Enterobacteriaceae. Salmonella spp. Shigella spp. Yersinia spp. Some E. coli strains. Obligate pathogens. Meningitis. Pneumonia. Sepsis.

Μέγεθος: px

Εμφάνιση ξεκινά από τη σελίδα:

Download "Enterobacteriaceae. Salmonella spp. Shigella spp. Yersinia spp. Some E. coli strains. Obligate pathogens. Meningitis. Pneumonia. Sepsis."

Σαναχάριβος Αἴσωπος Αλεξανδρίδης
7 χρόνια πριν
Προβολές:

1 ΚΛΙΝΙΚΑ ΣΥΝ ΡΟΜΑ Ανδρας 60 ετών µε σηπτικό σοκ στη ΜΕΘ. Νεογνό µε µηνιγγίτιδα ιαρροϊκό σύνδροµο σε οµάδα ταξιδιωτών Υποτροπιάζουσες ουρολοιµώξεις σε νεαρή γυναίκα Βαρειά πνευµονία σε άνδρα αλκοολικό.

2 Enterobacteriaceae Opportunistic pathogens Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter aerogenes Serratia marcescens Proteus spp. Providencia spp. Citrobacter spp. Meningitis Pneumonia Sepsis Diarrhea UTI Obligate pathogens Salmonella spp. Shigella spp. Yersinia spp. Some E. coli strains

3 Οικογένεια: Εντεροβακτηριοειδή Enterobacteriaceae Οικογένεια:Enterobacteriaceae Φυλή: Escherichieae Γένος: Εscherichia- Ειδος:E.coli Γένος: Shigella Φυλή: Edwardsielleae Φυλή: Salmonelleae Φυλή: Klebsielleae Φυλή: Proteeae Φυλή: Yersinieae Φυλή: Erwinieae

4 Εντεροβακτηριοειδή Η πιο µεγάλη οικογένεια µεταξύ των παθογόνων 32 γένη 130 είδη Ταξινοµούνται µε βάση Τις βιοχηµικές ιδιότητες Την αντιγονική δοµή DNA υβριδισµό

5 Εντεροβακτηριοειδή Ανευρίσκονται παντού Έδαφος Χώµα Νερό Φυτά Φυσιολογική χλωρίδα του εντέρου Προκαλούν ποικίλλα νοσήµατα Σηψαιµία 30-35% Ουρολοιµώξεις Λοιµώξεις του εντέρου Ενδονοσοκοµειακές λοιµώξεις

6 Εντεροβακτηριοειδή Ορισµένα σχετίζονται πάντοτε µε νόσο Salmonella typhi Shigella species Yersinia pestis Άλλα αποτελούν µέρος της χλωρίδας και ευκαιριακά κάνουν λοιµώξεις E.coli K.pneumoniae P. mirabilis

7 οµή

8 οµή-φυσιολογία Ενδιάµεσο µέγεθος ( x µm) Μη κινητά ή κινητά Αναπτύσσονται ταχέως, αερόβια και αναερόβια (προαιρετικά αναερόβια) Αναπτύσσονται σε µη εκλεκτικά (αιµατούχο) εκλεκτικά υλικά (MacConkey)

9 Χαρακτηριστικές βιοχηµικές ιδιότητες Ζυµώνουν τη γλυκόζη Ανάγουν τα νιτρικά Καταλάση θετικά Οξειδάση αρνητικά Χρησιµοποιείται για τη διαφοροποίηση των εντεροβακτηριοειδών από άλλα gram αρνητικά βακτηρίδια

10 Χαρακτηριστικές βιοχηµικές ιδιότητες Σύµφωνα µε την ικανότητα ζύµωσης της λακτόζης διαφοροποιούνται σε Λακτόζη-θετικά Λακτόζη-αρνητικά Σύµφωνα µε την ικανότητα αντοχής σε χολικά άλατα διαχωρίζονται τα παθογόνα εντεροβακτηριοειδή από άλλα σαπροφυτικά βακτήρια του εντέρου

11 Growth of Enterobacteriaceae on MacConkey agar Colorless colonies Pink colonies Uninoculated plate Lactose non fermenters Lactose fermenters Salmonella, Shigella, E. coli, Citrobacter Proteus Klebsiella, Enterobacter

12 IMViC: Indole test Αποτέλεσµα: Ιώδες χρώµα στην επιφάνεια είναι ενδεικτικό της παρουσίας Ινδόλης από οξείδωση Τρυπτοφάνης Negative test e.g. Klebsiella Positive test e.g. E. coli Απουσία χρώµατος σηµαίνει ότι δεν παρήχθη Ινδόλη ιαχωρίζει µεταξύ διαφορετικών γενών ή ειδών. π.χ. E. coli (+) απο Klebsiella (-).

13 IMViC test: MR/VP test Methyl Red:Έλεγχος ζύµωσης γλυκόζης µε µικτή όξινη διάσπαση-τελικό ph όξινο Τελικό προϊόν: οξέα (γαλακτικό, σουκινικό, οξεικό, µυρµηκικό) και αιθυλική αλκοοόλη Voges Proskauer: Έλεγχος ζύµωσης γλυκόζης µε βουτανεδιολική ζύµωση Τελικό προϊόν: βουτανεδιόλη-πρόδροµη ουσίαακετυλοµεθυλοκαρβινόλη-τελικό ph αλκαλικό.

14 IMViC test: MR/VP test Results Methyl Red test Red: Positive MR (E. coli) Yellow or orange: Negative MR (Klebsiella) Voges-Proskauer test Pink: Positive VP (Klebsiella) No pink: Negative VP (E. coli)

15 Citrate Utilization Test Αποτέλεσµα Έλεγχος ανάπτυξης (+)- ενδεικτικό ύπαρξης κιτρικής λυάσης Ανάπτυξη στο υλικό προκαλεί αύξηση του ph και αλλαγή χρώµατος από πράσινο σε µπλέ. Positive Klebsiella, Enterobacter Negative E. coli

16 Urease Test Αποτέλεσµα Αλλαγή χρώµατος=θετική δοκιµασία. Proteus :θετική δοκιµασία µετα απο 4 h ενω Klebsiella και Enterobacter µετά απο 24 h. Positive test Negative test

17 Χαρακτηριστικές βιοχηµικές ιδιότητες Rapid identification system for Enterobacteriaceae: The API 20 E strips provide rapid Identification system for Enterobacteriaceae:

18 οµή -Φυσιολογία Λιποπολυσακχαρίτης (Lipopolysaccharide- LPS) Core πολυσακχαρίτης κοινός σε όλα τα εντεροβακτηριοειδή Σωµατικό Ο αντιγόνο Λιπίδιο Α

19 οµή -Φυσιολογία Η τυποποίηση των εντεροβακτηριοειδών γίνεται µε βάση το: Σωµατικό αντιγόνο Ο (πολυσακχαρίτης) Καψιδιακό αντιγόνο Κ (πρωτεΐνη ή πολυσακχαρίτης) Βλεφαριδικό αντιγόνο H (πρωτεΐνη)

20 Παθογένεια-Ανοσία Λοιµογόνοι παράγοντες Ενδοτοξίνη Έλυτρο Βλεφαριδικό αντιγόνο Η και αντιγόνο Κ του καψιδίου Antigenic phase variation Συστήµατα έκκρισης τύπου ΙΙΙ

21 Type III Secretion System Συστήµατα έκκρισης πρωτεϊνών στα Gram-negative παθογόνα βακτήρια Οι δραστικές πρωτεϊνες τροποποιούν τη λειτουργία του κυττάρου ξενιστή. plague, typhoid fever, bacterial dysentery Αποτελούνται απο >20 δραστικές και συνοδές πρωτεϊνες

22 E. coli Το επικρατέστερο είδος της ΑΕΡΟΒΙΑΣ µικροβιακής χλωρίδας του εντέρου υνητικά παθογόνο σε βρέφη και ενήλικες (αίτιο διαρροϊκού συνδρόµου)

23 Μορφολογία Gram αρνητικό Βακτηρίδιο Κινητό Προαιρετικά αναερόβιο

24 Λοιµογόνοι παράγοντες Προσκολλητίνες Colonization factor antigens (CFA/I, CFA/II, CFA/III) Agregative adherence fimbriae (AAF/I, AAF/III) Bundle-forming pili (Bfp) P pili Invasion plasmid antigen (Ipa) ΕΚΦΡΑΖΟΝΤΑΙ ΜΟΝΟ ΑΠΟ ΤΑ ΠΑΘΟΓΟΝΑ ΣΤΕΛΕΧΗ

26 Λοιµογόνοι παράγοντες Εξωτοξίνες Shiga toxins Stx-1, Stx-2 Θερµοανθεκτικές τοξίνες heat-stable toxins - STa και STb Θερµοευαίσθητες τοξίνες Heat-labile toxins - LT-I, LT-II Αιµολυσίνες

27 Λοιµώξεις Σηψαιµία Μετά από λοιµώξεις ουροποιητικού ή γαστρεντερικού Θνητότητα υψηλή Λοιµώξεις ουροποιητικού Ενδογενείς Τα στελέχη εκφράζουν προσκολλητίνες

28 Λοιµώξεις Μηνιγγίτιδα νεογνών Μαζί µε τον S.agalactiae ο συχνότερος αιτιολογικός παράγοντας σε παιδιά κάτω του 1 µηνός 75% των στελεχών εκφράζουν το Κ1 αντιγόνο Συνήθως το συγκεκριµένο στέλεχος ανευρίσκεται στο γαστρεντερικό της µητέρας

29 Γαστρεντερίτιδα Εντεροτοξινογόνα Εντεροπαθογόνα Εντεροδιεισδυτικά Λοιµώξεις (ETEC) (EPEC) (EIEC) Εντεροαιµορραγικά (EHEC) Enteroaggregative (EAEC) Diffusely adherent (DAEC) Πολύ καλά πειραµατικά µοντέλα λοίµωξης στον άνθρωπο ΕΝ ΠΡΟΚΑΛΟΥΝ ΣΥΧΝΑ ΝΟΣΟ- ΕΞΑΙΡΕΣΗ ΤΑ ΠΑΙ ΙΑ

30 Pathogenic Mechanisms of E. coli

31 Εντεροτοξινογόνα(ETEC) Γαστρεντερίτιδα Συχνότερη σε αναπτυσσόµενες χώρες Νόσος των ταξιδιωτών (Traveler s diarrhea) Μετάδοση µετά από κατανάλωση: Μολυσµένου ύδατος Μολυσµένων τροφίµων

32 Εντεροτοξινογόνα(ETEC) Τοξίνες Θερµοευαίσθητες τοξίνες: LT-I, LT-II Θερµοανθεκτικές τοξίνες: STa STb

33 LT vs ST

34 Θερµοευαίσθητη τοξίνη : LT-I οµικά και λειτουργικά όµοια µε την cholera toxin Αποτελείται από 5 δεσµευτικές υποµονάδες και µία δραστική Όλα τα εντεροτοξινογόνα στελέχη παράγουν τον ίδιο αντιγονικό τύπο εντεροτοξίνης

35 Θερµοευαίσθητη τοξίνη : LT-I Η θερµοευαίσθητη εντεροτοξίνη συνδέεται µε GM- 1 µονοσιαλογαγγλιοσίδη λεπτού εντέρου Το δραστικό µέρος ενεργοποιεί το σύστηµα της αδενυλοκυκλάσης Άυξηση του camp και έκκριση ύδατος και ηλεκτρολυτών Υδαρείς κενώσεις

36 ΟΜΗ LT

37 G proteins and camp

38 Κλινική εικόνα Νόσος όµοια µε cholera, συνήθως λιγότερο σοβαρή Προσκόλληση,παραγωγή τοξίνης,πρόκληση διάρροιας Όχι εµφανείς ιστολογικές αλλοιώσεις στα επιθηλιακά κύτταρα Η διάρροια συνοδεύεται από εµέτους και πυρετό Μπορεί να είναι πολύ σοβαρή, κυρίως σε νεογνά και µικρά παιδιά Ενήλικες ==> traveler s s diarrhea

39 Θερµοανθεκτική εντεροτοξίνη-sta εν αδρανοποιείται στους 100ºC για 30min εσµεύεται στον διαµεµβρανικό υποδοχέα της guanylate cyclase λεπτού εντέρου. Οδηγεί σε αύξηση του cgmp(όχι camp) αύξηση έκκρισης ύδατος και ηλεκτρολυτών υδαρείς κενώσεις

40 Εντεροδιεισδυτικά στελέχη-eiec Κλινικό σύνδροµο όµοιο µε Shigella Η ιδιότητα οφείλεται σε πλασµίδιο Όλα τα Shigella-like στελέχη έχουν σωµατικά αντιγόνα όµοια µε τη Shigella Τα EIEC στελέχη ανήκουν σε συγκεκριµένους ορότυπους: Προσκολλώνται στο παχύ έντερο Ζυµώνουν βραδέως τη γλυκόζη EIEC Sereny test- ιαγνωστικό

41 Εντεροπαθογόνα στελέχη E.coli (EPEC) Τα πρώτα που σχετίσθηκαν µε διαρροϊκό σύνδροµο Κύρια αιτία νεογνικής διάρροιας σε αναπτυσσόµενες χώρες Σπάνια σε µεγαλύτερα παιδιά και ενήλικες προστατευτική ανοσία Προσκόλληση στα επιθηλιακά κύταρα καταστροφή λαχνών σύνδρομο δυσαπορρόφησης

42 Εντεροαιµορραγικά στελέχη E.coli(EHEC) Λοιµώξεις σε ανεπτυγµένες χώρες < 100 βακτήρια προκαλούν λοίµωξη Ήπια µέχρι πολύ σοβαρή νόσο(αιµορραγική κολίτιδα) > 50 ορότυποι έχουν αποµονωθεί, οι περισσότερες όµως λοιµώξεις οφείλονται στον ορότυπο Ο157:Η7 Αιµολυτικό ουραιµικό σύνδροµο εµφανίζεται σε ποσοστό 5%-10% σε παιδιά κάτω των 10 ετών

43 Εντεροαιµορραγικά στελέχη E.coli(EHEC) Εκφράζουν Shiga-like toxin (Stx-1,Stx-2 ή και τις δύο) Η υποµονάδα Β δεσµεύεται σε ένα γλυκολιπίδιο (globotriaosylceramide,gb3) που βρίσκεται στις λάχνες του εντέρου και στα νεφρικά ενδοθηλιακά κύτταρα Η υποµονάδα Α εισέρχεται στο κύτταρο δεσµεύεται στο 28S rrna αναστέλλει την πρωτεϊνοσύνθεση δυσαπορρόφηση υδαρείς κενώσεις

44 ιάγνωση-θεραπεία Τα στελέχη στο κλινικό εργαστήριο ΕΝ ΙΑΧΩΡΙΖΟΝΤΑΙ µόνο σε εργαστήρια αναφοράς Εξαίρεση Ο157:Η7 Θεραπεία: Υποστηρικτική Αντιβιοτικά στο αιµολυτικό ουραιµικό σύνδροµο

45 Characterisation of the Escherichia coli strain associated with an outbreak of haemolytic uraemic syndrome in Germany, 2011: a microbiological study Vol 11 September 2011 Findings All isolates were of the HUSEC041 clone (sequence type 678). All shared virulence profiles combining typical Shiga-toxin-producing E coli (stx2, iha, lpfo26, lpfo113) and enteroaggregative E coli (agga, aggr, set1, pic, aap) loci and expressed phenotypes that define Shiga-toxinproducing E coli and enteroaggregative E coli, including production of Shiga toxing 2 and aggregative adherence to epithelial cells. Isolates additionally displayed an extended-spectrum β-lactamase phenotype absent in HUSEC041. STEC O104:H4-ΕΝΗΛΙΚΕΣ

46 Εντεροαιµορραγικά στελέχη E.coli(EHEC)- ιάγνωση MacConkey άγαρ µε σορβιτόλη : EHEC στελέχη δεν ζυµώνουν την σορβιτόλη Έλεγχος παραγωγής τοξίνης Σήµερα µοριακή ανίχνευση της τοξίνης ΣΥΣΤΑΣΗ CDC:Σε κάθε αιµατηρή διάρροια σχετιζόµενη µε κατανάλωση τροφίµων-δοκιµασία ανίχνευσης τοξίνης

47 Enteroaggregative E.coli (EAEC) Eπιµένουσα διάρροια σε παιδιά και ενήλικες σε αναπτυσσόµενες και αναπτυγµένες χώρες Ενεργοποιούν την παραγωγή βλέννης σχηµατισµός biofilm: κάλυψη των λαχνών φλεγµονώδης διήθηση αιµορραγία

48 Diffusely adhering E. coli (DAEC) Προσκόλληση στα επιθηλιακά κύτταρα Μηχανισµός της νόσου άγνωστος Επιµένουσα διάρροια (>14 µέρες) στα παιδιά

49 E. coli UTI το συχνότερο αίτιο ουρολοιµώξεων Το έντερο αποκίζεται από ουροπαθογόνα στελέχη (UPEC) Τα UPEC στελέχη φέρουν προσκολητίνες ειδικές των επιθηλιακών κυττάρων του ουροποιητικού συστήµατος Ανιούσες λοιµώξεις- EΝ ΟΓΕΝΕΙΣ

50 E. coli UTI Ανώτερο ουροποιητικό Πυελονεφρίτιδα πυρετός, δυσουρία, ναυτία και έµετοι, Κατώτερο ουροποιητικό Κυστίτιδα υσουρία Αιµορραγική κυστίτιδα Ουρηθρίτιδα συχνουρία

51 Μηνιγγίτιδα νεογνών Εµφανίζεται σε νεογνά < 1 µηνός Συνήθως τα στελέχη φέρουν το K1 αντιγόνο Ο συγκεκριµένος ορότυπος υπάρχει στο γαστρεντερικό σύστηµα της µητέρας και του νεογνού Συνήθως συνυπάρχει και σηψαιµία Μηχανισµός διείσδυσης άγνωστος: κυτταροκίνες?

52 Βακτηριαιµία E.coli: Το συχνότερο αίτιο µικροβιαιµίας από Gram(-) βακτήρια Λοιµώξεις ουροποιητικού (ο πιο συχνός αιτιολογικός παράγοντας) Σηπτική αρθρίτιδα Ενδοκαρδίτιδα Προστατίτιδα Αλλες λοιµώξεις : διαπυήσεις τραυµάτων, λοιµώξεις δέρµατος, ενδοκοιλικά αποστήµατα, περιτονίτιδα

Σχετικά έγγραφα

Εντεροβακτηριοειδή. Salmonella-Shigella

Εντεροβακτηριοειδή. Salmonella-Shigella Εντεροβακτηριοειδή Salmonella-Shigella Εντεροβακτηριοειδή Escherihia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter Serratia Hafnia Proteus, Providencia, Morganella Salmonella Shigella Yersinia Arizona Citrobacter