ΑΤΔΙ Αζελώλ Δξγαζηήξην Αλάιπζεο Βηνινγηθώλ Υγξώλ & Δθθξηκάησλ Η ρεκεία ησλ ηαηληώλ νύξσλ Πέηπος Καπκαλούζος Πξνζδηνξηζκόο Δηδηθνύ βάξνπο 1
Μέηξεζε ΔΒ κε ηαηλίεο νύξσλ Aιιαγή ηνπ pka πξνεπεμεξγαζκέλσλ πνιπειεθηξνιπηώλ, πνπ βξίζθνληαη πάλσ ζηελ αληηδξαζηήξηα επηθάλεηα ηεο ηαηλίαο. Οη πνιπειεθηξνιύηεο ηνλίδνληαη αλάινγα κε ην πνζό ησλ ηόλησλ κέζα ζην δείγκα νύξσλ. Η αιιαγή ηνπ ph πξνθαιεί ηελ κεηαβνιή ηνπ ρξώκαηνο ηνπ δείθηε κπιε ηεο βξσκνζπκόιεο. 2
Πξνζδηνξηζκόο Δηδηθνύ Βάξνπο κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δξγαζηεξηαθά ιάζε ΔΒ κε ηαηλία νύξσλ 1. Σε πνιύ όμηλα νύξα (ph 5) Ψεςδώρ θεηικά αποηελέζμαηα 2. Σε κεγάιε ζπγθέληξσζε ιεπθώκαηνο (100-750 mg/dl). Ψεςδώρ απνηηικά αποηελέζμαηα Σε πνιύ αιθαιηθά νύξα (ph 8) (ζε ηηκέο ph > 6,5 πξέπεη λα απμάλνπκε ηε ηηκή ηνπ ΔΒ θαηά 5 κνλάδεο Τν ΔΒ όηαλ κεηξηέηαη κε ηαηλία είλαη αλεπεξέαζην από ηελ ηηκή ηεο γιπθόδεο. Η θιίκαθα ηνπ ρξώκαηνο ηνπ εηδηθνύ βάξνο έρεη θαηαζθεπαζηεί γηα ph = 6 3
Πξνζδηνξηζκόο ph Mέηξεζε ph κε ηαηλία ησλ νύξσλ Σςνδςαζμόρ δεικηών γηα ηελ αλίρλεπζε αιιαγώλ ηνπ ph μεηαξύ 5 και 9 (ή 8,5). Δείκηηρ Εύπορ Δείκηη Χπώμα ζε όξινο πεπιβάλλον Χπώμα ζε αλκαλικό Πεπιβάλλον Μπιε βξσκνζπκόιεο 6,0 7,6 Κίηξηλν Κπαλό Δξπζξό θξεδνιίνπ 7,2 8,8 Κίηξηλν Δξπζξό Δξπζξό κεζπιίνπ 4,2 6,2 Δξπζξό Κίηξηλν Φξεζηκνπνηνύληαη ζπλήζσο δύν από ηνπο ηξεηο απηνύο δείθηεο 4
Πξνζδηνξηζκόο ph κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δξγαζηεξηαθά ιάζε pη Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα 1. Running over. Δκθαλίδεηαη όηαλ ε αληηδξαζηήξηα επηθάλεηα ηνπ ph έξρεηαη ζε επαθή κε νύξα πνπ κόιηο αληέδξαζαλ κε ηελ αληηδξαζηήξηα επηθάλεηα ηνπ ιεπθώκαηνο. Τν θαηλόκελν πξνθαιείηαη όηαλ ε ηαηλία δελ ζηξαγγίδεηαη κεηά ηελ εκβάπηηζε ηεο κέζα ζην δείγκα νύξσλ θαζώο θαη όηαλ θξαηάκε ηελ ηαηλία θάζεηα. 2. Αλκαλοποίηζη: Πξνθαιείηαη όηαλ ηα νύξα παξακείλνπλ ζε ζεξκνθξαζία δσκαηίνπ πάλσ από δύν ώξεο θαη νθείινληαη ηελ αλάπηπμε κηθξννξγαληζκώλ. 5
Πξνζδηνξηζκόο γιπθόδεο Πξνζδηνξηζκόο γιπθόδεο κε κέζνδν GOD/POD GOD Β-D-Γιπθόδε + O 2 + H 2 O > Γιπθνληθό νμύ + H 2 O 2 POD 2H 2 O 2 + 4-ΑΑP + 1-Ναθζνι,3,6-δηζνπιθνληθό νμύ > θηλόλε + 4H 2 O Γελ αληρλεύνληαη άιια ζάθραξα ή αλαγσγηθέο νπζίεο 6
Πξνζδηνξηζκόο Γιπθόδεο κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δζθαικέλα απνηειέζκαηα GOD/POD Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα: 1. Ομεηδσηηθέο νπζίεο (ρισξίλε). 2. Έθζεζε ηεο ηαηλίαο ζηνλ αέξα. 3. Πνιύ ρακειό εηδηθό βάξνο. Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα: 1. Έληνλα ρξσκαηηζκέλα νύξα. 2. Πνιύ όμηλν ph (ph < 5). 3. Υςειό εηδηθό βάξνο. 4. Μέηξηεο πνζόηεηεο θεηνληθώλ ζσκάησλ. 5. Έθζεζε ησλ νύξσλ ζε ρακειή ζεξκνθξαζία. 6. Αζθνξβηθό νμύ. 7
Πξνζδηνξηζκόο θεηνλώλ Πξνζδηνξηζκόο θεηνλώλ κε κέζνδν Legal ΟΗ Nηηξνπξσζηθό λάηξην + Αθεηνμεηθό νμύ > - Φξώκα ΟΗ - Nηηξνπξσζηθό λάηξην + Αθεηόλε + Γιπθίλε > Φξώκα Τν β-πδξνμπβνπηπξηθό νμύ δελ αληρλεύεηαη. Η ρξσκαηηθή πνηθηιία ζηηο ηαηλίεο νθείιεηαη ζην αθεηνμεηθό νμύ. 8
Πξνζδηνξηζκόο Κεηνλώλ κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Εζθαλμένα αποηελέζμαηα Legal Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα: Aλ έρεη πξνεγεζεί ζηνλ εμεηαδόκελν δνθηκαζία απέθθξηζεο ηεο βξσκνζνπιθνθζαιείλεο (BSP). Όηαλ ηα νύξα είλαη έληνλα ρξσκαηηζκέλα. Παξνπζία κεηαβνιηηώλ ηεο L-ληνπακίλεο θαη νπζηώλ πνπ πεξηέρνπλ ζνπιθπδξπιηθέο νκάδεο. Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα: Όηαλ ν αζζελήο έρεη ιάβεη αζπηξίλε. Σε παξαηεηακέλε παξακνλή ησλ νύξσλ νπόηε νη κηθξννξγαληζκνί θαηαλαιώλνπλ ηηο θεηόλεο. Όηαλ ππεξηεξεί ην β-πδξνμπβνπηπξηθό νμύ ζηα νύξα, ην νπνίν θαη δελ κπνξεί λα αληρλεπηεί. 9
Πξνζδηνξηζκόο πξσηεΐλεο Πξνζδηνξηζκόο ιεπθώκαηνο κε ηαηλία νύξσλ Οη πξσηεΐλεο, νη νπνίεο δηαζέηνπλ ζεηηθά θαη αξλεηηθά θνξηία, αληηδξνύλ κε ηνλ δείθηε ph θπαλνύ ηεο ηεηξαβξσκνθαηλόιεο ζε όμηλν πεξηβάιινλ κεηαβάιινληαο ην ρξώκα ηνπ από θίηξηλν κέρξη πξάζηλν. Η ηαηλία αληρλεύεη θαηά θύξην ιόγν αιβνπκίλε 10
Πξνζδηνξηζκόο Πξσηεΐλεο κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Πξνζδηνξηζκόο ληηξηθώλ 11
Πξνζδηνξηζκόο Νηηξηθώλ κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Μέζνδνο αλίρλεπζεο ληηξηθώλ κε αληίδξαζε Griess Νηηξώδε Αξσκαηηθή έλσζε Άιαο δηαδσλίνπ Άιαο δηαδσλίνπ Αξσκαηηθή έλσζε Φξσζηηθή άδσ (ξνδ ζθνύξν ρξώκα) Η κέζνδνο αληρλεύεη κέρξη 100.000 βαθηήξηα / ml Compur Dirui Medi-Test Urit-Test 12
Πξνζδηνξηζκόο ππνζθαηξίσλ Μέζνδνο αλίρλεπζεο εζηεξάζεο ιεπθνθπηηάξσλ κε ηελ αληίδξαζε δηαδσ-αληηδξαζηεξίνπ Αξσκαηηθόο εζηέξαο Αξσκαηηθή αιθνόιε Ομύ Αξσκαηηθή αιθνόιε Άιαο δηαδσλίνπ Φξσζηηθή άδσ Η κέζνδνο αληρλεύεη από 5 10 ππνζθαίξηα / ml 13
Πξνζδηνξηζκόο Ππνζθαηξίσλ κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit Εζθαλμένα αποηελέζμαηα εζηεπάζηρ Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα: 1. Ομεηδσηηθέο νπζίεο (ρισξίλε) 2. Φνξκόιε Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα: 1. Έληνλα ρξσκαηηζκέλα νύξα 2. Μεγάιε ζπγθέληξσζε γιπθόδεο 3. Υςειό εηδηθό βάξνο 4. Γηάθνξα θάξκαθα (θεθαιεμίλε, θεθαινζίλε, ηεηξαθπθιίλεο, γεληακηθίλε) 5. Αζθνξβηθό νμύ 14
Πξνζδηνξηζκόο αίκαηνο Πποζδιοπιζμόρ αιμοζθαιπίνηρ με ηην μέθοδο ηηρ ψεςδο-ςπεποξειδάζηρ Η αίκε ηεο αηκνζθαηξίλεο ή ηεο κπνζθαηξίλεο αληηδξά κε έλα νξγαληθό ππεξνμείδην σο ππεξνμεηδάζε παξάγνληαο έγρξσκν πξντόλ. Hgb (Fell) + RCOOH + δείθηεο > Hgb (Fell) + νμεηδσκέλνο δείθηεο + ROH Αηκνζθαηξίλε Οξγαληθό Άρξσκν Έγρξσκν πξντόλ Υπεξνμείδην Η ηαηλία αληρλεύεη αηκνζθαηξίλε, κπνζθαηξίλε θαη εξπζξά. 15
Πξνζδηνξηζκόο Αίκαηνο κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δζθαικέλα απνηειέζκαηα Χεπδνππεξνμεηδάζεο Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα 1. Παξνπζία ηζρπξώλ νμεηδσηηθώλ κέζσλ π.ρ. ρισξίλε (εληζρύεηαη ε νμεηδσηηθή δξάζε). Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα 1. Αζθνξβηθό νμύ > 10 mg/dl 2. Υςειό εηδηθό βάξνο θαη ιεπθώκαηνο (παξεκπνδίδεηαη ε ιύζε ησλ εξπζξώλ αηκνζθαηξίσλ) 3. Φνξκόιε 4. Μεγάιε πνζόηεηα ληηξσδώλ. 5. Παξνπζία αληηππεξηαζηθνύ θαξκάθνπ captopril 16
Πξνζδηνξηζκόο ρνιεξπζξίλεο Πξνζδηνξηζκόο ρνιεξπζξίλεο κε ηελ κέζνδν ηεο δηαδώησζεο 2-Μεζπι-5-ληηξναληιίλε + ληηξώδεο λάηξην H + Γηαδσησκέλν άιαο Φνιεξπζξίλε + δηαδσησκέλν άιαο H + Αδώρξσκα Η επαηζζεζία ηεο κεζόδνπ είλαη 0,4 0,8 mg/dl. 17
Πξνζδηνξηζκόο Φνιεξπζξίλεο κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δζθαικέλα απνηειέζκαηα θαηά ηελ κέηξεζε ρνιεξπζξίλεο κε ηαηλίεο νύξσλ Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα δίδνπλ κεγάιεο πνζόηεηεο θαηλνζεηαδίλεο, ρισξνπξαζίλεο θαη ηλδηθάλεο. Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα παξαηεξνύληαη ζε: - έθζεζε ησλ νύξσλ ζην θσο - ζε παξνπζία αζθνξβηθνύ νμένο > 50 mg/dl - ζε παξνπζία ληηξσδώλ. 18
Πξνζδηνξηζκόο νπξνρνιηλνγόλνπ Πξνζδηνξηζκόο νπξνρνιηλνγόλνπ κε ηαηλία νύξσλ Μέθοδορ Erlich (Units Erlich/κl) Oπξνρνιηλνγόλν + p-δηκεζπινακηλνβελδαιδεύδε > έγρξσκν ζύκπινθν νπξνρνιηλνγόλνπ - δείθηε Μέθοδορ Διαζώηωζηρ (mg/dl) Oπξνρνιηλνγόλν + άιαο δηαδσλίνπ > έγρξσκν αδσ-ζύκπιεγκα 19
Πξνζδηνξηζκόο Οπξνρνιηλνγόλνπ κε δηάθνξεο ηαηλίεο νύξσλ 4/3/2011 Compur Dirui Medi-Test Urit-Test Δζθαικέλα απνηειέζκαηα θαηά ηελ κέηξεζε νπξνρνιηλνγόλνπ κε ηαηλίεο νύξσλ Χεπδώο ζεηηθά απνηειέζκαηα παξαηεξνύληαη ζε: - ζνπιθνλακίδεο, - ην π-ακηλνζαιηθπιηθό νμύ, - ε πξνθαίλε, - ην 5-πδξνμπηλδνιηθννμεηθό νμύ, - ε απμεκέλε ζεξκνθξαζία (π.ρ. 37 o C). Χεπδώο αξλεηηθά απνηειέζκαηα παξαηεξνύληαη ζε: - έθζεζε ζην ειηαθό θσο, - πξνζζήθε θνξκόιεο γηα ζπληήξεζε, - παξνπζία πςειήο ζπγθέληξσζεο αζθνξβηθνύ νμένο (αλ ε κέζνδνο είλαη ε κέζνδνο αλίρλεπζεο είλαη ην άιαο ηνπ δηαδσλίνπ). 20
Πξνζδηνξηζκόο αζθνξβηθνύ νμένο Ο ξόινο ηνπ αζθνξβηθνύ νμένο Μπινθάξεη όιεο ηηο ρεκηθέο αληηδξάζεηο πνπ ρξεζηκνπνηνύλ: ην άιαο ηνπ δηαδσλίνπ, αληηδξάζεηο νμείδσζεο. Γιπθόδε: γηα ηηκή αζθνξβηθνύ νμένο πάλσ από 50 mg/dl Φνιεξπζξίλε: γηα ηηκή αζθνξβηθνύ νμένο πάλσ από 50 mg/dl Αηκνζθαηξίλε: γηα ηηκή αζθνξβηθνύ νμένο πάλσ από 10 mg/dl Nηηξώδε: γηα ηηκή αζθνξβηθνύ νμένο πάλσ από 25 mg/dl Ππνζθαίξηα (παξεκβνιή ζηελ αληίδξαζε εζηεξάζεο ζηελ ηαηλία νύξσλ) Οπξνρνιηλνγόλν (εθόζνλ πξνζδηνξίδεηαη κε ην άιαο ηνπ δηαδσλίνπ) 21
Πξνζδηνξηζκόο αθεηνμεηθνύ νμένο κε ηαηλία νύξσλ H αλίρλεπζε ηνπ αζθνξβηθνύ νμένο βαζίδεηαη ζηνλ απνρξσκαηηζκό ηνπ αληηδξαζηεξίνπ Tillmans (2,6 δηρισξν-θαηλν-ηλδνθαηλόιε). Κακία νπζία δελ παξεκπνδίδεη ηελ κέηξεζε αζθνξβηθνύ νμένο ζηελ ηαηλία νύξσλ. 22