ΑΙΜΟΠΑΘΟΛΟΓΟΑΝΑΤΟΜΙΑ



Σχετικά έγγραφα
POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ

Η τεχνική της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION)

PCR Εφαρμογές-2. RACE Site directed mutagenesis

ΓΕΝΕΤΙΚΗ ΜΗΧΑΝΙΚΗ. Η τεχνολογία του ανασυνδυασμένου DNA και οι εφαρμογές της...

Εφαρμογές τεχνολογιών Μοριακής Βιολογίας στην Γενετική

ΟΙ ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΤΕΧΝΙΚΕΣ ΣΤΟΝ ΕΛΕΓΧΟ ΤΟΥ ΑΙΜΑΤΟΣ. Αλεξόπουλος Κώστας Χημικός M.Sc, PhD

Εργαλεία Μοριακής Γενετικής

Νικόλαος Σιαφάκας Λέκτορας Διαγνωστικής Ιολογίας Εργαστήριο Κλινικής Μικροβιολογίας ΠΓΝ «ΑΤΤΙΚΟΝ»

Η Κυτταρογενετική στις αιματολογικές κακοήθειες

Αρχές μοριακής παθολογίας. Α. Αρμακόλας Αν. Καθηγητής Ιατρική Σχολή ΕΚΠΑ

ΒΙΟΛΟΓΙΑ ΘΕΤΙΚΗΣ ΚΑΤΕΥΘΥΝΣΗΣ ΟΝΟΜΑΤΕΠΩΝΥΜΟ: ΤΜΗΜΑ: ΘΕΜΑ 1 Ο. 3. Το DNA των μιτοχονδρίων έχει μεγαλύτερο μήκος από αυτό των χλωροπλαστών.

Μικροβιολογία Τροφίμων Ι Εργαστήριο

Ο ρόλος και η σημασία των μοριακών τεχνικών στον έλεγχο των. μικροβιολογικών παραμέτρων σε περιβαλλοντικά δείγματα για την προστασία

Αρχές μοριακής παθολογίας. Α. Αρμακόλας Αν. Καθηγητής Ιατρική Σχολή ΕΚΠΑ

ΧΡΗΣΗ ΜΟΡΙΑΚΩΝ ΜΕΘΟΔΩΝ ΣΕ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ ΕΛΕΓΧΟΥ ΠΟΙΟΤΗΤΑΣ ΝΕΡΟΥ

ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΔΙΑ ΒΙΟΥ ΜΑΘΗΣΗΣ ΑΕΙ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΠΙΚΑΙΡΟΠΟΙΗΣΗ ΓΝΩΣΕΩΝ ΑΠΟΦΟΙΤΩΝ ΑΕΙ (ΠΕΓΑ)

Εισαγωγή στη Real Time PCR. Καραπέτσας Θανάσης PhD, MSc

Η ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑ ΤΟΥ ΑΝΑΣΥΝΔΥΑΖΟΜΕΝΟΥ ΓΕΝΕΤΙΚΗ ΜΗΧΑΝΙΚΗ

ΥΠΟΛΕΙΜΜΑΤΙΚΗ ΝΟΣΟΣ ΣΤΗ Β-ΧΡΟΝΙΑ ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΙΚΗ ΛΕΥΧΑΙΜΙΑ

Οργάνωση των NA σε ιούς. 09/04/ Μοριακή Βιολογία Κεφ. 1 Καθηγητής Δρ. Κ. Ε. Βοργιάς

ΚΕΦΑΛΑΙΟ 4. Βασικές αρχές της μοριακής βιολογίας. Ακαδημαϊκές Εκδόσεις 2011 Το κύτταρο-μια Μοριακή Προσέγγιση 1

Εργαστηριακή ιάγνωση Γρίπης Μοριακή διάγνωση ή όχι?

Εφαρμογές τεχνολογιών Μοριακής Βιολογίας στην Γενετική

1. Πού πραγματοποιούνται η αντιγραφή και η μεταγραφή; ΘΩΜΑΣ ΑΠΑΝΤΗΣΗ. 2. Ποιες είναι οι κατηγορίες γονιδίων με κριτήριο το προϊόν της μεταγραφής τους;

Τεχνικές Μοριακής Ενδοκρινολογίας. Ενότητα 3: Παιδιατρική Ενδοκρινολογία Βασιλική Ε. Γκρέκα-Σπηλιώτη Σχολή Επιστημών Υγείας Τμήμα Ιατρικής

ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)

ΤΕΧΝΙΚΕΣ ΠΡΟΔΙΑΓΡΑΦΕΣ ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΟΥ ΣΥΝΟΔΟΥ ΕΞΟΠΛΙΣΜΟΥ ΑΥΤΟΜΑΤΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΕΞΕΤΑΣΕΩΝ ΜΕ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑ PCR

Κεφάλαιο 4: Ανασυνδυασμένο DNA

Επισκεφτήκαμε το ινστιτούτο νευρολογίας και γενετικής όπου μας μίλησε ο κύριος Βάσος Νεοκλέους και η κ. Αλέξια Φαίδωνος για τη μηχανή Polymerase

Ιδιαίτερες νοσολογικές οντότητες στα λεμφώματα υψηλού βαθμού κακοηθείας

Βιολογία. Θετικής Κατεύθυνσης

ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΟΛΙΓΟΚΛΩΝΙΚΩΝ ΠΛΗΘΥΣΜΩΝ Β-ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΣΤΟΝ ΝΕΦΡΙΚΟ ΙΣΤΟ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΕΣ ΠΑΘΗΣΕΙΣ ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΚΗΣ ΑΙΤΙΟΛΟΓΙΑΣ

ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΕΛΕΥΘΕΡΩΝ ΕΛΑΦΡΩΝ ΑΛΥΣΕΩΝ ΣΤΟΝ ΟΡΟ ΚΑΙ ΣΤΑ ΟΥΡΑ. Χρυσούλα Νικολάου

EΘΝΙΚΟN ΚΑΙ ΚΑΠΟΔΙΣΤΡΙΑΚΟN ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟN ΑΘΗΝΩΝ ΕΙΔΙΚΟΣ ΛΟΓΑΡΙΑΣΜΟΣ ΚΟΝΔΥΛΙΩΝ ΕΡΕΥΝΑΣ ΓΡΑΜΜΑΤΕΙΑ ΕΠΙΤΡΟΠΗΣ ΕΡΕΥΝΩΝ ΑΝΑΡΤΗΤΕΑ ΣΤΟ ΔΙΑΔΙΚΤΥΟ

Γονιδιωματική. G. Patrinos

Πρωτόκολλο Επεξεργασίας Λεµφικών Ιστών. Θεοδώρα Παπαδάκη Αιµοπαθολογοανατοµικό Εργαστήριο

Βιολογία Κατεύθυνσης Γ Λυκείου Διαγώνισμα στο Κεφάλαιο 4 ο

Πολυμορφισμοί Ανρώπινου DNA. Νικόλαος Δάβανος, MSc PhD

Ενότητα 2011: Λεμφώματα

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΑ ΘΕΩΡΗΤΙΚΟ ΥΠΟΒΑΘΡΟ. Πρόλογος. Κεφάλαιο 1: Γενετική μηχανική - Βιοτεχνολογία. Κεφάλαιο 2: Δομή και λειτουργία των νουκλεїνικών οξέων

ΓΕΝΕΤΙΚΗ ΒΕΛΤΙΩΣΗ ΦΥΤΩΝ

Προβλήματα σχετιζόμενα με την τυποποίηση αντιγόνων Ι

ΗPV και ενδοεπιθηλιακές αλλοιώσεις κατωτέρου γεννητικού συστήματος. Ε.Κωστοπούλου Λέκτορας Παθολογικής Ανατομικής Πανεπιστήμιο Θεσσαλίας

ΔΙΑΓΩΝΙΣΜΑ 4o BLOG (2) ΖΗΤΗΜΑ Α ΜΟΝΑΔΕΣ 25

Βιολογία Θετικής Κατεύθυνσης. 4 ο Κεφάλαιο - Τεχνολογία του ανασυνδυασμένου DNA

Βιολογία Ο.Π. Θετικών Σπουδών Γ' Λυκείου

ΤΟ DNA ΚΑΙ RNA. Θανος Εξαρχου Γ1

ΑΠΟΦΑΣΗ Ο ΠΡΟΕΔΡΟΣ ΔΣ - ΔΙΟΙΚΗΤΗΣ

Ποιες είναι οι ομοιότητες και οι διαφορές μεταξύ της αντιγραφής και της

ΛΕΜΦΑ ΕΝΙΚΟ ΛΕΜΦΩΜΑ ΟΡΙΑΚΗΣ ΖΩΝΗΣ ΙΣΤΟΛΟΓΙΚΗ ΕΙΚΟΝΑ

5 GTG CAC CTG ACT CCT GAG GAG 3 3 CAC GTG GAC TGA GGA CTC CTC 5

ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΟΛΙΓΟΚΛΩΝΙΚΩΝ ΠΛΗΘΥΣΜΩΝ Β-ΚΥΤΤΑΡΩΝ ΣΤΟΝ ΝΕΦΡΙΚΟ ΙΣΤΟ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΕΣ ΠΑΘΗΣΕΙΣ ΑΝΟΣΟΛΟΓΙΚΗΣ ΑΙΤΙΟΛΟΓΙΑΣ

ΘΕΜΑ Α Να επιλέξετε τη φράση που συμπληρώνει ορθά κάθε μία από τις ακόλουθες προτάσεις: 1. Στο DNA των μιτοχονδρίων περιέχονται πληροφορίες για:

Δ. Ιακωβίδης. Πνευμονολόγος Aν. Διευθυντής Μονάδα επεμβατικής Πνευμονολογίας Γ.Π.Ν. «Γ. Παπανικολάου

ΕΘΝΙΚΟ ΚΑΙ ΚΑΠΟΔΙΣΤΡΙΑΚΟ ΠΑΝΕΠΙΣΤΗΜΙΟ ΑΘΗΝΩΝ ΣΧΟΛΗ ΘΕΤΙΚΩΝ ΕΠΙΣΤΗΜΩΝ ΤΜΗΜΑ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ ΤΟΜΕΑΣ ΒΙΟΧΗΜΕΙΑΣ ΚΑΙ ΜΟΡΙΑΚΗΣ ΒΙΟΛΟΓΙΑΣ

Με την ανάπτυξη αυτής της τεχνολογίας το DNA που ήταν τόσο δύσκολο να µελετηθεί έγινε «παιχνίδι» στα ανθρώπινα χέρια

Λίγα λόγια για τις αιματολογικές νεοπλασίες

Μελέτη έκφρασης των αντιγόνων των οικογενειών Survivin και MAGE-A στον καρκίνο του πνεύμονα

ΘΕΜΑ Α Α1. γ Α2. γ Α3. α Α4. β Α5. β ΘΕΜΑ B B1. B2.

B4-Ασκήσεις για το Κεφάλαιο 4: Η τεχνολογία του ανασυνδυασμένου DNA

A/A Είδος Προδιαγραφές

ΑΠΑΝΤΗΣΕΙΣ ΘΕΜΑ Α Να επιλέξετε τη φράση που συμπληρώνει ορθά κάθε μία από τις ακόλουθες προτάσεις:

Ζεύγη βάσεων ΓΕΝΕΤΙΚΗ 11. ΜΟΡΙΑΚΗ ΓΕΝΕΤΙΚΗ. Φωσφοδιεστερικός δεσμός

ΕΞΕΛΙΞΗ ΣΕΙΡΑ ΜΕΤΑΒΟΛΩΝ ΠΡΟΣ ΟΛΕΣ ΤΙΣ ΣΥΝΙΣΤΩΣΕΣ ΠΟΥ ΠΑΙΡΝΟΥΝ ΜΕΡΟΣ ΣΕ ΕΝΑΝ ΠΛΗΘΥΣΜΟ ΜΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΔΟ ΤΟΥ ΧΡΟΝΟΥ

ΕΡΩΤΗΣΕΙΣ ΚΑΤΑΝΟΗΣΗΣ

Μικροβιολογία Τροφίμων Ι Εργαστήριο

ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΙΟΛΟΓΙΚΩΝ ΙΑΓΝΩΣΤΙΚΩΝ ΕΞΕΤΑΣΕΩΝ

ΒΙΟΛΟΓΙΑ Ο.Π. ΘΕΤΙΚΩΝ ΣΠΟΥΔΩΝ. Να σημειώσετε το γράμμα που συμπληρώνει κατάλληλα τη φράση:

Aνίχνευση του στρεπτοκόκκου ομάδας Β σε έγκυες γυναίκες: Καλλιέργεια, ή PCR;

Γενοτύπιση τοπικών ποικιλιών αμπέλου: ένα βήμα για την αξιοποίησή τους

ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΔΙΑ ΒΙΟΥ ΜΑΘΗΣΗΣ ΑΕΙ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΠΙΚΑΙΡΟΠΟΙΗΣΗ ΓΝΩΣΕΩΝ ΑΠΟΦΟΙΤΩΝ ΑΕΙ (ΠΕΓΑ)

Ιδιαίτερες νοσολογικές οντότητες στα λεμφώματα υψηλού βαθμού κακοηθείας

Διαγώνισμα Βιολογίας στα Κεφάλαια 1 έως 4 ΚΥΡΙΑΚΗ 7 ΔΕΚΕΜΒΡΙΟΥ 2014

«β-μεσογειακή αναιμία: το πιο συχνό μονογονιδιακό νόσημα στη χώρα μας»

Προϋποθέσεις εφαρμογής των μοριακών τεχνικών

ΑΤΕΙΘ Β ΕΞΑΜΗΝΟ Πεδίο Β2-Μοριακή προ- και μετα-γεννητική διάγνωση ασθενειών Συμμετρίες και μοριακή θερμοδυναμική βιομορίων

ΑΝΟΣΟΒΙΟΛΟΓΙΑ. Εξεταστική Ιανουαρίου 2010

ΟΜΟΣΠΟΝΔΙΑ ΕΚΠΑΙΔΕΥΤΙΚΩΝ ΦΡΟΝΤΙΣΤΩΝ ΕΛΛΑΔΟΣ (Ο.Ε.Φ.Ε.) ΕΠΑΝΑΛΗΠΤΙΚΑ ΘΕΜΑΤΑ ΕΠΑΝΑΛΗΠΤΙΚΑ ΘΕΜΑΤΑ 2018 A ΦΑΣΗ ΒΙΟΛΟΓΙΑ ΑΛΓΟΡΙΘΜΟΣ

ΑΝΟΣΟΙΣΤΟΧΗΜΙΚΕΣ ΚΑ! ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΤΕΧΝΙΚΕΣ ΣΤΗΝ ΟΓΚΟΛΟΓΙΑ. Β. Ζουμπουρλήςΐ

ΕΝΟΤΗΤΑ 14: Ο ΦΟΡΕΑΣ ΤΗΣ ΓΕΝΕΤΙΚΗΣ ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΑΣ (DNA) 14.1 ΕΙΣΑΓΩΓΗ

ΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΟΥ ΑΞΟΝΑ ΤΕΛΟΜΕΡΑΣΗΣ/ΤΕΛΟΜΕΡΩΝ ΣΕ ΜΕΣΕΓΧΥΜΑΤΙΚΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΜΥΕΛΟΥ ΤΩΝ ΟΣΤΩΝ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΡΕΥΜΑΤΟΕΙ Η ΠΝΕΥΜΟΝΑ

ΑΥΤΟΜΑΤΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΓΙΑ ΤΗ ΔΙΕΝΕΡΓΕΙΑ ΜΟΡΙΑΚΩΝ ΕΞΕΤΑΣΕΩΝ ΜΕ ΤΕΧΝΟΛΟΓΙΑ REAL-TIME PCR

Χρόνια μυελογενής λευχαιμία

Συχνότητα Human Papilloma Virus (HPV) στη Κύπρο

Επιστηµονικό Πρόγραµµα

Τµήµα Ογκολογικής Γενετικής

Κεφ. 4 DNA, RNA και η ροή των γενετικών πληροφοριών

ΧΡΗΣΤΟΣ ΚΑΚΑΒΑΣ 1 ΚΑΘΗΓΗΤΗΣ ΒΙΟΛΟΓΟΣ Μ.Δ.Ε

ΑΝΟΣΟΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΑ ΠΑΡΟΥΣΙΑΣΗ ΠΕΡΙΣΤΑΤΙΚΟΥ ΗΜΗΤΡΗΣ ΚΑΛΑΝΤΖΗΣ ΑΙΜΑΤΟΛΟΓΟΣ

ΑΣΚΗΣΗ: ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ (POLYMERASE CHAIN REACTION, PCR)

Θεωρία (4 Ο Κεφάλαιο) επιμέλεια: Μιχάλης Χαλικιόπουλος καθηγητής Βιολογίας

ΜΕΤΑΓΡΑΦΗ ΤΟΥ DNA ΣΕ RNA

Hλεκτροφόρηση Μοριακοί Δείκτες στα Φυτά

Tρίτη, 3 Ιουνίου 2003 ΘΕΤΙΚΗ ΚΑΤΕΥΘΥΝΣΗ Γ ΛΥΚΕΙΟΥ ΒΙΟΛΟΓΙΑ

ΓΕΝΕΤΙΚΗ ΠΡΟΔΙΑΘΕΣΗ ΣΤΗΝ ΕΜΦΑΝΙΣΗ ΝΟΣΩΝ ΠΟΥ ΣΧΕΤΙΖΟΝΤΑΙ ΜΕ ΠΕΡΙΒΑΛΛΟΝΤΙΚΗ ΕΚΘΕΣΗ:

ΒΙΟΛΟΓΙΑ ΘΕΤΙΚΗΣ ΚΑΤΕΥΘΥΝΣΗΣ

Βιοτεχνολογία Φυτών. Μοριακοί Δείκτες (Εισαγωγή στη Μοριακή Βιολογία)

ΝΕΕΣ MΟΡΙΑΚΕΣ ΤΕΧΝΙΚΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΤΥΠΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ ΒΑΚΤΗΡΙΩΝ

εργαστηριακό έλεγχο Κατσιαφλάκα Άννα Βιοπαθολόγος,Msc Επικ. Επιμελήτρια Β Εργαστήριο Υγιεινής κι Επιδημιολογίας

ΚΑΤΕΥΘΥΝΤΗΡΙΕΣ ΟΔΗΓΙΕΣ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΕΛΑΧΙΣΤΗΣ ΥΠΟΛΕΙΜΜΑΤΙΚΗΣ ΝΟΣΟΥ ΣΕ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ ΚΑΚΟΗΘΗ ΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΚΑ ΝΟΣΗΜΑΤΑ

Transcript:

ΑΙΜΟΠΑΘΟΛΟΓΟΑΝΑΤΟΜΙΑ Η συµβολή της µοριακής ανάλυσης Eλισάβετ Οικονοµάκη Βιολόγος Αιµοπαθολογοανατοµικό Εργαστήριο ΠΓΝΑ << Ευαγγελισµός >>

ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΜΕΘΟ ΟΙ (Μη µορφολογικές) Αλυσιδωτή Αντίδραση Πολυµεράσης (PCR) Αντίστροφης Μεταγραφάσης Αλυσιδωτή Αντίδραση Πολυµεράσης (ReverseTranscriptase PCR) (RT PCR) Ποσοτική PCR Πραγµατικου Χρόνου (Real Time Quantitative PCR) Ανάλυση αλληλουχίας νουκλεοτιδίων (Sequencing) Mικροδιατοµή ιστού µε ακτίνες Laser (Laser Microdissection)

Πλεονεκτήµατα µοριακών τεχνικών εν εξαρτώνται από αντιγονική έκφραση Πληροφορίες σχετικά µε παθογένεση διάγνωση και πρόγνωση αιµατολογικών νόσων

Μειονεκτήµατα Χρονοβόρο σταντάρισµα Υψηλό κόστος Κατάργηση κυτταρικής µορφολογίας

Αλυσιδωτή Αντίδραση της Πολυµεράσης Polymerase Chain Reaction

Αρχικό δίκλωνο µόριο (DNA template) 100 90 80 70 60 50 RT

Αποδιάταξη 100 90 80 70 60 50 94º C

Επικόλληση Επιµήκυνση 100 90 80 70 60 50 55º C 72º C

ιπλασιασµένο µόριο DNA

Μετα από 40 κυκλους PCR Tο PCR προιόν ανιχνεύεται µε ηλεκτροφόρηση

Είδη PCR Aπλή PCR Φωλιασµένη PCR (Nested PCR) Ηµιφωλιασµένη PCR (Seminested PCR) ReverseTranscriptase PCR Real Time PCR

Target region Initial PCR 3 5 5 3 Target region 5 3 3 5 P4 3 5 5 3 P3 Second PCR amplification

Πλεονεκτήµατα Αύξηση της ευαισθησίας Η περιοχή στόχος είναι σε λίγα αντίγραφα Κατεστραµένο DNA λόγω µονιµοποίησης Μειονεκτήµατα Κίνδυνος επιµόλυνσης!!

Εφαρµογές της PCR σε λεµφοϋπερπλαστικές εξεργασίες Aνίχνευση κλωνικότητας σε Β- ή Τ- κυτταρικής προέλευσης εξεργασίες ιαφορική διάγνωση µεταξύ µονοκλωνικής και πολυκλωνικής λεµφοϋπερπλασίας Ανίχνευση ελαχίστης ή υπολειµµατικής νόσου Ανίχνευση χρωµοσωµικών µεταθέσεων πχ JH/BCL2,JH/BCL1 σε Οζώδες Λέµφωµα και Λέµφωµα Μανδύα Ανίχνευση ιών π.χ. ΕΒV

ΑΛΥΣΙ ΩΤΗ ΑΝΤΙ ΡΑΣΗ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ

Υποδοχέας Β-λεµφοκυττάρων (ανοσοσφαιρίνες) Υποδοχέας Τ-λεµφοκυττάρων Aνίχνευση κλωνικότητας σε Β- ή Τ- κυτταρικής προέλευσης εξεργασίες

BIOMED-2 Concerted Action BMH4-CT98-3936: PCR-based clonality studies VH DH JH 6 VH-FR1 primers J H primer Heteroduplex analysis MW Monoclonal Monoclonal Polyclonal HO 2 polyclonal GeneScan analysis CTGTGCAAGAG CGGGCTATGGTTCAGGGAGTTAT GGCTACTACGGTATGGACGTCTGG CTGTGCAAGAG GACGAAACAGTAACT GCCTACTACTACTACGGTATGGACGTCTGG CTGTGCAAGAGA GATAGTATAGCAGCTCGT ACAACTGGTTCGACTCCTGG CTGTGCAAGAGA TCCGGGCAGCTCGTTT TGCTTTTGATATCTGG CTGTGCAAGAG CCTCTCTCCACTGGGATGGGGGG CTACTGG CTGTGCAAGAG CAGCAGCTCGGCCCCCTTTGACTACTGG CTGTGCAAGAG GACTTTGGATGCTTTTGATATCTGG CTGTGCAAGAG GGTGGGAGCTACTA GACTACTGG CTGTGCAAG GGTAGCTAAAC CTTTGACTACTGG CTGTGCAA TATCTACTTTGACTACTGG monoclonal Απο Σταµατόπουλος και συν.

Φχ / Hae III CD20 Smear H2O IgH Ανίχνευση κλωνικότητας για IgH µε PCR

ιαφορική διάγνωση µεταξύ µονοκλωνικής και πολυκλωνικής λεµφοϋπερπλασίας MARKER λέµφωµα Γαστρίτιδα? / λέµφωµα? 120 bp 80 bp γαστρίτιδα Η ανίχνευση Β-µονοκλωνικότητας σε µοριακό επίπεδο µε την µέθοδο της PCR µπορεί να ανιχνεύσει πολύ πρώιµα στάδια λεµφώµατος ή πολύ πρώιµες υποτροπές

Aνίχνευση υπολειµµατικής νόσου

Ανίχνευση ελαχίστης νόσου Βιοψία στοµάχου Β-Λέµφωµα από µεγάλα κύτταρα Οστεοµυελική βιοψία σταδιοποίησης Παρουσία µικρών Β-Λεµφοκυττάρων ιήθηση??

Παρακολούθηση ασθενών για έλεγχο πιθανής υποτροπής Περίπτωση δερµατικού Τ-λεµφώµατος Phix/HaeIII Positive Control IGH NC Πρώτη βιοψία Ιδιος ασθενής υποτροπή 70-95 bp άλλος ασθενής 10% Acrylamide Gel (Mc Carthy)

Πλεονεκτήµατα PCR Μεγάλη ευαισθησία (1/100.000) Αυτοµατοποίηση Χρήση υλικού αρχείου

Mειονεκτήµατα Ύπαρξη ψευδώς αρνητικών DΝΑ κακής ποιότητας και ανεπαρκούς ποσότητας Ανεπαρκής κυτταρικός πληθυσµός Κακή πρόσδεση των εκκινητών στην περιοχή στόχο Ύπαρξη ψευδώς θετικών στην PCR Επιµολύνσεις στην PCR Έπιλεκτικός πολλαπλασιασµός ορισµένων γονιδιακών περιοχών.. ( (Eπιβεβαίωση του αποτελεσµατος PCR µε SEQUENCING ) Κατάργηση κυτταρικής µορφολογίας

DNA απο παραφίνη µυελός ΟΒ Ο ΒΛ PHIX Κακη ποιοτητα

Αντίστροφης Μεταγραφάσης Αλυσιδώτη Αντίδραση Πολυµεράσης Reverse Transcriptase Polynucleotide Chain Reaction (RT PCR)

RT PCR Eφαρµογές Ανίχνευση χιµαιρικών µεταγράφων πχ (Bcr/abl) Ανίχνευση ιικού RNA (ρετροιί( ρετροιί,ιικόιικό φορτίο) Ανίχνευση υπολειµµατικής νόσου συνδεόµενης µε χιµαιρικά γονίδια Μελέτη γονιδιακής έκφρασης

RT PCR Πλεονεκτήµατα Μεγάλη ευαισθησία (1/100.000) Αυτοµατοποίηση Ανίχνευση χιµαιρικών γονιδίων Μειονεκτήµατα Κατάργηση κυτταρικής µορφολογίας Χρήση νωπού υλικού RNA κακής ποιότητας από παραφινωµένους ιστούς (200 bp µέγιστη περιοχή που µπορεί να ενισχυθεί ) Eνίσχυση άσχετων τµηµάτων (ψευδώς θετικά) Επιβεβαίωση του αποτελέσµατος µε Sequencing

Ποσοτική PCR Πραγµατικού Χρόνου Real Time Quantitative PCR Ποσοτική µέθοδος Ανιχνεύει αρχικό αριθµό DNA RNA µορίων στο δείγµα