy lekára najčastejšou príčinou býva IBS (irritable bowel syndrome)- syndróm dráždivého čreva odhaduje sa, že asi 40% kolonoskopií je vykonaných pre IBS stanovenie kalprotektínu môže zredukovať množstvo kolonoskopií všetci pacienti s IBD (inflammatory( bowel disease) majú zvýšen ené hladiny fekálneho kalprotektínu pacienti s IBS (irritable bowel syndrome) majú normálne hladiny
IBD - inflammatory bowel disease Crohnova choroba, ulcerózna kolitída Incidencia: 7-10ľudí/100 tisíc, načastejšie vo veku 15-30 rokov, a 50-70 rokov, nárast u detí Symptómy: abdominálna únava, zvýšená teplota bolesť, hnačky, strata váhy, Extraintestinálne manfestácie: artritída, kožné manifestácie, zápal žlčových ciest, postihnutie očí... Etiológia: nie je známa, predpokladá sa spolupôsobenie faktorov genetických, enviromentálnych a imunologických Zdroj: Mudr.Vlniešková,Medirex
Diagnostika ochorenia IBD inflammatory bowel disease : klinický obraz endoskopické, histologické vyšetrenie (biopsia) mikrobiologické vylúčenie infekčnej hnačky základné laboratórne vyšetrenia: CRP,orosomukoid, KO USG, RDG metódy biologické markery: serologické: ANCA - protilátky proti cytoplazme neutrofilov ulcerózna kolitída ASCA - protilátky proti kvasinka Saccharomyces cerevisiae- Crohnova - nevýhoda: nízka n senzitivita a špecificita pre intestinálny zápal Crohnova choroba fekálne: KALPROTEKTÍN výhodou vyšš ššia špecificita pre dg.. ochorení GIT
Vyšetrenie fekálneho KALPROTEKTÍNU neinvazívne jednoduché a časovo nenáročné finančne nenáročné Možnosti stanovenia ELISA (laboratórna rna metóda) kvalitatívne vne rýchle testy (stanovenie v ambulancií) kvantitatívne vne rýchle testy (laboratórna rna metóda)
ELISA metóda Calprest - referenčný test pre stanovenie KALPROTEKTÍNU - enzýmová imunoanalýza -vysoká senzitivita, špecificita a negatívna prediktívna hodnota - pre vyšší počet vzoriek, časovo náročnejší (cca. 120-140 minút) - laboratórne testovanie (vyšetrenie)
Rýchly kvantitatívny vny test CalFast - rýchly kvantitatívny test (výsledok do 20 minút) - pre pracoviská s menším počtom vzoriek - jednoduchá a rýchla metóda - vysoká senzitivita a špecificita, porovnateľná s ELISA metódou
Rýchly kvalitatívny vny test Calprotectin Card - rýchly kvalitatívny test (výsledok do 10 minút) - vhodný pre ambulancie (balenie: 10 testov) - jednoduchá a rýchla metóda - vyzerá aj sa robí ako FOB test - vysoká senzitivita (94%) a špecificita (93%) v porovnaní s laboratórnou metódou - test nie je hradený zdravotnou poisťovňou (hradia si ho pacienti)
REFERENČNÉ HODNOTY KALPROTEKTÍNU -cut-off 50 μg/g stolice - pred deti (podľa Paduchová,Ďuračková Klinická štúdia 2009) hladina KALPR Klinické štádium < 50 μg/g normálne 50-100 μg/g stredný zápal GI >100 μg/g významný zápal GI >250 μg/g mierna až sredná IBD aktivita >500 μg/g ťažké IBD všetci pacienti s IBD (inflammatory( bowel disease) majú zvýšen ené hladiny fekálneho kalprotektínu pacienti s IBS (irritable bowel syndrome) majú normálne hladiny normálna hodnota znamená, že črevná sliznica nie je postihnutá zápalom
KLINICKÉ ŠTÚDIE ZO SVETA Zdroj: J.P. Gisbert a kol., Digestive and Liver Disease 41 (2009) 56 66
Zdroj: J.P. Gisbert a kol., Digestive and Liver Disease 41 (2009) 56 66
KLINICKÉ ŠTÚDIE - Slovensko Paduchová a Ďuračková (Klinická štúdia 2009 LF UK Bratislava) - 5 zdravých dobrovoľníkov (priemerný vek 13,4 r.) -19 pacientov s diagnostikovaným IBD (15,8 r.): 14 CD a 5 UC Výsledky štúdie: Hladiny kalprotektínu (medián): kontrolná skupina pacienti s IBD 19,5 μg/g 1076,7 μg/g CD 1132,4 μg/g UC 490,9 μg/g
Štúdie predikcia relapsu nešpecifick pecifického črevného zápaluz -potvrdzujú relaps ochorenia pri vysokých koncentráciách kalprotektínu - štúdia Tibble a kol. Pacienti v remisii s hladinou kalprotektínu > 250 μg/g -85% malo relaps počas nasledujúcich 12 mesiacov <250 μg/g - 12% malo relaps počas nasledujúcich 12 mesiacov
ZÁVER sedimentácia a CRP môžu byť často normálne aj pri výraznej zápalovej aktivite sliznice čreva dobrá korelácia medzi hladinou kalprotektínu v stolici a zápalovou aktivitou zistenou pomocou endoskopie a histológie stanovenie kalprotektínu v stolici môže zredukovať množstvo kolonoskopií (veľký význam u detí) normalizácia kalprotektínu je indikátorom hojenia sliznice fekálny kalprotektín je jednoduchý a objektívny parameter stavu ochorenia a odpovede na liečbu u pacientov s IBD