ΒΛΑΣΤΟ/ ZYMOΜΥΚΗΤΕΣ (YEASTS)

Μέγεθος: px

Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "ΒΛΑΣΤΟ/ ZYMOΜΥΚΗΤΕΣ (YEASTS)"

Κυβηλη Κορομηλάς
8 χρόνια πριν
Προβολές:

1 ΒΛΑΣΤΟ/ ZYMOΜΥΚΗΤΕΣ (YEASTS)

2 ΒΛΑΣΤΟΜΥΚΗΤΕΣ ΓΕΝΟΣ Candida C. albicans Cryptococcus C. neoformans n

4 ΟΙΚΟΓΕΝΕΙΑ Cryptococcaceae ΓΕΝΟΣ Cryptococcus ΕΙΔΟΣ C. neoformans Var. neoformans Var. gattii

5 Βλαστομύκητας, παγκόσμια κατανομή Παχύ πολυσακχαριδικό έλυτρο Δεν βρίσκεται ΦΧ ανθρώπου Βρίσκεται περιβάλλον, έδαφος Ν, PH Ευκαιριακές λοιμώξεις αριθμό η λειτουργία Τ-λεμφοκυττάρων

6 Φορείς C. neoformans περιστέρια κύτταρα / gr περιττωμάτων - Δεν νοσούν θ σώματος των

7 Κρυπτοκόκκωση «Εξωγενής λοίμωξη» Μολυσματικές μορφές < 4μ - Βλαστοσπόρια - Μικρά βλαστοκύτταρα, μικρό έλυτρο

8 Στρογγυλά ή ωοειδή βλαστοκύτταρα μ Παχύ πολυσακχαριδικό έλυτρο in vivo/ vitro Όχι ψευδομυκητύλλιο

9 Λευκές βλεννώδεις αποικίες (SABOURAUD ΑΓΑΡ) Δεν ζυμώνει σάκχαρα Ζύμωση σακχάρων Αφομοιώνει Gl Ma Su Gal (όχι Lac) Αυξανόγραμμα Παράγει ουρεάση Christensen s urea agar 2-5 ημ. 25 C (+)

10 ΟΜΑΔΕΣ ΥΨΗΛΟΥ ΚΙΝΔΥΝΟΥ ΚΡΥΠΤΟΚΟΚΚΙΚΗ ΛΟΙΜΩΞΗ AIDS CD4 Helper T λεμφοκύτταρα Πρωτοπαθής πνευμονική κρυπτοκόκκωση συνδυάζεται AIDS 60% ασθενών AIDS κρυπτοκοκκική λοίμωξη 4ο αίτιο λοιμώξεων ασθενών AIDS - Pneumocystis jirovecii - CMV - Μυκοβακτηρίδια - C. neoformans ΠΛΕΟΝ ΣΥΧΝΗ ΚΑΙ ΘΑΝΑΤΗΦΟΡΟΣ ΜΥΚΗΤΙΑΣΗ

κρυπτοκοκκική λοίμωξη 4ο αίτιο λοιμώξεων ασθενών AIDS - Pneumocystis

11 ΘΕΡΑΠΕΙΑ ΑΝΟΣΟΚΑΤΑΣΤΑΛΤΙΚΑ μεταμόσχευση νεφρού, ΜΟ ΚΑΚΟΗΘΕΙΣ ΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΚΕΣ ΝΟΣΟΙ λευχαιμία, λέμφωμα Τ λεμφοκυττάρων ουδετεροπενία εκ της νόσου ουδετεροπενία εκ της θεραπείας ΣΑΚΧΑΡΩΔΗΣ ΔΙΑΒΗΤΗΣ ΘΕΡΑΠΕΙΑ ΚΟΡΤΙΚΟΣΤΕΡΟΕΙΔΗ

λεμφοκυττάρων ουδετεροπενία εκ της νόσου ουδετεροπενία

12 ΚΛΙΝΙΚΕΣ ΕΙΚΟΝΕΣ ΚΡΥΠΤΟΚΟΚΚΩΣΗΣ ΜΗΝΙΓΓΟΕΓΚΕΦΑΛΙΤΙΔΑ 100% θνητότητα 50% με θεραπεία ΠΝΕΥΜΟΝΙΑ α παθής, β παθής ΔΕΡΜΑΤΟΣ ΜΑΛΑΚΩΝ ΜΟΡΙΩΝ δερματίτιδα αγγειί/ κυτταρί/ μυοσίτιδα ΟΣΤΕΟΜΥΕΛΙ/ ΑΡΘΡΙ/ ΠΥΕΛΟΝΕΦΡΙ/ ΕΝΔΟ/ΠΕΡΙΚΑΡΔΙΤΙΔΑ

παθής ΔΕΡΜΑΤΟΣ ΜΑΛΑΚΩΝ ΜΟΡΙΩΝ δερματίτιδα αγγειί/

13 ΣΤΟΙΧΕΙΑ ΠΑΘΟΓΕΝΕΙΑΣ ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ C. neoformans ΠΥΛΗ ΕΙΣΟΔΟΥ Αναπνευστικό ΚΥΨΕΛΙΔΕΣ Θέση πολλαπλασιασμού Πρωτοπαθής πνευμονία Αιματογενής διασπορά - ΚΝΣ Μηνιγγοεγκεφαλίτιδα - Δέρμα - Σπλάχνα

14 Α ΦΑΣΗ Μόλυνση Επιβίωση Πολλαπλασιασμός Β ΦΑΣΗ Αποφυγή κυτταρικής ανοσίας Διασπορά λοίμωξης Θάνατος μεγαλοοργανισμού

15 Α ΦΑΣΗ ΜΟΛΥΝΣΗ Μικρά βλαστοκύτταρα, μικρό έλυτρο (Dehydrated) < 4μ Βλαστοσπόρια ΕΠΙΒΙΩΣΗ 37 C Καλσινευρίνη Α, φωσφατάση παράγεται σε stress 37 C 5% CO 2 PH Στελέχη που ΔΕΝ έχουν γονίδιο καλσινευρίνης είναι ΜΗ παθογόνα ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΣΜΟΣ

φωσφατάση παράγεται σε stress 37 C 5% CO 2 PH 7. 3 7.

16 Αντιμετώπιση φαγοκυττάρωσης Β ΦΑΣΗ κυτταρικής ανοσίας διασπορά C.neoformans Έλυτρο Άλλοι εξωκυττάριοι πολυσακχαρίτες Παραγωγή μελανίνης Παραγωγή μανιτόλης δισμουτάση, πρωτεάσες, φωσφο/ λυσοφωσφολιπάσες

17 ΕΛΥΤΡΟ Σύνθετος πολυσακχαρίτης ΜΒ Γλυκουρονοξυλομαννάνη GXM Αντιγονικές ιδιότητες GXM C. neoformans var. neoformans A, D var. gattii B, C CAP 59 CAP 64 Γονίδια παραγωγής ελύτρου Μεταλλακτικά στελέχη Δεν παράγουν έλυτρο ΜΗ ΠΑΘΟΓΟΝΑ ΓΙΑ ΤΟΝ ΑΝΘΡΩΠΟ

18 C εναλλακτική οδός ΕΛΥΤΡΟ C5α χημειοταξία PMNs C3b οψωνινοποίηση Fc IgG anti GXM οψωνινοποίηση καλύτερη < έλυτρο φαγοκυττάρωση APC μακροφάγο κυψελίδες Δεν πέπτει ικανά ελυτροφόρους μικροοργανισμούς Ανεπιτυχής παρουσίαση Ags T-λεμφοκύτταρα παραγωγή ΙΝΤ πολλαπλασιασμός Τ-λεμφοκυττάρων

μακροφάγο κυψελίδες Δεν πέπτει ικανά ελυτροφόρους μικροοργανισμούς

19 ΠΟΛΥΣΑΚΧΑΡΙΔΙΚΑ ΕΞΩΚΥΤΤΑΡΙΑ ΠΡΟΪΟΝΤΑ Γλυκουρoνοξυλομαννάνη GXM ΕΛΥΤΡΟ Γαλακτοξυλομαννάνη GalXM πολυσακχαριδικά Μαννοπρωτεΐνες MP εξωκυττάρια προϊόντα GalXM-MP αναστέλλουν μετανάστευση PMNs ενεργοποιούν κατασταλτικά T- λεμφοκύτταρα ΕΝΥ αύξηση ιξώδους ζελατινώδες ενδοκρανιακή πίεση

εξωκυττάρια προϊόντα GalXM-MP αναστέλλουν μετανάστευση PMNs

20 - ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΜΕΛΑΝΙΝΗΣ ΑΝΤΙΟΞΕΙΔΩΤΙΚΟΣ ΠΑΡΑΓΩΝ C.neoformans φαινολοοξειδάσες Κατεχολαμίνες (DOPA)+ Ελεύθερες οξειδωτικές ρίζες ΜΕΛΑΝΙΝΗ εγκεφάλου μακροφάγων - ΠΑΡΑΓΩΓΗ ΜΑΝΙΤΟΛΗΣ Αντιοξειδωτικός παράγων Ενδοκρανιακής πιέσεως

Ελεύθερες οξειδωτικές ρίζες ΜΕΛΑΝΙΝΗ εγκεφάλου

21 ΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΑΝΟΣΙΑ Πολυμορφοπύρηνα oξειδωτικό σύστημα Μακροφάγα μυελο-υπεροξειδάσης, Η 2 Ο 2 Νatural killer cells Ειδικά Τ- λεμφοκύτταρα Abs C oψωνινοποίηση

22 ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΔΙΑΓΝΩΣΗ Εγκεφαλονωτιαίο υγρό ΕΝΥ Πτύελα, βρογχικές εκκρίσεις Δερματική βλάβη Ούρα, αίμα (αντιγοναιμία) Γενική εξέταση ΕΝΥ - Κύτταρα / mm 3 - Λεμφοκυτταρικός Τύπος - Λεύκωμα ~ - Γλυκόζη φυσιολογική ή μέτρια

23 Άμεσο παρασκεύασμα Αρνητική χρώση σινικής μελάνης Ε: 50% ΕΝΥ

24 Ανίχνευση πολυσακχαριδικού Ag ελύτρου Μ-Abs LATEX + ΕΝΥ -ΟΥΡΑ -ΟΡΟΣ Συγκολλητινοαντίδραση Ε: 100% ΔΙΑΓΝΩΣΤΙΚΗ ΜΕΘΟΔΟΣ ΚΡΥΠΤΟΚΟΚΚΩΣΗΣ

25 Κ/α ΕΝΥ Sabouraud 37 0 C ΠΤΥΕΛΑ Sabouraud + χλωραμφενικόλη

26 Τυποποίηση παρασκεύασμα με σινική μελάνη Ελυτροφόρος βλαστομύκητας ζύμωση σακχάρων αυξανόγραμμα gl mal suc gal lac(-) δοκιμασία παραγωγής ουρεάσης Cryptococcus

27 ΘΕΡΑΠΕΙΑ Αμφοτερικίνη Β ΙV + 5-φλουοροκυτοσίνη PO Λιποσωμική μορφή αμφοτερικίνης Αδρανείς εχινοκανδίνες Θνητότητα > 50% με θεραπεία Πρόγνωση κακή ΕΝΥ Κύτταρα < 2Ο / mm Γλυκόζη Σινική (+) Πολυσακχαριδικά Ags (+++)

28 Περίπτωση δερματικής Κρυπτοκόκκωσης

29 Περίπτωση - Πνευμονικής Κρυπτοκόκκωσης ΚΝΣ Ασθενής χειρουργείται για χωροκατακτητική εξεργασία του πνεύμονος ΙΣΤΟΛΟΓΙΚΗ ΕΞΕΤΑΣΗ

30 ΙΣΤΟΛΟΓΙΚΗ ΕΞΕΤΑΣΗ ΠΝΕΥΜΟΝΟΣ

31 Αστάθεια βαδίσματος ΕΝΥ Κύτταρα 15/ mm 3 Τύπος κυττάρων λεμφοκυτταρικός Γλυκόζη 55mg% Λεύκωμα 60mg%

32 ΧΡΩΣΗ ΣΙΝΙΚΗΣ ΜΕΛΑΝΗΣ ΣΤΟ ΙΖΗΜΑ ΕΝΥ

33 Κ/Α & ΤΥΠΟΠΟΙΗΣΗ C. neoformans

34 ANTIMYKHTOΓΡΑΜΜΑ ANTOXH ΣΤΟ CASPOFUGIN

35 ΤΙ ΕΞΕΤΑΣΗ ΘΑ ΖΗΤΟΥΣΑΤΕ ΝΑ ΚΑΝΕΙ Ο ΑΣΘΕΝΗΣ? ΤΙ ΥΠΟΨΙΑΖΕΣΤΕ ΟΤΙ ΜΠΟΡΕΙ ΝΑ ΕΧΕΙ ΠΑΡΑΛΛΗΛΑ?

36 Aspergillus

38 ASPERGILLUS -Υφομύκητας - κοσμοπολίτικη κατανομή ~ 700 είδη «Aspergillus» φύση ~ 19 απομονώθηκαν από τον άνθρωπο 4 είδη πλέον συχνά - Λοιμώξεις ανθρώπου - Παροδικό αποικισμό A. fumigatus, Α. flavus, Α. niger, A. terreus

39 Aspergillus in vitro σε τρόφιμα παράγει τοξίνες Α. flavus Αφλατοξίνες (τοξικές, καρκινογόνες) Ωχρατοξίνες Kojic acid Clavacin Δεν παράγονται in vivo - Δεν αφορούν την παθογένεια των λοιμώξεων του

40 ΕΠΙΔΗΜΙΟΛΟΓΙΚΑ ΣΤΟΙΧΕΙΑ Παντού περιβάλλον Αναπτύσσεται σε αποθηκευμένα Δημητριακά Όσπρια Ξηρούς καρπούς Άχυρο Σκουπίδια Κοπριές ζώων Φυσιολογικά εισπvέουμε σπόρουs Aspergillus / 24 h

41 Ικανότητα επιβίωσης και πολλαπλασιασμού >45 0 C Σπόροι μολύνουν σκόνη ανθεκτικοί Εισπνοή σκόνης οικοδομικές εργασίες σε νοσοκομεία ανεμιστήρες ΜΙΚΡΟΕΠΙΔΗΜΙΕΣ

42 Aspergillus 2-3μm Λοιμογόνα σωματίδια Σπόροι ή κονίδια μ Κυψελίδες πνεύμονος

43 Ευκαιριακές λοιμώξεις Ανοσοκατεσταλμένους Ουδετεροπενικούς Κυτταρική ανοσία

44 ΜΟΛΥΝΣΗ Εισπνοή σπόρων Αναπνευστικό Επαφή σπόρους ή υφές Λύση συνεχείας δέρματος Μυκηταιμία Οποιοδήποτε όργανο Υφές Aspergillus αίμα Μολυσματικοί θρόμβοι - Διασπορά λοίμωξης- Αποφράσσουν αγγεία - Έμφρακτα - Νεκρώσεις ιστών - Αιμορραγίες

45 Pathogenesis of aspergillosis

46 Aspergillus Life-cycle Spores inhaled Germination Mass of hyphae (plateau phase) Hyphal elongation and branching

47 ΚΛΙΝΙΚΕΣ ΕΙΚΟΝΕΣ ΑΣΠΕΡΓΙΛΛΩΣΗΣ Πνευμονική ασπεργίλλωση Ωτομυκητίαση Λοίμωξη παραρρινίων κόλπων Λοίμωξη οφθαλμού Λοίμωξη ΚΝΣ

48 ΠΝΕΥΜΟΝΙΚΗ ΑΣΠΕΡΓΙΛΛΩΣΗ Αλλεργική πνευμονία Νεκρωτική πνευμονία, εμπύημα υπεζωκότος Ασπεργίλλωμα

49 ΑΛΛΕΡΓΙΚΗ ΒΡΟΓΧΟΠΝΕΥΜΟΝΙΑ Α. fumigatus A. flavus Φλεγμονή βρόγχων, βρογχιολίων, περιβρογχικά Άσθμα - στένωση αεροφόρων οδών Απλή ακτινογραφία θώρακος παθολογική Πτύελα, εκμαγεία αεροφόρων οδών (βλέννη + κύτταρα) mucin plugs ειδικών IgE έναντι Aspergillus, ηωσινόφιλα

50 ΝΕΚΡΩΤΙΚΗ ΠΝΕΥΜΟΝΙΑ Α. fumigatus A. flavus ισχυρά ανοσοκατασταλμένοι λέμφωμα λευχαιμία ουδετεροπενικοί μεταμοσχεύσεις AIDS CD4 < 50mm 3 συγγενείς ανοσοανεπάρκειες κορτιζονοθεραπεία Θνητότητα

51 ΚΛΙΝΙΚΑ βήχας, πυρετός, αιμόπτυση, άλγος πλευρίτιδα, εμπύημα υπεζωκότος ΑΚΤΙΝΟΛΟΓΙΚΑ σκίαση αντίστοιχης περιοχής ΦΛΕΓΜΟΝΗ κοκκιωματώδης βλάβη αποστηματοποίηση νέκρωση σπηλαιοποίηση πνευμονοθώρακα αν βλάβη στις πνευμονικές πύλες θανατηφόρος αιμόπτυση επιθετική αγωγή λιποσωμική μορφή αμφοτερικίνης

52 ΑΣΠΕΡΓΙΛΛΩΜΑ Aποικισμός κοιλοτήτων - Συγγενείς κύστεις πνεύμονος - Επίκτητες (φυματίωση) Χειρουργικός καθαρισμός αποστήματος - Παραρίνιοι κόλποι οι υφές παίρνουν τη μορφή όγκου Fungus ball

53 Παραμονή στη κοιλότητα ασυμπτωματικός Περιφερικές οργανώνονται, φλεγμονή, αιμόπτυση Εργαστηριακά - Abs - χρώση υλικού βιοψίας (GMS, PAS) χαρακτηριστικές υφές σχηματίζουν 45 γωνία - κ/α υλικού βιοψίας θετική στο 50%

54 ΩΤΟΜΥΚΗΤΙΑΣΗ Έξω ακουστικός πόρος Ανάπτυξη Aspergillus ιστικά υπολείμματα εκκρίσεις ωτός (κερί) Χρόνια εξωτερική ωτίτιδα (διαβητικοί)

55 ΠΑΡΑΡΙΝΟΚΟΛΠΙΤΙΔΑ Αλλεργική παραρινοκολπίτιδα χρόνια ρινίτιδα, υποτροπιάζουσα παραρινοκολπίτιδα ανευρίσκεται Aspergillus, ηωσινόφιλα, ΡΜΝs Χρόνια κοκκιωματώδης εξεργασία xρόνια φλεγμονή με αργή εξέλιξη Νεκρωτικές βλάβες βλεννογόνο των παραρινίων κόλπων σε ουδετεροπενικούς Ασπεργίλλωμα hyphal ball Συνήθως δεν είναι διηθητικό, αντιμετωπίζεται χειρουργικά

56 ΟΦΘΑΛΜΟΣ Τραυματισμός κερατοειδούς Επιπλοκή χειρουργικής επέμβασης καταρράκτη Ανοσοκατασταλμένος ασθενής, αιματογενής διασπορά καταστροφή οφθαλμού ΚΝΣ Ανοσοκατασταλμένος αιματογενής διασπορά έμφρακτα εγκεφάλου Ανοσοϊκανοί αποστήματα εγκεφάλου Νευροχειρουργική επέμβαση, μηνιγγίτιδα

57 ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΑΚΗ ΔΙΑΓΝΩΣΗ Ιστολογική εξέταση GMS, PAS Άμεσο παρασκεύασμα Υφές πλάτος 2-4μ, 45 γωνία παράλληλα τοιχώματα διαφράγματα (septa) πιθανά ασπεργίλλωση Τα χαρακτηριστικά κονιδιοφόρα δεν αναπτύσσονται σε ιστούς ( Ο₂),μόνο σε κ/ες

58 Καλλιέργεια Ορολογική εξέταση ELISA Αgs ΚΤ Αspergillus γαλακτομανάνη και γλυκάνη σε ουδετεροπενικούς (ορός, ΒΑL) PCR

60 Ανεύρεση υφών ή κονιδιοφόρων Aspergillus σε περιοχές που αποικίζει : πτύελα, κόπρανα, τραύμα, ούρα, ξέσματα κερατοειδούς Δεν έχουν διαγνωστική αξία εκτός αν συνδυάζονται με την κλινική εικόνα και το ιστορικό

61 ανεύρεση Aspergillus σε τραύμα μεταμοσχευμένου ασπεργίλλωση ανεύρεση Aspergillus σε πτύελα λευχαιμικού ασπεργίλλωση Aspergillus επιμολύνει συχνά τρυβλία contaminant Aspergillus αποικίζει παροδικά ανώτερο αναπνευστικό ανοσοϊκανού ατόμου

62 Πότε αξιολογούμε θετική καλλιέργεια με ασπέργιλλο? Ανεύρεση Aspergillus σε δείγμα κατ επανάληψη εκτεταμένος αποικισμός ή λοίμωξη Ανεύρεση Aspergillus σε δείγμα ανοσοκατασταλμένου εκτεταμένος αποικισμός ή λοίμωξη

63 Καλλιέργεια σε Sabouraud άγαρ με ή χωρίς χλωραμφενικόλη 37 C 1-2 x 24ωρα Μεγάλες αποικίες Aspergillus niger

64 ΜΑΚΡΟΣΚΟΠΙΚΗ ΜΟΡΦΟΛΟΓΙΑ ΑΠΟΙΚΙΑΣ ΧΡΩΜΑ ΥΦΗ ΜΕΓΕΘΟΣ Aspergillus fumigatus

65 Τυποποίηση Μακροσκοπικά χαρακτηριστικά χρώμα, σύσταση αποικίας Μικροσκοπικά χαρακτηριστικά τμήμα ή υλικό αποικίας/cellotape (υφές, κονιδιοφόρα)

66 Septate hyphae, foot cell, fruiting body ύψος μ πλάτος μ

67 Aspergillus fumigatus Αποικία κοκκώδης, γκριζοπράσινη με λευκή άλω Κεφαλή βάσης έχει σχήμα ροπάλου Μια σειρά φιαλίδια παραγωγή σπορίων

68 Αspergillus terreus αποικία φαιά

69 Αspergillus niger αποικία κοκκώδης μαύρη «ως αλατοπίπερο» κονιδιοφόρα στρογγυλά μικρά

70 Αspergillus flavus αποικία κοκκώδης φαιοκίτρινη μεγάλο σφαιρικό κονιδιοφόρο

71 Έλεγχος MIC αντιμυκητικών σε στέλεχος Aspergillus fumigatus

72 ΘΕΡΑΠΕΙΑ Ασπεργίλλωμα, απόστημα Χειρουργική Συστηματική ασπεργίλλωση Αμφοτερικίνη Β λιποσωμική μορφή LipAmB,voriconazole,caspofungin ΠΡΟΦΥΛΑΞΗ Σε ανοσοκατασταλμένους ασθενείς, po itraconazole (sporanox) +/- ρινική ενστάλαξη αμφοτερικίνης προς αποφυγή αποικισμού ΘΝΗΤΟΤΗΤΑ Με θεραπεία 66%, xωρίς θεραπεία 100%

73 A. flavus Α.fumigatus A.niger A. terreus

74 Αspergillus fumigatus

Σχετικά έγγραφα

Αρμέγει δήθεν ο Γιώργος τα πρόβατά του κάθε πρωί και γεμίζει καρδάρες με γάλα το οποίο αποθηκεύεται σε δοχεία μεγάλης χωρητικότητας και μεταφέρεται σ

Αρμέγει δήθεν ο Γιώργος τα πρόβατά του κάθε πρωί και γεμίζει καρδάρες με γάλα το οποίο αποθηκεύεται σε δοχεία μεγάλης χωρητικότητας και μεταφέρεται σ εργοστάσιο επίσης δήθεν δικής του ιδιοκτησίας όπου